INTRODUCCION:

Cromatografa lquida

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y

La Cromatografa lquida,BIOQUIMICA
tambin conocida como Cromatografa de

lquidos, es una tcnica de separacin y no debe confundirse con una

CURSO: QUIMICA ORGANICA I
tcnica cuantitativa o cualitativa de anlisis. Es una de las tcnicas
analticas ampliamente utilizadas, la cual permite separar fsicamente
II B
losCICLO:
distintos componentes
de una solucin por la adsorcin selectiva de
los constituyentes de una mezcla. En toda cromatografa existe un
contacto entre dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y
una mvil (fase mvil) que fluye permanente durante el anlisis, y que
TITULO:
INFORME DE LABORATORIO (CROMATOGRAFIA)
en este caso es un lquido o mezcla de varios lquidos. La fase
estacionaria por su parte puede ser almina, slice o resinas de
intercambio inico que se encuentran disponibles en el mercado. Los
intercambiadores inicos son matrices slidas que contienen sitios
DOCENTE: FELIPE RUBIO
activos (tambin llamados grupos ionognicos) con carga electrosttica
(positiva o negativa). De esta forma, la muestra queda retenida sobre el
soporte slido por afinidad electrosttica. Dependiendo de la relacin
carga/tamao unos constituyentes de la mezcla sern retenidos con
ALUMNOS:
mayor
fuerza sobre el soporte slido que otros, es decir sern
adsorbidos, lo que provocar su separacin. Las sustancias que
LOPEZ ZEGARRA NILDA
permanecen ms tiempo libre en la fase senil, avanzan ms
RISCO RUBIO JOSE
rpidamente
con el fluir de
la misma y las que quedan ms unidas a la
BUSTAMANTE
FERNANDEZ
fase estacionaria
o retenidas avanzan menos y por tanto tardarn ms
ELIZABETH
en salir
o fluir.
es el principio
LUISste
JUAREZ
ROXANAfundamental de la cromatografa. Un

LEIVA
ALCANTARA
MAGALY
ejemplo notable es la cromatografa
de intercambio inico. Las columnas

AZABACHE
ALVITES
MIGUEL
ms utilizadas son las de slice.
ANGULO

RODRIGUEZ

RUBEN

== Mtodos de cromatografa lquida ==

Mtodo

Abreviat
Mecanismo predominante
ura

slido Lquido, o
de adsorcin

LSC

Adsorcin sobre la superficie

Lquido

LLC

Reparto entre fases lquidas, una mvil y

la otra estacionaria.

Fase enlazada

BPC

Reparto y / o adsorcin entre las fases

mvil y enlazada.

--

Uso de la estructura de ligantes

inmovilizados para unir bioselectivamente
la protena deseada.

Afinidad

Seleccin de un mtodo de cromatografa lquida

El conocimiento de la estructura molecular de los componentes de la
muestra puede ser muy til en la seleccin de un mtodo de
cromatografa lquida. Una gua muy general para la seleccin de un
mtodo se da a continuacin.
La cromatografa de absorcin opera mejor en la separacin por clases
de compuestos o para la separacin de compuestos isomtricos. La
tcnica de cromatografa lquido lquido es mejor para la separacin de
homlogos. Los grupos funcionales que son capaces de formar enlaces
de hidrgeno fuertes se retienen mucho en cromatografa de adsorcin,
sin embargo la (Lquido lquido) proporciona una alternativa para la
separacin de estos compuestos, estas sern las muestras que tienen
polaridad media.

OBJETIVOS:
Revisar los conceptos realizados con la polaridad y
separacin por cromatografa.
Aprender a separar los componentes coloreados de una
mescla.
Conocer los criterios de seleccin de fases considerando las
diferencias de polaridad de compuestos de una mescla.
Separar los componentes coloreados de un extracto obtenido
de una fuente vegetal.
Comprender los principios generales de la separacin de la
cromatografa.

 Determinar los factores y elementos necesarios para llevar a

cabo el procedimiento de la cromatografa en las plantas
como proceso de separacin de los elementos fsicos y
qumicos que forman a stas y a las sustancias como "fase
mvil" (acetona).

