Principios basicos de las pruebas de

fotoestabilidad de Farmacos
Daniel Ricardo Delgado M.Sc
Universidad Nacional de Colombia

16 de mayo de 2013

1.

Introducci
on

Muchas sustancias qumicas reaccionan al ser expuestas a la radiacion electromagnetica; los f

armacos no son una excepcion. La radiacion electromagnetica
entre 200 y 400 nm tiene un interes particular, sin olvidar que la region del visible con longitudes de onda entre 400 y 800 nm, tambien es potencialmente
nociva para los intereses de estabilidad de farmacos fotosensibles. Las formulaciones se exponen a una variedad de fuentes de radiacion electromagnetica
durante la fabricaci
on, envasado, distribucion, en los estantes de farmacia, y en
el punto de uso. Estas exposiciones pueden incluir lamparas de vapor de Hg,
luces fluorescentes e incandescentes, luz de sol filtrada a traves de una ventana
y la luz solar directa.
Las pruebas de fotoestabilidad se llevan a cabo con el fin de determinar el grado en que la fotorreacciones afectan la composicion de las formas farmaceuticas adem
as de determinar los posibles mecanismos de las fotorreacciones de los
f
armacos. Estas pruebas consisten en iluminar los productos de manera controlada para determinar si son fotoestables o cuantificar el grado de fotodegradacion.
Las fotorreacciones de f
armacos pueden conducir a una disminucion de su concentraci
on y por lo tanto una perdida de la eficacia, la formacion de productos
t
oxicos estables, y la formacion de intermediarios de vida corta toxicos (por
ejemplo, los radicales libres). Tambien existe la posibilidad de fotorreacciones
in vivo, cuando la radiaci
on electromagnetica alcanza el interior del ojo y en
menor medida en los vasos sanguneos y los tejidos.
Los estudios de fotoestabilidad son de vital importancia en el desarrollo de
nuevos f
armacos, puesto que permiten de manera temprana dise
nar estrategias
que permitan abordar este problema ya sea cambiando la estructura molecular
del f
armaco o recurriendo a procesos de fotoproteccion. De no ser posible, las
investigaciones para tal desarrollo pueden ser detenidas a tiempo.

2.

Conceptos B
asicos

La presencia de grupos funcionales pueden impartir posible fotolabilidad a

moleculas de f
armacos. Entre los cuales se tienen: Carbonilo, nitroaromaticos,
N oxido, alquenos (C = C), cloruros de arilo, enlaces debiles C H y O H,
sulfuros y polienos.
Algunos de estos grupos funcionales imparten fotolabilidad como resultado de
sus propiedades crom
oforos (carbonilo) y algunos de ellos imparten fotolabilidad
en virtud de sus enlaces covalentes debiles. (ejemplo, enlaces O H)
Una lista de varios enlaces comunes y sus respectivas energas de enlace (Eb ) y
las longitudes de onda correspondientes (max ) se presentan en la Tabla 1
Enlace
O-H
H-H
C-H
N-H
C-O
C-C
C-Cl
Cl-Cl
Br-Br
O-O

3.

Eb (KJ/mol)
465
436
415
390
360
348
339
243
193
146

max
257
274
288
307
332
344
353
492
620
820

Fotorreactividad

La primera ley de la fotoqumica, descrita por Grotthus en 1817 y Draper en

1843, establece que s
olo la radiacion que es absorbida por una molecula puede ser
eficaz en la producci
on de cambios fotoqumicos en esa molecula. Una apicacion
apropiada de la primera ley en el contexto de las pruebas de fotoestabilidad de
f
armacos es que s
olo la radiacion que es absorbida por un sistema (formulacion)
puede ser eficaz en la produccion de cambios fotoqumicos en ese sistema. Por
lo tanto, una formulaci
on que no absorbe energa electromagnetica incidente no
se someter
a a la fotodegradacion.
Consideremos la absorci
on de absorcion se de radiacion ultravioleta y visible
por una molecula
F + h F
(1)
en donde F es la molecula del farmaco, h es la energa electromagnetica involucrada y F es la molecula del farmaco en el estado electronicamente excitado.
La molecula de f
armaco puede disipar la energa absorbida de varias maneras.

3.1.

Fotorreactividad directa

Fotorreactividad directa se refiere a la situacion en la que las moleculas de

f
armaco absorben energa electromagnetica UV o visible lo que resulta en la
2

perdida del f
armaco y la formacion de productos:
F + h F

(2)

F P

(3)

F F + Calor(Conversion interna)

(4)

F F + h (F luorecencia)

,,

F F + h (F osf orecencia)

F + M F + M (T ransf erencia energia)

(5)
(6)
(7)

donde F es la molecula de farmaco, h es la energa electromagnetica de una

energa dada a una frecuencia y longitud de onda, F es la molecula de farmaco
en un estado electr
onicamente excitado, h , y h ,, son fotones emitidos a traves
de fluorescencia y fosforescencia, respectivamente, M es una molecula aceptora,
y M es la molecula aceptora en un estado electronicamente excitado despues
de aceptar la energa de una molecula de farmaco.

