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75
ISSN 1516-4691
Fevereiro, 2009

Aspectos gerais da validao

de mtodos qumicos,
biolgicos e computacionais
na gesto de qualidade de
resultados de pesquisa

ISSN 1516-4691
Fevereiro, 2009
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria
Centro Nacional de Pesquisa de Monitoramento e Avaliao de Impacto Ambiental
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Documentos 75

Aspectos gerais da validao de

mtodos qumicos, biolgicos e
computacionais na gesto de
qualidade de resultados de
pesquisa
Vera Lcia S. S. de Castro

Embrapa Meio Ambiente

Jaguarina, SP
2009

Exemplares dessa publicao podem ser solicitados :

Embrapa Meio Ambiente
Rodovia SP 340 - km 127,5 - Tanquinho Velho
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Pires, Emlia Hamada e Cludio M. Jonsson
Normalizao Bibliogrfica: Maria Amlia de Toledo Leme
Editorao Eletrnica: Edislene Aparecida Bueno Ruza
1 edio eletrnica
(2009)

Todos os direitos reservados.

A reproduo no-autorizada desta publicao, no seu todo ou em
parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei n 9.610).

Castro, Vera Lcia S. S. de.

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e
computacionais na gesto de qualidade de resultados de pesquisa. /
Vera Lcia S. S. de Castro. Jaguarina: Embrapa Meio Ambiente,
2009.
28 p. : il. (Embrapa Meio Ambiente. Documentos; 75)
1. Laboratrios. 2. Sistemas da qualidade. 3. Boas prticas de
laboratrio. I. Castro, Vera Lcia S. S. de. II. Ttulo. III. Srie.
CDD 001.42
Embrapa 2009

Autores
Vera Lcia S. S. de Castro
Veterinria, PhD ,Pesquisadora da Embrapa Meio Ambiente, Rodovia SP 340 - Km 127,5 - 13.820-000,
Jaguarina, SP.
E-mail: castro@cnpma.embrapa.br

Apresentao

O crescimento da demanda de sistemas da qualidade aumentou a necessidade de

assegurar que os laboratrios que fazem parte de grandes organizaes, ou oferecem outros servios a elas, possam operar sob um sistema de qualidade especfico.
A validao de procedimentos analticos um aspecto vital para subsidiar a confeco de laudos emitidos pelos laboratrios, quer para testes de substncias qumicas
quer para produtos biolgicos, perante os rgos oficiais. A principal razo para essa
tendncia o credenciamento de laboratrios de acordo com a norma ISO 17025 e
as Boas Prticas de Laboratrio (BPL) que exigem dos laboratrios a estimativa da
incerteza associada aos seus resultados.
Enquanto que a abordagem desenvolvida para a validao dos ensaios qumicos
bem determinada em relao estimativa da incerteza e validao do mtodo, a
mesma metodologia no diretamente aplicvel aos ensaios biolgicos. A validao
dos ensaios e softwares contribui significativamente para a garantia da qualidade dos
resultados gerados e para a acreditao de laboratrios.
Dessa forma, nesse Documento objetiva-se preconizar procedimentos harmnicos
padronizados e registros fidedignos a fim de dar confiabilidade aos resultados obtidos
e laudos fornecidos por laboratrios. Alm disso, com a execuo e o aprimoramento
dos protocolos desenvolvidos, haver maiores subsdios tcnicos para gerenciar
possveis problemas encontrados. A sua aplicabilidade poder ser examinada e
aprimorada em etapas consecutivas pela equipe do laboratrio, aps o exame dos
dados obtidos.
Claudio Aparecido Spadotto
Chefe-Geral
Embrapa Meio Ambiente

Sumrio

Introduo

...................................................................................... 07

1. Validao de mtodos de ensaios ....................................... 09

2. Abordagens para a validao de mtodos.................. 10
2.1 Mtodos qumicos ............................................................. 12
2.2 Mtodos biolgicos ............................................................ 13
2.3 Mtodos computacionais .................................................... 15

3. Etapas para o desenvolvimento e validao de ensaios 17

3.1 Etapas gerais ..................................................................... 17
3.2 Definio de um plano de validao de mtodos qumicos .......... 21
3.3 Definio de um plano de validao de mtodos biolgicos ........ 23
3.4 Definio de um plano de validao de mtodos computacionais
(softwares) ............................................................................. 25

4. Consideraes Finais .............................................................. 26

Referncias

................................................................................... 27

Aspectos gerais da validao

de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais na
gesto de qualidade de resultados de pesquisa
Vera Lcia S. S. de Castro

Introduo
Est sendo cada vez mais reconhecida e exigida a necessidade de mostrar a
qualidade de medies qumicas, atravs de sua comparabilidade,
rastreabilidade e confiabilidade. Dados analticos no confiveis podem conduzir a decises desastrosas e a prejuzos financeiros irreparveis. Para garantir que um novo mtodo analtico gere informaes confiveis e
interpretveis sobre a amostra, ele deve sofrer uma avaliao denominada
validao. A validao de um mtodo um processo contnuo que comea no
planejamento da estratgia analtica e continua ao longo de todo o seu desenvolvimento e transferncia. Para registro de novos produtos, todos os rgos
reguladores do Brasil e de outros pases exigem a validao de metodologia
analtica e, para isso, a maioria deles tem estabelecido documentos oficiais
que so diretrizes a serem adotadas no processo de validao. Um processo
de validao bem definido e documentado oferece s agncias reguladoras
evidncias objetivas de que os mtodos e os sistemas so adequados para o
uso desejado (RIBANI et al., 2004).
Um laboratrio, ao realizar ensaios com qualidade, deve se basear em regulamentaes emitidas por organismos de normatizao. Conseqentemente,
deve demonstrar que tem condies de executar de maneira adequada estes
ensaios de acordo com os mtodos normatizados, dentro das condies especficas de suas instalaes. Validar um resultado significa garantir que o
procedimento, que inclui as condies de operao do equipamento e a
seqncia analtica, seja aceito como correto. Alm disso, importante

