TESIS DOCTORAL

NUEVAS APORTACIONES AL CONOCIMIENTO FARMACOLGICO

DEL CAMO INDIANO

Mara Isabel Fernndez Calvo

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

FACULTAD DE FARMACIA
DEPARTAMENTO DE FARMACOLOGA
1995

Lo que se sabe dobla su valor si al mismo tiempo se tiene el de

confesar lo que no se sabe, pues ast lo que se sabe, est libre
de la sospecha que recae sobre el que quiere hacer creer que
sabe lo que no sabe.
Schopznhauw~

D. Angel Maria Villar dcl Fresno, Catedrtico y Director dcl l)cpartiuncnto dc

Farmacologa <le la Facultad de Farmacia dc la Universidad Complutense (le Madrid, y
Da Nl Pilar Martnez Honduvilla, Profesora Titular del citado Departamento,

CERTIFICAN:

Nuevas aportaciones al
conocimiento farmacolgico del camo tillan o, presentada por la Licenciada en Farmacia
Dita, Maria Isabel Fernndez Calvo, ha sido realizada en oste Departamento bajo su inmediata
direccin y asesOramiento, reuniendo todos y cada uno de los requisitos necesarios para optar
al Grado ce Doctor en Farmacia.
Que

la Tesis Doctoral que lleva por titulo

Concluido el trabajo experimental y bibliogrfico, se autoriza su presentacin

para que sea juzgado por el Tribunal correspondiente.
Y para que as conste, a los efectos oportunos, firmamos el presento en Madrid,
Febrero dc 1995.

6~
Angel Mara Villar del Fresno
Director de la Tesis Doctoral

4 ~4)
M~ Pilar Martnez Honduvilla
Directora (le la Tesis Doctoral

La pmsenc Tuis Doctoral ha sido financiada por una

Boca dc Formacin de Personal Investigador dc la
Universidad Complutense do Madrid.

Al finalizar este trabajo, quiero expresar ini ms sincero agradecimiento a todos los que
de alguna forma han intervenido en l.
Al Profesor Don Angel Mara Villar del Fresno, quien como Director del Departamento
de Farmacologa, me acogi hace ya cinco aos, primero para la realizacin de la Tesina de
Licenciatura, y despus para la de esta Tesis Doctoral; gracias por su direccin y apoyo hasta
el ltimo momento.
A la Profesora Doila M0 Pilar Martnez 1-londuvilla, codirectora de la Tesis, por
haberme introducido y orientado en el campo de la investigacin. Durante estos aos, muchas
son las cosas que de ti he aprendido; gracias sobre todo por tu confianza y estimulo continuo.
Mi reconocimiento a Don Luis Domnguez Arqus, Jefe del Servicio de Restriccin de
Estupefacientes del Ministerio de Sanidad y Consumo, por sus atenciones y amabilidad.
Al Servicio de Anatoma Patolgica del Hospital Provincial de vila, especialmente
al Dr. Lpez Bravo, por su colaboracin e inestimable ayuda.
A Carmen, mi amiga y compaera de trabajo en todo este tiempo; por todos los buenos
y malos momentos que hemos compartido. Tu amistad es el mejor fruto obtenido.
1-lago extensivo mi agradecimiento a todos los miembros del Departamento de
Farmacologa, porque cada uno de vosotros habis contribuido en este trabajo. Pero mi
recuerdo es especial para aquellos que lo habis seguido y sufrido de cerca: a Jess y a mis
conipafieros de mdulo, gracias por soportarme.
A toda ini familia, por vuestra ayuda y comprensin; gracias por saber entender el poco
tiempo que os he dedicado

A lodos vosotros.

ABREVIATURAS
ACTH
AMPe
CBD
CBN
DL0
DL50
DL100
DM111
FSH
i.p.
i.v.

LII
MEP
PRL
SNC

TIIC
TRH

Hormona adrenocorticotropa
Adenosin monofosfato cclico
Cannabidiol
Cannabinol
Dosis letal O
Dosis letal 50
Dosis letal 100
Dimetilbeptilpirano
Hormona folculo estimulante
intraperitoneal

intravenosa
Hormona luteinizante
Mximo efecto posible
Prolactina
Sistema Nervioso Central
Tetrahidrocannabinol
1-lormona tiroidea

NDICE

Cannabis ha sido empleado en todo el mundo con distintos

propsitos, y posee una larga historia caracterizada por su
utilidad, e~fica o nociva, dependiendo del punto de vista,..

NDICE
INTRODUCCIN Y JUSTWICACION
REVISIN BIBLIOGRFICA DE CANNABIS SA TIVA

.1

11.1.- ALGUNOS DATOS HISTRICOS

11.2.- ASPECTOS LEGALES

11.3.- PREPARACIONES DE CANNABIS

11.4. ESTUDIOS BOTNICOS

12

11.4.1.- I-IABITAT

11.4.2.- DESCRIPCIN

/2

11.4.3.- TAXONOMA

13

11,4.4.- CLASIFICACIN SEGN LA COMPOSICIN Q UIMICA

11.5.- PRINCIPIOS ACTIVOS: LOS CANNABINOIDES

16

11.5.1.- GENERALIDADES

l6

11.5.2.- ESTRUCTURA QUMICA

16

11,5.3.- PROPIEDADES FSICO-QUMICAS

11.5.4.- RELACIN ESTRUCTURA-ACTIVIDAD

19

11.5.5.- FARMACOCIINTICA
* Absorcin y distribucin
* Metabolismo y eliminacin

22
22
23

11.5.6.- MECANISMOS DE ACCIN

* Interacciones inespecficas con membranas biolgicas
* Interacciones especficas con membranas biolgicas
* Alteraciones enzimticas
* Alteraciones en la sntesis de prostaglandinas
* Alteraciones del metabolismo macromolecular
* Interaccin con hormonas esteroideas
* El receptor cannabinoide

24
24
25
25
26
27
27
27

11.6.-FARMA COLOGA GENERAL

34

11,6.1.- EFECTOS PSICOACTIVOS

34

11.6.2. EFECTOS SOBRE EL SISTEMA CARDIOVASCULAR

36

11.6.3.- EFECTOS SOBRE EL SISTEMA RESPIRATORIO

36

INDICE

11.6.4.- EFECTOS SOBRE SIST. REPRODUCTOR Y ENDOCRINO

37

11.6.5.- EFECTOS SOBRE SISTEMAS NEUROQUIMICOS

38

11.6.6.- EFECTOS SOBRE LA INGESTA

39

11.6.7.- EFECTOS SOBRE LA TEMPERATURA CORPORAL

39

11.6.8.- EFECTOS SOBRE EL SISTEMA INMUNITARIO

40

11,6.9.- EFECTOS SOBRE EL FETO Y EL RECIN NACIDO

40

11.6.10 POSIBLES USOS TERAPUTICOS

4/

Uso en glaucoma

Antiasmtico
Anticonvulsivante
Accin antiemtica

Actividad analgsica

*
*

Accin antiinflamatoria
Tratamiento en los espasmos musculares
Accin sedante

Otras acciones teraputicas

*
*

41
42
42
43
43
44
45
45
46

11.6.11.- TOLERANCIA

46

11,6,12.- DEPENDENCIA
11.6.13.- EXPERIMENTACIN ANIMAL: EFECTOS

47

SOBRE EL
COMPORTAMIENTO
11.7.- DOSIS LETAL 50 (flj~

48
49

11.8.- TEST FARMACOLGICOS PARA EL ESTUDIO DE LOS

50

CANNABINOIDES

PARTE EXPERIMENTAL

.51

111.1,- ANIMALES DE EXPERIMENTACIN

5/

111.2.- PREPARCIN DE LAS MUESTRAS Y TRATAMIENTOS

.5-

111.3.- DOSIS LETAL 50

.54

111.3.1.- MATERIALES Y MTODOS

54

111.3.2.- RESULTADOS

.54

111.3.3.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

58

INDICE

111.4.- ESTUDIO ANATOMOPATOLGICO

59

111.4.1.- MATERIALES Y MTODOS

.59

111.4.2,- RESULTADOS

61

111.4,3.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

66

111.5.- BATERA FARMACOLGICA PARA CANNABINOIDES

67

111.5.1.- ANLISIS ESTADSTICO

67

111.5,2.- MATERIALES Y MTODOS

67

DESARROLLO EXPERIMENTAL

74

A.- Curva dosis/efecto del hashisl

75

,,,,..,.,....

A.l.- RESULTADOS

76

A.2.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

B.- Efecto del Tetraliiclrocannabinol

..

87

,.,,,,.,..

B.- RESULTADOS

88

B,2,- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

..,,,,

C.- Efectos dcl Cannabidiol y Cannabinol

Cl.- RESULTADOS

84

95
96

..,.,.,.,..,.,,.,..,,,

C.2.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

92

,.,......

loo

D.- Estudio del posible efecto de los otros componentes

de la resma de (annabis
Dl,- RESULTADOS

/02

D.2.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

110

E.- Potenciacin o inhibicin del efecto <le efecto

farmacolgico de los diferentes principios activos tras
una administracin conjunta
El.- RESULTADOS

E,2.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

os

13
114

..,,.,,.,

ni

CONCLUSIONES

123

BIBLIOGRAFA

125

.111

INTRODUCCIN Y .IIJSTIFICACIN

Para los agricultores Cannabis es cosecha de fibra;...

INTRODUCCIN Y JUSTIFICACIN
Cannabis sadva es una de las drogas ms tradicionales en el trfico ilegal. El
importante incremento experimentado en las ltimas dcadas por el consumo dc los derivados
del Cannabis (que se concentra fundamentalmente en los pases occidentales), as como el
conocimiento ms profundo de sus efectos psicotrpicos y orgnicos, ha originado la
proliferacin de datos experimentales encaminados no slamente a su estudio analtico sino
tambin a su proyeccin en teraputica y mecanismo de accin de sus principios activos.
Entre las drogas que son objeto de uso indebido, y por lo tanto, de trfico ilfeito, es
indudablwncnte el (i7annabis la nica que generalmente no contiene adulterantes y iiicanieflte
en alguna ce sus preparaciones, como cl aceite de hashish, se detectan algunas impurezas que
suelen ser otros constituyentes dcl (Jannabis o residuos de los disolventes de la extraccin, No
obstante, en casos contados se han detectado algunas adulteraciones con otras plantas,
especialmente en la marihuana. Por otro lado, existen grandes plantaciones de Camo indiano
destinadas a la obtencin dc Libra textil, pues presentan baja proporcin de principios activos,
Sin embargo, muchas de estas plantaciones, paralelamente enmascaran cultivos con flues
lucrativos, destinados a la extraccin de su resma, por ser variedades con una riqueza
importante en sustancias psicoactivas; por ello, toda aportacin cientfica al estudio analtico
de las nuestras decomisadas, puede facilitar su identificacin y clasificacin dc las misma
como droga o textil.
i)esde el punto de vista teraputico, esta planta fue en la antiguedad una de las
empleadas para paliar muchas y muy diversas afecciones, como veremos en las pginas
dcclicada.s a los cIatos histricos de Cannabis. Actualmente se conocen derivados sintticos de
Los cannabinoides empleados en la terapia antiemtica y para el glaucoma, y se estn
realizando importantes avances en el campo ce los analgsicos. Esto, junto con el
descubrimiento del receptor para cannabinoides y de la existencia de posibles ligandos
endgenos para dicho receptor, ha situado cii la cima de la investigacin cientfica a este tipo
de compuestos.
Por todo lo expuesto anteriormente, en la primera etapa de este trabajo experimental,
nos propusimos evaluar los diferentes mtodos analticos eromatogrficos para identificar de
una manera rpida la presencia de compuestos psicoaetivos en tina muestra de camo. Dicho
estudio concluy con la lectura ce dos Tesinas dc Licenciaturas basadas en mtodos de

IN~IROflUCCIN Y JUSTIrICACIN

cromatogarfia en capa fina (TLC) (Fernndez, 1993) y cron1atografla de alta resolucin

(HPLC) (Recuenco, 1993),

Ahora nos proponenios completar esos trabajos con un estudio puramente
farmacolgico, empleando diferentes ensayos sobre animal de laboratorio que permiten
caracterizar una sustancia como cannabimimtica.
Los objetivos principales hacia los que se encamin este proyecto fueron los siguientes:
* Revisin bibliogrfica de la especie desde el punto de vista botnico, fitoqufinico y

farmacolgico.
* Determinacin de la toxicidad aguda del Jiashish mediante el empleo de la DL50.
* Estudio anatomopatolgico de los rganos afectados tras la intoxicacin,
* Puesta a punto cte los diferentes tcst farmacolgicos para el estudio de camiabinoides.
* Establccin.iiento de Ja curva dosis/efecto de la resina.
* Ensayo ce diversas muestras de resma de Cannabis sal/va (hashish) con diferencias
en su composicin.
* Comparacin del efecto farmacolgico mostrado tras la administracin de dichas

imiestra, con el que sc presenta tras la administracin de cannabinoides puros

enpkados como patrones.
* Potenciacin o inhibicin de los efectos de los diferentes principios activos tras ujia

administracin conjunta.

REVISIN BIBLIOGRFICA DE CANNABIS SA TIVA

para los mdicos del siglo pasado era una panacea, ypara
los mdicos de hoy en da, un en igma;...

REVISIN BIBLIOGRFICA DE CANNABIS SA TIVA

11.1.- ALGUNOS DATOS HISTRICOS
La historia de Cannabis se remonta aproximadamente a 5000 aNos atrs. El testimonio
ms antiguo de que el hombre haya hecho uso de la marihuana es una descripcin de la droga
en un compendio de medicina chino, cl herbolario del emperador Shen Nung, que data del ao
2737 a. de C. El camo, se menciona ya en el 1200 a. de C. como fuente de fibra textil, y
la pi~iiuerti referencia histrica a cerca dc sus propiedades medicinales se encuentra en el
antiguo tratado lhaivaveda en el ao 1000 a. de C.(Singh el al., 1981). Otros datos
relacionados con esta droga aparecen en documentos asirios de unos 800 aos a. de C. Por
ltimo, en un tratado chino de medicina del siglo U d. de C. se cita al cannabis por sus
propiedades narcticas,
Segn el Iii. Royle, el calmante del dolor ~Nepentede Homero) que Helena ofrece
Telmaco en honor ce Menelao, puede ser Cannabis; segn se narra, Flelena consigue esta
planta por medio ce una mujer egipcia de Tebas. Dioscrides recomienda la hierba en forma
de cataplasma para las inflamaciones y tumores, Paulus Aegineta dice que las semillas tienen
propiedades carminativas y desecantes, y el zumo de la planta fresca es til para el dolor y
obstrucciones de odo (Millspaugh, 1974).
Muchas son las alusiones y menciones histricas que relacionan esta droga con hechos
cotidianos. Incluso en tiempos antiguos, la marihuana fue tema de prdiga controversia social:
estaban los que advertan que la planta del camo orillaba el camino del infierno, y los que
pensaban que conduca al Paraso. As en la era china pre-cristiana, se consideraba la
mariluiana como libertador del pecado. Ms tarde los Chinos la proclaman como la planta
donadora <le deleite o embeleso. En la India, la marihuana se conoce por nombres que al
traducirlos, hacen referencia a gran parte de sus cualidades: gua celestial o divina y
consolador o calmante de la pena o el dolor, hierba de fakires, cimentador de amistades,
hoja ce la alucinacin, excitador del deseo, provocador de risas
Segn la leyenda de Zoroastrian, los Musulmanes usaban la marihuana durante las
Cruzadas para endurecerse en los actos de terror contra los Cristianos (Turner, 1974). En
Arabia, las preparaciones ce Cannabis, conocidas como hashish, se suelen asociar con cuentos
increbles ce Rasan y sus asesinos, los cuales cometieron toda clase de atrocidades bajo la
influencia de la intoxicacin por Eannabis, Probablemente la palabra hashish proceda

REVISIN BIBLIOGRFICA DE cklNN,IBIssAnva

precisamente del uso que hacan las tribus dirigidas por Rasan, derivando posteriormente de
ella el trmino asesino (hashishin).
Herodoto denomin a la planta Kpvaf3tvg ~pepog al conocer que los Tracios

obtenan una clase de tejido de ella. Cuenta que la semilla de Cannabis se usaba para los
baos de vapor en los ritos funerarios de los escitas, y se han encontrado grabados cii vasijas
de bronce procedentes de estas civilizaciones (Kettenes-van Denbosch, 1978).
Hemos visto cmo esta planta se empleaba de una forna u otra en todo el Medio Este;
as, era bien conocida por asirios, egipcios, escitas, hindes y griegos. Sin embargo no se
encuentran indicaciones claras de que fuera utilizada por los antiguos Jud!os. De hecho, el
Antiguo Testamento menciona muy pocas drogas; incluso el opio, una medicina de alta
reputacin en la antiguedad, no aparece en la Biblia. Cal es la razn por la que un libro que
detalla muchos aspectos de la vida, sagrados y profanos, no mencione drogas como opio y
Cannabis?
Los Asirios utilizaban (annabis en sus ritos religiosos (como droga que induce al
xtasis) y como una droga medicinal (principalmente en lo que hoy denominamos
enfermedades neurolgicas y psiquitricas). Por otro lado, durante ciertos perodos de la
historia, el comercio de Judea dependi de Asiria; el impacto cultural-religioso de la corte de
Nnive (ciudad cruenta, llena de mentiras y robo), penetr no slamente en la clase real y
prestigiosa de Jerusaln, sino tambin en las clases bajas. Se puede asumir que bajo estas
condiciones, las drogas asirias fueran conocidas y utilizadas, por lo menos entre la clase
dirigente, tanto como herramienta para ritos religiosos como de medicina. Despus de la
muerte del rey asirio Ashurbanipal (669-626 a.C.), el reinado hedonistico de Asiria desapareci
con rapidez de la historia. El rey judo Josiah (628 a.C.), durante cuyo reinado resurgieron y
se reescribieron algunos de los libros del Antiguo Testamento, hizo eliminar rpidamente toca
la influencia pagana de las costumbres religiosas y de la vida juda. El hashish, smbolo de la
relajada moral asiria, debi ser prohibido. Todo esto se ajusta al fondo histrico, y a las
necesidades polticas de un estado Judo independiente y su rey. Esto explica la extraa
ausencia de vocablos como Cannabis y opio en los libros sagrados judos (Mechoulan ca al.,
1991).

REVISIN flILILIoGRFICA 1113 (AANAUISSflYIA

Cabe la posibilidad, sin embargo, que en una instancia el antiguo trmino (Jannabis sea
mexcionado en la Biblia. Es probable que pannag, un producto inidentificado, exportado
desde Judea a Tiro y mencionado por el profeta Ezekiel (5, 22), fuera de hecho Cannabis.
Probablemente el vocablo hebreo pannag fuera una de las denominaciones originales, en
snscrito bhanga y en persa bang. En hebreo y en otras lenguas orientales, slamente las
coisonant.es brman la base de tina palabra; las letras p y b frecuentemente se intercambian.
El trmino pannag, posiblemente, sufri una mettesis en sirio Cqunnappa), y rabe clsico
(kuinab), llegando al final a Cannabis en griego.
As, cl empleo dc Cannabis se fue extendiendo desde China hasta India, Luego a
Europa Meridional y al Norte de Africa, y desde all, hacia el ao 1800, a Europa Occidental,
por inedia de las tropas dcl ejrcito de Napolen que volva de la campalTh de Egipto.
El inters del valor teraputico de (Jannabis en el Oeste, sc despert por el documento
escrito de un cirujano irlands, OShaughnessy, en 1842 (Fornukong el al,, 1989). Este
cirujano, empleaba la droga para tratar distintas afecciones, como espasmos musculares, alivio
del dolor, convulsiones dcl ttanos, rabia, reumatismo y epilepsia. Su uso en medicina se fue
extendiendo por el rest.o de Europa y Amrica para combatir una amplia variediad de
problemas, que iban desde las convulsiones y los calambres menstruales, hasta la amigdalitis,
migraas y dolor ce cabeza. Tambin de utiliz para aumentar las contracciones uterinas y
reducir los dolores en el parto.
Tras esta gran difusin, el hctvhish se tso ce moda en los crculos artsticos y literarios
(le mitad del siglo pasado. Moreau de Tours public uos estudios muy detallados en 1845,
y tambin describieron los efectos de la droga en relatos llenos de colorido, figuras literarias
como Gautier (1843) y l3audelaire (1858). stos, junto a Dumas y Balzac, se reunan bajo el
signo del Club des J-laschischins en Paris durante 1840-1860.
Sn La primera mitad del siglo XX, los preparados de Cannabis fueron disminuyendo,
y su uso medicinal prcticamente desapareci. As, fue retirado de la Farmacopea de Gran
Bretaa en 1932 y de la estadounidense en 1942. Unos aos ms tarde, en 1950, desaparece
de Ja lista del ndex Merck, Sin embargo, en la Farmacopea india sigui hasta 1966
(Eormukong ci al., 1989). El inters por sus propiedades teraputicas ha dado lugar en la
actualidad, a la sntesis de derivados del TILO (principio activo mayoritario de la planta) con

.5

REVISIN BIBLIOGRFICA DE (MN,VAI)IS SA TI YA

un hituro proinetedor. 1kw desgracia, desde finales de los aos 50, este inters por la
,nariliuala no ha sido slo ~ las posibilidades teraputicas, sino por el aspecto narctico de
la ~lroga.Actualmente. < unpiuhis y sus derivados, son objetos de un trfico ilcito considerable
y esiste un elevado numero dc personas, principalmente jvenes, que lo consumen.

ti

fj

11.2.- ~~>E<~N)S
U~GAJfl

muvwn BIDLIOOLUIcA no namUDUMUVA

1V

1)calc cl punto dc visto legal. y dentro de la vertiente jurldico-penal, el consumo dc

drogas se encuentro regulado en nuestro pule en los Delitos de riesgo en general ~, n~
concretamente en Los artculos 341> bis a~ y 344 dcl vigente Cdigo Penal. En efreto, podemos
leer testuoltiienle

