Tema 5: Agentes Antimicrobianos

INTRODUCCIN

La utilizacin de sustancias qumicas para el tratamiento de infecciones, aunque de forma emprica, es

tan antigua como la humanidad:

En el s. VI a.C. en China se utilizaba la emetina para el tratamiento de la disentera amebiana.

En el s. XVI se describe la utilizacin de la quinina para el paludismo, droga que se utiliz durante
mucho tiempo.
Tambin en el s. XVI se describe la utilizacin de mercurio para el tratamiento de la sfilis y luego
los mercuriales han sido ampliamente utilizados como desinfectantes (mercromina- mercurocromo).
En el s. XIX se empieza a usar el IK (hoy tintura de yodo) para la sfilis.

Pero el desarrollo cientfico de los antimicrobianos, sustancias qumicas utilizadas para el tratamiento
de infecciones, comenz con Paul Erlich (Polonia 1854-1915) quin en 1901 comprob que algunos de sus
preparados orgnico con arsnico, el salvarsan y el neosalvarsan eran efectivos contra la sfilis, siendo
los primeros compuestos de sntesis que se usaron en la curacin de enfermedades infecciosas. Fue premio
Nobel en 1908 por sus trabajos en qumica inmunolgica. Principio de la toxicidad selectiva
Cuanto ms diferentes sean el patgeno y las clulas del hospedador ms fcil ser encontrar drogas que
acten selectivamente frente al patgeno y no sean dainas para el hospedador y por eso hay muchos
antibacterianos (bacterias son procariotas) y pocos antifngicos, antiprotozoarios y antihelmnticos
(hospedador y patgeno son eucariotas) adecuados.
Con los antivirales ocurre que dado que los virus utilizan la maquinaria metablica del hospedador muchos
de los compuestos que atacan los virus son tambin dainos para el hospedador.

Aos ms tarde:

En 1928, Fleming descubre la penicilina que puede

considerarse el hito ms importante en la historia de
la quimioterapia, si bien su uso no se extendi hasta
los aos 40.
En 1932, Domagk descubre las sulfonamidas que
fueron los primeros agentes antimicrobianos usados
en la prctica (antes que la penicilina).
En 1944, Waskman descubri la estreptomicina
producida por Streptomyces griseus y acu el
trmino antibitico para describir sustancias de origen
natural con capacidad antimicrobiana.
En 1945, Brotzu descubre las cefalosporinas a
partir de Cephalosporium acremonium.

Actualmente el trmino antibitico se utiliza para

nombrar cualquier agente antibacteriano incluidos los
de origen sinttico o semisinttico, que son
aquellos en los que una parte de la molcula es natural
y la otra de sntesis, buscando que sean ms efectivos,
ms fcil de administrar o de efecto ms duradero.

CLASIFICACIN DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS

Pueden clasificarse atendiendo a distintos criterios:

1. Microorganismos frente a los que actan

Antibacterianos
Antifngicos
Antivirales
Antiparasitarios

2. Estructura qumica (11 tipos distintos)

2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
2.5.
2.6.
2.7.
2.8.
2.9.
2.10.
2.11.

Carbohidratos. (Streptomicina)
Lactonas Macrocclicas (Eritromicina)
Quinonas y Derivados (Tetraciclina)
Aminocidos y Pptidos Anlogos (Penicilina)
Compuestos Heretocclicos que contienen Nitrgeno (Polioxinas)
Compuestos Heretocclicos que contienen Oxgeno (Monesina)
Derivados Alicclicos (Cicloheximida)
Compuestos Aromticos (Cloranfenicol)
Compuestos Alifticos (Fosfomicina)
Compuestos de Quinolona (cido Nalidxico)
Oxazolidinona