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na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

enfatizar que qualquer alterao em mtodos normatizados, publicados ou

transferidos implica na necessidade de revalidar o mtodo, para que o laboratrio demonstre que os novos mtodos utilizados por eles conduzem a resultados confiveis, que garantam qualidade, idoneidade e credibilidade de seus
produtos ou servios.
O controle do erro imprescindvel em laboratrio. Para tanto, importante
assegurar que a variabilidade se mantenha controlada para cada metodologia
atravs de medidas de controle intra e interlaboratorial. O principal objetivo
assegurar a consistncia dos resultados obtidos. importante ressaltar que
no possvel estimar a incerteza de um procedimento analtico sem o
controle da qualidade das medidas realizadas pelo laboratrio. Um processo
pode ser considerado confivel se os dados registrados encontram-se dentro
dos limites de controle e a variabilidade dos resultados individuais se encontra
estvel. A fim de realizar a avaliao da conformidade dos ensaios deve-se
ter pleno conhecimento do processo; obter a fidelidade dos dados coletados
representados pelos controles; estabelecer critrios para verificar se as alteraes observadas so causadas por variaes inerentes ao sistema e se
sero estveis atravs do tempo ou se ocorrem ocasionalmente.
Uma interpretao adequada dos resultados considera tanto os erros aleatrios quanto os erros sistemticos do procedimento analtico. Os vieses que
levam incerteza podem ser introduzidos, por exemplo, na coleta do material, na escolha do mtodo, no transporte e armazenamento da amostra, diluies seriadas, temperatura de incubao, etc.; os quais nem sempre podem
ser controlados pelo analista. As vrias etapas do processo analtico devem
ficar sob controle do analista a fim de evitar fontes de erro. Alguns aspectos
a serem considerados, mesmo que tratem de cuidados gerais em laboratrio,
so: a) treinamento adequado da equipe de analistas nas tcnicas utilizadas
no laboratrio; b) manuteno e calibrao de equipamentos; c) cuidados
com o material utilizado incluindo preparo, esterilizao e uso correto; d)
realizao adequada do procedimento analtico como quantificao de colnias, identificao de microrganismos, etc. e e) acompanhamento da qualidade
das anlises por um controle de qualidade e testes intra e interlaboratoriais.

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1. Validao de mtodos de
ensaios
A norma NBR ISO/IEC 17025:2005 (International Standard Organization)
descreve os requisitos para os laboratrios de calibrao e de ensaio atenderem, se desejarem demonstrar que so tecnicamente competentes. As atuais
exigncias dessa norma fazem com que esses laboratrios implementem
procedimentos para validao de mtodos no normalizados, mtodos desenvolvidos pelo laboratrio ou alteraes em mtodos normalizados, quando
aplicvel. A validao de mtodos de ensaios de fundamental importncia
para comprovar que o mtodo no normalizado desenvolvido capaz de obter
resultados tecnicamente vlidos e intercomparveis.
Validao a comprovao, atravs do fornecimento de evidncia objetiva,
de que foram atendidos os requisitos para uma aplicao ou para uso especficos pretendidos. Segundo Inmetro (2003), com o objetivo de confirmar que
os mtodos so apropriados para o uso pretendido, o laboratrio deve validar:
mtodos no normalizados; mtodos desenvolvidos pelo prprio laboratrio;
mtodos normalizados usados fora dos escopos para os quais foram concebidos; ampliaes e modificaes de mtodos normalizados. Ainda de acordo
com Inmetro (2001), mtodo normalizado aquele desenvolvido por um
organismo de normalizao ou outras organizaes, cujos mtodos so aceitos pelo setor tcnico em questo; e mtodo no normalizado aquele
desenvolvido pelo prprio laboratrio ou outras partes, ou adaptado a partir
de mtodos normalizados e validados.
As normas de qualidade estabelecem mecanismos para promover a
confiabilidade dos ensaios realizados evidenciando que os laboratrios operam de acordo com os requisitos estabelecidos pela norma, o que atesta
competncia tcnica na realizao de ensaios. No Brasil, verifica-se uma
grande lacuna na realizao de ensaios adotando sistemas da qualidade. A
adequao de anlises qumicas e biolgicas empregadas em conformidade
com as normas de qualidade vem permitindo ampliar e fortalecer a infraestrutura dos servios tecnolgicos realizados por laboratrios prestadores
de servio.
A norma internacional ISO/IEC 17025 uma norma especfica para laboratrios de ensaio e de calibrao. Em seu item 5.4.5, a validao de mtodos
apresentada como um dos requisitos tcnicos importantes na qualidade
assegurada dos laboratrios de ensaio, acompanhada da documentao do

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trabalho de validao. A norma NBR ISO/IEC 17025:2005 no especifica a

maneira pela qual este procedimento deve ser implementado, mas determina
que controles sejam estabelecidos.
Assim sendo, cada laboratrio deve adotar o procedimento mais adequado ao
seu caso especfico, observando as exigncias da norma, no que se refere
especificamente ao item 5.4 Mtodos de ensaio e calibrao e validao de
mtodos. Porm, essencial que os estudos de validao sejam representativos e conduzidos de modo que a variao da faixa de concentrao e os tipos
de amostras sejam adequados. Assim, por exemplo, um mtodo para um
composto majoritrio requer um critrio de aceitao e uma abordagem
diferente de um mtodo desenvolvido para anlise de traos. A validao de
mtodos deve ser planejada antes de seu desenvolvimento e execuo. A
estratgia de validao especfica e influenciada pelo procedimento analtico utilizado, pela natureza e concentrao do composto de interesse e pela
matriz. Correlacionando-se o desenvolvimento, otimizao e validao de
mtodos de uma maneira lgica e organizada, os laboratrios podem gerar
resultados bastante eficientes e produtivos (RIBANI et al., 2004).
A acreditao dos laboratrios exige a validao dos mtodos com a estimativa da incerteza associada aos seus resultados. A validao de um mtodo
mostra que esse mtodo especfico capaz de servir ao propsito para o qual
usado. A incerteza pode ser definida como um parmetro associado ao
resultado de uma medida, que caracteriza a disperso dos valores que podem
ser atribudos ao mensurado. A fim de obter a incerteza da medio de um
ensaio necessrio o levantamento das fontes de incertezas no processo de
ensaio a fim de estimar a possvel variao no resultado expresso. Para cada
mtodo de ensaio podem-se ter diferentes fontes de incerteza da medio,
dependendo do prprio mtodo, equipamentos e instalaes utilizadas.