3.2.

Fotorreactividad indirecta

En el caso de fotorreacciones indirectos o sensibilizado, un componente distinto de moleculas del farmaco (aditivos o impurezas en la formulacion) absorbe
energa electromagnetica UV o visible lo que resulta en la formacion de una o
m
as especies reactivas que luego reaccionan con las moleculas del farmaco tal
como se indica a continuaci
on:
RC CR + h RC CR

RC CR RC. + .CR

(8)
(9)

RC CR + O2 RC CR + O2

(10)

RC. + O2 RCOO.

(11)

O2 + F productos

(12)

RCOO. + F productos

(13)

En donde, RC CR es una molecula organica presente como un aditivo o impureza en la formulaci

on de medicamento que absorbe energa electromagnetica
UV o visible. En algunos casos, el CR CR puede someterse a fotolisis (escinde) produciendo RC., Una especie de radicales libres reactivos que pueden
combinar con oxgeno molecular (O2 ) produciendo radicales peroxilo (RCOO)
que pueden reaccionar y por lo tanto consumir algunos farmacos. En otros casos, la energa se transfiere desde el electronicamente excitado (RC CR ) a
oxgeno molecular produciendo oxgeno molecular singlete (1 O2 ), una especie
reactiva que tambien pueden reaccionar y consumir algunos farmacos. El grado
en el que una molecula de f
armaco dado es susceptible de someterse a reacciones con radicales peroxilo y oxgeno molecular singlete depende de la estructura
de la molecula de f
armaco, la composicion de la formulacion de farmaco, y las
condiciones en las que el f
armaco esta expuesta a la energa electromagnetica.
3

3.3.

Fotorreacciones de Auto-Sensibilizaci
on

Alternativamente, el f
armaco puede, en algunos casos, actuar como un autosensibilizador:
F + h F

(14)

(15)

F + O2 F + O2
1

O2 + F productos

(16)

En donde, la molecula de farmaco electronicamente excitado (F ) transfiere energa al oxgeno molecular produciendo 1 O2 , el cual puede reaccionar, en
algunos casos, consumiendo el farmaco.

4.

Cin
etica de Fotoreacci
on de F
armacos

Para soluciones diluidas, las cuales presentan baja absorbancia (A <0,12),

la expresi
on de la velocidad para el consumo del farmaco se da de la siguiente
manera:
Z 2
d[F ]
= K[F ] = 2,303b[F ]
I  d
(17)

dt
1
donde [F ] es la concentraci
on molar del farmaco, k es la constante cinetica de
primer orden (s1 ), b es la longitud de la celda (cm), es el rendimiento
cu
antico para la fotorreacci
on, I es el flujo de fotones (einstein L1 s1 ), y 
es la absortividad molar del farmaco (M 1 cm1 ). Los lmites de la integral (1
y 2 ) se eligen con el fin de abarcar la gama de longitud de onda de interes (por
ejemplo, 290 a 400 nm). El rendimiento cuantico para la fotorreaccion se puede
definir como el n
umero de moleculas de farmaco que se someten a fotorreaccion
dividido por el n
umero de fotones absorbidos.
En los casos en que la solucion del farmaco presente una alta absorbancia (A >
1, 3):
Z 2
d[F ]

= K =
I d
(18)
dt
1
En este caso, k es una constante de velocidad para cinetica de orden cero (M s1 )

5.

actinometra

Metodos instrumentales tales como radiometra espectral, cuidadosamente

calibrados pueden ser utilizados para realizar mediciones Actinometrica. La actinometra se debeb llevadr a cabo en las mismas condiciones de iluminacion
a las que es sometido el f
armaco en fase de prueba de fotoestabilidad. la actinometria permite la determinacion a que , y flujo de fotones o dosis de
luz.est
an expuestas las muestras de medicamentos (Forma faramaceutica) durante las pruebas de fotoestabilidad, ya sea mediante un enfoque instrumental
como la radiometra o por metodos qumicos.
4

5.1.

