FACULTADTtulo:

DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y
BIOQUIMICAS

Alteracin comparativa de enzimas

frente a catalizadores no biolgicos

Asignatura: Bioqumica II
Docente responsable: Caldern Gmez, Javier Jack
Grupo de laboratorio: G1 y G2
Integrantes:

Ajahuana Villafan, Teresa Mnica

Rodrguez Tarrillo ,victoria
Trujillo Gutirrez Roxana
Vargas Huyhua, Milagro

Semestre acadmico: 2015 1

Ciclo acadmico: VII

LIMA PER
2015

INTRODUCCION

En los diversos compartimientos celulares transcurre

un gran nmero de reacciones qumicas que
proporcionan a la clula energa y los componentes
necesarios para su mantenimiento. La vida depende
de la existencia de catalizadores poderosos y
especficos
Las sustancias que aceleran la velocidad de reaccin
de
las
reacciones
qumicas
se
denominan
catalizadores. En el mundo vivo, los catalizadores se
denominan enzimas las cuales son protenas de
aspecto globular.
En la presente prctica se evaluaron los distintos
catalizadores de naturaleza no biolgica, para poder
sustentar y corroborar lo obtenido y aprendido en
teora

PRCTI
Alteracin comparativa de enzimas frente a
CA N2
I.

OBJETIVOS
1. Objetivo general:
Someter al almidn a los distintos catalizadores para
hidrolizarlos

II.

MARCO TERICO
LAS ENZIMAS:
Las enzimas son protenas que catalizan reacciones qumicas en
los seres vivos. Las enzimas son catalizadoras es decir sustancias
que son consumirse en una reaccin .aumentan notablemente su
velocidad.
No hacen factibles las reacciones imposibles sino que solamente
aceleran
las que espontneamente podran producirse .Ellos
hace viable que en condiciones
fisiolgicas
tengan lugar
reacciones que sin catalizador requeriran condiciones extremas
de presin , temperatura o pH (Lehninger ).
LOS CATALIZADORES NO-BIOLOGICOS:
Son aquellos que aceleran reacciones qumicas, pero no son
producidos por organismos vivientes, incluso algunos, ni siquiera
son requeridos por seres vivos. Son comnmente metales o sales
de algunos metales como Hierro (Fe), Manganeso (Mn), Paladio
(Pd), Platino (Pt), Magnesio (Mg), Nquel (Ni), entre muchos otros,
todos ellos logran reducir el tiempo en el que se efecta una
reaccin qumica. Por ejemplo, el Paladio, permite que en su
superficie se unan con mayor facilidad tomos de Oxgeno e
Hidrgeno para formar agua (H2O), un proceso que en la
naturaleza, sin catalizador, tardara muchsimo ms tiempo en
efectuarse.
EL ALMIDN:
El almidn es un polisacrido vegetal que se almacena en las
races, tubrculos y semillas de las plantas. En los cuales se
encuentra generalmente en forma de pequeos grnulos
microscpicos de estructura cristalina.
Est en el endospermo de todos los granos. El almidn se puede
hidrolizar a glucosa y proporcionar al hombre la energa y la
glucosa que son necesarias para que el cerebro y el sistema
nervioso central funcionen.
El grano de almidn est formado por amilosa y amilo pectina. La
amilopectina se encuentra en la parte exterior del grano, es
insoluble en agua y no da coloracin con la solucin de lugol. La
amilosa se encuentra en la parte interna y da coloracin violeta
en presencia de Lugol.

Por otro lado, la amilasa cataliza la hidrlisis del almidn,

glucgeno y dextrinas presentes en los alimentos en molculas
cada vez ms pequeas, en un proceso progresivo dando como
producto final el disacrido maltosa. La amilasa es una mezcla de
enzimas acta sobre los enlaces l-4 que unen las glucosas
((enlaces glicosidicos).En el hombre la encontramos en la boca
(amilasa salival) y en el intestino (amilasa pancretica). La
amilasa pancretica se considera idntica en su accin a la
amilasa salival. El pH ptimo para la amilasa salival es de 6.6.
Cuando se encuentra en medios con pH ms cidos o ms
alcalinos, la actividad de la enzima disminuye o se inhibe por
completo. La presencia de sales tambin modifica la actividad de
esta enzima.