2. Abordagens para a validao de

mtodos
Os mtodos desenvolvidos internamente devem ser descritos em procedimentos documentados, que contenham pelo menos:
a) identificao adequada do procedimento;

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b) escopo;
c) descrio do tipo de item a ser ensaiado ou calibrado;
d) parmetros ou grandezas e faixas a serem determinadas;
e) referncia a aparatos e equipamentos, incluindo os requisitos de desempenho tcnico;
f) referncia a uso de padres de referncia e materiais de referncia;
g) determinao das condies ambientais requeridas e perodo de estabilizao necessrio;
h) descrio de todas as etapas do ensaio/calibrao.
i) critrio e/ou requisitos para aprovao/rejeio, quando aplicvel;
j) meno aos dados a serem registrados e ao mtodo de anlise e apresentao dos resultados;
k) referncia ao procedimento para determinao da incerteza de medio.
A NBR ISO/IEC 17025:2005 determina em seu item 5.4.5.2 que o laboratrio deve registrar tanto os resultados obtidos dessa validao quanto o procedimento utilizado para tanto, alm de uma declarao de que o mtodo ou
no adequado para o uso pretendido. De acordo com a NBR ISO/IEC
17025:2005, convm que a tcnica utilizada para a determinao do desempenho do mtodo seja uma das seguintes ou combinao das mesmas:
calibrao com o uso de padres de referncia ou materiais de referncia;
comparaes com resultados obtidos por outros mtodos; comparaes
interlaboratoriais; avaliao sistemtica dos fatores que influenciam o resultado; avaliao da incerteza dos resultados com base no conhecimento cientfico dos princpios tericos do mtodo e na experincia prtica. A NBR ISO/
IEC 17025:2005 orienta que a atividade de validao sempre um equilbrio
entre custos, riscos e possibilidades tcnicas. Existem casos em que a faixa e
a incerteza dos valores s podem ser fornecidas de forma simplificada devido
falta de informaes.
A incerteza expandida uma quantidade que define um intervalo sobre o

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resultado de uma medio que pode ser esperado para compreender uma
frao de uma distribuio dos valores, que podem ser razoavelmente atribudos a um mensurando. Ela fornece um intervalo de confiana dentro do qual
existe a maior probabilidade de se encontrarem valores que podero ser
atribudos ao valor verdadeiro. A fim de estimar a incerteza geral, necessrio tratar separadamente cada fonte de incerteza para obter a contribuio
total. A partir desses componentes, obtm-se, ento, a incerteza combinada
que expressa como a raiz quadrada positiva da soma dos quadrados das
incertezas individuais na mesma unidade.
Dentro do mbito geral de validao de mtodos possvel distinguir dois
tipos. O primeiro tipo, chamado de validao no laboratrio, consiste das
etapas de validao dentro de um nico laboratrio, seja para validar um
mtodo novo que tenha sido desenvolvido localmente ou para verificar que
um mtodo adotado de outras fontes est bem aplicado. A validao no
laboratrio utilizada durante o desenvolvimento de uma metodologia, em
que so avaliadas todas as caractersticas de desempenho da validao da
metodologia, porm sem verificar a reprodutibilidade. O segundo tipo, validao completa, envolve todas as caractersticas de desempenho e um estudo
interlaboratorial que utilizado para verificar como a metodologia se comporta com uma determinada matriz em vrios laboratrios, estabelecendo a
reprodutibilidade da metodologia e a incerteza expandida associada
metodologia como um todo.
S assim a metodologia pode ser aceita como uma metodologia oficial para
uma determinada aplicao. Protocolos internacionalmente aceitos tm sido
estabelecidos para a validao completa interlaboratorial, mais precisamente
o Protocolo Harmonizado Internacional e o procedimento ISO. Estes protocolos requerem um nmero mnimo de laboratrios e materiais testes para
serem includos no estudo interlaboratorial para validao completa do mtodo analtico (Regitano et al., 2004).

2.1. Mtodos qumicos

As caractersticas de desempenho do mtodo de ensaio qumico devem estar
claramente declaradas no procedimento documentado e incluir:
especificidade e seletividade; faixa de trabalho e faixa linear de trabalho;
linearidade; sensibilidade; limite de deteco; limite de quantificao; exatido e tendncia (bias); preciso; robustez; incerteza de medio (Inmetro,
2003). Condies que determinam a validade de um mtodo variam em

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funo das condies operacionais do laboratrio, bem como das prticas

utilizadas pelos profissionais envolvidos. Mudanas substanciais nas condies em que as anlises so feitas (materiais ou humanas) deveriam determinar a necessidade de uma revalidao do mtodo.
Dessa forma, na validao da metodologia de anlise de resduos de produtos
fitossanitrios deve ser verificada a adequao dos procedimentos propostos
ou estabelecidos, para a combinao especfica ingrediente ativo - matriz,
dentro de determinados parmetros operacionais do laboratrio executante.
Na validao todos os aspectos do mtodo que podem influenciar os resultados devem ser rigorosamente controlados e os parmetros do mtodo so
estabelecidos. Por parmetros do mtodo entende-se por Exatido, Preciso,
Limite de Deteco (LOD), Limite de Quantificao (LOQ), Especificidade,
Linearidade, Faixa e Robustez. Por limite de deteco (LOD) entende-se o
nvel de resduos na amostra acima do qual se pode afirmar, com 95% de
certeza, se existem resduos presentes na amostra. Por outro lado, limite de
quantificao (LOQ) o nvel de resduos na amostra acima do qual se pode
afirmar, com 95% de certeza, qual o nvel de resduos que esto presentes na
amostra. Neste contexto, ND (Nada Detectado) significa qualquer nvel de
resduos abaixo do limite de deteco. O limite inferior de validao o limite
de quantificao (LOQ), e o limite superior de validao o maior nvel no
qual se validou o mtodo. O resultado desses controles fornece os
parmetros do mtodo, os quais iro indicar a eficincia de todo o procedimento analtico. Na prtica, a eficincia do procedimento analtico obtida
pela determinao da porcentagem de recuperao do analito em mltiplas
amostras de matrizes representativas de testemunha, fortificadas em diversos nveis.