13,
4
,
itt

los que mnuaaovleren. .Aave.rrcfravn e> /rilsmna el consumo ilegal ch drogas rxIcca.z nuap<fwlentey
xaageande&W .skntreliic.n meelleinte siclos .k cultivo. feahrkawla e> trdfica olas pose~ma con este ltimo fi,& urita
ceWIgUeIeM cena u penas dr prixldaa nwaaor. y multes eh .10.1MW u 140<1.000 punas si se trarnn ch sustancias que
cenaeana ganw efisA. ea les xealeue y de twrexues mewar vn lo.t dems cwot ,Ve Impondrn las penas superiora en grado
cueasule. leas dregeax tiSxl&t. CXUQJ!Attfrflt&$ .3 SIiSttIfle?IUS jMIct*a4>icas u djbndan enftw menores de dieciocho afiat
en ee,ngros thwvntr.t agaaidneks aasiliuuvs o usualUerinalenw penlteackaflot cuando el cailpiable perteneciese a sana
orgenulzeaclOn que taniwa~a Consta ./hteilieh&I dljhandtrlu.w. os! casen cuando ka cantidad poukha para traficarflaere ch
ncSones inspfle&l.D SI los tEcleas eanfrfle*ts./laVNfl ralbados porjacultotiro ejusaclomsrlo pblico con absaso de sea
pre*sle>sa. se e inqiern.hJ. asdsnaas. les penes eh lnhubili&acidn especial. l.a sancin <le! facultativo comprende a los
metlcus y peronius cuso posrsle3n ele slradaw sesaluarlos. calfeamuw&aflce> y sus depemllentes. En los casos dc enrenw
gnavee&sdy cuesaaele los lwdaew raso avealfleselt&w en enaslleclmiento pblico. ose trate eh los Jefes, adminIstrados: o
vswenwaefin eA anata aus>ssnhewttla drclkenl esunquc Iberas peuvkahneate. <sinfinesdel psrealoprimero. los fllbunale4
ulems e/e Impuner lea pernas superior esa grau/o. sawchifu decretar algamas ch las medidas .ulguleates: a) CIanuro
definusivea dr les raspresea. sas: lecealex o etsesblrlmlente,. o <lisolucida ch la sociedad 1) Suspensin ch las actvh*#s
eh les esapreses ea sne*deul por Ucaaose. ele xci: meses <sano tafia, c) Paulaibicin a la enapwsu de realisar actlvichharh&
.;wnwlenws merressonks e. sorgeacius de, es citar dv esq culis cia cs<vo ejercicio u lan cometldo.favoreck!o o encubIerto
el dcli:.>. por llena,. de, dux anexes es leas abs. Cuando ulgasasta <he estas aaedldasfluuw aplicada. el 7flbunal podr
propuner cales .Iehsslnlstnacle isa que dixpusages las *awnwsridus ch la empresea para salvaguardar le dewclaoe eh los
rsbq/taefinvx leas cosadesatis eh 1rllaouocsln exresnjetru por de/lien de Igual caudal a los pariste esa el atkuio~
pruduclrel tasaSe os r.yaesflaales lux mismos rfeenos que las eh stos en causan lo escsblecklo esa el nnoero 25 dei! articulo
lO ch, eMe~ (Oeho~

Lo primera cuestin que sc plantea es si el Cannable sc encuentra dentro de lo que se

debe entender por drogo txico. cstupcfacient* y sustanela psicorpiea, y si es as, si se trata
de una sustancio que cause duho a la salud o no.
Desde cl punto dc vista mdico. parece claro que Cannabis entre dentro de lo que
entendemos por drogo en al campo dc las toxlcomnanlas, ya que se consideran como tales a
lodo /brnaco pxlcoaciva con accin rejbrzanle pavitiva. capacidad para desairollar
dependencia psicolgica. diccin, aif corno fennenos de tolerancia y toxicidadS

RI,V1516N BIBIIOGRAI:ICA DE <A NNAIJZS 5AtIIVA

Para Ja Administracin dc Justicia, la inclusin de los derivados cannbicos dentro del

concepto de droga txica, estupetbcicnte o sustancia psieotrpica puede ser ms dificultosa
nues stos no se encuentran definidos en Cdigo Penal, Por ello, durante muchos aos ha
existido una gran controversia entre Los penalistas respecto al (Jannabis. La Fiscala del
tribunal Supremo entiende como droga toda sustancio que introducida en el organismo,
puede naodf/ear. innwdiatanwn (e o no, a o varias de sus Ihaciones. Caracterstica comn

de u bogo. es que. crea

depe.tulcit&u <U tl Ot$ZCII5SiIt<>

el

.venscwi pi de bienestar y placer y causa una acusada

que. Iaabitaado a la <rogo, necesita de manera

continua, en

oran: irexstibl e.. pun evitar la apwlcin de tensiones fisicas y psquicas de variada ndole

(Portero (jarcla, 1983). Nl Iribunal Supremo, segn se desprende ce numerosas sentencias,

entiende por d roga txica o estupelacente, a las conIprenclidIas en las listas 1, II y IV del
Convenio linico dc 1961, y en stas aparece claramente recogido Cannabisy su resino> los
exacw os i humas de la <. annalus (lista 1) y el C.2an,abL~ y su resino (lista IV).
Queda e la.io. por (unto, que desde el punto ce vista jurdico penal, Cannabi.s se
encuentra perlbctamcnte dentro ce las sustancias a que se hace referencia en el artIculo 344
del Cdigo Penal y ms en su actual redaccin (drogas txicas, es!upq/cienles y sus&incias
psico(ipit<is).

wvisn rnBLtoclitM~CA ml eANMUIISUflVA

11.3.- lREPAIIACI(>NEH

DE =IY.&Iflt

En general. en el trfico ilcito C ~urnabls

es una drogo que se suele presentar de las tres
fonuas siguientes Ubaez. 1990):
corno productos herbceos (marihuana). TradIcIonalmente se cree que solamente las
suinidodes floridas y con mito contienen cantidades apreciables de compuestos peicoactivos.
La presentacin de la inaribuano. como veremos ms abcjo, es variadsima dependiendo de la
regin dc procedencio de la muestra. Los productos herbceos pueden contener entre un 0,55% de Ii It.
-

ti

Productos de resIno (hushfrh). La It3cnica empleada para la obtencin de la resino varia

tambin en funcin de la zona, siendo Las ms frecuentes el frotar la planta entre las manos
o contra una superficie de goma o la cual se adbiere la resino. Tambin puede pulverizarse la
materia berhcca. para despus exponer el polvo al sol derritindose la resma que luego es
fcilmente moldeado. 1.0 resino <le flnnahls suele contener entre un 2-10% dc THC.
-

} kf
1~

Cemnahtv liquIdo (aceito de hashlvh). Es un extracto liquido obtenido dc 1. hierba o de la

resino. Se realiza una extraccin continuo atediante un soxblet, siendo los disolventes
empleados el etanoL. metanol, acetona y ter do petrleo. Se obtiene as un aceite viscoso de
coloracin verde o castao dependiendo de la procedencia y el grado de madurez de la
malaria. Aproximadamente estos productos suelen contener entre un 10-30% de THC.
<enunhs se consume principalmente fumado, pero tambin puede Ingorirse corno

alimento o bebido. I.o India ca el nico psis donde el consumo por va oral es importante, en
rorma de bebido principalmente. Tambin se consume en forma de las ms diversas golosinas
y productos alimenticios. Sin embargo, en la mayor parle de los paises es ms frecuente humar
la drogo, que consumirla do este modo. Loa preparaciones ms tertea, suelen fumarse en pipo.
Las Cormas crudas nonos activas, se human en pipo o en cigarrillos.
En ocasionas so mezclan otras drogas con Cannabs. As, en la India, Pakistn y en
otros paises dcl mundo, el aboco suele ser porte componente de la preparacin a Aunar. La
mezcla con otro tipo dc drogo es ms raro; en ocasiones se aade da/nra, que contiene
escopolamino, atropina y otros alcaloides de la belLadona.

REVISIN llIfliiOURAFICA DE <NMVAIIIS 4113

El camo indiano se cultiva principalmente en regiones clidas y secas, como India,

l;gipto, Irica del Sur. Mjico, etc. Segn las reas, la composicin y la forma de elaboracin,
los nre~nidos reciben d is i titas de nominaciones:
*

En India:

II/tung. conocido tambin como.yiddh~ subji 6 pa/ti. Est constituido por las

hojas y las sumidades floridas masculinas y femeninas. Se fuina tal cual, o en ocasiones
mezclado con tabaco y opio. Se puede encontrar tambin en preparados con mantequilLa,
bollera o pasteles. mezclado con alYodisfacos, lis poco activo como estupefaciente. A partir
del IIhang se obtienen otras dos preparaciones, el u/kl (por maceracin en alcohol) y la
mudra (mezclado con opio y estramonio).

Ganjah, formada por las sumidades femeninas fecundadas, e introducidas en

resma. Suc le lresenuilse en masas np Imuindas, fiat ga~jah, o en husos redondos, round
ganj ah. 1 ~s muy nc (iva y sc suele Rimar en unas pipas especiales. timbin se ingiere en
forma de bebida con leche y agua.

Choras, llamado tambin charras, charrus, chiras o monja. Se trata de la

resma obtenida por recoleccin manual, Es la droga ms rica cii principios activos. Se suele
consumir lbmado o ingerido cii forma de dIulces, que llevan miel, canela, azcar, etc.
*

En Egipto y Arabia:

Iashtvh. Al igual que la anterior, es la resma, pero en estado casi puro. Se

mOldeLI en linos bastones que se incorporan a los cigarrillos comunes o bien se fuma en pipas
especiales. lambin se le suelo adicionar miel, mantequilla o ingredientes aromticos de las

Solanceas. Como hemos dicho anteriormente, los musulmanes durante las Cruzadas, dirigidos
por 1 lasan, IXimabun una Ii ierbn (iasILvh), que les estimulaba durante las batallas; ior ello, se
les denomino I;a.vlaisi,u o hasliaslun, dc donde dieriv el trmino asesino en rabe, pues bajo
la influencia de esta droga, estas persouias no dudaban en matar,

Jo

REVISIN BmDLIOURAFICA tW CANNARIS SAflIA

*

En lurquin:

aromticas
*

lq/iorum. Son extractos acuosos dc la planta, adicionados de otras plantas

y ti lrodistacas.

E m A frie a del Norte:

KW en Marruecos y Argelia. Son las sumidades floridas femeninas del

ci nio, redtic 1 dii

ti

polvo grosero.

Thkrar. en lYmnez. S.n las suinidades troceadas, tamizadas, y presemitadas

en Iormiia de p~qtietes.
*

1 ja Mjico

el Sur de 1 jstudos liii idos:

farlluana. Probablemente, el origen ce este vocablo provenga de la frase

azteca Mi lunu II unu. que posteriormemile hubiera derivado en su pronunciacin al trmino

actual. 1ambie3n se conoce como pat y <mss. Contiene sunildades floridias y se consume
me,.cludn con tabaco, liada en papel de IXimn, que se conoce vulgarmente como porro. Otras
denomi ixaciones con unes 1 [picas de (entroamrica son JtWflht(l~ marlia, etc.
*

En Europa:

La forma ms recuente de consumo es rumando las sumidades floridas tal

o bien, Inc/e ladas con tubace..>.

cual,

(Jiras preparaciones

son:

iIaxhtvI liquido o Aceite tic Marihuana, mucha ins activo.

Jilvrur. resma pura de la droga.
>awanwsk, drogo almizclada, para pistachos, almendras...

pi

itnvistw DIDUOORAPICA DE nftMWSMflVA

10
~0

11.4.- ESVIJI)l() IAQINJ.CQ

11.4.1. 1 IIIITAT
1~

(unnahis sai/va es originario de las zonas templadas de Asia, extendindose su cultivo

hacia China. India. Persia. Se supone que la planta entr en Europa durante el periodo
Romano. establecindose despus por todos las zonas templadas del globo.

(rece sin di Licultad tanto en sitios desrticos como en tierras cultivadas, lo que ha
facilitado su expansin. Florece en Julio y Agosto.

.i 1
1

El verdadero camo indiano, que posee propiedades narcticas, crece a una altitud

superior a 1800 mu. prim~eipalmentc cmx el Tibet e Himalaya. Estas variedades no presentan

itt

gram~des diferencias botnicos con las que crecen a bajos niveles de altitud, pero la variacin

iI~

en la cornposicii qumica es notable.

1111
iii

11.4.2. l)ESCRIIClN

Sc trata tic una planta anual, herbcea, diolca de gran talle, que alcanza desde 1 hasta
3 mn de altura. Presento tallo erecto y estriado, lofloso en la base, simple o escasamente
mmi ficado, y con una corteza interna fibrosa y viscosa.
1 ~lcamo posee luijas aserradas compuestas. siendo las inferiores opuestas, con 5-7
foliolos lanceolados y las superiores alternas, sencillas o con 3 segmentos; dc color verde
oscuro por el lwz, plidas y vellosas por el envs, presentan peciolos largos, finos y

estipuLados.
l,as flores masculinas estn constituidas por racimos axilares o paniculas, con 5 spalos
ovales, ms o nenes separados y vellosos; 5 estambres opuestos aL cliz, con filamentos
COrtos, iguales entre si y colgantes, y largas anteras.
Las inflorescencias femeninas son cimas compactas y espigadas. Son las flores ssiles
y con una brctea folicea cada una de ollas; cliz simple y nervado, spalos hirsutos y con

la

REVISIN ltIBIIOCIRFICA DE CANNtIflIS.~ATIVI

lbrma de corazn; ovario con un slo vulo recto y orttropo; estilo poco evidente y 2
estigmas alargados que sobresalen del perianto.
1 U fruto de C tu,nahhv swira es un aquenio glandular, casi esfrico, envuelto por los
spalos: pericarpo membranoso, i midehiscente, pero fcilmente separable mediante presin entre

las dos valvas.

l>oi alt mino. It sean1 Itt es ovoidea, list y dic color marrn veteado; un slo embrin
curvado, oleagi[toso y con C5CL151) itlbtimtieii
11.4.3.- lAXONUMIA
Muchas son Las clasificaciones taxonmicas a las que se ha sometido esta planta a
travs tic la historia: autores que consideran una sola especie dentro del gnero Cannabis, otros
que consideram dos especies, y hasta aquellos que son partidarios de una gran cantidad dc ellas
en 1X tei a de su orlgen geogr ti Co.
Nosotros, en este caso, hemos adoptado (como ya lo hicimos en los estudios analticos
croinatogr leos que cuni miaron con la presentacin ce la Tesina ce Licenciatura; Fernndez,
1993) la clasiflcncin escogida por Sniall y Cronquist (Sinal y Cronquist, 3976). Estos autores
presentan ( annabis salivo como la niCh especie del gnero. A su vez, dicha especie posee
tos subespecies, en funcin del potencial ce toxicidad ce ~ts principios activos. As, el gntpo
de ilaatas que poseemt una elevada concemtracin cte sustancias narcticas pertenecen a
(cuinabis voltio subsp. indica y aquellas cuya toxicidac es limitada se agntpan bajo la
subespecie C annabis sahic subsp. salivo y son utilizadas para la obtencin ce fibra textil y
aceite. (ada una de las subespecies presenta adems dios variedades botnicas, que se
idemiti llena por su crecimiento salva jo o bien ce ctmltivos: var. sal/va y var. sponlanea son
respectivamente las variedades cultivada y natural de la subsp. saliva, y la var. indica y var.
ka/risa,iea, de la sxibsp. hu/ca.

13

fr 1
~gj
.s..

lj

.4;,

REVISIN UBLIOGRARCA DI! <~AWUOWMflV4

Por lo tonto, la clasificacin taxonmica quedara como se expresa a continuacin:

1
.1W!

Divisin
Subdivisin

I>eropxicIa

Clase
Subclase
Orden

Igykalcx

l:unilia

Cannahinuccae

(incro

<aumihis

Especie

<ai,,iibis saliia 1..

(utmnahis sai/y subsp. salivo
(annahis salivo subsp. salivo var. solivo
ann<his solivo subsp. salivo var. sponianea
(annahis salivo subsp. Indica
<1 e.umabix salivo subsp. indica var. indica
emnabis salivo subsp. Indica var. kq/irIstanica

ti

:1~11

:4
t91j

141 1

11.4.4.- CI..ASIFLCACIW SEUN LA COMPOSICIN QIJIMICA

Desde los ltimos treinta aos sc ben realizado numerosos intentos para clasificar las
distintos variedades de <emnahix en Ibncin de sus propiedades txicas o textiles. GrIt
propuso un sistema dc clasificacin basado en el astado de madurez de la planta (Grl, 1964).
As, clasificaba las distintas resinas en cinco categoras diferentes, relacionadas con cl proceso

fitoqulnico por el cual el cido cannabidiolco (CBDA) es gradualmente convenido en

cannabidiol (CIII)), a~-flIC, y finalmente a cannabinol (CBN). Estas cinco categoras agrupan
plantas mataduras, en cuya composicin predomine el CBDA (1); Intermedias, con riqueza
en <2H13 (2); maduras, ricos en TIIC <3); sobre-maduras, con predominio de CBN <4), y
alteradas, que presentan una clara descomposicin qumica (5).
1.0 compLejidad dcl sistema dc clasificacin de GrLM, las avanzadas tcnicas analticas
y la necesidad de una clasificacin ms clara pero relacionada con la composicin qumica,
llevaron a Waller o establecer, en 1971, un sistema de clasificacin basado en el frnotipo, en
runcin de La relacin siguiente:

REVISIN BIBLIOGRFICA Dli < ANNARIS LUnA

fl<)

AYTilo

OBD

ORN

Se ha comprobado en numerosos experimentos que la prdida de la potencia de los

efectos de la ma hunna vn acompaada de la conversin de TIlO en CUN. Esto significa que
la suma del contenido de II CI (UN seria ms o menos igual a la proporcin dc TI-LO en las
muestras liescas, recolectadas recientemente (Mohamed el al., 1985).
)bservaado l.i frmula anterior, si una muestra analizada presenta un fenotipo >1 serti
considerada como ( ~nnal>Lv ti pu droga (fenotipo 1); si p~ el contrario es <1, entonces se
considera como ( <wnabis t pu libro (fenotipo II).
)tros autores han atiipliiido esta clasi henejn incluyendo un gran nmero ce fenotipos
di ferejites, haciendo re ferenc la a todas las varedades ce CunnabL~ conocidas, y teniendo en
cuenta otros cannabi noides menos corrientes cue los tres mencionados anteriormente pero
presentes en dicha especie ([urna cl al., 1980). Nosotros, sin embargo, hemos optado por la

clasificacin de Waller, que aunque sencilla, aporta informacin suficiente para afrontar
mies! ro estudio fiwnincolgieo.

1$

REVISIN IIIBlIOGRUICA DE (ANVAhlS SAflJA

11.5.- pRINCIPIOS ACTI VOS: LOS CANNABINOIDES

11.5.1. (.1ENERAI,il)AI)hS
l.as distintas preparaciones de ( annabis vea/va deben su poder psicoactivo a una serie
(le principios activos v>rcseltes en la planta y que globalmente se denominan cannabinoides.
Se han descrito hasta 426 componentes distintos, (le los cuales ms de 60 son cannabinoides
(l)ewey. 1 >86). Estos principios activos se encuentran en cualquiera ce las partes de la planta,
si bien, la mayo: concentracin (le el los a parece en las inflorescencias, De todos los
cannab noides conoc idos, el (~)At letruhidrocannabinol (&THC) es cl principal componente
pscoact i yo desde el purti (le vista farmacolgico.
Otros cannabinoides presentes en cantidades apreciables, aunque con menor actividad
arniacoigca. son el )\tletrallidrocannabinol (A8THO), el cannabidiol (CBD) y el
cannabinol <CUN).
(

1 )ebido al e levado nmero de sustancias potencialmente activas presentes en la

,narihuuu, y particu larnente a la gran variedad (le cannabinoicies, es probable dtiO todos ellos
actuen sinrgiennente. adtivarnente o incluso antagnicamente cuando se administra, a los
animales de experimentacin, cii forma (le extracto crudo o de resma (Dewey, 1986).
11.5.2. ESiRI lUN IRA QUMICA
Inc Mechou 1am, a finales de los aos 60, quien identific ior primera vez la estructtra
ilufin iea (le los cannah anides, presentando una estructura carbocfci ica ce 21 tomos de
carbono <Meehonltun, 1970). A diferencia ce la mayora dic los otros agentes psicotriicos
carece de nitrgeno en su molden la.
Existen dos tipos diferentes de numeracin para estos compuestos, en funcin de que
se considere la estructura pruicipal como un benzopirano o bien como un monoterpeno
(Razdan, 1986). i,o cierto es (ltlC AtlI [(2es exacta:i~ente el mismo compuesto que &-THC,
A8ll (2 el mismo que 8TIlO, etc, utilizando, respectivamente
4 la nomenclatura
dbenzoprnica o nionoterpnica. Nosotros, para este trabajo liemos optado por la primera de
8TIIC, etc.
ellas, y por lo tanto, hablaremos siempre de ~
A

REVISIN BIBI.IOORFIcA DE (7ANNAIIISXATIIA

__________________________________________

los cannabnoides naburMes Poseen dos centros quirales en C6a y C lOa en la

coiIguraeion

(/flfl~~

siendo las tbrmnas

()

20 veces ms activas que las formas QQ.

Aparecen ahora representadas las estructuras de los cuatro cmmabinojdes de nuestro

inters

mayoritarios de ( cmnahtv.

A9-TETRAHDROGANNABINOL

17

REVISIN flIflt.IOGRFICA DE CA NNABISSA?! VA

CANNABIDIOL

OH

A
HO

CANNABINOL

OH

Ja

REVISiN BIBLIoURPICA 013 (A Nt/AJIS SA TI VA

11.5.3. PROIIEI )AUES IISICOQUMiCAS

Son los cannabnoides y la mayora de sus metabolitos compuestos altamente lipfilos
y de Ntia solubilidad en soluciones acuosas. Concretamente, 49TI-IC es un componente
resinico, insoluble en agua con un valor dic PKft <le 10,6. Presenta un coeficiente de particin
octanol/agua a Pl 1 neutro dcl orden dc 6000 (Agurel e, al, 1986). Se trata de un compuesto
lotolbil, sensible al calor, a la accin de los cidos y a la oxidacin, pasando fcilmente a
(UN. Sin embargo. almacenado correctamente, a ~
2O~C
y disuelto en etanol, permanece estable
(iu ran te var i os meses.
1 .a elevada liposolubildad tic estos compuestos ha hecho ms complicado su estudio
lhrmacolgieo. No obstante, con el (lesarrollo cientfico, se ha logrado sintetizar numerosos
anlogos ce los cannabinoides que son solubles en agua y que han facilitado, en gran medida,
el avance en el conocimiento de este grupo de compuestos. Uno dc estos anlogos
8THC (MB~THC)que
cannabimimticos hidrosolubles es eL 1 d4morfolino) butiriloxiA
ha demostrado tener actividad lhrmacoigiea equipotencial con el MTHC (Compton y Martin,
1991>).
11.5.4.- RBI .ACIN ISlRUCItRA-ACTIVIDAD
Aunluc hoy da est ms que demostrada la existencia del receptor para cannabinoides,
no est totalmente claro si este receptor es el nico responsable de todas las acciones centrales
mediadas por dichos compuestos. Con la sntesis ce numerosos anlogos del KlHC, la gran
cantidad tic experimentos realizados, tanto en hombre como en animales de laboratorio, y el
desarrollo tic progrtunas informticos y tcnicas dic anlisis tridimensional (Thomas el al,,
1991), se han podido establecer los requisitos estructurales necesarios tiara que una molcula
conserve su accin ean:iabimimticti
El A~Fl (2 y el Ml1IC incluyen en su estructura una cadena latera) aliftica en
ce tipo ~entlo. Su desaparicin produce prdida ce la actividad, pero su modificacin
-

el

~1

puedie potenciara. As, el nmero minino dic tomos de carbono ha de ser de tres (Razdan,
1 <>86). Sin embargo, incrementando su longitud en siete tomos y ramificndola con dos
grupos metilos, sc potencia su accin; se obtienen as los ])imetilheptil (DM1-!) anlogos del
48 y A>ilC, que han demostrado ser muy activos (Martin el al,, 1991).

