Vous êtes sur la page 1sur 19

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos

___________________________________________________________________________________

Geoqumica de Istopos Estables: Fundamentos, Tcnicas y


Aplicaciones
E. Reyes
Estacin Experimental del Zaidn,
CSIC, Ciencias de la Tierra y Qumica Ambiental
Lab. Biogeoqumica de Istopos Estables, Granada
Introduccin
La mayor parte de los elementos del sistema peridico son familias isotpicas,
de hecho solo hay 21 elementos monoisotpicos (Tabla 1). Los distintos istopos de un
elemento tienen exactamente la misma configuracin electrnica, pero hay variaciones
en su ncleo, todos
tienen el mismo nmero
Tabla 1.- Peso atmico de los elementos Patrn
de protones pero cambia
U. M. A.
%
Elemento U. M. A.
%
E lemento
el nmero de neutrones.
9
9,012182
100,00 103Rh
102,905503 100,00
Be
Por ejemplo, el carbono
19
18,998403
100,00 127I
126,904477 100,00
F
solo
presenta
dos
23
22,989770
100,00 133Cs
132,905433 100,00
Na
12
istopos
estables
C
y
27
26,981541
100,00 141Pr
140,907657 100,00
Al
13
12
31
159
C.
El
C
tiene
6
30,973763
100,00
158,925350 100,00
P
Tb
45
165
protones y 6 neutrones,
44,955914
100,00
164,930332 100,00
Se
Ho
55
mientras que el 13C tiene
54,938046
100,00 169Tm
168,934225 100,00
Mn
59
197
6
protones
y
7
58,933198
100,00
196,966560 100,00
Co
Au
75
neutrones. Con los
74,921595
100,00 209Bi
208,980388 100,00
As
89
88,905856
100,00 232Th
232,038054 100,00
Y
dems elementos ocurre
93
92,906378
100,00
Nb
lo mismo, la diferencia
es siempre el nmero de
neutrones y siempre
ocurre que uno de los istopos es, con diferencia, el ms abundante en la naturaleza
(Tabla.2).
Dado que las propiedades qumicas de un elemento dependen bsicamente de
la configuracin electrnica todos los istopos tendrn un comportamiento qumico
similar, sin embargo las propiedades fsicas, que dependen de la estructura y masa del
ncleo, si variarn, y por supuesto lo mismo ocurrir con los compuestos en los que se
encuentran dichos istopos. El agua por ejemplo tendr constantes fsicas que sern
diferentes dependiendo de los istopos de que est formada (Tabla 3).
Tabla 2.- Abundancia de los istopos ligeros estables
tomo
Masa
%

H
1
99.9844

C
2
0.0156

12
98.89

N
13
1.11

14
99.64

15
0.36

16
99.763

O
17
0.0375

S
18
0.1995

32
95.02

33
0.75

34
4.21

36
0.02

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

Los enlaces formados por los istopos ligeros son menos energticos que los
de los istopos pesados y por tanto se rompen con ms facilidad. As durante una
reaccin qumica las molculas que contienen el istopo ligero reaccionaran con una
velocidad ligeramente superior a la de las molculas pesadas. Tambin en las
reacciones bioqumicas, por ejemplo: reacciones bacterianas, fotosntesis, procesos
microbiolgicos, etc. el istopo ligero es ms abundante en los productos de reaccin
que en los de procedencia, dicho de otra manera: los productos resultantes se
"enriquecen" y los iniciales se "empobrecen" en el istopo ligero.
Tabla 3.- Algunas constantes fsicas del agua segn su composicin
isotpica
H216O
0.9976

H216O
1.1051

H218O
1.1106

3.98
0.00

11.24
3.81

4.30
0.28

Punto de ebullicin (760 Torr, C)


Presin de vapor (100C, Torr)

100.00
760.00

101.42
721.60

100.14

Viscosidad (20C, centipoises)

1.002

1.247

1.056

Constantes
Densidad (20C, g cm-3)
Temperatura de mayor densidad (C)
Punto de congelacin (760 Torr, C)

Por otra parte, y a causa de la diferencia de masa, tambin los procesos fsicos,
como la difusin, evaporacin, condensacin, cristalizacin, etc. producen
diferenciaciones isotpicas. Todas estas variaciones de la composicin isotpica que se
producen en compuestos o fases de un sistema a causa de fenmenos fsicos o qumicos
se denominan fraccionamientos isotpicos.
Notaciones usuales
H216O

En una reaccin del tipo: 1/3 CaC16O3 + H218O <----------> 1/3 CaC18O3 +

La razn isotpica "R" de un elemento, por ejemplo, del oxgeno del carbonato sera:

18 O
R 16
O CaCO3
Por supuesto 18O y 16O vienen expresados como nmero de tomos. El factor
de fraccionamiento "" (factor de separacin o factor de enriquecimiento) de los
istopos de un elemento entre dos fases o compuestos qumicos coexistentes (carbonato
y agua en este caso) ser la razn R del carbonato partido por la razn R del agua:

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

c-w =

18
16
R c = ( O / O )c = 1.031
R w ( O 18 / O 16 )w

(25 C)

Siendo una funcin de la temperatura.