2.2. Mtodos biolgicos

As abordagens desenvolvidas para anlises qumicas, em relao estimativa de incerteza e validao de mtodo, no so diretamente aplicveis aos
ensaios biolgicos. reconhecidamente difcil estimar a incerteza de ensaios
que utilizam organismos, como espcies animais e vegetais, dificultando,
conseqentemente, o atendimento deste requisito da norma. Em conseqncia, os laboratrios que desenvolvem ensaios biolgicos, assim como a comunidade analtica em geral, esto se preocupando cada vez mais com a estimativa da incerteza de medida dos resultados produzidos; devido ao
credenciamento de laboratrios na ISO 17025 e Boas Prticas de Laboratrio (BPL).

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O comportamento dos organismos dependente das caractersticas do prprio organismo e das condies ambientais do laboratrio. Em testes realizados com organismos vivos, como ratos, peixes, minhocas, microcrustceos,
etc.; o comportamento dos organismos teste depende de condies
ambientais no laboratrio. Nesse caso, h a necessidade do desenvolvimento
de metodologia para a validao desses ensaios, levando em considerao as
caractersticas de cada um.
Pode se tornar difcil estabelecer com preciso a contribuio de cada passo
individual do processo analtico desde que o analito um microrganismo vivo,
cujo estado fisiolgico pode ser largamente varivel. importante reconhecer que nem todos os componentes faro uma contribuio significativa para
a incerteza combinada, e que na prtica provvel que s o faa um pequeno
nmero (ELLISON et al., 2000). Na estimativa da incerteza total, deve ser
considerada a incerteza de cada um dos componentes que contribuem para a
mesma.
As tcnicas de DNA recombinante utilizadas em anlises microbiolgicas, por
sua vez, promoveram o acmulo exponencial de seqncias gnicas e
genomas depositados em bancos de dados pblicos mundiais. Esse acmulo
tem aumentado a demanda por metodologias que permitam sua identificao
funcional ou confirmao de homologia, alm da elucidao dos padres de
expresso. Entretanto, os mtodos moleculares apresentam dificuldades
para a sua validao devido a fatores tais como: variao no desempenho dos
termocicladores, variao na qualidade dos reagentes e equipamentos e eficincia das diferentes polimerases e a presena de inibidores da PCR na matriz
da amostra (FREITAS et al., 2006). Abordagens mais eficientes de anlise da
expresso gnica em nvel genmico constituem-se num desafio presente na
identificao e no estudo simultneo de um grande nmero de genes envolvidos em diversos processos biolgicos, desde o desenvolvimento dos organismos at suas interaes com fatores ambientais (DONSON et al., 2002).
A anlise convencional de genes individuais por transcrio reversa e reao
em cadeia da polimerase ou RT-PCR, apesar de precisa e robusta, no apresenta a eficincia e a rapidez necessrias para acompanhar o ritmo de
seqenciamento e descoberta de novos genes (CALSA JUNIOR et al., 2004).
Entre os mtodos abertos de anlise global de transcritos, vrias tcnicas
baseadas na eletroforese em gel tm sido amplamente utilizadas em combinao com a PCR para a deteco e caracterizao de genes expressos
diferencialmente. Nos mtodos moleculares, o nmero de amostras usadas

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na validao de um teste deve incluir o mximo de variantes genticas

presentes na populao para a qual o teste vai ser utilizado e sempre que
forem introduzidas novas variantes dever ocorrer a revalidao do teste. As
amostras fenotipadas devem ser analisadas em estudo cego para avaliao
do mtodo.
Uma estratgia de amostragem e anlise microbiolgica, por exemplo, de
alimento, significa um procedimento planejado para selecionar amostras de
uma populao e para conduzir a amostragem para obter as informaes
necessrias. Este plano determina como os resultados podem ser interpretados e se as informaes de sistemas diferentes so comparveis ou no. Em
alimentos, isto pode ser alcanado naturalmente usando produtos contaminados ou amostras de produtos com nveis predeterminados de contaminao.
Apesar da contaminao de uma matriz s imitar de modo superficial a
presena de contaminantes naturais, freqentemente a melhor soluo
disponvel. Tais preocupaes so tambm aplicveis aos testes com
biopesticidas em mamferos (roedores), j que so processos complexos de
anlise e incluem vrios passos desde a amostragem dos tecidos dos animais
expostos, preparo da soluo inicial, condies de isolamento e mtodos de
quantificao de colnias, entre outros.
Segundo Feldsine et al. (2002), o protocolo de validao de procedimento de
anlise qualitativa moleculares como a deteco de patgenos em alimentos
consiste em uma srie de experincias na qual so avaliados os seguintes
parmetros: a) Validao intralaboratorial com a anlise de tipos diversos de
alimentos, de diferentes nveis de inculo e controles, bem como de nmero
de pores testadas por inoculo. Devem ser avaliados ainda ao menos dois
lotes de cada tipo de alimento contaminado naturalmente, alm de controles
de amostras inoculadas e no inoculadas no mesmo perodo para verificar se
h contaminao cruzada; b) Validao interlaboratorial com vrios laboratrios, tipos de alimento, cultura de inoculao e doses. Devem ser avaliadas
ainda amostras contaminadas natural e artificialmente alm de testes para
diferena significativa e indicadores de desempenho entre os laboratrios.

2.3. Mtodos computacionais

Em relao aos mtodos computacionais - softwares, h alguns procedimentos propostos que devero ser avaliados e adaptados as condies de cada
ensaio e infra-estrutura laboratorial (SHIN; NAM, 2007). O processo de
validao de um software difcil porque, em geral, os programas apresen-

