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TRIGLYCERIDES -LQ

Triglycrides-LQ
GPO-POD. Liquide
Dtermination quantitative de triglycrides
IVD

4.
5.

Conserver 2-8C
PRINCIPE DE LA METHODE
Les triglycrides incubs avec la lipoprotine lipase (LPL) librent du
glycrol et des acides gras libres. Le glycrol est phosphoryl par le
glycrol-phosphate dshydrognase (GPO) et ATP en prsence de
glycrol kinase (GK) pour produire le glycrol-3-phosphate (G3P) et
ladnosine-5-diphosphate (ADP). Le G3P se transforme alors en
dihydroxyactone phosphate (DAP) et peroxyde dhydrogne (H2O2) par
GPO.
la fin, le peroxyde dhydrogne (H2O2) ragit avec le 4-aminophnazone
(4-AF) et p-chlorophnol, raction catalyse par la peroxydase (POD) et
donnant une coloration rouge :
LPL

Triglycrides + H2O Glycrol + Acides gras libres


Glycrol kinase

Glycrol + ATP
G3P+ ADP
GPO

G3P + O2
DAP + H2O2
POD

H2O2 + 4-AF + p-Chlorophnol


Quinone + H2O
Lintensit de la couleur forme est proportionnelle la concentration de
1, 2,3
triglycrides prsents dans lchantillon test
.
SIGNIFICATION CLINIQUE
Les triglycrides sont des graisses qui apportent de lnergie la cellule.
linstar du cholestrol, ils sont transports vers les cellules de
lorganisme par les lipoprotines du sang.
Un rgime riche en graisses satures ou hydrates de carbone peut lever
les niveaux de triglycrides.
Son augmentation na pas de spcificit. Plusieurs douleurs, comme
certains troubles hpatiques (cirrhose, hpatite, obstruction biliaire) ou
diabtes, peuvent tre associs avec son lvation3, 6, 7,
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les
donnes cliniques et de laboratoire.
RACTIFS
GOOD pH 6,3
50 mmol/L
p-Chlorophnol
2 mmol/L
Lipoprotine lipase (LPL)
150000 U/L
Glycrol kinase (GK)
500 U/L
R
Glycrol-3-oxydase (GPO)
3500 U/L
Peroxydase (POD)
440 U/L
4 - Aminophnazone (4-AF)
0,1 mmol/L
ATP
0,1 mmol/L
TRIGLYCERIDES CAL Calibrateur primaire de triglycrides
PRPARATION
Le ractif et le calibrateur sont prts lemploi.
CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption
indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement
ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination.
Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Dtrioration des ractifs
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbances (A) du blanc 505 nm 0,40.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 505 nm.
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage.
- Equipement classique de laboratoire
CHANTILLONS
Srum et plasma1.
Stabilit de lchantillon : 5 jours 2-8C.
PROCEDURE
1.
Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (490-550)
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C
2.
Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille.
3.
Pipeter dans une cuvette:
Blanc
talon
chantillon
R (mL)
1,0
1,0
1,0
-10
-talon (Remarque1, 2) (L)
--10
chantillon (L)

BSIS49-F

16/09/13

Mlanger et incuber pendant 5 minutes 37C ou 10 min. 15-25C


Lire labsorbation (A) du calibrateur et lchantillon contre le Blanc du
ractif. La couleur est stable au moins 30 minutes

CALCULS

( A) chantillo n x Conc. talon = mg/dL de triglycrides dans lchantillon


( A) talon
Facteur de conversion : mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
les ractifs et le calibreur.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
correspondraient pas aux attentes.
VALEURS DE REFERENCE
Hommes :
40 160 mg/dL
Femmes :
35 135 mg/dL
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Plage de mesure: Depuis la limite de dtection de 0.000 mg/dL, jusqu la
limite de linarit de 1000 mg/dL
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:
Intra-srie (n=20)
Inter-srie (n=20)
Moyenne (mg/dL)
109.97
224.23
111
224
SD
0.641
1.007
3.743
7.907
CV (%)
0.58
0.45
3.38
3.52
Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,0013 A.
Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux (x).
Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Coefficient de corrlation (r): 0.99810
Equation de la Coubre de rgression: y= 0,9178x - 0.5426
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ
INTERFRENCES
Il na pas t observ dinterfrences avec la bilirubine < 170 mol/L,
hmoglobine < 10 g/L2.
Il a t rapport que certaines drogues et autres substances interfrent avec la
dtermination des triglycrides4, 5.
REMARQUES
1.
TRIGLYCERIDES CAL : En raison de la nature du produit, il est conseill
de le traiter avec beaucoup de soin vu quil peut facilement contaminer.
2.
LCF (Lipid Clearing Factor) est intgr au ractif.
3.
La calibration avec ltalon aqueux peut donner lieu des erreurs
systmatiques dans les mthodes automatiques. Dans ce cas, il est
recommand dutiliser des calibrateurs sriques.
4.
Utiliser des embouts de pipette jetables et propres pour la dispensation.
5.
SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.
BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of


enzimes. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

PRSENTATION
Ref: 41030
Ref. 41031
Ref. 41032
Cont.
.
Ref. 41033
Ref. 41034

R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL


R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL

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