Facultad de Ingeniera y Arquitectura

Ingeniero Qumico

Determinacin espectrofotomtrica de plomo y cadmio en hojas de girasol

Tcnicas de monitoreo y anlisis

Maestro de la materia: Dr. Luis ngel Garza Rodrguez

Integrantes del equipo:

Ana Cristina Ramrez Carrasco #711138
Francisco Javier Ramrez Carrasco #711137
Luis Fernando Ramrez Carrasco #

Equipo: No. 1

Monterrey, Nuevo Len. Mxico a sbado 7 de febrero de 2015

TABLA DE CONTENIDO

Captulo

Pgina

1. Introduccin

1.1.

Objetivo General

1.2.

Objetivos Particulares

2. Antecedentes
2.1.

Principio para la determinacin de Pb+2

2.1.1.2 Procedimiento

2.2.

Principio para la determinacin de Cd+2

2.2.1.2 Procedimiento

8
10

11

3. Bibliografa..13

LISTA DE FIGURAS
Figura

Pgina

Tipos de fitorremediacin

Plomo en su forma elemental..

Cadmio elemental.

Girasoles 7

1. Introduccin

El proyecto consistir en la determinacin de los analitos de plomo y cadmio mediante la

absorcin de esos metales en girasoles, los cuales son metales pesados que actan como
contaminantes en el suelo y que en grandes cantidades pueden ser txicas para ciertos
organismos.
Decidimos investigar y desarrollar el proyecto, ya que consideramos importante conocer cmo
es que este tipo de plantas son de gran ayuda para absorber del suelo aquellos agentes
contaminantes y como es que se podra de alguna forma descontaminar el suelo de una manera
fcil y que no genere grandes costos.
Cabe destacar que la fitorremediacin, que es la tcnica que se seguir, es el uso de plantas
para recuperar suelos contaminados, tiene como ventajas que es una tecnologa no destructiva
y de bajo costo. Ha adquirido auge por ser un procedimiento pasivo, estticamente agradable y
til para remediar simultneamente una gran variedad de contaminantes.

Adems, es un proceso de descontaminacin que involucra el empleo de plantas que pueden

remover, transferir, estabilizar, descomponer y/o degradar contaminantes de suelo, sedimentos
y agua, como solventes, plaguicidas, hidrocarburos poliaromticos, metales pesados,
explosivos, elementos radiactivos, fertilizantes, para hacerlos ms biodisponibles para las
plantas.
Cuando se dan niveles muy altos de biodisponibilidad, tanto los elementos esenciales (Cu, Zn,
Mn, Fe, Ni, Mo) como los no esenciales (Cd, Pb, Hg, Cr) pueden ser txicos. La amenaza que
suponen para la salud humana y animal se agrava por su larga persistencia en el suelo.
Las bases conceptuales de la fitorremediacin se apoyan en los mecanismos presentes en
plantas que hiperacumulan metales.

Figura

#1.

Tipos

de

fitorremediacin.1
Se eligi el girasol (Helianthus annuus L.) ya que es la especie que absorbe los metales
pesados en mayor cantidad acumulndose ms en sus hojas que en su fruto si se cosecha la
biomasa entera de la planta, por lo que se considera una planta hiperacumuladora favorable en
la fitoextraccin de Cd, Zn, Pb y elementos radiactivos.

1.1.

Objetivo general

Determinacin de plomo y cadmio en hojas de girasol, y conocer las propiedades principales

de cada uno de estos elementos.
1.2.

Objetivos particulares

Obtener los analitos mediante el mtodo elegido.

En base al conocimiento de las propiedades de plomo y cadmio, poder aplicar mtodos

de identificacin para confirmar si se trata de este compuesto.

2.