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tam comportamentos dependentes dos dados de entrada, os quais so muito

variados em um sistema que opera com banco de dados e trabalha com
grande quantidade de clculo numrico (STEMPNIAK; LANDGRAF, 2003).
Existem diversos mtodos disponveis para assegurar a qualidade de um
software, tais como: a) Mtodos analticos tratam das caractersticas
finais do software produzido; b) Mtodos construtivos tratam do processo
de desenvolvimento do software. Nesta categoria, pode-se assegurar a qualidade do software atravs do emprego de tcnicas validadas para o processo
de desenvolvimento do software, como para as fases de documentao, projeto, implementao, simulao, etc.; c) Mtodos gerenciais tratam da qualidade do software dentro do mbito geral dos sistemas de gesto da qualidade.
As abordagens de validao empregadas para um software podem incluir
padres visuais da interface com o usurio, experimentao da interface pelo
prprio usurio (facilidade de aprendizagem e aplicao do software para as
finalidades prticas a que se destina); uso de mtodos e tcnicas convencionais para processamento dos resultados; execuo de testes tipo caixa preta
submetendo determinados componentes do software a entradas conhecidas
e confrontar os resultados com valores tambm conhecidos; validao na
origem das informaes pr-armazenadas como tabelas e frmulas matemticas e validao de dados pelo prprio usurio que consiste na
disponibilizao de funcionalidades no software para o prprio usurio poder
verificar, indicar a situao e proteger as informaes contra alteraes
inadvertidas aps t-las validado.
De acordo com o Inmetro (2003a), a validao dos softwares comerciais no
necessria, mas sim das planilhas criadas segundo um software comercial.
Uma planilha ou programa sempre validado antes de sua primeira utilizao
ou aps qualquer modificao. Uma planilha validada comparando-se os
resultados gerados com o processamento manual dos dados. A comparao
tambm pode ser feita com outras planilhas ou programas previamente validados ou softwares comerciais. Qualquer alterao em um programa ou
planilha submetida a uma nova validao e o nmero da nova verso consta
do nome do programa ou planilha ou do prprio documento, alm de constar
do documento de validao gerado. Os softwares desenvolvidos pelos laboratrios, bem como as adaptaes dos softwares comerciais, devem ser validados. importante ressaltar que qualquer que seja a sistemtica adotada para
validar as planilhas dever ter a aprovao do chefe do laboratrio. recomendvel que os documentos de texto sejam conferidos, confrontando-se
seu contedo com os dados originais.

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3. Etapas para o desenvolvimento

e validao de ensaios
3.1. Etapas Gerais
As etapas gerais para o desenvolvimento e a validao de mtodos de ensaio so:
1. Definio do ensaio e estabelecimento do embasamento tcnico-cientfico - Nesta etapa, so definidos o objetivo do ensaio, o uso e as aplicaes
pretendidas atravs de consulta a bibliografia pertinente, tais como normas nacionais, normas internacionais, documentos tcnicos, artigos cientfico, etc. A escolha do mtodo analtico ser em conformidade com as
condies experimentais, segurana, custo, rapidez de resposta e possibilidade de automao. Preferencialmente, se possvel, utilizar mtodos
publicados como normas nacionais, regionais e internacionais em sua
ltima edio. Essa consulta auxilia na definio das bases do desenvolvimento do mtodo e dos requisitos e sistemtica para validao. Alm da
bibliografia pertinente pode-se se consultar especialistas de universidades
e empresas que adotam o ensaio a ser implantado ou similar em sua rotina
de teste.
2. Levantamento das necessidades materiais e de pessoal - Nesta etapa,
devem-se especificar os equipamentos necessrios e realizar levantamento de necessidades de modificaes de infra-estrutura do laboratrio e
estabelecer o sistema de segurana necessrio para o ensaio de forma a
garantir a integridade fsica dos colaboradores e equipamentos utilizados.
Ainda nessa etapa, verificada a competncia dos colaboradores para a
execuo do ensaio em questo, a definio da necessidade de
contratao ou treinamento de colaboradores.
3. Elaborao e aprovao do procedimento de ensaio - Nesta etapa deve
ser realizada a elaborao do procedimento de ensaio, quando necessrio,
atravs de ensaio piloto, repetindo quantas vezes forem necessrias para
a concretizao dos resultados encontrados e para certificar-se que o
procedimento de ensaio condiz com o procedimento de uso do equipamento. O Plano de Desenvolvimento e Validao de Mtodos de Ensaio deve
apresentar informaes quanto descrio e cronograma das etapas do
processo, s especificaes e sistemtica de aprovao de insumos,
reagentes e equipamentos e instrumentos; sistemtica de validao, s
especificaes da qualidade analtica utilizadas para validar o desempenho

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Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

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do ensaio e aplicao de aes corretivas para resultados inadequados.

Devem ser registrados, quando aplicvel; as normas consultadas, os procedimentos de segurana, os equipamentos utilizados, o manuseio do
material e dos equipamentos, os resultados e a estimativa da incerteza
alm da forma de coleta e registro dos dados. A elaborao do procedimento de ensaio, quando necessrio, deve ser iniciada atravs de ensaio
piloto, repetindo quantas vezes forem necessrias para a concretizao
dos resultados encontrados e para certificar-se que o procedimento de
ensaio condiz com o procedimento de uso do equipamento. Os planos
devem ser atualizados medida que se efetua o desenvolvimento e deve
ser assegurada uma comunicao efetiva entre todo o pessoal envolvido.
4. Calibrao de equipamentos e padres e manuteno - Nesta etapa
devem ser verificadas as necessidades com relao a calibrao e ajuste
dos equipamentos para a realizao do ensaio de acordo com procedimento institucionais bem como estabelecido o plano de manuteno peridica
dos equipamentos utilizados. Os equipamentos e materiais devem ser
calibrados e/ou verificados periodicamente segundo critrio de uso definido pelo laboratrio. Aqueles cujos resultados de calibrao tenham sido
considerados no-conformes (erros aceitveis maiores que o estipulado)
sofrero as aes corretivas: verificao de necessidade de ajustes e
manuteno e nova calibrao. As necessidades com relao calibrao
e ajuste dos equipamentos devem ser verificadas para a realizao do
ensaio de acordo com procedimento institucionais, para controle de equipamentos de medio, inspeo e ensaios. Os equipamentos e materiais
utilizados em ensaios e anlises devem sofrer manutenes preventivas,
peridicas e rotineiras alm de calibrao peridicas, para garantir o seu
funcionamento otimizado. Eles devem estar protegidos de fatores que
afetem o seu bom funcionamento, como condies ambientais e possurem localizao adequada no laboratrio, que no introduzam contaminao ao sistema.
5. Realizao de estudos de validao, estimativa da incerteza e registro
dos dados - As formas de validao so diversas, dependendo do tipo,
complexidade e grau de exatido do ensaio e podem incluir: anlise de
sistemas de medio; calibrao dos padres de referncia ou materiais
de referncia; comparaes diretas com resultados obtidos por mtodos
normalizados; comparaes interlaboratoriais e desenvolvimento de
metodologias quando no existentes. Para tanto, nessa etapa, devem ser
definidos requisitos para avaliao de cada um dos parmetros considerados na validao.