Amilasa
Es una molcula lineal compuesta por 250 a 300 unidades de
-D-glucopiranosa enlazadas por uniones 1-4.

Amilo pectina
Es ramificada, constituida por 1.000 a 3.000 unidades de
glucosa conectadas por uniones 1-4 y 1-6 en los puntos de
ramificacin

Hidrolisis cida: Por accin del HCl a 100 C, produce una

hidrolisis total del almidn y forma glucosa, maltosa e
isomaltosa.
Hidrolisis Enzimtica: Por accin de la enzima alfa amilasa
produce una hidrolisis parcial produciendo maltosa, glucosa y
dextrina lmite que es una cadena ramificada y para poder
romperla se necesita de alfa-1-6-glucosidasa.
Hidrlisis Total o Completa: Rompimiento total de los
enlaces alfa-1-4 y alfa -1-6 del almidn que es un polisacrido
que dar como productos de monmeros de (glucosas).
Hidrlisis Parcial o Desordenadas: Ruptura parcial o
incompleta del almidn que dar lugar a los productos tales
como glucosas en baja proporcin, maltosas y dextrinas.
Hidrlisis Nula o Negativa: No sucede ruptura de enlaces
en este tipo de hidrlisis las enzimas se mantiene igual (no
habr reaccin).

III.

MTODO PROCEDIMENTALLA
1. Digestin
AMILASA

ALMIDON

Sustrato
Problema
Agua destilada
HCl 10 %

CATALIZADORES NO
BIOLOGICOS
AMILASA

Enzima
(catalizador)
o
o
o

Muestra n1: 1 mL Agua destilada + 4 mL

de ALMIDON + Bao Mara 38 C x 15 min.
Muestra n2: 1 mL HCl 10 % + 4 mL de
ALMIDON + Bao Mara Hirviente x 15 min.
Muestra n3: 1 mL Amilasa + 4 mL de
ALMIDON + Bao Mara 38 C x 15 min

2. Determinacin del sustrato

Muestra n4: 0.5 mL del tubo 1 + 1 gota de Lugol

Muestra n5: 0.5 mL del tubo 2 + 1 gota de Lugol
Muestra n6: 0.5 mL del tubo 3 + 1 gota de Lugol

RESULTADO
Azul
3.

RESULTADO
Rojo pardo

RESULTADO
Marrn

Determinacin del producto

a) Con reactivo de benedict:
Muestra n7: se agreg 0.5mL de la muestra
n4(agua destilada +rvo.de almidn+ BM) en el
tubo n7 + 2mL de reactivo de benedict
Muestra n8: se agreg 0.5mL de la muestra n5
(HCl 10%+ Rvo.de almidn +BM) en el tubo n8 +
2mL de reactivo de benedict

Muestra n9: se agreg 0.5mL de la muestra n6(

amilasa + Rvo.de almidn +BM) en el tubo n9 +
2mL de reactivo de benedict

Luego las tres muestras fueron sometidas a calor,

hasta observar el cambio de color que demuestra
la presencia de azucares reductores en cada una
de las muestras (color rojo ladrillo)

Despus de estar a bao

mara, se pasa agua fra
para poder observar
el
resultado de la muestra

b) Con reactivo de fehling

Muestra n10: se agreg 0.5mL de la muestra
n4(agua destilada +rvo.de almidn+ BM) en el
tubo n7 + 1mL de reactivo de Fehling A + 1mL de
fehling B
Muestra n11: se agreg 0.5mL de la muestra
n5 (HCl 10%+ Rvo.de almidn +BM) en el tubo
n8 + 1mL de reactivo de Fehling A + 1mL de
fehling B
Muestra n12: se agreg 0.5mL de la muestra
n6( amilasa + Rvo.de almidn +BM) en el tubo
n9 + 1mL de reactivo de Fehling A + 1mL de
fehling B