3. Efecto sobre los microorganismos

o

Bacteriosttico Bactericida - Bacterioltico

Tiempo

Tiempo

Tiempo

Fungisttico Fungicida

4. Mecanismos de Accin

Inhibiccin de la Sntesis de la Pared Celular

Inhibicin de la Sntesis de Protenas

Inhibicin de la Funcin de la Membrana

citoplasmtica

Inhibicin de las Rutas Metablicas

Inhibicin de la Sntesis de DNA y RNA

Bloqueo del lugar de Reconocimiento de Virus

4.1. Inhibidores de la Sntesis de la Pared Celular

Actan bloqueando la sntesis de la Pared Celular a
distintos niveles y producen la muerte celular.
Suelen ser bactericidas.
Actan de esta forma los -lactmicos, penicilinas o
derivados del 6-APA y las cefalosporinas entre otros.

Efectos inhibitorios en la
sntesis de la Pared Celular
de las beta-Lactamas

Especial mencin requieren los inhibidores de la sntesis de los cidos miclicos presentes
en la PC de las micobacterias: Ej.: isoniazida o etambutol que evitan la formacin de la capa de
acidos miclicos que producen exclusivamente estas bacterias.
Su formacin es compleja y es uno de los motivos por los que son necesarios tratamientos muy
largos para evitar el crecimiento de estas bacterias.

4.2. Inhibidores de la sntesis de protenas

Los ribosomas de eucariotas y procariotas son distintos y en esto se basa el efecto
selectivo de estos compuestos.
Pueden actuar a distintos niveles.
Actan de esta forma los: aminoglucsidos, cloranfenicol, tetraciclinas,
macrlidos.

Los aminoglucsidos producen protenas ineficaces y son por ello bactericidas y para el resto la accin
es reversible (cuando baja la concentracin del compuesto el proceso se reanuda).

Mecanismo de Accin se los principales inhibidores de la sntesis de protenas

Estreptomicina (Aminoglucsido): Acta cambiando
la forma de la subunidad 30S y la lectura del mRNA es
incorrecta producindose aminocidos incorrectos.

Tetraciclina (30S): bloquea el punto de unin del tRNA

evitando la incorporacin de aminocidos a la cadena que
se est sintetizando.

Cloranfenicol: acta en la subunidad 50S bloqueando la

formacin de los enlaces peptdicos.

Macrlidos: se unen a la subunidad 50S bloqueando el

movimiento del mRNA a lo largo del ribosoma y la sntesis
de protenas se detiene.

4.3. Inhibidores de la rutas metablicas

Pueden actuar a distintos niveles, en la cadena transportadora de electrones, inactivando enzimas, etc.
Un buen ejemplo es el de las sulfonamidas, de estructura similar al PABA (cido p-amino benzoico)
compuesto esencial en la sntesis de los nucletidos necesarios para la sntesis de los cidos nucleicos en
procariotas.

Inhibidores de las rutas metablicas PABA (cido p-amino benzoico)

Ruta Implicada/ Mecanismo de Accin

Papel del PABA en la sntesis del cido Flico

Inhibicin de la sntesis del cido Flico por Sulfonamida

4.4. Inhibidores de la funcin de la membrana citoplasmtica

Actan daando la integridad de la MC, afectando a una de sus principales funciones que es la de regular
el paso de sustancias y la permeabilidad selectiva o inhibiendo la sntesis de algn componente de la misma,
como es el ergosterol en la MC de los hongos.
Son poco selectivos y por ello txicos porque el colesterol de la MC de las clulas humanas es similar al
ergosterol.

La anfoteracina B acta unindose a las molculas

de ergosterol que hay en la membrana
citoplasmtica de los hongos y es por ello un
antifngico. Ocasiona la ruptura de la MC y por lo
tanto la lisis celular.
Algunos antihelmnticos actan alterando la
permeabilidad
de
la
membrana
citoplasmtica.