Actinometros fsicos

Desde el enfoque instrumental se emplean dos tipos principales de detectores: detectores termicos que convierten la energa radiante en calor (bolometros,
termistores, y termopilas), y dispositivos fotoelectricos que convierten la energa
radiante en una corriente electrica (fototubos, celdas fotovoltaicas, y radiometros espectrales). Los radi
ometros espectrales permiten medir la energa que
llega al detector de la fuente de iluminacion, como una funcion de longitud de
onda durante intervalos bastante estrechos (2 nm). Esto constituye una ventaja significativa en relaci
on con otros actinometros porque permite correcciones
para cualquier cambio en la salida de la lampara debido al envejecimiento.

5.2.

Actinometros qumicos

Un actin
ometro qumico es tpicamente una solucion que se ilumina en las
mismas condiciones que las muestras. Hay dos enfoques generales para actinometria qumica: el uso de soluciones de alta y de baja densidad optica. Para
una soluci
on con densidad
optica alta, se emplea una reaccion qumica cuyo
rendimiento cu
antico para fotorreaccion este bien caracterizada y constante a
traves de una amplia gama de longitudes de onda. La solucion debe absorber
todos los fotones incidentes en toda la gama de longitud de onda de interes. El
uso de soluciones de ferrioxalato potasio para actinometria qumica esta bien
descrito en literatura. La expresion que describe la velocidad de un actinometro
de alta densidad
optica est
a dada por:

d[F ]
= K = I d
dt

(19)

donde [A] es la concentraci

on molar de la actinometro, k es la constante de
cinetica de orden cero, es el rendimiento (conocido) cuantico para fotorreaccion
de la actin
ometro:
I = k/
(20)

6.

Composici
on Fsica de las Muestras

Las muestras que se someten a las pruebas de fotoestabilidad de medicamentos pueden ser iluminadas como una solucion diluida en el que las moleculas de
f
armaco est
an expuestos a la radiacion de manera uniforme, en soluciones concentradas en el que la radiacion electromagnetica es absorbida por una fina capa
de moleculas de f
armaco, o en una suspension en la que una fraccion de los la
radiaci
on electromagnetica incidente es dispersada y reflejada. La eleccion del
disolvente para la preparaci
on de soluciones puede tener un efecto significativo
sobre el espectro de absorci
on del farmaco en solucion, lo que resulta en cambios
en la max a valores m
as cortos o mas largos, los cambios en la absorbancia a
max promueven cambios en el rendimiento cuantico de la fotodegradacion, en
la tasa de fotodegradaci
on, y alteraciones en los fotoproductos obtenidos.

6.1.

Tabletas s
olidas

La energa electromagnetica de la fuente se absorbe completamente por una

fina capa de moleculas en la superficie de los comprimidos. La absorcion de
energa electromagnetica por moleculas del farmaco de la superficie puede resultar en la formaci
on de fotoproductos que absorben energa electromagnetica
a las mismas longitudes de onda que el farmaco por tanto se ralentiza la reacci
on adicional (efecto de filtro). Alternativamente, los fotoproductos no pueden
absorber energa electromagnetica de la misma longitud de onda que el farmaco
lo que permite que las capas sucesivas de moleculas del farmaco en el solido
se sometan a fotorreacci
on. El mecanismo de fotorreacciones en solidos puede
diferir de la que se presenta soluciones generando diferentes productos. Esto se
puede deber a que los radicales libres pueden moverse rapidamente en solucion,
pero sus movimientos son limitados en los solidos.

6.2.

Polvos

Muchos de los principios asociados con las pruebas de fotoestabilidad de los

comprimidos s
olidos se aplican tambien a los polvos. Solidos, ya sea en tabletas o
en polvo, se dispersan, reflejan, absorben o transmitir energa electromagnetica.
El grado en el que cualquiera de estos fenomenos particulares tiene lugar depende
de tama
no de partcula, la geometra, y el angulo de incidencia y la longitud
de onda de la energa. En general, a longitudes de onda mas corta de energa
electromagnetica, tiende a ser mas absorbida y dispersada transmitiendose a
una mayor profundidad.

6.3.

Lquidos

De todas las formas farmaceuticas, las soluciones permiten exponer en mayor proporci
on a las moleculas de farmaco a la energa electromagnetica. La
consecuencia de esto es que los farmacos tienden a ser mas fotolabiles en soluciones que en otras formas de muestra tales como comprimidos solidos. Esto
es particularmente cierto para las soluciones diluidas, donde la absorcion y la
dispersi
on de los componentes en la solucion aparte de moleculas del farmaco
se reduce al mnimo. Un f
armaco que es estable en polvos o tabletas no puede
ser estable en soluciones lquidas. A la inversa, un farmaco que es estable en
soluci
on lquida es probable que tambien sea estable en polvos y comprimidos.

7.

