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INTRODUCCION.
La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir
pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas
cientficas.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin
tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico,
que habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas para los diferentes
volmenes de pipeteo.
Identifique las Caracteristicas:
1. Botn pulsador
2. Tornillo del botn pulsador
3. Rueda dentada de graduacin del volumen.
4. Cono de la pipeta.
5. Expulsor de punta.
6. Puntas o tips descartables
7. rack para tips
Volumen
0,5 l - 10 l
0,5 l - 20 l
10 l -100 l
20 l -200 l
100 l -1000 l
Tipo de punta
Amarillas o blancas
Amarillas o blancas
Amarillas
Amarillas
Azules o blancas
y Figura
a. Presione el botn
superior hasta el primer
tope positivo,
b. Sostenga la pipeta
verticalmente, sumerja
la punta en el lquido.
La profundidad a la que
la punta se sumerge en
la muestra depende del
modelo; en general
menos de 6 mm
c. Suelte el botn
despacio y fcilmente
para aspirar, .Espere
unos
segundos
y
entonces retire la punta
del lquido.
d. Ubique la punta de la
pipeta en la pared
interior del vaso en un
ngulo de 10 a 40
grados. Presione el
botn
suavemente
hasta el primer tope..
Espere unos segundo.
e. Presione el botn
hasta el segundo tope
para expeler cualquier
remanente de lquido.
Mantenga
el
botn
presionado hasta el
final, remueva la pipeta
por arrastre sobre la
superficie del vaso.
f. Libere el botn
g. Expulse la punta
presionando el botn de
eyeccin
x2=199,6000
x3= 199,4900
x4= 199,7000
Exactitud (E%)
Desviacin estndar
S=Z.
(Xi X)2
n-1
Coeficiente de variacin
Objetivo:
Usar correctamente las micropipetas y calcular su exactitud
Material
Micropipetas de 20, 200 y 1000 ul
Tips Azules (1000 ul)
Tips Amarillos (200 ul)
Tips Blancos (20 ul)
Gradillas con 5 Tubos de vidrio 5ml
Agua Destilada
Buffer Laemmli
HCl 1 N
PARTE EXPERIMENTAL
1. EXACTITUD (E%) Y EL COEFICIENTE DE VARIACIN (CV%)
Para cada micropipeta revisar el porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de
variacin (CV%) en todo el rango usando al menos dos volmenes diferentes; por
ejemplo:
Procedimiento:
1. Seleccionar la micropipeta y las puntas adecuadas.
2. Colocar un trozo de papel parafilm (2x2 cm) en la balanza y tarar a cero.
3. Tomar el volumen de agua destilada con la micropipeta y dispnselo sobre el
parafilm. Anote el peso del agua aadido. La densidad del agua es 1 g/mL a 25 C,
por lo tanto un volumen de 1 mL corresponde aproximadamente a una masa de 1 g,
300 L a 0.3 g, 200 L a 0.2 g, 60 L a 0.06 g, 10 L a 0.01 g y 3 L a 0.003 g.
4. Repita el procedimiento cinco veces para cada volumen.
Para la micropipeta P1000 revisar los volmenes de 300 L y 1000 L.
Volumen (ul) Peso (mg) Volumen (ul) Peso (mg)
1000
300
1000
300
1000
300
1000
300
1000
300
Dibuje la micropipeta utilizada, anote sus caractersticas y Hacer los clculos para
encontrar el porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de variacin (CV%). Cul
es el estado de su Micropipeta?
60
200
60
200
60
200
60
200
60
200
Dibuje la micropipeta utilizada, anote sus caractersticas y Hacer los clculos para
encontrar el porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de variacin (CV%). Cul
es el estado de su Micropipeta?
10
10
10
10
10
Dibuje la micropipeta utilizada, anote sus caractersticas y Hacer los clculos para
encontrar el porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de variacin (CV%). Cul
es el estado de su Micropipeta?
2. ERRORES EN LA MEDICIN.
Otro de los factores que influyen en el manejo es la forma correcta de pipetear.
Procedimiento:
1)
2)
3)
4)
5)