En los estudios de variacin de abundancia isotpica, la composicin isotpica
de los elementos se expresa comnmente bien como "razn isotpica R" de la pareja de
istopos considerados (13C/12C) o bien como valor "":

Rm - R p
*1000 = ( R m - 1)* 1000
Rp
Rp

donde Rm y Rp representan las razones isotpicas entre el istopo pesado y el ligero de


la pareja isotpica considerada en la muestra y en el patrn de referencia
respectivamente. Por ejemplo para el carbono, hidrgeno y oxgeno las razones
isotpicas consideradas seran: 13C/12C, 2H/1H, 18O/16O y 13C, 2H, 18O.
El valor de una muestra dada representa, por tanto, la diferencia, en partes
por mil, entre su razn isotpica y la del patrn, referida a este ltimo. Su valor
depende por tanto del patrn de referencia adoptado. Un valor positivo o negativo
indica que la muestra es, respectivamente, ms rica o ms pobre en el istopo pesado
que el patrn.
El factor de fraccionamiento entre dos fases o compuestos (A y B) puede
expresarse en funcin de los valores :

1000 ln (A-B) = A - B
Esta expresin es muy exacta siempre que [10]. El valor de 1000 ln A-B
representa el fraccionamiento isotpico del elemento en cuestin entre los compuestos
A y B.
Tipos de Fraccionamiento
Bsicamente existen dos tipos de fraccionamiento:
a) Fraccionamientos (o efectos) isotpicos en el equilibrio

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

b) Fraccionamientos (o efectos) isotpicos cinticos


Discusiones ms detalladas sobre fraccionamientos isotpicos se encuentran en O'Neil
(1986), Gat y Gonfiantini (1981), Gat (1980), etc.
Fraccionamiento isotpico en el equilibrio
Las reacciones con este tipo de intercambio isotpico implican la
redistribucin de istopos de un elemento entre varias especies o compuestos, en
sentido estricto solo se produce en sistemas cerrados, uniformes y equilibrados
qumicamente. Un ejemplo clsico es el que se produce entre dos fases minerales,
que es la base de la geotermometra isotpica.
Consideremos una reaccin del tipo 13CO2(g) + H12CO3-(l) <=> 12CO2(g) +
H
istopos pueden intercambiarse entre los distintos componentes, sin que
se produzcan cambios qumicos, hasta alcanzar el equilibrio. El fraccionamiento
isotpico resultante se puede describir como una constante de equilibrio que es funcin
de la temperatura y de la presin
13

CO3-(l). Los

K = [12CO2(g)] [H13CO3-(l)] / [13CO2(g)] [H12CO3-(l)]


T (C)
0
30

K
1,0092
1,0068

En este caso (y en otros muchos) los istopos pesados se concentran en el


compuesto qumico que tiene enlaces ms fuertes (o ms numerosos) entre sus tomos,
en este caso el H13CO3-(l)
En general los efectos isotpicos en el equilibrio, e incluso los cinticos,
decrecen cuando aumenta la temperatura del sistema.
Fraccionamiento isotpico cintico
Se producen bajo condiciones de no equilibrio, a) por que molculas del
mismo compuesto, que contienen istopos diferentes, se mueven a diferentes
velocidades debido a sus distintas masas, por ejemplo 12CO2 frente a 13CO2; tanto las
molculas ligeras (M=44) como las pesadas (M=45) tienen la misma energa cintica a
la misma temperatura, por tanto:
1/2M44V442=1/2M45 V452 de donde V44/V45 = 451/2/441/2 = 6,708/6,633 = 1,012
De donde se concluye que el 12CO2 se mueve un 1,2% ms rpido que el 13CO2.

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

c) molculas del mismo compuesto, pero con diferentes istopos, reaccionan a


diferentes velocidades debido a las desiguales energas de enlace interatmicas.
d) En general dentro de un mismo compuesto las molculas ms ligeras se
mueven y reaccionan con mayor rapidez.
Efectos isotpicos debidos a la destilacin Rayleigh
A partir de la ecuacin de Rayleigh se pueden ver los efectos del
fraccionamiento isotpico en el caso de una destilacin fraccionada de lquido. Se
trata de una razn exponencial que describe el reparto isotpico entre dos
reservorios cuando uno de ellos decrece en tamao. Las condiciones que deben
cumplirse para describir los procesos de fraccionamiento isotpico son: (1) un
material es eliminado continuamente desde un sistema que contiene molculas de
dos o ms especies isotpicas (por ejemplo, agua con 18O y 16O), (2) el
fraccionamiento se describe como factor y (3) no cambia durante el proceso:
Bajo estas condiciones la evolucin de la composicin isotpica del material
residual sera:
(R / R) = (X1 / X1) -1
donde R = razn isotpica (Ej., 18O/16O) en el reactante, R = razn inicial, Xl = la
concentracin o cantidad del istopo ms abundante (el ms ligero) (por
ejemplo,16O), y X1 = concentracin inicial. Puesto que la concentracin de Xl >> Xh
(concentracin del istopo pesado), Xl es aproximadamente igual a la cantidad
original de material en la fase. Por lo tanto, si f = Xl/X1 = fraccin del material
residual, entonces:
R = R f(-1) .
O bien, expresado en unidades :

f(-1)

que sera valido para valores prximos a 1, prximo 0, y valores menores de 10,
aproximadamente.
En sentido estricto, el trmino Fraccionamiento Rayleigh debera usarse
solo para sistemas qumicamente abiertos donde las especies isotpicas removidas
en cada instante estaban en equilibrio termodinmico e isotpico con las especies
residuales del sistema en el momento de la eliminacin. Adems, esta destilacin
Rayleigh tan ideal solo se produce cuando el reactante en el reservorio es finito y
bien mezclado y no vuelve a reaccionar con el producto (Clark y Fritz, 1997). Sin
embargo el termino fraccionamiento Rayleigh se aplica por lo general a sistemas