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

A documentao dos mtodos deve incluir dados de validao, limitaes

de aplicabilidade, procedimentos para controle da qualidade, calibrao e
controle de documentos. Mtodos obsoletos devem ser descontinuados,
mas devem ser guardados para fins de arquivo e identificados claramente
como obsoletos de modo que seja possvel comparar dados novos e antigos. Quando os mtodos forem revisados, a validao precisa ser tambm
atualizada. Os resultados dos estudos de validao de mtodos de ensaios
so anexados ao Plano de Desenvolvimento e Validao de Mtodos de
Ensaios. Para cada ensaio ou estudo deve haver um plano de validao
elaborado, realizado e documentado. No caso de no aceitao dos resultados obtidos, deve-se verificar onde est a origem do problema. Assim,
pode-se decidir por realizar novos ensaios, mudar o procedimento, investir
em novos equipamentos ou ainda em treinamento para os colaboradores.
Alteraes no mtodo de ensaio podem comprometer os estudos realizados. Desta forma, sempre que uma alterao ocorrer no mtodo, um novo
estudo de validao poder ser requerido, dependendo das alteraes
realizadas. Uma vez que alteraes no mtodo de ensaio podem comprometer os estudos realizados, um novo estudo de validao dever ser
realizado sempre que uma alterao ocorrer no mtodo.
A estimativa da incerteza do ensaio deve ser medida. A fim de estimar a
incerteza geral, necessrio tratar separadamente cada fonte de incerteza para obter a contribuio total. Os componentes individuais de incerteza devem ser identificados e demonstrados estar sob controle bem como
terem a sua contribuio avaliada para a variabilidade de resultados. A
principal tarefa na atribuio de um valor para a incerteza de uma medio a identificao das fontes relevantes de incerteza e a atribuio de
um valor a cada contribuio significativa. necessrio manter um registro das fontes individuais de incerteza identificadas, o valor de cada
contribuio e a sua origem. Os componentes de incerteza podem ser
estimados com base em um modelo matemtico. Caso o clculo vlido de
incerteza no seja possvel, os componentes de incerteza devem ser identificados e razoavelmente estimados.
A validao inicial de softwares deve verificar o maior nmero possvel de
aspectos da operao de um computador. O procedimento de validao
usado para um sistema especfico e quaisquer dados registrados durante a
validao devem ser documentados. Verificaes similares devem ser
realizadas, se o uso do computador for alterado, ou aps a manuteno,
ou reviso do software. No caso da validao de um software de
processamento de resultados de ensaios, deve-se realizar um ensaio, me-

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Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

dida ou verificao para comparar com um teste realizado atravs de

outro dispositivo de medio. Programas de computador executando clculos podem ser validados por comparao com resultados gerados manualmente e registrados em papel.
6. Realizao de treinamento dos colaboradores Nessa etapa, deve ser
realizado o treinamento formal do procedimento de ensaio com os colaboradores envolvidos e realizar o registro do treinamento conforme o procedimento interno correspondente.
7. Avaliao do controle de qualidade do laboratrio - O intervalo entre as
verificaes de controle de qualidade para monitorar o desempenho dos
ensaios ser influenciado pelo nmero dos ensaios ou estudos reais, de
acordo com a atividade do laboratrio. Alguns aspectos a serem considerados nessa etapa so: a) capacitao adequada da equipe de analistas
nas tcnicas utilizadas no laboratrio; b) manuteno e calibrao de
equipamentos; c) cuidados com o material utilizado; d) realizao adequada do procedimento analtico (utilizao de brancos de amostra e amostras fortificadas, rplicas, amostras cegas e materiais de referncia, estudo de interferncias e efeitos de matriz, ensaios de recuperao), e e)
acompanhamento da qualidade das anlises por um controle de qualidade
e testes intra e interlaboratoriais.
As vrias etapas do processo analtico devem ficar sob controle do analista a fim de evitar fontes de erro. O controle das caractersticas dos
ensaios e das variveis envolvidas feito de forma contnua e prov
fundamentos para a qualidade e melhoria do processo. Uma forma de
esquematizar os dados e obter uma srie histrica da qualidade ambiental
laboratorial a utilizao de uma carta de controle que permita perceber
quando os procedimentos efetuados no foram eficientes. No caso dos
ensaios biolgicos, tambm deve ser realizado um programa de
monitorao de contaminao dos equipamentos e materiais utilizados
nos ensaios cada vez que houver algum ajuste no mtodo de
descontaminao ou problemas com o equipamento utilizado.
O intervalo entre as verificaes de controle de qualidade para monitorar
o desempenho dos ensaios ser influenciado pelo nmero dos ensaios
reais, de acordo com a atividade do laboratrio. Caso ocorra algum problema na conduo das atividades, esta dever ser refeita. A anlise crtica
das no-conformidades encontradas pode detectar tendncias de erro de
acordo com a quantificao causal e evitar a reincidncia de problemas. O

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

objetivo do plano de inspeo estabelecer um roteiro ou mtodo para as

medies. Estas medies podem ser realizadas por amostragem,
contanto que seja escolhido o tamanho apropriado da amostra. A amostra
deve ser independente, randmica e homognea, para representar apropriadamente as caractersticas da populao.

3.2. Definio de um plano de validao de mtodos qumicos

A validao de um mtodo estabelece, atravs de estudos sistemticos de
laboratrio, que o mtodo adequado finalidade, isto , suas caractersticas de desempenho so capazes de produzir resultados correspondentes s
necessidades do problema analtico. A boa prtica na validao do mtodo
descrita no Guia EURACHEM (1998). J que no existe um acordo unnime
sobre a interpretao de alguns dos termos acima, nem sobre as convenes
usadas na sua determinao, ao mencionar dados de validao, recomendvel mencionar quaisquer convenes adotadas.
As principais caractersticas de desempenho incluem: seletividade e
especificidade (descrio do mensurando); faixa de medio; calibrao e
rastreabilidade; tendncia - em alguns campos da medio qumica, o termo
recuperao usado para descrever a tendncia total; em outros campos,
recuperao usada em relao a determinados elementos de tendncia;
linearidade; limite de deteco/ limite de quantificao; robustez e preciso.
Mtodos internamente desenvolvidos devem ser adequadamente validados,
documentados e autorizados antes de uso. Quando eles estiverem disponveis, materiais de referncia com matrizes combinadas devem ser usados
para determinar qualquer tendncia, ou quando isto no for possvel, os
resultados devem ser comparados com outra(s) tcnica(s), de preferncia
baseada(s) em diferentes princpios de medio. A medio da recuperao
de analito contaminado adicionado, medio dos brancos e o estudo de interferncias e efeitos matriciais podem ser tambm usados para verificao da
tendncia ou recuperao. A estimativa da incerteza deve fazer parte deste
processo de validao e, alm de cobrir os fatores acima, deve abordar
questes, tais como a homogeneidade e estabilidade das amostras.
Os planos de validao de cada ensaio qumico sero estabelecidos pela
equipe envolvida no mesmo. A documentao dos mtodos deve incluir dados
de validao, limitaes de aplicabilidade, procedimentos para controle da
qualidade, calibrao e controle de documentos.