Luego las tres muestras fueron sometidas a calor,

hasta observar el cambio de color que demuestra
la presencia de azucares reductores en cada una
de las muestras (color naranja ladrillo)

Despus de estar a bao

mara, se pasa agua fra
para poder observar
el
resultado de la muestra

c) Con reactivo de tollens:

Muestra n13: se agreg 0.5mL de la muestra
n4(agua destilada +rvo.de almidn+ BM) en el
tubo n7 + 1mL de reactivo de Tollens A + 1mL
de Tollens B
Muestra n14: se agreg 0.5mL de la muestra
n5 (HCl 10%+ Rvo.de almidn +BM) en el
tubo n8 + 1mL de reactivo de Tollens A + 1mL
de Tollens B
Muestra n15: se agreg 0.5mL de la muestra
n6( amilasa + Rvo.de almidn +BM) en el tubo
n9 + 1mL de reactivo de Tollens A + 1mL de
Tollens B

IV.

RESULTADOS Y DISCUSIN
1. Solucin conservadora de almidn

Formacin del espejo

de plata

Observamos que al estar el agua en su punto de ebullicin

se le agrego sal y seguidamente almidn. La sal se usa
como conservador, que permite encubrir al almidn sin
modificarlo qumicamente su estructura para no sufrir
ninguna reaccin posterior de hidrolisis
Se observ una solucin con precipitado color
blanquecino; eso es debido al tipo de almidn que se us,
que es almidn de trigo y no reactivo de almidn. Este
fenmeno se da por que el almidn en su uso nativo es
insoluble en agua formando suspensiones de grandes
partculas y para evitar esa suspensin se usa reactivo de
almidn
El almidn de trigo, dentro de su estructura contiene 20%
de almidn soluble y en la otra porcin es insoluble por
ende la suspensin de esta porcin debido que capta agua
del medio, se hincha y precipita
2. Determinacin del sustrato:
Para identificar polisacridos se usa el reactivo de lugol
(disolucin de yodo y yoduro de potasio).La coloracin
producida por el lugol (azul-violeta) se debe a que el yodo
se introduce entre las espiras de la molcula del almidn
por lo tanto no es una reaccin qumica, sino que se forma
un compuesto de inclusin que modifica las propiedades
fsicas de las molculas
a) Muestra n4: (muestra n1 + lugol)
Al agregarle lugol a la muestra el resultado fue un color
azul oscuro, indicndonos la presencia de almidn en la
muestra, y este resultado se dio porque el agua destilada
no sirve como catalizador enzimtico y como resultado no
presento hidrolisis
b) Muestra n5: (muestra n2 + lugol)
Al agregarle lugol se torn un color amarillo naranja
indicndonos la presencia de monosacridos, es decir una
hidrolisis completa, pero el verdadero resultado tuvo que
ser hidrolisis parcial pero este resultado se debi porque
el reactivo de almidn usado fue almidn de trigo cuya
caracterstica es cubrir el resultado
El cido clorhdrico que fue el catalizador utilizado en esta
muestra, este catalizador tiene un efecto en el almidona
una degradacin hasta obtener dextrinas, ya que este
catalizador solo realiza un trabajo completo como la amilasa
por ende el resultado debi ser una hidrolisis incompleta
de color marrn oscuro
c) Muestra n6: (muestra n3 + lugol)

Al agregarle lugol se torn un color marrn oscuro

indicndonos la presencia de disacridos y dextrinas, es
decir una hidrolisis incompleta, pero el verdadero
resultado tuvo que ser una hidrolisis completa esto se
resultado se debi porque el reactivo de almidn usado fue
almidn de trigo cuya caracterstica es cubrir el resultado.
La amilasa salival
ptialina que fue el catalizador

Tub
os

Muestra

reactivo
de
Benedict

Tubo
n 7
Tubo
n 8

muestra
n1(0.5mL)
muestra
n2(0.5mL)

2ml

Tubo
n 9

resultados

turquesa

Tipo de
hidrolisis
H. nula

Turquesa pero en
H.
el
fondo
un incompleta
precipitado
rojo o parcial (a
en
pequea pesar que al
cantidad
inicio fue
completa)
muestra
2ml
turquesa con un H. completa
n3(0.5mL)
fondo rojo ladrillo
(siendo al
inicio
parcial)
enzimtico usado en esta muestra, acta sobre los
almidones y glucgenos rompiendo los enlaces hasta formar
fragmentos de molculas polimricas, por ende nuestro
resultado tuvo que dar un color amarillo como indicador de
una hidrolisis completa
3.