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

cerrados en el equilibrio (por ejemplo: la condensacin del vapor atmosfrico en


gotitas de una nube donde hay un intercambio continuo entre los istopos del vapor
y de las goteruelas de agua: Dansgaard, 1961, 1964; Friedman et al., 1964; Taylor,
1972) y a fraccionamientos cinticos, porque las situaciones son prcticamente
idnticas.
H2O
Principales
FENMENOS

CO2
Principales
EFECTOS

ATMSFERA

OCANO

13

D/H=156

12

C/ C=11161 ppm

Nubes

Evaporacin
Condensacin

Climticos
T ,P

Lluvia
Suelos

Fisiolgicos

Absorcin por
las plantas

Hoja

Bioqumicos
primarios

H2O, CO2
Fotosntesis

C3

CA

Glucosa H2O
Biosntesis
Bioconversiones
Transformaciones
Procesos industriales

Azucares

Lpidos

Licores

Aceites

Bioqumicos
secundarios

Aminocidos Constituyentes
minoritarios
Protenas
Alimentos

Aromas

Bioconversiones y
Efectos tecnolgicos

Figura 1.- Fuentes de fraccionamiento isotpico


Efectos isotpicos biolgicos
Los procesos biolgicos son generalmente unidireccionales y son ejemplos
magnficos de reacciones isotpicas cinticas. Los organismos usan preferentemente
las especies isotpicas ligeras ya que les supone un menor costo energtico. Esto
provoca un importante fraccionamiento entre el substrato (pesado) y los productos
biolgicos (ms ligeros). La magnitud del fraccionamiento depende de las
velocidades de reaccin, de la concentracin de los productos iniciales y finales,
condiciones ambientales y de las especies de organismos (en el caso de
transformaciones metablicas).
Un buen ejemplo de la complejidad de este tipo de reacciones cinticas se
puede encontrar en el fraccionamiento entre CO2 y el carbono orgnico fotosinttico
(Fogel y Cifuentes, 1993). El fraccionamiento respondera a la ecuacin:
= A + (Ci/Ca)(B-A)
Siendo el fraccionamiento isotpico, A el efecto isotpico causado por la difusin
del CO2 en su incorporacin a la planta (4,4), B es el efecto isotpico causado por
la fijacin enzimtica (fotosinttica) del carbono (-27,) y Ci/Ca es la razn entre
CO2 interno y atmosfrico. La magnitud del fraccionamiento depende de los valores

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

de todos estos parmetros. Por ejemplo, cuando se dispone de una cantidad ilimitada
de CO2 (Ci /Ca = 1), el fraccionamiento est controlado solo por la accin enzimtica
y el 13C de la planta puede alcanzar valores de hasta -36 (Fogel y Cifuentes,
1993). En cambio si el contenido en CO2 es bajo (Ci /Ca << 1) los valores 13C
estarn fuertemente afectados por el efecto isotpico difusivo, aunque este sea bajo,
ocasionando valores 13C ms positivos (-20 a -30)
Fuentes de fraccionamiento isotpico
Como ejemplo de la complejidad que conllevan los fraccionamientos
isotpicos en la Figura 1 se han elegido dos de los compuestos ms habituales y
abundantes en la naturaleza, CO2 y H2O. Su pueden observar un conjunto de efectos
que afectaran a estos dos compuestos: climticos fisiolgicos, bioqumicos, etc.
Dichos efectos van acompaados de un conjunto de fenmenos tales como:
evaporacin condensacin, fotosntesis, biosntesis, etc. que sistemticamente
conllevan procesos de fraccionamiento isotpico.
Patrones isotpicos
Por desgracia no todos los valores citados en la literatura internacional, para
un mismo elemento, vienen expresados frente al mismo patrn. Para transformar los
valores de un patrn a otro, Craig (1957) propuso la siguiente ecuacin:

(X - A) = (X -B) + (B- A) + 10 -3 (X -B) (B- A)


donde (X-A) y (X-B) son los valores de la muestra X frente a los patrones A y B
respectivamente, mientras que (B-A) es el valor de B frente a A. Por ejemplo, la
conversin de valores 18O entre V-PDB y V-SMOW se realiza mediante las siguientes
ecuaciones:
18OVSMOW = 18OVPDB + VPDB-VSMOW + 10-3 18OVPDB VPDB-VSMOW
18OVSMOW = 18OVPDB + 30,92 + 10-3 18OVPDB 30,92
18OVSMOW = 30,92 + 1, 03092 18OVPDB
Cada laboratorio usa un conjunto de patrones de trabajo propios, pero los
resultados se refieren siempre a un patrn aceptado universalmente.
Para muestras acuosas, y tanto para hidrgeno como para oxgeno, el patrn
usado universalmente era el SMOW (Standard Mean Ocean Water) que representa la
composicin isotpica media del agua de los ocanos. Este patrn se eligi por que los
ocanos representan el punto inicial y final de cualquier ciclo hidrogeolgico
importante. Por otra parte el ocano representa, aproximadamente, el 97% del agua
presente en la corteza de la Tierra y tiene, adems, una composicin isotpica

