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AMYLASE-LQ

- Amylase
CNPG3. Cintique Liquide
Dtermination quantitative dalpha-amylase (AMS)
IVD

CALCULS
Srum ou plasma A/min x 3954 = U/L AMS

Conserver 2-8C
Urine

PRINCIPE DE LA METHODE
L -amylase hydrolyse lalpha maltotrioside 2-chlore-4-nitrophnyle
(CNPG3) ou 2-chlore-4-nitrophnol (CNP) et forme du maltrioside 2chlore-4-nitrophnyle (CNPG2), du maltotriose (G3) et du glucose (G), en
fonction de la raction suivante:
10 CNPG3 9 CNP + 1 CNPG2 + G3 + G
La vitesse de formation de 2-clhore4-nitrophnol, dtermine
photomtriquement, est proportionnelle la concentration catalytique d amylase de lchantillon1.
Amylase

SIGNIFICATION CLINIQUE
L-amylase (AMS) est une enzyme qui aide dissoudre le
glycogne dans lamidon. Elle se trouve principalement dans les
glandes salivaires et dans le pancras exocrine. Sa dtermination sert
principalement diagnostiquer ou contrler les maladies du
pancras telles que la pancratite chronique ou aigue. Elle permet
aussi la maladie de la vsicule biliaire,
de dtecter certains
problmes gastro-intestinaux et dautres types de troubles2, 5,6.
Le diagnostic clinique doit tre ralis en prenant compte des
donnes cliniques et de laboratoire.
REACTIFS
MES pH 6,0
CNPG3
Chlorure sodique
Actate calcique
Tiocianate potassique
Acide sodique

100 mmol/L
2,25 mmol/L
350 mmol/L
6 mmol/L
900 mmol/L
0,95 gr/L

Units: Lunit internationale (UI) correspond la quantit denzymes qui


converti 1 mol de substrats par minute, dans des conditions standard. La
concentration est exprime en unit/litre (U/L).
Facteur de conversion: U/L x 0,01667 = kat/L.

CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
valeurs ont t contrles : SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
les ractifs et le calibreur.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
correspondraient pas aux attentes.

VALEURS DE REFERENCE3
Srum ou plasma
Jusqu 90 U/L d -amylase
Urine
Jusqu 450 U/L de -amylase
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.

CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection 0,2439 U/L jusqu la limite
de linalit 2000 U/L.
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:

PREPARATION
Ractif prt lemploi.

Moyenne (U/L)
SD
CV (%)

CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption
indique sur ltiquette du flacon, et si les flacons sont maintenus
hermtiquement ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de
contamination. Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Une fois ouvert, le ractif reste stable pendant 60 jours, sil est referm
immdiatement aprs utilisation et sil se conserve 2-8C.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation du blanc 405 nm> 0,50.

MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
-

Spectrophotomtre ou analyseur pour lectures 405 nm.


Bain thermostable 37C (Remarque 1).
Cuvettes de 1,0 cm dclairage.
Equipement classique de laboratoire (Remarque 2).

ECHANTILLONS

Srum ou plasma1, spar le plus tt possible des hmatites. En tant


quanticoagulant, on conseille lhparine.
- Urine, ajuster le pH autour de 7,0 avant de mettre de ct.
Stabilit: 1 mois 2-8C.
-

PROCEDURE
1.

2.
3.

Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C
Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille
Pipetter dans une cuvette:

R (mL)
Echantillon (L)

Srum ou plasma
1,0
20

Urine
1,0
10

4. Mlanger, laisser incuber 30 secondes.


5. Lire labsorbation (A) initiale de lchantillon, mettre en route le
chronomtre et lire labsorbation chaque minute pendant 3 minutes.
6. Calculer la moyenne de laugmentation dabsorbation par minute
(A/min).
BEIS27-F

13/02/14

A/min x 7908 = U/L AMS

Intra-srie (n= 20)


61,2
165
1,00
2,44
1,64
1,47

Inter-srie (n= 20)


65,1
172
2,84
4,57
4,36
2,65

Sensibilit analytique: 1 U/L = 0,0003 A/min


Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux (x).
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.

INTERFERENCES
Lhmolyse a une incidence sur les rsultats1. Lactivit de l -amylase peut
tre inhibe par des agents de chlation tels que le citrate et l EDTA.
Diffrentes drogues ont t dfinies, ainsi que des substances qui interfrent
dans la dtermination de l -amilase3,4.

REMARQUES
L-amylase dpend de la temprature, les essais raliss des
tempratures de <37C ou >37C peuvent faire varier les rsultats.
2.
La salive et la sueur contiennent de l -amylase. Eviter la pipette avec la
bouche et le contact de la peau avec le ractif ou la substance employe.
3.
Contient du Tiocianate potassique. Eviter linhalation ou le contact du
ractif avec les yeux ou la peau. Dans ce cas, laver la peau et les yeux
grande eau et consulter un mdecin.
4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.
1.

BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Ying Foo A et al. Amylase measurement with 2-chloro-4nitrophenyl


maltrotrioside as substrate. Clin Chim 272, 1998; 137-147.
McNeely M. Amylase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

PRESENTATION
Rf: 41201
Rf: 41202

Cont.

R : 20 x 2 mL
R : 2 x 60 mL

SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE


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