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Carlos ngel Gallardo C., Edgar Cano E., Gabriel Eduardo Lpez G., Vanessa Blas V., Roxana Olvera R.,
Margarita Franco C., Roco Ortiz B.
Las ficobiliprotenas de Spirulina maxima y Pseudanabaena tenuis protegen contra el dao heptico y el estrs
oxidativo ocasionado por el Hg2+
Revista Mexicana de Ciencias Farmacuticas, vol. 41, nm. 2, abril-junio, 2010, pp. 30-35,
Asociacin Farmacutica Mexicana, A.C.
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Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57914151005
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Trabajo Cientfico
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Introduccin
En la actualidad debido a la industrializacin, los seres vivos
estn expuestos a la intoxicacin por diferentes formas qumicas
de mercurio, este metal causa diferentes efectos txicos en un
gran nmero de tejidos y rganos, ya que es de difcil eliminacin
y se bioacumula. El grado de toxicidad depende del tiempo de
exposicin, de la concentracin del metal y de la forma qumica1.
Particularmente, la forma inorgnica de este metal con valencia
2+ participa en la reaccin de Fenton donde el in mercrico
(Hg2+) reacciona con el perxido de hidrgeno produciendo
radical hidroxilo, in hidrxido y la especie metlica se reduce,
lo que provoca estrs oxidativo y dao celular2.
Los estudios de toxicidad en roedores han demostrado que
el Hg2+ daa al hgado , ya que se presenta un aumento de
la produccin de especies reactivas del oxgeno (EROS) y
peroxidacin de lpidos (LP)3.
Por otro lado, se ha demostrado que la ingesta de cianobacterias
del gnero Spirulina protege contra la citotoxidad inducida por
Hg2+, CCl4, doxorrubicina, 4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina,
entre otros 4,5. El mecanismo protector de la ingesta de
cianobacterias se debe a que contienen vitaminas, cidos
grasos polinsaturados, y otros fitoqumicos como las clorofilas
y sus pigmentos accesorios llamados f icobiliprotenas 6 .
Particularmente en Spirulina se encontr que produce tres
ficobiliprotenas, aloficocianina, la ficoeritrina y en particular
ms del 50% de sus ficobiliprotenas las constituyen el pigmento
azul ficocianina.
De hecho, se ha demostrado que los extractos proteicos ricos
en ficobiliprotenas de Spirulina tienen un poder antioxidante
y citoprotector7, y estudios recientes han demostrado que el
extracto proteico de Pseudanabena tenuis la cual es altamente
productora de ficoeritrina, protege contra el dao renal que
provoca el Hg2+8. Por lo mencionado anteriormente, fu de
nuestro inters evaluar y comparar las diferentes proporciones de
ficobiliprotenas de Spirulina maxima y de Pseudanabena tenuis
ante el dao heptico provocado por el Hg2+.
Material y mtodos
Obtencin del extracto de ficobiliprotenas
Se parti de la cepas Spirulina maxima y Pseudanabena tenuis,
que fueron proporcionadas por el laboratorio de Fisiologa
Vegetal del Departamento de Botnica de la ENCB. Dichas
cepas fueron identificadas por la Dra. Roxana Olvera Ramrez,
del departamento de Botnica de la ENCB.
Los cultivos se escalaron hasta tener cultivos de lote continuo
de 20 L mantenidos en medio mineral a temperatura de 24
Anlisis bioqumico
Todos los hgados utilizados en las pruebas bioqumicas fueron
homogenizados en 3 mL de regulador de fosfatos 10 mM pH 7.4.
Evaluacin de la peroxidacin de lpidos
Cada muestra fue homogeneizada en 2.2 mL de solucin
salina 0.9 % para realizar la tcnica descrita por Triss y
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Actividad de la Catalasa
La actividad de la catalasa fue medida por medio de la tcnica
de Aebi de 198414 la cual se basa en la desaparicin del H 2O2 a
240 nm. Se colocaron 5 L de del homogenizado en 3 mL de
regulador de fosfatos 100 mM pH 7.4 que contena H 2O2 30
mM. Se midi la absorbancia a los 15 y 30 segundos. Los datos
se presentan como k/mg de protenas.
Estudio histolgico
Los hgados fueron fijados durante 12 horas, para posteriormente
incluirlos en parafina. Se obtuvieron 8 cortes coronales de 7m
de cada rgano y posteriormente fueron teidos por la tcnica
de hematoxilina-eosina. El estudio microscpico se realiz a
doble ciego, analizndose 20 secciones de tejido para cada uno
de los rganos evaluados15.
Nota: Todos los reactivos empleados para las determinaciones
de fluorescencia son marca SIGMA calidad grado HPLC.
Mientras que aquellos utilizados en la determinacin enzimtica
e histologa son SIGMA calidad analtica.
Anlisis estadstico
En las grficas de peroxidacin de lpidos, las EROS y las
actividades de la catalasa y la GPX se muestran como valores
de la media el error estndar EE. Estas variables se analizaron
utilizando un anlisis de ANOVA de una va, seguida de la
prueba de Dunnett post hoc contra el control. Los valores de P<
0.05 se consideraron estadsticamente significativos.
Resultados y discusin
El mercurio es un contaminante industrial, que produce una
serie de alteraciones en tejidos tanto de plantas como animales.
Uno de los rganos blanco de este metal es el hgado, donde
induce dao tisular, principalmente cuando se encuentra en
su forma catinica de valencia 2+, en la que es absorbido y
acumulado16. El objetivo de nuestra investigacin fue demostrar,
que los pigmentos accesorios llamados ficobiliprotenas de las
cianobacterias Spirulina maxima y Pseudanabena tenuis previenen
el estrs oxidativo causado por mercurio, as como el dao
celular. Nuestros resultados demostraron que las ficobiliprotenas
independientemente de la cianobacteria que se trate mantienen
la citoarquitectura normal del parnquima heptico (Figura 1) y
evita que se eleven los marcadores de estrs oxidativo LP y EROS
(Figura 2) por lo que se sugiere que todas las ficobiliprotenas
tienen las mismas propiedades antioxidantes y citoprotectoras.
El mercurio en su forma Hg2+ causa estrs oxidativo porque
tiene gran afinidad por las protenas intracelulares que contienen
grupos sulfidrilo16.
Figura 1. Fotomicrografas del tejido heptico. a Grupo control. b Grupo tratado con Hg2+. c Ficobiliproteinas de S maxima 100mg/kg + s.s.
d Ficobiliproteinas de P tenuis 100mg/kg + ss. e Ficobiliproteinas de S maxima 100mg/kg + Hg2+. f Ficobiliproteinas de P tenuis 100 mg/kg
+ Hg2+ . El tratamiento con Hg2+ ocasion atrofia, prdida de los cordones de hepatocitos, vasocongestin y prdida de los ncleos. (Flechas
en b). Las alteraciones histolgicas no se presentaron en los grupos tratados con ficobiliprotenas de ambas cianobacterias (e y f).
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Conclusiones
Podemos concluir que las ficobiliprotenas de las cianobacterias
son potentes sustancias antioxidantes y hepatoprotectoras
independientemente de la cianobacteria de la que provengan.
Agradecimientos
Este estudio fue parcialmente financiado por el proyecto
20090485 SIP-IPN. O-B, R. es becaria EDI, COFFA y SNI.
G-C, C.A. y L-G, G. E; B-V, V. son becarios CONACyT.
Referencias
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4. Sharma M. K; Sharma A; Kumar A; Kumar, M. 2007.
Evaluation of protective efficacy of Spirulina fusiformis
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