CURSO DE MICROBIOLOGIA GENERAL

SEMINARIO INVESTIGATIVO

METODOS DE ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN

PRESENTADO POR:
JESS DAVID BAENA NEGRETE

PRESENTADO A:
YENIS IBETH PASTRANA PUCHE (ING. DE ALIMENTOS)

DICIEMBRE/4/2012

METODOS DE ESTERILIZACION Y DESINFECCION

Para la bioseguridad en el laboratorio es fundamental disponer de conocimientos bsicos sobre la
desinfeccin y la esterilizacin. Habida cuenta de que los objetos muy sucios no pueden
desinfectarse o esterilizarse rpidamente, es igualmente importante comprender los conceptos
bsicos de la limpieza previa, los siguientes principios generales se aplican a todas las clases
conocidas de microbios patgenos.
1. DESINFECCION
La desinfeccin es el proceso fsico o qumico mediante el cual se busca la eliminacin de los
microorganismos en forma vegetativa de los objetos inanimados, sin que se asegure la eliminacin
de las esporas bacterianas.
1.1 NIVELES DE DESINFECCION

Desinfeccin de bajo nivel (DBN): es realizado por agentes qumicos que eliminan
bacterias vegetativas, hongos y algunos virus en un periodo de tiempo corto (10 minutos).
Por ejemplo: grupo de amonios cuaternarios.
Desinfeccin de nivel intermedio (DNI): se realiza utilizando agentes qumicos que
eliminan bacterias vegetativas y algunas esporas vegetativas. Aqu se incluyen el grupo de
los fenoles, hipoclorito de sodio, alcoholes, compuestos iodados( iodforos y alcohol
iodado).
Desinfeccin de alto nivel (DAN): es realizada con agentes qumicos lquidos que
eliminan todos los microorganismos, como por ejemplo: el glutaraldehdo, el acido
peractico, perxido de hidrogeno y formaldehido.

1.2. FACTORES QUE AFECTAN LA DESINFECCIN

Cantidad y ubicacin de los microorganismos: cuanto mayor es la biocarga, mayor es

el tiempo que un desinfectante necesita para actuar. Por ello, es fundamental realizar una
limpieza de la superficie de los instrumentos. Y si estn compuestos por piezas se deben
desmontar y limpiar cada una.
Resistencia de los microorganismos al agente qumico: se refiere principalmente al
espectro de accin que tiene el mtodo o agente utilizado.
Factores fsicos y qumicos: algunos desinfectantes tienen especificadas la temperatura
a la que son ms efectivos, el pH favorece la actividad de los desinfectantes.
Presencia de materiales extracelulares o biofilmes: muchos microorganismos producen
masas gruesas de clulas denominadas biofilmes, los cuales generan una barrera contra la
desinfeccin, por ende los desinfectantes deben saturar a los biofilmes para eliminar los
microorganismos presentes.

1.3 ELEMENTOS CRITICOS,SEMICRITICOS Y NO CRITICOS

La accin del agente o del procedimiento a utilizar, depender en gran parte de las caractersticas
del objeto, y de la probabilidad que este pueda producir una infeccin si es utilizado estando

contaminado. El nivel y el tipo de desinfeccin se realiza de acuerdo a la categora que pertenezca

el objeto.

Elementos crticos: son los que se introducen directamente en el cuerpo, la sangre o

cualquier rea del organismo que suele ser estril. Ej.: agujas hipodrmicas, catteres. Su
tratamiento debe ser de esterilizacin por calor o radiacin, o el uso de desinfectantes de
alto nivel, por Ej.: glutaraldehdo, oxido de etileno, acido peractico.

Elementos semi-crticos: estn en contacto con las mucosas intactas (colonizadas por
flora normal) pero no a atraviesan. Encontramos en este grupo: termmetros (bocal), estos
elementos pueden ser tratados con desinfectantes de mediano u alto nivel, siempre
sometido a un posterior lavado con agua y detergente.