2ml

Determinacin del producto:

a) RESULTADOS CON REACTIVO DE BENEDICT.

El Rvo benedict est constituido por una disolucin de sulfato de

cobre II citrato de sodio y carbonato de sodio .Al tratar el azcar
con estos reactivos, as como la muestra del tubo n9;
experimentan una reaccin de oxidacin. El cobre II en disolucin

acuosa
, de color azul, se reduce a cobre I, el cual precipita
como oxido de cobre I, de color rojo. Citado en el libro
Qumica de Alimentos: Manual de laboratorio escrita por
Nuria Bolaos V
Reaccin del fundamento:

b) RESULTADOS DE REACTIVO DE FEHLING A Y B

Tub
os
Tub
on
10
Tub
o n
11
Tub
o n
12

Muestra
muestra
n1(0.5mL)
muestra
n2(0.5mL)
muestra
n3(0.5mL)

reactivo de
fehling A y B
1ml de fehling A
y 1 ml de
fehilng B
1ml de fehling A
y 1 ml de
fehilng B
1ml de fehling A
y 1 ml de
fehilng B

resultado
Continua
siendo azul
En el fondo
presenta color
rojo
En el fondo del
tubo se
present un rojo
ladrillo intenso

Tipo de
hidrolisis
H .Nula

H. Parcial

H.
completa

En el Rvo de Fehling, el cobre procedente de CuSO4 se encuentra

en forma de hidrxido cprico y se forma la correspondiente sal
Na2SO4, Cuando el Cu (OH)2 (de color azul) se calienta en
presencia de un compuesto reductor se forma oxido cuproso (color
rojo ladrillo). Citado en el libro Introduccin a la qumica
industrial: fundamentos qumicos y tecnolgicos escrito
Argeo Angiolan

Debido al tipo de almidn usado en la prctica, almidn de trigo,

los resultados no fueron apreciables

c) RESULTADOS DEL Rvo DE TOLLENS

Tubos

Muestra

reactivo de
tollens

resultado

Tubo n 13

muestra
n1(0.5mL)

1ml de
tollens A y 1

No hubo
alteraciones

Tipo de
hidrolisi
s
H. Nula

Tubo n 14

muestra
n2(0.5mL)

Tubo n 15

muestra
n3(0.5mL)

ml de tollens
B
1ml de
Tollens A y 1
ml de tollens
B
1ml de
tollens A y 1
ml de tollens
B

Se produce
espejo de plata

H.
incompl
eta

Produce espejo
de plata pero
est en ms
cantidad

H.compl
eta

El reactivo de Tollens (Ag (NH3)2+), es un agente de oxidacin suave, su

solucin de Nitrato de plata es transparente e incolora de pH bsico. Para
evitar la precipitacin de iones de Plata como Hidrxido de Plata insoluble,
se agregan unas gotas de una solucin de Amoniaco, que con los iones de
plata forma un complejo llamado Diamina-Plata (I) que es soluble en agua.
Al oxidar un azcar reductor con el reactivo de Tollens, se produce el
correspondiente cido Carboxlico y los iones de Plata se reducen
simultneamente a Plata metlica. (Formando el espejo de palta)
V.

CONCLUSIONES
La muestra problema : almidn, la que se us en prctica
fue almidn de trigo y no reactivo de almidn, al observarse
precipitaciones blanquecinas caracterstico del almidn de
trigo , al ser insoluble en medio acuoso, se hinchan y
precipitan
El lugol es un reactivo de inclusin que solo modifica las
propiedades fsicas de la molculas mas no modifican
qumicamente, dando resultados positivos de coloracin de
azul oscuro al reconocimiento de polisacridos como el
almidn
El agua destilada, no es un buen catalizador enzimtico,
porque al reaccionar con el almidn nos dio como resultado
nulo o hidrolisis nula
El cido clorhdrico es un buen catalizador enzimtico para
la formacin de dextrinas , al darnos resultado positivo ante
las pruebas fsicas con lugol

VI.

