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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES

CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS


DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA

MANUAL DE PRACTICAS DEL LABORATORIO CLINICO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

Elaborado: M. V. Z. Marcela Morfn Mata


Dr. Efran Islas Ojeda
Autorizado: Departamento de Clnica Veterinaria

DIRECTORIO:

M. C. Q. RAFAEL URZA MACAS


Rector De la Universidad Autnoma de Aguascalientes

M. en C. JOS DE JESS GUTIRREZ GONZLEZ


Decano del Centro de Ciencias Agropecuarias

C. P. GEORGINA MACIAS MORA


Secretario del Centro de Ciencias Agropecuarias

ING. FRANCISCO JAVIER HERNNDEZ DUEAS


Secretario de Docencia de Pregrado del Centro de Ciencias Agropecuarias

M. V. Z. ENRIQUE GUILLERMO HERNNDEZ AYALA


Secretario de Vinculacin y Difusin del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. ARTURO GERARDO VALDIVIA FLORES


Secretario de Investigacin y Posgrado del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. EFRAN ISLAS OJEDA


Jefe de Departamento de Clnica Veterinaria del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. EFRAN ISLAS OJEDA


Profesor titular de la materia Patologa Diagnstica Veterinaria

M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA


M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ
Profesoras adjuntas del laboratorio de la materia Patologa Diagnstica Veterinaria

ndice
Portada
Directorio
ndice
Introduccin
Competencia a las que contribuye, y su ubicacin dentro del mapa
curricular vigente.
Objetivo general del sistema de prcticas
Habilidades y Actitudes
Nivel de desempeo
Programa del sistema de prcticas
Practicas generales de Seguridad

1
2
3
4
5
6
6
7
8
9

Prctica No. 1 REGLAMENTO DEL LABORATORIO


Prctica No. 2 EQUIPO BASICO DEL LABORATORIO
Prctica No. 3 TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS
Prctica No. 4 PRUEBAS DE DIAGNOSTICO
Sesin 1 COPROPARASITOLOGIA
Sesin 2 HEMATOLOGIA
Sesin 3 URIANALISIS
Sesin 4 SEROLOGIA
Sesin 5 TOXICOLOGIA
Sesin 6 QUIMICA SANGUNEA
Sesin 7 INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA TIROXINA TOTAL
Prctica No. 5 INMUNOFLUORESCENCIA
Prctica No. 6. SEGUIMIENTO DE CASOS CLNICOS

15
20
26
35
44
49
57
65
69
74
77
84
89

INTRODUCCIN
El nombre de la materia que cursars es Patologa Diagnstica Veterinaria, que en realidad quiere
decir Diagnstico Clnico, pues ste es el que t vas a realizar diariamente a lo largo de tu vida.
ste manual ha sido diseado principalmente para ti; que estudias la Medicina Veterinaria; pues
debes dominar un gran nmero de tpicos. An hoy cuando la especializacin est tan difusa, no
hemos llegado a la etapa en que los MVZ, dedicados a la prctica clnica, se especialicen en
ramas como los mdicos humanos.
En consecuencia tanto los que ejercen, como t que estudias, sern llamados a menudo para
considerar o emplear tcnicas de diagnstico de laboratorio con las que pretendemos que te
familiarices, para que elabores un mejor diagnstico de las enfermedades.
Este manual incluye informacin sobre la validez de las tcnicas que emplears, adems de
valores que te ayudarn a la interpretacin de los resultados, as como a comprender el proceso
patolgico de las enfermedades. Estrictamente en la prctica clnica la conformacin del
diagnstico de los problemas que aquejan a los pacientes es muy difcil de hacer y requiere
adems de la combinacin de la historia clnica, el examen fsico general y de las pruebas de
laboratorio, en este curso y con la ayuda de ste manual te familiarizaras para llegar al
diagnstico clnico que te servir para establecer un tratamiento y formular un pronostico.

INTRODUCCIN A LA
MEDICINA VETERINARIA Y
ZOOTECNIA
1

PRODUCCIN DE
FORRAJES

MICROBIOLOGA
VETERINARIA
11

FARMACOLOGA
GENERAL

INFORMTICA APLICADA

PRODUCCIN APCOLA

12

ANATOMA COMPARADA
DE LOS ANIMALES
3 DOMSTICOS I

ANATOMA COMPARADA
DE LOS ANIMALES
8 DOMSTICOS II

ANATOMA TOPOGRFICA
DE LOS ANIMALES
DOMSTICOS
13

CITOLOGA E HISTOLOGA

FISIOLOGA GENERAL

FISIOLOGA VETERINARIA

10

15

FARMACOLOGA
VETERINARIA
17

18

ANLISIS DE DATOS
PRODUCTIVOS Y
SANITARIOS

ENDOCRINOLOGA
VETERINARIA
19

14

ADMINISTRACIN
AGROPECUARIA

BIOQUMICA
5

4
ENF. BACTERIANAS DE
LOS ANIM. DOMSTICOS
16

INMUNOLOGA
VETERINARIA

PATOLOGA GENERAL
VETERINARIA

20

5
ENF. VIRALES DE LOS
ANIM. DOMSTICOS
21

TERAPUTICA MDICO
VETERINARIA
22

PROPEDUTICA MDICO
VETERINARIA
23

ENF. PARASITARIAS DE
LOS ANIM. DOMSTICOS
26

ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD SANIT. DE LA
31 CARNE Y SUS DERIV.

GENTICA Y MEJORAMIENTO ANIMAL

REPRODUCCIN
ASISTIDA

27

32

NUTRICIN DE LOS
ANIMALES DOMSTICOS
24

29

PATOLOGA SISTMICA
VETERINARIA

30

25

BROMATOLOGA

MEDICINA VETERINARIA
PREVENTIVA

CLNICA DE PORCINOS

ZOOTECNIA DE BOVINOS
PRODUCTORES DE
CARNE
46

36

37

ZOOTECNIA DE AVES

33

38

ALIMENTACIN DE LOS
ANIMALES DOMSTICOS
34

39

PATOLOGA
DIAGNSTICA
VETERINARIA

40

35

CLNICA DE AVES

B1

METEOROLOGA
AGRCOLA Y
EDAFOLOGA

CONSERVACIN DE
ALIMENTOS DE ORIGEN
C1
ANIMAL

B2

TALLER DE PROCESAMIENTO DE PRODUCTOS


LCTEOS
C2

AVES NO
CONVENCIONALES
D2

EXTERIORES DE LOS
ANIMALES DOMSTICOS
E1

E2

DIAGNSTICO
IMAGENOLGICO
F1
VETERINARIO

F2

DE APOYO
No.

MEDICINA INTERNA
VETERINARIA

ZOOTECNIA DE OVINOS Y
CAPRINOS

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS
42 EN PORCINOS

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS
51
EN BOVINOS

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS EN AVES
43

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS EN
52
EQUINOS

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS EN
44 PERROS Y GATOS

PRCTICAS CLNICO
ZOOTCNICAS EN
53 OVINOS Y CAPRINOS

FINANZAS
AGROPECUARIAS

MERCADOTECNIA

A3

A4

PRODUCCIN INTENSIVA
DE FORRAJES
B3

MANEJO DE PASTIZALES
B4

TALLER DE PROCESAMIENTO DE PRODUCTOS


CARNICOS
C3

ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD SANITARIA DE
LA LECHE Y P. L.
C4

D4

ANIMALES DE
ZOOLGICO

E4

PREPARACIN Y
JUZGAMIENTO DE
GANADO

FAUNA SILVESTRE

PREPARACIN Y
JUZGAMIENTO DE
MASCOTAS
E3

URGENCIAS Y TERAPIA
INTENSIVA

CIRUGA ORTOPDICA Y
DE TEJIDOS BLANDOS
F4

FUNDAMENTALES

APLICADAS

F3

BSICAS
No.

CLNICA DE EQUINOS
49

50

D3

PERITAJE ZOOTCNICO

ZOOTECNIA DE EQUINOS

41

MAMFEROS NO
CONVENCIONALES

D1

CLAVES :

IRRIGACIN Y
FERTILIZACIN
AGRCOLA

CLNICA DE BOVINOS

48

ZOOTECNIA DE PERROS
Y GATOS

CONTADURA
A2

No.

10
PRCTICAS
PROFESIONALES DE
MVZ
54

47

CLNICA DE PERROS Y
GATOS

ECONOMA PECUARIA
A1

9
ZOOTECNIA DE BOVINOS
PRODUCTORES DE
LECHE
45

TERAPUTICA
QUIRRGICA

TCNICAS QUIRRGICAS
28

8
ZOOTECNIA DE
PORCINOS

No.

ELAB. Y EVAL. DE
PROYECTOS
AGROPECUARIOS
A5

OPTATIVAS
PROFESIONALIZANTES
No.

OBJETIVO GRAL:
Al finalizar el proceso de aprendizaje, el alumno estar capacitado para conocer como
aplicar e interpretar las tcnicas del laboratorio con el fin de integrar un diagnstico.
HABILIDADES
- Aplicar los recursos teraputicos contra los padecimientos de los animales.
- Aplicar tcnicas de bsqueda, organizacin, anlisis e integracin de informacin
relevante en la ciencia animal.
- Detectar las situaciones problemticas para la produccin y la salud animal, generar
soluciones alternativas y sealar la ms conveniente.
- Argumentar sus opiniones respecto a propuestas productivas o sanitarias, ofreciendo una
crtica fundamentada.
- Desarrollar habilidades bsicas para el aprendizaje del idioma ingls (Escuchar, hablar,
leer y escribir), as como para la comprensin de textos de su rea de competencia.

ACTITUDES

- Respetar la vida de los animales tiles al hombre y evitar el sufrimiento innecesario de


los mismos.
- Desarrollar hbitos de estudio orientados a la superacin y actualizacin profesional.

Niveles de Desempeo:
Nivel de Desempeo: 3
Justificacin del nivel propuesto: Se propone un nivel 3 porque el Mdico Veterinario
Zootecnista tiene una gran responsabilidad en el manejo de informacin que obtiene de los
exmenes de laboratorio para llegar al diagnstico preciso de las enfermedades que aquejan
a los animales de compaa y de produccin, teniendo como finalidad un diagnstico
preciso y la aplicacin de un tratamiento adecuado

Nivel 1.- Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere
baja autonoma.
Nivel 2.- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas en
diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo grado
de responsabilidad y autonoma en las decisiones. A menudo requiere colaboracin con otros
y trabajo en equipo.
Nivel 3.- Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su responsabilidad
recurso materiales con los que opera su rea. As como control de recursos financieros para
adquisicin de insumos.
Nivel 4.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que
mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar y
dirigir grupos de trabajo.
Nivel 5.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que
mostrar un alto nivel de creatividad, as como buscar y lograr la cooperacin entre grupos e
individuos que participan en la implantacin de un problema de magnitud institucional.

II. Programa del sistema de prcticas

Tema

Reglamen
to del
laboratorio
Equipo
bsico del
laboratorio
Toma y
Envo de
muestras
Pruebas
de
Diagnsti
co

Sesiones

Especie de aplicacin

Reglamento del laboratorio

No aplica

Sem
a
na
1

Equipo bsico del


laboratorio

No aplica

2 hrs

Toma y Envo de muestras

Todas las especies

2 hrs

2 hrs

2 hrs

4 hrs

2 hrs

2 hrs

2 hrs

6.Qumica Sangunea

2 hrs

7 .Inmunoensayo de la
prueba tiroxina total.
Inmunofluorescencia

10

3 hrs

1.Coproparasitologa
2.Hematologa
3.Urianalisis
4.Serologa
5.Toxicologa

1. Todas las especies


2. Todas las especies
3. Todas las especies
4. Bovinos y Ovinos
5. Alimentos de
origen vegetal y
rganos de animales
postmortem
6. Todas las especies

Tiempo estimado
para la prctica

7. Canideos

Inmunofluorescenc
ia
Seguimiento de
casos
clnicos

Seguimiento de casos
clnicos

Todas las especies

11

3 hrs

Todas las especies

12

Dependiendo de la
prctica a realizar.

III. Prcticas Generales de Seguridad. Reglamentos y procedimientos generales.

Normas mnimas para los laboratorios que trabajan con materiales con actividad
biolgica.
Medidas generales
-

Toda persona que deba ingresar en laboratorios donde se desarrollen tareas que
impliquen el uso de material biolgico debe estar capacitado y entrenado para las
tareas que deba realizar.

Forma parte de la capacitacin la lectura y comprensin de estas normas, como as


tambin su aceptacin y compromiso de cumplimiento expresado por escrito.

El Responsable de Laboratorio debe restringir el ingreso al lugar de trabajo a


aquellas personas cuyas tareas lo justifiquen y que hayan sido capacitadas e
informadas de los riesgos a los que est sometida con su ingreso.

