A los metabolitos que ocupan lugares de interseccin en el metabolismo se les

denomina metabolitos de encrucijada. La glucosa-6-fosfato es uno de esos metabolitos de

encrucijada. Una vez que el alimento ha sido digerido y los monosacridos viajan por el torrente
sanguneo, deben ser transportados al interior de todas las clulas de todos los tejidos del
cuerpo. Una vez que esto ha sucedido la mayora de ellos sern transformados y fosforilados
para producir glucosa-6-fosfato, que puede ser inmediatamente utilizada en la va anaerobia de
la gluclisis o bien una vez abastecida la demanda energtica o los esqueletos de carbono para
fabricar otras biomolculas, la glucosa-6-fosfato puede ser utilizada para almacenar unidades
de glucosa en el glucgeno que se almacena principalmente en el hgado y msculo
esqueltico.

Produccin y liberacin de glucosa por el

hgado.
Efecto metablico
metabolismo
Enzima blanco

Efecto en el

Degradacin de
glucgeno en hgado
fosforilasa

glucgeno glucosa
glucgeno

de la glucosa

sntesis de glucgeno
Menos glucosa
almacenada
glucgeno sintasa como
glucgeno en hgado
Gluclisis en hgado

Menos glucosa usada

como
fosfofructocinasa-I
combustible en el
hgado

Gluconeognesis
aminocidos
fructosa-1,6-bifosfatasa
en hgado
glicerol
glucosa
oxaloacetato
piruvato cinasa
Movilizacin de cidos
Menos glucosa usada
como
grasos (tejido adiposo
combustible en el
hgado y msculo triacilglicerol lipasa)
Figura: efecto del glucagon en diferentes rganos y enzimas blanco.
Las flechas hacia arriba indican estimulacin del proceso o la enzima; hacia abajo significan
inhibicin

Asimilacin de glucosa por las clulas y almacenamiento como triacilglicridos y

glucgeno.
Efecto metablico

Enzima blanco
Asimilacin en
Transportador de glucosa
msculo

Asimilacin en
Glucocinasa
msculo

Sntesis de glucgeno
Glucgeno sintasa
hgado y msculo

Degradacin de glucgeno
Glucgeno fosforilasa
hgado y msculo

Gluclisis, produccin de acetil-CoA

Fosfofructocinasa-I
hgado y msculo
Complejo de la piruvato deshidrogenasa

Sntesis de cidos grasos

Acetil-CoA carboxilasa
hgado
Sntesis de triacilglicridos
Lipoprotena lipasa
tejido adiposo

Figura: efecto de la insulina en diferentes rganos y enzimas blanco.

Las flechas hacia arriba indican estimulacin del proceso o la enzima; hacia abajo significan
inhibicin.

Los carbohidratos son las biomolculas ms abundantes en la tierra. Por ejemplo, cada
ao la fotosntesis transforma ms de 100 x 10 9 toneladas de CO2 y H2O en celulosa y otros
derivados. Algunos carbohidratos como el azcar comn y el almidn, son parte de la dieta en
muchas partes del mundo y su oxidacin es un proceso central a partir del cual deriva mucha
energa en clulas de organismos no fotosintticos. Los carbohidratos polimricos insolubles
en agua funcionan como elementos de proteccin y estructura de la pared celular de plantas y
bacterias y de los tejidos conectivos de los animales. Otros polmeros de carbohidratos lubrican
las articulaciones del esqueleto de los vertebrados y participan en el reconocimiento y adhesin
de las clulas. Otros polmeros de carbohidratos ms complicados se encuentran unidos de
manera covalente a lpidos y protenas actuando como seales que determinan la localizacin
intracelular o el destino metablico de estas biomolculas hbridas denominadas
genricamente como glicoconjugados.

Dentro de los procesos econmico-industriales de inters humano sobre los

carbohidratos, se encuentra el proceso de la fermentacin. En este proceso que incluye todos
los pasos de la gluclisis, aunque el producto final piruvato- es degradado a etanol y CO 2. La
fermentacin es un proceso que se lleva a cabo en ausencia de oxgeno por levaduras y otros
microorganismos, que son utilizados en la industria para fermentar los carbohidratos derivados
de mltiples fuentes. Es as como se obtienen mltiples productos como cerveza, vino y tequila.

El glucgeno, reserva de glucosa en los animales, se almacena principalmente en

hgado y msculo. Su conversin a glucosa-6-fosfato (G6P) para entrar a la gluclisis, es
catalizada en parte por la glucgeno fosforilasa; el camino inverso i.e. la sntesis, se lleva a
cabo por la glucgeno sintasa. Estas enzimas estn reguladas recprocamente a travs de
reacciones de fosforilacin/defosforilacin, este proceso es el resultado de una cascada de
fosforilacin que responde a los niveles de glucagon y epinefrina a travs del CAMP.

1. Hexocinasa y Glucocinasa
2. Fosfoglucosa isomerasa
3. fosfofructocinasa
4. Aldolasa
5. Triosafosfato isomerasa

La formacin de la glucosa-6-fosfato es catalizada por dos isoenzimas: la hexocinasa y

la glucocinasa.