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

uniforme. En 1976 un simposium internacional que vers sobre patrones en istopos


estables se decidi usar el V-SMOW (Viena-SMOW) que es un patrn obtenido a
partir de agua del Rin. (Fritz y Fontes, 1980).
Para oxgeno y carbono de muestras carbonatadas se usa el PDB (Craig, 1957)
que es un carbonato procedente de un fsil, la Belemnitella Americana, de la formacin
cretcica Pee Dee de Carolina del Sur (EE UU). Por desgracia este patrn, utilizado por
lo investigadores americanos para la elaboracin de la primera escala de
paleotemperaturas, est ya agotado, por lo que ha sido sustituido por otros patrones
tales como el V-PDB que es prcticamente idntico al PDB (Gonfiantini, 1995), con
una razn 13C/12C de 0.0111797, el NBS-19 (se trata de un material calizo) con un
valor de 1,95 frente al V-PDB, etc. Para valores de
13C muy bajos
(aproximadamente -30) se usa el NBS-21 que es un grafito espectromtrico.
Para el nitrgeno se usa el NBS-14 que se trata de Nitrgeno atmosfrico.
Para el azufre se us el CDT, (Troilita del Can del Diablo) que es FeS
meteortico, tambin agotado.
Evidentemente en la actualidad se utilizan otros muchos patrones que adems
de estar disponibles, se adaptarn mejor a las necesidades concretas de cada caso,
(apndices 1 y 2).

Figura 2.- Esquema de un IRMS

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

Tcnicas
En la Figura 2 se muestra el esquema bsico de cualquier espectrmetro de
masas de istopos ligeros estables. Un IRMS, como cualquier espectrmetro de
masas, consta de una fuente de ionizacin, en este caso de Impacto Electrnico,
donde la muestra gaseosa (CO2, H2, N2, SO2, O2, etc.) se ioniza (dando la especie
molecular monocatinica) por interaccin con un haz de electrones de alta energa.
Este tipo de Fuente de Ionizacin se caracteriza por ser de alta eficiencia
pudindose, en los modelos actuales, llegar a producir un in por cada 3000
molculas (un espectrmetro orgnico tipo cuadrupolo produce un in por cada
100.000 molculas) lo que permite medir cantidades nfimas de muestra, en el
intervalo de los picomoles.
Posteriormente el analizador de masas, en este caso magntico
(electroimn), separa las diferentes molculas mediante una aceleracin del haz (de
hasta 10Kv de voltaje de aceleracin) y una posterior interaccin por el campo
magntico. As, para valores constantes de voltaje de aceleracin, intensidad de
campo magntico y carga de las molculas, la deflexin o cambio de direccin
que va a sufrir el haz incidente solo va a depender de las masas de las molculas y
por tanto de los istopos presentes en ellas. Para el caso de un haz inicial de CO2, a
la salida del electroimn habra 3 haces, de masas 44, 45 y 46.
Por ltimo, el detector, tipo Copa de Faraday, contabiliza los iones que
llegan a l por medio de la pequea intensidad de corriente que se produce al captar
el electrn que le falta. Estas copas estn dispuestas en posiciones fijas
predeterminadas, y es la intensidad del campo magntico la que se vara para poder
medir diferentes gases y por tanto diferentes masas, 2 y 3, para el Hidrgeno, 28 y
29 para el Nitrgeno, 44, 45 y 46 para CO2, 66 y 64 para SO2, etc. ya que cada haz
debe incidir en una de las copas sin que ni un solo in pueda escapar a su deteccin
por el espectrmetro. Un elevado vaco en todo el sistema (superior a 10-6 mbar)
asegura un recorrido libre de los haces inicos.
Como se ha indicado anteriormente, un IRMS necesita que la muestra llegue
a la fuente de ionizacin en forma gaseosa. Existen una gran cantidad de sistemas de
Preparacin de Muestras cuya misin es la de convertir la muestra de inters
(carbonatos, agua, materia orgnica, etc.) en los gases a analizar y disponerlos en la
fuente de ionizacin del espectrmetro.
Los fabricantes actuales de espectrmetros permiten realizar una
Configuracin Modular del equipo, Figura 3, para que cada usuario pueda adquirir
solo aquellos sistemas de preparacin y aquellos componentes del espectrmetro que
necesita para realizar el anlisis de un determinado tipo de muestras, permitiendo a
posteriori ampliar el equipo segn sus nuevas necesidades. En geoqumica (la
aplicacin con la que naci la IRMS en los aos 1930-40) la forma clsica de
preparar la muestra, an no desplazada totalmente como se ver mas adelante, es

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

mediante sistemas de vaco con trampas criognicas donde el gas final se transfiere
al espectrmetro en un porta muestras de vidrio.
Este tipo de preparacin necesita de un sistema de entrada denominado de
Doble Ingreso DUAL INLET que se caracteriza porque el gas llega a la Fuente de
Ionizacin por una difusin pasiva (a travs de capilar) entre el reservorio, que esta a
elevada presin, y la fuente con alto vaco. Posteriormente se vio la posibilidad de
unir la lnea de preparacin al Dual Inlet de forma que se automatizaba ms el
proceso.
Elemental
Analyser