De acuerdo al equipamiento y al tipo de tareas que realice, cada laboratorio


elaborar un Plan de Contingencia que indique como proceder frente a
determinados accidentes: "Si se vuelca un tubo en la mesa, proceder....", "Si se
rompe un Erlenmeyer en el agitador, entonces...", etc. El conocimiento de este Plan
tambin debe ser parte de las actividades de capacitacin del grupo.

Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al laboratorio, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

Prcticas generales
-

Estar prohibido pipetear con la boca.

Estar prohibido comer, beber, fumar y aplicarse cosmticos en el rea de trabajo.

Los guantes debern descartarse al alejarse de la mesa de trabajo; no se tocarn con


ellos elementos como picaportes, tapas de recipientes, telfonos, teclados, carpetas.
etc.

Se dispondr de recipiente de descarte en el lugar de trabajo a no ms de 30 cm del


personal.

Las manos debern lavarse luego de trabajar con material viable, luego de sacarse
los guantes y antes de salir del laboratorio.

Prcticas especficas
-

La superficie de trabajo se debern descontaminar por lo menos una vez al da o


luego de cada derrame de material viable, utilizando agentes probadamente
efectivos contra los agentes con que se trabaja.

El trabajo con jeringas deber restringirse tanto como sea posible. Deber usarse un
descartador rgido para agujas y otros elementos punzantes. No reencapuchar las
agujas, pues es una fuente importante de accidentes cort punzantes.

Todos los procedimientos deben ser realizados cuidadosamente para evitar


derrames, salpicaduras y la formacin de aerosoles.

Escurrir las pipetas apoyando la punta en la pared interna del recipiente,


produciendo una presin leve.

No burbujear aire en recipientes abiertos, por ejemplo para lograr una descarga total
de los tips de pipetas automticas.

Al abrir frascos que contengan lquidos hacerlo volcando el tapn hacia el operador,
de tal manera que la apertura se produzca hacia adelante, para evitar que las
salpicaduras salten a la cara de la persona que est trabajando.

Usar en lo posible tubos con tapa a rosca.

10

Los tubos de centrfuga deben estar siempre tapados


-

Si durante la centrifugacin se destapa o rompe algn tubo se debe desinfectar la


centrfuga.

Tener en cuenta el cambio de presin que se produce en los recipientes al sacarlos


de la congeladora y llevarlos a temperatura ambiente.

Normas de seguridad relacionadas con el trabajo


1. No manipular especies animales sin habilitacin para esta tarea.
2. Usar uniformes y materiales de contencin para los animales.
3. Informar inmediatamente las mordeduras, araazos o cualquier trauma fsico.
4. Mantener el orden en el rea de trabajo.
5. No fumar, beber o comer en reas de animales.
6. Separar los materiales defectuosos o en malas condiciones.
7. No colocar materiales en carros de transporte que impidan la visibilidad.
8. Mantener las manos limpias.
9. Los materiales rotos debern ser recogidos con escobilla y para y colocados en
lugares apropiados.

Trabajos de campo
El personal que realiza tareas de campo est expuesto a adquirir infecciones zoonticas.
Para reducir al mnimo los riesgos de contagio se debe conocer el peligro asociado a dichas
actividades y las vas de infeccin.

11

Precauciones generales:
-

No se debe beber, comer o fumar durante el trabajo.

Debe estar vacunado (ej. Antitetnica, rabia, etc.).

Mantener el material de trabajo en perfecto estado de conservacin.

Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes


especiales a tal fin.
Despus de procesar cada animal, todas las gasas, algodones sucios, toallas de papel y
otros desperdicios se colocarn en bolsas especficas para tal fin.
MEDIDAS PREVENTIVAS
LAVADO DE MANOS
Es la medida ms importante y debe ser ejecutada de inmediato, antes y despus del
contacto:
- entre diferentes procedimientos efectuados en el mismo paciente.
-

luego de manipulaciones de instrumentales o equipos usados que hayan tenido

contacto con superficies del ambiente y/o pacientes.


- luego de retirarse los guantes
- desde el trabajador al paciente

Deben ser realizados:


- Luego de manipular sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, materiales e
instrumentos contaminados, tanto se hayan usado o no guantes.

Inmediatamente despus de retirar los guantes del contacto con pacientes.

Entre diferentes tareas y procedimientos.

12

Se debe usar:
- Jabn comn neutro para el lavado de manos de preferencia lquido.
-

Jabn con detergente antimicrobiano o con agentes antispticos en situaciones


especficas (brotes epidmicos, previo a procedimientos invasivos, unidades de alto
riesgo).

TECNICA DEL LAVADO DE MANOS


La tcnica de lavarse las manos tiene la siguiente secuencia:
1. subirse las mangas hasta el codo
2. retirar alhajas y reloj
3. mojarse las manos con agua corriente
4. aplicar 3 a 5 ml de jabn lquido
5. friccionar las superficies de la palma de la manos y puo durante 10 o 15 segundos
6. enjuagar en agua corriente de arrastre
7. secar con toalla de papel
8. cerrar la canilla con la toalla

USO DE LOS GUANTES


Usar guantes limpios, no necesariamente estriles, previo al contacto con: sangre,
fluidos corporales, secreciones, excreciones, mucosas y materiales contaminados.
Para procedimientos invasivos se deben usar guantes de ltex, estriles y luego
descartarlos.

13

USO DE LOS ZAPATOS O BOTAS


-

Usar botas limpias, no estriles para proteger la piel y prevenir la suciedad de la


ropa durante procedimientos en actividades de cuidado que puedan generar
salpicaduras y aerosoles de sangre, fluidos corporales, secreciones y excreciones.

Quitarse las botas o zapatones y colocarlas en un lugar adecuado para su posterior


procesamiento.

Lavar las manos despus de quitarse las botas o zapatones.

PROTECCION CORPORAL
La utilizacin de Batas es una exigencia multifactorial en la atencin a pacientes o
animales.

14

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 1

REGLAMENTO DEL LABORATORIO


TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

15

Esta prctica se realizar en el laboratorio multidisciplinario A del edificio 5; en las


instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la
Universidad Autnoma de Aguascalientes.

Nmero de alumnos por unidad de prctica


Para sta prctica se contar con un nmero no mayor a 20 alumnos por sesin, con la
finalidad de que tengan una correcta asimilacin, del reglamento vigente que rige al
laboratorio.

Propsito especfico de cada prctica.


La persona ser competente para aplicar el reglamento que rige al laboratorio para el uso de
ste, durante la realizacin de las prcticas, cuando conozca el programa de la materia, se
relacione con el reglamento a seguir dentro del laboratorio, y asista cumpliendo las reglas
establecidas.

Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la


prctica.
Al terminar la prctica sern: un profesionista que acate las reglas establecidas del
laboratorio durante su estancia en el mismo a lo largo del semestre.

Normas de seguridad especficas de la prctica.


Para sta prctica se requieren las siguientes normas de seguridad:
Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al laboratorio, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

16

Desarrollo de la prctica:
En sta prctica, nos apoyaremos con esquemas escritos ya establecidos, para el reglamento
oficial de laboratorio, adems de revisar, las normas oficiales que se presentan
anteriormente en el manual de prcticas de patologa diagnstica.
Adems se har mencin de otras reglas como prerrequisito para la entrada al laboratorio
como son:
-

Se tomarn 10 minutos de tolerancia, despus del horario establecido.


Es indispensable llevar la muestra con la cual se va a trabajar.
Utilizar la bata dentro del laboratorio.
Llevar manual de prcticas de patologa diagnstica.

Sistema de evaluacin:

Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.

Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

17

Mtodo de asignacin de calificaciones

CRITERIOS DE EVALUACION.
Lista de Cotejo
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Materia Biolgico.
Resultados.
Interpretacin.
Discusin.
Resolucin del problema.

10%
5%
10 %
10%
10%
30%
25%

NOTA.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

Para Saber Mas


http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/077ssa14.html

18

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

19

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 2

EQUIPO BASICO DEL LABORATORIO


TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

20

Esta prctica se realizar en el laboratorio multidisciplinario A del edificio 5; en las


instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la
Universidad Autnoma de Aguascalientes.
Nmero de alumnos por unidad de prctica
Para sta prctica se contar con un nmero no mayor a 20 alumnos por sesin, con la
finalidad de que tengan una correcta asimilacin, del equipo bsico utilizado en el
laboratorio.
Propsito especfico de cada prctica.
El alumno ser competente para identificar el equipo bsico empleado en un laboratorio
para su correcta utilizacin en procesos posteriores en el diagnstico clnico; cuando
conozca el reglamento de laboratorio, tenga conocimiento de las funciones bsicas de un
laboratorio, acceso a manuales de uso y mantenimiento de equipo utilizando correctamente
el equipo bsico, indumentaria, as como mostrar una conducta apropiada dentro del
laboratorio. Revisar, limpiar y organizar el equipo y el rea de trabajo.

Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la


prctica.
Al terminar la prctica sers un profesionista con la capacidad de conocer, utilizar, y
mantener en buenas condiciones todo el equipo que se utiliza en un laboratorio, as como la
aplicar correctamente el reglamento de ste, a lo largo del semestre.
Normas de seguridad especficas de la prctica.
Para sta prctica se requieren las siguientes normas de seguridad:
Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al laboratorio, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

21

Desarrollo de la prctica:
A continuacin se harn algunas recomendaciones sobre las partes, enfoque y
cuidado del microscopio binocular. Equipo usado con mayor frecuencia dentro del
laboratorio.
El uso y cuidado restante se ver en la prctica respectiva.
EL MICROSCOPIO.
COMPONENTES DEL MICROSCOPIO.- Los componentes del microscopio son
clasificados como de soporte, mecnicos y pticos.
Las partes del soporte sirven para sostener los sistemas ptico y de
iluminacin, las partes mecnicas sirven para proporcionar movimiento y la parte
ptica incluye lo concerniente a la iluminacin (lmparas y condensador) y las lentes
que dan la amplificacin (objetivos y oculares).
OBSERVACIN AL MICROSCOPIO.
El esfuerzo excesivo y la fatiga deben evitarse en la observacin microscpica.
Esto se consigue atendiendo a los siguientes hbitos:
1) El observador deber acostumbrarse a usar los dos ojos.
2) El banco y la mesa deben estar a una altura que le permitan al observador el uso del
microscopio de una manera confortable.
PASOS PARA UN ENFOQUE CORRECTO.
1. Colocar la laminilla en la platina.
2. Encender la lmpara.
3. Subir la platina con el tornillo macromtrico hasta lograr un enfoque claro con el
objetivo de menor aumento (aro amarillo).
4. Pasar al siguiente objetivo (aro azul) afinar la imagen con el tornillo micromtrico.
5. Mover el revolver y colocar en la laminilla una pequea gota de aceite de inmersin,
colocar el objetivo de inmersin (aro blanco).
6. Afinar la imagen con el tornillo micromtrico.
Los pasos 1 a 4 generalmente son usados para observacin de parsitos, hongos y
recuento de glbulos. Los pasos 5 y 6 son utilizados para observacin de bacterias y tejidos.

EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO.


Quien use un microscopio debe tener en consideracin que es un instrumento de
precisin construido para realizar un trabajo preciso.
Los cuidados elementales son los siguientes:
1) Las lentes y el espejo deben estar limpios. El vidrio de las lentes es blando y se raya con
facilidad, por lo tanto, la limpieza de las mismas se har usando solo papel
manufacturado con este propsito.
22

2) Cuando se emplee el objetivo de inmersin y laminilla con cubreobjetos, ambos


debern limpiarse con xilol inmediatamente despus de usarlo para eliminar el aceite de
cedro, humedeciendo ligeramente el papel en este solvente ya que el cemento que
mantiene fijas las lentes es soluble en l y stas pueden safarse de su sitio si se mojan
con exceso.
3) La superficie de friccin de las partes mecnicas deben estar siempre ajustadas y
lubricadas para manejarla con facilidad. Para lubricarlas se usa aceite muy fino o
vaselina lquida, blanda o dura.
4) Las preparaciones deben estar siempre limpias, sobre todo, a nivel de cubreobjetos. Se
pierde visibilidad cuando estn sucias por huellas digitales, aceite de cedro seco o
polvo.
5) Despus de usar el microscopio se limpian las lentes y la platina, posteriormente se tapa
con su funda.
6) En caso de alguna falla ptica o mecnica del microscopio, deber darse aviso
inmediato de ello al instructor.
USO DEL MICROSCOPIO.
1) Observacin de cada una de las partes de los especimenes.
2) Efectuar mediciones de especimenes.