1.-

A.- Hexocinasa:

Puede fosforilar a otras hexosas. Est presente en todas las clulas Es inhibida por la
GLUCOSA-6-FOSFATO que es el producto de la reaccin que cataliza.,
La hexocinasa cambia su conformacin al unirse a las hexosas. Este cambio se
produce gracias a que la enzima tiene dos dominios unidos por medio de otro ms que acta
como una bisagra. La enzima en su conformacin abierta permite que la hexosa se acomode
en su sitio activo; cuando esto ha sucedido, la enzima adquiere su conformacin cerrada en la
cual se desplaza a las molculas de agua y disminuye la energa de solvatacin, necesaria
para que se lleve a cabo la reaccin de fosforilacin.
B.- Glucocinasa
La glucocinasa es ms abundante en el hgado. Tiene una K m de 10 mM que es ms
alta que las concentraciones fisiolgicas de glucosa. Esto permite que en condiciones de
hiperglicemia, despus de alimentarse, cuando hay muchas hexosas en el torrente sanguneo,

simultneamente funcionen ambas enzimas, lo cual favorece la rpida entrada de glucosa a las
clulas. La glucocinasa es inhibida por la FRUCTOSA-6-FOSFATO en vez de por GLUCOSA-6FOSFATO como en el caso de la hexocinasa.
La reaccin que catalizan ambas enzimas (glucocinasa y hexocinasa), es irreversible
en condiciones intracelulares y tiene un cambio en energa libre de 1.6 kJ/mol.

La fosfoglucosa isomerasa (PGI), anteriormente llamada GLUCOSA-6-FOSFATO

isomerasa es una enzima que cataliza la isomerizacin de una aldosa, la GLUCOSA-6FOSFATO en una cetosa, la FRUCTOSA-6-FOSFATO; la reaccin se lleva a cabo en cinco
pasos para los cuales la enzima necesita abrir el anillo de la glucosa, para hacer la
isomerizacin y posteriormente cerrarlo convirtindola el gructosa-6-fosfato.
1.-Formacin del complejo ES.
2.- Un cido, presumiblemente el grupo -amino de una lisina de la enzima, cataliza la apertura
del anillo.
3.- Una base, presumiblemente el carboxilato de un cido glutmico de la enzima, retira el
protn cido del C2 del azcar para formar un intermediario cis-enediolato (este protn es cido
porque ocupa una posicin con respecto al carbonilo).
4.- El protn es reemplazado en C1. Los protones retirados por bases, son lbiles y se
recambian rpidamente con el solvente.
5.- El anillo se cierra para formar el producto, el cual es posteriormente liberado.
La PGI requiere de Mg 2+ para su actividad y el pH ptimo para la reaccin es de 6.7 y
9.3 por lo que se sugiere que los aminocidos que participan en la misma son una histidina y
una lisina respectivamente; el cambio en energa libre de esta reaccin es de 1.7kJ/mol, por
esto es fcilmente reversible.

Fosfofructocinasa-1
La fosfofructocinasa-1 (PFK-1) es una enzima que cataliza la fosforilacin de la
FRUCTOSA-6-FOSFATO con gasto de una molcula de ATP. Esta reaccin tiene un cambio en
la energa libre de 23.8kJ/mol, por lo que es irreversible. La PFK-1 es la principal enzima
reguladora de la gluclisis; sus factores reguladores son:
Inhibidores:
Cuando las necesidades energticas del organismo son bajas, por ejemplo en estado
de reposo, existen concentraciones elevadas de ATP y de cido ctrico, estas molculas
reconocen sitios alostricos en la PFK-1. Al unirse a ellos ocasionan una menor afinidad de la
PFK-1 por la FRUCTOSA-6-FOSFATO lo cual resulta en una inhibicin de la actividad
enzimtica.
Estimuladores:
Cuando las necesidades energticas del organismo son elevadas, en el ejercicio o bien
en condiciones de ayuno prolongado, se generan las altas concentraciones de ADP, de AMP y
de FRUCTOSA-1,6-BISFOSFATO, lo cual ocasiona el incremento en la actividad de la PFK-1.

La formacin de fructosa-2,6-difosfato (F2,6P), es catalizada por la fosfofructocinasa-2

(PFK-2). Esta enzima es regulada a travs de reacciones de fosforilacin, cuando la PFK-2
est fosforilada es capaz de hidrolizar a la F2,6P y cuando no lo est, funciona en la direccin
inversa, la sintetiza. Cuando los receptores especficos para el glucagon son ocupados por
sta hexosa difosforilada, se produce AMPc, sustancia que estimula a la protena cinasa; sta
ltima fosforila a varias enzimas, dentro de ellas se encuentra la PFK-2.
FRUCTOSA-6-FOSFATO+ ATP
F2,6P + H2O

F2,6P+ ADP
(sntesis)
fosfofructocinasa-2

FRUCTOSA-6-FOSFATO + Pi
(hidrlisis)

La aldolasa cataliza la transformacin de la FRUCTOSA-1,6-BISFOSFATO en

gliceraldehdo-3-fosfato y dihidroxiacetona-3-fosfato. Las aldolasas se clasifican segn su
mecanismo de reaccin en:
Clase I:
Estn presentes en animales y plantas, catalizan la formacin de las dos triosas fosfato
en los siguientes pasos:
1.- formacin del complejo enzima-sustrato (ES).
sitio activo de la
aldolasa

CH2OPO3

H2N

(CH2)4

ENZIMA

residuo de lisina

Figura: representacin de la formacin del complejo ES en la aldolasa de clase I

2.-Se provoca la reaccin del carbonilo de la FRUCTOSA-1,6-BISFOSFATO con el grupo amino de la lisina en el sitio activo para formar un intermediario cation imina (-C==N +H-(CH2)4)
que es una base de Shift protonada
3.- Ruptura del enlace entre los C3 y C4 del azcar, con la formacin de una enamina y la
liberacin del GLICERALDEHDO-3-FOSFATO.
4.- Protonacin de la enamina para formar su tautmero, el cation imina (base de Shift
protonada).
5.- Hidrlisis del cation imina, liberacin DIHIDROXIACETONAFOSFATO y regeneracin de la
enzima libre.