1!2

REVISIN BIBLIOCRFICA DE <NNABISSAIIIA

la actividad sobre el comportamiento depende en gran medida del grupo hidroxilo

fenlic() del C, ~Mechoulamy Edery, 1 <>84). Incluso se conoce el ngulo de torsin (155~) que
debe tener este grupo para obtener la configuracin activa del A9TIIC. Esta premisa se basa
en cl hecho de que cl 1 metoxiAil 10, que presenta una actividad farmacolgica muy
pequea. no presenta el ngulo necesario. lsta teora asume tambin que es el oxgeno
fenlico ms que el hidrgeno. el que est implicado en la interaccin con el receptor de
membrana (Sunas y Marta, 1990), Por otro lado, el Na boctate que es un derivado sinttico
nuv e lictz. como :e(luctor (le la presin intraocular del gLaucoma, posee un grupo dietil
et i 1 mu i no ester i heado en el li idrox lo.
-

Para que el compuesto preseilte psicoactividad es imprescindible tambin la presencia

del un lIb l)entnl) ira no. como Lo demuestra el hecho ce que el CUD no posea psicoactiviciad
y carezca tic dicho un i 1 lo. 1 U oxigeno benzopirnico, puede ser sustituido por un nitrgeno; un
ejemplo de esta sustitucin lo tenemos con el Levonantradol (Razdan, 1986). La sustitucin
de los dos metilos del (2<, resta actividad sobre el sistema nervioso central. Muy importante es
tmnbin que la unin entre los anillos sea traus; la unin en cts no da actividad. Sin embargo,

1 lowlett U al han demostrado que anlogos no clsicos ce los cannabinoides como el

levonantradol (tetraciclico) o el LP 55,940 (bicclico, que carece del anillo benzopirnico),
son capaces de producir una gran actividad analgsica.
Por ltimo, ~ircce ser que la posicin del doble enlace es fundamental para la
actividad sobre el SNC, siendo mxima para At se~uicla del A8. Si se produce la saturacin
completa tic anillo, disminuye notablemente la actividad (Razcan, 1986). Es importante
destacar que el grupo metilo del C~ juega un papel fundamental en los efectos
coniportamentales. su sustitucin o eliminacin atena dichos efectos. La Nabilona, posee un
grupo ceta en lugar del metilo en C~; esto le confiere un potente efecto antiemtico.
-

i .os anlogos ami noalquilindl icos con accin cannabiniimtica son los ltimos
compuestos sintetizados que guardan relacin farmacolgica con los cannabinoidies naturales.
Estos compuestos, que poseen una estructura francamente diferente a la de los cannabinoides,
producen erectos mtinociceptivos similares a los del THC (Compion et cd,1992). Adems
sc unen al receptor cannabinoide con una gran afinidad, como se ha podido demostrar
mediante tcnicas de 1>/ud/ng; un ejemplo de este tipo tic compuestos lo tenemos en el WIN
552122 (Kuster el al., 1993).

20

REVISIN BIIILIOORPICA DE (X]NNABJSSAZflA

000%

N
H

1 ,evoinn t nido1

It
OH

HO

(.P-55,94(>

4~ 1
R2V181014 UnuoGnAvic DE cnewsunva
11.5.5.-

l:ARMACUCINTICA
y

El hombre suele consumir las preparaciones de Cannabis fUmadas en forma de

cigarrillo o un pipo. El estudio lbrmacocintico de los cannabinoides tras su introduccin en
el organismo por esta vio dc administracin, se hace muy complejo, pues intervienen

.~

:1k

AL.:
.4

numerosos factores diflcilmentc controlables. Entre ellos se encuentra la variabilidad de la

composicin de cada drogo: La proporcin de A-THCen la planta oscila entre un 0,3% y ms
del 3%. y si se troto de la resino (hashish), supera 0110%. Adems existax ctores
concernientes a la turma de IXimar ci cigarrillo (tiempo de retencin del aliento, volumen
inhalado...). Poro complicar an ms el estudio, junto con el ATHC coexisten otros muchos
cannabinoides que tuodilicati notablemente la farmacocintica del compuesto.
Sin embargo. asumiendo que cl THC es el mayoritario y principal componente
responsable dc la actividad. nos Liniltaremos a describir los parmetros farmacocinticos de

Vi

Ui~ 1k~ 1

1
j~%1

dicho compuesto.
En general. son los cannabinoidos un grupo de compuestos bidrtbbos que suifen una
rpida absorcin, redistribucin y almacananlento en tejido adiposo, producindose
posteriormente una liberacin lenta, y ntantenLndose niveles plasmticos durante largos
perodos de tiempo. Esto explico la ausencIa de un sndrome agudo de abstinencia tras su
retirada (Agurel cl al.. 1986).
Conio el AVIHC es insoluble en agua, las nicas vas de administracinutilizadas por
el hombre para su consumo son lo inLutiatoria y la ingestin. SI bien, para experimentacin
animal, adems de culos dos vas, se emplean La endovenosa (kv.) y la intraperitoneal (i.p.).
No hay duda que Lo va cIa administracin escogida ea otro dc los factores condicionantes que
nodilicon la farnioc<>cindtica.

,~
4,

~i{

itt

k
t
jj

Absorcin y distribucl6n
lrae< uno administracin inhalatoriao intravenosa, se produce unarpida absorcin, con

una elevacin dc los niveles plasmticos muy rpida y similar en ambos casos (mximo en
unos quince minutos). Tratndose dc una administracin oral, comparativamente se alcanzan
niveles plasmticos ms bajos, encontrndose el mximo al cabo de una o dos horas tras la

22

ji

1~

,,.1
II
RBVtSt&4 DIBLOGIL&PICA DEC4N8.IWMflVA

:,

ingesta. l)cspus. en seguida se produce una disminucin progresiva, aprecindose un

fenmeno dc redistribucin; cl TI C sc une en un 77% a protenas plasmticas, principalmente
a lipoproteinas. Esta elevada unin proteica explicarla el porqu6 slo tina pequefla proporcin
dc TlIC pasa al sistema nervioso controL.

it

1 .a elevada liposolubilidad del compuesto, y la existencia de ~Jfl r~~~icl4j0 a U,avs de

la circulacin entero-heptica. se corresponde con una tambin elevada vida media. As, tras
tontosola
en liumatios
como enscratones.
hastaplasmtica
los 7-8 dasque
en oscila
cl perro.
Efectivamente,
uno
administracin.
observadisporndose
una vida media
entre
las 20.30 h
el perfil grfico de los niveles plasmticos del AtTHC puede interpretarse considerando la
intervencin dc 3 4 compartimentos durante su distribucin en el organismo (modelo
multiconportimcntal). lino gran porto del THC plasmtico (70%) es captado fUndamentalmente
por el tejido adiposo. encontrndose concentraciones muy elevadas del compuesto en pulmn
y rin a las pocos horas dc su administracin, para redistribuirse y acumularse en das
posteriores. cii bazo y tejido adiposo principalmente (Hunt y Jons, 1980).
*

II

.4

.
>1

I~

f
1>

4 ~,
r <~

MotaboIlsano y ollnilnacln
Los cannabinoides poseen un metabolismo complejo que ha sido estudiado por un gran

nmero dc investigadores. De todos los cannabinoides naturales, slo se conocen bien las rutas
metablicossimilar,
del ~NVl1iC,
~-Tl{C,
y CBN.
En todos ellos se produce
un tambin
proceso
metablico
empozando
por unaCI3D
oxidacin
hepticafiindamentalnienle,
aunque
existe metabolismo en pulmn e intestino. Esta oxidacin ocurre va citocromno P450,
obcni.Sndoge derivados mono, di o trilidroxilados. De los aproximadamente SO netabolitos
conocidos, importancia findaniental posee el monohldroxilado 11 -OH-A-THC por ser el ms
activo dc todos los metabolitos hidroxiludos. stos luego continan su oxidacin pasando a
los correspondientes derivados cetnleos y carboxleos (Agurel el aL, 1986). As! mismo, la
cadena lateral pentulico prescito en los principales cannabinoides, tambin puede sufrir
hidroxilacin. va por la cual se producen cuatro metabolitos bidroxilados: 1-, 2-, 3- y 401 l~AtTHC (1-larvey. 1990). Por otro ludo, tras la epox-oxidacin de dobles enlaces del anillo

se produce el nctabolito 9ct, 1 (k.epoxihexohidrocatwabiflOl.

[~
4
4

i.a eliminacin do los metabolitos se realiza, fUndamentalmente, en forma de cidos

libres o co~ugados con glucurnico o cidos oleico, palmtico o esterico. Se produce una

23

.5,

U1~

auvImN BIBLIOGRFICA DII <SIDDWZI

excrecin por va biliar (en heces) de aproximadamente 2/3, y 1/3 por va renal (en orina). Esa
mayor proporcin de droga eliminado por heces es debido a que la mayora de las
hgado, eliminndose por la bilis
hidroxilaciOflcs, como hemos dicho anteriormente, ocurren en
al intestino, con la peculiaridad de que puede volver a reabsorber. por la existencia de la
circulacin enturo-heptico. Dc ah que se trate de una eliminacin lenta: se necesita 4 6 5 das
para eliminar el 5C>% de la dosis administrada. En los consumidores no habituales los
nietabolitos pueden detectarse e~ orine entre los 2 y los 10 das siguientes al ltimo cigarrillo
fumado. 1 ~nlos consumidores crnicos, se pueden detectar incluso despus de cuatro semanas
de la inhalocin <l)igregorio y Stcrllng, 1987).

Por ltimo decir que no se detectan en orlan ni en hoces A-THC ni CBD sin
netabolizar, puro si trozas de ClIN.

:~;I.1
,14

ji.

4,,,

it

1%

444

11.5.5.- MIWANISMOS l)li ACCIN

Numerosos e intensos son los estudios huta ahora realizados para intentar elucidar el
meconisnio de accin de los cannabinoides, que pueda explicar tanto sus efectos psicoactivos

como el resto de las acciones admitidos para dichos compuestos. Sin embargo, como veremos
o continuacin. no podemos hablar de un nico mecanismo de accin; todo lo contrario, una
vez ms hoy que destacar lo complejidad y exclusividad de Los cannabinoides, pues son varios
y dilbrcntcs los mecanismos dc actuacin atribuidos al A9-THC y compue8tos relacionados.
*

Inleracciomies

len

nOapCCiuCUS con

fliofliurUn.
L..

wOu3088

Dada la elevada lipolilio que presentan los cannabinoides, es Mdl comprenderqueestos

compuestos posean una mayor afinidad por las membranas biolgicas que por los medios
acuosos dcl organismo. Por ello, diversos autores consideran que muchos de los efectos que
producen los cannobinodes sobro cl SMC se deben a perturbaciones inespecificas en la
membrana neuronol (Martin, 1986). Parece ser que existe una interaccin con la bicapa
Lipidica, producindose un aumento de la fluidez de la membrana y que se ha relacionado con
la psicoactivldad dc algunos cannobinoides. Sin embargo los estudios realizados en lo que se

refiere al grado dc fluiderlestabilidad de las membranas celulares han resultado ser bastante
contradictorios. l>or otro lodo, son Lgicas las comparaciones que algunos autores han hecho
entre los cminabinoides y los anestsicos locales debido a la elevada lipofihia de ambos tipos

24

RLiVISIN BIBLIOGRFICA DE (ANNA1118 8477YA

de cOmIfllCStOS. no obstante, actualmente esta hiptesis queda desechada, ya que los estudios
de interaccin del II 10 a membranas biolgicas realizados por Seeman e: al? en 1972,
muestran una unin it) veces menor de la necesaria para que un compuesto cumpla la regla
de Meyer-Overton que curacteiza a los ifirmacos anestsicos. Por tanto, se concluye que
aunque el A~ll It sea capaz de producir ligeras perturbaciones en la membrana celular que
provocan alteraciones en cl comportamiento, no son lo suficientemente profundas como para
producir unestesia.
*

lnteraceiontS especificas con ncxnbranas biolgicas

~xistentambin estudios que sugieren que los cannabinoides interaccionen de una

manera especilica con los componentes lipidicos de las membraias celulares, Esto se relaciona
con la uo.liiieucin dcl efecto sobre la membrana cuando se altera ligeramente la nolcula
tic un cunnabinoide. l.os componentes ce la membrana que podran interaccionar con los
cannabnoides son ntmcrosos: colesterol, lecitina, distintos fostolfpidos... Podrfa ser que los
cannahi noides formaran complejos con los fosfolpidos siendo regulado este proceso por La
presencia del colesterol. Adems existen estudios que demuestran que tras el consumo de
...annal,is, se produce una alteracin en la concentracin ce los fosfolipidos en plaquetas,
eritrocitos, plasma y leucocitos ( Kalo fontis cf al., 1980).
*

Mteraelones

Cfl?.iIfltiCBS

.08 cannabinoides son capaces ce inhibir un gran nmero de sistemas enzimticos. En

general, parece ser que esta inhibicin ocurre a travs de un mecanismo de accin ffiespecl fico.
Resultamos a continuacin los enzimas inhibidos ms importantes:

c/u~asu 1 >1/o.v/uta,va (ATPasa)

Las alteraciones sobre la actividad dc la ATPasa conleva implicaciones en la mayora de los

proccso~ biolgicos debido a la energa producida tras la hidrlisis del ATP. Se sabe que los
cannabinoides inhiben todas las ATI>asns conocidas, de cualquier tejido y especie, a muy bajas
concentraciones, pero hasta cl nioment(> no se ha encontrado una clara relacin entre
PorCenttU e de i tui ibicin eizimtica y psiconctividad.

25

e
4

.3

1WV1810W DIBUOORAFICA DE ~40MOMM1Z4

.Id~,gU; < Vclasy 14>./udfrxvrusa

Estudios realizados en los ltimos silos muestran que los efectos producidos por el TilO ~
compuestos relacionados sobre los sistemas enzimticos que participan en el recambio del
AMPe dependen de La dosis. el tejido y de la concentracin y tipo del cannabinoide empleado.
Todos estas variables, asociados al carcter bifsico de las respuestas de los cannabinoides,
hocen muy dilicil conocer perfectamente el papeL que desempea el AMPc en las acciones de
dichos compuestos. En este sentido, los cannabinoides no ejercen ningn efecto sobre la
fostbdiesterasn. sino que producen una alteracin en la actividad enzimtica de la adenilato
ciclasa. Parece ser cIne existe tan efecto dosis-dependiente sobre esta enzima; as, a bajas
concentraciones se producirla mo inhibicin de la adenilato ciclasa debido a una interaccin
espeel fleo del cannubinoide a un receptor (Howlett, 1937). Por el contrario, a concentraciones
elevadas. se producirla el efecto contmrlo, esto es, un aumento de la actividad enzimtica con
cl consecuente incremento dc los niveles de AMPe, todo ello provocado por un niecanlsnio
incspecl fleo de perturbacin do nietnbrona.

[1
ti

<1
3<

1II

4 Ii

otras enzimas sobres los que estos compuestos ejercen su accin, inhibindolas por
norma general. son: cx-OLucosidosa, p-oluouronidasa, Fosfate cida, NADP-oxidasa, 5Nuccotidosa, Colesterol esterase, cte.
*

Alteracin ca la sntesis do prostaglandlnas

tina vez ms la complejidad es la nota predominante en los estudios realizados para

entender el mecanismo dc actuacin de los cannabinoides. Los alteraciones que estos
compuestos producen sobre la cascada de cido araquidnico son dependientes tanto de la
concentracin dc la sustancia como del tejido examinado. En general, los cannabinoides
estimulan la I~u.jbUuuc ,~> que como resultado provoca un Incremento en la sintesis del cido
araquidnico; como punto flnal de lo cascada, y dependiendo del tejido, la conversin del
cido araquidnico o las diferentes prostaglandnas, se ver estimulada o inhibida. Adems,
Evons vi aL en 1987, demuestraui que ciertos componentes no cannabinoicos de la marihuana
son inhibidores dc la Ido-oxlgenasa,mientras que los cannabinoides, adems de inhibfr esta
enzima, inhiben tambin la Llpoxlgenasa.

Ir

JV

26

~1
4

uwstw DIDUOGLUICA Dli <AMMBISSA

.3

Vi

AlteraciollOS del netabolisno niacromnolecular

411

Ita general, los exporinentos u viera demuestran que ciertamente los cannabinoides
producen una marcada inhibicin, dependiente de la concentracin, sobre uno o ms de los
pasos involucrados en cl metabolismo macromolecular (inhiben la sntesis de DNA, RNA,

ti

42

proteinas. etc). Estos procesos no presentan relacin alguna con los efectos observados I, vivo
sobre el sistema nervioso central, pues cannabinoides inactivos en este sentido, como el CBN,
si producen alteraciones en la sntesis de macromolculas,
*

fi

InteraccIn con liuranonas esteroldeas

luie, es sabido la influencia que tienen las hormonas esteroideas sobre las emociones
y los estados afectivos. III cerebro posee receptores para diferentes hormonas uteroides, entre
las que se encuentran estrgenos. progesterona, andrgenos y corticosteroides. Por otro lado,
los cannabinoides estn relacionados con los esteroidos, pues ambos presentan una estructura
carboclelica similar: esto sugiero que los cannabinoldes puedan Interaccionar con los sistemas
esteroidicos.

4,

Por ejemplo. la adninisiracin -THC, CBD, CBN y otros cannabinoides a ratas de

laboratorio, produce un lncremcno de los niveles plasmticos de corticosterona, siendo el ms
potente dc todos cl AVlIlC (Zuardi ve aL, 1984). Adems, el THC es capaz de interaccionar
con los receptores dc glucocorticoides del hipocampo. Se sabe tambin que el consumo de
marihuana puede producir una disminucin de los niveles plasmticos de testosterona,
impotencia y oligosperniin en cl hombre. Los efectos que los cannabinoides producen sobre
la funcin reproductora, puedci resumirse en: alteraciones en la secrecin de gonadotropinas,
inhibicin dc produccin de andrgenos y estrgenos y alteraciones en la unin a los
receptores diana.
*

El receptor cannabnoldo

En los ltimos aos los estudios realizados pura intentar encontrar y aislar un receptor
para los cannabinoides. se apoyaban en la existencia de una relacin estructura-actividad, en
ensayos de blnding rtializodos gp viera, cl hallazgo de posibles antagonistas y la posibilidad de
encontrar un ligando endgeno.
21

RE VISIN BIuI.IOGRFICA DR (ANNARISSAflJ

la primera identheacin satisllictoria del sitio ce unin ce un cannabinoide en tejido

cerebral, sc realiz mediante la utilizacin de un anlogo sinttico soluble y psicoactivo, el 5
trinCtilflhI1()fliO~AHlII( ( Nyc cf aL, 1985). Este sitio cte unin con alta afinidad, saturable
y rcvcrsi Nc. se encon! tuba distribuido pat todo el cerebro, principalmente en hipocampo,
csttiado y mdula espinal. Sin embargo, al ensayar otros cannabinoides, no se encontr una
clara correlacin entre la afinidad dc cada uno de ellos y su potencia psicoactiva, por lo que
se piensa que dicho sitio ce unin no media los erectos isicoactivos de los cannabinoides.
1 lowlett, en 984, demuestra que el AtIflC inhibia la actividad de la adenilato ciclasa
dc una Corma dosis ilependiente sc demostr que esta inhibicin no era debida a una alteracin
inespeciflea de la membrana, pues no se produca en todos los tipos de clulas ensayadas..
Adems esta inhibicin estaba regulada por cationes divalentes como Mg2~ y Mi? y
nucctidos ce guanina. Dos aos ms tarde, el grupo ce lowlett demuestra que la inhibicin
tic la adeni lato cie lasa requera, adems, ce la presencia de la protena O~ ya que el efecto se
poda bloquear mec imite ti bosi lucin de sta inducida por la toxina periusiss (Hewlett el al?
1 98(fl. lodo esto, junto con La existencia ce una correlacin de las propiedades analgsicas de
una serie de compuestos cannubinoides no clsicos que inhiban la actividad de la adenilato
cielasa Pi iilru (1 lowlett ci aL, 1987), condgjo a la formulacin de un modelo de receptor
cannabinoide (Devane ti al., 1988). Con estos estudios se lleg al disefio de cannabinoides
sintticos, siendo por ejemplo el CI>55,940, uno de los ms usados corno ligando en los
ensayos de hinding y que posee un perfil farmacolgico similar al del t9THC.
1 ~i 1 MU), el equipo de Matsuda, mientras buscaban genes relacionados con los
receptores de la sustanciad, clon un gen que luego result ser el del receptor ce
cannabnoides. Bste gen codificaba para un receptor acoplado a la adenilato ciclasa. Es una
protena de membrana de 476 aminocidos. con 7 dominios hidrofbicos y varios grupos
sensibles a g ieosi Inc i.
Una vez caracterizado el receptor cannabinoide y clasificado dentro del grupo de
receptores que se encuentran acoplados a la protena G, Howlett y Houston han demostrado
en tu.io ce sus ltimos ensayos, que dicho receptor sigue manteniendo su funcionalidad aunque
se encuentre separado de la membrana celular, hecho que se ha comprobado mediante la
solubilizacin del receptor cunnabinoide utilizando un detergente; una vez solubilizado, se

28

~4f

~~aIJ

REVISIN IIIIILIOOI4FICA DE (ANNA BIS SAltVA

comprob mediante tknicas de lneling que conservaba su alta afinidad de interaccin con los
ligandos (1 louston y 1 lowlett, 1 992).
Recientemente, utilizando un anlogo cannabimimtico muy potente y soluble en agua,
cl XV 55,2122. se ha demostrado que los cannabinoides producen una inhibicin potente,
reversible y estcreoesp<xihct de los canales de calcio tipo N (Pacheco c/ al, 1992). Estos
experimentos sugieren adems que la va dc transduccin entre el receptor cannabinoide y los
canales de calcio, ini pl ica una protena ~1e~> que se une a GTP, que es sensible a la toxina
e independiente del metabolismo del AMPo, Por lo tanto, la inhibicin de los canales
tic calcio de ti pu N podra disminuir la excitabilidad y la liberacin del neurotransmisor, ya
que el calcio es un segundo mensajero muy Frecuento en la transmisin neuronal. Esto podra
explicar alguno de los efectos psicoactivos ce los cannabinoides.
Pura conocer la localizacin y ti istr bucin del receptor, se han empleado en estos
ltimos aos tcnicas muy sensibles dc autorradiografla e hibridacin in si/it, siendo los
md inligandos ms usados: los propios cannabinoicies naturales (311&THC), cannabinokies
clsicos sintticos como los l)imetilheptil anlogos (3HtiOLI-&THCI)MH) (Thomas e/al?,
1992), cannabinoides sintticos no clsicos (U~Clt55,94O) (flerkenha.m cf aL, 1989) y aril
alquil indoles. como cl ~Vin55,2122 (Jansen cl al?, 1992). Sorprendentemente, este receptor
ha resultado ser uno de los cne se encuentran en mayor densidad en cerebro, y adems, est
presente en toca la escala vertebrada, El patrn ce distribucin se conserva admirablemente.
Las zonas ce anis alta densidad se encuentra en los ncleos de proyeccin de los ganglios
basales (globus pali/das, .vubxtcauia niga pcuw reileala/cO, en el hipocampo y en cerebelo.
Otras zonas con tambin alta densidad tic receptores son el bulbo olfatorio, el cauclacio
putamen latera! y el ncleo entopeduncular. Las regiones que preset~tat~ una densidad
receptorial moderada, pertenecen principalmente a las capas y VI del corlex cerebral. La
mdula espinal y el tronco cerebral, prcticamente carecen de receptores cannabinoides, En el
hipotlamo, destaca el rea preptica medial, el hipotlamo lateral y los ncleos veitromedial
y paraventricular. Un la hipfisis existo un nmero muy bajo de receptores.
Cuando sc estatua en paralelo la distribucin ce los receptores cannabinoides con otros
tipos de receptores, encontramos que se observa una relacin entre los doparninrgicos y los
cannabinoicos, y concretamente con los receptores D- 1. Ambos estn acoplados fuertemente
a la adenilato ciclasa, siendo el receptor cannabinoicle inhibidor y el receptor Dl, activador