El equipo que se menciona a continuacin es el empleado para un diagnstico:

MICROSCOPIO BINOCULAR
BALANZA GRANATARIA
BALANZA SEMI-ANALITICA
ESPECTOFOTMETRO
ESTUFA BACTERIOLGICA
HORNOS DE SECADO
CENTRIFUGAS
AUTOCLAVE
CONTADOR DE COLONIAS
DESTILADOR
BAO MARA
JARRA DE ANAEROBIOSIS
POTENCIOMETRO
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
MICROSCOPIO ESTEREOSCPICO
AGITADOR MAGNTICO
AGITADOR DE PIPETAS
HEMOGLOBINOMETRO
LAMPARA DE LUZ ULTRAVIOLETA
CAJA DE AGLUTINACIN
HISTOQUINET
MEDONIC (B. H.)
REFRACTOMETRO
LECTOR DE MICROELISA
23

Sistema de evaluacin:

Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.


Evaluaciones intermedias con recomendaciones

Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

Mtodo de asignacin de calificaciones

CRITERIOS DE EVALUACION.
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Material
Lista de Cotejo

10%
60%
30%

NOTA.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

Para Saber Mas


MANUAL DE PATOLOGA CLINICA VETERINARIA.
BENJAMN, M.N. 1984
LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA.
COFFIN. 1977

24

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

25

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 3

TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS


TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

26

Esta prctica se realizar en el rea pecuaria, en las unidades de bovinos, ovinos y caprinos,
as como en la cnicula y de codornices de las instalaciones del Centro de Ciencias
Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la Universidad Autnoma de
Aguascalientes.

Nmero de alumnos por unidad de prctica


Para sta prctica se contar con todo el grupo.
Propsito especfico de cada prctica.
El alumno ser competente para utilizar las tcnicas bsicas de la toma de muestras
para el envo al laboratorio y su anlisis en animales vivos; cuando maneje y sujete
a los animales, poniendo en prctica los conocimientos necesarios de anatoma y
propedutica, evitando situaciones de stress y sufrimiento innecesario; utilizando
como medio de apoyo el laboratorio para poder llegar a un diagnstico y llevando
un registro con el control de muestras.

Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la


prctica.
Al terminar la prctica ser Un profesionista competente para tomar y enviar muestras al
laboratorio, cuidando el bienestar animal, utilizando sta tcnica cada vez que requiera y
durante el semestre de prctica
Normas de seguridad especficas de la prctica.
Para sta prctica se requieren las siguientes normas de seguridad:
Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al rea pecuaria, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada. As como botas limpias de hule.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

Trabajos de campo

27

El personal que realiza tareas de campo est expuesto a adquirir infecciones zoonticas.
Para reducir al mnimo los riesgos de contagio se debe conocer el peligro asociado a dichas
actividades y las vas de infeccin.
Precauciones generales:
-

No se debe beber, comer o fumar durante el trabajo.

Debe estar vacunado (ej. Antitetnica, rabia, etc.).

Mantener el material de trabajo en perfecto estado de conservacin.

Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes


especiales a tal fin.
Despus de procesar cada animal, todas las gasas, algodones sucios, toallas de papel y
otros desperdicios se colocarn en bolsas especficas para tal fin.
MEDIDAS PREVENTIVAS
LAVADO DE MANOS
Es la medida ms importante y debe ser ejecutada de inmediato, antes y despus del
contacto:
- entre diferentes procedimientos efectuados en el mismo paciente.
-

luego de manipulaciones de instrumentales o equipos usados que hayan tenido

contacto con superficies del ambiente y/o pacientes.


- luego de retirarse los guantes
- desde el trabajador al paciente

28

Deben ser realizados:


- Luego de manipular sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, materiales e
instrumentos contaminados, tanto se hayan usado o no guantes.

Inmediatamente despus de retirar los guantes del contacto con pacientes.

Entre diferentes tareas y procedimientos.

Se debe usar:
- Jabn comn neutro para el lavado de manos de preferencia lquido.
-

Jabn con detergente antimicrobiano o con agentes antispticos en situaciones


especficas (brotes epidmicos, previo a procedimientos invasivos, unidades de alto
riesgo).

TECNICA DEL LAVADO DE MANOS


La tcnica de lavarse las manos tiene la siguiente secuencia:
 subirse las mangas hasta el codo
 retirar alhajas y reloj
 mojarse las manos con agua corriente
 aplicar 3 a 5 ml de jabn lquido
 friccionar las superficies de la palma de la manos y puo durante 10 o 15 segundos
 enjuagar en agua corriente de arrastre
 secar con toalla de papel
 cerrar la canilla con la toalla

29

USO DE LOS GUANTES


Usar guantes limpios, no necesariamente estriles, previo al contacto con: sangre,
fluidos corporales, secreciones, excreciones, mucosas y materiales contaminados.
Para procedimientos invasivos se deben usar guantes de ltex, estriles y luego
descartarlos.

Desarrollo de la prctica:

Los servicios del laboratorio de diagnstico pueden ser una valiosa ayuda para el
veterinario, porque podr hacer diagnsticos ms precisos y tendr la informacin necesaria
para establecer medidas teraputicas o preventivas.
La muestra seleccionada deber ser representativa del padecimiento. Se enviarn
varias muestras del mismo lugar procurando muestrear tambin a un animal aparentemente
sano.
La obtencin de resultados significativos en cualquier procedimiento de laboratorio
requiere por un lado, que la muestra sea extrada en forma correcta y por otro que sta sea
preservada de la mejor manera posible para evitar su deterioro antes de llegar al laboratorio.
No es posible tener alguna confianza en resultados obtenidos por el examen de muestras
inadecuadas o mal preservadas.

Para estudios bacteriolgicos se debern tomar las muestras con la mayor limpieza
posible, en recipientes esterilizados o bolsas de plstico (nuevas) y por separado.
Para micologa se har un raspado de piel a profundidad procurando que sea en el
borde de la lesin, con una hoja de bistur estril y un frasco que contenga glicerina al 50
%.
Las muestras de sangre para estudio hematolgico debern de ser recolectadas en
frasco con anticoagulante. Para estudios serolgicos o de qumica sangunea se tomarn sin
adicionar anticoagulante, procurando no agitar los frascos para evitar la hemlisis.
Orina. Para estudio fsico, qumico y de sedimento se recolectarn en frascos
limpios, si se requiere urocultivo se utilizarn frascos estriles.
Coproparasitologa. Estas muestras se toman directamente del recto del animal, en
guantes o bolsas de plstico y deber ser una por cada animal.
Inmunofluorescencia. Se remitir el rgano afectado en un conservador adecuado
(refrigeracin o glicerina al 50 %).

30

IDENTIFICACIN DE LAS MUESTRAS.

a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.

En la identificacin debern incluirse los siguientes datos:


Nombre del propietario.
Direccin y telfono.
Datos del animal.
Datos clnicos.
Tratamiento y respuesta.
Conservador utilizado.
Diagnstico presuntivo.
Estudio solicitado.

ENVIO DE MUESTRAS.
Para el envo de las muestras a un laboratorio de diagnstico, siempre debe tenerse en
cuenta que los materiales son potencialmente infecciosos, por lo que el medio ms eficaz y
seguro para el envo de muestras es el mensajero directo: pero en algunas ocasiones se
requiere del servicio postal, cuando esto ltimo se usa, las muestras deben de reunir los
siguientes requisitos:
- Deben de estar colocados en recipientes dobles (dos cajas o bien una caja y bolsas de
plstico) ya que se mejora el aislamiento y aumenta la resistencia del recipiente.
- Como se mencion anteriormente, las muestras debern de ser enviadas en recipientes
individuales, entre cada bolsa o frascos que contengan las muestras se coloca un
material que amortige los golpes y absorba la humedad (se prefiere el aserrn, pero
puede utilizarse papel o viruta), la caja externa se cierra de tal forma que todas las
esquinas y tapas queden selladas con cinta adhesiva; esto a su vez aumenta la
resistencia del recipiente. Es muy importante que en la envoltura de los paquetes sean
puestos con claridad los siguientes datos: MATERIAL DE FACIL
DESCOMPOSICIN PARA ANALISIS, MENEJESE CON CUIDADO, FRAGIL.
Con el fin de que el material biolgico llegue lo ms pronto posible al laboratorio,
deber considerarse la conveniencia de la forma de envo (area o por carretera, ya sean por
flete en lneas comerciales o vehculos particulares, adems al remitir la muestra, es
conveniente comunicarse inmediatamente al laboratorio, indicando el medio de transporte,
lnea comercial empleada y hora probable de arribo a su destino, as como el nmero de
gua sanitaria).
No es recomendable enviar muestras a los laboratorios de diagnstico los fines de
semana, perodo cercano a vacaciones, das festivos ya que se corre el peligro de que stas
no sean recibidas.

31

Sistema de evaluacin:

Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.


Evaluaciones intermedias con recomendaciones
Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

32

Mtodo de asignacin de calificaciones

CRITERIOS DE EVALUACION.
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Material
Lista de Cotejo

10%
60%
30%

NOTA.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

Para Saber Mas


MANUAL DE PATOLOGA CLINICA VETERINARIA.
BENJAMN, M.N. 1984
LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA.
COFFIN. 1977
DIAGNOSTICO Y PATOLOGIA EN VETERINARIA
COLES. 1989
PATOLOGIA CLINICA Y
PROCEDIMIENTOS DE
DIAGNOSTICO EN VETERINARIA
DOXEY, D.L. 1987
TOXICOLOGIA VETERINARIA
HUMPREYS, D.J. 1990
MANUAL DE DIAGNOSTICO BACTERIOLGICO Y
MICOLOGICO JANG 1974

33

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del rea de trabajo?
Realizaste las tcnicas
conforme a las instrucciones?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?

34

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 4

PRUEBAS DE DIAGNOSTICO
TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

35

Esta prctica se realizar en el laboratorio multidisciplinario A del edificio 5; en las


instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la
Universidad Autnoma de Aguascalientes.

Nmero de alumnos por unidad de prctica


Para sta prctica se contar con un nmero no mayor a 20 alumnos por sesin, con la
finalidad de que tengan una correcta asimilacin, de los diferentes mtodos de diagnostico
en un laboratorio.
Propsito especfico de cada prctica.
El alumno ser competente para
aplicar diferentes tcnicas para el anlisis
coproparasitologico, de sangre, orina, serologa, toxicologa, qumica seca, y micro ELISA
para formar un criterio clnico de diagnstico en la solucin del problema mediante un
tratamiento cuando aplique el reglamento del laboratorio, tenga conocimientos bsicos de
parasitologa, inmunologa, bacteriologa, virologa, fisiologa, toxicologa y patologa as
como conocimientos del manejo de la muestra y del paciente

Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la


prctica.
Al terminar la prctica ser un profesionista con la capacidad de realizar distintos
exmenes de laboratorio as como su interpretacin en los resultados, comprender el
proceso patolgico de las enfermedades, para en un lapso mximo de 72 hrs. llegar a un dx.
final y as poder dar un pronstico, un tratamiento (receta mdica), y sus recomendaciones,
por medio de un reporte escrito.

Normas de seguridad especficas de la prctica.


Para sta prctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al laboratorio, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

36

Prcticas generales
-

Estar prohibido pipetear con la boca.

Estar prohibido comer, beber, fumar y aplicarse cosmticos en el rea de

Los guantes debern descartarse al alejarse de la mesa de trabajo; no se tocarn con

trabajo.

ellos elementos como picaportes, tapas de recipientes, telfonos, teclados, carpetas.


etc.
-

Se dispondr de recipiente de descarte en el lugar de trabajo a no ms de 30 cm del


personal.

Las manos debern lavarse luego de trabajar con material viable, luego de sacarse
los guantes y antes de salir del laboratorio.

Prcticas especficas
-

La superficie de trabajo se debern descontaminar por lo menos una vez al da o


luego de cada derrame de material viable, utilizando agentes probadamente
efectivos contra los agentes con que se trabaja.

El trabajo con jeringas deber restringirse tanto como sea posible. Deber usarse un
descartador rgido para agujas y otros elementos punzantes. No reencapuchar las
agujas, pues es una fuente importante de accidentes cort punzantes.

Todos los procedimientos deben ser realizados cuidadosamente para evitar


derrames, salpicaduras y la formacin de aerosoles.

Escurrir las pipetas apoyando la punta en la pared interna del recipiente,


produciendo una presin leve.

No burbujear aire en recipientes abiertos, por ejemplo para lograr una descarga total
de los tips de pipetas automticas.

Al abrir frascos que contengan lquidos hacerlo volcando el tapn hacia el operador,
de tal manera que la apertura se produzca hacia adelante, para evitar que las
salpicaduras salten a la cara de la persona que est trabajando.

Usar en lo posible tubos con tapa a rosca.

37

Los tubos de centrfuga deben estar siempre tapados


-

Si durante la centrifugacin se destapa o rompe algn tubo se debe desinfectar la


centrfuga.

Tener en cuenta el cambio de presin que se produce en los recipientes al sacarlos


de la congeladora y llevarlos a temperatura ambiente.

Normas de seguridad relacionadas con el trabajo


-

Mantener las manos limpias.