Clase II:
Slo se encuentran en algas, hongos y algunas bacterias. Estabilizan al grupo
carbonilo por medio de Zn 2+ o Fe2+ en vez de hacerlo por medio de una base de Shift como en
la clase I.
Ambas aldolasas presentan cinticas de tipo uni-bi y son estereoespecficas.
El porqu existen dos tipos de aldolasa es una observacin controversial, pues se supone que
la gluclisis es una ruta ancestral. Originalmente se propuso que las de clase I se encontraban
slo en organismos avanzados y que las de clase II, son un tipo de enzimas primitivas, menos
eficientes que las de clase I. Pero, la descripcin de que en algunos organismos se expresan
simultneamente las dos clases, sugiere que ambos tipos son igualmente antiguos;
probablemente este hecho sea un ejemplo de la antigua redundancia metablica que la
evolucin ha eliminado de la mayora de los organismos contemporneos

La triosafosfato isomerasa (TPI o TIM) cataliza la interconversin del

GLICERALDEHDO-3-FOSFATO y DIHIDROXIACETONAFOSFATO. Esta reaccin es la quinta
de la gluclisis y la ltima de primera etapa de este proceso. La TPI, se ha encontrado en todas
las especies analizadas hasta la fecha, y actualmente se conoce la secuencia de aminocidos
de la TPI de 50 especies y la estructura tridimensional de 8 de ellas (pollo, levadura
Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, E. coli , Bacillus stearothermophilus, Plasmodium
falciparium, E. histolytica y humano).
Slo uno de los productos de la catlisis de la aldolasa, el GLICERALDEHDO-3FOSFATO, contina a lo largo de la va glucoltica. La DIHIDROXIACETONAFOSFATO y el
GLICERALDEHDO-3-FOSFATO son ismeros cetosa-aldosa exactamente igual que la
FRUCTOSA-6-FOSFATO y la
GLUCOSA-6-FOSFATO. Las concentraciones de
GLICERALDEHDO-3-FOSFATO y DIHIDROXIACETONAFOSFATO se mantienen en la clula
en una relacin de (GLICERALDEHDO-3-FOSFATO / DIHIDROXIACETONAFOSFATO) de
0.473, existe ms DIHIDROXIACETONAFOSFATO que GLICERALDEHDO-3-FOSFATO; sin
embargo, debido a que el GLICERALDEHDO-3-FOSFATO se consume en la siguiente
reaccin, la mayor parte de la DIHIDROXIACETONAFOSFATO se transforma en
GLICERALDEHDO-3-FOSFATO. La interconversin de GLICERALDEHDO-3-FOSFATO y
DIHIDROXIACETONAFOSFATO probablemente ocurra va un intermediario enediol o
enediolato, en analoga a la reaccin catalizada por la PGI en el paso dos de la va:

Gliceraldehdo-3-Fosfato
Dihidroxiacetona

Intermediario Enediol

o Enediolato
fosfato

Figura: representacin de la reaccin catalizada por la triosafosfato isomerasa.

Los nmeros verdes sealan el nmero de tomo
Evidencias para soportar la anterior observacin provienen de resultados obtenidos al
utilizar anlogos del estado de transicin, el fosfoglucohidroximato y el 2-fosfoglicolato, que son
compuestos estables cuyas estructuras geomtricas recuerdan la del intermediario enediol o
enediolato propuesto:

Fosfoglucohidroximato

2-fosfoglicolato

Figura: anlogos del estado de transicin de la reaccin catalizada por la TIM

La TPI cataliza las reacciones uniendo ms fuertemente al estado de transicin que al
substrato; de hecho el 2-fosfoglicolato se une de 100 a 155 veces con ms afinidad a la TPI
que el GLICERALDEHDO-3-FOSFATO o DIHIDROXIACETONAFOSFATO. De ah que estas
molculas sean fuertes inhibidores de la enzima
Por otra parte se, conocen los rearreglos estructurales que se llevan a cabo en
presencia de diversos anlogos del substrato. Todas las enzimas analizadas, son dmeros
formados por dos cadenas idnticas de aproximadamente 27 kDa. Los parmetros cinticos de
la enzima proveniente de diferentes especies son semejantes. No se han descrito cofactores o
reguladores alostricos, ni se ha detectado cooperatividad entre las subunidades y la actividad
de los sitios es independiente. Por medio de tcnicas de ingeniera gentica, se construy una
variante monmerica a partir de la TPI de Trypanosoma brucei, a la cual se ha denominado
como monoTIM. Esta molcula, es capaz de unir al substrato y catalizar la reaccin, sin
embargo, manifiesta una disminucin de 20 veces con respecto a la enzima nativa en la K m y
de 1000 veces en la kcat.
La triosafosfato isomerasa, es una enzima muy eficiente, la velocidad con que cataliza
la isomerizacin del GLICERALDEHDO-3-FOSFATO es entre 10 8 y 109 veces mayor que en
ausencia de sta. La relacin kcat/Km para el GLICERALDEHDO-3-FOSFATO como
substrato (La relacin kcat/Km representa la constante de velocidad aparente de segundo
orden (v) de la reaccin entre enzima libre ( E ) y substrato libre (S); v = (kcat/Km) ES)
es de 108 M-1s-1; ste valor es comparable al calculado (108-1010 M -1s-1) para reacciones
bimoleculares en solucin controladas por difusin. La reaccin catalizada por la TPI se lleva a
cabo gracias a la formacin de un intermediario cis-enediol(ato). Mecansticamente, la funcin
biolgica de esta enzima, consiste en disminuir las barreras energticas que limitan la
velocidad de protonacin y deprotonacin de los substratos y/o estabilizar el intermediario cisenediol(ato). El perfil de energa libre de la reaccin que cataliza, muestra que el estado de
transicin ms alto es precisamente la unin del GLICERALDEHDO-3-FOSFATO a la enzima.
Gracias al estudio de los parmetros catalticos de la TPI variando la viscosidad del solvente,

se ha confirmado por una parte, que la unin del GLICERALDEHDO-3-FOSFATO a la enzima