Protecci
on de F
armacos Fotolabiles

La protecci
on de los f
armacos fotolabiles se puede lograr por varios medios.
El enfoque m
as simple es probablemente por la proteccion externa. El uso de
recipientes opacos construidos de color marron o ambar de vidrio y plastico de
color es com
un. Adem
as, las tabletas y las capsulas estan protegidos con frecuencia por los envases blster de lamina de aluminio. Los comprimidos tambien

pueden recubrirse utilizando dioxido de titanio (T iO2 ) que dispersa efectivamente la energa electromagnetica incidente y ralentiza la fotodegradacion. Sin
embargo, los recubrimientos de T iO2 en tabletas pueden causar aumento de la
fotodegradaci
on de los f
armacos, en algunos casos, sobre todo cuando la humedad est
a mal controlada.
La protecci
on interna de los farmacos se logra mediante la adicion de excipientes a la formulaci
on, que estan dise
nados para proteger el medicamento de la
fotodegradaci
on por absorci
on competitiva. Los colorantes alimentarios se utilizan con frecuencia para este proposito. Ellos se escogen de manera tal, que
absorban energa electromagnetica a las mismas longitudes de onda que absorbe el f
armaco. De otro lado los desactivadores fsicos tales como ciclodextrina se
utilizan como agentes protectores internos que apagan fsicamente los estados
electr
onicos excitados de moleculas del farmaco (F ).

8.

Gua ICH

Para que las pruebas de fotoestabilidad de farmacos puedan tener cierta

validez predictiva a las condiciones reales en que se producen y manejan los
medicamentos, las condiciones experimentales bajo las cuales estas pruebas se
llevan a cabo deben estar bien caracterizadas. De particular importancia respecto a estas pruebas es la fuente de iluminacion elegida para las pruebas de
fotoestabilidad. El Comite Internacional de Armonizacion (directrices de la ICH)
especifica las fuentes de iluminacion aceptables para las pruebas de fotoestabilidad de f
armacos. Estas directrices tambien especifican la energa total a las
que deben ser sometidas las muestras durante las pruebas de fotoestabilidad.
Las directrices de la ICH especifican que las muestras deben ser expuestos a las
siguientes fuentes de radiaci
on durante las pruebas de fotoestabilidad:

Opci
on 1. L
ampara de luz artificial fluorescente o lampara de arco de
xen
on o l
amparas de halogenuros metalicos.
Opci
on 2. L
ampara fluorescente blanca fra y la lampara fluorescente UV
cercano.

8.1.

Fuente de iluminaci
on

La fuente de iluminaci
on elegida para las pruebas de fotoestabilidad puede tener un efecto significativo sobre los resultados. Esto es cierto debido a diferentes
fuentes de iluminaci
on proporcionan salidas que tienen diferentes distribuciones
espectrales de energa. Por lo tanto, dos fuentes de iluminacion pueden entregar
la misma energa total a las muestras, pero la energa se pueden distribuirse de
forma diferente a traves de los espectros de emision.

8.2.

Posici
on de la muestra

La posici
on de las muestras de medicamentos dentro de las camaras de iluminaci
on es muy importante. La irradiancion dentro de una camara utilizada para
los estudios de fotoestabilidad puede variar sustancialmente como una funcion
de la posici
on de la muestra dentro de la camara. Es por lo tanto importante
organizar las muestras para que experimenten la irradiacion de manera uniforme
(Colocar las muestras a la misma distancia de la fuente). El sensor espectrorradi
ometro o la soluci
on actin
ometro deben ser colocados en la camara de modo
que se expone a la misma irradiacion como muestras. Los tipos de reacciones
fotoqumicas son generalmente independientes de la temperatura. Sin embargo,
las reacciones termicas posteriores, dependen de la temperatura. Estas reacciones termicas pueden complicar por lo tanto las pruebas de fotoestabilidad. En
este sentido, las muestras y el actinometro deben ser irradiados en condiciones
de temperatura controlada. Esto es a veces muy difcil debido a que muchas
c
amaras de iluminaci
on disponibles en el mercado no se construyen de una manera que permite el control efectivo de la temperatura. El control de humedad
tambien es importante en el caso de comprimidos solidos o de otras muestras
que est
an expuestos a energa electromagnetica en recipientes abiertos. Los cambios de humedad pueden alterar significativamente los resultados de las pruebas
de fotoestabilidad de los comprimidos en particular cuando los comprimidos se
recubren con T iO2

Referencias
[1] James Swarbrick, Pharmaceutical Photostability and Stabilization Technology, Drugs And The Pharmaceutical Sciences-A Series of Textbooks and
Monographs, (2007)
[2] Glenn Halstead Brow and Eugene M. Salle Qumica cuantitativa, Editorial
Revete S.A (pag. 359), (2007)