Los materiales rotos debern ser recogidos con escobilla y para y colocados en

lugares apropiados.
Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes
especiales a tal fin.
MEDIDAS PREVENTIVAS
LAVADO DE MANOS
Es la medida ms importante y debe ser ejecutada de inmediato, antes y despus del
contacto:
- entre diferentes procedimientos efectuados en el mismo paciente.
-

luego de manipulaciones de instrumentales o equipos usados que hayan tenido

contacto con superficies del ambiente y/o pacientes.


- luego de retirarse los guantes
- desde el trabajador al paciente
Deben ser realizados:
- Luego de manipular sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, materiales e
instrumentos contaminados, tanto se hayan usado o no guantes.

Inmediatamente despus de retirar los guantes del contacto con pacientes.

38

Entre diferentes tareas y procedimientos.

Se debe usar:
-

Jabn comn neutro para el lavado de manos de preferencia lquido.

Jabn con detergente antimicrobiano o con agentes antispticos en situaciones


especficas (brotes epidmicos, previo a procedimientos invasivos, unidades de alto
riesgo).

TECNICA DEL LAVADO DE MANOS


La tcnica de lavarse las manos tiene la siguiente secuencia:

subirse las mangas hasta el codo

retirar alhajas y reloj

mojarse las manos con agua corriente

aplicar 3 a 5 ml de jabn lquido

friccionar las superficies de la palma de la manos y puo durante 10 o 15 segundos

enjuagar en agua corriente de arrastre

secar con toalla de papel

cerrar la canilla con la toalla

39

Desarrollo de la prctica:
El desarrollo de cada prctica se describe por el nmero de sesin, en el anexo No. 2.

Sistema de evaluacin:

Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.

Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

40

Mtodo de asignacin de calificaciones


CRITERIOS DE EVALUACION.
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Materia Biolgico.
Resultados.
Interpretacin.
Discusin.
Resolucin del problema.
Lista de Cotejo

5%
10 %
10%
10%
30%
25%
10%

CRITERIOS DE EVALUACION PARA LA PRCTICA DE INMUNOENSAYO DE


LA PRUEBA TTIROXINA TOTAL(T4)
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Materia Biolgico.
Resultados.
(Incluir la grfica de calibracin. Resultado obtenido
despus de la interpolacin
Interpretacin.
Discusin.
Cuestionario
Resolucin del problema.
Lista de Cotejo

5%
10 %
15%

10%
15%
15%
20%
10%

NOTA.
Es requisito indispensale entregar Hoja Clnica para derecho a calificacin de
prctica.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

41

Para Saber Mas


LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA.
COFFIN. 1977
DIAGNOSTICO Y PATOLOGIA EN VETERINARIA
COLES. 1989
PATOLOGIA CLINICA Y
PROCEDIMIENTOS DE
DIAGNOSTICO EN VETERINARIA
DOXEY, D.L. 1987
TOXICOLOGIA VETERINARIA
HUMPREYS, D.J. 1990
MANUAL DE DIAGNOSTICO BACTERIOLGICO Y
MICOLOGICO JANG 1974
DIAGNOSTICO CLINICO
VETERINARIO
KELLY. 1988

42

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

43

ANEXO 2.
SESION 1.
COPROPARASITOLOGA
La Parasitologa comprende a todos los organismos que viven a expensas de otros,
sin que los individuos parasitados perciban ningn beneficio. El gran nmero que se conoce
de parsitos y la frecuencia de estos como agentes causales de enfermedades los ponen a la
cabeza como los principales enemigos de la Economa Nacional Pecuaria, no solamente por
la muerte inmediata que pueden producir a los animales, tambin, por las graves prdidas
que ocasionan al actuar constantemente minando la salud de los animales, sea cual sea el
tipo de explotacin; ayudan como vectores a la difusin de otras enfermedades infecciosas,
inhiben medicamentos costosos, exigen la organizacin de Campaas nacionales para
combatirlas, disminuyendo la utilizacin de los alimentos.

44

A continuacin se exponen las tcnicas ms comunes y que se pueden realizar en cualquier


laboratorio con un mnimo de material.
RECOLECCIN Y ENVIO DE HECES.
a) Con el brazo cubierto por un guante, obtener la muestra directamente del animal (20-50
gr. De heces) y poner en recipiente de boca ancha o en bolsas de plstico limpias e
individualmente para cada muestra.
b) Identificar clara e indeleblemente el recipiente.
c) Llevar la muestra al Laboratorio el mismo da que se recolect y si es posible
transportarla bajo refrigeracin (2 C a 4 C).
Existen muchos tipos de soluciones para la elaboracin de esta tcnica como son
solucin de azcar, solucin salina saturada, solucin de sulfato y lugol.
PREPARACIN DE SOLUCIONES.
a) Solucin de azcar
Azcar 1280 gr.
Agua destilada 1000 cc
Formaldehdo 10 % - 25 cc
b) Solucin salina saturada.
Agua destilada- 1000 cc
Agregar sal hasta que ya no se disuelva.
c) Solucin de sulfato de zinc.
ZnSO4 7H2O 331 grs.
Agua destilada 1000 cc
Densidad 1.18 1.22
d)

Lugol.
Agua destilada 100 ml.
Yoduro de potasio
10 g
Cristales de yodo
5g

MATERIAL.
Microscopio estereoscpico / compuesto.
Vasos de plstico de 100 ml. de capacidad.
Asa de alambre o varilla de vidrio.
Gotero.
Coladera.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
45

Solucin saturada de cloruro de sodio.


Cmara de Mc Master.
Tubo de ensaye.
Embudo.
Vasos de plstico de 250 ml.
Cuchara
Caja de petri
Solucin jabonosa 1% o Agua tibia
Colorantes (azul de metileno, lugol o violeta de genciana)
FLOTACIN DIRECTA.
1.- Colocar una porcin de la muestra fecal (2 a 5 g) en el vaso.
2.- Agregar 30 ml. de solucin saturada lentamente hasta alcanzar una completa
homogenizacin.
3.- Colar y transferir a otro vaso, dejando reposar por 15 minutos. No ms de 1 hr. porque
los huevecillos se destruyen.
4.- De la superficie, tomar unas gotas de la solucin y colocarlas en el centro de un
portaobjetos.
5.- Colocar un cubreobjetos a la muestra.
6.- Observar al microscopio con el objeto de menor aumento.
7.- Identificar.
TCNICA DIRECTA. (LUGOL)
1.- Se colocan dos gotas de lugol en un portaobjeto.
2.- Se coloca una pequea muestra de heces sobre las gotas y se homogenizan.
3.- Se coloca un cubreobjetos.
4.- Se observa con el objetivo de 40X y posteriormente con el objetivo de inmersin.
5.- Se identifican los quistes u ooquistes de parsitos.
TCNICA DE MC. MASTER MODIFICADA.
1.- Colocar 3 gr. de heces en el frasco de boca ancha.
2.- Agregar 42 ml. de agua. Homogenizar.
3.- Colar y transferir a un tubo 15 ml. de la suspensin.
4.- Centrifugar a 2000 rpm durante 2 min.
5.- Eliminar 2/3 partes del sobrenadante. Resuspender el sedimento con solucin para
flotacin. Mezclar.
6.- Centrifugar a 2000 rpm durante 2 min.
7.- Con la ayuda del gotero tomar volumen suficiente de la superficie y llenar los dos
compartimentos de la cmara. Evitar la formacin de burbujas.
8.- Dejar reposar por tres minutos.
9.- Observar al microscopio con el objetivo de menor aumento.
10.- Mediante la observacin directa, realizar el conteo en los dos compartimentos de la
cmara.
11.- El resultado final que corresponde a la suma de los dos conteos multiplicarlos por 50.

46

CONCENTRACIN POR SEDIMENTACIN.


1.- Colocar la muestra fecal en el vaso de precipitado (la cantidad vara de acuerdo a la
especie animal).
2.- Agregar de 20 a 50 ml. de la solucin preparada (segn la especie) lentamente y
mezclando hasta que la muestra tenga la apariencia de una pasta uniforme.
3.- Colar y transferir a otro vaso limpio.
4.- Adicionar solucin suficiente, agitar suavemente y dejar reposar la muestra por 5
minutos.
5.- Eliminar el sobrenadante y repetir el paso 4 hasta que el sedimento quede limpio.
6.- Depositar pequeas cantidades del sedimento en una caja de Petri, agregando dos a tres
gotas de colorante para hacer resaltar los huevos.
7.- Observar en el microscopio estereoscpico o en el microscopio compuesto con el
objetivo seco dbil (10x).
8.- Identificar los parsitos.

47

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

48

SESION 2.
HEMATOLOGA

El procedimiento ms comn para la toma de una muestra de sangre en especies


mayores es la puncin de la vena yugular; en los porcinos las venas marginal de la oreja y
la cava anterior, en los perros y gatos las venas marginales de la oreja y femoral.
La sangre se deposita en un frasco que contenga anticoagulantes como EDTA,
oxalato, heparina, etc. Para efectuar la mayor parte de los exmenes hematolgicos son
suficientes 5 ml. de sangre.
Una gota de una solucin al 10% de las sales dipotsicas y disdicas del cido
etilendiaminotetractico (EDTA) evita la coagulacin de 5 ml. de sangre si se utiliza en
forma de polvo se emplean 5 mg.

49

RECUENTO TOTAL DE LEUCOCITOS Y ERITROCITOS


Equipo necesario para proceder al recuento total de leucocitos y eritrocitos:
1. Cmara cuenta glbulos o hematmetro.
2. Cubreobjetos especial para la cmara
3. Pipetas de dilucin.
4. Lquidos de dilucin. Turk: G. Blancos. Hayem: G. Rojos.
5. Microscopio.
6. Contador manual.
La cmara cuenta glbulos suele ser de una pieza de cristal con dos plataformas
elevadas, cada una de las cuales estn grabadas las cuadrculas perfeccionadas de
Newbawer.
Los cuadros de la esquina se utilizan para el recuento total de leucocitos. El cuadro
total se subdivide en 16 ms pequeos. Como regla, cinco de los cuadros medianos se
utilizan para lograr el recuento total de eritrocitos.
Las pipetas de dilucin para el recuento de leucocitos (1:20) y eritrocitos (1:200),
tienen grabadas dos seales para lograr las diluciones convenientes.
Procedimiento.
Las pipetas se llenan mediante un tubo elstico aplicado a la porcin superior con el
cual se succionan los lquidos. Con aspiracin suave, se hace subir sangre hasta la primera
marca exactamente 0.5, secando el exceso con un papel secante. Debe tomar la precaucin
de detener la subida de lquido exactamente en la seal o ligeramente por encima de la
misma. Luego se aspira la solucin hasta la marca 101.
Una vez llenadas las pipetas se agitan durante 2 o 3 minutos si es con la mano o 30
segundos con agitador de pipeta elctrico. Se llena la cmara de recuento, la cual deber
estar completamente limpia y se deja transcurrir 1 a 2 minutos a que sedimente y as tome
la posicin que les corresponda. Se empezar a contar los leucocitos a lo largo de los cuatro
cuadros grandes de las esquinas, que contienen 16 cuadros pequeos. El clculo es simple
solamente se multiplica por 50 el nmero total de leucocitos hallados en 4 mm2.
Antes de proceder al recuento de eritrocitos se examinar la preparacin con poco
de aumento para apreciar la buena distribucin, Para el recuento total de eritrocitos se
emplea el objetivo seco fuerte (40 x); con su aumento se cuentan los glbulos contenidos en
cinco cuadros del centro de la cmara cuya cifra se multiplicar por 10,000 valor que
representa el nmero de elementos rojos por milmetro cbico de sangre.