4.5. Inhibidores de los procesos de replicacin y transcripcin

Dado que slo existen pequeas diferencias en el ADN de eucariotas y procariotas el uso de estas drogas es
arriesgado.
Algunos de estos compuestos son anlogos a los nucletidos y nuclesidos y por ello se incorporan en el
ADN o ARN de los patgenos alterando la forma de las molculas de los cidos nucleicos y los procesos de
replicacin o transcripcin.
Se suelen usar como antivirales (AZT, anlogo de la timidina) porque las polimerasas vricas incorporan
nucletidos no funcionales ms fcilmente y a ms velocidad que las polimerasas de las clulas humanas.
NUCLESIDOS Y SUS ANLOGOS ANTIMICROBIANOS

4.6. Bloqueo del lugar de reconocimiento de los virus

Se denominan attachment antagonists y es una reciente lnea de trabajo en la bsqueda de antivirales.
Se utilizan pptidos y azcares anlogos a los que existen en las protenas de unin o protenas receptoras,
evitando el reconocimiento y la adhesin, etapas iniciales del proceso de replicacin vrica.
CARACTERSTICAS DE INTERS DE LOS ANTIMICROBIANOS:
1) Propiedades fsico-qumicas:
Son importantes sobretodo aquellas que influyen en la eficacia y el modo de administracin. Ej.: si
resisten o no la acidez del estmago, si se absorben en el intestino y pueden entonces administrarse
por va oral (siempre es esto mejor que la va endovenosa o intramuscular).
Si atraviesan o no las barreras del organismo, lo que facilitar la llegada a la diana.
2) Espectro de accin
3) Farmacocintica o comportamiento en el organismos (LADME), vida media, etc.
4) Efectos secundarios, toxicidad. Pocos cumplen el principio de toxicidad selectiva.
5) Aplicaciones clnicas.

Sensibilidad de los microorganismos a los agentes antimicrobianos

Los microorganismos son naturalmente sensibles a algunos antimicrobianos y resistentes a otros
(resistencia natural). Sin embargo ocurre con frecuencia que cepas que eran sensibles se vuelven
resistentes con el tiempo (resistencia adquirida).
Por ello, es de gran importancia la realizacin de pruebas o ensayos de sensibilidad a los antimicrobianos,
conocidos como antibiogramas o antifungigramas.
El parmetro que cuantifica la sensibilidad se denomina Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI CIM)
que se define como la mnima concentracin de antimicrobiano que inhibe la multiplicacin de un m.o. Se
expresa en g/ml.

TESTS DE SUSCEPTIBILIDAD A AGENTES ANTIMICROBIANOS

1)
2)
3)
4)

Antibiograma por tcnica de disco-difusin

Antibiograma por tcnica de dilucin
Antibiograma por tcnica de difusin en gradiente
Otras tcnicas (Tiras API, Sistema Wider)

MTODO DE DIFUSIN EN DISCO

1: Se toma con un isopo una 2: Se siembre un agar en el que 3: Se mide el dimetro del radio
muestra de la colonia/cultivo a el crecimiento sea bueno que de inhibicin y se da un
probar su resistencia.
cubra toda la superficie y se cultiva resultado.
junto
con
los
discos
de
antimicrobiano

Los resultados en esta prueba se leen como:

o
o
o

S: se espera una buena respuesta clnica (Sinnimo de xito en el tratamiento?)

R: el antibitico no ser eficaz (Sinnimo de fracaso en el tratamiento?)
I: dos posibles lecturas
1) Posible respuesta clnica cuando el antibitico pueda administrarse a dosis muy altas.
2) Posible respuesta clnica si la infeccin se produce en un lugar en el que el antibitico se concentra
(Ej: ampicilina en orina).

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Efectos que se pueden observar en esta tcnica.

ANTAGONISMO

SINERGIA

Propiedad de ciertas combinaciones de antibiticos Se refiere a la propiedad de ciertas combinaciones de

de ejercer un efecto bactericida inferior al de cada Antibiticos capaces de producir un efecto bactericida
uno de ellos.
superior al ejercido por cada uno de ellos por
separado.