TraceGa
E

GC

G
MultiFlow

IMN
PERMANENTE
O
ELECTROIMN

FILTRO

Gilson A/S

MultiPrep
Software

Dual
Inlet

EXPANSIN
HASTA
10

Manifold

Figura 3.-Configuracin modular

Si bien estos sistemas se siguen usando en muchos laboratorios


geoqumicos, han sido casi totalmente sustituidos por los sistemas de FLUJO
CONTINUO que aparecieron en los aos 80 y que permiten, una gran productividad
(cientos de muestras al da frente a unas pocas decenas en los sistemas clsicos) con
una necesidad de muestra en torno a 10-100 veces menor. Seran los sistemas
denominados Trace Gas, Elemental Analycer, GC y Multiflow. En los sistemas de
preparacin de muestra por Flujo Continuo, el gas a analizar llega inmerso en un
flujo de He que acta como gas de arrastre y que mantiene una presin constante en
la fuente de ionizacin. Se pueden medir cantidades mucho menores de muestra
porque esta llega en forma de pico gaussiano consumindose totalmente en cada
anlisis.
Sistema de combustin off-line
En la Figura 4 se muestra un ejemplo de sistema de preparacin de muestras
clsico off-line para el anlisis de C, H y N en materia orgnica. Se parte de varias

10

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

decenas de miligramos de muestra (depender de la riqueza en estos elementos) que


se alojan en un porta muestras de vidrio con Ag y CuO en cantidades suficientes. Se
conecta a sistema de vaco y se cierra a la llama. Se introduce en un horno a 850C
durante 2-3 horas para que se produzca la oxidacin total y posteriormente a 600C
durante 2-3 horas para que se reduzcan los xidos de nitrgeno a N2. Una vez
finalizado dicho proceso se conecta cada porta muestras a una lnea de vaco donde
tras su rotura, se separarn mediante trampas criognicas el CO2, H2O y N2 que se
transferirn a unos porta muestras adecuados donde permanecern hasta el momento
de ser medidos en el espectrmetro mediante el sistema de doble ingreso o Dual
Inlet. Para el anlisis del H2 se necesitara de un segundo proceso para reducir el
H2O a H2 (mediante sistemas de reduccin con uranio, con Zn, con Cr, etc.)
Vaco

Ag
CuO
Muestra

Reduccin a H2
(U, Zn, Cr)

H2O

N2

CO2

Separacin Criognica

Figura 4.- Sistema de combustion off-line de Materia Orgnica


Carbonatos
En la Figura 5 se muestra un sistema off-line, semiautomtico para
carbonatos que permite su conexin directa al espectrmetro de doble ingreso. Este
sistema ha sustituido a la clsica lnea de preparacin de carbonatos aunque su
fundamente es el mismo. Bsicamente consiste en el ataque del carbonato por PO4H3
ultra puro. El CO2 formado se purifica con trampas criognicas, para eliminar agua o
cualquier otro componente y se inyecta directamente en el espectrmetro. As se
pueden procesar un mayor nmero de muestras y estas pueden ser de un peso muy
inferior a las que se utilizan en la lnea clsica (varios miligramos).

11

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

Tcnicas de flujo continuo


En la Figura 7 se muestra un esquema de los procesos que tienen lugar en
los sistemas de preparacin de muestras ms comunes en Flujo Continuo. En la
mitad superior aparecen los destinados a preparar la muestra para el anlisis de H y
O mediante conversin cuantitativa a alta temperatura (tambin denominado sistema
de pirlisis). Cuando lo que interesa es la composicin isotpica de la muestra total
(sin distinguir fracciones moleculares) se utiliza un sistema denominado TC/EA
(nomenclatura de Thermo Electrn, no obstante Micromass posee un sistema

Zona de purificacin y
transferencia de gases

Figura 3
relaciones
i
lTrampa
Figura 5
actividade
depsito e

Microvolumen y
sistema de
inyeccin

Vacuometro
de precisin
Microvolumen

criognica

Volmenes
de
Contador
de vaco

Portamuestras

IR
MS

Bomba
de vaco

He

Bomba
Turbomolecular

Capilar

Bomba
de vaco

Figura 5.- Sistema semiautomtico para carbonatos


equivalente) donde la muestra (micromoles) a 1450C y en presencia de grafito en
exceso se transforma en CO y H2. Estos se separan mediante una columna
cromatogrfica y se analizan secuencialmente.
Para el caso de que interese estos mismos anlisis isotpicos en fracciones
moleculares (cidos grasos, alcanos, alcoholes, aminocidos, etc.) de un extracto, se
someter la muestra (nanomoles) a una separacin inicial mediante cromatografa de
gases, y posteriormente cada fraccin separada ser sometida al proceso TC/EA. Sin
embargo ahora solo ser posible medir o el H2 o el oxgeno como CO, pero no
ambos istopos a la vez.