50

HEMOGLOBINA
La hemoglobinometra es notable por su imprecisin, a pesar de ello podrn ser
indicados los procedimientos en veterinaria prctica, por el hecho de que traducen la
capacidad del eritrocito de acarrear oxgeno. Existen varias tcnicas para saber la cantidad
de pigmento respiratorio en la muestra de sangre.
La lectura se basa en el porcentaje del valor normal en gramos por 100 ml. de
sangre. Esta lectura se puede realizar en el hemoglobinmetro de Spencer.
Material.
Hemoglobinmetro de Spencer.
Palillos con saponina.
El instrumento llamado hemoglobinmetro de Spencer mide la oxihemoglobina por
absorcin de la luz a travs de un filtro verde.
Procedimiento.
Se coloca una gota de sangre en una placa de cristal (cmara de hemoglobinmetro),
y despus los eritrocitos se someten a lavado por medio de un agente que suele ser la
saponina desecada, de uno de los extremos de un palillo. Esta cmara de cristal se aplica al
hemoglobinmetro y sucesivamente el color verde se compara con un patrn. El color
verde tiene la ventaja de que la absorcin de la hemoglobina ocurre en coincidencia con la
banda verde espectro visible.
HEMATOCRITO.
Literalmente el trmino de hematocrito significa dividir la sangre, lo cual en el
laboratorio se logra por medio de la centrifugacin.
Al centrifugar la sangre se separan en ella tres partes bien distintas:
1) La masa de eritrocitos en el fondo.
2) Capa blanca o gris de leucocitos.
3) Plasma sanguneo.
MICROHEMATOCRITO.
Para esta determinacin se recomienda un tubo capilar de hematocrito de unos 7 cm.
de longitud y calibre aproximado de 1 mm. Los tubos se llenan por capilaridad; la porcin
interna se limpia con todo cuidado con un trozo de gasa y el extremo superior del tubo se
obstruye por aplicacin a la llama de un mechero, se colocan en la centrfuga con la punta
sellada al exterior, se hace accionar durante 5 min. de 7000 a 10000 rpm Despus de la
lectura sobre el cual ser ms fcil apreciar el porcentaje respectivo de cada capa.
Valor corpuscular medio.- Obtenidos los valores del nmero de eritrocitos, de la
hemoglobina y del volumen globular, es posible calcular el volumen promedio de un
eritrocito, adems su concentracin en hemoglobina. Estos valores son de importancia
particular para precisar la clasificacin morfolgica de la anemia y tambin de ayuda para
decidir el tratamiento y su continuacin.

Volumen corpuscular medio (V. C. M.)Expresa el volumen promedio del eritrocito


individual. Este valor se determina por divisin del volumen globular en 100 ml. de sangre,

51

por el recuento de eritrocitos en millones por milmetro cbico. El resultado se expresa en


femtolitros (fl)
V.C.M. = Ht * 10 / E (millones por microlitro)
Hemoglobina corpuscular media. (H. C. M.) Cantidad de hemoglobina, por peso, en el
eritrocito promedio. Este valor se determina por divisin de la hemoglobina en gramos,
presente en 1000 ml. de sangre, por recuento de eritrocitos en millones por milmetro
cbico. El resultado se expresa en picogramos (pg)
H.C.M.= Hb * 10 / E (millones por microlitro)
Concentracin media de hemoglobina corpuscular (C. M. H. C.) Concentracin de
hemoglobina en el eritrocito promedio o la proporcin del peso de la hemoglobina y el
volumen en el cual est contenido. Este clculo se obtiene por divisin de la hemoglobina
en gramos por 10, 000 ml. de sangre por el volumen de glbulos rojos por 10 ml. de sangre.
C.M.H.C. = Hb*100 / Ht
Extensin de la sangre (frotis sanguneo). El examen de una extensin de sangre perifrica
en el examen es uno de los procedimientos ms informativos.
Una extensin de sangre tiene magnficos resultados cuando se hace con sangre
fresca que no contenga anticoagulante y en caso de que se emplearan, el ms recomendable
es EDTA.
Para la preparacin propiamente dicha el portaobjetos perfectamente limpio y
desengrasado es colocado en una superficie horizontal o simplemente se obtiene por los
bordes entre el pulgar y el ndice, acaso con el dedo pequeo como apoyo al otro extremo.
Se deposita una pequea gota de sangre en uno de los extremos, mediante un palillo o un
tubo capilar de microhematocrito. Inmediatamente despus, debe sujetarse con los dedos,
otro portaobjetos con un borde perfectamente regular, se coloca frente a la gota de sangre,
formando ngulo aproximadamente de 30 y acercando hasta que lo toque, sin pasar de ah
y se extiende. La extensin debe tener aspecto regular y uniforme, sin lagunas pues la
presencia de las mismas delata que el cristal estaba manchado de grasa.

52

Tincin de los frotis de sangre. De la variedad de colorantes ms conocidos las ms


utilizadas son Giemsa, Wright y Hemocolorante rpido.

Procedimiento.
Mtodo de Giemsa.
1. Se fija el frotis de sangre en alcohol metlico absoluto de 3-5 minutos, despus se deja
secar.
2. Se coloca el colorante, que cubra completamente el portaobjetos.
3. Se deja el colorante durante 30 minutos.
4. Se lava la preparacin con agua destilada neutra, se seca al aire y se observa.
Mtodo de Wright.
1. Se cubre el frotis con el colorante de Wright, se deja actuar de uno a tres minutos.
2. Se aade una cantidad igual de agua destilada neutra o de amortiguador y se mezcla
perfectamente soplando sobre la preparacin hasta que aparezca una capa metlica
sobre la superficie del lquido.
3. Se deja actuar de 2 a 5 minutos, se quita el sobrenadante y se lava con agua corriente o
agua neutra destilada. Se seca al aire y se observa.
Mtodo de Hemocolorante rpido.
1. Fijar el frotis con alcohol metlico y dejar secar.
2. Sumergir el portaobjetos en el Hemocolorante UNO (solucin de Eosina Amarillenta en
amortiguador de fosfatos) durante 1 min.
3. Lavar con agua corriente y sacudir para eliminar el excedente.
4. Sumergir por 1 min. En el Hemocolorante DOS (solucin de Azur-Azul de metileno en
amortiguador de fosfatos)
5. Lavar con agua corriente, se deja secar y se observa.
Forma de ejecutar el conteo.
Tan pronto como la laminilla se ha secado completamente, se coloca una gota de
aceite en el extremo ms delgado del frotis, ya que la observacin se realiza con el objetivo
de inmersin que permite las identificaciones celulares ms precisas.
Se facilita su identificacin tomando en cuenta que los ncleos son prpura o
azules, el citoplasma azul plido, algunas granulaciones son rojas como eosinfilos, azules
en los basfilos, las plaquetas son azul prpura y los eritrocitos rosas.
El nmero mnimo de leucocitos contados en el recuento diferencial es 100, los
cuales deben ser el total de la suma de los dos lados de la extensin. La mejor manera de
desplazar el portaobjetos y poder ejecutar un buen conteo es en forma de grecas, con lo que
se evita contar dos veces el mismo campo.

53

54

BOVINO
5,0-10,0
(7,0)

PORCINO
5,0-8,0
(6,5)

EQUINO
6,5-12,5
(9,5)

OVINO

CAPRINO

24-46 (35)
8,0-15,0
(12)

32-50 (42)
10,0-16,0
(13)

40-60 (52)

8-16 (12)

8,0-18,0

24-50 (38)

22-38

8-16 (12)

8,0-12,0

50-68 (63)

32-52 (42)
11,0-19
(15)
34,0-58,0
(46)

23-48 (33)

15-30

11,0-17,0
30-36
(32,7)

17,0-21
30,0-34,0
(32)

15,2-18,6
31,0-37,0
(35)

9-13
31-38
(33,5)

5,2-8,0

6,0 - 8,0

6,0 - 7,0

6,0-8,0

6-7,5

4-12 (8,0)
45-75

11-22 (16) 5,5-12,5 (9)


39-62
25-70

2500-7500 4300-13700 1500-5500


(4500)
(3500)
2-7
2-10
0,5-7
25-840
(400)
15-45
600-4000
0-2
0-120
(20)
0-20

220-2200
28-47

3000-10500 2700-6700
(4700)
0-4
0-2

0,5-11

0-2400
(700)
0-2

0-2500

0-200
(50)

0-400

100-800
(500)

0-800
(400)
30-65

0-2

0,0-1,0
325-715
(520)

4-12 (8)
40-75

GATO
5,0-10,0
(7,5)
24,045,0(37)

CANINO
5,5-8,5
(6,8)

19-23

HCM pg

35-42

13-17
30,0-36,0
(33,2)

32-36

CMHC g/dl

6,0-7,5

Protenas Totales (g/dl)

4-13
50-70

6,0-7,5
5,5-19,5
(12,5)
20-55

2000-9000 2000-9000
(5000)
0-6
0-4
0-750
(200)
10-50
700-6000
(2400)
Raros

0-550
30-48

Raros

Raros

0-10

1-8

0-925
(375)
0-3

0-1000
(400)
0-3

50-650

0-170
(50)

0-300
(50)

0-120

100-600
(330)

250-750
(400)

37-55 (45) Hematocrito %


12,0-18,0
8,0-15,0 (12)
(15)
Hemoglobina gr. / dl
39,0-55,0
(45)
60-77 (70) VCM fl

1500-7000
(4000)
1-4
0-850
(350)
35-75

1200-7200 2500-12500
(7500)
Raros
0-3

0-100
(20)
0-11

Eritrocitos M/uL

0-300
(100)
2-12
0-1500
(650)

0-1
Raros

0,0-0,4
300-700
(450)

6-17 (11,5) Leucocitos K/uL


12-30
Valores relativos
Valores
1000-4800 absolutos
(2800)
3-10
Valores relativos
Valores
150-1350 absolutos
(750)
60-77
Valores relativos
3000Valores
11500
absolutos
(7000)
0-3
Valores relativos
Valores
0-300
absolutos
(70)
2-10
Valores relativos
Valores
100-1250 absolutos
(550)
Valores relativos
Valores
Raros
absolutos

Linfocitos

Monocitos

Neutrfilos

Segmentados
Neutrfilos
en Banda
Eosinfilos

Basfilos

Reticulocitos
%
Plaquetas
K/uL

0,0-1,5
200-900

55

HOJA DE COTEJO
Actividad

Evaluacin

Evaluacin

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas
conforme a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en
las condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

56

SESION 3
URIANALISIS
INTRODUCCION.
El anlisis de orina y su interpretacin crtica acaso sea uno de los procedimientos
diagnsticos ms importantes de la investigacin veterinaria.
Por ser la orina el producto final de un proceso fisiolgico complicado y
delicadamente equilibrado, pueden influir en la constitucin de la misma muchos
mecanismos normales y patolgicos. Como se sabe la orina no slo se altera por
enfermedades propia del rin sino por bastantes circunstancias extrarrenales, con
alteraciones que pueden tener importancia diagnstica.

Obtencin de muestra de orina. La orina de muchas especies domsticas puede obtenerse en


general, simplemente aprovechando la miccin del animal. Sin embargo, debe recordarse
que en varios ejemplares es necesario limpiar la vulva o prepucio para evitarse la
contaminacin en las muestras.
En un recipiente rigurosamente limpio se procurar recoger por lo menos 10 ml. de
orina, aunque se pueden utilizar porciones ms reducidas con los modernos mtodos del
laboratorio.

57

DESARROLLO.
EXAMEN FSICO.
Examen a simple vista. Se consigue considerable informacin si se toma la molestia de
observar y anotar de la orina su color, transparencia, olor y aspecto de la espuma.
Color. El color de la muestra de orina debe ser observado y anotado con respecto a la que
se deposit en un tubo de ensaye. Se emplean los colores siguientes para la denominacin:
Incoloro, amarilla plida, amarilla intensa, amarilla parda, amarilla verdosa, lechosa, rojo,
pardo rojizo, pardo, verde, azul.
El color que presente la orina se debe a la concentracin de urocromos, pigmentos
biliares, hemoglobina, hematuria e inclusive los medicamentos pueden alterar el color
normal de la orina.
Olor. En general, el olor de la orina no tiene carcter diagnstico, aunque la de los machos
de ciertas especies (porcino, felinos y caprino) tiene un tufo fuerte caracterstico (sui
generis), los olores urinosos derivan de la presencia de cidos orgnicos voltiles. El olor
amoniacal es comn si las bacterias convierten la urea en amonaco. Los cuerpos cetnicos
se pueden revelar al olfato en caso de gestacin patolgica, acetonemia y diabetes, en cuyas
circunstancias se percibe un olor dulzn comparado al de algunas frutas.
Espuma. Su color es blanca, en presencia de bilis o pigmentos biliares puede ser verdosa,
amarillenta o parda. Si hay hemoglobina, la espuma ser tambin parda, pero de tono
rojizo.
Peso especfico/ Densidad. El peso especfico de la orina significa la relativa cantidad de
slidos en solucin y en consecuencia, es indicacin del grado de reabsorcin tubular o
concentracin renal.
El peso especfico de la orina deber ser prueba sistemtica en todos los anlisis de
orina, en particular en caso de perturbacin metablica como la diabetes sacarina o si
clnicamente se observan signos de enfermedad renal.
Para tomar el peso especfico se aprecia con toda facilidad con el empleo del
urinmetro, despus de que se ha dejado el lquido a la temperatura ambiente durante unos
minutos antes de proceder a la lectura.

Procedimiento.
1. Se llena la probeta hasta unos 3 centmetros por debajo del borde.
2. Se deja flotar el urinmetro tomndolo primero suavemente con los dedos.
3. Se registra el peso especfico sealado por la parte ms convexa del menisco. Se
evitarn burbujas en la superficie de la orina pues su presencia perturbara la lnea del
menisco.

58

PESO ESPECIFICO NORMAL EN LA ORINA DE LOS ANIMALES DOMSTICOS.