RESULTADOS:
1.-

4.-

7.-

2.-

3.-

5.-

6.-

8.-

VERDE

9.-

10.-

EL AMARILLO
CLOROFILA
BETACAROTENO

MENOS
AMARILLO
SALTOFILA

MATERIAL Y REACTIVOS
-MATERIAL
Mortero
Pipeta Pasteur
Placa Petri
Papel filtro de transito rpido y transito lento
Espinaca
Embudo
Alcohol
-REACTIVOS

Etanol

PROCEDIMIENTO:

1.- primero procedemos a deshojar la espinaca sin la nervadura, luego

agregamos alcohol y 2 ml de etanol en el mortero, procedemos a
colocar la espinaca hasta obtener una solucin.
2.- Despus de haber obtenido nuestra solucin procedemos a filtrar
usando el embudo y el papel de filtro de transito rpido en una placa
Petri.
3.- doblamos ambos filtros (transito rpido y lento) por la mitad luego
colocamos ambos filtros en dentro de la placa Petri uno frente al otro
en posicin paralela uno frente al otro para ver la velocidad de las
molculas conforme van avanzando por el papel filtro.
4.- luego usando un capilar procedemos a agregar nuestra solucin raya
a raya controlamos 5 minutos y luego nuevamente volvemos a repetir
el mismo procedimiento 5 veces en cada papel filtro (transito lento y
rpido).

DISCUSIN:
Durante la prctica de laboratorio dada se puede inferir que el proceso
de la mezcla qumica analizada disuelta en el disolvente y que al colocar
una gota de la misma sobre la tira de papel filtro y una en la placa de
slica gel, se observaron resultados como una pigmentacin amarilla
Gliricidiasepium posea lutena (carotenoide) que es un compuesto
qumico que contienen muchas plantas en sus hojas cabe resaltar que la
lutena tiene propiedades antioxidantes y reducen la sensibilidad de la
piel frente a los rayos UV, adems se presenci un color verde en la
cromatografa el cual era clorofila b la cual es un pigmento accesorio
presente en vegetales y otras clulas fotosintticas complejas; absorbe
luz de una longitud de onda diferente y transfiere la energa a la clorofila
A, que se encarga de transformarla en energa qumica y est
compuesta principalmente por carbono, hidrogeno y una molcula de
magnesio. Se puede inferir que se realiz de manera correcta la prctica
de laboratorio ya que se obtuvo la coloracin de la cromatografa
esperada comparado con los resultado.

CONCLUSION:

Esta practica desarrollada en el laboratorio nos ensea tcnicas para

separar sustancias a partir de una mezcla compleja, las separaciones se
fundamentan en aprovechar las propiedades fsicas o qumicas el cual
encontramos a diferentes tcnicas de prueba en el cual nos podemos
dar cuenta de cmo interactan determinadas sustancias De tal manera
aumente el grado de conocimiento en el campo profesional como son
piln mortero, papel de filtro. Observamos claramente la separacin el
amarillo betacaroteno el menos amarillo saltofila y el color verde la
clorofila en el papel filtro

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: ABBOTT, David y ANDREWS, R. S. I.

1.-ABBOTT, David y ANDREWS, R. S. Introduccin a la Cromatografa. 3ra. Edicin.
Coleccin Exedra. Editorial Alhambra. Espaa. 1973.
2.-BAUER, Karin ; GROS, Leo and SAUER, Werner. Thin Layer Chromatography: An
Introduction. Hthig Verlag. Germany. 1991
3.- BROWNING, D. R. Cromatografa-Toray-Masson. Espaa. 1971.
4.-DOMINGUEZ, Xorge Alejandro. Cromatografa en Papel y en Capa Delgada. Serie
de Qumica. Organizacin de los Estados Americanos. N 16. U.S.A. 1975
5. - GTZ, Wolfgang; SACHS, Albert and WIMMER, Hans. Thin-Layer
Chromatography. Gustav Fisher. Verlag. Germany. 1980.