est limitada por la frecuencia de encuentros entre las dos especies, y por otra, que no se
debe a los ajustes conformacionales que la protena desarrolla con el solvente para la catlisis
o a los rearreglos qumicos entre substrato y enzima. Por tanto, la TPI es un catalizador
"perfecto"; cualquier aumento en la velocidad de los pasos catalticos no tendra efecto en la
velocidad de la reaccin. En varias enzimas (Gracias al estudios cinticos variando la
viscosidad del solvente, se ha demostrado que la velocidad cataltica de las siguientes
enzimas: fosforilasa b, peroxidasa de rbano, quimotripsina, -lactamasa, anhidrasa
carbnica, invertasa, acetilcolinesterasa, y adenosina desaminasa; est limitada por la difusin
del substrato hacia la enzima.), se ha encontrado que la difusin del substrato, es el paso
limitante para la catlisis. De tal forma, que el recambio entre el agua de hidratacin y el
solvente, permite que la velocidad con la que la capa de hidratacin de la protena se reajuste
durante la catlisis, y no sea un paso limitante durante los rearreglos qumicos entre la protena
y el substrato. Estos hechos han permitido la evolucin de mecanismos biolgicos altamente
eficientes.
El mecanismo propuesto para la actividad cataltica de la triosafosfato isomerasa a
partir de la combinacin de estudios cinticos, genticos y estructurales, en particular, la
similitud de los valores obtenidos para la dependencia de la catlisis de la TPI con el pH
respecto a los observados para la PGI, que denotan la presencia de dos pKs uno de 6.5 y otro
de 9.5, involucra un mecanismo cido-base. Pero, los estudios de la variacin de la catlisis
con el pH no permiten por si mismos interpretar cules son los residuos especficos que
participan en la reaccin; para resolver la identidad de los mismos, se han utilizado compuestos
de marcaje de afinidad, tanto la bromohydroxiacetona fosfato como el glicidol fosfato:

Bromohydroxiacetona fosfato

Glicidol fosfato

Figura: compuestos de marcaje de afinidad para la catlisis de la TIM.

que inactivan a la TPI formando steres con el glutmico 165, cuyo grupo carboxilato, segn lo
indican estudios de cristalografa de rayos X, est idealmente situado para remover el protn
del C2 del substrato. De hecho, el remplazo del Glu 165 por Asp, lo cual aleja el grupo
carboxilato en 1 resulta en una reduccin de la actividad cataltica de la enzima alrededor de
1000 veces.
Los estudios cristalogrficos de la enzima de levadura en complejo con
fosfoglucohidroximato, indican que la histidina 95 est unida por dos puentes de hidrgeno al la
DIHIDROXIACETONAFOSFATO, lo cual permite la protonacin del oxgeno carbonlico del
GLICERALDEHDO-3-FOSFATO:

Figura: representacin de los enlaces que se forman en el sitio activo de la TIM durante
la catlisis.
Por otra parte, estudios de resonancia magntica nuclear (NRM) indican que esta His
95 est en su forma neutral imidazol en vez de la forma imidazolio protonada. Pero, cmo un
grupo imidazol N3-H, el cual tiene un pK altamente bsico de 14.0, protona a un oxgeno
carboxlico que cuando se protona tiene un pK muy cido de 0? Y del mismo modo, cmo
puede el carboxilato del Glu 165 (pK 6.5) sustraer el protn del C2 (pK17) del
GLICERALDEHDO-3-FOSFATO?. Una posible explicacin es que el intercambio del protn
est facilitado por la formacin de una intensa barrera de puentes de hidrgeno. Esta inusual
asociacin tan fuerte (-40 a 80kJmol-1 vs 12 a -30kJmol-1 para puentes de hidrgeno
normales) se forma cuando los pKs del donador y aceptor son muy parecidos.
Al convertir el GLICERALDEHDO-3-FOSFATO al intermediario enediol (o enediolato),
el pK de la forma protonada de su oxgeno carbonlico, el cual se transforma en un hidroxilo, se
incrementa a 14.0, lo cual concuerda con la neutralidad de la His 95. La resultante barrera de
puentes de hidrgeno entre este grupo hidroxilo y la His 95 permite que la cadena lateral
imidazol protone el tomo de oxgeno. De la misma forma, el oxgeno carbonlico es protonado,
el pK del protn del C2 se reduce a 7.0, valor cercano al pK del carboxilato del Glu 165.
Aparentemente, la reaccin ocurre va un simultneo retiro del protn por el Glu 165 y una
protonacin por la His 95. La intensa barrera de puentes de Hidrgeno postulada para explicar
la formacin del estado de transicin, no el complejo de Michaelis, entre el Glu 165 y el C2-H y
entre la His 95 y el oxgeno carbonlico se piensa provee la estabilizacin necesaria para
catalizar la reaccin. La cadena lateral cargada positivamente de la Lys 12, la cual es
probablemente responsable del pK de 9.5 observado en el trazo de catlisis vs pH de la TPI
(junto con el macrodipolo formado por dos -hlices una de ellas modifica el pK de la His 95,
mientras que el macrodipolo positivo de la otra hlice permite la unin del fosfato del substrato),
es la que estabiliza electrostticamente al estado de transicin cargado negativamente. La
conversin del enediol(ato) a DIHIDROXIACETONAFOSFATO es facilitada por la formacin de
la intensa barrera de puentes de Hidrgeno en el estado de transicin.