ESPECIE
BOVINA
OVINA
CAPRINA
PORCINA
EQUINA
CANINA
FELINO

PESOS ESPECIFICOS
PROMEDIO
1.035
1.030
1.030
1.015
1.035
1.025
1.030

RANGO
1.005-1.040
1.020-1.040
1.015-1.045
1.010-1.030
1.020-1.050
1.018-1.045
1.020-1.040

EXAMEN QUMICO.
En un recipiente sin contaminantes como compuestos cuaternarios de amonio,
hipocloritos, detergentes y blanqueadores, tomas la muestra y proceda el uroanlisis.
A pesar de que la orina contiene gran cantidad de sustancias orgnicas, slo el
nmero son de importancia en los anlisis de orina.
En sus anlisis qumicos se comprenden sistemticamente las siguientes pruebas:
Reaccin (pH), Protenas, Cetonas, Glucosa, Pigmentos Biliares, hemoglobina, bilirrubina.
Reaccin cida- alcalina (pH)
La concentracin normal de iones de hidrgenos en la orina depende del tipo de
rgimen alimenticio. Los animales ms o menos vegetarianos tienden a emitir orinas
alcalinas, en tanto las cidas son propias de los animales que consumen cereales de alto
valor proteico o directamente de carnes de otros animales.

VALORES NORMALES DE pH
BOVINOS
CAPRINOS
OVINOS
CANINOS
FELINOS
EQUINOS
PORCINOS

ALCALINA (7-8.5)
ALCALINA
ALCALINA (6-8.5)
ACIDA (5.2-6.8)
ACIDA (6-7)
ALCALINA (7-8.5)
ALCALINA (6-8.5)

Las tiras de papel hidronio con el uso de otras tiras como las preparadas por Ames
Co. Los colores pueden ser interpolados hasta media unidad.
pH.- Zona con rojo de metilo y azul de bromotimol. Sensibilidad: Puede diferenciar valores
entre 5 y 9.
Protenas.

59

En trminos generales, la orina, si se elimina en condiciones normales, no contiene


ninguna protena, pues la pequea cantidad que pueda pasar por el filtro glomerular se
reabsorbe en los tbulos.
El reconocimiento de protenas en la orina se ha simplificado recientemente con el
empleo de papel reactivo de Ames.
Cualquier color similar a alguno de los cuadros de colores con signos (+) indica
protenuria significante. El juicio clnico determinar el significado del resultado (trazas) en
orina con gravedad puede ser similar a trazas a pesar de concentraciones de albmina
solamente fisiolgicas.
Protenas: Zona con azul de tetrabomofenol amortiguada a un pH. Esta rea en ausencia de
protenas es amarilla a un mismo pH, toma un tono verde segn el tipo y concentracin de
las protenas. Sensibilidad: 5 de 100 mg. De albmina por 100 ml. de orina pueden dar
trazas esta rea es ms sensible a la albmina que las globulinas, hemoglobulina,
protenas de bence-jones y microprotenas.
Glucosa.
En la orina normal no hay glucosa aunque esta azcar pasa fcilmente por los
glomrulos, pudiendo darse como trazas cuando presente 1/10%, generalmente claro (+)
indica % o menos, obscuro (++++) 1 2% o ms y medio (++) % indica que hay
glucosa pero no denota claramente cantidad.
Glucosa: Zona con glucosa oxidada la cual con el oxgeno atmosfrico oxida la glucosa a
cido glucnico y perxido de hidrgeno. Este ltimo con una peroxidasa oxida el sistema
cromgeno a un tono de caf obscuro. Sensibilidad: aproximadamente 0.1% se modifica
por sustancias inhibidoras, temperatura y pH una causa de inhibicin en una concentracin
urinaria alta de cido ascrbico.

Cetonas.
Entre los cuerpos cetnicos se comprenden el cido acetoactico, acetona y cido
betahidroxibutrico. Se reporta un resultado negativo y cuando no aparece ningn tono de
morado, positivo en 15 segundos cuando el extremo de la tira reactiva vira hacia el color.
La intensidad de color morado es proporcional a la cantidad de cuerpos cetnicos presente.
Cetonas: Zona de nitroprusiato de sodio, glicina y amortiguador. Sensibilidad de 5 a 10 mg.
De cido acetoactico por 100 ml. es menos sensible a la acetona y si reacciona con el
cido betahidroxibutrico.
Sangre.
La sangre puede estar presente en la orina (hematuria) o, en otros casos, lo que esta
presente en el pigmento hemoglobina sin ocurrencia de eritrocitos (hemoglobinuria); la
distincin entre hematuria y hemoglobinuria es de considerable importancia diagnstica. La
hemoglobinuria generalmente es signo de enfermedad general, en tanto la hematuria suele
casi siempre relacionarse con una enfermedad del aparato genitourinario.

60

De acuerdo con el cdigo de colores se dan cuatro clasificaciones que corresponden


a negativo, bajo (+), medio (++) y alto (+++).
Sangre: Zona de una combinacin de un perxido ortnico y ortolidina. Sensibilidad: es
ms sensible a la hemoglobina libre y a la mioglobina que a los eritrocitos. Complementa el
examen microscpico, la sensibilidad es menor con altas concentraciones urinarias de cido
ascrbico.
Bilirrubina.
Esta prueba se puede hacer por medio de tiras reactivas, su lectura se har de
acuerdo a las pruebas anteriores, representando cada uno de los colores la concentracin de
bilirrubina. Bajo (+), moderado (++) alto (+++).
Manejo.
No contamine las reas reactivas con humos voltiles, detergentes y otras sustancias
deteriorantes provenientes de zonas de trabajo o como las que pueden ser encontradas en
los recipientes para muestras.
Moje completa pero brevemente las reas reactivas en orina para no disolver los
reactivos. Lea cuidadosamente los resultados a los tiempos especficos bajo buena luz y con
el rea cerca de la carta de colores apropiado.
EXAMEN MICROSCOPICO DE SEDIMENTO URINARIO.
Procedimiento.
En muchas muestras de orina es necesario concentrar los elementos de proceder al
examen microscpico Las muestras contaminadas con heces y otro material darn
resultados falsos y perturbadores.
La orina que va examinarse microscpicamente deber ser agitada con suavidad
para suspender todo sedimento depositado al fondo del tubo. Se centrifugan unos 15 ml. de
orina a 1500-2000 rpm durante 5 minutos. Se decanta toda la orina del tubo, pues siempre
queda suficiente lquido en las paredes para suspender de nuevo el sedimento, cuyo
conjunto es el que sirve para el examen.
Despus de la nueva suspensin del sedimento, se deposita una gota en un
portaobjetos limpio sobre cuyo material se aplica el cubreobjetos y se observa al
microscopio con objetivo seco fuerte en el que es fcil de identificar la mayora de detalles,
como cilindros.

61

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

62

63

64

SESION 4
SEROLOGA
INTRODUCCION.
Bruce, descubri el primer miembro del gnero Brucella a partir de casos de fiebre
de Malta en la Isla de este nombre.
Bang, descubri Brucella abortus en vacas abortadas y demostr que era la causa de
la enfermedad conocida con el nombre de Bang.
Traum, descubri Brucella sus en cerdas abortadas.
Toma de muestra.
La muestra se toma directamente de la yugular o de la vena coccgea en tubos
limpios (bovinos).
Las muestras sern remitidas al Laboratorio el mismo da de su obtencin, o bien si
se prefiere separar el suero nicamente, ya que por medio de congelacin se puede
preservar los anticuerpos presentes en el mismo.
Aglutinacin.
La aglutinacin se produce cuando el antgeno (suspensin de bacterias teidas) se
une a los anticuerpos contenidos en el suero.
DESARROLLO.
La reaccin de aglutinacin puede realizarse por medio de la tcnica de aglutinacin
en placa, aglutinacin en tarjeta y aglutinacin lenta en tubo.
Prueba en Tarjeta.
Es una prueba rpida de aglutinacin, que se ejecuta con una sola dilucin del suero
(no hemolizado) y un antgeno de la cepa 1119-3 de Brucella abortus en una concentracin
del 8% en bovinos y 3% en ovinos y caprinos, teida con rosa de bengala en cido lctico y
con un pH de 3.5 0.5.
Procedimiento.
Se saca del refrigerador los sueros problema, sueros control y el antgeno,
dejndolos a la temperatura ambiente durante 30 minutos antes de ejecutar la prueba.
1.- Depositar 0.03 ml. (30 l) del suero problema sobre la placa.
2.- Depositar 0.03 ml. (30 l) del antgeno junto al suero y no sobre de l.
3.- Mezclar perfectamente el antgeno con el suero, utilizando para cada muestra el extremo
de un palillo.
4.- Realizar movimientos rotatorios lentamente a la placa o bien se puede emplear un
aparato mezclador, durante 4 minutos.
5.- Una vez que finalizan los 4 minutos se procede a efectuar la lectura. La observacin de
la aglutinacin deber efectuarse con el apoyo de una fuente de luz apropiada o bien
utilizando la fuente de luz indirecta con que cuenta el aglutinoscopio.

65

Interpretacin.
NEGATIVA= NO se presenta aglutinacin.
POSITIVA = Cualquier grado de aglutinacin.
Prueba de Rivanol.
Conforme a lo establecido en la NOM esta prueba se practicar a todos los sueros de
los bovinos que hallan resultado positivos a la Prueba de Tarjeta (prueba tamiz). La prueba
de rivanol se considera como una prueba confirmatoria que es altamente confiable debido a
su adecuada sensibilidad y especificidad.
Fundamento.
El rivanol es un colorante de acridina (lactato de 2 etoxi, 6,9 diamino acridina) que
tiene la propiedad de aglutinar los anticuerpos no especficos del suero bovino, entre ellos
los anticuerpos tipo IgM que predominan en el caso de una vacunacin o infeccin
primaria.
Facilitando la reaccin de aglutinacin entre los anticuerpos IgG que se encuentran
en cantidad mayor en estimulaciones antignicas posteriores y el antgeno de Brucella
abortus cepa 1119-3 teida con verde brillante y cristal violeta, con pH de 5.8 a 6.2 y
concentracin celular 4%.
Procedimiento.
1.- Dejar que el suero y los reactivos lleguen a la temperatura ambiente durante por lo
menos 1 hr.
2.- Usando una pipeta para cada suero, colocar 0.4 ml. (400 l) del suero problema en el
tubo correspondiente.
3.- En los tubos perfectamente identificados, uno por suero, depositar 0.4 ml. (400 l) de
solucin de Rivanol.
4.- Mezclar inmediatamente agitando.
5.- Luego de ser expuesto a temperatura ambiente durante por lo menos 15 minutos y
mximo una hora, los tubos deben de ser centrifugados a 2000 rpm durante 5 min. En el
tubo de ensaye se forman 2 fases;
SEDIMENTO compacto de color amarillo, constituido por Rivanol + anticuerpos no
especficos.
SOBRENADANTE de color amarillo plido, constituido por los anticuerpos IgG
especficos.
a) Con una pipeta se colocan sobre la placa cantidades de lquido sobrenadante:
CANTIDAD
DILUCIN
1 : 25
0.08 ml. (80 l)
1 : 50
0.04 ml. (40 l)
1
: 100
0.02 ml. (20 l)
1 : 200
0.01 ml. (10 l)
1 : 400
0.005 ml. (5 l)
b) Agregar una gota de 0.03 ml. (30 l) de antgeno de rivanol a cada cantidad de lquido
sobrenadante, mezclar con el agitador de la mayor a menor dilucin.
c) Se ejecutan cuatro movimientos giratorios de la placa.
d) Colocar la placa en la caja (aglutinoscopio) y poner el reloj a 12 minutos.
66

e) A los 6 minutos girar la placa 4 veces.


f) Despus, transcurridos los 12 minutos, rotar nuevamente 4 veces y leer la reaccin
utilizando una fuente de luz indirecta.
Interpretacin.
Considerar que en los casos de revacunacin se pueden presentar resultados falsos
positivos. Los resultados sern interpretados tomando en cuenta si hubo vacunacin previa;
los animales no deben ser muestreados hasta 10 meses despus de la ltima vacunacin.
Conforme a la NOM-041-ZOO-1995
Los animales NO vacunados se consideran POSITIVOS cuando presenten
aglutinacin completa en cualquier dilucin (1:25 a 1:400)
Los animales VACUNADOS se consideran POSITIVOS cuando presenten
aglutinacin completa en diluciones 1:50 o mayor a sta.

67

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

68

SESION 5
TOXICOLOGA

INTRODUCCION.
El veterinario prctico se enfrenta con frecuencia a la circunstancia de tener que
explicar el motivo de muertes sbitas a un propietario convencido de que su animal muri
como consecuencia de envenenamiento.
En todos los casos que sospeche de envenenamiento; las muestras se tomaran por
duplicado (rin, hgado, orina, sangre, encfalo, contenido ruminal), donde es ms
probable la retencin del txico. Todas las muestras para los exmenes toxicolgicos
debern ser enviados sin agentes preservativos, aunque se refrigeran adecuadamente en el
tiempo de la remisin.
Algunos tipos de envenenamiento causan modificaciones histolgicas que pueden
ser de orientacin diagnstica.