29

~t/,

1ti

REVISIN BIBLIOGRFICA DE (ANNA BIS SAIiIA

(MailICUX el aL. 1992). lambin se ha demostrado la coexistencia de receptores gabargicos

con receptores cannabinoicos en cerebelo, que podra ser una explicacin de la disminucin
de la coordinaci~n motora que se produce en el hombre y en los animales de experimentacin
tias la ~itlmili ist raen tIc TI U (Mackie cf aL, 1992).
Afortunadamente, se establece un alto grado de correlacin entre las localizaciones del
receptor camabinoide, la afinidad tic los ligandos al receptor, y la produccin de efectos ti
1q10. 1 ~stose observ empicando una amplia gama ce cannabinoides naturales, metabolitos,
derivados sintticos clsicos y no clsicos, derivados halogenados, etc. (Comptom el al?, 1992):
As, la disminucin de la actividad espontnea acompaada de un respuesta exagerada a los
reflejos protlueitlt>s ti baJas dosis, y la catalepsia a dosis altas, son producto de la localizacin
de los receptores can nabinoicos en los ganglios basales y el cortex cerebral,
1 .a ataxia, puede estar relacionada con la presencia <le receptor en cerebelo.
1 a bain densidad receplorial del tallo cerebral se asocia con la disregulacin respiratoria e
incluso de la IXncin cardiovascular, aadindose as un nuevo matiz txico a los
can uiali i no i ces.
Por otro lacio, la hipotermia que se produce tras la administracin de (Sannabis, se relaciona
con una accin sobre los receptores dcl hipotlamo anterior y rea preptica.
1 os efectos psieoactivos producidos en cl hombre han sido estudiados en profundidad,
incluyendo tambin los cambios en la visin y audicin, la i neapacitacin a la concentracin
y razonamiento, e neluso las alteraciones en la memoria. Parece que todos ellos estn
relacionados con la localizacin de los receptores de cannabinoides en el corta cerebral e
hipocam~O,
Igualmente, se relaciona con el hipocampo la actividad anticonvulsivante de los
-

CLiIlIltibilIoidCS

Incluso los eflctos analgsicos del THC se asocian a reas neuronales que presentan, en los
estudios autorradiogrlicos, muy baja densidad en receptores, como son el tronco cerebral y
lii nitlulti espinal, ambos asociados con la transmisin de la informacin nociceptiva y
analgsica (Mailleux y Vanderhaeghen, 1992). Sin embargo, esto no excluye la posibilidad de
una accin peri rrict~ de los cannabinoides sobre neuronas sensitivas,
-

A lo largo de esta revisin del receptor cannabinoide liemos ido haciendo numerosas
referencias a localizaciones ce dicho receptor en el sistema nervioso central. Sin embargo,

30

Ii

REVISIN LIIBLIOGRIZICA DII (ANNABt~SAlKI

existe tambin representacin del receptor cannabinoide en reas perifricas. As, poco despus
de tiLle se cloriart~ el 41211 tILle codificaba al receptor unido a protena O de los cannabinoides,
se Vio que no slo se expresaba en el cerebro, sino tambin en los testculos, aunque en unos
iveles muy bajos ((irard el al,, 1991). En 1992 Kaminski el al?, encuentran una elevada
unin especfica ce distintos radioligandos cannabinoides a sitios de unin en clulas
esplnicas tic ratn. Estos halhugos apoyaban la hiptesis ce que la inmunosupresin causada
por <Ii l( estuviera mediada por la inhibicin de los niveles de AMPo intracelular (Schatz
ej al?. 1992), Pues el ANtl>e es un segundo mensajero importante para la activacin de los
linfocitos. Elbctivamcnte. los ltimos estudios realizados al respecto muestran resultados de
la expresin dcl receptor cannabinoide en bazo, amgdalas y leucocitos de sangre perifrica,
siendo los linfocitos II las clulas que presentan mayor proporcin ce expresin, si bien 16
veces menor a la recogida en SNC (llonnboula ci al?, 1993). Por ltimo, recientemente se ha
donado un gen ((XS) para un receptor tic cannabinoides, que no se expresa en cerebro, pero
s en los macrlhgos tic la zona marginal del bazo. Todava no est claro, pero hay evidencias
para creer que sc tinta ce un receptor que traduce su seal a travs de una protena 0, en
respuesta a la tnin ce un ligando endgeno. Adems, curiosamente es el cannabinol (CBN)
el cannabinoide que presenta una mayor a haidad por este receptor que por el receptor cerebral.
l.n un iXtaro no muy lej Lino, probablemente se distingan dos tipos ce receptores ce
cannabinoides: uno responsable (le las acciones centrales (GB 1) y otro de las perifricas (CB2)
(N4unro el <1.1 1993).
Por otro lado, la demostracin ce la expresin de receptores cainabinrgicos por todo
el cerebro sugera la presencia ce un ligando endgeno natural, que se uniera a este receptor.
Pues bien, hace slo un par ce aos, el grupo ce Mcchoulam en la bsqueda de ligandos
endogenos para dicho receptor, itisl de cerebro de cerdo, un compuesto que se una al
receptor y que iXie denominado A nanckunida (<le sncrito cmanda, que significa
benavcnturaw,n) (Devane e, <ti., 1992). l.a estructura ce dicho compuesto fue determinada por
espcctrofotonetrla de masas y RMN, y confirmada por sntesis. Se trataba de un derivado del
cido araquidnico. la araciuidoni Ictanolamicia. Despus se demostr que la anandamicia inhiba
la adenilato cielas (Vogel ci al?, 1993), y cne dicha inhibicin es bloqueada por la accin de
la toxina pe~usiss (Felder ci al. 1993). confirmncose la interaccin especfica de este ligando
con el receptor cannabinoide. Pocos meses despus sc empiezan a realizar ensayos
farmacolgicos sobre rgano aislado y animal entero, en los que la anandamida minietiza los
efectos que producen los cannabinoides sobre el comportamiento animal, en distintos test

ni

REVISIN BIBLIOORFICA DR GANNABISSAIYIA

f~~nacolgicOs tpicos de dichos compuestos (Fride y Mechoulam, 1993>. La identificacin

dc la anandilin ida como iii ligando potencial para el receptor cannabinoide reafirnia la
importancia biolgica de las amidas de cidos grasos y sus derivados, Actualmente dos son
las posibles vas dc Ibrmacin de este ligando endgeno: la condensacin del cido
araquidnico con euuxolwnida, o bien a partir de un precursor (Naraquidonil
fosfatidiletanOlamidflt tras la accin de la fosfodiesterasa (Di Marzo el aL, 1994). La
intervencin dc la ruta metablica del cido araquidnico con el sistema canabinoide es ms
que evitiente tras una accin enzimtica escalonada, se produciran diferentes compuestos que
en parte podran actuar a travs dcl receptor cannabinoide. De hecho, ya se han identificado
en cerebro de cerdo, otros dos derivados del cido araquidnico que son capaces de
interaccionar con el receptor cannabinoide: La ilornoylinolcniletatolamicla y la
I)ocosm tct raen cta nc lamida (1 lanus el al?, 1993). Ms recientemente, se ha aislado en el
intestino dc perro otra sustancia capaz de reaccionar con el receptor cannabinoide, el
Armquidonil2gIiceVoI (Ramos, 1994); esto demuestra que la anandamida no es el nico
representante dc estos posibles mediadores neuronales, y que cabe la posibilidad de que exista
una gran diversidad dc efectos moduladores por parte de ellos.

coNtIc*1

1t*IpI

KIiZi uiZi I2hiiSi l0i.

~jjjjjjj~jjjjjjjjjjjt4nCHaCHic*l
Homo-yIlnalcnicianowda

CONHCHaCf%GI

7,10,13. 16.tkcsIcVCcflIItIAflOLNWidfi

2-Aroquldonil glicerol

32

REVISIN BIBLIOGRPICA DE CANPM1118 SA7IIA

Por ltimo, en los ltimos meses se ha obtenido mediante sntesis, el primer

antagonista selectivo y activo por va oral (le receptor central de cannabinoides. Sin embargo,
no presclita afinidad por el receptor cannabinlico perifrico. El 8R141716A, compuesto
derivado dcl pitwnl, antagoniza todos los efectos farmacolgicos y comportamentales
atribuidos a los cannabinoicies (RinaldiCarmona <u aL, 1994). Este compuesto puede aportar
grandes avances para el conocimiento de la fisiologa del sistema anandamida/cannabinoide.

CI

SR 14171 GA

33

4.1,1

A ,,t

REVIsIN

nmuoanM~c& Dii nMWMISMflVA

4$

---e

1.6.- flR&L&L31LQUL~QKNfla

1a lbrmacologla de los cannabinoides est caracterizada por la multiplicidad de etbctos,

siendo debidos principalmente a su accin sobre el SMC; es de esperar por ello, que la mayora
dc los efectos sc produ?cim a nivel do la inervacin del rgano ms que en el rgano en s.
l,os cwitmbiuoidcs producen diversos efectos comportamenales, fisiolgicos y
rar,nacolgicos tanto en el hombro como en animales de experimentacin, dependiendo
claramente dc la va de administmcin. Para facilitar el estudio, la mayora dc los
experinientos sc encucntraw~ fundamentalmente basados ea el principal componente paicoactivo
aislado dc Cannchix scflhiu, el AVille, y por lo tanto, en la mayora de los casos haremos
referencia a este compuesto. Daremos en primer lugar un ligero repaso sobre los efectos que
produce dicho compuesto en el ser humano, continuando con los que se observan en
experimentacin animal, para concluir con las aplicaciones teraputicas posibles.

11k. 1.

EFIWTOS

3
ti

nijI
~44
~

.1

PSIC()ACUIVOS

1~

l..os erectos que puede producir el consumo de Cannabk en el hombre son muy
complejos. Los efectos subjetivos que experimentan los individuos incluyen: excitacin y
disociacin de ideas, aumento de los sentidos, errores en la apreciacin del tiempo y espacio,
alteracin de las emociones, ideas ruas e Ilusiones, Impulsos irresistibles> espejismos y
alucinaciones. Se ha comprobado que estos elbctos varan de unos Individuos a otros en
tbnci~ de la dosis, va de administracin, la experiencia y expectacin del sujeto y la
vulnerabilidad individual a ciertos efectos paicotxicos. Adems, los niveles plasmticos del
11K! dependen tunihii3n de la tdenica del fumador, del contenido en cannabinoides de la
muestra y de la proporcin alterada durante la pirlisis, en la cual se producen tambin otros
compuestos que pueden agudizarlos efectos o aumentar la toxicidad a largo plazo.

Al

It
~

Tras el consumo do esta drogo, los efectos comienzan con un periodo inicial de euforia

44

o /dgh, que ha sido descrito como une sensacin de bienestar y felicidad, que va seguido
frecuentemente por un estado do somnolencia o sedacin, Por un aumento de la dosis o ~
Consumo repetido, sc producen hiperestesies sensoriales y distorsiones en la percepcin
sensorial en cuanto a forma, distancia, color, etc.

1
4

34

h,

anfw amuoaaAmc ce caNALIaM&0VA

Adems. sc produce un deterioro de las funciones cognoscitivas, incluyendo:

alteraciones de la nwmoria, disminucin del aprendizaje, disminucin de la percepcin y de
la atencin. En aquellos casos en que adems el individuo padece un sndrome depresivo, el
consumo crnico de esta drogo puede provocar estados de psicosis agudas y Pnico> con fiuses

de ansiedad intensa Aboad

(

y
4

4.

y Martin, 1992).

A dosis ya muy elevadas o o largo plazo en consumidores crnicos, se puede

desarrollar estados de delrium y una psicosis txica aguda, acompafiad.a de despersonalizacin,
prdida de la percepcin interior, para finalmente desencadenar un sndrome amotivacionol.
Mathew y sus colaboradores, en un estudio reciente realizado sobre un grupo dc 35 voluntarios
que rutunron cigarrillos dc mariluuana que contenan dosis bojas y altas de THC, demuestran

Ir

que el grado de despersonalizacin y de desintegracin es proporcional a la dosis, y que el

efecto mximo se produce a los 30 minutos tras la inhalacin, volviendo el sujeto a su estado
normal a los 12<) minutos despus (Motbew e, al., 1993).

4,
.

It,

llay evidencias de que el uso crnico de derivados del Cannabis puede llevar consigo
un alto riesgo
agravando
enfermedades
dc desarrolloyadcexistentes.
varias complicaciones
Un estudio realizado
psiquitricas.
mediante
En general,
el seguimiento
esto se produce
de una
amplia poblacin dc consumidores habituales de marihuana, durante 15 aNos, ha mostrado un
aumento de lo incidencia dc la esquizofrenia y otros procesos psicticos 6 veces superior a
la presentada por los no consumidores de dicha drogo, indicando que el consumo de Cannubis
1987).
es
un factor de riesgo independiente para cl desarrollo de la esquizofrenia (Andrasson el aL,
14!

Los estudios realizados un los uMtimos altos, tanto en hombres como en animales de
experimentacin, que trataban dc establecer una relacin entre el consumo de marihuana y el
aumento de la violencia y la agresividad, reflejaban que tras el consumo de dicha drogo se

inhalacin
produca
93
se observa
undedescanso
marihuana
un aumento
en la(Cherek
respuesta
de la agresividad
ci al.,
agresiva.
1993).deSin
Estas
losembargo,
su~Jetos
diferencias
en unseestudio
durante
explican
las horas
realizado
por
siguientes
la en
diferente
el aalio
la
va de adndnistracin utilizada en los primeros estudios (oral e intramuscular) y en ste ltimo
(inlualacin).

>Qii
xI

35

it

REVISIN BIBLICORAPICA DR CAHMdAUMUVA

Numerosos autores apoyan la hiptesis de que existen dos grandes grupos de

canrnbiioides uno de ellos lirmado por cannabinoides que producen depresin
coniparttltflental acompaada de un componente estimulante, siendo el A-THC el compuesto
modelo. El otro grupo, encabezado por el CBD y 013W, lo constituyen cannabinoides que
producen tanibin depresin del SMC, pero sin componente estimulante (Dewey, 1986).
4

::

11.6.2.-

~~~c,os SOBRE El. SISTEMA CARDIOVAScULAR

1 .os erectos de los cannabinoides a este nivel son mucho ms mareados en animales de
experimentacin que en el l~ombre. e incluso se pueden manifestar efectos opuestos. Est
peribetamente demostrado que la administracin aguda de TIlO produce taquicardia sinusal.
Cuando la drogo es inhalada, la taquicardia aparece a los 5 minutos, teniendo una duracin
de nproxlmadatnum~te 30 minutos: en cambio, cuando es administrada por via oral, existe una
relacin temporal entre esa taquicardia y los efectos subjetivos (Hoilister, 1986).
A dosis bajas y mediante inhalacin, en general no se aprecian cambios en la presin
sangunea, peri> a dosis elevadas aparece hipotensin ortosttica y sensacin de vrtigo, as
como una disminucin de la velocidad del riego sanguneo cerebral (Mathew el aL, 1992). Los
estudios realizados sobre esto tema concluyen en general que los mltiples efectos producidos
sobre cl aparato cardiovascular so deben a una depresin del centro vasomotor y a una accin
cardionceleradora.

4
1

Y
11.6.3.- IWIXCIOS S<)1)RB EL SISTEMA RESPIRATORIO

E,

11

No debemos olvidar que la va de administracinms utilizada para el consumo de esta

droga es la inhalatoria. A los daos que pueda producir el TIlO sobre el aparato respiratorio
hay que aadir el producido por las otras sustancias que se inhalan al frmar un cigarrillo. La
inxalacin va a producir alteraciones en el tracto respiratorio. Lo ms frecuente es que
aparezcan tras varias exposiciones a la droga, aunque no es raro que algunos de los eftctos
aparezcan tras haber inhalado una sola dosis. Los cannabinoides producen una accin
broncoclilatadora y antiasmtica, muy positiva con fines teraputicos. Sin embargo, parece que
esta accin se contrarresto con la ejercida sobre los macrfagos pulmonares y clulas
epiteliares, disminuyendo as las defensas antibacterianas naturales de la zona.

36

ti

)I Si

1:4
t4

si

e:

REVISIN DIDLIOORAPICA DR fl4NM4IW srn

Adems como efectos negativos que sc pueden producir a largo pazo por un consumo
crnico se encuentra la bronquitis crnica, laringitis catarral, irritacin bronquial, ronquera e
incluso cambios en lo mucosa con metoplasia y alteraciones precancerosas.
ti

11.6.4.- EEECIC)S SOBRE El. SISiEMA REPRODUCTOR Y ENDOCRINO

4

t)csde la antiguedad se ha relacionado la marihuana con el incremento de la actividad

~

sexual. Este poder que se atribuye al tannubis se justifica como consecuencia de su efecto
desinhibitorio, anwtndose tIc la mente del consumidor todos los tabees.

1
,:

l,.os cannabinoides estn implicados em~ muchas de las alteraciones de la funcin sexual

y de otras litaciones endocrinas. Tanto cl -THC como gran parte de sus anlogos, tienen
electos sobre el sistema reproductor masculino y femenino.

4,

4>t~

44
,

En algunos cosos existen controversias, pero la mayora de los estudios muestran una
disminucin en la secrecin de la hormona folculo estimulante (PSE) y de la hormona
luteinizante <1,11). necesarias nra la ovulacin y el mantenimiento de la fase folicular; este
efecto lo provoca el flnnubr por su accin sobre el hipotlamo. Respecto al descenso de los
niveles plasmticos de prolactina (PRL) tras el consumo o la administracin de derivados
cannabinoides. no sc pucde decir que sea debido a una inhibicin directa sobre la glndula
hipofisiaria (Mendelson vi aL. 1984).
Es apreciable tambin la reduccin en cl tamao de los testculos y la regresin de las
clulas de Leydig. efectos que son revertidos por cl tratamiento con andrgenos exgenos.
Adcms, como consecuencia se puado producir, en consumidores crnicos, una oligosperinia
e incluso ginecontastia.

wt.
1a

Por otro lado, se ha denostrado que el A-THC es un potente estimulante de la

secrecin dc lo hormona adronocorlcotropa (ACTH). Sin embargo, los cannabinoides en
general producen una disminucin dc los niveles de tiroxina y trlyodotironina, pero este efecto
no parece ser debido a su accin a nivel pituitario o tiroideo, ya que a la misma dosis no se
altera el cfecto de la hormona tiroidea (TRE).

37

~SiPI

1
i% 1
4

-II

Evutd amuaaMncA ir

aAwMTffA

11.6.5.- EIIW.f< >S S( )IIRE SISTEMAS NEUROQUIMICOS

(han parte dc los efectos que sobre el 8140 producen los cannabinoides se pueden

explicar por los alteraciones que son capaces de provocar sobre distintos sistemas

acurotransmisores. Vamos a ir viendo qu ocurre con cada uno de ellos,

1$
*

AcetilcOliflul
El Atli It y sus derivados disminuyen cl recambio de acetilcolina al mismo tiempo

que producen un incremento de su concentracinen hipocampo, principalmente. Existe adems

una relacin entre las dosis que originan este efecto y la aparicin de alteraciones en el
coniportanliento. lanibin se eleva en otras regiones, pero en menor grado, como en el cortex,
tmtriado y protuberancia. El incremento de los niveles de acetilcolina no va acompaflado de
una inhibicin del enzima occtilcolinesterasa. Este efecto se demostr recientemente en un

1
,

,1

estudio tOro sobre rgano aislado, en concreto sobre conductos deferentes y plexos
mesentricos de cobaya (lkrtwce e: aL. 1992).

it
*

Sorotonna

la administracin crnica de cutnablnoides causa efectos biffislcos sobre la sntesis de

este neurotransmisor: comienza con un incremento significativo del contenido cerebral de
serotonma, concretamente, son cl hipotlamo y el cerebelo las zonas ms afectadas,
observndose paralelamente. una depresin del comportamiento animal. Seguidamente, se
produce mm Ibse estiniulatoria, que se relaciona con una disminucin de la serotonina en las
respectivas reas cerebrales (Dewey. 1986).
*

Dopamina

La exposicin aguda dc A-THC en animales de experimentacin causa un descenso

de las concentraciones cerebrales de dopamina; por el contrario, el tratamiento crnico, lleva
consigo a un aumento de su recambio y sntesis. Respecto a la relacin con el efecto sobre el

comportamiento
iminiul. un
hayefecto
que decir
que, pero
Igualmente
que lo que
ocurria endel
el caso
de la
serotonina,
sc observa
bifsico,
a la Inversa;
el descenso
contenido

114

38

ji

1
DmLIOORAnCA DR <aun Sari

1
7,4

dopaninriCO
cerebral
se corresponde
conde
undoponiina.
periodo de depresin, mientras que durante la
lose estimulatoria
se detectan
altos niveles

st

Adreitalflhl y noradrenallita

1 .os efectos detectados sobre los sistemas adrenr8lco y noradrenrgico son similares
a los que sc producen a nivel del dopaminrgico.
*

Gaba
41

l.u interaccin del sistema connabinoide con el gabargico es un hecho ampliamente

demostrado. As, se produce un incremento de dicho neurotransmisor tras la administracin
del cannabinoide, y se la demostrado adems que el THC puede interaccionar sinrgicamente
con las benzodiazepinas, incrementando la potencia epileptgena del diazepem. Otras
experiencias han establecido la existencia dc sinergismo en la produccin de catalepsia en
valn con dosis bqitL% de benzodiazepinas: dicho efecto no se observa con la administracin de
estos rrmacos por si solos <Pertwec y Oreentree, 1988). Todos estos efectos se podran
explicar por la posible coexistencia dc receptores gabargicos y de cannabinoides (Herkenham
viaL, 1991).
11.6.6. tWIWlOS SOBRE LA INOIISTA
Bit la literatura se encuentran bastante referencias anecdticas a cerca de los efectos de

la narihuana sobra el apetito. 1.05 comentarios ms frecuentes tienen relacin concl aumento
del deseo por los dulces. Sin embargo. muy pocos estudios cientficos se han realizado hasta
ella experinientucim
momento que hagan
animal,
referencia
sc detecta
a la ua
accin
notable
de losdisminucin
cannabinoides
en laa ingesta
este nivel.
de alimentos
En el casocon
de
la consecuente prdida de peso.
11.6.7.- FFPV~flt4 SOBRE LA TEMPERATURA CORPORAL
En el siglo pasado los extractos de Cannabis se utilizaban para bajar la fiebre antes de
la introduccin de la aspirina. La sensacin de sofoco, seguido de escalofros y enfriamiento

39

1
,
~

REVISIN IlIBLiOGRVICA Dl! <t4NNAUlSWII

ce las extremidades. se describi en muchas ocasiones tras el trata,micnto con extractos de

caflo.
1 U l\mtu Inar huana

ti

la dosis habitual produce efectos nfaimos en la temperatura

~~~pttiI
corno coiiseeueiieia de una ligera alteracin del centro termorregulador. En el hombre,
solamente dosis elevadas de Mil IC administradas por va oral pueden inducir una calda de
la temperatura corporal: esta hipotermia sc ve ihvorecida si el individuo se encuentra en un
ambiente fro ( lormukong el al, 1989). Sin embargo, el MTI-IC produce hipotermia dosis
dependiente en la mayora dc los animales ce experimentacin, siendo an ms potente en
animales hpurterol leos que en cutnncos.
Parece ser que estos compuestos producen hipotermia por actuar como depresor del
SNC, concretamente sobre el centro ternorregulador y tras el bloqueo de las prostagladinas
de la serie l
11.6.8. EFItIX)S SOBRE El. SlS~lEMA INMUNITARLO
Est totalmente comprobado que el &ll--IC, el principal componente de la marihuana,
produzca inmunosupresin tanto en el hombre como en animales de experimentacin. Aunque
el electo inhibitorio del II U sobre la respuesta inniunitaria, tanto humoral como mediada por
clulas, sc ha demostrado con numerosos ensayos, se conoce muy poco sobre el necanisno
(le accin mediante el cual se produce dicha inhibicin. Sin embargo, recientemente se ha
caracterizado y donado un receptor IMita los cannabinoides en macrfagos esplnicos,
comprobndose adems que se trata de un recCptC)r diferente al cerebral, y que por lo tanto,
parece ser que este rceepto periUrico pacida intervenir en la regulacin dcl sistema
iniunitario ( Munro cf a/. , 1 993).
11.6.9. IWI&UOS St)I3RE El. FEIX) Y EL RECIN NACIDO
1 ~nnarihuana y sus derivados atraviesan libremente la placenta y pueden inducir
efectos toxicolgicos y teratolgicos directanente sobre el feto, tras un uso crnico y a
concentraciones elevadas.

