Biotransformacin De Fase II

La Biotransformacin Fase II, tal como se mencion anteriormente, consiste

en reacciones de conjugacin, catalizadas por un conjunto de enzimas, la
mayora de ellas localizadas en el citosol.
Las reacciones consisten en agregar un grupo polar de tamao
relativamente grande a los productos de las reacciones de la Fase I o a los
xenobiticos originales que contienen los grupos funcionales apropiados
para ser substratos de las reacciones de conjugacin. Los donadores de los
grupos polares tienen que ser compuestos de alta energa, ya que las
reacciones de conjugacin no son termodinmicamente favorables.
El resultado que se logra con estas reacciones es un gran incremento de la
solubilidad en agua del xenobitico.
Glucuronidacin: La reaccin consiste en agregar un grupo glucuronil en
un grupo hidroxilo, amino o sulfhidrilo del txico. La enzima que cataliza la
reaccin es la UDP glucuronil transferasa y el donador del grupo polar es el
cido UDP glucurnico. La enzima se encuentra localizada en el retculo
endoplsmico, a diferencia de las otras enzimas de la Fase II que se
localizan en el citosol. Los compuestos glucuronidados son muy solubles en
agua y aparecen en la orina y en la bilis. Existe un nmero muy grande de
xenobiticos que son substrato de esta enzima.
Sulfatacin: La reaccin consiste en la transferencia de un grupo sulfato
de PAPS (3-fosfoadenosil-5-fosfosulfato) a un grupo hidroxilo o amino en el
xenobitico. La reaccin es catalizada por sulfotransferasas, enzimas
solubles localizadas en el citosol. El producto de la reaccin es un sulfato
orgnico ionizado, muy soluble en agua que se excreta en la orina.
Aminoacidacin: La reaccin consiste en la formacin de una unin
peptdica entre el grupo amino de un aminocido, normalmente glicina, y un
carboxilo en el xenobitico. Obviamente para que esta reaccin se pueda
dar es indispensable que el xenobitico tenga un grupo carboxilo. Estos
conjugados son eliminados en la orina debido a que el sistema de
transporte del rin reconoce al aminocido.
Glutationizacin: La glutationizacin consiste en la adicin de glutatin
(GSH), a travs de su grupo sulfhidrilo (nucleoflico), con un carbn
electroflico del xenobitico. La reaccin es catalizada por la glutatin-Stransferasa y el glutatin mismo es el cofactor de alta energa. El glutatin
es un tripptido, Glu-Gli-Cis. El compuesto que se forma se rompe en el
rin produciendo el Cis-derivado, que se acetila para producir un
conjugado del cido mercaptrico, el cual se excreta en la orina. Esta
reaccin es importante en la destoxificacin de epxidos y perxidos. La
glutatin-S-transferasa se encuentra en clulas de muy diversos tejidos. Si
esta reaccin disminuye significativamente el nivel celular de glutatin, el
organismo puede sufrir daos considerables debido a la peroxidacin de
lpidos o por otros tipos de agresin qumica.

Metilacin: La metilacin juega un papel menor en la biotransformacin de

xenobiticos, excepto en la destoxificacin de arsnico. Los compuestos
inorgnicos de arsnico se transforman en metabolitos monometilados y
dimetilados que son menos txicos. La reaccin consiste en la transferencia
de un grupo metilo a un hidroxilo, amino o sulfhidrilo, es catalizada por las
metiltransferasas y el compuesto donador de grupos metilo es la SAM (Sadenosil-metionina). La metilacin es importante en la transformacin de
compuestos endgenos y forma parte en la biosntesis de varios
aminocidos y esteroides, as como en la metilacin del ADN.
Las reacciones de la Fase I activan grupos funcionales, la metilacin los
enmascara impidiendo que participen en reacciones de la fase II, por lo
tanto, si se metilan los xenobiticos se disminuye la tasa de eliminacin del
compuesto.
Como se puede ver, varias de las reacciones de la Fase II requieren de los
mismos grupos funcionales, as que los compuestos que pueden ser
modificados por ms de una enzima entran en reacciones que son
mutuamente competitivas.
Qu tanto tiene lugar una reaccin determinada depende, de la capacidad
del tejido para llevar a cabo la reaccin y de la afinidad de la enzima por el
substrato. La capacidad est definida por la cantidad de cofactor presente
en el tejido cuando ste es expuesto al xenobitico.