69

DESARROLLO.
Las pruebas para la presencia de las siguientes sustancias pueden ser llevadas
fcilmente a cabo en un laboratorio elemental, con un mnimo de equipo y reactivos;
arsnico, mercurio, bismuto, nitratos, estricnina, nitritos.
Tcnica para la determinacin de Acido Cianhdrico.
1. Se preparan tiras de papel filtro mojadas en solucin que contenga 5 grs. De carbonato
de sodio y 0.5 gr. De cido pcrico en 100 ml. de agua. Se deja que esas tiras queden
casi por completo secas.
2. Se aaden 2-3 grs. De los materiales vegetales, hmedos y desmenuzados en un tubo de
ensaye, al que se le aaden cuatro gotas de cloroformo.
3. El extremo de la tira de picrato se coloca en un tapn de corcho el cual tapa el tubo de
ensaye, sin que toque sus paredes.
4. Se incuba por lo menos 24 horas a 37 C.
5. La prueba positiva queda indicada por una coloracin rojo brillante a rojo pardo del
papel filtro.
Tcnica para la determinacin de Metales Pesados (Reaccin de Reinsch).
1. Se depositan en un vaso de precipitado limpio 25 gramos de tejidos hepticos, gstricos
o de otra clase finamente molidos.
2. Se aaden 10 ml. de cido clorhdrico concentrado y 90 ml. de agua destilada.
3. Se introducen en el matraz o vaso, una lamina o alambre de cobre puro, abrillantado
con cido ntrico.
4. Se coloca un matraz lleno de agua fra sobre la parte abierta del recipiente y el material
se hierve durante 30 a 45 minutos.
5. Se quita el cobre, se lava con abundante agua destilada y se deja secar sobre una
superficie de papel secante. La coloracin obscura indica la presencia de arsnico o
bismuto. Si aparece un depsito plateado podr indicar la presencia de mercurio. El
antimonio dar tambin color obscuro con reflejos purpricos.
El depsito negro de arsnico podr confirmarse con la colocacin del cobre en 1 o
2 ml. de una solucin al 10% de cianuro de potasio. Si el depsito negro persiste se debe a
la presencia de Bismuto o Antimonio.
Tcnica para la determinacin de Nitratos.
1. Se disuelve 0.5 gr. de Difenilamina en 20 ml. de agua destilada.
2. Se aade cido sulfrico hasta el enrase del total a 100 ml.
3. Se enfra la solucin y se guarda en un frasco de color mbar. Esta solucin madre
puede ser diluida a partes iguales con cido sulfrico al 80 % para una solucin de
potencia a la mitad.
4. Para ensayar un vegetal con respecto a la presencia de nitratos se deja caer una gota de
reactivo en un corte de dicho vegetal.
5. Un color azul indica la presencia de nitratos.
6. Si el color se ha obtenido con la solucin diluida indica el valor de dos positivos (2 +),
lo que significa el punto de peligro para el alimento.

70

Tcnica para la determinacin de Nitritos.


1. Se disuelve 0.5 gr. De cido sulfanlico en 150 ml. de solucin de cido actico glacial
al 20 %.
2. Se disuelven 0.2 gr. De clorhidrato de alfanaftilamina en 150 ml. de cido actico
glacial al 20 % con calor suave y moderado.
3. Se aaden a un tubo limpio 2 ml. de la solucin desconocida. Esta solucin puede
obtenerse por impregnacin del material problema en agua destilada.
4. Se aaden 2 ml. de solucin cido sulfanlico (reactivo).
5. Se aaden 2 ml. de solucin clorhidrato de alfanaftilamina. Se mezcla bien. Un color
rosado o rojo es positivo con respecto a la presencia de nitritos.
Tcnica para la determinacin de Plomo.
1. Raspe una pequea cantidad de material de la pared del estmago.
2. Se aaden cuatro gotas de cido ntrico concentrado y se calienta muy lentamente hasta
secar. Se tomaran precauciones para no calentar excesivamente, pues la muestra puede
quedar ennegrecida. Lo que podr dificultar la interpretacin de los resultados.
3. Se aaden unas cuantas gotas de agua y dos gotas de una solucin al 10% de Yoduro de
potasio.
4. La presencia de plomo indica positivamente por la aparicin de un color amarillo fuerte.
Determinacin de Estricnina.
1. En un tubo de ensaye colocar 3 ml. de cido sulfrico concentrado.
2. Agregar con cuidado y por las paredes del tubo 2 ml. de la solucin que contenga la
muestra procurando no agitar el tubo.
3. Agregar unos cristales de dicromato de potasio y la formacin de un anillo o el
desprendimiento de color rojo a violeta de los filamentos ser tomada la prueba como
positiva.

71

CAUSA
ARSENICO
(Parasiticidas,
raticida,
insecticida y medicamentos)
PLOMO
Saturnismo
(Insecticida, pinturas, etc.)
MERCURIO

TRATAMIENTO
Debe administrarse por va oral 30 gr. de hiposulfito de
sodio mezclados en 250 ml. de agua y un tiempo por va
endovenosa 10 ml. de una solucin de hiposulfito de
sodio al 20 % por va subcutnea 10 ml. de cafena.
Administrar por va oral sulfatos de magnesio o de sodio
a razn de 150 a 300 grs. cada 8 hrs. Aplicar calmantes
para controlar el estado de excitacin.
Si las lesiones son cutneas, lavar la piel
profundamente. Administra como toma, claras de huevo
y 5 lts. de leche (tan frecuente como sea posible). Dar
por va oral de 2 a 5 gr. de azufre sublimado y 30 grs. de
hiposulfito de sodio disueltos en 300 ml. de agua.
Aplique 10 ml. por va subcutnea de cafena. En casos
crnicos dar 5 a 10 grs. diarios de yoduro de potasio.
Es importante eliminar esos forrajes de crecimiento
retardado por sequa, jvenes helados, pisoteados, etc.
De la alimentacin del ganado. Administrar por va
endovenosa de 40 a 80 ml. de hiposulfito sdico al 20
% y dar como toma 40 grs. De sulfato ferroso disuelto
en de litro de agua. Administrar cafena y suero
glucosado.

ACIDO CIANHIDRICO O
ACIDO
PRUSICO
(Insecticidas,
algunos
pastizales y sorgos, maz,
moruno, laurel, cerezo, lino,
sudan, almendras amargas,
Johnson, sagitaria, holco o
pasto miel, etc.)
MOLIBDENO Molibdenosis Adicin a la racin de 1% de sulfato de cobre. Por va
(Fertilizantes)
oral 1 gr. De sulfato de cobre por cada 45 kgs. de peso y
1 mg. de carbonato de cobalto por cada kilogramo de
peso corporal. Repetir este ltimo tratamiento cada
semana.
ESTRICNINA
Administracin de 500 mg. A 1.3-4 grs. de amital
sdico por va endovenosa. Aplicar 10 ml. de cafena
por va subcutnea y 500 ml. de suero glucosado por va
endovenosa.
INTOXICACIONES
EN Administrar de inmediato 100 gr. de sulfato de hierro al
LAS QUE SE DESCONOCE 40 % mezclados con 110 a 120 grs. de percloruro de
EL AGENTE CAUSAL
hierro oficial (hacer mezcla en el preciso momento de
emplearla). Dar una toma que contenga una preparacin
a base de partes de magnesia hidratada y parte de
carbn animal, disuelta en un litro; caballo, bovino y
especies menores (50-100 grs. Aplicar 500 ml. por va
endovenosa de suero glucosado y 10 ml. de cafena va
subcutnea. Adems de administrar antihistamnicos.
Este tratamiento universal, es de gran utilidad en
presencia de intoxicaciones provocadas por alergias,
arsenicales, sales metlicas, yodo, alcaloides y sus sales.
No tiene clorito, cido clorhdrico, cianuro y emtico.

72

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

73

SESION 6
QUMICA SANGUNEA
INTRODUCCION.
El concepto de Qumica Seca no es un concepto nuevo, ya que el empleo de tiras de
papel impregnadas de reactivos para medir componentes urinarios como glucosa y
protenas, data de hace un siglo, por no mencionar las tiras de papel para la medicin del
pH.
La base de este sistema de anlisis est en el empleo de reactivos consistentes en
unidades de reaccin con una forma slida que satisfagan la necesidad de llevar a cabo
anlisis rpidos, para un componente dado en un momento determinado.
La expresin QUIMICA SECA se refiere realmente a la presentacin de los
reactivos con los que se trabaja, los cuales se encuentran embebidos en una matriz de
naturaleza variable, en estado seco y que no requiere de la rehidratacin para su uso, siendo
esta directa mediante la aplicacin de la muestra a estudiar, sea orina, suero, plasma o
sangre total.
El estudio de los componentes sanguneos que den reacciones con reactivos
especficos, tales son como la glucosa, cido rico, creatinina, protenas totales, colesterol
y sus fracciones, enzimas, electrolitos, y muchos otros se denomina QUIMICA
SANGUINEA y nos sirve para darnos cuenta de las concentraciones de estos analitos en
nuestro paciente y as determinar cuando stos se encuentran en cantidades normales o
cuando en nmeros que nos puedan indicar que nuestro paciente cursa por algn estado
patolgico.

74

MATERIAL.
Aparato Reflotrn.
Centrfuga (si es necesario).
Gradilla
Micropipetas.
Puntas para micropipeta.
Sanitas.

REACTIVOS.
Tiras de qumica seca.
Muestra de sangre con
EDTA. (reciente).

DESARROLLO.
1.- Despus de la explicacin de los componentes y uso del Reflotrn, conectar el aparato a
la corriente elctrica y encenderlo.
2.- Esperar a que en la pantalla se lea el mensaje READY. Con el botn de seleccin de
temperaturas, seleccionar la temperatura con la que se va a trabajar (segn el analito a
medir).
3.- Las tiras reactivas, muestras (muy bien mezcladas), deben de estar a temperatura
ambiente.
4.- Abrir la compuerta del aparato en donde se introduce la tira reactiva con la muestra.
5.- Al momento que se va a introducir la tira, con la pipeta y con punta nueva, tomar 30uL
de la muestra a analizar y colocarla en el cojinete rojo de la tira reactiva (despus de
desprender la capa protectora de color plateado) con la pipeta y con precaucin de que no
se derrame fuera del cojinete.
6.- Se introduce al momento que se deposit la muestra (no mas de 20 segundos).
7.- Esperar a que el aparato d la lectura despus del tiempo de incubacin lo cual ser el
resultado.
8.- Cuando en la pantalla est el resultado, con el botn de seleccin de unidades
convencionales o internacionales, podemos ver el resultado en ambos segn se necesite.
9.- Retirar tira reactiva y proceder con los dems analitos.

75

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

76

SESION 7.
INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA TIROXINA TOTAL
INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA
TTIROXINA TOTAL(T4)

Introduccin:

Objetivos:
Al trmino de esta prctica, el alumno:

Aplicar la tcnica de Inmunoensayo para la determinacin y cuantificacin de la


Tiroxina total en suero.
Entender los principios tericos y tcnicos de la tcnica de MICROELISA.
Adems construir una grfica de calibracin para llevar a cabo la interpolacin de los
valores de absorbancia para encontrar los valores cuantitativos de la T4.

Material:

Reactivos:

Charola con micro-pozos con anti T4.


Lector de micro pozos.
conjugada.
Pipetas semiautomticas.
conjugada.
Papel absorbente.
Puntas de plstico.
Papel cuadriculado para graficar.
Cmara hmeda.

Agua destilada.
Concentrado
de

enzima

Diluyente

enzima

de

la

Reactivo de TMB.
Solucin de Stop(HCl 2N).

77

Procedimiento de la Prueba:
1.- Asegure el nmero deseado de pozos cubiertos en la charola.
2.- Con pipetas de 25 uL, deposite muestras y controles dentro de los pozos.
3.- Agruegue 100 uL del Reactivo Conjugado Operante en cada pozo.
4.- Mezcle completamente durante 30 segundos. Es muy importante hacer la mezcla
completamente.
5.- Incubar a temperatura ambiente(18-25 grados centgrados)., por un lapso de 60 min.
6.- Quite la mezcla de la incubacin golpeando el contenido del plato a un recipiente de
desechos.
7.- Enjuague y golpee la charola de los micropozos 5 veces con agua destilada(no utilizar
agua de la llave).
8.- Golpe los pozos firmemente hacia el papel absorbente para quitar las gotas de agua
residuales.
9.- Deposite 100 uL de TMB en cada pozo. Suavemente mezcle durante 5 segundos.
10.- Incube a temperatura ambiente y en la oscuridad durante 20 minutos.
11.- Detenga la reaccin agregando 100 uL de solucin de Stop a cada pozo.
12.- Mezcle suavemente durante 30 segundos. Es importante que el color azul cambie
totalmente a color amarillo.
13.- Leer la absorbancia a 450 nm con un lector de micro pozos.

