ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA BIOQUIMICA Y FARMACIA
NOTA:

CARRERA: BIOQUIMICA Y FARMACIA

GUIA DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA BSICA
PRACTICA 05 CRECIMIENTO MICROBIANO EN AGAR SANGRE
1.-DATOS GENERALES:
NOMBRE: Rhodney Hugo Quevedo Jadan
CODIGO: 26746
GRUPO : 05
FECHA DE REALIZACION: 2015-14-01
FECHA DE ENTREGA: 2015-01-19
2.-OBJETIVO(S):
2.1

GENERAL
Identificar qu crecimiento microbiano est presente en el cultivo
realizado con muestra de lavabos.

2.2

ESPECIFICOS

Observar qu tipos de microorganismos estn presentar en el lavabo del

laboratorio.
Diferenciar microorganismos infecciosos que han crecido en el cultivo.

3.- MARCO TERICO:

AGAR SANGRE
El agar sangre es una combinacin de un agar base (agar nutritivo) con fuente
Proteica (digeridos trpticos, digeridos proteicos de soja) el cual tiene un
agregado de 5 % de sangre ovina, (tambin puede usarse sangre humana,

para cultivos en una placa De agar) con una pequea cantidad de hidratos de
carbono naturales y cloruro sdico.
El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa tambin
para Ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos (que es un
factor de Virulencia). Observando los halos hemolticos alrededor de las
colonias se determina el
Tipo de hemlisis que posee:

alfa: halos verdosos

beta: halos incoloros
gamma: inexistencia de halos.

El

crecimiento

tanto

de

microorganismos exigentes como no

exigentes, que incluyen
Bacterias aerobias y anaerobias, aunque no es medio de eleccin para
anaerobios. Permite visualizar reacciones hemolticas que producen muchas
especies bacterianas.
Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento y cultivo de
Microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de
una gran Variedad de muestras, como para la observacin de reacciones de
hemlisis.
La aportacin de casena y peptonas de soja al agar de tripticasa-soja hace el
Medio en muy nutritivo por el suministro de nitrgeno orgnico, particularmente
Aminocidos y ppticos de cadena ms larga. La presencia de estas peptonas
en el medio Permite el cultivo de una gran variedad de grmenes aerobios y
anaerobios que crecen Rpidamente, as como los del gnero candida.
Tambin permite el crecimiento de
Tincin de Gram:
La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin diferencial
empleado en bacteriologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en

muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian Gram

(1853-1938), que desarroll la tcnica en 1884.
Se utiliza tanto para poder referirse a la
morfologa celular bacteriana, como para poder
realizar

una

primera

diferenciacin

aproximacin

bacteriana,

la

considerndose

bacterias gram positivas a las que se visualizan

de color morado, y bacterias gram negativas a
las que se visualizan de color rosa, rojo o
grosella.
Pasos para realizar la tincin
Los pasos que se han de seguir para realizar la tincin son los siguientes:
1) Se fija la muestra mediante calor.
2) Violeta cristal (tie todas las bateras, gram positivas y gram negativas)
durante 1 minuto.
3) Se fija con Lugol, 1 minuto.
4) Se decolora con una mezcla de alcohol y cetona (los gram negativos se
decoloran).
5) Safranina (colorante de contraste, que tie a los gram negativos), 1 minuto.
Los tiempos para aplicar cada colorante son orientativos. En la tincin, las gram
positivas se observarn de color azul-violeta, y las gram negativas de color
rosa.
4.- PARTE PRCTICA:
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Microscopio
Placa
Mechero de alcohol

Aguja de inoculacin
Reactivos de Gram
Aceite de inmersin
Medio de Cultivo ( agar sangre )

MTODOS Y TCNICAS

Tomamos una muestra de microorganismos existentes en el lavabo del

laboratorio en agar sangre para que se d el enriquecimiento de los

microorganismos.
Colocamos en una placa una colonia representativa del cultivo
Realizamos el flameo respectivo.
Procedemos con la tincin Gram
Dejamos secar la placa, tambin nos podemos ayudar con el mechero
Colocamos una gota de aceite de inmersin sobre la muestra teida
Observamos con lente de 100x

5.-RESULTADOS Y DISCUCIONES

En la placa preparada pude observar bacilos Gram negativos en una cantidad

muy apreciable, es decir abundantes.
6.-CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Identificamos el crecimiento microbiano producido en el medio de cultivo

con la muestra tomada de los lavabos.

Observamos qu tipo de microorganismo se encuentraba presente en la

placa preparada con ayuda del microscopio.

Diferenciamos que tipo de bacteria se trataba por medio de la tincin
Gram.

7.-BIBLIOGRAFIA:

Laboratorio de Microbiologia. (21 de 06 de 2011). Recuperado el 01 de 12

de 2014, de Tincin de Gram :
http://labmicrofarmaciaulat.blogspot.com/p/tincion-de-gram_20.html
PDF. (17 de 06 de 2013). Obtenido de AGAR SANGRE:
http://www.laanunciataikerketa.com/trabajos/manoslimpias/medios.pd
f
Web Consultas. (17 de 05 de 2013). Recuperado el 01 de 12 de 2014, de
Tincin Gram: http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincionde-gram-13399
Wikipedia. (04 de 9 de 2014). Obtenido de Agar sangre:
http://es.wikipedia.org/wiki/Agar_sangre