La cefoxitina (CF030) induce la expresinde la

betalactamasa cromosmica de la clase C, que
confiere resistencia a las cefalosporinas de tercera
generacin (CAZ30).
RESISTENCIA INCOMPLETA
La presencia de colonias en el interior del halo de
inhibicin permite sospechar la presencia de
determinados
mecanismos
de
resistencia,
generalmente enzimaticos.

VENTAJAS

Es sencilla
til
Econmica

INCONVENIENTES

No permite determinar la CMI

No es adecuada para m.o. exigentes como los
estreptococos, neumococo, Neisseria, bacterias
de crecimiento lento, micobacterias o bacterias
anaerobias para las que se utilizan pruebas
especficas.
La forma de los halos proporciona informacin
interesante.

11

Regla del 90-60:

90-95% de pacientes inmunocompetentes con infecciones monomicrobianas que son tratados
parenteralmente con antibiticos considerados sensibles (S) a dosis ptimas y con una buena penetracin
en el sitio de infeccin, tienen una evolucin clnica favorable.
Mientras que un 60% de los pacientes con estas infecciones que reciben un antimicrobiano frente al que el
microorganismo exhibe algn tipo de resistencia (R) tienen una evolucin clnica positiva.
Esto es debido a la influencia de distintos factores:
a) Factores propios del microorganismo, como son el valor de la CMI, el mecanismo de R, el
tamao de la poblacin microbiana o la formacin de biopelculas.
b) Factores dependientes del medicamento, como son la actividad microbicida o solo inhibidora
del cto, la dosificacin inadecuada del medicamento, problemas de distribucin tisular, interacciones
medicamentosas,..
c) Factores propios del paciente, lugar y gravedad de la infeccin, presencia de material exgeno,
toma incorrecta del medicamento, estado inmunitario del paciente.

MTODOS DE DILUCIN
Tipos:
1) Dilucin en Agar (Bacterias Anaerobias) [No se explica en el tema]
2) Dilucin en Caldo (Bacterias Aerobias)
a. Microdilucin
b. Macrodilucin
Microdilucin
Macrodilucin:
Se emplea una placa de microtitulacin con pocillos de Se
emplea
por
cada
combinacin
fondo en U.
microorganismo/antimicrobiano una batera de
tubos.

El primer tubo de la derecha es un control de

medio sin antibitico en el que crece la
bacteria que queremos estudiar. El resto llevan
una concentracin de antibitico variable
expresada en mg/L. El tubo con el nmero 8 se
corresponde con la concentracin mnima
inhibitoria. (CIM)

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VENTAJA: Se conoce la CIM

MTODOD DE DIFUSIN EN GRADIENTE (E-TEST)
Tan sencilla como la de difusin en disco pero tiene la ventaja de que da el valor de la CMI.
Tiene buena correlacin con la tcnica estandar de dilucin en tubo.
Da un valor ms exacto de la CMI que el mtodo de diluciones dobles progresivas porque el rango de
concentraciones es ms estrecho.
1: Se toma con un isopo una 2: Se siembre un agar en el que 3: Se mide el dimetro del radio
muestra de la colonia/cultivo a el crecimiento sea bueno que de inhibicin y se da un
probar su resistencia.
cubra toda la superficie y se cultiva resultado.
junto con la tira E del
antimicrobiano

OTRAS TCNICAS
-

TIRAS API

Antibiograma para Enterococos, Estreptococos y neumococos. (Ej: ATB STREP EU)

Permite determinar la sensibilidad de enterococos, estreptococos y neumococos a antibiticos en un medio

semi-slido en condiciones muy prximas a las tcnicas de referencia de dilucin en agar o de microdilucin.
-

Sistema WIDER (Soria Melguizo)

Sistema de identificacin de microorganismos y de sensibilidad antibitica para bacterias y hongos.

Sistema abierto de identificacin y sensibilidad. Paneles de microdilucin deshidratados.