Antecedentes

Antes de hablar sobre las formas de obtencin de los analitos, es importante mencionar
algunas de las propiedades y usos que nos podran ser de mucha utilidad a la hora de
determinarlos.
Plomo (Pb)
Se ubica en el grupo IVA (metales) en la tabla peridica. El Pb es un metal gris azulino que se
presenta en forma natural y en pequeas cantidades (0.002%) en la corteza terrestre. El Pb es
txico para el sistema nervioso y se asocia con la depresin de muchas funciones endcrinas,
aunque no hay evidencia de efectos teratognicos o carcinognicos. El uso ms amplio del Pb
elemental es para la fabricacin de acumuladores; tambin es usado para la fabricacin de
tetraetilo de plomo, pinturas, cermicas, forros para cables, elementos de construccin, vidrios
especiales, pigmentos, soldadura suave y municiones. 1
El Pb, en el suelo, se encuentra principalmente en forma de Pb +2 , tambin es conocido su
estado de oxidacin +4. Algunos de los compuestos insolubles son Pb (OH) 2, PbCO3, PbS,
PbSO4.4

Figura #2. Plomo en su forma elemental.2

Cadmio (Cd)
El cadmio es un metal blanco azulado, dctil y maleable. La toxicidad que presenta es similar
a la del mercurio, su estado de oxidacin ms comn es el +2. Puede presentar el estado de
oxidacin +1, pero es muy inestable.
El cadmio puede ser encontrado mayoritariamente en la corteza terrestre. Este siempre ocurre
en combinacin con el zinc. El cadmio tambin se consigue en las industrias como inevitable
subproducto de extracciones de zinc, plomo y cobre. La toma por los humanos de cadmio
tiene lugar mayormente a travs de la comida. Los alimentos que son ricos en cadmio pueden
en gran medida incrementar la concentracin de cadmio en los humanos.
Aproximadamente tres cuartas partes del cadmio producido se emplea en la fabricacin de
bateras, especialmente en las bateras de nquel-cadmio.2

Figura
Cadmio elemental.3

#3.

Tambin mencionaremos algunos datos sobre los girasoles:

Helianthus annuus girasol pertenece a la familia de las Asteraceae , posee una facilidad de
manejo en su cultivo, se adapta fcilmente a un amplio intervalo en la variacin de
temperatura. La poca de la siembra es variable y depende de las caractersticas climatolgicas
de cada regin.
El girasol es reportado por su capacidad de acumular metales y responder con una alta
biomasa radicular no obstante una baja tolerancia al cromo comparado con otras plantas
acumuladoras. El girasol tiene la capacidad de acumular altas concentraciones de uranio y
cadmio en sus tejidos (principalmente tallo) con una razonable tolerancia, es por esta razn
que el girasol se emplea en los procesos de fitorremediacin acumulando y reciclando dichos
metales excesivos de los suelos y promoviendo la limpieza ambiental.
Con los antecedentes expuestos y con la intencin de estudiar Helianthus annuu L. como
planta potencial para fitoacumular plomo y cadmio en sus tejidos y as dar una solucin
biolgica a la gran problemtica ambiental de los suelos contaminados, daremos a conocer el
mtodo para la determinacin de estos metales pesados. 3
- Su vida dura exactamente un ao desde que germina.
- Altura: 2-3 m (puede alcanzar los 6 m). Hay variedades enanas de 40 cm de altura.
- Germinacin en 7-14 das a 15C.3

Figura #4. Girasoles.4

2.1.

Principio para la determinacion de Pb+2

El plomo sobre la superficie de las hojas se disuelve agitando con una solucin de cido
ntrico. El plomo se extrae como complejo con ditizona, pasando a la fase de cloruro de
metileno a un pH por arriba de 9. La intensidad del color del complejo se mide
espectrofotomtricamente y se compara contra una curva de calibracin preparada de manera
similar, a partir de estndares de plomo para calcular la cantidad de este metal. Se pueden
agregar cianuro y sulfito como enmascarantes para eliminar la mayor parte de las
interferencias de otros metales.