40

1k

Ri3VI5IH DIBUOORAFICA DR CANM4BD W7E4

.1

En los estudios desarrollados por Wenger, administrando THC a ratas prefiadas, se ha

observado iue las cras nacen con un peso menor, estando tambin disminuido el peso de las
gnadas. As mismo, se produce lina disminucin en el contenido del neuropptido Y (NPY)
en cl lipotlaniti. Con todo ollo, tras la administracin crnica de THC a dosis bajas durante
el r~
5ifl%~flS~%SSt se pniuwx una inhibIcin transitoria del desarrollo del eje hipotlamopituitario-gonadal. con los consiguientes cambios en el sistema neuroendocrino (Wenger et aL,
1991).

1:,

44

11.6.1<). l>()Sllil.ES lISOS TERAI>IJiiCOS

it

Durante ntuclios siglos, crnnublx se us para paliar diferentes enfermedades, pero a

principios del siglo pasado sc produjo una verdadera explosin desu potencial teraputico. As
sc utilizaba en el tratamieto del ttanos, en los desrdenes convulsivos, en neurlgias,

.41U

migraas, disnenorrea. insomnio senil, depresin y gonorrea, as como en las adicciones al

apio. Tanbin se us par estimular el apetito y aliviar el dolor y la ansiedad en pacientes
terminales dc cncer. Sin embargo, con la llegada de la hrmacologa moderna y el
descubrimiento dc muchos otros frmacos ms efectivos en estasenfermedades, el entusiasmo
por <cuinahis canto agente teraputico ilie disminuyendo progresivamente al comenzar el siglo

II
~4

xx.
.1

Con el conocimiento de lii estructura del principal componente activo de esta planta,
el ~WlC.la industria lhrntacutico y laboratorios comenzaron a investigar en la sntesis de
compuestos derivados dcl THC con fines teraputicos. No obstante el principal problema es
separar los elbetos farmacolgicos deseados dc los efectos psicoestimulantes de estos
derivados.
*

liso en cl glauconu

El descubrimiento do lo capacidad que posee el THC para disminuir la presin

intraocular fue ms o incitas casual. En un estudio multiparamtrico realizado sobre fbniadores
crnicas de niariluiana, tras la medida de la presin intreocular se observ una disminucin
del 45% en <> de II itdividuos 30 minutos despus de haber fumado (Hepler y Frank, 1971).
Se han hecho muchos experimentos en conejos empleando distintas vas de administracin>
incluyendo la instilacin en el ojo, que han confirmado este efecto y que ha resultado ser tan

4!

~4.

Ir,.
I
4

te

.4

tuvmIOw UmLIOOItAFIcA DII <MNMtBD SAZYE4

potente y duradero con~o el de la pilocarpina. Tambin se han probado otros caunabinoides,

como cl 8-u (3- 1 -hidroxi-A-TI1V o el CBN. que han mostrado el mismo efecto. Estos
conipuestos no poseen etbctos sobre el SMC, lo cual supone un campo interesante en la
aplicacil teraputica. En 1981 ~ administr por va oral a pacientes con glaucoma un

u
fi

homlogo sinttico del 111V. cl BW 146V, pero por desgracia, la bajada de la presin
intracculur fe acompaada de hipotensin ortosttica y efectos subjetivos (Hollister, 1986).
*

AntiasmtICO
4

Tanto cl A-il1<.! comu cl M-TFIC estn provistos de efectos broncodilatadores,

mientras que el (111) y CliN carecen de esta propiedad. No sc han encontrado evidencias de
tolerancia a este erecto tras una administracin continuada durante 20 das, pero el tratamiento
dcl asma es tRucho mutis crnico, por ello hay que seguir realizando estudios sobre este aspecto.

El TI IV debe ser administrado mediante aerosol para que sea eficaz como antiasmtico; su

mecanismo de accin an no est clamnente establecido, pero no debe ser estimulacin 11

mdrenrgica. Actualmente se siguen ensayando anlogos eficaces en este sentido pero exentos

4~$

de efbctos psicoactivos.
*

Aitlconvtmlslvnnte

lino de los primeros usos teraputicos de Cannabis a finales del pasado siglo fue
precisamente para combatir los ataques convulsivos en el hombre, Estadios posteriores
realizadossobrodirerentes especias animales mediante tcnicas de electroshock hanconfirmado
esta accin. El mnetabolito dcl K-TFIC, 1 l-OH-A-THC, y el anlogo sinttico,
dhnctilheptilpirano (DM111>). son ms potentes que el compuesto primario. Aunque no se
conoce clnranw~te el niecumnisnio de accin por el cual los cannabinoides producen este efecto,
parece ser que deprimen la transmisin neuronal entre la corteza cerebral y la mdula espinal.
Tambin sc ha podido observar que el CBD ha resultado ser ms potente anticonvulsivanite que

iii

1
li!y

It;

1!,

el 111V y que ambos compuestos. administrados conjuntamente potencian dicho efecto. El

hecho dc que el CIII> no manifieste efectos pslcoactivos marcados y su actividad

1:9

anticonvulsivante, lince que las investigaciones se dirijan por este camino (Martin, 1986).

42

st

u
44

14

RBVISItd DmLIOOBAPICA

ne tenues &ow~

Accin antieinticit
A principios de los aos 70 so pudo comprobar que los pacientes con terapia

anticancerost presentaban menos sntomas de vmitos y nauseas sin previamente hablan

limado niariltuano. Pocos aos despus sc ensay la administracin de THC a pacientes que
estaban recibiendo cisplatino, obtenindose una accin antiemtica superior a la de la
clorperazino. siendo tuis e lectivo en pacientes jvenes que en ancianos. Sin embargo en

si

ensayos
clnicos posteriores,
de los
pacientes tratados
con THC
experimentaron
efectos
psicoestimulantes.
as conti muchos
sedacin,
somnolencia,
hipotensin
ortosttica,
visin borrosa,
disfliria y conlXLniIt mental. Debido al desarrollo de estos sntomas centTales, se sintetiz un
derivado del AVIl 1(7, la Nabilona. el cual pareca tener un gran margen entre su accin
antiemtica y los efectos eut~ricos. La Nabilona result ser ms elbotiva como antiemtico que
la proclorpentziita. puro no estaba exenta de efectos secundarios que Incluan sequedad de
haca, alteraciones en la coordinacin, una ligera bajada de la presin arterial y mareos. El
Levonuntradol y el IIRL 4664 son tambin otros dos derivados sintticos del THC que
nuestnu~ electo antiemtico sin eli~ctos colaterales ulvo por la disforia.

444

1? ~i.
45,

El posible mecanismo de accin por el cual Cannabis evita la emesis no est bien
establecido. Muchas son las hiptesis que intentan explicarlo, basndose la mayora de ellas
en la interaccin de los cannabinoicles con otros sistemas neuroquinilcos que actan sobre el
centro del vmito.
*

Actividad analgsIca

1
r

Marihuana, hashish y otras preparaciones del Cannabis se han usado a travs de los
siglos para aliviar el dolor. Desde finales de los aRos 60 muchos son los ensayos
rarmacolgicos que se hicieron al respecto. mostrndose una gran variabilidad de resultados
que ponan en wurc dicho la accin analgsica de esta droga; incluso pruebas realizadas en
grupos ce personas voluntarias no reflejaron efecto analgsico sino todo lo contrario (Hill it
at~ 1973). Sin embargo, precisamente estudiando la potencia analgsica de distintos
compuestos cannabinidlcos no clsicos que inhiban la adenilato ciclan, se propuso por
primera vcz un modelo del receptor cannabinoide {owlettit aL, 1987).

43

r
4$;

REVISIN BIflt,IOGIIFICA DF LANNA DX SA?iIkI

las drogas untinociceptivas pueden producir sus efectos bloqueando las sefiales dc
seflsflciflhl de dolor en centros espec leos del cerebro, interrumpiendo la transmisin ascendente
a nivel de la mdula espinal. o bien en ambos niveles, supraespmal y espinal. Pues bien, tras
la administracin de Atll It: y el potente canriabinoide sinttico CP55940, por va
endovetiosa e iiitrtteettl a ratas intactas y ratas espinalizadas, se ha comprobado que los
cannabnoides ejercen su eketo antinociceptivo tanto a nivel espinal como supraespinal
(l.ichtman y Maril ti. 1991). .os sitios de unin para los cannabinoides en la mdula espinal
se encuentran en la sustane a gelatinosa, que es un rea implicada en la transmisin de las
seales de nocicepcin (1 lerkenbam ci aL, 1990).
1:1 erecto undxociceptivo depende en gran medida ce la vta de administracin del &
TI it:, siendo las vas endovenosa e intratecal las que reflejan una mayor potencia analgsica,
y la subcutnea e ntrnperitoneul. las rutas de dmi nisracin menos eficaces (Smith y Martin,
1992). Otro Ibetor lXidamental es el estructural observndose una estrecha relacin entre la
activdad analgsica y la estercosclectvidad (Martin, 1985).
Por uit tui lacIo, actualmente se estn real izando numerosos estudios para intentar desvelar
la posible interaccin del sistema opiode con el sistema cannabinoide, As, se ha demostrado
que el efecto analgsico de la moni ta administrada por va intratecal (it.) se potencia con el
pretratamiento de cannubinoides (Welch y Stevens, 992), Saber si los cannabinoides y los
opndes uctuan en sitios tic unin distintos o similares es algo que todava est por determinar,
Puede ser que la interaccin de ambos sistemas se produzca por efecto modulador de los
cannabinoides sobre el sistema opinide (Vaysse cf aL, 1987), o bien por que ambos acten
activando sistemas dc neuroetctores en la clula; lo cierto es que existen importantes
evidencias que muestran una vez ms la complicacin del sistema cannabinoide.
*

Accin ini tUn 1am tul orn

Existe una considerable discrepancia entre los distintos autores sobre el efecto que
producen los cannabinoides a este nivel. Algunos estudios realizados en los aflos 70 han
demostrado que el A>-IiIC es unas vcinte veces ms potente que la aspirina y
aproximadamente el doble que la hidrocortisona en el test del edema inducido por carragenina
cii ratas. ()tros tiutores ~ cl contrario niegan que CannabL~ posea dicha accin como lo han
demostrado sus experimentos. Parece ser que la diferencia entre los resultados de irnos y otros

1,
4.3

RUVtSIH nmuoanAp,eA DE CWtS SA??VA

estribaen la va de administracin y el vehculo empleado. Sin embargo, en 1986 Evaus e/ aL,

demostraron la implicacin de algunos componentes del Cannabis en los enzimas que
intervicnetl en la cascada del cido araquidnico, inhibiendo la lipoxigenasa y la ciclo-

t 4

oxigenasa. y estimulando la lbsfolipasa A2, con lo que se demuestra la accin antiinflamatoria

de dichos componentes.
*

TratamIento en los espasmos nusculafts

1 1 ~
MJIr~

Antiguamente los enfermos con problemas en la espina dorsal trataban los espasmos
musculares limando (<muahis. lXfectivaniente, la accin relajante muscular y antiespasmdica
del TI IV lic conlirnmda por un experimento en 1980 en el que sc administr ThC (5-10 aig)
por va oral a pacientes que sufran esclerosis mltiple (Potro y Bllenberger, 1981). Sin
embargo. se necesita tener ms resultados clnicos que muestren la efectividad y ausencia de
efectos secundarios dc dichos compuestos.
*

Accin actUante

Las preparaciones de C~uswubIx.

administradas por va oral a dosis mucho ms bajas
que a las que produce efectos psicoactlvos, producen un efecto sedante y tranquilizante que
va acompaado por una disminucin de la ansiedad. Es ms, el efecto sedante es el ms
caracterstico de todos los erectos que producen los cannabinoides, y concretamente el WC
y especialmente cl (131), en los c~sayos clnicos. 131 uso prolongado de marihuana a dosis
bajas produce una reduccin de la ansiedad, pero el consumo de dosis masivas produce una
situacin de pnico ansioso por un mecanismo desconocido. Los ensayos de experimentacin
animal muestran resultados muy diferentes, en litacin del tipo de especie utilizado. Se han
propuesto tanto mecanismos centrales como Interaccin con las prostaglandinas para explicar
la accin ansiolitica de estos compuestos (Formukong ci al., 1989).
Recientemente, el grupo de Cluimaraes y Mechoulam, ha demostrado que el principal
cannabinoide con propiedades ansioliticas os el CBD. y que la modificacin de su estructura
puede potenciar dicho efecto, cuino se observa tras la administracin de su derivado sinttico
110-219 (Guinaraes y, aL, 1994). Un flauro teraputico para 01 tratamiento de la ansiedad
aparece con estos derivados del CI3D que han demostrado poseer un potente perfil ansiolitico
en los ensayos preliminares.

45

REVisw nrnuocntkqc os aauwss<nvi

:1
.3

Otras acciones teraput leas

l)erivadas de los distintos erectos que los cannabinoides y sus anlogos sintticos son
capaces de producir sobre los diferentes sistemas del organismo, tenemos la siguiente relacin
de oplicociotws que han sido demostradas In vilro e 1>, vivo:

.4

Accin antit~ipcrtensiva
Accin antibacteriana
A....;Afl antimroluica
LP.
liso en migraa
Posible uso para combatir el insomnio
Estimulantes del apetito.

31

33 4,
s.

.3.

El mayor problema en la bsqueda de agentes teraputicos derivados del Cannabis, es

la consecucin de compuestos que tengan acciones teraputicas a dosis menores que las que
producen efectos adversos, Por otra parte, la elevada liposolubilidad de estos compuestos les
permite distribuirse por el SMC a dosis razonables; por ello, hasta que no se consiga una
apropiada selectividad farmacolgica, la terapia con cannabinoldes seguir siendo muy
restringida.

ik;

11.6.11. TOI.IiRANC.IA
Como es subido, la tolerancia es un estado de adaptacin caracterizado por
disminucin dc la respuesta a la misma cantidad de una droga determinada <Eddy, 1965).
t)esde principios dc los aos 60 se empiezan a hacer ensayos sobre animales de
experinientacin para probar que el consunto continuado de Cannabis produce tolerancia. Estos
estudios demostraron la rpida aparicin de tolerancia en ratas, ratones y palomos; es ms, u
produce tolerancia sobre cada uno de los efectos farmacolgicos que produce dicha droga,
estudiados independientemente. Jan de las caractersticas de la tolerancia desarrollada con los
cannabinoides, que se opone a la tolerancia demostrada para los opiceos y otros compuestos,
es la larga duracin de dicha tolerancia despus de cesar la adminIstracin.

46

IPle

1 4444
~Ir

fi

REVISIN IMULIOGRFICA DF GAMiAHIS SAflIA

Entre los estudios realizados sobre humanos para ver la tolerancia de esta droga,
destacamOs los realizados por iones y ltenowitz sobre un grupo de 12 hombres voluntarios y
normales. durante un periodo dc 30 das, qte ingeran 210 mg/da cte =TI-IC,Jones encontr
que los sujetos can uderuntes a los eRetos subjetivos y al incremento del pulso, normalmente
asociado al hbito de fumar marihuana. Sorprendentemente, a pesar de las grandes dosis de
ll It: empleadas. no encontr efectos subjetivos psicodlicos y observ una relativa bradicardia
durante cl curso tIc la administracin crnica de THC. Adems, demuestra un ligero grado de
dependencia fisica y sndrome de abstinencia, pues dentro de las 6 horas siguientes a la
retirada sbita de la droga, se produjo tin (tu mento en la actividad, irritabilidad, insomnio e
inquietud.
11.6.1% l)l.~PENl)ENt:lA
Entre muchos mdicos y psiclogos sc ha extendido el error de que la habiluacin, en
cl xciii tic; dc dcpcnclench /Lvica copnhinada con sinioznas de abstinencia, es el principal
criterio por el que debe vulorarse el daflo potencial de una droga para e] individuo, 1-Lay una
lnea divisoria muy sutil entre la dependencia fsica y la psquica. La funcin psicolgica tiene
tambin bases tisiolgicas y bioquimicus~ el deseo dc satisfaccin inmediata es un poderoso
factor de refuerzo psicolgico. Por Otro lado, no se desarrolla dependencia fsica con
estimulantes del SNt: como la cocana, que se sabe que provoca en el individuo uno de los
tipos ms esclaviziidores dc Ihrmaeodcpendeneia. La dependencia de una droga no depende,
por tanto, slo ce la capacidad de sta para producir sntomas de abstinencia. La
larmacodependencia obedece fundamentalmente a la interaccin entreun sujeto y una molcula
biol~gieumcnte activa que provoca placer y el posterior deseo creciente de refuerzo repetido.
Esta interaccin lleva a un comportamiento de bsqueda de la droga o dependencia en el
comportamiento. Sobre esta base, resulta engaoso clasificar la marihuana como una droga
blanda que no cren dependencia.
Auntue en los consumidores de (anncds se desarrolla tolerancia, no aparece ninguna
dependencia fsica significativa que se pueda identificar por sntomas de abstinencia anlogos
a los que presentu la herona y el alcohol. Los sntomas observados tras la interrupcin del
consumo intenso son relativamente leves~ la prdida de apetito, el insomnio y la irritabilidad
son bien tolerados, peo est comprobado que el Ciannabis puede crear un estado de

47

3<

<lE

6
434.

15V15d~

Dli C<NM4MM NIPA

14

4.

dependeilcia fisiolgica o en el comportamiento, que constituye un importante oi>stculo para

la supresin del consumo.
En cl hombre no se han dentoatrado signos benes de abstinencia, pero s se han realizado
numerosos estudios en experimentacin animal ue reflejan la existencia de una dependencia
lisien en aquellos animales tratados crnicamente con extractos de Cannabis sailva (Singh ci
al. 1981).

33
4.,

~l

11.6.13. EXPERIkIENTACIN ANIMAL

*

1~

Efectos sobro la conducta do los animales

1 .a administracin aguda de iiIC o del extracto de marihuana, produce en la mayora

de las especies animales, catalepsia y adopcin de posturas anormales del cuerpo,
hipersensibilidad, ataxia y algunas veces biperactividad. Se produce adems una supresin de
la actividad motora espontnea y de la exploracin. Uno de los efectos predominantes en la
conducta, en ratn, es un limtmcno de deteccin postural con miradafljg en este estado, los
ratones rcspondct tuis a los estmulos, que en otras condiciones (Hollister, 1971).
loltnnan y su equipo, describieron una disminucin de It actividad espontdnea,
moderada hipotermia. hipersensibilidad a los estmulos tctiles y auditivos, y ataxia despus
dc dosis bajas de TI It (1 a 1<) ng/kg. en ratn). Tras la administracin de dosis mayores
(200-500 mg/kg). sc observ sedacin, hipotermia pronunciada y una marcada disminucin de
la actividad espontnea y roectividad (Holtzman ti aL, 1969). Por otro lado, se pudo
comprobar que la habituacin previa a la situacin experimental, puede reducir marcadamente,
o disminuir, los efectos dcl 11W sobre la actividad motora. Bit general, los cannabinoides
disminuyen o suprimen la agresividad en animales ea condiciones normales; por el contrario,
la agresividad se incremento cuando el animal es sometido previamente a una situacin de
estrs. Estos autores lntontaro correlacionar los cambios en la conducta de los ratones con
alteraciones en la concentracin de noradrenalina y sorotonina. As, dosis bAJas de 11K titeron
asociados a una dismucin de noradrenalina en cerebro, mientras que las altas se asociaron
con un incremento de dicho neurotransmisor. Las concentraciones de serotonina se
incrementaron despus de la administracin de THCde forma dosis dependiente. La duracin
de los efectos sobre la temperatura corporal y la actividad espontaneo, se relacionaron con los
cambios en las aminas cerebrales.

48

.4

~.

4.3.

14i,iij.

4
1

It

UI
14.

mBvisiOt DULIOGRAFICA Dli (~410455 MI7fl

11.7.- DOSIS LEI&L 52 1UL3>

43;,

5 .a DL,, expresa la toxicidad aguda de un producto, al indicar la dosis que matara al

50% de la poblacin en estudio cuando se adtninistra por una va especfica. Por ello> siempre
debe relerirse a un animal de experimentacin y a una va de administracin en concreto.

.34

It

Son numerosos los mtodos propuestos para la determinacin de la DL,,, pero todos
mantienen una lnea similar en cl desarrollo de la experiencia. Nosotros hemos optado por el
mtodo propuesto por leed y Muench en 1938, Comiste en administrar dosis crecientes del
producto en estudio, siguiendo una progresin geonvSlrica de razn 2, partIendo de la dosis
mxima que no mata a ningn ratn (l)L<,) hasta llegar a la dosis que mata a todos (DL10).
Se establecen lotes de 10 ratones de peso conocido y homogneo. El producto es
administrado por va intraperitoneul (i.p.) y se valoran las muertes que ocurran antes de las
725i siguientes a la administracin. Sc trata de una respuesta del todo o nada, es decir, el ratn

df.!!

.j4!

itt
~ it

~j

.j.
II

muere o no muere. Paralelamente se establece un lote control al que se le adminlstra

nicamente el vehculo donde va disuelto el producto en estudio,

gk

Estos autores establecen las siguientes premisas:

VI

SI un animal muere cuando se le administr una determinada dosis del producto en estudio,
hubiera muerto tnmbidn si perteneciera a otro lote de animales a los que se les adininistra una
dosis mayor.
Si un animal sobrevive a una dosis determinada1 hubiera sobrevivido tambin en otro lote
al que se le administra turnia dosis menor.
*

lina vez anotado el nmero dc animales vivos y muertos por cada grupo, se realiza el

34

clculo acumulativo de vivos y muertos para las distintas dosis ensayadas. Tras acumular los
animales vivos de dosis nuyora menor (abajo-arriba) ylos muertos en sentido opuesto (arriba34,

abajo). se calcula el 54, dc mortalidad de cada lnea. Posteriormente, se construyen unos ejes
de coordenadas colocando dosis en abscisas y nmero de anmales en ordenadas. Se
representan dos lineas, tina de ellas correspondientea los animales vivos acumulados y la otra
a los muertos acumulados; las lineas se cortan en un punto. Se traza una perpendicular desde
la interseccin hacia el eje dc abscisas; el punto de corte con ste corresponde a la DL,,.