La estructura secundaria de la TPI, est formada por ocho hebras que alternan con
una (a veces dos) hlice(s). La cadena se pliega de manera que las ocho hebras forman una
hoja paralela central semejante a un barril (el ngulo entre las hebras y el eje del barril es
de 35 0). Las hlices que unen a las hebras se empaquetan en forma paralela a la direccin
de las hebras. El sitio activo se encuentra en uno de los extremos del barril, en la cavidad
formada por las asas contiguas a las hebras . Este patrn topolgico se ha encontrado en
ms de 20 enzimas con actividades catalticas diversas (aproximadamente el 10 % de las
enzimas cristalizadas). No es claro si este patrn de plegamiento refleja las caractersticas de
un ancestro comn, o si el barril presenta una topologa estable a la cual han convergido
diferentes enzimas
Existe una presin evolutiva continua para modificar la cadena polipeptdica; las
regiones conservadas son aquellas que han resistido esta presin a lo largo de la evolucin. En
protenas homlogas, las regiones que se encuentran en el sitio activo estn conservadas, as
como los residuos directamente involucrados en la qumica de la reaccin. Este es el caso de la
TPI, los aminocidos conservados son aquellos que participan directamente en la qumica de la
reaccin, o se localizan en la vecindad del sitio activo. A pesar de las diferencias en los
aminocidos de la interfase, la topologa del barril y la geometra de la asociacin de los
monmeros en el dmero, es semejante en diferentes especies.
La comparacin de la estructura de la TPI con el complejo TPI-fosfohidroximato revela
que cuando el substrato de une una asa (loop) conservado de 10 residuos se cierra (se conoce
como asa cataltica o flexible), sobre el sitio activo como una bisagra, lo que implica el
movimiento de cadenas laterales en 7.0. Un segmento de cuatro residuos de esta asa hace
puentes de hidrgeno con el fosfato del substrato. Retirar mutagnicamente a estos 4 residuos
no deforma significativamente a la enzima, por tanto la unin del substrato no es severamente
afectada, pero la velocidad de la catlisis se reduce 10 5 veces y une muy dbilmente al
fosfoglucohidroximato. Evidentemente, el hecho de que el asa se cierre sobre el sitio activo,
preferencialmente estabiliza la reaccin para la formacin del estado de transicin.
El cierre del asa tambin provee un ejemplo de control estereoelectrnico de la enzima
en la reaccin. En solucin el intermediario enediol se descompone para formar el compuesto
txico metilglioxal por la eliminacin del fosfato del C3:

Metil glioxal
Figura: representacin de la molcula de metil glioxal.
En la superficie de la enzima, esta reaccin no sucede porque el grupo fosfato es
detenido por el asa flexible en el plano del intermediario enediol, posicin que es desfavorable
para la eliminacin del fosfato. En una mutante que carece del asa flexible, el enediol tiene
posibilidades de salir del sitio cataltico, aproximadamente el 85% es liberado, el cual
rpidamente se convierte en metil glioxal y fosfato.
A la fecha, no es todava claro el por qu la TPI slo es activa como dmero, ya que los
aminocidos involucrados en la catlisis se encuentran contenidos en el monmero. Es
probable que las interacciones en la interfase sean necesarias para mantener a los
aminocidos catalticos en una posicin adecuada, o para mantener la estabilidad de la

estructura de barril; de hecho, un nmero de aminocidos de la interfase se encuentran

conservados. Sin embargo, algunos miembros de la familia de protenas / son barriles
activos como monmeros.
Glucogeno
El glucgeno es el polisacrido de reserva energtica en los animales que se almacena en el
hgado (10% de la masa heptica) y en los msculos (1% de la masa muscular) de los
vertebrados. Adems, puede encontrarse pequeas cantiades de glucgeno en ciertas clulas
gliales del cerebro.
Gracias a la capacidad de almacenamiento de glucgeno, se reducen al mximo los cambios
de presin osmtica que la glucosa libre podra ocasionar tanto en el interior de la clula como
en el medio extracelular.
Cuando el organismo o la clula requieren de un aporte energtico de emergencia, como en los
casos de tensin o alerta, el glucgeno se degrada nuevamente a glucosa, disponible para el
metabolismo energtico.
En el hgado la conversin de glucosa almacenada en forma de glucgeno a glucosa libre en
sangre, est regulada por la hormona glucagn y adrenalina. El glucgeno heptico es la
principal fuente de glucosa sangunea sobre todo entre comidas. El glucgeno contenido en los
msculos es para energa que se consume durante la contraccin muscular.
El glucgeno se almacena dentro de vacuolas en el citoplasma de las clulas que lo utilizan
para la gluclisis. Estas vacuolas contienen las enzimas necesarias para la hidrlisis de
glucgeno a glucosa.
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/sintesis%20glucogeno.html
enfermedades
Existe un grupo de enfermedades heredadas genticalmente que resultan en un
defecto en alguna enzima requerida para la sntesis o degradacin del glucgeno. Esto resulta
en a.- formacin de un glucgeno con una estructura anormal o b.- la acumulacin de grandes
cantidades de glucgeno normal en tejidos especficos. Una enzima particular puede ser
defectuosa en un solo tejido como el hgado o el defecto puede ser mas generalizado,
afectando msculo, rin, intestino y miocardio. La severidad de las enfermedades va desde
fatal en la infancia hasta desordenes medianos que no afectan tan drsticamente la vida. A
continuacin se mencionan las enfermedades mas frecuentes relacionadas con la sntesis y
degradacin del glucgeno:
Enfermedad de Von Gierke (Tipo I): deficiencia en la glucgeno-6-fosfatasa. Sintomatologa:
afecta hgado, rin e intestino. Presenta hipoglicemia severa en el ayuno. Acumulacin de
lpidos en el hgado, hepatomegalia. Hiperlactiacidemia e hiperuricemia. La estructura del
glucgeno es normal, pero se acumula en cantidades significativamente mayores que las
normales.
Enfermedad de Pompe (Tipo II): deficiencia en la alfa-glucgeno oxidasa lisosomal. Presenta
concentraciones excesivas de glucgeno en vacuolas citoplsmias a anormales. Niveles de
glucosa en sangre normales. Cardiomegalia severa. Usualmente ocurre una muerte temprana.
Estructura del glucgeno normal.
Sndrome de McArdle (Tipo V): la afeccin es en el msculo esqueltico, el metabolismo en el
hgado es normal. Debilidad temporal, no hay salida de lactato al torrente sanguneo durante
ejercicio atenuante. Desarrollo mental normal. Mioglobinuria en edad adulta. Elevados niveles
de glucgeno con estructura normal en el msculo.

