XVIII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica

XVIII National Congress of Biochemical Engineering

VII Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica
VII International Congress of Biochemical Engineering
X Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular
X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting

Clave: CAL152PAT20120126
IDENTIFICACION DE LOS PRINCIPALES
ANTIOXIDANTES PRESENTES EN CACAHUATES,
NUECES Y PISTACHES COSECHADAS EN MEXICO
MEDIANTE HPLC
Patricia, Rosales Martnez, Dra. Ma. del Socorro Lpez Cortez,
Dra. Sofa Arellano Crdenas.
DIRECCIN DE LOS AUTORES
Maestra en Ciencias en Alimentos. ENCB IPN. Departamento de Biofsica. ENCB IPN.
Prol. de Carpio y Plan de Ayala s/n. Col. Casco de Santo Toms. 11340. D.F., Mxico

CORREO ELECTRNICO
ninfa83@hotmail.com

XVIII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica

XVIII National Congress of Biochemical Engineering
VII Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica
VII International Congress of Biochemical Engineering
X Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular
X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting
INTRODUCCIN
El inters cada vez mayor por parte de la
poblacin a nivel mundial en el cuidado
de la salud, ha puesto de manifiesto la
necesidad de consumir alimentos con
propiedades
nutricionales
que
contribuyan a disminuir el riesgo de
padecer enfermedades (Padilla et al,
2008).
De acuerdo a estudios epidemiolgicos
realizados los alimentos de origen vegetal
en especial las frutas, vegetales,
oleaginosas, vino tinto y jugos presentes
en la dieta, pueden ejercer un efecto
protector contra algunas enfermedades
tales como el cncer, trastornos
cardiovasculares y cerebrovasculares.
Una alternativa saludable y de bajo costo
es el consumo habitual de oleaginosas
como el ssamo, nueces, almendras,
pistaches, semillas de girasol, de
calabaza, canola, cacahuate, etc; los
cuales cuentan con un importante valor
nutricional y una amplia variedad de
compuestos bioactivos con capacidad
antioxidante como la vitamina E, y una
mezcla compleja de compuestos fenlicos
que son benficas a la salud (Luna y
Guerrero, 2010).
Los trabajos de investigacin que se han
realizado hasta la fecha, se han enfocado
al estudio de sus componentes qumicos y
recientemente a la atencin de los
compuestos
antioxidantes.
Los
antioxidantes, se caracterizan por tener
por funcin primordial impedir o retrasar
la oxidacin de diversas sustancias cuyas
reacciones pueden provocar alteraciones

fisiolgicas importantes que pueden

desencadenar diversas enfermedades
(Zamora, 2007). De acuerdo con
numerosos estudios, algunos de los
antioxidantes con mayor importancia
identificados en las oleaginosas son
resveratrol,
catequina,
epicatequina,
quercetina, entre otros (Lotis et al, 2009).
Dada la importancia de los hallazgos de
estas investigaciones, se hace necesario
llevar a cabo estudios similares a los
anteriormente
citados
empleando
oleaginosas que se producen en Mxico,
ya que en la literatura consultada a la
fecha, no hay reportes sobre la presencia
de estos antioxidantes en las muestras de
cacahuates,
nueces
y
pistaches
cosechados en nuestro pas.
OBJETIVOS
Realizar la identificacin de los cuatro
antioxidantes
ms
importantes
(resveratrol, catequina, epicatequina y
quercetina) en las muestras de cacahuates,
nueces y pistaches por el mtodo de
cromatografa de alta resolucin (HPLC).
MATERIALES Y MTODOS
Se prepararon soluciones metanlicas de
los
estndares
puros
(resveratrol,
catequina, epicatequina y quercetina) a
concentraciones (150, 300 y 600 ppm). Se
pesaron muestras de cacahuate crudo y
tostado variedad Espaol y Virginia,
nuez Castilla, San Luis Potos y Western
as como pistache crudo y tostado
variedad
Kerman,
previamente
desgrasadas.

28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, Mxico.

e-mail: colegioibq@hotmail.com

www.cmibq.org.mx

XVIII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica

XVIII National Congress of Biochemical Engineering
VII Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica
VII International Congress of Biochemical Engineering
X Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular
X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting
Se realizaron extracciones metanlicas y
se disolvieron en la fase mvil. Se emple
la columna OmniSpher C18 (VARIAN)
(150 x 4.6 mm), tamao de partcula 5
m. La inyeccin fue automtica y el
volumen de inyeccin fue de 40 L. La
velocidad de flujo constante fue de 1.0
mL/min. Todos los disolventes utilizados
fueron grado HPLC.

El cromatograma obtenido se presenta a

continuacin en la figura 1.

Epicatequina

Catequina

Resveratrol
Quercetina

DESARROLLO
Se obtuvieron las condiciones ptimas
para realizar el anlisis cualitativo. Se
prepararon viales con extractos de las
muestras, para realizar la inyeccin de 40
L al equipo de HPLC. Las absorbancias
utilizadas para cada estndar fueron:
resveratrol (306 nm), catequina y
epicatequina (280 nm), quercetina (370
nm).
Los cromatogramas obtenidos de cada
estndar proporcionaron informacin
cualitativa acerca de los componentes de
la muestra, mediante su tiempo de
retencin.
Para
obtener
los
cromatogramas se realizaron pruebas
preliminares variando la concentracin de
cada estndar (150, 300 y 600 ppm) para
lograr obtener los picos que se observaran
dentro de las caractersticas del
cromatograma
y
as
lograr
la
identificacin.
RESULTADOS
Se realiz una mezcla de estndares
(resveratrol, catequina, epicatequina y
quercetina) para confirmar el tiempo de
retencin de cada compuesto estndar.