12

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

En la mitad inferior de la figura se muestran los sistema de flujo continuo


utilizados para el anlisis de N y C. De forma similar a lo expuesto anteriormente se
pueden hacer estos anlisis bien en la muestra total o bien en las fracciones
moleculares. La muestra total se quema, en presencia de oxgeno, a una temperatura
comprendida entre 950 y 1000 C y los gases obtenidos, CO2 y N2 (el agua se
elimina por una trampa qumica), tras una reduccin a 650 C, se separan por una
columna cromatogrfica y se miden secuencialmente en el espectrmetro de masas.
Este sistema denominado EA-IRMS fue el primero, en flujo continuo, en aparecer
en el mercado a finales de los aos 70, a continuacin se explicar con ms detalle.
En caso de fracciones moleculares (mezclas de componentes) los componentes
separados por un cromatgrafo de gases se queman, al igual que antes se haca con
la muestra total, el CO2 o el N2 obtenidos se analizan en el espectrmetro de masas.
Este sistema se denomina GC-C-IRMS y tambin se explicar ms adelante.
EA-IRMS
En la Figura 6 se muestra el esquema de un EA-IRMS. Consta de: un
carrusel automuestreador (a) donde se colocan las muestras (normalmente unos
pocos miligramos aunque esto depende de su riqueza en C y N) pulverulentas,
previamente pesadas, secas y dentro de una pequea cpsula de estao, formando
una pequea bolita. Un carrousel dispone de 50 pocillos para contener otras tantas
muestras pero se puede aumentar su capacidad hasta 150 muestras. La muestra cae
en la columna de oxidacin formada por un tubo de cuarzo relleno con xidos de

COMBUSTION
Combustin

IRMS

GC
Perclorato magnsico

Reduccin

Cu

Co
Cr
1000

CO2
N2

CO2
N2
H2 O

He
Figura 6.- Esquema del CG-IRMS

13

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

cobalto y cromo (b) donde a una temperatura de, aproximadamente, 1000 C


(depende del modelo) y en presencia de atmsfera de oxgeno puro se produce una
combustin instantnea y total (este proceso recibe el nombre de Flash Combustin)
dando lugar a CO2, N2, NxOy, H2O y O2 en exceso. Una segunda columna de
reduccin (c) rellena de cobre reducido permite que a la salida de la misma solo
existan CO2, N2 y H2O. El agua se elimina en (d) por absorcin sobre perclorato
magnsico. Posteriormente, si solo se pretende analizar N2, se puede eliminar el CO2
mediante una trampa de Ca(OH)2. Si interesan los dos componentes una columna
cromatogrfica separa el N2 del CO2 y se introducen, secuencialmente, en la fuente
de ionizacin del espectrmetro mediante un sistema de Split denominado Conflo
III. Un flujo de He recorre todo el circuito desde la entrada de la cpsula hasta la
llegada de los gases a la fuente de ionizacin.
Flujo Continuo para oxgeno e hidrgeno (TC/EA)
En este caso la muestra, normalmente materia orgnica, aunque tambin se
pueden analizar sulfatos, nitratos y aguas, se aloja en una cpsula de plata, similar a
las utilizadas en el EA (en este caso se usa plata y no estao para evitar la
contaminacin por oxgeno procedente de la misma cpsula) y despus se cierra y
aloja en un carrusel (tambin similar al utilizado en el EA). Desde este carrusel cae
en la columna de reaccin, que est formada por un tubo de almina recubierto
internamente por otro de glassy carbon y este a su vez relleno con grafito y virutas
de glassy carbon. Todo ello contribuye a que exista un exceso de carbono, el cual, a
temperaturas superiores a los 1300 C, ocasiona la produccin de tantas molculas
de CO como tomos de oxgeno existan en la muestra.
El hidrgeno se transforma en H2 y el carbono de la muestra que pueda
haber en exceso se grafitiza. En las muestras que poseen nitrgeno, se produce
tambin N2. El CO y el H2 (ms el N2 en su caso) formados se separan
posteriormente por una columna cromatogrfica y a la salida se envan al
espectrmetro mediante un sistema de split tipo ConFlo III, exactamente igual al
usado para el analizador elemental. Todo el circuito se purga con un flujo de He para
evitar la existencia de oxgeno externo y para permitir que fluyan los gases hasta el
espectrmetro.
Para el caso de los anlisis de aguas el sistema de muestreo no es un carrusel
sino un inyector de los utilizados en cromatografa (ver el GC) o el mismo brazo
CombiPal usado en el GasBench, el cual usando una jeringa cromatogrfica inyecta
1 microlitro de agua a travs de un septum situado en la entrada de la columna de
reaccin.

14

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

Flujo continuo en mezclas de componentes


En todos los casos el primer componente es un cromatgrafo de gases que
no difiere en nada de los utilizados en GC o GC-MS. Este cromatgrafo permite
inyectar la muestra a estudiar y mediante la columna adecuada y la rampa de
temperaturas seleccionada se separaran los distintos compuestos de inters segn sus
diferentes tiempos de retencin.
A la salida de la columna existe un sistema para conversin de la muestra en
CO2 + N2 (sistema GC/C) que consiste en un pequeo reactor de combustin, similar
(pero de reducidas dimensiones) al usado en EA y que continua con un sistema de
reduccin (para el caso de anlisis de N2) y con una trampa criognica para atrapar
el agua. O bien el sistema para conversin de la muestra en CO + H2 (sistema
GC/TC) similar (pero de reducidas dimensiones) al usado en el EA/TC. La nica
variacin con respecto a un GC convencional es que existe una vlvula a la salida de
la columna que enva inicialmente todo el disolvente hacia el detector del
cromatgrafo (normalmente un detector de ionizacin de llama) y solo deja pasar a
las columnas de reaccin los gases seleccionados de la muestra, lo cual inhibe la
posibilidad de que el disolvente llegue a estos reactores y consuma un exceso de
reactivos.
Una versin muy reciente permite, adems, mediante un sistema de split,
realizar un anlisis GC-MS en la muestra para poder conocer la composicin
cualitativa de los diferentes compuestos separados antes o independientemente de su
anlisis isotpico. Esto permite que, mediante un nico cromatgrafo de gases, se
puedan realizar tanto los anlisis GC-MS como los GC-IRMS.