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Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

As caractersticas de desempenho da validao citadas acima so interrelacionadas, muitas delas contribuindo para a incerteza total de medio, e
os dados gerados podem ser usados para avaliar a incerteza de medio
durante a validao. A incerteza de medio caracteriza a faixa de valores,
dentro da qual o valor real deva se situar, com um nvel de confiana especificado. Para que as medidas sejam de valor prtico, necessrio ter algum
conhecimento de sua confiabilidade ou incerteza. Uma declarao da incerteza associada a um resultado transmite ao cliente a qualidade do resultado.
Cada medida possui uma incerteza a ela associada, resultante de erros originados dos vrios estgios de amostragem e anlise e do conhecimento imperfeito de fatores afetando o resultado. Na obteno ou estimativa da incerteza
relativa a um mtodo e analito especficos, essencial assegurar que a
estimativa considere explicitamente todas as fontes possveis de incerteza, e
avalie componentes significativos. A principal tarefa na atribuio de um
valor para a incerteza de uma medio a identificao das fontes relevantes de incerteza e a atribuio de um valor a cada contribuio significativa.
As contribuies distintas precisam ser ento combinadas, a fim de fornecer
um valor global.
Tipicamente, as contribuies de incerteza para resultados analticos podem
incidir em quatro grupos principais (ANVISA, 2004):
i) Contribuies a partir da variabilidade aleatria de curta durao, tipicamente estimada a partir dos experimentos de repetitividade.
ii) Contribuies tais como efeitos do operador, incerteza de calibrao,
erros de graduao de escala, efeitos de equipamento e laboratrio, estimativas a partir dos experimentos de reprodutibilidade entre os laboratrios, intercomparaes internas, resultados dos ensaios de proficincia ou
por julgamento profissional.
iii) Contribuies fora do escopo dos experimentos entre laboratrios, tais
como incerteza dos materiais de referncia.
iv) Outras fontes de incerteza, tais como variabilidade da amostragem
(falta de homogeneidade), efeitos de matriz e incerteza sobre hipteses
subjacentes (tais como hipteses sobre integridade da derivao).
Um registro precisa ser mantido das fontes individuais de incerteza
identificadas, o valor de cada contribuio e a sua origem. Os componentes

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

de incerteza podem ser estimados com base em um modelo matemtico.

Tendo em vista o grande nmero de clculos gerados, clculos estes relativamente demorados e complexos, passou-se a perceber a inviabilidade de um
sistema de gerenciamento que no fosse informatizado, devido ao grande
tempo dispensado em todo este processo de gerao de resultados (NASCIMENTO; SEVERO, 2003).

3.3. Definio de um plano de validao de mtodos biolgicos

A harmonizao da validao dos protocolos desejvel para a validao dos
procedimentos analticos a serem credenciados atravs de normas e legislao. Os mtodos para ensaios biolgicos no so to bem definidos quanto
para os compostos qumicos. Contudo, devido variedade de mtodos
microbiolgicos e biolgicos, aceito que a validao reflita as reais condies de teste. Assim, os planos de validao de cada ensaio biolgico sero
estabelecidos pela equipe envolvida no mesmo caso a caso.
Os protocolos para validao de ensaios biolgicos podem ser planejados em
duas vertentes distintas. Na primeira, faz-se uma comparao entre dois
mtodos e a comparao entre eles ser usada para a obteno de
parmetros estatsticos de concordncia entre os mtodos. Na segunda,
trata-se de uma avaliao de um mtodo prprio ou do desenvolvimento de
um novo mtodo.
Em anlises microbiolgicas, o processo de quantificao de colnias complexo e inclui vrios passos, sendo os mais importantes: amostragem da
poro de teste, preparao da suspenso inicial e das diluies decimais
consecutivas, isolamento, incubao e contagem das colnias. A maioria
desses componentes pode ser medida e avaliada. Outros componentes como,
por exemplo, estabilidade da amostra deve ter a sua importncia considerada
para a variabilidade de resultados. Tradicionalmente, a estimativa da incerteza da quantidade de colnias viveis feita atravs da distribuio de Poisson
e geralmente pequena se considerada somente a repetitividade da contagem feita por um analista.
Na estimativa da incerteza total, deve ser considerada a incerteza de cada
um dos componentes que contribuem para a mesma sendo que a maioria das
incertezas em microbiologia pode ser considerada independente. Desta forma, quando o resultado do teste fruto de componentes com incertezas