1
1:

~i1.
4 k.
~,

U.
1!
.1

REVISIN Bhi3I,IOGRFJcA DE (NNAhJSSAifl

11.8.- Th$ISI FARM.ACQL=.2.Q.W==

j>ARA EL ESTUDIO DE LOS CANNABINOIDES
\tll IY produce una caracterstica respuesta psicotrpica en los hombres y una gran
variedat de alteraciones comouamcntules especficas en los animales dc experimentacin
(Compton rl cii., 3 QQ 1 Y
Para el estudio farmacolgico tic los cannabinoides se han escogido, debido al complejo
esPectro tic eltetos cue P~~fl dichos compuestos, una serie de pruebas experimentales que
pennitel reconocer u att sustanci a como cannabim imtica siempre y cuando cumpla con el
patrn farmacolgico estableeido.
Presentamos aqul, de una forma somera, Los ensayos farmacolgicos ms habituales
recogidos en la lteraltra cientlea encaminados a conocer algo ms a cerca de los efectos
producidos ras cl consumo de la marihuana, as como mara el desarrollo de derivados
sinWtcos con fines erap&utieos.
1 ~ntrelos tes Iirmacolgicos ms uf i [izldos
en los ltimos aos y realizados sobre
un nial entero, eabc a lestuear los siguientes:
*
*

*
*
*

Ataxia esttica en perros.

\ 3 teraei n del e o ni porttu u icato en nonos.
Accin antcon vti Is xa a te, en rutas.
Est(mulo tlscrmativo, en rulas.
Y un espectro dc respuestas Iurmacolgcas en ratn, que es nico para este tipo de drogas,

Y que comprende:
1 lipoterinin
(atalepsia
i\ctvidad lw aiotri i.

- Analgesia

II i perexe tal i idad e liinc rreflcx i a.

Para nuestro estudio hemos escogido las pruebas que se realizan sobre ratn por ser un
animal de fcil unncj< y que aportan a lbrmaein suficiente, Cada uno de ellos ser
desarrollado en el apartado MIERIA.Sy MTODOS del presente estudio.
50

PARTE EXPERIMENTAL

pctc los eonxt,?lUi<)/CS, un euforizantefl..

II.
1.

PARTE EXPERI ENTAL

:1:

[.apune expcrinwntol de este trabajo, se basa en la determinacin de los efectos

bnnacolgiCO% de diversas ititiesIras de resino de Cannabis, que presentan diferente grado de
oMurcz y por lo iant~ direrente composicin. con el fin de evaluar la importancia de los
cannabiiuidCS en dichos efectos. El estudio comienza con la determInacin de la DL~ y
andilsis onotuno.pUtOlMiC(1 dc los rganos afecado8 tras la intoxicacIn; se continua con la
comparacin de erectos entre la resino entera y los dIferentes cannabinoides puros, empleados
como patrones. osE cuino cus un estudio de potenciacln-inhibicin de efecto tras la
adminisItOCifl coIlitIflttI de dichos principios activos.

A contituaciii pusatmntis o desarrollar cada uno de los bloques en los que se divide el
trabi~o e~perimnetal de esta Tesis Doctoral. En cada uno do ellos aparecen los materiales y
los distintos nitutlos enpleadw.. as como los resultados obtenidos y una discusin de los
mismos.

ji
JI

111.1.- ANILIJJ.21 UM EXPKItIMENTACIN

Ti

l,os aninales uiilitadon en los diferentes oxporlmonlos fueron ratones <Mies musculus)
1.1

hembras de la cepa 0FF-1. con un peso modio dc 25*3 g, y separados en lotes dc ocho
animales dc peso homogneo. Dichos animales pernianecleron desde 24 horas antes del
experimento bosta su conclusin~ en condiciones consientes de fotoperlodo (luz entre las S:0O
y 20:00 horas). lemporatura (23*1 U(~) aislados do todo mido y perturbacin ambiental y con
acceso a comida estndar (PAN3 AB) y agua ad IIbInem.
111.2.- fEMEABACIt{ DE 5 MMEflBA X IEAI&MIEIffQS
lantt el lmaxIulsIs como los patrones puros de ,x-T}IC, CBD y CBN, fueron
proporcionados por cl Servicio dc Restriccin de Estupofttcientes y Psictropos (Direccin
General de Farmacia y Productos Sanitarios; Ministerio de SanIdad y consumo de Madrid).

LL

e h~;

El decontiso proporcionado momIa un anlisis cusl y cuantitativo de los tres

cannabinoidos que noii interesaban pum nuestro estudio, realizado mediante tcnicas de
Croniaiografla lltuida dc alta resolucin.

i; ~I4
!I: Ii~.i

II

itt

II

~tiu

PARTE EXPERIMENTAL

Para el anlisis farmacolgico escogimos el empleo de la tesina de Cannabis (hashish)

y no de la ilunta entera (nhtrihaat por ser la primera ms rica en cannabinoides y ser
realmente el producto de ( annabis ms empleado por los consumidores. Sc utilizan por tanto,
diferentes niUeSIrtIS de rCsiIm tic ( annahtv, COU una composicin en cannabinoides muy
di furente cHive ellas Y

CjUC U cWlii timietn S~

~n ir~

HIO (~%)

CBN (gV.>

8.028

0,817

13.701

1.272

i, lo?

8,801

1,010

?,~l1~

6,065

1,583

13,951

1,011

7,80)

5.295

8,468

1,1.11

9,150

0,873

Ikn

0,715

0,242

tM,1tl

2,887

1.i~

298
tIl1I

e.U

detalla en la siguiente tabla:

355

Pura simplificar el nmero de muestras, de las aqu recogidas se emplearon, en los

distintos experimentos, siete de ellas, que fueron escogidas en funcin de su composicin. Las
dos restantes sc despreciaron, bien nr la escasez del producto, o bien por poseer
Caractersticas muy similares a alguna de las seleccionadas. Adems empleando la frmula de]
Fenotipo propuesta por (irlid, podemos clasificar dichas muestras en resinas de tipo droga,
o resinas de tip.> textiL; cuando cl cociente sea >1, se incluir la muestra dentro del fenotipo
1 (tipo droga); cuando cl cociente sea 4, pertenecer al fenotipo II (tipo textil).

)dY~fl(>tL~O

+ ORN
A9THC
CBD

En funcin dc todo cs.o, la clasificacin quedara como sigue:

52

PARTE

N~ ~IIFMIItA

EXPERIMENTAL

(.UtLLiNIt

PENOTII() (IIIO)

II

217

1 eDROGAl

211.2

2,21

8 (DROGA)

2<1

1.92

1 (DROGA)

291

6,98

II (TEXTIL.)

.i~YI 1

1,93

8 (DROCIA)

II

(>81

II (IFXLIL.)

MIs

11,10

8 <DROCA)

fi,

160

1 (DROGA)

JAS

1.60

1 (DROGA)

As mismo, queriendo observar el efecto global que produce la resiia entera, decidimos
adniinistrarla en bruto, tal cual, su 1 someterla a tina extraccin anterior. Para ello, las muestras
finamente pulxeriindas y pesadas en funcin de la dosis, se resuspende, co un volumen
determinado, en el vehculo adecuado. En este caso, hemos escogido el aceite de ssamo
(SiGMA), por su carcter inocuo y ser uno de los vehculos ms recomendados para la
disolucinsuspensin de sustancias muy Lipflas.
los patrones, es decir. &1l It, (UD y CII3N, el da de su administracin fueron
disueltos en cl mismo vehculo con el la dc guardar las mismas caractersticas de tratamiento.
la doga iXie adm inistrtidn a los aidmales por va intraperitoneal 6 .p.), a las diferentes
dosis ensayadas en cada uno de los experimentos que detallaremos ms adelante, en un
volumen siempre fU~ de vehculo (aceite de ssamo) dc 0,2 mi, y sirvindonos de agujas de
236 que hacen ms fcil la administracin de suspensiones. Para cada dosis, se establecen dos
lotes dc ocho ratones, en las pruebas dc la batera farmacolgica ce cannabinoides. Para la
determinacin de la DI .~>,, se Ibrman lotes co choz animales, como se describe en el mtodo.
Paralelamente en todos los casos, se establece un lote control al que se le administra
unienmente el vehculo aceite de ssamo (0,2 mi).

53

PARTE EXPERIMENTAL

111.3.- P=flilSLIYI%% 59
111.3.1. MAIFRIAI VS y MEIO1fl4
la 01<,, expresa la toxicidad aguda de un producto, al indicar la dosis que matarla al
50% dc la poblacin cn estudio cuando se adm inistra por una va especfica
(omo va comentamos aiitcflormenti>, hemos escogidos el mtodo propuesto por Reed
y Mueneh para la determinac1Cm dc la 1)1 Un cl apartado correspondiente ce la REVI SIN
131131.1 ( )( IR All(A se describe dcciii ladanente la tcnica,
~.

Debido a la gran variedad en la composicin ce las diferentes muestras a estudiar,

decidimos rcalintr la dctcrmnacin de la D1~> de tres muestras ce resma, que poseyeran
diferente composicin en cannnl.inoidcs. 1.11 escasa cantidad de resma disponible hizo
imposible la ticterLil mac jn tic la 1)1 ~, tic cada una de las muestras que luego iban a ser
ensayadas. escogindosc por ello, tres muestras ci iferentes que fueran lo suficientemente
representativas1 con unu proporcin tic canLiabinoides muy baja, intermediaalta y muy alta,
obtenindose as, una gan lo ibrnacin acerca de la toxicidad aguda del

(annabis,

111.3.2. RESI II l.AI)t )S

*

RESINA 642

Presenta cii su composicin un 0.745% dc TilO, 0,615% de CBD y 0,242% de CBN.

lista muestra Wc escogida por su b~j a proporcin en cannabinoides.
Despus de varias pruebas. sc consigui establecer la dosis mxima que no mata a
ningn ~lIiiIflLil
(Dl , 1 g/kgt A partir de sta, sc administran dosis crecientes que siguen una
progresin geomtrica de 2, hasta nlcanvw aquella dosis que mata a todos los animales del lote

Por tamo, empIcamos 4 lotes de 10 animales, a los que se les administr,

respectivamente, 4 <dosis distintas, y que fueron 1, 2, 4 y 8glkg. Adems, como lote control,
se establece un quinto grupo dc animales que nicamente recibi aceite de ssamo

54

PARTE IRXPERIML3NTAI

(0,2n1l/rntn)~ tras la experiencia pudimos comprobar la ausencia de toxicidad del aceite dc

ssamO. 1 II la siguiente Ubla aparecen reflejados los resultados obtenidos:

DOSIS

NI

lO

lO

lO

lo

MtEIUCW
ACUMUIAI)OS

VIVOS
ACUMULADOS

lo

16

16

50

Id

tG

87,5

24

24

lOO

TOTAL
LNEA
=

% MORTALIDAD

MMI IdA II >5

VVIVL>S

DLtiO RESINA 642

N HAlONF:$

t0

lo
O

O
tal

1 ~

MUI~ 1TO 5 VI /OA

121

ti

Dosis

10

(g/lcg)

MTODO RBED-MUENCII

En la gr~flca podemos apreciar que la Dlt50 en oste caso es de 2glkg.

55

PARTE EXLERIMENTAI

WSINA 588

Usta resma presenta un ~>,150% de 1l It, 3,l4l0/o de CBD y un 0,873% de CJ3N.

ConsidCIW1Io5 dicha muestra por pO5CCl una proporcin considerable de los principios activos.
Se estableci como 1)I,~. (>~5gfkg y

1~IcM).

2glkg, Por tanto, en este caso distribuimos

los animales en tres lotes, a los que se les adn~inistr 0,5; 1 y 2g/kg respectivamente. Los
resultados, sc represetitan a Co iti nuac ln:
~o~5
gAg
(.5

MtI~IClOS
A(t IMUIAt)OS

VIVOS
ACUMULADOS

TOTAL
LNEA

% MORTALIDAD

lO

1>

lO

1)

16

lO

lO

40

lo

<~

00

MMtILd4I~ >5
v-vIvts

DL5O IUSSINA 588

N

HAT<)NI:S

tu,
1.

O
1-.

ti

DL.

(1>

jttUii

DOSIS (g/kg)

vivo

En este caso la Dl

.~,

Mirona fiED.MUBNCH

resulta ser 1,13 g/kg

56

PARrE EXPERIMENTAL

RESINA 452/1 1

Por ltimo, la tercera muestra escogida presentaba una gran riqueza de TI-IC 13,951%
al mismo tiempo que una considerable cantidad de CBD (7,7330/o) y un 1,011% de CBN. De
la misma manera se detern i no la mx ma dosis a la cual ningn animal nueve, siendo en este
eas~ dc 0,25g/kg. y Qg/kg la dOSiS a la que mueren todos. As, establecimos cuatro lotes de
(hez aLlimales cada uno, a los que se les administr respectivamente 0,25; 5,0; 1 y 2g/kg. En
este caso los resultados fueron los si~iuientes:
00515
g/k~

>4i~

NI

MIUUUI0S
AtIIMUIADOS

VIVOS
ACUMULADOS

TOTAL
LNEA

% MORTALDAD

LI

14,3

II

54,5

lOO

fl

0>~

lO

0,5

lo

0
wn

1(8

5
<1

Ib

MSILIIkLtLIIS
v~vvm

Por ltimo. la grfica refleja que la 1)i.~~ es 0

192g/kg
57

PARTL~ EXPIARIMENTAI

111.3.3.- 1)156 FSION 1 )E 1< >8 RESIII :lV\DOS

En todos los casos sc demuestra la inocuidad del vehculo empleado (aceite dc ssamo),
al nenos cii la c onc eit sae ion

tt iii ,ada.

Vistos los resultados de la determinacin dc la DL5<> para las tres resinas diferentes,
podeluos observar tuc la dosis letal 5<) disminuye a medida que aumenta la proporcin de
fi-IC presente en la esina, como era dc esperr por ser ste el principal responsablede los
ckctos que produce la sesma dc ( wnubbv. As, para la resma 642, con una proporcin casi
nula ile II l( (<),745-~). la 1)1 es elevadsima (2g/kg), debindose su toxicidad principalmente
0 588, con una proporcin considerable del
a la liroplil res na y no al II It. 1 a nuestra n
priicipio activo 0>. 1 5fl0 o), nos proporciona ya una DL
10 ce 1.1 3g/kg. Por ltimo, refirindonos
0/o), el
a la resma 452/ti , que ~osee una altsima cantidad de letrahidroeannabinol (13,951
resultado tic la 1>1 es tic O,Q2g/kg, demostrndose que el THC no es slo el principal
~,,

.<

responsable de los eketos del hwdLvh. sino tambin cte su poteicial txico. No obstante,
clebenios seflalar que pese a la elevada popociii ce I1lC presente en la resma, podemos
considerar dicha droga como atxica en cuanto a la letalidad que produce (observando las
DI%>), lo cual no md ca que no sea nociva ~ra la saltd.

58

PaTn ExPmWU4TAL

111.4.- ES1LIDIO ANlOM(>PATOLICO

11.4.1, MAlERIAI ES Y MTOI ><)S
Para completar cl estudio de la toxicidad aguda producida por la administracin de las
diferentes resinas, decidimos recoger algn animal de los que moflan durante la realizacin
del experimento de dclcrminocim dc la DL~; inmediatamente despus de su muerte, se
abrieron por la cavidad abdominal y se Introdujeron en formol neutro (solucin de
forarndehido al 1(3%, llevada u swuracin con carbonato magnsico), para su posterior anlisis
anuIOtflOptItOlMiCO. con cl fin dc conocer los rganos afectados por la Intoxicacin, y la causa
de su muerte.
Por otro lodo, con el nimo dc estudiar la evolucin de dicha IntoxIcacin, nos
propusimos anolhwr los rganos dc los animales tratados con una dosis determinada, y
provocar su nucrw en determinados perlados de tiempo post-administracin. Tras el anlisis
de los resuhodos obtenidos en la determinacin de la DLI., la dosis escogida tite la de lgAg
dc resino s0 51(8. por provocar sta la muerte de un bsUo nmero de animales dentro del
periodo dc tiempo establecido para el estudio. Los animales se sacrificaron a las 6, 12, 24, 48
y 72 liaros tras la administracin, y fueron introducidos en formol neutro para su posterior

1
1

:1

:1

anlisis. En paralelo sc rettli?* tanubin el estudio patolgico de animales control, tratados

exclusivamente con acuite de ssamo (0,2 m; i.p.) y animales sin tratamiento.
Debido a lo lipusolubilidad dc la tesina de hwhlsh y de sus componentes, los rganos
vitales de nuestro inters sot: cerebro, pulmn, corazn, hgado, niln, suprarrenales y ovario.
El estudio completo rue rcali2ado segn la tcnicamontada en el Servicio de Anatoma
Patolgico dcl 1 lospital Provincial de Avila. Esquemtkaflwnte. dicha tcnica consta de los
siguientes posos:

1.- FlJael6n. (Formol neutro ~l 10%)

2.- AutopsIa. (Seleccin de rganos y estudio macro~pco).
.4

.1

.59
4

II
U

PARlE BXPUUMliNTAL

InclusIn en parafina.
Esta etapa sc realiz mediante un Procesador de Tejidos pn inclusin (Tissue Teck
de AMES), y consta tIc las etapas siguientes:
a.- l)esliidrntilcii, empleando una escala creciente de alcoholes, desde alcohol de 70
hasta lOt).
b. Aclarado, con 1 listolcmnon~.
e. Parafino.
*

Fornaclfl de bloques de parafin.

Este proceso se realiza sobre una Consola Histolgica (Tissue Teck II AMES).
MIn..ntnn.L&

I5I~S

~VEE4S

Se obtienen cortes (entre 5 y 7 it) de los tejidos escogidos, mediante el empleo de un

licrotonio rotatorio (l,Iill 1512).
Tineln hIstol6glca (Tcnica lionudoxIlIna-EoslniO.
Los cortes se recogen sobre portaobjetos recubiertos de albumino gllcerlnlzada, para
perfecta adhesin, y se someten u los siguientes pasos para su tincin:
u.- Despurolinintciii (ilistolemon~).
b.- Relidratnein. con escala creciente de alcoholes, hasta agua.
c.- Ilematoxllina dc Crnzzi. De 7 a 10 minutos.
d.- Agua corriente.
o.- Eosina. Dc 1 a 2 minutos.
1.- fleshidrutacin en escala creciente dc alcoholes.
g.- Tras dos pasos dc uistolcon~, se montan los cortes con cubre objetos empleando
resma Eukitt.
Microscopia.
Para la observacin microscpica de los cortes realizados empleamos un
otonicroscopio ptico de campo claro (NIKON HPX), que permite fotografiar los cortes de
is tejidas seleccionados.

60

ji

PARTE EXPBRRAIMTAL

.4.2.- RESIII.lAIflN
Con tcnicas dc inclusin en lmrafinn sc obtuvieron, cortes histolgicos de cerebro,
linn, corazn. hgado. niln, suprarrenales y ovario, que posteriormente se tifieron con

1 fl estudio l~istolgico de los rganos, mostr una congesttn en todos ellos, siendo ste
nico signo comn (Microlhtograflu 1, 2 y 3 ). A nivel cerebral, renal, suprarrenal y de
tono es cl nico signo patolgico. sin que exista relacin con el tiempo de evolucin.
l.os pulmones presentan congestin desde el primer momento del estudio (6 horas).
ls tarde. y basta el momento dc su muerto, los lesIones aumentan cusl y cuantItativamente,
esentando en primer lugar edema, que generalmente es de tipo focal y limitndose a
~quetIos
reas difusamente repartidas. A lo largo de la evolucin estas zonas pueden ser algo
.ds importantes. pcrb en ningn momento sc constituye como un edema pulmonar masivo
,4icrothtogmlln 4). A los tbnmenos de edema descritos, se suman ms tarde hemorragias
tra-olveolar0i ocasionales.
Ita cl hEgodo. o las 6 horas dcl iratomiento, se observan junto con la congestin ya
todo, uno lipcrplasia discreto de las clulas de <pifar y moderado pleomorfismo
:patocitorio que tambin sc aprocia a nivel nuclear. Es frecuento la presencia de clulas
inucleados y ocasional, la de alguna mItosis (Mcrofotografla 5). Las alteraciones ms
gaificativos ocurren u nivel altoplasnitlco, observndose focos de edema intracelular
umoloccin turbia) (Microfotogrflfift 6) y de degeneracin plumosa compatible con
ipcrtrolia e hiperpasia mitocondrial (Mlcrofotografla 7).
En los animales atarifiados despus de las 12 horas, las lesiones referidas al hepatocito
m mucho menos evidentes, y en las observados a las 48 horas, estos cambios son mnimos.
in embargo lo que destaca os el aumento do los fenmenos congestivos, de manera similar
lo que describimos en pulmn (Microfotoiraflfi 8).

II1:
1;

:~ r
1

ti.

III!

ji

61

t
tLJlLi~

IARIIi EXtI3RIMENIAI.

111.4.3. 1)15(1 SIN 1W lOS RESI ll:lV\tJoS

1 os animales control examinados (tratamiento con aceite de ssamo y sin tratamiento)
ijo mostraron alteraciones histolgicas ei los cortes analizados,
1 os cambios observados a nivel pulmonar expuestos anteriormente, se identifican a los
descritos clsicamente cono los iniciales dc la congestin pulmonar por insuficiencia cardiaca
(Contran. Kumar y Robbins, 1900). 131 estasis sanguneo evoluciona rpidamente a edema, que
en primer lugar se localizo en las vas respiratorias. Los capilares alveolares aparecen repletos
dc sange~ la rotura de estos capi hites puede producir pequeas hemorragias intraalveolares,
y posteriormente, la fragmentacin y tagoctosis ce restos dc hemates, provoca la aparicin
en la zona de nacrtagos cargados dc hemosiderina.
plcomorsmo hepatoel tario y nuclear, las clulas binucleadas, las mitosis y la
hiperpasia e hipertroiia de las clulas dc Kupffer, son cambios reactivos inespecficos del
hgado y sc producen de Forma automtica ante mltiples tipos de agresin, como infecciones
virales (virus 1 lerpes siniplex, virus de las Hepatitis, etc,), txicos (alcohol, tetraeloruro de
carbono1 ti oacetam ida, ziclovud ino. etc).
La presencia de clulas binucleadas y ce mitosis ocasionales tienen menos significado
cii los animales jvenes, como en nuestro modelo experimental, pero si tenemos en cuenta el
esto de las alteraciones observadas a las que con frecuencia se asocian, podra considerarse
como ut cambio inducido cxperimentaltiwnte.
1 a tumelaccin turbia y la degeneracin plumosa por hiperpasia mitocondrial, se han
descrito como signos morfolgicos ce lesin incipiente de la hepatopata alcohlica humana.
lambin pueden observarse por la accin ce otros txicos, como el AL (Ziciovudina), y
sicmpre como lesin incipiente, Estas lesiones suelen ser reversibles a la retirada del txico,
y en caso contrario, con frecuencia evolucionan o se sustituyen por fenmenos cte esteatosis,
En nuestro caso no liemos observado fenmenos ce este tipo ( Lpez Bravo, A. Comunicacin
personal).

