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CHOLESTEROL

Cholestrol
CHOD-POD. Enzymatique chlorimtrique
Dtermination quantitative de cholestrol
IVD

CALCULS
( A)Echantillo n

Conserver 2-8C

x 200 (Modle Conc.) = mg/dL de cholestrol dans lchantillon

(A) Modle

PRINCIPE DE LA METHODE
Le cholestrol prsent dans lchantillon donne lieu un compos color,
suivant la raction suivante:

Facteur de conversion: mg/dL x 0,0258= mmol/L.

CONTROLE DE QUALITE

Lintensit de la couleur forme est proportionnelle la concentration de


cholestrol prsent dans lchantillon test1, 2.

Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les


valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
les ractifs et le calibreur.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
correspondraient pas aux attentes.

SIGNIFICATION CLINIQUE

VALEURS DE REFERENCE

Le cholestrol est une substance grasse prsente dans toutes les cellules
de lorganisme. Le foie produit naturellement tout le cholestrol dont il a
besoin pour former les membranes cellulaires et pour produire certaines
hormones. La dtermination du cholestrol est lun des outils les plus
importants pour diagnostiquer et classifier les lipmies. Laugmentation du
niveau de cholestrol est lun des facteurs de risques cardiovasculaires
possibles5, 6.
Le diagnostic clinique doit tenir compte des donnes cliniques et de
laboratoire.

Evaluation du risque5, 6:
Moins de 200 mg/dL
Normal
200-239 mg/dL
Modr
240 ou plus
Elev
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.

CHE

Cholestrol ester + H2O


Cholestrol + Acides gras
CHOD

Cholestrol + O2 4-Cholestnone + H2O2


POD

2 H2O2 +Phnol + 4-Aminophnazone


Quinonimine + 4H2O

REACTIFS
R1
Tampon

PIPES pH 6,9
90 mmol/L
phnol
26 mmol/L
Cholestrol estrase (CHE)
300 U/L
R2
Cholestrol oxydase (CHOD)
300 U/L
Enzymes
Peroxydase (POD)
1250 U/L
4 - Aminophnazone (4-AF)
0,4 mmol/L
Patron primaire de dtection du cholestrol
CHOLESTEROL CAL
200 mg/dL

PREPARATION

Ractif de travail (RT): Dissoudre ( ) le contenu dune capsule


denzymes R 2 dans un 1 flacon de tampon R 1.
Refermer et mlanger doucement jusqu ce que le contenu soit dissout
Stabilit (RT): 4 mois au rfrigrateur (2-8C) ou 40 jours 15-25C.
Conserver labri de la lumire.

CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption
indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement
ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Ne
pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation (A) du blanc 505 nm 0,1.

CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection de 0,6 mg/dL jusqu la limite
de linarit de 600 mg/dL.
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:
Moyenne (mg/dL)
SD
CV (%)

Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 505 nm (500-550).


Cuvettes de 1,0 cm dclairage.
Equipement classique de laboratoire.

INTERFERENCES
Aucune interfrence dhmoglobine na t constat jusqu 5 g/L et bilirubine
jusqu 10 mg/dL1, 2.
Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que des substances pouvant interfrer
dans la dtermination du cholestrol3, 4.

REMARQUES
1.

2.
3.

ECHANTILLONS
Srum ouplasma1, 2: Stabilit de lchantillon 7 jours 2-8C et plusieurs
mois si lchantillon est congel (-20C).

PROCEDURE
1.

2.
3.

Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (500-550)
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C/.15-25C
Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille
Pipetter dans une cuvette:

RT (mL)
Modle (Remarque 1-2) (L)
Echantillon (L)

4.
5.

Blanc
1,0
---

Modle
1,0
10
--

Echantillon
1,0
-10

Mlanger et incuber pendant exactement 5 minutes 37C ou 10


min. at temprature ambiante.
Lire labsorbation (A) du patron et lchantillon, en comparaison
avec le blanc du ractif. La couleur reste stable pendant au moins
60 minutes.

BSIS11-F

12/09/13

Inter-srie (n=20)
90,4
301
1,12
2,30
1,24
0,76

Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,002 A.


Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux (x).
Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Coefficient de corrlation (r): 0,995.
Equation de la Coubre de rgression: y=1,004x - 0,931.
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.

MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
-

Intra-srie (n=20)
90,1
305
0,64
3,30
0,71
1,08

4.
5.

CHOLESTEROL CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill de


le manipuler avec une grande prcaution. En effet, il peut tre contamin
avec facilit.
LCF(Lipid Clearing Factor) intgr au ractif.
Le calibrage au moyen du patron de dtection peut donner lieu des
erreurs systmatiques lors de mthodes automatiques. Dans de tels cas, il
est conseill dutiliser des calibrages sriques
Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.

BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Naito H.K. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic
System. Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

PRESENTATION
Ref: 1001090
Ref: 1001091
Ref: 1001092
Ref: 1001093

Cont.

R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL


R1: 10 x 20 mL, R2: 10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
R1: 4 x 125 mL, R2: 4 125 mL, CAL: 1 x 5 mL
R1: 4 x 250 mL, R2: 4 250 mL, CAL: 1 x 5 mL

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Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com