Reactor de
oxidacin
900 C

Reactor de
pirlisis
1200 C
Vlvula
retorno
de flujo

Vlvula
retorno
de flujo

Gas de
apoyo

Reactor
de
pirlisis
1450 C

Inyector

V
Reactor
activo

Reactor
complementario

Figura 7.- Flujo continuo. Anlisis de razones isotpicas en mezclas de


componentes de C+N y O+H (GC/C y GC/TC)

15

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

Aplicaciones de la Biogeoqumica isotpica


Debido a que los fenmenos fsicos, qumicos y biolgicos producen
fraccionamientos isotpicos en los elementos, el estudio de sus razones isotpicas
tiene innumerables aplicaciones en muy diversas ramas de la ciencia. Su discusin
se hara interminable, por lo que a continuacin solo se indican algunos de estos
campos de aplicacin. Para ms informacin ver: Attendorn y Bowen (1997), IAEA
(1983), Clauer y Chaudhuri (1992), Frenzel (1995), Lajtha y Michener, R.H. (1994),
Fritz y Fontes (1980, 1986, 1989), Griffiths (1998).
Geotermometra en Petrologa gnea y metamrfica.
Estratigrafa y Sedimentologa: indicadores ambientales.
Hidrologa: Trazadores del agua, trazadores de solutos en el agua.
Edafologa: Gnesis, evolucin.
Paleontologa: Paleodietas, indicadores ambientales.
Paleoclimatologa: Registros de paleotemperaturas, paleohumedad.
Ecologa y fisiologa, animal y vegetal.
Medicina: Diagnstico clnico, gasto energtico, procesos metablicos.
Medioambiente. Estudios de contaminacin
Alimentacin: Control de calidad, denominacin de origen.
Procesos industriales
Astrobiologa
etc.
Bibliografa
Attendorn, H.G. y Bowen, R.N.C. (1997) Radioactive and stable isotope geology.
Chapman & Hall. London, 522 pp.
Clark, I.D. y Fritz, P. (1997) Environmental Isotopes in Hydrogeology, CRC Press,
328 pp.
Clauer, N. y Chaudhuri, S. (1992) Isotopic signatures and Sedimentary Records.,
Springer-Verlag. Berlin, 529 pp
Craig, H. (1957) Isotopic standards for carbon and oxygen and correction factors for
mass-spectrometric analysis of carbon dioxide, Geochim. Cosmochim.
Acta., 1(2),133149.
Dansgaard, W. (1961) The isotopic composition of natural waters. Medd.Grnl.,
165(2), 1-120.
Dansgaard, W. (1964) Stable isotopes in precipitation. Tellus, 16, 436-438.
Fogel, M.L. y Cifuentes, L.A. (1993) Isotope fractionation during primary
production. In: M.H. Engel and S.A. Macko (Eds). Organic Geochemistry,
Plenum Press, New York, 73-98.
Frenzel, B. (1995) Problems of isotopes in tree-rings, lake sediments and peat-bogs
as climatic evidence for the Holocene. European Science Foundation,
Strasbourg, 189 pp.

16

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

Friedman, I., Redfield, A.C., Schoen, B y Harris, J. (1964) The variation of the
deuterium content of natural waters in the hydrologic cycle. Rev. Geophys.,
2,177-224.
Fritz, P. y Fontes, J.Ch. (1980) Handbook of Environmental Isotope Geochemistry,
Vol. 1, The Terrestrial Environment, A. Elsevier, Amsterdam, 504 pp.
Fritz, P y Fontes, J.Ch. (1986) Handbook of Environmental isotope geochemistry.
Vol. 2. The Terrestrial Environment, B. Elsevier. Amsterdam, 548 pp.
Fritz, P y Fontes, J.Ch. (1989) Handbook of Environmental isotope geochemistry.
Vol.3. The Marine Environment, A. (1989) Elsevier. Amsterdam, 392 pp.
Gat, J.R. (1980) The isotopes of hydrogen and oxygen in precipitation. En: P. Fritz
and J.-Ch. Fontes (Eds), Handbook of Environmental Isotope Geochemistry,
Vol. 1, The Terrestrial Environment., A. Elsevier, Amsterdam, 21-48.
Gat, J.R. y Gonfiantini, R., (Eds) (1981) Stable Isotope Hydrology: Deuterium and
Oxygen-18 in the Water Cycle. IAEA Technical Report Series #210,
Vienna, 337 pp.
Gonfiantini, R. (1995) Reference and Intercomparison Materials for Stable Isotopes
of Light Elements, IAEA-TECDOC-825, IAEA, Vienna, 13-29.
Griffiths, H. (1998) Stable isotope, Integration of biological, ecological and
geochemical processes, Bios Scientific Publishers, Oxford, 438 pp.
IAEA (1983) Paleoclimates and palaeowaters: A collection of environmental isotope
studies, International Atomic Energy Agency, Vienna, 204 pp.
Lajtha, K. y Michener, R.H. (1994) Stable isotopes in Ecology and environmental
Science. Blackwell Scientific Publications. London, 316 pp.
O'Neil, J.R., (1986) Theoretical and experimental aspects of isotopic fractionation.
En: J.W. Valley, H.P. Taylor and J.R. O'Neil (Eds), Stable Isotopes in High
Temperature Geological Processes. Reviews in Mineralogy, 16, 1-40.
Taylor, C.B. (1972) The vertical variations of the isotopic concentration of
tropospheric water vapour over continental Europe an their relationship to
tropospheric structure, N.Z. Dep. Sci. Ind. Nucl. Sci., Rep., INS-R-107, 45
pp.