Para que la vida de los mamferos pueda llevarse a cabo adecuadamente, es necesario
un aporte constante de glucosa al torrente sanguneo. La glucosa es la fuente de energa
preferida por el cerebro y por clulas que carecen de mitocondrias o tienen muy pocas como
los eritrocitos maduros. La glucosa es tambin esencial como fuente de energa para el
msculo en ejercicio en donde es el sustrato de la gluclisis en el citoplasma anaerobio.
La glucosa sangunea puede ser obtenida a travs de tres fuentes: la dieta, la
degradacin del glucgeno y la sntesis de novo de la misma (gluconeognesis):
Glucosa
Utilizada 40 - Glucosa de la dieta
(gramos/hora)

20 Glucgeno
Gluconeognesis
10
0
40

16

horas

24

20
Das

Figura: fuentes de abastecimiento de la glucosa.

La ingesta de la glucosa y de sus precursores como el almidn, monosacridos
(fructosa) y disacridos (lactosa, manosa y sacarosa), es espordica y no siempre es un
aporte directo de glucosa a la sangre (pinsese por ejemplo en la intolerancia a la lactosa). Por
el contraste, la gluconeognesis puede proveer una sntesis continua de glucosa, pero tiende a
ser lenta en la respuesta a la falta de glucosa sangunea. Este problema se ha resuelto al
almacenar grandes cantidades de glucosa que pueden ser mobilizadas de manera muy rpida,
a partir del glucgeno. La ausencia de glucosa en la dieta provoca la rpida liberacin a partir
del glucgeno previamente almacenado en el hgado. De manera similar el glucgeno
almacenado en el msculo es degradado durante el ejercicio. Cuando disminuye la reserva de
glucgeno, algunos tejidoss sintetizan glucosa de novo utilizando los esqueletos de los
aminocidos de las protenas como fuente de Carbono para hacer glucosa.
Estructura y funcin del glucgeno.
Los almacenes principales de glucgeno en el cuerpo de los mamferos son el msculo
esqueltico y el hgado; en muchas otras clulas se almacena en muy bajas cantidades. La
misin del glucgeno en el msculo es proveer de la fuente necesaria para producir ATP
durante la contraccin muscular. Por el contrario el glucgeno heptico se utiliza para mantener
los niveles de glucosa sangunea en los eventos tempranos del ayuno.
Cantidades de glucgeno en hgado y msculo.
Aproximadamente 1 2 % del peso hmedo del msculo en reposo de un adulto bien
alimentado, unos 400 g, son glucgeno; por el contrario, en el hgado, unos 100 g son
glucgeno, entre el 6 y 8 % de su peso hmedo. No se sabe la razn metablica para estas

cantidades, pero en algunas enfermedades del almacenamiento de glucosa, la cantidad en

hgado y msculo puede ser significativamente mayor.
Estructura del glucgeno
Una molcula de glucgeno puede llegar a tener una masa molecular de 10 8 Da. Estas
molculas estn almacenadas en grnulos citoplsmicos que contienen la mayora de las
enzimas necesarias para su sntesis y degradacin. El glucgeno es una cadena ramificada de
exclusivamente alfa-D-glucosa.
Los enlaces glucosdicos principales son alfa-1,4, cada intervalo de entre 8 y 10
residuos enlazados en esta forma, hay uno enlazado en posicin alfa-1,6, a esto se le conoce
como una ramificacin.

Figura: representacin de la estructura del glucgeno.

Fluctuaciones de las reservas de glucgeno.
El glucgeno del hgado se incrementa durante el estado de buena alimentacin y es
disminuido durante el ayuno. El glucgeno muscular no es afectado por periodos pequeos de
ayuno (algunos das) y es solo moderadamente disminuido en periodos de ayuno prolongados
(semanas). El glucgeno del msculo es regenerado como respuesta a periodos de consumo
de energa elevados, por ejemplo despus del ejercicio. La sntesis y degradacin del
glucgeno son procesos concomitantes, las diferencias entre las velocidades de estos
procesos determina los niveles de glucgeno almacenado durante situaciones metablicas
especficas.

Debido a la importancia de mantener los niveles de glucosa sangunea, la sntesis y

degradacin del glucgeno estn muy reguladas. En el hgado la sntesis de glucgeno se
acelera durante periodos en los que el individuo est bien alimentado, por tanto la degradacin
del glucgeno se acelera en periodos de ayuno. En el msculo la degradacin del glucgeno
ocurre durante el ejercicio activo y la acumulacin comienza en cuanto el msculo entra en
reposos. La regulacin de la sntesis y degradacin ocurre a dos niveles: 1.- la glucgeno
sintasa y glucgeno fosforilasa son controladas alostericamente. 2.- control hormonal.