Elementos no crticos: se encuentran en contacto con la piel sana pero no con las
mucosas. No son considerados como agentes infecciosos, mas son considerados
"vectores mecnicos" que pueden transmitir grmenes y bacterias. Ej.: tapabocas. Para su
desinfeccin se recomienda agua y detergente, seguido de un desinfectante de mediano
nivel.

1.4 MTODOS DE DESINFECCIN

La desinfeccin es uno de los procedimientos ms antiguos en medios hospitalarios y de
laboratorio. Existen dos mtodos de desinfeccin: los fsicos y los qumicos.
1. 4.1 MTODOS FSICOS

Pasteurizacin.
Con este proceso se realiza la DAN y por el cual el agua es llevada a 77C de temperatura
durante aproximadamente 30 minutos. As se destruyen todos los microorganismos
excepto las esporas bacterianas.

Hervido o ebullicin.
Se utiliza agua hirviendo a temperaturas altas para lograr la desinfeccin. Por ejemplo,
para una DAN, se hierven los instrumentos en un recipiente con tapa de 15 a 20 minutos
contabilizando desde que el agua rompe el hervor, los objetos deben ser completamente
cubiertos por el agua y no debe aadirse ningn otro elemento mientras el agua este
hirviendo.

Radiacin ultravioleta (UV).

Su accin se ejerce por desnaturalizacin de los cidos nuclecos , pero su efectividad se
ve influenciada por factores como la potencia de los tubos UV, tipo de microorganismo y la
intensidad de los UV que se ve afectada por la distancia y la suciedad del recipiente.

1.4.2 MTODOS QUMICOS

Por su mecanismo de accin veremos aqu los que modifican las protenas y cidos nuclecos,
provocan inhibicin enzimtica y muerte celular. Predominan los agente alquilantes ( yodo,
formaldehido y glutaraldehdo, etc.).

Yodo:
Son bactericidas, vricidas y fungicidas, las soluciones diluidas son poco estables en altas
temperaturas, pierden su actividad antisptica con rapidez y pierden su actividad en
presencia de materia orgnica.

Glutaraldehdo:
Se utiliza a temperatura ambiente en solucin al 2%. Es un esporicida para tiempos de
accin de 6 a 10 horas es utilizado para la esterilizacin de equipos metlicos , gomas y
lentes y material de vidrio.

Alcoholes:
Como desinfectante se utilizan, el alcohol etlico y el alcohol isoproplico, actualmente el
alcohol al 70% se considera un agente intermedio, y por tanto sin capacidad esporicida, a
concentraciones superiores se ha comprobado que disminuye su eficacia. Se puede utilizar
en la limpieza de termmetros, varillas de vidrio, mesones y superficies externas.

Compuestos clorados:
El compuesto clorado ms utilizado es el hipoclorito de sodio, su actividad bactericida y
vricidas se considera muy til en la limpieza de suelos, mesones y piscinas, debido a que
produce inactivacin de cidos nuclecos y desnaturalizacin de protenas.

Amonios cuaternarios:
Son uno los compuestos mas utilizados en hospitales, industrias alimentarias, su
mecanismo de accin afecta a las bacterias y hongos, ya que desnaturaliza las protenas
celulares y provoca ruptura de la membrana celular.

El yodo, el amonio cuaternario y los productos clorados son altamente utilizados en la

industria alimentaria
1.4.3 MEDICION DE LA EFICACIA DE LA DESINFECCIN
La eficacia de la desinfeccin se mide a travs de:

Prueba de Chambers:
El desinfectante debe matar en 30 segundos a 22C el 99,99% de un cultivo contenido de
75-125 x 106 UFC de Escherichia coli y Staphylococcus aureus.

La eficacia comparativa de un desinfectante se puede medir en:

Coeficiente de fenol:
Relacin entre el poder microbicida del desinfectante comparado con el del fenol sobre
cepas de Salmonella typhi y Staphylococcus aureus.

2. ESTERILIZACIN

la esterilizacin es el proceso mediante el cual se eliminan todas las formas de vida microbiana
contenidos en un objeto o sustancia, incluidas las esporas bacterianas y se logra por mtodos
fsicos y qumicos.

Todo material resistente al calor y compatible a la humedad debe ser esterilizado al calor
hmedo.