Antes de realizar el experimento

Se sembraran 3 semillas de girasol en 6 macetas distintas, un mes y medio antes de realizar el
experimento para dejar que la planta germine completamente.
Durante el tiempo de germinacin contaminaremos la tierra en la que se encuentren sembradas
con estandarizaciones de los metales pesados mencionados anteriormente, para que los
girasoles puedan acumularlos.
El da del experimento recolectaremos muestras de hojas, cuando menos dos hojas de cada
planta, las colocaremos en una bolsa de plstico limpia y sellada. Las hojas seleccionadas
deben estar razonablemente libres de tierra u otra contaminacin visible.
2.1.1

Procedimiento

1. Preparacin de la curva de calibracin.

sta la debe elaborar al mismo tiempo que analiza las hojas. La formacin de quelatos
y la extraccin con disolventes se deben hacer en frascos limpios de unos 170 mL, con
tapas. A cada uno de los seis frascos etiquetados pipetee 0 (blanco), 2, 4, 6 u 8 mL del
estndar con 10 ppm de plomo y agua suficiente para llevar el volumen a unos 20 mL.
Agregue unos 60 mL de la solucin de amoniaco, cianuro y sulfito (slo si se le indica)
usando una probeta graduada y 25 mL de la solucin de CH 2Cl2-ditizona con una
pipeta (no con la boca). Tape el frasco y agtelo durante casi 1 min. Con una pipeta
tome la mayor parte de la capa de cloruro de metileno, ms densa, y fltrela a travs de
papel filtro seco recibiendo en un tubo de medicin seco Bausch and Lomb Spectronic
20 o su equivalente, o centrifugue antes de transferir (las muestras deben prepararse
para medirlas ahora para que puedan medirse al mismo tiempo que los estndares).5
Use uno de los estndares para medir la absorbancia de 400 a 600 nm en incrementos
de 20 nm para determinar la longitud de onda de absorcin mxima. Con esta longitud
de onda mida la absorbancia de cada estndar, usando el blanco para poner en cero al
instrumento. Trace una grfica de la absorbancia en funcin de microgramos de plomo
usados para preparar la curva de calibracin usando una hoja de clculo.
2. Determinacin de plomo en las hojas.
9

Para cada bolsa de plstico con una muestra de hoja caliente 20 mL de HNO 3 0.1 M
hasta unos 70 grados centgrados. Agregue 20 mL a cada bolsa, cirrela y agtela
durante unos 2 min. Vierta en vasos limpios de 100 mL. Agregue una gota de solucin
indicadora de azul de timol a cada una y despus agregue NH 3 2 M, gota a gota, hasta
que el cambio de color sea completo (al azul), y agregue un par de gotas ms. La
solucin debe oler a amoniaco. Entonces, agregue (slo si se lo indican) 60 mL de
solucin de amoniaco, cianuro y sulfito; despus agregue 25 mL de la solucin de
CH2Cl2-ditizona y proceda con la medicin del extracto como hizo con los estndares.5
2.2.

Principio para la determinacion de Cd+2

El mtodo se basa en la reaccin del cadmio presente en las hojas con la ditizona para dar un
complejo deditizonato de cadmio de color rojo el cual se extrae con cloroformo y se cuantifica
colorimtricamente a una longitud de onda de 515 nm.
Soluciones y reactivos necesarios
Los reactivos que a continuacin se mencionan deben ser grado analtico y deben almacenarse
en recipientes de polietileno de vidrio libre de cadmio, cuando se hable de agua debe
entenderse agua bidestilada, desionizada y exenta de cadmio.
-

Acido clorhdrico (HCl) concentrado, acido ntrico (HNO3), acido perclrico (HCIO4);
al 70%, acido sulfrico (H2SO4) concentrado, alcohol etlico (C2H5OH), al 95%,
cloroformo (CHCl3), hidrxido de amonio (NH4OH) concentrado, perxido de
hidrgeno (H2O2), al 30%, tetracloruro de carbono (CCl 4), solucin de hidrxido de
amonio (NH4OH), solucin de hidrxido de sodio (NaOH), 1N. Disolver 10 g de
hidrxido de sodio en 250 cm3 de agua, solucin de hidrxido de sodio 6N. Disolver
240 g hidrxido de sodio en agua y aforar a 1 cm 3. Solucin de dimetilglioxima
(C4H8N2O2).Disolver 1 g de dimetilglioxima en 100 cm3 de alcohol etlico al 95%,
solucin concentrada de ditizona I, (C13H12H4S). Disolver 100 g de difenil-ditiocarbazona en 1 litro de cloroformo, almacenar en botella mbar y en refrigeracin.