Referencia de este artculo:


Reyes, E. (2004): Geoqumica de Istopos Estables: Fundamentos, Tcnicas y
Aplicaciones. En: L. Barbero y M.P. Mata (Eds.). Geoqumica Isotpica
Aplicada al Medioambiente, Seminarios de la Sociedad Espaola de
Mineraloga (ISSN: 1698-5478), 1, 1-19.

17

E. Reyes
___________________________________________________________________________________

Apndice 1.- Patrones internacionales para oxgeno, hidrgeno, carbono y


nitrgeno
REFERENCIA

MATERIAL

IAEA-VSMOW

Vienna Standard Mean


Ocean Water
St Light Antarctic
Precipitation
Greenland Ice Sheet
Precipitation
Deuterium labelled
water
Deuterium labelled
water
Water
Water
Water
Water
O-18 Labelled Water
O-18 Labelled Water
Biotite

IAEA-SLAP
IAEA-GISP
IAEA-302A
IAEA-303B
IAEA-OH-1
IAEA-OH-2
IAEA-OH-3
IAEA-OH-4
IAEA-304-A
IAEA-304-B
IAEANBS30(NIST8538)
IAEA-CH7(NIST-8540)
IAEANBS22(NIST8539)
IAEANBS28(NIST8546)
IAEA-NBS127
IAEANBS1(NIST8544)
IAEA-NBS19
(NIST-8545)
IAEA-CO-1

DVSMOW
0,00

13CVPDB

15NAIR

18OVSMOW
0,00

-428

-55,5

-189,5

-24,8

+508,4
+996
-3,9
-30,8
-61,3
-109,4

-0,1
-3,3
-8,7
-15,3
+251,7
+501,5
+5,1

-65,7

Polyethylene

-100,3

-31,8

Oil

-118,5

-29,7

Quartz sand

+9,58

Barium Sulphate
Carbonatite

-5,01

+9,3
-23VPDB

Carbonatite

+1,95

-2,2VPDB

Marble

+2,48

IAEA-CO-8

Calcite

-5,75

IAEA-CO-9

Barium Carbonate

-47,1

IAEALSVEC(NIST8545)
IAEA-305A

Lithium Carbonate

-46,5

2,44VPDB
22,7VPDB
15,3VPDB
26,5VPDB

IAEA-305B
IAEA-310A
IAEA-310B

N-15 Labelled
ammomnium sulphate
N-15 Ammomnium
sulphate
N-15 Labelled Urea
N-15 Labelled Urea

+39,8
+375,5
+47,2
+244,6

18

Geoqumica de Istopos estables: fundamentos


___________________________________________________________________________________

Apendice 2.- Patrones internacionales para carbono, nitrgeno y azufre


REFERENCIA

MATERIAL

IAEA-USGS32
IAEAUSGS26(NIST8551)
IAEA-N1
IAEA-N2
IAEA-311
IAEA-USGS25
IAEA-NO-3
IAEA-NSVEC
IAEANBS127(NIST8557)
IAEANBS123(NIST8556)
IAEA-S1
NIST-8555
NIST-8553
IAEA-309A
IAEA-309B
IAEA-303A

Potasium sulphate
Ammonium sulphate

13CVPDB

15N
AIR

34SCDT
+180

+53,7

Ammonium sulphate
Ammonium sulphate
Ammonium sulphate
Ammonium sulphate
Potassium nitrate
Air N2
Barium sulphate Water

+0,4
+20,3
+2,05
-30,4
+4,7
-2,8
+20,3

Sphalerite

+17,1
-0,3
+21
+16

IAEA-C2

Silver sulphide
Silver sulphide
Elemental sulphur
C-13Labelled UI-glucosa
C-13Labelled UI-glucosa
C-13 Labelled sodium
bicarbonate
C-13 Labelled sodium
bicarbonate
Travertine

IAEA-C3

Cellulose

IAEA-C4

Wood

IAEA-C5

Wood

IAEA-CH6(NIST8542)
IAEA-C6

Sucrose

IAEA-C7
IAEA-C8
IAEAUSGS24(NIST8541)

Oxalix acid
Oxalic acid
Graphite

IAEA-303B

+93,9
+535,3
+93,3
+466
8,25PDB
24,91PD
B
23,96PD
B
25,49PD
B
-10,4

Sucrose

10,8PDB
-14,48
-18,3
-16,1

19