Apndice: clculo de resultados.


a) Calcule el promedio de los valores de absorbancia para cada muestra problema.
b) Usando el valor promedio de absorbancia para cada muestra, determinar la
concentracin correspondiente de T4 en ng/mL interpolando desde la curva estndar.
c) Reporte sus resultados, sus discusiones y conclusiones.

RESULTADOS:
Incluir la grfica de calibracin.
Resultado obtenido despus de la interpolacin.

78

CUESTIONARIO:
Parte tcnica:
1.- Cual es la funcin de los siguientes reactivos en el procedimiento?
Reactivo de TMB.
Solucin de Stop.
2.- Por que es importante que los lavados sean crticos y que el retiro de agua residual en
los pozos sea retirado completamente?
3.- Qu estamos cuantificando, anticuerpos o antgenos?
4.- En base a la pregunta anterior, que tipo de tcnica es? indirecta o directa? Explique.
5.- Que significa ELISA y porque MICROELISA?
Parte Terica:
1.- Qu patologas puede usted determinar con la cuantificacin de esta hormona T4?
2.- Por qu se relaciona esta hormona con la alopecia en especies de animales como gatos,
perros y caballos?.
3.- Investigue los valores normales de esta hormona en las tres especies de animales
anteriores.
4.- Mencione los tres tipos de protenas transportadoras de esta hormona T4.
5.- Qu otras hormonas tiroideas nos ayudaran a descartar un Hipotiroidismo y un
Hipertiroidismo?.

BIBLIOGRAFIA:

79

INMUNOENSAYO DE LA
TIROXINA TOTAL
Tiroxina T4 hormona sintetizada y almacenada en la Tiroides.
El 99.5% de T4 es transportada por 3 protenas distintas:
1.- Globulina(TGB) 70%.
2.- Pre-albmina(TBPA)20%.
3.- Albmina(10%).
La T4, til para el diagnstico de desrdenes tiroideos(hipotiroidismo e hipertiroidismo),
as como tiroiditis., e incluso anomalas genticas.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA:
La mayora de los sistemas de ELISA desarrollados para detectar agentes ciertos
antgenos, anticuerpos o agentes infecciosos, consisten en un anticuerpo dirigido contra el
agente en cuestin, firmemente unido a una matriz slida, ya sea en el interior de las
cubetas de una placa de microdilucin o la superficie externa de una perla esfrica de
plstico o de metal, o algn otro soporte slido, estos sistemas se denominan
inmunoensayos en fase slida (SPIA). Si el antgeno est presente en el lquido a probar,
se forman complejos antgeno-anticuerpo estables cuando el lquido se agrega a la fase
slida. El antgeno no unido se elimina por completo mediante lavado y luego se agrega al
sistema un segundo anticuerpo contra el antgeno que se est buscando. Este anticuerpo ha
sido conjugado a una enzima, como la fosfatasa alcalina o la peroxidasa de rbano picante.
Si el antgeno est presente en el soporte slido, se une al segundo anticuerpo y forma un
complejo con el antgeno en el medio. Despus de eliminar por lavado el anticuerpo
marcado no unido, el agregado e hidrlisis de sustrato de la enzima produce un cambio de
color y completa la reaccin.

80

El sistema descrito requiere de anticuerpo especfico marcado con enzimas para


cada antgeno probado.

El TMB/H2O2, produce el desarrollo de color azul cuya intensidad de color es


inversamente proporcional a la cantidad de t4 en los problemas.
El HCl, solucin de paro es agregado para detener la reaccin y producir el revelado.
La intensidad del color formada es proporcional a la cantidad presente de la hormona T4 y
se relaciona inversamente a la cantidad de T4 en la muestra.
APLICACIONES:
HIPOTIROIDISMO:
Prdida de calcio y fsforo.
Ablandecimiento de huesos.
Alopecia.
ESTUDIOS TIROIDEOS AUXILIARES:
TSH (Hipfisis)
Tiroglobulina
Anticuerpos antitiroglobulina
FT4
T4 total
T3t
FT3
Yodo proteico.
SE PUEDEN DESCARTAR:
Obesidad por trastornos tiroideos.
Seborrea.
Alopecia(fisiolgica o patolgica).
Piodermas.
Hipercolesterolemia.
TRATAMIENTO:

Aplicacin de tiroxina sinttica.


Aplicacin de Yodo.

81

HIPOTIROIDISMO

HIPERTIROIDISMO

TSH alta
T4T baja
T3T baja
T3F
T4F
Yodo bajo

TSH baja
T4T alta
T3T alta
T3F
T4F
Yodo alto

1.- PARA EVALUAR FUNCION TIROIDEA:

TSH, T3T, T4T y TU(T3 captacin).

2.- PARA EVALUAR FUNCION BIOLOGICA :

FT3 y FT4

82

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

83

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 5
INMUNOFLUORESCENCIA
TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

84

Esta prctica se realizar en el laboratorio multidisciplinario A del edificio 5; en las


instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la
Universidad Autnoma de Aguascalientes.

Nmero de alumnos por unidad de prctica


Para sta prctica se contar con un nmero no mayor a 20 alumnos por sesin, con la
finalidad de que tengan una correcta asimilacin, de los marcadores para la evaluacin de
la integridad membranal.
Propsito especfico de cada prctica.
El alumno ser competente para aplicar las propiedades del marcador fluorescena para
evaluar integridad membranal en espermatozoides en distintas especies animales; cuando
conozca el reglamento del laboratorio, las propiedades de la fluorescena, la estructura del
espermatozoide para identificar las molculas receptoras de progesterona en el acrosoma de
ste, mediante su marcaje con fluorescena y as evaluar la integridad membranal y evaluar
la viabilidad de ste.

Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la


prctica.
Al terminar la prctica ser un profesionista capacitado para comprender las propiedades de
la fluorescena, y capaz de evaluar la integridad membranal en los espermatozoides, para
ver la viabilidad de ellos, esto lo lograr, con la ayuda de la prctica al trmino del
semestre.

Normas de seguridad especficas de la prctica.


Para sta prctica se requieren las siguientes normas de seguridad:
Vestimenta
-

Toda persona para ingresar al laboratorio, deber utilizar bata o filipina, blanca,
limpia y deber traerla cerrada.

En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o


aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonticos, se deber
utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, segn sea el caso.

85

Desarrollo de la prctica:
La inmunofluorescencia puede utilizarse para identificar anticuerpos de carcter
autoinmunitario o antiinfeccioso, as como para identificar microorganismos en muestras
microbiolgicas o partes de clulas en cultivo. La prueba es realizada sobre portaobjetos.
Moderadamente se han descrito tcnicas semejantes que utilizan enzimas en vez de
fluorocromos. Tienen la ventaja que pueden visualizarse con microscopios pticos
normales, pero su inconveniente es que requieren el paso del revelado por una enzima sobre
el mismo portaobjetos, sta se ha descrito en la identificacin de antgenos leucocitarios.
Para utilizar anticuerpos en la localizacin de antgenos intracelulares, los
anticuerpos deben conjugarse con una sustancia que los haga visibles, pero que no interfiera
con la especificidad de sus interacciones. Para examinar con microscopio de luz,
generalmente se forman complejos entre un anticuerpo y una pequea molcula
fluorescente (por ejemplo fluorescena, rodamina, etc.) para producir derivados que a
continuacin pueden incubarse o no. Y los sitios de enlace se pueden observar con el
microscopio de fluorescencia. A esto se le llama INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA.

MATERIAL.
Microscopio de Fluorescencia.
Portaobjetos.
Palillos de madera.
Tubos Ependoff.
Centrifuga.
Platina caliente a 37 centgrados.

REACTIVOS.
Muestra biolgica (semen, bacterias, etc)
Nigrosina.
Fluorescena.
Buffer.

DESARROLLO.
Puede variar de acuerdo al tipo de muestra y al tipo de marcador con el que se
cuente en el momento, por este motivo la tcnica ser descrita por el tcnico en el momento
que se est realizando la prctica.
Cabe mencionar que las muestras biolgicas a utilizar tienen que ser tomadas no
ms del da anterior y algunas otras como el semen, tienen que tomarse el mismo da o
pueden ser conservadas en congelacin con nitrgeno lquido.

86

Sistema de evaluacin:
Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.

Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

Mtodo de asignacin de calificaciones

CRITERIOS DE EVALUACION.
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Introduccin y Descripcin del Materia Biolgico.
Resultados.
Interpretacin.
Lista de Cotejo

10%
25%
10%
15%
40%

NOTA.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

Para Saber Mas

87

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Utilizaste la bata de laboratorio
cerrada y limpia?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Trajiste el Material completo?
Realizaste las tcnicas conforme
a las instrucciones?
Entregaste el microscopio, en las
condiciones en las que te lo
entregaron?
Te manejaste con propiedad
dentro del laboratorio?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?
Dispusiste de los desechos de
cmo indica el manual?
Los resultados que encontraste
fueron correctos?

88

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES


CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA
LABORATORIO DE PATOLOGA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 6
SEGUIMIENTO DE CASOS CLINICOS
TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA
RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA
M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMREZ

89

Esta prctica se realizar en el saln asignado de acuerdo al semestre en curso, en las


instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootcnica de la
Universidad Autnoma de Aguascalientes.

Nmero de alumnos por unidad de prctica


Para sta prctica se contar con un nmero no mayor a 20 alumnos por sesin, con la
finalidad de que tengan una correcta asimilacin, del seguimiento de los casos clnicos.
Propsito especfico de cada prctica.
El alumno ser competente para seleccionar algunas de las tcnicas aplicadas en el
laboratorio de patologa diagnstica para establecer un diagnstico presuntivo en un caso
clnico, cuando conozca el reglamento del laboratorio e integre los conocimientos de
manejo de muestras y del paciente, as como de las causas posibles de enfermedad en los
animales domsticos, Integrando las tcnicas que se realizaron durante el semestre, para su
anlisis en el laboratorio, elaborando un diagnostico, despus de la correcta interpretacin
de los resultados, y as hacer las recomendaciones necesarias aunadas a un tratamiento
eficaz, para llegar a una resolucin del caso.
Resultados esperados en relacin a los Criterios de desempeo especficos de la
prctica.
Al terminar la entrega de casos clnicos, ser un profesionista con la capacidad de dar
seguimientos completos a distintos casos clnicos en las diferentes especies, con la ayuda de
las tcnicas de laboratorio aprendidas durante el semestre, para poder llegar a un
diagnstico final, y poder dar el tratamiento y recomendaciones adecuados.
Normas de seguridad especficas de la prctica.
Para sta prctica no se requieren normas de seguridad, ya que no asistir al laboratorio,
solo se entregaran los reportes en el saln de clases.

90

Desarrollo de la prctica:
Esta prctica, se llevar a lo largo del semestre, el alumno se integrar a un equipo,
conformado por no mas de 6 personas. Se tendrn que elegir, 6 casos clnicos diferentes, en
las distintas especies animales (bovinos, ovinos o caprinos, equinos, porcinos, caninos o
felinos y aves).
Se irn presentando los avances de cada uno de los casos, cada semana, del semestre, hasta
hacer la presentacin final.
Sistema de evaluacin:

Observacin directa a travs de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito.

Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Practica

Observaciones sobre la
prctica

Recomendaciones

91

Mtodo de asignacin de calificaciones

CRITERIOS DE EVALUACION.
Lista de Cotejo
Presentacin general.
(Portada, Tcnica, Bibliografa, Anexos, Ortografa, Formato)
Hoja Clnica
Marco Referencial
Marco Terico
Diagnstico Diferencial
Diagnstico Integral
Tratamiento y Resolucin del problema
Seguimiento Fotogrfico

5
10
10
10
15
15
10
20
5

NOTA.
Los reportes se entregaran 8 das despus de haber realizado la prctica. Los
reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrn mximo 3 das hbiles para
entregarlos, descontando 1 punto por cada da de retraso.
Las faltas ortogrficas se escribirn 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendr
derecho a calificacin aprobatoria.
ES NECESARIO APROBAR LAS PRCTICAS DE LABORATORIO PARA
ACREDITAR LA MATERIA.

Para Saber Mas

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ANEXO 1

HOJA DE COTEJO
Evaluacin Evaluacin
Actividad

alumno

instructor

Final

Observaciones

Asististe puntualmente a tu
prctica?
Faltaste a alguno de los
reglamentos del laboratorio?
Entregaste completo tu
reporte?
Te manejaste con propiedad
dentro del saln?
Cumpliste de manera completa
con el objetivo de la prctica?

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