Todo material resistente al calor y no compatible a la humedad debe ser esterilizado al

calor seco.

La esterilizacin con mtodos qumicos gaseosos, debern realizarse en cmaras con

ciclos automatizados que brinden seguridad al usuario y garanta de los procesos.

2.1 MTODOS FSICOS

Los mtodos fsicos de esterilizacin son:

Calor hmedo:
Se emplea para esterilizar desechos biolgicos peligrosos y objetos termolbiles; para este
propsito se utiliza el autoclave. El calor hmedo bajo la forma de vapor saturado a una
atmosfera de presin; 15 psi (libra/pulgada 2), provoca la desnaturalizacin irreversible de
las enzimas y de las protenas estructurales. Las temperaturas habituales de esterilizacin
son 121C y 132C; los elementos como medios de cultivo, lquidos e instrumentos se
suelen esterilizar en autoclave a 121C por 15 minutos. Este es el mtodo mas utilizado en
los laboratorios.

Calor seco:
Este mtodo requiere un tiempo ms largo de exposicin que el calor hmedo y mayor
temperatura (160-180C). este mtodo se utiliza en materiales de vidrio; y acta
coagulando las protenas de los microorganismos, este mtodo est limitado en presencia
de materia orgnica Ej.: aceites o grasas que protegen a los diferentes microorganismos.

Filtracin:
Es el mtodo de eleccin para soluciones de antibiticos, sustancias qumicas toxicas,
vacunas e hidratos de carbono, que son sensibles al calor y es una forma de eliminar
microorganismos incluyendo los virus se someten al paso por un filtro de aire de alta
eficiencia (HEPA). Para filtrar los lquidos se fuerza el pasaje de la solucin a traces de una
membrana de acetato o nitrato de celulosa cuyos poros tienen un espacio de 0.22 m.

Radiacin ionizante:
La radiacin ionizante es utilizada en maquinas de microondas y radiolgicas, consiste en
rayos gamma de longitud de onda corta y gran energa; se utiliza para esterilizar material
descartable como jeringas plsticas, catteres o guantes antes de su uso.

2.2 METODOS QUMICOS

Los mtodos qumicos ms utilizados son:

Esterilizacin por gas de Oxido de etileno (ETO):

Es un proceso de esterilizacin de baja temperatura (30-60C) mediante el cual se somete
a los microorganismo a la accin de oxido de etileno, el cual penetra con facilidad a travs
de materiales de goma y plstico en estado gaseoso. Es un mtodo muy eficaz ya que
esteriliza todos los materiales termo sensibles que no se pueden esterilizar con vapor. El
material esterilizado requiere de aireacin para que se eliminen los residuos del gas.

Esterilizacin por gas-plasma de perxido de hidrogeno:

Es un proceso de esterilizacin a baja temperatura que consiste en la difusin de perxido
de hidrogeno en fase plasma ( estado entre liquido y gas) que ejerce la accin biocida. El
perxido de hidrogeno no deja ningn residuo toxico. Se convierte en agua y oxigeno al
final del proceso, su ciclo de esterilizacin varia entre los 54 - 75 minutos, no se debe
esterilizar con este mtodo objetos que contengan celulosa, algodn , lquidos, humedad y
madera. Es mtodo de esterilizacin ms caro.

Esterilizacin por Glutaraldehdo:

Tiene un amplio espectro de actividad antimicrobiana, es activo ante la presencia de
materia orgnica e inactiva rpidamente los microorganismos, excepto las esporas. Fciles
de usar, son relativamente no corrosivos. Su efecto como agente esterilizante y
desinfectante disminuye al diluirlo en agua.

BIBLIOGRAFIA

http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf

http://books.google.com.co/books?id=239cauKqSt0C&pg=PA45&dq=esterilizaci
%C3%B3n+y+desinfeccion&hl=es&sa=X&ei=eiClUKT3HYGo8gTNu4HoAw&ved=0CEQQ6
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http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/vol23/suple2/pdf/08%20esterilizaci
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http://personal.us.es/jjmarin/ESTERILIZACION%20y%20DESINFECCION.pdf