La glucgeno sintasa y la glucgeno fosforilasa responden a los niveles de metabolitos

y energa necesarias por las clulas. Es lgico por tanto que la sntesis del glucgeno es
estimulada cuando los niveles de energa y substratos son elevados por el contrario, la
degradacin del glucgeno procede en condiciones de demanda energtica.
1.- Regulacin de la sntesis de glucgeno y la degradacin
alimentacin:

en estado de buena

En el estado de buena alimentacin, la glucgeno sintasa es activada alostericamente

por glucosa-6-fosfato cuando est presente en concentraciones elevadas. Por el contrario, la
glucgeno fosforilasa es inhibida alostericamente por la glucosa-6-fosfato, as como por el ATP.
En el hgado la glucosa tambin sirve como un inhibidor alostrico de la glucosa fosforilasa:
glucgeno
glucosa glucosa-6-fosfato -

glucosa-6-fosfato
ATP glucgeno
glucgeno
fosforilasa
sintasa
msculo

Ca2+ +
AMP +
glucosa-1-fosfato

Figura: representacin de los factores que regulan la sntesis y degradacin del

glucgeno.
2.- activacin de la degradacin del glucgeno en msculo por calcio y AMP:
a.- efecto del Ca2+:
Durante la contraccin muscular existe una urgencia por ATP, esta energa es aportada
por la glucosa almacenada en el glucgeno. Los impulsos nerviosos causan despolarizacin de
la membrana, lo cual a su vez promueve la liberacin de Ca 2+ desde el retculo sarcoplsmico.

El Ca2+ se une a una subunidad de la fosforilasa cinasa, la calmodulina la activa sin la

necesidad de su fosforilacin (accin catalizada por la protena cinasa). Cuando el msculo se
relaja, el Ca2+ retorna al retculo sarcoplsmico y la fosforilasa cinasa se torna inactiva. Esta
enzima
ima, la fosforilasa cinasa, tiene su mxima actividad cuando est fosforilada y con
Ca2+ unido.
b.- efecto del AMP:
La glucgeno fosforilasa tipo b muscular es activa en presencia de elevados niveles de
AMP, lo que ocurre en el msculo en condiciones de anoxia extrema y alto consumo de ATP. El
AMP se une a la forma inactiva de la glucgeno fosforilasa b causando su inactivacin sin
fosforilacin.

La enzima a regular en la sntesis de glucgeno es la glucosa sintasa. Esta enzima

existe en dos formas, la forma a no est fosforilada y es ms activa que la forma b que est
fosforilada y es inactiva. La glucosa sintasa es convertida a la forma b (y por tanto inactivada)
por varias fosforilaciones en la enzima, el grado de inactivacin es proporcional a el grado de
fosforilacin. El proceso es catalizado por la protena cinasa que es dependiente de cAMP. La
unin de glucagon o epinefrina a los receptores de la membrana de los hepatocitos o de la
epinefrina a los receptores del msculo resulta en la activacin de la adenilato ciclasa
(mediada por una protena G). Esta enzima cataliza la sntesis de cAMP, el cual activa a la
protena cinasa dependiente de cAMP. La protena cinasa entonces fosforila y por tanto inactiva
a la glucgeno sintasa. La glucgeno sintasa b puede ser retransformarse a la forma a por la
protena fosfatasa 1, la cual remueve hidrolticamente los grupos fosfato.

La unin de hormonas como el glucagon o la epinefrina a los receptores, es la seal

para degradar glucgeno, esto puede deberse a la necesidad de mantener los niveles de
glucosa sangunea o para proveer energa al msculo en ejercicio.
1.- activacin de la protena cinasa: la unin de glucagon o epinefrinaa sus receptores
especficos en la membrana resulta en la activacin cAMP dependiente de la protena cinasa.
Esta enzima es un tetrmero que tiene dos subunidades regulatorias (denominadas R) y dos
subunidades catalticas (denominadas C). el cAMsP se une al dmero regulador (RR), liberando
a las subunidades catalticas quien ahora estn activas.
2.- activacin de la fosforilasa cinasa. La protena cinasa dependiente de cAMP activa,
fosforila la forma inactiva de la fosforilasa cinasa, lo que resulta en su activacin. La enzima
fosforilada puede ser inactivada por la hidrlisis de los grupos fosfato por la protena
cinasa
1.
3.- activacin de la glucgeno fosforilasa la glucgeno fosfoilasa existe en dos formas,
una inactiva denominada b y una activa denominada a. La fosforilasa cinasa activa fosforila a la
glucgeno fosforilasa b, convirtindola en la forma a, lo cual da inicio a la ruptura del
glucgeno. La fosforilasa b se regenera por la hidrlisis de sus fosfatos por la protena
fosfatasa 1. Cuando la glucosa est unida a la glucgeno foforilasa a, es la seal para que se
detenga la degradacin del gluc, el complejo es un mejor substrato para la protena fosfatasa
1. Adems cuando la glucgeno fosforilasa b est unida a la glucosa, no puede ser activada
alostricamente por AMP.

El glucgeno, reserva de glucosa en los animales, se almacena principalmente en

hgado y msculo. Su conversin a glucosa-6-fosfato (G6P) para entrar a la gluclisis, es
catalizada en parte por la glucgeno fosforilasa; el camino inverso i.e. la sntesis, se lleva a
cabo por la glucgeno sintasa. Estas enzimas estn reguladas recprocamente a travs de
reacciones de fosforilacin/defosforilacin, este proceso es el resultado de una cascada de
fosforilacin que responde a los niveles de glucagon y epinefrina a travs del CAMP.

Aspectos Histricos de la gluclisis

Cambio en la
energa
Libre estndar
( G )
substratos

enzima

productos

Glucosa + MgATP2-

Hexocinasa

glucosa-6-fosfato
+
MgADP2- + H+

glucosa-6-fosfato

fructosa-6-fosfato
+
MgATP2-

fructosa-6-fosfato
glucosa-6-fosfato isomerasa

fosfofructocinasa-1

dihidroxiacetona fosfato
+
gliceraldehdo-3-fosfato

fructosa-1,6-bisfosfato
aldolasa

dihidroxiacetona fosfato

gliceraldehdo-3-fosfato
1,3-bisfosfoglicerato
+

+
NAD+ + Pi
gliceraldehdo-3-fosfato
NADH + H+
deshidrogenasa
1,3-bisfosfoglicerato
+
MgADP2-

3-fosfoglicerato

2-fosfoglicerato

gliceraldehdo-3-fosfato
triosafosfato isomerasa

fosfoglicerato cinasa

fosfoglicerato mutasa

-4.0
+0.4

fructosa-1,6-bisfosfato
+
-3.4
MgADP2- + H+

kcal mol-1*

+5.73
+1.83

+1.5

3-fosfoglicerato
+
ATP

4.5

2-fosfoglicerato

+1.06

fosfoenolpiruvato

+0.44

enolasa
10

fosfoenolpiruvato
+
MgADP2- + H+

piruvato cinasa

+
H2O
piruvato + ATP

-7.5

Tabla : las reacciones de la gluclisis.