REACCIN

CAPACIDAD

AFINIDAD

Glucuronidacin

Alta

Baja

Aminoacidacin

Media

Media

Sulfatacin

Baja

Alta

Glutationizacin

Baja

Alta

Acetilacin

Variable

Variable

Por ejemplo, el fenol contiene un grupo hidroxilo y puede ser

transformado por una glucuroniltransferasa o una sulfotransferasa. La
capacidad de estas reacciones depender de la concentracin celular de
UDP glucuronato y PAPS.
Cuando se administran cantidades pequeas de fenol, aparece el
sulfoester en la orina, si se administran cantidades crecientes de fenol,
se incrementar la concentracin del sulfoester y posteriormente
aparecer el derivado glucuronidado. Esto significa que el fenol tiene
mayor afinidad por la sulfotransferasa, esta reaccin proceder hasta

que se agote la disponibilidad de PAPS. Cuando se agota el PAPS se

empieza a utilizar el UDP glucuronato. En el caso de la N-acetilacin, las
afinidades y capacidades pueden cambiar debido al polimorfismo de
esta enzima (acetiladores lentos contra los acetiladores rpidos).

Bioactivacin

Como mencionamos anteriormente, la bioactivacin es el conjunto de

reacciones metablicas que incrementan la toxicidad de los xenobiticos, o
sea que los metabolitos resultantes de la biotransformacin de la
substancia absorbida son ms txicos que el compuesto original.
La mayora de las bioactivaciones son producidas por las enzimas de la Fase
I, aunque algunas de las enzimas de la Fase II tambin pueden bioactivar
algunos xenobiticos. Este efecto lateral indeseable de la biotransformacin
ocurre cuando se producen especies qumicas muy reactivas, normalmente
compuestos electroflicos con gran afinidad por los nuclefilos. El ADN, las
protenas y los lpidos son nuclefilos.
La mayora de las reacciones en los que se generan productos de aduccin
de ADN y protenas se deben a la interaccin de estas macromolculas con
los productos de las reacciones de bioactivacin. El acetoaminofn se Nhidroxila en el hgado, va un Citocromo P-450. El producto de la
hidroxilacin
reacciona
con
protenas
del
hgado,
produciendo
hepatotoxicidad.

La aduccin del ADN es un tema de estudio de gran importancia, ya que da

por resultado la transformacin de las clulas normales en cancerosas. El
benzo-alfa-pireno es un cancergeno que es bioactivado en el hgado,
formando un epoxidiol altamente electroflico que se liga al ADN.
Existen varios mecanismos por medio de los cuales una substancia puede
incrementar la toxicidad de otra:
Induccin de Enzimas: Un xenobitico puede inducir una enzima que
bioactiva a otro xenobitico. Por ejemplo el etanol induce la sntesis del
Citocromo P-450 que bioactiva al tetracloruro de carbono. Esta interaccin
hace que el tetracloruro de carbono sea ms txico cuando se administra
junto con alcohol
Inhibicin de enzimas. La inhibicin tambin puede incrementar la
bioactivacin. Por ejemplo, una substancia que bloquee la sntesis de los
Citocromos P-450 har que el organismo se vuelva ms susceptible a los
txicos que son destoxificados por los P-450. Las substancias que inhiben la
sntesis de Citocromo P-450 tambin pudieran servir de antdoto si la
especie txica es producto de la bioactivacin del xenobitico por el
Citocromo P-450
Las rutas de Bioactivacin son las siguientes:
El tejido blanco contiene las enzimas para bioactivar el xenobitico y es el
sitio activo para la especie txica. El ejemplo clsico de esta ruta es la
bioactivacin del tetracloruro de carbono va la deshalogenacin por el P450 del hgado, produciendo el radical libre triclorometilo, el cual reacciona
con protenas y lpidos del hgado.
Un tejido no blanco bioactiva al xenobitico, el cual experimenta otra
bioactivacin en el tejido blanco. Ejemplo, el benceno es oxidado a fenol por
los P-450 del hgado y este compuesto se transporta hasta la mdula sea
donde se transforma en hidroquinol, un diol que causa dao en la mdula
sea.
Un tejido no-blanco bioactiva el xenobitico, el cual tiene sus efectos en
el tejido blanco. Ejemplo: el hexano se transforma en 2,5-hexanodiona por
la accin del P-450 y el alcohol deshidrogenasa del hgado. Este metabolito
produce ligaduras cruzadas en los neurofilamentos causando dao en
nervios perifricos.

