Curvas de Titulacin de Aminocidos

Curva de titulacin de aminocidos

Amino acid titration curve

Garca Gmez Jenyffer Paola * Cubides Rincn Ingrid Marisol * Guaquida Pire Alejandra
Fecha de entrega del informe: 29-04-2014
Resumen: Se titularon con hidrxido de sodio 0,1N y cido clorhdrico 0,1N los siguientes
aminocidos: glicina, lisina y acido glutmico. En donde se pretende hallar el punto isoelctrico,
adems del pKa del cido y el pK del amino de cada uno de los aminocidos, con el fin de construir
las curvas de titulacin de cada aminocido.
Palabras clave: pH, acidez
Abstract: Titrated with 0.1 N sodium hydroxide and the following amino acids 0.1N hydrochloric
acid: glutamic acid, glycine and lysine. Where it is intended to find the isoelectric point, the pKa of
the acid addition and the pK of the amine of individual amino acids in order to build the titration
curves for each amino acid.
Key Words: pH, acidity, pk.
Introduccin
En el caso de los aminocidos, las curvas de
titulacin proporcionan la siguiente informacin (o
bien se puede deducir a partir de las mismas):
- Medida del pK de los grupos ionizables: se
localizan en el punto medio de la zona tampn.
- Regiones de capacidad tampn: mesetas donde
se localizan los pKs; dichas regiones se
encuentran en el intervalo pK 1 unidad de pH.
- pI: se localiza en el intervalo de viraje.
- Formas ionizables del aminocido en cada rango
de pH.
- Carga elctrica del aminocido en cada rango
del pH
- Solubilidad relativa del aminocido en cada
rango de pH
[]

[]

J P Garca Gmez
Ciencias Bsicas
Escuela de qumica
Programa: qumica
E-mails: efen08@hotmail.com
I M Cubides Rincn
Ciencias Bsicas
Escuela de qumica
Programa: qumica
E-mails:marisgirl_9207@hotmail.com

[] B A Guaquidad Pire
Ciencias Bsicas
Escuela de qumica
Programa: qumica
E-mails: alejita_guaquida@yahoo.es

La titulacin se realiza con el fin de determinar la

cantidad de cido dbil titulando con base fuerte, y
cantidad de base dbil titulando con cido fuerte.,
esto sucede porque el cido o la base ha
neutralizado la cantidad de base o cido,
respectivamente, presente.
Al graficar el pH frente a la cantidad de titulante
aadido, obtenemos la curva de titulacin.
La relacin cuantitativa entre pH, la accin
tamponante de una mezcla de cido dbil con su
base conjugada, y el pKa del cido dbil viene
dada por la ecuacin de Henderson-Hasselbach:

Resultados y discusin
TITULACION ACIDO GLUTAMICO
PH

ml NaOH PH
4,00 1
4,35
4,79
5,53
8,52
9,87
10,30
10,81

ml HCl

2,96

2
3
4
5
6
7
8

2,74
2,56
2,35
2,22
2,0
1,95
1,8

2
3
4
5
6
7
8

Curvas de Titulacin de Aminocidos

1,3
1,4

Este aminocido presenta tres grupos ionizables:

el grupo -carboxilo, el grupo carboxilo de la
cadena lateral y el grupo -amino. Por lo tanto, la
adicin de equivalentes de base produce la
liberacin secuencial de protones al medio, y
estos equilibrios estn determinados por sus
correspondientes constantes: el grupo -carboxilo
(pKC), el grupo carboxilo de la cadena lateral
(pKR) y el grupo amino (pKN)
TITULACION DE LA GLICINA
ml
NaOH

PH

ml HCl

0,3
0,1 8,55
0,2
8,77
0,3
8,85
0,4
8,92
0,5
9,09
0,6
9,16
0,7
9,25
0,8
9,32
0,9
9,39
1,0
9,47
1,1
9,55
1,2
9,62