Configuracin de antibiticos adaptada a las necesidades de nuestro mercado. Posibilidad de lectura
visual del crecimiento y de las distintas reacciones.

13

Mdulo de lectura equipado con una cmara digital de vdeo. Anlisis de Imagen e interpretacin de
los resultados en menos de 5 segundos.

Pruebas de sensibilidad de los antifngicos:

La realizacin de este tipo de pruebas es mucho menos frecuente, porque hay muchos menos antifngicos
y porque la susceptibilidad de los principales hongos que causan micosis es bien conocida.
Se usan tcnicas de microdilucin o el mtodo de difusin en gradiente.
El problema de los hongos filamentosos es cmo estandarizar el inculo y da ciertos problemas
en la lectura.
-

Estudios de sensibilidad a los antivricos:

No son frecuentes y los sanitarios los prescriben empricamente.

Cuando se hacen se usan tcnicas que comparan la inhibicin en la replicacin del virus en presencia del
antiviral comparado con el mismo medio sin antiviral.
Se usa el mtodo de las placas o calvas.
-

Estudios de sensibilidad a los antiparasitarios:

Se usan tcnicas de evaluacin in vitro o en animales de experimentacin que son muy complejas.
La aparicin de R es adems poco frecuente, por lo que no suelen fallar los tratamientos.
-

Deteccin de -lactamasas

La presencia de - lactamasas es una de las principales causas de R a las penicilinas y en ocasiones las
pruebas de sensibilidad convencionales no detectan estas resistencias. Por ello es frecuente utilizar tcnicas
adicionales.
Hay un grupo de lactamasas denominadas de espectro extendido (BLEE) que causan graves
problemas en hospitales y cuya presencia requiere ser detectada de forma rpida en el laboratorio.
Estas tcnicas sirven para detectar lactamasas extracelulares como las
que poseen los estafilococos pero detectar las intracelulares es mucho ms
complicado porque hay que lisar las clulas.
Ejemplo:
Nitrocefina: Es una cefalosporina cromognica que cuando es hidrolizada por
las lactamasas cambia a rojo.

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Tcnica de Gots

Consiste en sembrar una placa con Micrococcus luteus

(sensible a la penicilina) y en el centro se pone un disco
con penicilina.
Las cepas que se quiere saber si poseen lactamasas se
siembran en estras en forma de radio.
Las cepas productoras del enzima destruyen la penicilina
en el borde del halo de inhibicin y permiten el crecimiento
del micrococo.

CONSIDERACIONES FINALES:
La eleccin de un antimicrobiano debe realizarse tras
considerar no slo los resultados del ensayo de sensibilidad
y deben tenerse en consideracin entre otros:

Los aspectos farmacocinticos del antimicrobiano

La toxicidad.
Las posibles interacciones entre ellos.
Las caractersticas del paciente (edad, existencia de otras enfermedades, etc..)
La localizacin de la infeccin en relacin con la farmacocintica del frmaco para saber si llegar o
no al lugar de la infeccin.

Por todo esto puede concluirse que en ocasiones los resultados no son los esperados.
Espectro de accin antimicrobiana

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RESISTENCIA A LOS AGENTES MICROBIANOS

El abuso de los antibiticos crea superbacterias!!! (El Pas 16 Nov. 2012)

El mal uso de los frmacos genera 25.000 muertes al ao en Europa!
Las resistencias no son un problema individual, sino de salud pblica!
Las farmacuticas han perdido inters en desarrollar nuevos antibiticos!

El descubrimiento de nuevos antimicrobianos y la subsiguiente aparicin de resistencias es una constante

desde el descubrimiento de los mismos.
Entre los microorganismos aquellos en los que con mayor frecuencia se desarrollan resistencias son las
bacterias y adems en los ltimos aos han aparecido bacterias multirresistentes lo que es motivo de
gran preocupacin en el mundo hospitalario. Existe una relacin directa entre el aumento del uso de
antibiticos y la aparicin de RESISTENCIA.
Cabe destacar que en los ltimos aos se han detectado resistencias a la cloroquina en algunos protozoos
del gnero Plasmodium (P. falciparum y P. vivax) lo que es un problema de salud de gran importancia.