Los nmeros de la izquierda sealan el nmero del paso en la va. * 1cal mol -1 = 4.184
J mol-1
Para ir a la descarboxilacin del piruvato
Los intermediarios producidos en las reacciones de la gluclisis se utilizan en varios
procesos biosintticos incluyendo la produccin de serina y fosfolpidos de membrana.
La gluclisis se divide en dos partes
Para ir a informacin sobre la enzima deshidrogenasa lctica
Regresa a el hgado es la central metablica del cuerpo

La fosfofructocinasa-1 (PFK1), es el punto principal de control, es una enzima

alostrica sensible a las concentraciones de AMP, ADP, ATP, citrato e isocitrato (intermediarios
del ciclo de Krebs). Cuando las condiciones energticas son elevadas, i.e. en el reposo cuando
hay grandes concentraciones de ATP y citrato, la PFK1 es inhibida y se acumula fructosa-6fosfato y glucosa-6-fosfato, disminuyendo la concentracin de fructosa-1,6-bisfosfato. Al
aumentar las concentraciones de ADP o AMP, i.e. en condiciones de demanda energtica, la
PFK1 se activa por lo cual las concentraciones de fructosa-6-fosfato y glucosa-6-fosfato
disminuyen, por el contrario, las concentraciones de fructosa-1,6-bisfosfato, gliceraldehdo-3fosfato y dihidroxiacetonafosfato aumentan. Existen otros eventos de regulacin de la gluclisis
como son la fosforilacin de la glucosa y la transformacin de piruvato a acetil-CoA, lactato o
glicerolfosfato, tambin la concentracin de piridin nucletidos.

Efecto Pasteur

En condiciones anaerobias, en los tejidos animales, la degradacin de la glucosa en la

va glucoltica produce lactato. En presencia de O 2, la desaparicin de glucosa as como la
aparicin de lactato son mucho menores. El O2 inhibe la gluclisis. La presencia de esta
molcula permite que en el ciclo de Krebs se liberen 18 veces mas molculas de ATP por
glucosa oxidada que en la gluclisis. . La presencia de ADP y O 2 activan la respiracin y la
fosforilacin oxidativa. Al incrementar la concentracin de ATP y citrato, la actividad de la PFK1
disminuye.

Ciclo del cido lctico o de Cori.

Este ciclo consta de una serie de reacciones para la regeneracin de glucosa en el

hgado a partir del lactato muscular generado en condiciones anaerbicas, por ejemplo en el
ejercicio:
1.- Formacin de glucgeno heptico por glucognesis o gluconeognesis.
2.- El glucgeno heptico se degrada en glucosa gracias a la glucosa-6-fosfatotasa, la
diferencia de concentracin en el interior y exterior del hepaticito ocasiona que la glucosa salga
al exterior celular; esta glucosa sangunea por accin de la glucocinasa y hexocinasa, se
transforma en glucosa-6-fosfato.
3.- La glucosa sangunea es captada por el msculo para formar glucgeno.
4.- La gluclisis muscular produce lactato que puede tener varios destinos, formacin de
glucgeno, la entrada al ciclo de Krebs, en donde se oxida completamente a CO 2 y H2O para
abastecer de energa al organismo, alguna porcin es excretada en la orina y el sudor (existe
una acumulacin del metabolito en condiciones de ejercicio prolongado), la mayor parte de la
concentraciones captada por el hgado donde se regenera la glucosa-6-fosfato para formar
glucgeno heptico.

El glucgeno es el polisacrido de reserva energtica en los animales que se almacena en el

hgado (10% de la masa heptica) y en los msculos (1% de la masa muscular) de los
vertebrados. Adems, puede encontrarse pequeas cantiades de glucgeno en ciertas clulas
gliales del cerebro.
Gracias a la capacidad de almacenamiento de glucgeno, se reducen al mximo los cambios
de presin osmtica que la glucosa libre podra ocasionar tanto en el interior de la clula como
en el medio extracelular.
Cuando el organismo o la clula requieren de un aporte energtico de emergencia, como en los
casos de tensin o alerta, el glucgeno se degrada nuevamente a glucosa, disponible para el
metabolismo energtico.
En el hgado la conversin de glucosa almacenada en forma de glucgeno a glucosa libre en
sangre, est regulada por la hormona glucagn y adrenalina. El glucgeno heptico es la
principal fuente de glucosa sangunea sobre todo entre comidas. El glucgeno contenido en los
msculos es para energa que se consume durante la contraccin muscular.
El glucgeno se almacena dentro de vacuolas en el citoplasma de las clulas que lo utilizan
para la gluclisis. Estas vacuolas contienen las enzimas necesarias para la hidrlisis de
glucgeno a glucosa.

Los precursores gluconeognicos son molculas que pueden dar origen a una sntesis
neta de glucosa. Estas molculas incluyen a todos los intermediarios de la gluconeognesis y
del Ciclo del cido ctrico. El glicerol, lactato y alfa-cetocidos obtenidos de la desaminacin de
los aminocidos glucognicos son los precursores ms importantes para la formacin de
glucosa.

Precursores gluconeognicos.

Compuestos cetognicos

Regulacin de la gluconeognesis

Glucagon
Disponibilidad de substrato