66

PAR1L! EXPERIM[!NtAt

111.5.- JIATERIA FARMACOLGICA PARA CANNAI3INOIDES

Como hemos avanzado anteriortuente, en este trabajo nos centramos en las pruebas
~~wniacOlgictt5 para cannabinoides ms utilizadas, empleando como animal de laboratorio el
ratn.
Pasamos a desarrollar los materiales y el mtodo empleados en cada una de ellas.
111.5.1. ANAl ISIS BSTAI)ISlICO
1 os valores obtenidos en los diferentes ensayos realizados, se sometieron a un anlisis
estadstico en el ttte se obtuvieron la media, el error estndur y en el que se contrast la
hiptesis dc normal Idtid i tt rapo bnc inna1.
Al tratarse tic resultados que seguan una distribucin tiormal, se atalizaron usando el
lcst patamtrico 1 de Studenl, para comparar dos tinicos grupos experimentales (control y
pral) lctna. en cada caso).
1 a cotuparacin entre mltiples grupos se realiz mediante anlisis de varianza,
aplicando el lest ce NunmanKeutv.
En todos los casos se adopt cl intervalo dc confianza del 95% (probabilidad de error
menor dc (),05 ) y del 99% < probabi 1 idad de error menor ce 0,01),
111.5.2.- MAIiiRIAI,ES Y MTODOS
*

WMPERAltIRA CORPORAL: HIPOTERMIA

En cl Itombre sano It temperatura corporal se mantiene alrededor de los 37 0C,

ndepcndientemetue dcl ambiente externo, es decir es homotermo. Sin embargo, los animales
poiquiloternios son aquellos en los que su temperatura vara cot las condiciones externas
(Gttyton, 1990). Tal es cl caso dc los ratones, animales empleados cii este trabajo de
experimentacin. l.a temperatura corporal normal media de estos anitnales oscila entre los 35,5
y los 36,5 Q.

67

-~

tAI&It EXPERINtEN1AI.

Con el fin de dismituir la gran cantidad tic factores externos que pueden influir sobre
los valores de temperatura basal tic este animal de experimentacin, se mantiene a los ratones
aislados en unas condiciones iuubicntales constantes. As mismo, la influencia del ritmo
circadiano la sido Di iii tu izada real izando las pruebas Sietupre a la misma hora del da.
Para ucd ir la temperatura corporal ce los animales ce experimentacin empleamos una
sonda rectal (VSI 400) acoplada u un termmetro digital crnliRTEc P6
Se real ini una mcdi da inmediatamente antes de la administracin de la resma o patrn,
0C entre las des
y otra entre 61)QQ mi autos despus dc dicha administracin. La difrencia en
medidas se compara cot la de un grupo control que se defitie corno cero y el resultado se
expresa como ( ch. 7 lipoh.nnia.

M (C0)

2<>

TI2ST DE LA INMOVILII)Al) EN EL ANILLO: CATALEPSIA

El est de la inmovilidad en el anillo, permite evaluar el grado de catalepsia que es

capaz dc provocat un fl~rmneo tras su administracin en un animal de laboratorio. En este caso,
obtenemos cl porccntxi e tic 1 tiempo total (11t2 e! ratn permanece completamente inmvil sobre
un anillo horizontal.
El mtodo, descrito por Pertwee en 1972 y qte originariamente recibe el nombre ce
11w ru~g us, continua en actualidad y es uno ce los mtodos ms empleados para valorar la
catalepsia. Nosotros hemos realizado el mismo tcst de Pcrtwee con unas ligeras
modi heaciones.
El aparato consta ce un aro metlico horizontal ce 5,5 cm de dimetro, unido a un
Soporte que lo mantiene a 16 cm del suelo, Cada ratn se coloca sobre el aro durante 5
IlliIltttOs. Durante este periodo. se contabiliza el tiempo en segundos que el animal permanece
totalmente inmvil. Este valor se divide entre 300 segundos y se multiplica por 100,
obtenindose as cl Indice tic u tnov illilod.

68

PARTE EXPERtMENTAL

%INMQVELXDAD

t x 100

LT

u Tiempo (segutidos) de pctmaneticia inmvil.

t1: Tiempo total (segundos) que dura la prueba.

Se considera como criterio de inmovilidad a la ausencia de todo movimiento voluntario,

excepto los movimientos asociados a la respiraciti. La ausencia de movimientos del hocico
y bigotes es tina buetia referencia de inmovilidad, haciendo el anlisis ms objetivo.
Si un ratn permanece sobre el anillo al menos 2,5 minutos sin caerse o escaparse de
l, se da por tinalizada la prueba considerando como tiempo total esos 2,5 minutos (150
segundos).
Por el contrario, si un animal se escapa o cae del anillo dentro de los 2,5 primeros
minutos, se vuelve a eoloca.t sobre el anillo durante tres minutos ms. En este caso el indice
sc calcula contabilizando la suma ce los tiempos que ha estado sobre el anillo antes y despus
de caerse. Si un ratn se cae ms dc 5 veces consecutivas en los primeros 2,5 minutos, se
desprecia el resultado y queda excluido del anlisis de ciatos, Para reducir la incidencia de
escapes, siempre se debe colocar el ratn sobre el anillo de espaldas al punto por el que se une
al soporte vertical.
Un animal to tratado con drogas que produzcan catalepsia, lo ms normal es que
pernatezca activo y curioseando el entorno, a veces escapndose del anillo por salto, cada,
o ms irecuentemente, bajando a travs del tubo vertical que soporta al anillo.
Sin embargo, los animales tratados con drogas catalpticas y en concreto con
cannabinoides, poseen una actividad exploratoria interrumpida por perodos en los que cesan
todos Los movimientos voluntarios del rabo, tronco, extremidades, hocico y bigotes Durante

este periodo de inmovilidad, el ratn adopta posiciones extraas, siendo una de las ms
frecuentes, el tenderse a lo largo del anillo, sujetndose ~nicamentC
por las patas traseras y las
delanteras; en esta situacin, suele ocurrir que su vientre gradualmente se vaya combando,

69

III
PARlE BXPERIMBNTAL

siendo cada vez ms inestable su posicin. d retorno a su actividad normal ocurre solamente
si cl animal termitial por caer del itijlo, aunque tambin puede ser que el propio ratn perciba
el inminente peligro y eomi ello recupere su estado normal. Por supuesto si el experimentador
toca su cuerpo o sc produce algn ruido lo suficientemente fuerte, el periodo de inmovilidad
sc quebranta. 1k ah que el experimento deba realizarse en una habitacin no solamente
ooinrntnda. sino twuibin aislada dc todo ruido externo, y siempre debe ser llevada a cabo por
cl nlisntO experimentador.
Se considera que un producto produce catalepsia cuando se obtienen valores del Indice
de inmovilidad superior al 20%

Aquellos rrmuncos que don ndicos comprendidos entre un 15-20% probablemente

poseen efecto sedante no especifico, pero no catalptico (Compton of aL, 1991).
tCAMP<> AlBERTO: ACTIVII)AI)

MOTORA
It

En un campo abierto con unos dimensiones de 30x30 cm, dividido en 12 cuadrados de

igual tamaflo, sc evala la actividad horizontal y la actividad vertical de los ratones (lride y
Mccboulam. 9~>3)

ti 4

l.a locomocin (actividad horizontal) so valoro por el nfimero de cuadrados cruzados

durante U minutos inniediataniente despus de introducir al animal en el interior del campo
abierto.
Al mnisnio tiempo se contabilizo cl nmero de veces que el animal se eleva sobre las
patos traseras (actividad vertical).
En condiciones normales, un animal sin tratamiento alguno, presentar una actividad
horizontal y vertical propios do estos animales, que se manifiesta con la exploracin de cada
rincn del campo por porto del ratn. Por el contrario, los animales tratados con derivados de
CannaNs, en funcin de la dosis como ya veremos en los resultados, manifestarn bien una
marcado bipoactividad ggo vertical como horizontal <dosis altas), o bien un aumento de la
actividad e hiporrefloxin (dosis muy b~Jn)

70

kaU

PARTE EXPERIMENTAL
*

ANTINOCICEPCIN

La nocicepcin es el mecanismo por el cual los estmulos nocivos son percibidos en

la periferia y transmitidos al sistema nervioso central.
El efecto analgsico producido por (annabis y sus derivados es un efecto central, y
corno ya vimos en la revisin bibliogrfica ocurre por mecanismos espinales como
supraespinales.
Por ello, para el estudio de la actividad analgsica de estos compuestos hemos optado
por dos mtodos trmicos para provocar el estmulo doloroso cuantificable y que son muy
empleados en experimentaci.n animal para estos casos: Test de la Placa caliente y el Test
del foco calorfico. Se evala as la capacidad que poseen los productos a ensayar de
clistuinuir la percepcin de este estmulo doloroso
Analgesmetro de la placa caliente (HotpUne).
El mtodo actual se basa en el original establecido por Janssen y Jageneau en 1958.
El estmulo doloroso en este caso se provoca por medio de un Analgesmetro Hot Plate
DS-37 Socrel (PANLAB, S.L.), que consta de una plancha metlica termostatizada
elctricamente a 54,50,20C, rodeada por un cilindro de 19,5 cm de dimetro y 13 cm de
altura, que asegura que el animal permanezca sobre dicha placa durante el ensayo. Adems,
dispone de un cronmetro que sefiala el tiempo en segutidos transcurrido desde que se sita
el ratn sobre la placa, hasta que acusa el dolor.
En este ensayo, consideramos como primer umbral doloroso el momento en que el
animal se lame las extremidades delanteras, y, como segundo umbral, el instante en que dicho
animal se lame las extremidades traseras, siendo ms valorable el segundo, pues se evita la
posibilidad de confusin con el acicalamiento normal de los roedores Consideramos corno
tiempo mximo de permanencia sobre la placa (cut-ofj), 30 segundos para el primer caso y 45
segundos para el segundo; a partir de entonces, el animal es retirado de la plancha y se
considera como cl 100% del efecto analgsico (Harris y Pierson, 1963).

PARTE BXPUIM4TAL

.os resultados se exprcsu~ como el % del Mximo Efreto Posible (%MPE) o % de

analgesia, que viene determinado por la frmula siguiente:

%flRPr~

cuto!!

ji

x 100
-

lp: Tiempo de lotencia dcl animal problema.

tc: Tiempo medio dc lateado de los animales control.
cutqO 30 seg. <patas delanteras); 45 seg. (patas traseras)

11

Analgeslmetro dcl Foco calorfico (TaII-FIck~.

it,

El asialgeslnetro del Foco calorifleo sc basa tembln en la produccin de un estmulo

doloroso trmico, que en este caso se producir sobre la cola del animal. El mtodo fue
propuesto en 194 por lVAmour y Smitl~.

1~
ti

El aparato (Analgeslmetro .1-7106. LETICA) est dotado de una Riente de calor de

intensidad reguluble y de un adecuado sistema de deteccin de la respuesta del animal,
asociado a un cronmetro que mide la lateada de respuesta con una precisin de dcimas de
segundos. 1.0 ructte <le calor est formada por una lmpara halgena (12V DC, 100W), alojada
en un roen desplurable.

IV.
y:

5
,jtt

:1,

Dicha lmpara tiene la posibilidad de emitir a tres intensidades calorficas diferentes,

mxima, inedia y mnima. As. cl color que puedo provocar ser funcin de la intensidad y del
tiempo. Cosi ello, podemos escoger la Intensidad calorfica que sea necesaria teniendo en
cuanta cl experimento, la drogo empleada y el animal de experimentacin.

ID.

ji
72

tI, ~I.

PARTE EXPERIMENTAL

La siguiente tabla nos muestra la relacin existente entre intensidad calorifiaca y tiempo de
exposicin:

1 (seg)

0)

T n,Asin,uCC)
75

1 nLiliWfl(

so

[0

25

60

20

75

80

30

>200

lOO

30

50

La cola del animal es colocada sobre una ranura, tapando una clula fotoelctrica. Se
hace incidir el calor radiante sobre la cola y cuando el animal responde al dolor, la retirti,
momento en el cual el foco incide directamente sobre la clula fotoelctrica, parndose el
cronmetro
-

En este caso para evitar el dao tisular, hemos empleado siempre la intensidad
calorfica media, y se considera como tiempo mximo de incidencia o cw-off 10 segundos;
a partir de entonces si todava no ha respondido el animal, se retira considerndose el 100%
del efecto analgsico.
De la misma manera, los resultados se expresan con el %MEP, pero teniendo en cuenta
que en este caso cada ratn es sometido a la prueba antes y despus de la administracin y por
lo tanto la frmula a aplicar sen a:

%MEP~

TdTa
cu toff Va

xloo

Ta: Tiempo de latencia antes de la administracin.

Td: Tiempo de latencia despus de la administracin.
cutoff 10 segundos.

73

PARTE EXPERIMENTAL

DIiSARR( >1.1 i ) EXPI~RlMI iNlAi.

Para el estudio farmacolgico ce las diferentes resinas de Ciannabis, hemos empleado
lotes ce ocho ratones de peso homogneo; como ya hemos dicho anteriormente, el tratamiento
se realiz cii todo momento por va ip. y con un volumen fijo de 0,2m1/ratn.
Para evitar cl solupumiento dc las pruebas, se decidi establecer dos lotes por cada una
de las dosis y resinas ensayadas; el primer lote, destinado a la medida de la temperatura
corporal y actividad motora, y el segundo, a la valoracin de analgesia y catalepsia. Teniendo
esto en cuenta, en todos los experimentos, cada ratn fue sometido a cada uno de los
dlerentes test, siguiendo la siguiente secuencia:

lcmpcrutu vn bu su1 (l, preadu iii istracin).

Adni 1 nist raeu de la clroga.
Actividad motora (20 tu inutos postadministracin).
De nuevo, temperatura corporal fIN, 6090 minutos postadministracin).

liempo de lutencia (segutidos) en cl analgesimetro del foco calorfico antes de la

adm1 nist raeiu.
Administracin de la droga.
Tiempo ce lutenein (segundos) en el analgesmetro del foco calorfico, 45 minutos post-

adninistrac [u.

liempo en segLindos hasta el princ lamido dc las patas delanteras en el analgesmetro ce

la placa caliente (60 minutoS postadministracin).
Tiempo en segundos hasta el primer lamido dc las patas traseras en el analgesnietro de la

placa caliente (6() minutos postadniinistracit4

Catalepsia (<Yo (le inmovilidad) 90 minutos postadministracin.

Paralelamente y bajo las mismas condiciones, se establece un lote control para cada tino

de los problemas, al que slo sc le administra el vehculo (aceite de ssamo), y que es

Sometido a las mismas pruebas anteriores.

74

PARTE EXPERIMENTAL

Dentro de lu seccin de [3ATERAFARMACOLGICA PARA CANNABINOIDES,

podemos dividir los estudios realizados en cinco bloques de experimentos, y que a
contiliuucitl COmCiittlmos brevemente:
1%.~

1>.
c
d-e.-

(uwu dosis/electo del hashish.

1. lecto del letruhidrocunnabinol.
1 ~l\2ctodel (annabinol y Cannabicliol,
I~siudo del posible erecto de los otros componentes de la resma de Cannabis.
Potenciacin o inhibicin del efecto farmacolgico de los diferentes principios

activos tras una tidininistracin conjunta.

A. Curva doss/efeeto <le /iaslilsh
Para la realizacin de esta serie ce experimentos, decidimos escoger una resma que
poseyera una gran riqueza (le il le, por ser ste el principio activo ms importante presente
cii la resino de ( ctn>cb Lv. con el fin (le poder relacionar el efecto con el contenido de dicho
compuesto. Se tinta de la muestra dc resma n0 452/li, que como vimos en la tabla
correspondiente posee un 13.95 1% de THC, 7,733% dc CBD y 1,011% de CBN. Por ello,
conociendo la composicin, al administrar una determinada dosis de resma, podemos conocer
tambin cul es la dosis expresada en THC, CI3D CI3N
Se realizaron diferentes ensayos, administrando dosis de resma de 25 mg/kg, 50 mg/kg,
LOO mg/kg. 20<) mg/kg, 500 mg/kg y 1000 mg/kg a diferentes lotes de ratones que fueron
sometidos u toda la batera farmacolgica para cannabinoides anteriormente desarrollada, con
el fin de conocer la linealiclad ce cada uno ce los efectos producidos tras la administracin
intraperitoneal de la sustancia (0,2 ml/ratn en aceite de ssamo). Queremos recordar que,
haciendo un sencillo clculo matemtico, estas dosis corresponden respectivamente a 3,42
mg/kg; 6,85 mg/kg; 13,90 mg/kg; 27,80 mg/kg; 69,50 mg/kg y 137,0 mg/kg de THC presente
Cii lii nuestra adnnn strada, No obstante, nosotros en este caso concreto, liaremos siempre
referencia a la dosis ce la resma, pues consideramos el efecto global producido por la
administracin tic cucho producto vegetal.

75

PARTE EXPERIMENTAL

AL- RESULTADOS
A continuacin, pasamos a exponer los resultados obtenidos para cada una de las
pruebas realizadas. Para estandarizar la presentacin de los mismos y hacer ms sencilla su
comprensin, en todos los casos aparecer en primer lugar la tabla de los valores medios
obtenidos, con el error estndar correspondiente, as como la significacin estadstica,
tefiriendo siempre los datos frente a un control (t-Student). Tambin se sefiala tanto en las
tablas como en las grficas, el valor obtenido tina vez restado el control a cada uno de los
datos medios; despus, los representaremos grficamente, obtenindose as la curva
dosis/efecto, que aparecen resaltadas en los grficos como columnas sombreadas en negro.

76

PARTE EXPERIMENTAL

lcnflCXiU,tU3i sQUI&Wtd.

Lb
Al CC)

(<iNIRUII4ISIN\

.0,260,05
-0.140.06
0,120,01

I3 1

I>ItI~l4I~N~ lA
t

iN 11401

0,050,03

RFSr4A 4V II
fI Hl [NtI A

51)

1,110,20
1,060,17
0,250,06
2,300,19
2,040.13

tlMIltIl

Rl-SIMA I,~ II

loo

t& [NI 141 II.

RISINA IV: II

200

0,110,06
2,720,20

I1I~ 1 1415< lA

2,610.14

siN 114111.

0,170.06

ItISINA

IV

500

II

3.560,32
3,390,26

-0,020.04
2.590.21

1 1. 1 tI Dl

l000

l4I:SIN:\ Ifl.~I 1

2,610.17

pOlIS cnhril

t,

,4km~

11,11 ,.IM,l

1,

nvdslcrnA lIS IudcnII~ n~8. So seprcsenln le media el error estndar (xv)

l[IpOTEI(MIA

fl ESI MA (n14 i Ng)

77

PARTE EXPERIMENTAL

ee Foco calorfico (analgesia~

CONTROL
RESINA 452/II

DOSIs (mg/kg)

%MEP

25

-5,5011,69
-4,812.14

0,690,45

DIFERENCIA

-4,543,26
2,I213,47

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA

50

6,6610,21
.I0.34fl.27

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA
CONTROL
RESII4A 452/II
DIFERENCIA
CONTROL
RESINA 452111

II .7815,06
22,121.79

100

-6,491,26
[1,296,66

200

17,785,40
-5,762,92

500

23.2019,96
-

28,967,04

DIFERENCIA
CONTROL
REINA 452/II
DIFERENCIA

.10,212.04
-3.592,27
6,62023

1000

pcO,05 conIrol y,, rroblen~a (-Swdeni>; pc0,0I conrol v,t problema (t-Sludent); n=8, So represenla la meda le

CTOT estndar (x~)

ANALGESIA FOCO

ANALGESIA (%MEP>

40
30

20
lo

o
10

20
DOSIS RESINA (mg/Kg)
OCONmoL ~RESINA I)IFEI4ENCIA

78

PARTE EXPERIMENTAL

AIialgesfmetro de la naca caliente (lamido natas delanteras~

1)0515 (mgAg)
CONIRtII,
flI-:sN .15 II
[>11:1
RLNLIA

9,210,73
25

9310,88
0,500,15

50

17,50132
7,902,70

(UN 114111.

(M)NIR( II,
141-SINA 112/11

lOO

11,491,06
[52 1.0,63
0,030,43

200

21,262,32

1>1 FI ILI~N 1 lA

33,4613,43

0,563,37

9,450,47

CON 1141)1.
141($INA IiZ.ll
I)Il<1(I4VN cIA

569410,93

II,S,85

(UN III >1.

RUS MA 452 II

9,640,60
16,032,48

500

35,5933,06

6,41*1,88

I>IFLI4FN(IA

l0,400,I0

(4 IN 114111-

21,882,31

1000

ItISINA .112/II
1>111(14 UNCIA
prl ~Icrnt(I.SIkdcnhl;

2,454.27

9,600,62

[USINA .I~2 II
1W FRUNcA

rr0,05 conhril

%MEP

(se)

58,6011,80

II,48l,91
0,01 contol y,, lrobIenI4 <t-StdvitX

>t3,

So representa la nedia 1. cl

CITOT

estndar (xt>

PLAcA (LAMIDO ATAS DELANTERAS)

Iii

>0515 it ESI NA

<m

1Vr, 1

[Jet INA U I,IIYKIeF:NCIA

79

-u

PARlE EXPERIMENTAL

* Analaesmetro

de la

placa caliente (lamido patas traseras~

DOSIS (mgjl<g>

25

CONTROL
RESINA 452/II

15,660.92
17,280,98
1,620,1)6

DIFERENCIA

CONTROL

32,924,26
15,923,22

50

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA

lOO

CONTROL
RESIIIA 452/II
DIFERENCIA

200

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA

500

AMEF
719355

1301,04

RESINA 452/II
DIFERENCIA

I(ig)

56,8535,20

19.01032
23,051,42
4,040,32

21,172,14
32.812,31
11.640,17

49,009,61

24,211,75
-

33383.13

49,9414,94

9,571,38

CONTROL
RESINA 452/II

l
lODO

23,920,62
33,683.18
9,762,5
6

38,613,18

DIFERENCIA
p<O.05 control

t~t

problema (1-Siuden); pc0,0I conirol s problema (-SIudenI)~ r8. Se represeflta la media el error estAndar (x~).

PLACA (LAMIDO PATAS TRASERAS)

TIEMPO

(sg)

35

30
25

20
[5
10

o
DOSIS I2ESINA (mg/I<g>
UcONTfoL ~RE3lNA MOIFERENCIA

86

PARTE EXPERIMENTAL

CatalCliflfl

%INMOVILIDAD

1)0818 (mgik

8)

2,380,63

ClIN 14111.
[USINA [2.11
LIII URI-N(IA

6.38O.17

25

INIIL( II RISIN,\ .4V-II

4,000,24
1,720,53

4 t

I5,36l,94

50
13,641,41

LINIR<1l.

8,402,32

RVSINA -UI2/I 1
1)11 114UN lA

26,605,19

lOO
18,21,87

6,510,89

(RINIlt< II.

37,123,58

200
30,512,69

I1IIIRINtIA
tNIRtII,

7,121,87

1(15 INA ,1% 2-II

Ibid RNL lA

52,801.12

500
45,681,25

3,870,64

It IN 1141>1

90,6I2.I8

RISINA 1i2!I 1
lIIIUI(I--NCIA
pU.0S

amiwl

k--

Ii>IIciIa

1000
86,741,54

<i-SludciI);

pilO

1 ~unird

.s

problema

<i-Siudomfl

rS,

Se ropresenlm la meda tel

error eslndar

<xz).