Toxicocintica
Ya hemos visto que el comportamiento del txico en el organismo est
determinado por los procesos de absorcin, distribucin, biotransformacin y
excrecin.
La interaccin dinmica de todos los procesos que constituyen el ADME,
determina el tiempo que permanecer un agente dentro del organismo
despus de que ste ha sido expuesto a una dosis determinada. Al estudio de
la velocidad de cambio de la concentracin de las especies txicas dentro del
organismo se le conoce como toxicocintica.
Las tasas de cambio que se presentan en cada fase del ADME se pueden
modelar matemticamente e integrarlas en un modelo que represente la
dinmica global del txico dentro del organismo.
Cada proceso, sea este de cambio de lugar y/o de identidad qumica, se puede
representar por una ecuacin diferencial en la que la derivada de la
concentracin con respecto al tiempo en un sitio determinado, se expresa
como una funcin de la concentracin en ese lugar. La constante de
proporcionalidad se denomina velocidad especfica y normalmente se
representa por la letra "k".

El conjunto de ecuaciones diferenciales simultneas integran el modelo que

representa el cambio global de la concentracin del txico. El modelo se puede
usar para predecir la magnitud de la respuesta txica en funcin de la
exposicin, utilizando la informacin generada por el muestreo biolgico y los
biomarcadores.
Si se quisiera representar el proceso en toda su complejidad resultaran
modelos prcticamente imposibles de manejar, as que se establecen una serie
de suposiciones plausibles que permiten simplificar el modelo.
Podemos representar al cuerpo por un modelo de un solo compartimiento que
sigue una cintica de primer orden si se supone que se llega rpidamente al
equilibrio en la interface sangre-tejido. En este caso, el cambio de
concentracin en plasma refleja el cambio de concentracin en los tejidos. Este
modelo establece que la velocidad de eliminacin de un compuesto, en un
momento dado, slo es proporcional a su concentracin. La variable
eliminacin incluye la expulsin del compuesto por todas las rutas de excrecin
y la desaparicin por biotransformacin. La cintica de primer orden se
representa matemticamente de la siguiente manera:

dC/dt = - kelC
Donde
C = concentracin plasmtica
kel = constante de velocidad de eliminacin de
primer orden
t = tiempo al que se muestre la sangre.

Este modelo indica que la velocidad global a la que procede el ADME de un

compuesto es directamente proporcional a la concentracin y que la
velocidad no vara linearmente con la dosis, sino que su variacin es

exponencial. La velocidad de eliminacin es alta cuando la dosis es alta, pero

disminuye fuertemente a medida que la concentracin del txico disminuye.
Vida media es el tiempo que tarda el organismo en reducir a la mitad la
concentracin del txico.
Si un compuesto tiene una vida media de 24 horas y su concentracin en un
momento dado es 40 mg/L, en un da se bajar la concentracin a 20 mg/L,
pero bajar esta concentracin otros 20 mg/L (bueno, casi 20 mg/L, digamos
19.8 mg/L) requerir de ms de 6 das.
La constante kel se puede evaluar graficando la concentracin plasmtica
contra el tiempo en escala semilogartmica. Se obtiene una lnea recta con
pendiente - kel.
La mayora de los compuestos siguen una cintica de primer orden, pero no
todos, el alcohol etlico sigue una cintica de orden cero, en la cual la velocidad
de eliminacin es independiente de la concentracin y slo es funcin del
tiempo. La cintica de orden cero se presenta cuando se saturan las enzimas
de un camino metablico. Si la concentracin de un agente es muy alta, se
saturarn las enzimas y su eliminacin mostrar una cintica de orden cero
aparente, aunque a concentraciones no saturantes presente una cintica de
primer orden. Por el contrario, los compuestos que normalmente se eliminan
siguiendo una cintica de orden cero, cuando las concentraciones son muy
bajas, su eliminacin sigue una cintica de primer orden aparente. El modelo
que representa la cintica de orden cero es:

dC/dt = Ko
Dnde: ko es la constante de velocidad de orden
cero,
C y t tienen el mismo significado que en la ecuacin
anterior

Cuando se tienen dosis repetidas el nivel del txico se aproxima a la

concentracin de estado estacionario porque las velocidades de eliminacin y
de absorcin son iguales. Se necesitan aproximadamente 5 vidas medias para
alcanzar el estado estacionario, as que los compuestos que se eliminan muy
lentamente tardan mucho en alcanzarlo.
El clculo de la concentracin en estado estacionario se hace con la siguiente
ecuacin:

C* = FD/tTs

Dnde:
C* es la concentracin en el estado estacionario;
D es la dosis;
F la biodisponibilidad o fraccin de la dosis
absorbida;
Ts es el tiempo de residencia en el organismo y
t es el intervalo entre dosis.