2.1.2

Procedimiento

10

1. Filtrar a travs de papel filtro y lavar con dos o tres porciones de 15 cm 3de cloroformo.
Transferir el filtrado a un embudo de separacin de 250 cm 3 de capacidad y extraer con
porciones sucesivas de hidrxido de amonio, hasta que desparezca el color verde de la
capa de cloroformo. Desechar la capa de cloroformo y lavar los extractos combinados
con cuatro porciones de 15 cm3 de cloroformo. Desechar los extractos de cloroformo.
Precipitar la ditizona por adicin de 2 cm 3 de cido clorhdrico concentrado, y agitar
vigorosamente para neutralizar totalmente el amonaco. Extraer la ditizona precipitada
con dos o tres porciones sucesivas de 25 cm3 de cloroformo y finalmente diluir a 250
cm3 con cloroformo los extractos combinados. Conservar en refrigeracin. Solucin
concentrada de ditizona II. Disolver 125 mg de cristales de ditizona en 50 ml de
cloroformo. Filtrar a travs de papel filtro y lavar con dos o tres porciones sucesivas de
15 cm3 de cloroformo. Solucin diluido de ditizona II.
2. Preparacin para la curva de calibracin.
Colocar en una serie de embudos de separacin de 125 cm3
Diluir entre 15 a 20 cm3con agua, agregar 10 cm3de solucin de tartrato de sodio y
potasio y 4.2cm3 de hidrxido de sodio 6N. Transferir una porcin adecuada de cada
solucin final a una celda de absorcin de 1 cm y medir su absorbancia a 515 nm. Usar
como referencia tetracloruro de carbono o un blanco preparado con 20 cm 3 de agua y
proseguir segn Graficar los valores de absorbancia corregidos contra los g de
cadmio.6
3. Determinacin de cadmio en la muestra
Tomar una alcuota de la muestra digerida, que contenga de 25 a 200g de cadmio y
colocarla en un vaso de precipitado de 150 cm3. Agregar 0.2 cm3de cido clorhdrico
concentrado para precipitar la plata presente en la muestra, agitar y dejar reposar por 2
minutos. Filtrar si es necesario y lavar con agua. Al filtrado y los lavados 5 cm 3 de la
solucin de tartrato de sodio y potasio, ajustar a un pH de 2 con cido clorhdrico
concentrado o hidrxido de amonio concentrado. Transferir la solucin a un embudo
de separacin de 125 cm3, y efectuar tres extracciones con porciones de 5 cm3de
solucin de ditizona I en cloroformo hasta que la capa de ditizona permanezca verde.
Agitar vigorosamente en cada extraccin y desechar los extractos. Lavar con porciones
de 10 cm3 de cloroformo hasta que la capa orgnica permanezca incolora, desechar los
lavados. Finalmente lavar con una porcin de 5 cm3 de tetracloruro de carbono y
desechar los lavados. Transferir la solucin acuosa a un vaso de precipitados de 150

11

cm3 y aadir 5 cm3 de solucin de tartrato de sodio y potasio. Ajustar el pH de la

solucin a 8.5 - 9.0, adicionando hidrxido de amonio concentrado. Agregar 5 cm 3 de
la solucin de dimetil-glioxima y agitar vigorosamente durante 30 segundos. Extraer
con, tres o ms porciones de 10 cm3 de cloroformo hasta la desaparicin de
cualquier precipitado blanco de dimetil glioxima en exceso. Desechar los extractos.
Lavar la capa acuosa con 5 cm 3 de tetracloruro de carbono y desechar el lavado.
Agregar 4.2 cm3 de hidrxido de sodio 6N al embudo de separacin y mezclar. En
seguida adicionar 5 cm3 de solucin de ditizona II en tetracloruro de carbono y agitar
vigorosamente. Transferir la capa de tetracloruro de carbono a un embudo de
separacin limpio. Extraer la capa acuosa con una segunda porcin de 5 cm 3de
solucin de ditizona II en tetracloruro de carbono y combinar las capas orgnicas.
Continuar extrayendo con porciones de 3 cm3 de solucin, de ditizona II en tetracloruro
de carbono hasta que los extractos orgnicos permanezcan incoloros o ligeramente
amarillos y agregar estos extractos a los anteriores. Lavar 2 veces los extractos
orgnicos combinados con porciones de 10 cm3de hidrxido de sodio1N y 10 cm3de
agua, y finalmente con 20 cm3 de agua. Desechar la capa acuosa en cada paso. Filtrar la
solucin roja del complejo de ditizonato de cadmio a travs del papel filtro y colocar el
filtrado en un matraz volumtrico de 25 cm3. Lavar el papel filtro con una porcin de
tetracloruro de carbono. Aforar con tetracloruro de carbono y mezclar bien. 6
Nota: Es recomendable que el material que se maneje sea de color mbar o de actnica
baja, se pueden proteger los embudos de separacin y el matraz volumtrico
cubrindolos con papel aluminio, evitando la exposicin del extracto a la luz.
Transferir una porcin adecuada de la solucin de tetracloruro de carbono a una celda
de absorcin de 1 cm. Leer la absorbancia de esta solucin dentro de los primeros 15
minutos siguientes a la extraccin, a una longitud de onda de 515 nm usando
tetracloruro de carbono puro como lquido de referencia. 6