Todos los microorganismos presentan resistencia natural a determinados antimicrobianos, pero adems
puede ocurrir que estos con el tiempo desarrollen resistencia a frmacos a los que eran sensibles lo que se
conoce como resistencia adquirida.
Pero hay una tercera posibilidad y es lo que se denomina resistencia teraputica que es aquella en la que
la eficacia clnica de una antimicrobiano es menor que la esperada como consecuencia de diferentes
factores dependientes tanto del microorganismo (mutaciones o adquisicin de material gentico extrao
como plsmidos o transposones portadores de genes de R), como del paciente como del frmaco.

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ESTRATEGIAS A SEGUIR
1. Antibioticoterapia combinada
La antibioticoterapia combinada es la utilizacin de ms de un agente antibacteriano en el tratamiento de
una enfermedad infecciosa. Estas combinaciones se utilizan con el objetivo de:
a) Impedir o retrasar la aparicin de resistencias.
b) Aumentar el espectro de cobertura especialmente en las infecciones polimicrobianas, buscando el
efecto aditivo de los distintos frmacos y tratando de disminuir la toxicidad.
Un ejemplo clsico de esta modalidad teraputica es el tratamiento de la tuberculosis pulmonar, que ha
incluido cuatro drogas: isoniacida, rifampicina, estreptomicina y piracinamida.
Sin embargo, la combinacin de antibiticos tiene diversos inconvenientes:

Pueden producirse incompatibilidades fsico-qumicas entre los agentes combinados.

Puede crearse antagonismo in vivo entre ellos.
Puede favorecerse la aparicin de multirresistencias.
Aumenta el riesgo de daos que pueden producirse a los enfermos
Puede aumentar el costo.

2. Alternar parejas de medicamentos concretos

Lo ideal: es la utilizacin de un solo agente con espectro de actividad estrecho contra el patgeno,
porque
Disminuye la afectacin de la flora normal
Disminuye el riesgo de aparicin de organismos nosocomiales (propios de los hospitales, ms

agresivos) resistentes.
Evita la potencial toxicidad de los regmenes multidrogas.
Reduce los costos.
3. Busqueda de nuevos frmacos.
Nanobiotecnlogos rusos lograron sintetizar pptidos antibacterianos que hacen frente,
exitosamente, a los bacilos y a los estafilococos. Es ms, no surge resistencia de estos
microorganismos a los nuevos antibiticos, adems de que es nfima la toxicidad de los
frmacos.
Son ya conocidas las sustancias antimicrobianas en la forma de molculas de decenas de aminocidos. Sin
embargo, los cientficos los emplearon por primera vez para la creacin de medicamentos. Resulta que, tales
pptidos antibacterianos son txicos. Con una concentracin elevada es posible daar no solo a las bacterias
sino al organismo.
El nanobiotecnlogo gor Elisiev, junto con cientficos del Instituto de Medicina Experimental de San
Petersburgo, cre protenas de propiedades antibacterianas que poseen una toxicidad mnima. Estas
protenas son casi invulnerables, por lo que para las bacterias es muy difcil oponerles resistencia, ya que las
protenas creadas destruyen rpidamente el envoltorio de las bacterias.
En otras palabras, los viejos antibiticos, que a menudo resultan ser demasiado dbiles y no pueden combatir
rpidamente una enfermedad, han comenzado a ser sustituidos por nuevos, ms eficaces.

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[Las siguientes imgenes reflejan el mtodo de dirigir estos pptidos antimicrobianos, pero en la noticia que
aparece no te habla de ellos]

Resistencia por mutacin puntual

Resistencia por conjugacin de un de

resistencia

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