Figura 1: Cromatograma de mezcla de

estndares (Catequina, Epicatequina,
Resveratrol y Quercetina).
De los cromatogramas obtenidos se
obtuvieron los tiempos de retencin
caractersticos de cada compuesto puro el
cual se emple para la identificacin de
estos componentes en las muestras. Estos
se presentan en la tabla I.
Tabla I: Tiempos de retencin
alcanzados de los estndares utilizados
Compuesto

(nm)

Resveratrol
Catequina
Epicatequina
Quercetina

306
280
280
370

Tiempo de
retencin
compuesto puro
(min)
19.11
4.49
11.41
21.16

28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, Mxico.

e-mail: colegioibq@hotmail.com

www.cmibq.org.mx

XVIII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica

XVIII National Congress of Biochemical Engineering
VII Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica
VII International Congress of Biochemical Engineering
X Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular
X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting

En las muestras de cacahuate crudo y

tostado variedad Espaol y Virginia, se
identificaron picos a los mismos tiempos
de retencin de resveratrol, catequina y
epicatequina.
Quercetina
no
fue
identificada en estas muestras con el
mtodo de extraccin empleado.
Nuez Castilla, San Luis Potos y
Western.
En las muestras de nuez de Castilla, San
Luis Potos y Western slo se logr
identificar picos con tiempos de retencin
que corresponden a la catequina y
epicatequina. Resveratrol y quercetina no
fueron identificados con el mtodo de
extraccin empleado.
Pistache crudo mexicano y tostado
origen Iran.
Para la muestra de pistache crudo de
origen mexicano y tostado origen iran se
identificaron picos con tiempos de
retencin correspondientes a la catequina
y epicatequina. Resveratrol y quercetina
no fueron identificados con el mtodo de
extraccin empleado.
A manera de ejemplo, en la figura 2, se
presenta el cromatograma de una de las

Resveratrol

Epicatequina

Cacahuate crudo y tostado variedad

Espaol y Virginia.

muestras de cacahuate crudo variedad

Virginia.
Catequina

Una vez obtenidos los cromatogramas de

cada compuesto puro, se procedi a
realizar el anlisis de las muestras de las
oleaginosas.

Figura 2: Cromatograma de cacahuate

crudo variedad Virginia.

DISCUSIN
La presencia de estos antioxidantes en las
muestras de cacahuate, nuez y pistache se
deben principalmente a lugar de origen,
tiempo
de
cosecha,
tiempo
de
almacenamiento y en general a los
mtodos utilizados para la extraccin.
Los
compuestos
antioxidantes
identificados en las muestras estudiadas
como resveratrol, catequina, epicatequina
y quercetina se consideran molculas
bioactivas por lo que estas oleaginosas
pertenecen al grupo de alimentos
funcionales.
De manera general, el reconocimiento de
las propiedades antioxidantes de los
compuestos polifenlicos, su gran
abundancia en nuestra dieta, y su papel en
la prevencin de diversas enfermedades
asociadas al estrs oxidativo, tales como
el
cncer
y
las
enfermedades
cardiovasculares y neurodegenerativas

28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, Mxico.

e-mail: colegioibq@hotmail.com

www.cmibq.org.mx

XVIII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica

XVIII National Congress of Biochemical Engineering
VII Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica
VII International Congress of Biochemical Engineering
X Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular
X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting
dan como resultado un mayor inters por
los investigadores y fabricantes de
alimentos.
CONCLUSIONES
En las muestras de cacahuate crudo y
tostado variedad Espaol y Virginia se
identificaron los antioxidantes resveratrol,
catequina y epicatequina.

3. Padilla F, Rincn A. 2008. Contenido

de
polifenoles
y
actividad
antioxidante de varias semillas y
nueces. ALAN. 58(3):303-8
4. Zamora D. 2007. Antioxidantes
micronutrientes en lucha por la salud.
Rev. Chil. Nutr. 34 (1):1-23

En las muestras de nuez Castilla, San

Luis Potos y Western, as como en el
pistache crudo origen mexicano y tostado
origen iran se identificaron los
antioxidantes catequina y epicatequina.
Con este tipo de trabajos se puntualiza la
importancia del valor nutricional y a las
propiedades funcionales de este tipo de
oleaginosas las cuales benefician a la
salud, adems del valor comercial que
representan estas en nuestro pas.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Lotis L, Resurreccin A. 2009.
Development of a reversed-phase
high
performance
liquid
chromatography
(RP-HPLC)
procedure for the simultaneous
determination of phenolic compounds
in peanut skin extracts. Food
Chemistry. 117:356363
2. Luna J, Guerrero J. 2010. Algunas
caractersticas
de
compuestos
presentes en los frutos secos y su
relacin con la salud. Temas Selectos
de Ingeniera de Alimentos. UDLAP,
4(1):37-48.
28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, Mxico.
e-mail: colegioibq@hotmail.com

www.cmibq.org.mx