El cido clorhdrico es un catalizador enzimtico no biolgico

de rendimiento medio, al reaccionar con el almidn nos dio
como resultado parcial o hidrolisis parcial
el almidn que se us fue de trigo y no reactivo de almidn
hizo que pueda haber un error al momento de identificar si
se proyecta hidrolisis parcial en el tubo 5 siendo realmente
hidrolisis completa
Bsicamente el ensayo con el lugol nos ha servido para
diferenciar la accin de las enzimas en nuestro sustrato:
como se obtuvo en los tubos 1 (reconoce solo la presencia
de almidn) , 2 (reconoce las partculas o los pedazos de
almidn hidrolizado a los que llama dextrinas) ,3 (que
sucedi la hidrolisis total por lo que l lugol no tiene lugar
para actuar puesto que solo se introduce por las espiras de
la cadena del almidn)
El reactivo de Benedict es el mejor identificador como
determinador del tipo de hidrolisis
Como ya se mencion el reactivo de fehling acta sobre
azucares reductores. En el tubo n13 no se encontr
precipitado por lo que no se encuentra la hidrolisis del
almidn(no hay hidrolisis)
y en el tubo n15 se encontraron con el precipitado rojo
ladrillo y ac si , que como ocurri la hidrolisis total del
almidn , el reactivo reacciona con el total de las glucosas
presentes , demostrndose en el color rojo ladrillo

COMENTARIOS

Con respecto a la bioseguridad: Antes de ingresar al

laboratorio debemos tener en cuenta las normas de
bioseguridad para evitar cualquier tipo de incidente. Se
debe utilizar guantes en todo momento ya que la materia
puede estar contaminado. Se debe lavar con ayuda de
escobilla y detergente todos los materiales como tubo de
ensayo, probeta, matraz, pipeta y secar con papel tissu
antes de realizar las prcticas de laboratorio para poder
obtener resultados satisfactorios

Se debe organizar entre nosotros (alumnos) las actividades

de laboratorio para poder obtener resultados satisfactorios
en todas las prcticas realizadas as lograr avanzar de
manera organizada y ordenada. Adems de favorecernos en
el tiempo , para poder continuar con las otras actividades
que se realizaran posteriormente a las actividades del
laboratorio

VII.

Con respectos a los reactivos usados en la prctica

presente, debido al no renovar los reactivos (por su fecha
de caducidad muy cercana o mal rotulado) los resultados en
la prctica no fueron tan satisfactorios, recomendara que
hubiera una mejor organizacin al respecto para adquirir los
reactivos debidos o nosotros preparar nuestros propios
reactivos

En la prctica presente, nos permiti corroborar los

conocimientos obtenidos sobre la hidrolisis de biomoleculas
de asignaturas previas como orgnica 3 y bioqumica 1. Sin
embargo el saber de los catalizadores no biolgicos, fue una
manera sencilla de explicar la propiedad catalizadora de las
enzimas
al comprobarlo tambin con los reactivos
respectivos

En nuestro criterio personal, la presente prctica, nos sirvi

investigar el fundamento de cada reactivo porque esto
permiti explicar el porqu de las reacciones de coloracin
de los reactivos de benedict, fehling y tollens y as tener
una manera de sustentar nuestros resultados. Adems de
saber que reactivos son ms efectivos para el uso de alguna
practica posterior de otras asignaturas

REFERENCIAS
Introduccin a la qumica industrial: fundamentos
qumicos y tecnolgicos , Argeo Angiolan, 1960 , pag. 326
Curso breve de qumica orgnica , Walter W.
Linstromberg, 1979, profesor luis Alberto bravo ,
,editorial . REVERT, pag . 388-389

 Qumica general, Universidad de Madrid , Hans Rudolf

Christen ,editorial Reverte , 1975, pag.185-186