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Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

estimadas ou conhecidas, como, por exemplo, do volume do inculo e do mtodo de leitura do resultado, obtm-se a incerteza combinada (NIEMELA, 2003).
A importncia dos parmetros relacionados incubao parece ser considerada como desprezvel j que no est includa entre os fatores de incerteza
comumente avaliados em mtodos de cultivo. Quanto ao tempo de incubao, a experincia sugere que desvios de horas do tempo especificado no
afetam os resultados significativamente (CORRY et al., 2007). Contudo, a
importncia deste parmetro para a incerteza do mtodo pode ser avaliada
durante as repeties efetuadas para a validao do mesmo.
Caso o clculo vlido de incerteza no seja possvel, os componentes de incerteza devem ser identificados e razoavelmente estimados. Assim, por exemplo, em
uma anlise microbiolgica qualitativa, a preciso no pode ser expressa como
um desvio padro ou um desvio padro relativo, mas pode ser expressa como
taxas, verdadeiro e falso positivo (e negativo); caso seja seguida de identificada
por mtodos moleculares (sequenciamento da subunidade 16S rDNA) com similaridade de 98% e confirmado pelo mtodo de identificao por cromatografia
gasosa dos cidos graxos da membrana celular. Esta dever ser relacionada
entre os componentes da incerteza (CORRY et al., 2007).
Em testes realizados com organismos vivos, o comportamento dos organismos teste depende de condies ambientais no laboratrio. Desta forma,
deve-se avaliar as condies de instalaes como temperatura e
luminosidade que podem afetar os resultados e contribuir para a incerteza
(MOREL et al., 2006). Tambm podem ser usados controles positivos e/ou
negativos em condies padronizadas, alm do controle histrico dos resultados obtidos anteriormente.
O valor do controle obtido com os dados histricos depende da qualidade
deste ltimo. Eles so teis quando se trata de experimentos semelhantes
padronizados e realizados no mesmo laboratrio (FESTING; ALTMAN, 2002).
Esse controle pode ser feito atravs de grficos que apresentem uma linha
central esboada como a mdia geral obtida em um determinado ensaio.
Assim, devido a vrias possibilidades de interpretaes, melhor fornecer
instrues especficas para a anlise dos controles, de como interpretar os
resultados e o que fazer baseado nestes resultados. Para tanto, necessrio
definir regras de aceitao e rejeio dos dados com o estabelecimento de
uma regra estabelecendo claramente estes limites.

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

3.4. Definio de um plano de validao de mtodos

computacionais (softwares)
A validao inicial deve verificar o maior nmero possvel de aspectos da
operao de um computador. O procedimento de validao usado para um
sistema especfico e quaisquer dados registrados durante a validao devem ser
documentados. Verificaes similares devem ser realizadas, se o uso do computador for alterado, ou aps a manuteno, ou reviso do software. Programas
de computador executando clculos podem ser validados por comparao com
resultados gerados manualmente. Para a verificao da adequada operao de
planilhas de clculos, dever ser executada uma comparao direta dos mesmos clculos realizados pela planilha com os clculos feitos manualmente,
registrados em papel.
Dentre os mtodos gerenciais de validao de software, h a norma ISO 90003 (Normas de Gesto da Qualidade e Garantia da Qualidade - Parte 3) que
define diretrizes para facilitar a aplicao da norma ISO 9001 a organizaes
que desenvolvem, fornecem e mantm software. Esta norma destina-se a
fornecer orientao quando um contrato entre duas partes exigir a demonstrao da capacidade do fornecedor em desenvolver, fornecer e manter produtos
de software. Contudo, a ISO 9000-3 trata de quais processos a organizao
deve ter e manter, mas no orienta quanto aos passos que devem ser seguidos
para chegar a desenvolver estes processos - nem de como aperfeio-los. A
melhoria contnua do processo de software tratada, por exemplo, pelo modelo
CMM (Capability Maturity Model).
O modelo CMM reuniu as melhores prticas de gerenciamento e desenvolvimento de software, dando origem a uma metodologia utilizada para a definio e avaliao das prticas chaves do desenvolvimento de projetos de
software. O modelo CMM teve como principal fundador o Departamento de
Defesa dos Estados Unidos. O conceito central do CMM o desenvolvimento
dos processos que envolvem projetos de software, organizados por reas
chaves, que permitem a empresa atingir um grau de maturidade (http://
www.cin.ufpe.br/~mjmcj/cmm/visao_geral.html).
Quando um computador for usado para coletar e processar dados associados a
ensaios qumicos ou biolgicos para validao daquela funo, geralmente suficiente assumir a operao correta, se o computador produzir respostas previstas, quando a entrada for com parmetros conhecidos, pois muitas vezes o software no
acessvel. Em ensaios, verificaes adequadas sobre as funes de coleta e mani-

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na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

pulao de dados podem ser feitas, usando-se um Material de Referncia.

Caso as planilhas estejam consideradas adequadas, estas sero protegidas por
senhas de acesso, que impedem alteraes indevidas. Os planos de validao de
cada software sero estabelecidos pela equipe envolvida no mesmo. A transmisso eletrnica de dados deve ser verificada, para garantir que nenhuma
degradao ocorra durante a transmisso (ANVISA, 2004). Isto pode ser realizado no computador, pelo uso de arquivos de verificao, mas, sempre que
prtico, a transmisso deve ser segurada por uma cpia impressa dos dados.
Deve ser observado que algumas falhas somente iro ocorrer, quando um grupo
especfico de parmetros for inserido. Assim, deve-se verificar a presena de
mensagens de erro.
Por fim, os sistemas automatizados controlados por computador devero ser
verificados quanto a operao satisfatria (incluindo desempenho em circunstncias extremas) e estabelecimento da confiabilidade do sistema, por um plano
de verificao e manuteno do sistema. Uma considerao importante que o
computador, interfaces e fiao de ligao tenham suficiente capacidade para
as tarefas requeridas. Se qualquer parte do sistema for sobrecarregada, poder
haver perda de dados.

4. Consideraes Finais
Os conceitos de validao de mtodos continuam a evoluir e esto sempre sob
considerao. A qualidade dos resultados gerada est diretamente relacionada
com a qualidade do processo de validao de mtodos. Nesse sentido, sempre
pertinente ressaltar que a validao de mtodos deve ser planejada antes de seu
desenvolvimento e execuo, uma vez que a estratgia de validao especfica para cada ensaio.
A proposta deste trabalho foi fornecer uma viso dos conceitos e procedimentos de validao utilizados no desenvolvimento de mtodos qumicos, biolgicos
e computacionais. Este artigo mostrou uma proposta de metodologia para desenvolvimento e validao de mtodos de ensaio, composta de diferentes etapas que cobrem os requisitos da NBR ISO/IEC 17025:2005. Para tanto, vrias
discusses foram inseridas no decorrer do texto, embora no seja objetivo deste
trabalho esgotar a discusso do tema. Antes, esperado que as informaes
obtidas a partir desse trabalho evoquem o detalhamento de novos mtodos de
validao de ensaios em reas carentes como os ensaios biolgicos.

Aspectos gerais da validao de mtodos qumicos, biolgicos e computacionais

na gesto de qualidade de resultados de pesquisa

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