Bibliografa

Referencias citadas

12

1. Abollino, O., Aceto, M., Malandrino, M., Mentaste, E., Sarzanini, C. y Barberis, R.
2002. Distribution and Mobility of Metals in Contaminated Sites. Chemometric
Investigation of Pollutant Profiles. Environmental Pollution, 119, p. 177.
Consultado el 2 de febrero de 2015
2. Agency for Toxic Substances and Disease Registry 2005. Division of Toxicology. A
TSDR Information Center: http: //www.atsdr.cdc.gov/toxfaq. html#bookmark05.
Consultado el 2 de febrero de 2015
3. Ernst, W. H. O. 2000. Evolution of Metal Hyperaccumulation and Phytoremediation.
New Phytol 146, 357-357.
Consultado el 3 de febrero de 2015
4. Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-147-SEMARNAT/SSA1-2004, Que Establece
Criterios para Determinar las Concentraciones de Remediacin de Suelos
Contaminados por Arsnico, Berilio, Cadmio, Cromo Hexavalente, Mercurio, Nquel,
Plomo, Selenio, Talio y Vanadio, Publicada en el Diario Oficial de la Federacin el 11
de Noviembre de 2005.
Consultado el 3 de febrero de 2015
5. Pagnanelli, F., Moscardini, E., Giuliano, V., Toro, L. 2004. Sequential Extraction of
Heavy Metals in River Sediments of an Abandoned Pyrite Mining Area: Pollution
Detection and Affinity Series. Environmental Pollution, 132, pp. 189- 201.
Consultado el 5 de febrero de 2015
6. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0165993614001587
Consultado el 7 de febrero de 2015

Referencias consultadas

Ayres G.H.; Anlisis Qumico Cuantitativo. Segunda Edicin. Harper & Row
Latinoamrica. (1970).

Burriel, F. Lucena, S. Arribas, J. Hernndez (2006) Qumica Analtica Cualitativa.

Pineda R. Presencia de hongos micorrzicos arbusculares y contribucin de

Glomusintraradices en la absorcin y translocacin de zinc y cobre en Helianthus

13

annuus L. girasol crecido en un suelo contaminado con residuos de mina. Tesis de

doctorado en Biotecnologa. Universidad de Colima- Tecomn. Colima, Mxico. 2004.

Lin J, Jiang W, Liu D. Accumulation of copper by roots, hypocotyls, cotyledons and

leaves of sunflower (Helianthus annuus L.). Bioresour Technol 2003; 86: 151-155.

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0026265X10001992

http://www.infoagro.com/abonos/contaminacion_suelos_metales_pesados.htm

https://www.youtube.com/watch?v=HxHlSpdq6ec

https://www.youtube.com/watch?v=gIWhQzfxpPQ

Referencia de Figuras
1. Figura #1
http://dsambonih.blogspot.mx/2014/11/mecanismos-planta-fitorremediadora.html
2. Figura #2
http://www.profesorenlinea.cl/fisica/Densidad_y_Volumen.htm
3. Figura #3
http://it.wikipedia.org/wiki/Cadmio
4. Figura #4
http://www.vidaenlatierra.com/los-girasoles.php

14