PH
3,98

0,6
0,9
1,2
1,5
1,8
2,1
2,4

3,03
2,83
2,71
2,58
2,45
2,32
2,22

9,72
9,89

A pH cido la Gly se encuentra como un cido

diprtico, ya que tanto el grupo amino como el
carboxilo se encuentran protonados, es decir, a
pH = 1, el 100% de las molculas de aminocido
se encuentran en forma de catin. Al ir aadiendo
equivalentes de base, el grupo -carboxilo (COOH) se disocia, cediendo protones al medio y
transformndose en un grupo carboxilato; este
equilibrio viene descrito por el pKC. Cuando pH =
pKC, la glicina se encuentra como 50% cation +
50% zwitterion. Por lo tanto, el par -COOH/-COOpuede servir como un tampn amortiguador en la
regin de pH cerca del valor Pkc.
TITULACION DE LISINA
ml NaOH
0,3
0,6
0,9
1,2

PH

ml HCl

PH

8,34

0,3

3,90

8,91

0,6

3,08

9,27

0,9

2,9

9,66

1,2

2,55

Curvas de Titulacin de Aminocidos

1,5 10,1

1,5

2,33

1,8

2,29

mientras que la lisina tiene el mayor grado de

basicidad.
Determinacin de pKb, pKa y punto isoelctrico:
Para la determinacin del pKa se obtiene
mediante la interpolacin de los puntos medios de
la curva de inflexin que presenta la grfica. Con
los valores obtenidos de pKa y pKb se promedian
para obtener el punto isoelctrico.
ACIDO GLUTMICO
pI= (pKa + pKb)/2
pI= 6,565

pI= (2,32 + 10,81)/2

GLICINA
pI= (pKa + pKb)/2
pI= 6,425

pI= (2,35 + 10,5)/2

LISINA
pI= (pKa + pKb)/2
pI= 6,52

pI= (2,75 + 10,29)/2

pK TEORICOS Y PUNTOS ISOELECTICOS

ACIDO GLUTAMICO
pK1= 2,19 pK2= 9,67
pI= 5,93
GLICINA
pK1= 2,34
pI= 5,96

pK2= 9,5

De acuerdo a las curvas de titulacin se puede

determinar, en el punto medio de la curva,
pH=pKa, de esta forma conociendo la constante
de acidez de los aminocidos evaluados, y
comparando su grado de acidez.

LISINA
pK1= 2,15
pI= 6,41

pK2= 10,67

Decimos que el pK es el pH cuando la

concentracin de cido y su base conjugada son
las mismas, interpolando en la grfica, el punto de
equivalencia, obtuvimos un pK.
pK=-log Kd
Kd=10-pK

Conclusiones

cido
glutmico
Ka=
4,7863*10-3
Kb=
1,5488*10-11

Glicina

Kb=3,1622*10- Kb=5,1286*1011

En esta prctica se puede concluir que por

medio de las curvas de titulacin podemos
conocer y determinar el pKa el pKb y el
punto isoelctrico PI.

Para poder calcular el punto isoelctrico de

los aminocidos en base a la curva de
titulacin que se realiz fue necesario
conocer los pK de los grupos amino y
carboxilo y adems el otro grupo carboxilo
de su cadena lateral.

Lisina

Ka=4,4668*10- Ka=1,7782*103

11

De
acuerdo
con
los
datos
obtenidos
experimentalmente, se observa que el cido
glutmico tiene un mayor grado de acidez;

Curvas de Titulacin de Aminocidos

[1]http://www.buenastareas.com/ensayos/Reconoc
imiento-Sales-Minerales/442145.html
[2]http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recurs
os_informaticos/concurso2001/accesit_4/sales.ht
ml
[3] Laboratorio de Bioqumica: Una Visin
Prctica. German Antonio Giraldo Giraldo, Nelsy
Loango Chamorro, Clara Mara Meja Doria
[4] Manual de Industrias Lcteas. M. Gosta
Bylund, Antonio Lpez Gmez
[5] http://cienciastella.com/sales.html

[6] Pearson, D. 1976. Tcnicas de laboratorio

para el anlisis de alimentos. Ed. Acribia.
Espaa 331pp.
[7] Braverman, J.B.S. 1980. Introduccin a la
bioqumica de los alimentos. 2. Ed. Z. Berk.
Editorial El Manual Moderno. Mxico, 358pp.