CATALEPSIA

INMUVII.II)AI)

lii

[III

DOSIS
I]N1RI, ttIIII:MIN,\

RESINA <w !I<14~

-

U IIIIF:IENUI\

8I

PARTE EXPERIMENTAL
*

Actividad motora vertical

W DE MOVIMIEN1flS

DOSIS (mgAcg)

CONTROL
RESINA 452/II

26~62*4.00
5,751,35

25

DIFERENCIA

-20.872,65

CONTROL
RIESINA 452/II
DIFERENCIA

50

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA

[OIl

CONTROL
RESINA 452/II
DIFERENCIA

200

89,003.07
4.I30I,89
-Is,ooI,I8
37,8014,03
l,60l,29
.362,02,74
30,003,88
0,620.50
-29,381.38

CONTROL
RESINA 452/II

33,505,79
0,5010,27
-33,0015,52

500

DIFERENCIA
CONTROL
RESINA 452/II

34,373.77
0,000,00

1000

DIFERENCIA

-34,371.0,00

p<O.OS co~sIroI uy, problema (t-Student); ~pcO,OIcontrol

it,

problema (frStudent); n8, Se ropresesita la meda el error estndar (xc>.

ACTIV[IIAO

VEhTICAI.

N MOVIMIENTOS

Go
te
20

o
20

--40
60

4,

00

4.00

4,

4,

DOSIS RESINA (mgjiCg)

[LCONTEoL ~RESINA DIFERENGIA

82

PARTE EXPERIMENTAL

s&lixidintl jnQi2ra horii.tittil

DOSIS <mgAg)

N DE MOVIMIENTOS

ItISINA -l~2:I 1

25

109.62I0.74
39,007,02
-70,62172

ION 8841)1.
RISINA .I%jlI

50

804,626.24
25,877,55
-78,75I3I

I>II1141NCIA

113,204,76

-coN IflUI.

loo

I&IMMA .1 ~2/II
8 )IIFI4INCIA
COINIR(1I,
lUSINA I52~ II

200

CI )NI1U.II.
500

vi

130256.38
26,624.40
.103.631,98
III,129,88
4.621.24

DIIIILiNCIA

-106,58,64

(<-PM tUI.

822.872,99
6,371.62

8000

RI~SINA .1-V/l 1
IlI1L/ItVN(-IA
pO.)5 -nwI

32,801,41
-80,41,35

-I 16.51.37

~;olIcwn
OS mkn>

8.08 comliol

it

problcmo .SIudentt rS. Se rcpreaena lo medio el error csiuidar (tU

ACTIVIDAD IIOItIZONTAL

1(313
-

o
ti

100

[jibitN

IICVI,

ri ~

U >I~rI4FN(~IA

83

PAfl BXPERMWTAL

k2.- DISCIISIN 1W lS)S REStJt~TADOS

Vistos los resultados obtenidos tras la administracin de hashlsh a diferentes dosis,
~tjervanos
un conjunto dc efectos comportsnentales y fisiolgicosque conllevan: hipotermia,
catalepsia, disminucin motora y analgesia. Estos efectos se han atribuido en numerosas
ocasiones a los principios activos dc O,mnabls, los cannabinoides, y existennumerosos trab~os
cxpcrinicflttilcs que as lo dcniucstran (Compton el al., 1991; Fride y Mechoulam, 1993; ...).
Despus dc establecer los distintos lotes para la administracin de las diferentes dosis,
y someter a los animales a todas las pruebas de la Batera Farmacolgicapara cannabinoides,
sc observ la cxistunei~ de una miccin Dosis/Efecto lineal en la mayora de los tests.
As, en cl caso de la Temperatura, se produce unahipotermia que va aumentando con
la dosis dc resino administrada, desde 25 mg/kg hasta 500 mg/kg (en que el efecto es mximo,
ms dc 3 TI. Curiosamente, con la administracin de una dosis superior (1000 mglkg), la
hipotermia es menor. 1 lay que decir que esta dosis de resna tun elevada resulta txica,
producindose incluso la muerte de algunos animal. tratados en pocas horas, con lo que la
valoracin del parmetro en cuestin es muy variable. Decir tambin, que la hipotermia
producida en los ratones a los 60-90 minutos tras la administracin de la resma de hashlsh es
estadlsticamente significativa (p<0.O1) con respecto a los lotes control en todos los casos
salvo con la dosis menor (25 mg/kg). en que no sc observan diferencias significativas
comparando los resuhudos con cl control. Segn los estudios realizados por Pertwee, la
hipotermia producida tras la administracin de productos de Cannabft, no provoca Incrementos
significativos ca otros parmetros valorados, como la catalepsia o la hipoactividad.
Respecto a la Catalepsia, fenmeno muy tpico de los ctnnabinoides, se obtiene una
linealidad perfecta, como podemos observar en la grfica correspondiente. Debemos aclarar
que aunque en todos los casos se obtengan resultados estadIsticamente significativos (p<0,O1),
slo podemos considerar catalepsia cuando exista un Indice de Inmovilidad> al 20% (Pertwee,
1972): por debqjo de este valor no sc reconoce la inmovilidad producida por las respectivas
dosis como fenmeno catalptico. sino como un efecto sedante de las bqjas dosis
administradas. Por ello, es a partir de la administracin de 200 mg/kg de la resma ensayada
cuando podemos considerar dicho efecto como tal, alcanzndose el efecto mayor tras la
administracin de la dosis de 1000 mg/lcg, con un Indice medio de Inmovilidad que alcanza
84

PARlE EXPERIMENTAL

cl 80%. Destacar de este test que es uno de los que producen resultados ms reproducibles y
caractersticos. Adems resultan muy curiosas las diferentes posturas en que es capaz de
permanecer el animal catalptico, as como la hiperreflexia detectada si ese perodo de
inmovilidad es interrumpido por algn ruido imprevisto. Uno de los signos ms fciles de
apreciar es la mirada fija en un punto determinado durante un largo perodo de tiempo sin que
el animal cambie en ningn momento la postura adquirida.
Llegarnos a la valoracin de la Actividad motora. La administracin de las diferentes
dosis de hashish produce una bipoactividad marcada tanto vertical como horizontal y cuyos
valores son estadsticamente significativos (p<O,Ol y p<O,05>. Una vez ms podemos
comprobar la linealidad existente entre la dosis administrada y el efecto producido,
obtenindose mayor disminucin del nmero de movimientos a mayor dosis. Si bien, hay que
decir que en el caso de la valoracin de la Actividad vertical existe alguia pequea variacin
en la curva dosis/efecto. La hipoactividad es manifiesta desde dosis pequeas de resma, como
podernos comprobar por la reduccin del nmero de movimientos de los ratones tratados con
respecto a los controles. Tras depositar al animal tratado en el centro del campo abierto para
desarrollo del test, podemos hacer tambin otra serie de observaciones, en lo que se re-flore al
comportamiento. Los animales tratados, y sobre todo los tratados con las dosis mayores
muestran adems de la hipoactividad, un fenmeno de incoordinacin motora, producindose
el estiramiento de las patas traseras espontneamente dificultando as el andar del animal. Se
produce tambin en la mayora de los casos, una disminucin -apreciable de los movinientos
estereotipados como el aseo, capacidad exploratoria, etc, En numerosas ocasiones, el ratn
una vez depositado sobre el tablero cuadriculado del campo abierto, cruza sin rapidez algunos
de los cuadrados, dirigindose a uno de los rincones del campo, donde permanece inmvil
incluso durante un par de minutos para reanudar posteriormente la exploracin del mismo. Por
el contrario, los ratones control, a los que slo se les administra el vehculo, muestran una gran
actividad motora tanto vertical como horizontal, exploracin, aseo...
Hay que decir, que tras la administracin completa de Iiiashish a las dosis ensayadas,
no se produce el efecto bifsico (estimulante y depresor) demostrado por diversos autores y
relacionado directamente con la dosis del Tetrahidrocannabiflol (dosis muy bajas y dosis
elevadas) (Holtzman a aL, 1969). Por contra, los animales tratados con dosis de 25 mg/kg
(dosis mnima de resma ensayada), ya empiezan a manifestar sntomas de sedacin.

85

PAlIE mCPIWMEt4TM.

En cuanto O los tests para la valoracin de la Analgesia <Test de la ~Placa

caliente0 y
*i Foco Luminoso>, por el contrario. se produce unagran variabilidad de multados, y una
vez diacflada la curva dosis/efecto sc comprueba la ausencia de lineulidad; si bien, hay que
decir que la tendencia dc la curva es ascendente. Estos resultados tan variables pueden
cuendcrso considerandc, que la valoracin de analgesia es uno de los test que estn ms sujetos
o sufrir alteraciones en runcin cte numerosos lbctores, como son: e] sexo del animal de
c~pcrimcnaci. la va de administracin, Ja poca del ello, el momento del da... En nuestros
ensayos. calos podido comprobar el efecto analgsico atribuido a Cannabis en algunos de los
lotes tratados, As, sc obtienen resuluidos estadisticamente significativos. Para el analgesimetro
dcl Poco Lwinoso. obtenemtrn valoren significativos QpcO,oi; pCO,O5) del $6 de analgesia
(%MEP) con respecto nl control a partir de la administracin de la dosis de 100 ng/kg de
mino. Destacar que cl efecto analgsico mximo se produce a la dosis dc 500 mg/kg
(%MEl>~2S,9%). * los ensayos de analgesia realizados con el analgeumetro de la Placa
Caliente, tenias considerado dos parmetros para detectar el umbral doloroso: el lamido de
las patas delanteras y el lamido de las patas traseras, ambos nos indice cl momento en que
cl animal siente dolor, si bien considoramos ns idneo el segundo de ellos, Quiz este
analgesfmctro produzca resultados ms flables que el de la Placa Caliente, por Influir menos
Ihetores cii cl momento dc la medida, multando ser incluso ms sensible; as, encontramos
diferonciw esuclIsica,ncn<c sgntlcauivas con respecbo al control ya desde la dosis de 50
mg/kg. Debemos tener en cuenta, que la grao mayora de los estudios de analgesia realizados
con extractos dc C.flamu indiano, y con cannablnoides, emplean como va de administracin
la ondtwenosu; ud es el cano de los ensayos llevados a cabo por Peter y Martin, en 1991, Por
estar nuestro trabajo basado en el anlisis lbrmocolgico de la resino completo de Cannabis,
y vemos obligados por ello al empico de la vio de administracin intraperltoneal, no podemos
establecer una clara rotacin entre la experiencia de otros autores y la nuestra. Si bien, parece
claro que uno dc los rctores responsables de la gran variabilidad de los datos obtenidos, es
prccisanxcntc la va dc udninlsracln escogida (Martin, 1985).

86

PAKIE EXPUIMENTAL

B.- Efecto del Tetrahldrocannablaol

Por rr cl Tetrabidrocannabinol el componente paicoactivo ms potente de Cannabis

salivo, nos propusimos abordar el estudio farmacolgico de este compuesto, para establecer
una relacin con los ensayos matizados con la resma hasta este momento, tanto de toxicidad
aguda corno de linealidod dosis/efecto.
Utilizando cl principio activo puro, WC y siempre empleando la va de administracin
i.p. y corno vehculo el aceite de ssamo, decidImos analizar (para luego hacer una
comparacin). los efectos producidos por esta sustancie, b~o las mismas condiciones de
tratamiento que los empleados en los experimentos anteriores.
Las dosis ensayadas en este caso fueron de 10,20 y 50 mg/kg de WC, en 0,2 ml/ratn
del vehculo. Lgicamente, se escogieron estas dosis por las referencias bibliogrficas
encontradas y por supuesto, por la orientacin obtenida tras la realizacin de la curva
dosis/efecto de lo nuestra de hashlsh empleada; esto nos permite establecer una relacin entre
el efecto mostrado por el propio TIlO a dosis equivalentes a las utilizadas en la resista en
funcin de su conwosicin.

1.

1i,~

II

It
,1

ti

jtfr

ji

tt

ji

1 {;.

87

PARTh EXPERIMENTAL

B.l.- RFSUI,TADOS
En la siguiente tabla aparecen recogidos los resultados que hemos obtenido
administrtlfldfl a los lotes problemas lO, 20 y 50 mg/kg de &TI-IC. Cada una de las dosis fue
ensayada junio a otro lote conirol. Figura cl valor medio, el error estndar y la significacin
estacliStiCLl respecto a los lotes control (tStudent). A dicha tabla le siguen una serie de grficas
que resumen los tintos obtenidos en cada una de las pruebas (Temperatura, Analgesia,
Caa lepsu y Actividad)
u rn

DOSIS II u.

FOtil <%MEI)

.gtfl

(%)

A.VERT.
(nmovirn)

kIIORIZ.
(nrnovrn)

I1ACA LO

PLACA Li

CATALEPSIA

<sg)

(sg)

LYIINIlit)I
ID

.1>01(0.02
0.ilI>..IAI.I 1

.3,211166
11.926,33

8,5710,40
14,1&tl,37

15,341,15
30,503,65

1,870,62
15,903,25

24,906,18
13,003,00

94,0012,99
91,608,74

tONIR(>I
2<>

0.0Yt<>AY1
I>.21>l.l>,t>

.ijit,1I.O9
7,i>I:2,35

12,1611,18
10.410,71

20,321,63
21,271,98

2246,63
16,802,80

32,606,47
26,004,27

112,50I0,38
129,1218.93

.2.9Ifl.12
1,57.ti.<,2

9,8610,6
13,260,8

531068
34,10413

29,604,47
2000,75

102,121,54
26,315.65

20.4.0(14
14(It(l,ll)

32
1, 0

.005 cciii rol

wl,leruri ( .5 ludeul>: p.0.tI1 coiitroL u. problema (.SludcnIh 8. Se representa la mediR tel error eslndar (dc)
NI: 1 ncrciCitO de tetiipcrilIIiIi%: i~l Iii: Ni ~ Iiu eftcl, msihIc; II.ACA ID: lace, lamido de las patas delautcras
1.Al A II: Inca. loiti .3., tIc III, paiat lrascrn~: A. VER. AcIiv [dadvertical: A,! IORIZ,: Actividad horizontal

IIIPO1EIth( lA

((It

II.

~0,O8

un

4,

__________________________________________
0.2

DOSIS THC

(mg/Ng)

88

r
PARTE EXPERIMENTAL

CATALEPSIA

it

..

2,33
3

5,31

34,1 3
DOSISllIC (ms/Rs)

ANALDESIA ?OC0

it

II,

l~iitr~1I
ni
l)OS[S [NC

(mu .Wa

89

u
PARTE EXPERIMENTAL

PLACA (LAMIDO PATAS DELANTREAS)

TIEMPO (Sg>

te

14
2

0
O

2
O

4,
CONTROLQ
TI-It
~

0,67
14,76

42,16
10,41

9,86
13,26
DOSIS TI-JO (mg/ICg)

PLACA <LAUWO PATAS TRASERAS)

TIEMPO (sg)

35
30
25
20

5
LO

5
O

CONTROL Q
CRO
~J

15 34

30,6

20,32

21.27

7.32
31,14

DOS[S PEO (mg/Kg)

90

PARTE EXPERIMENTAL

ACflVII3AD lIOflIZONttL

N 31< >V13<1 RNT(it;

Ii,

II>
II
<(<1

-1
II
ti

4,

2,0

02,12
26,37
DOSIS TIlO

(mg/l<g)

ACTIVIDAD VERTICAL

MAINI ENil >5

cl

ti

A,
1 Ni>

4,
38(1
80

<:o

2~6
2
DOSIS INC <rng/Kg)

PARTE EXPERIMENTAL

B.2.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

Despus de analizar los resultados obtenidos tras el estudio de toxicidad y curva
dosis/efecto de la resma de Gannabis, parece obligado valorar el efecto del principal
componente administrado bajo las mismas condiciones.
Como ya hemos comentado anteriormente en otros apartados, muchos son los estudios
experimentales que demuestran el efecto bifsico del THC. Por ello, decidimos cii primer
lugar, comprobar dicho comportamiento empezando con la administracin de una dosis baja
de Tetrahidrocaimabinol, para luego probar otras superiores, As, establecimos tratamientos con
10 mg/kg como dosis mnima, 20 mg/kg y 50 mg/kg como la mxima. 1-lay que decir que
todos los experimentos se han realizado utilizando la va intraperitoneal como va de
administracin del compuesto, con el fin de mantener los mismos factores de biodisponibilidad
y poder establecer una relacin de manera ms sencilla.
Al mismo tiempo nos proponfanos hacer un estudio comparativo de los efectos
desarrollados en animales tratados con resma y animales tratados con el principio activo

principal, estableciendo una equivalencia entre las dosis de TI-IC y la proporcin de dicho
cannabinoide presente en las dosis administradas de hashish. Considerando que las resinas
empleadas presentaban unaproporcin de TI-IC entre el 10-13%, el administrar 100, 200 y 500
ng/kg de dichas resinas, era equivalente o similar a la administracin dc 10, 20 y 50 mg/kg,
por supuesto, refirindonos exclusivamente al Tetrahidrocannabinol, objetivo fundamental de
este estudio parcial.
Pues bien, despus de realizar las distintas pruebas, y de prestar tina especial atencin
en el comportamiento animal, observamos que tras la administracin de dosis pequeflas de
THC (10 y 20 mg/kg), se aprecia un estado de hiper-excitabilidad en los animales tratados;
as los ratones muestran una mayor reaccin a los estmulos exteriores, se produce un
incremento en los gritos, aumento de la actividad motora (especialmente de la horizontal), y
no se detecta la marcada hipotermia que experimentaban estos animales tras la administracin
de las dosis correspondientes de tesina, sino que incluso en algunos casos aislados se detecta
hipertermia. Por el contrario, una vez administrada la dosis mayor, de 50 mg/kg vuelven a
aparecer los efectos que habamos detectado en los ensayos realizados con la tesina, es decir,
sedacin, hipotermia, hipoactividad, catalepsia... Se prueba as el complejo patrn de efectos

02

_______________________________________________

PARTE EXPERIMENTAL

que presentail los cannabinoides, y concretamente el Tetrahidrocannabinol: a dosis bajas

estimulacin del SNC, y a dosis ms elevadas depresin del mismo,
Analizando enca una de las pruebas de la Batera Farmacolgica de Cannabinoides que
hemos empleado, empezaremos una vez ms por la Temperatura corporal. Los resultados
muestran tina ligerisima disminucin de la temperatura de los animales tratados con dosis
pequeas cte 1111. twe aunque presentan diferencias estadisticamente significativas con
respecto a los controles, no superan en ningn caso los 0,5 0C, Administrando 500 mg/kg, el
efecto hipotrmico sc empieza a apreciar, pues el descenso de la temperatura corporal alcanza
PC. Si bien, dicho electo hipotrmico es significativamente inferior al producido tras la
administracin de una dosis ce esina que presente una proporcin equivalente e incluso
inferior dc FlIC., en las que la disminucin trmica alcanzaba los 230C,
Con respecto a la (htalcpsa podemos ver en la tabla de valores y grficos que se
obtienen resultados estadlsticainente significativos (p<0,0I) respecto a los lotes control, en
las tres dosis administradas; tenemos que decir, sin embargo, que los Indices de inmovilidad
obtenidos con las dosis de 10 y 20 mg/kg son inferiores al 20%, y por ello, el efecto no puede
ser considerado como catalptico. Con la dosis de 50 mg/kg este efecto es ms evidente
(34,1%). llevo una vez ms, es inferior al mostrado con la administracin de las dosis
correspondiente ce resma (52,8%), como se puede comprobar revisando los resultados del
grupo anterior de eNperimentos.
Pasamos ahora a comparar los efectos producidos sobre la Actividad motora; respecto
a la actividad vertical la mayor disminucin cte movimientos se puede observar con la dosis
dc 50 ng/kg. siendo esta la nica dosis con Ja que se obtienen datos con diferencias
estadsticamente significativas respecto al control (p<0,0l), Con 10 y 20 mg/kg el descenso
del numero ce movimientos es algo apreciable, ms no existen diferencias significativas. Con
la actividad horizontal vemos claramente el efecto estimulante producido con la administracin
(le dosis pequeas ce TIIC, obtenindose valores no significativos, pero se detecta un aumento
<le numero de movimientos con respecto al grupo control, Por el contrario, administrando la
dosis mayor (50 mg/kg), se manifiesta una marcada hipoactividad, que an as, sigue siendo
menor a Ja producida por la tesina cte Cannabis.

293

PARTE EXPERIMENTAL

Por ltimo, observando los resultados de las pruebas de Analgesia volvemos a

encontrar los datos ms dispares. Curiosamente se obtienen valores de %MEP mayores para
dosis bajas de THC, siendo en todos los casos estadsticarnente significativos comparndolos
cOn el control (pczO,05; p<0,Ol; Analgesmetro del Foco Luminoso). En el caso del
Analgesmetro de la Placa Caliente, ocurre lo mismo producindose el mximo efecto a la
dosis ms pequea; en este caso, la diferencias con respecto a los controles son
estadisticamente significativas, salvo para la dosis de 20 mg/kg en que los resultados no son
significativos. Como ya hemos comentado anteriormente la analgesia es un test que est sujeto
mltiples factores que pueden producir alteraciones en los resultados. Por ello, teniendo en
cuenta el patrn tan caracterstico de los cannabinoides, la va de administracin empleada
(i.p.), el sexo de los animales (ratones hembras), cte., podemos dar una explicacin a la falta
de linealidad y la gran variabilidad mostrada en estos ensayos.
Vistos todos estos resultados, parece claro que si bien se demuestra el comportamiento
bifsico (estimulante y depresor) del Tetrahidrocannabinol en funcin de las dosis, parece
cierto que, dada la menor potencia de efecto del principio activo principal (THC) con respecto
a la presentada por resma de composicin establecida, a dosis equivalentes, los efectos
farmacolgicos atribuidos a la resma de Cannabis no se deban exclusivamente a dicho
principio activo, sino que probablemente otros cannabinoides o bien otros compuestos no
cannabinlicos, modifiquen dicha actividad potencindola.
El paso siguiente cii este estudio ser, por lo tanto, intentar resolver dicha duda, viendo
el efecto que provoca la administracin de otros cannabinoides,

94

PARlE EXPERIMENTAL

C.- Efecto del Cannabidiol y Cannabinol

Siguiendo con el estudio y gracias a la aportacin del Servicio de Restriccin de

Estupefacientes, pudimos disponer de otros dos cairnabinoides de nuestro inters: CBD y CBN,
Estos ensayos fueron realizados simultaneando los lotes de animales a los que se les
administraba cada uno de los compuestos, evitando as una gran cantidad de factores que
podran falsear los resultados.
Para el anlisis de estos dos principios activos, la dosis escogida fue nica, siendo sta
de 100 mg/kg; una vez ms, partamos de referencias bibliogrficas que nos indicaban la
menor potencia de estos cannabinoides con respecto al THC. Por ser productos puros,
decidimos libremente no aumentar ms la dosis, por tratarse ya de una dosis suficientemente
elevada, establecindola como lmite mximo.
Volvemos a recordar, que cada uno de los lotes de animales (CBD, CBN y control),
fue sometido a todas las pruebas de la Batera Farmacolgica para Cannabinoides, siguiendo
las mismas directrices expuestas con anterioridad. Paralelamente se establecen respectivos lotes
control a los que solo se les administr 0,2 ml del vehculo (aceite de ssamo).

95

PARTE EXPERIMENTAL

Cl. RISSULlAI)OS
IAl caba que figura ms abajo recoge un resumen de los resultados (el valor medio con
el error sta.ndar) que hemos obtenido en cada una de las pruebas tras la admistracin de tina
dosis de 100 mg/kg de (lID y (UN a diferentes lotes de animales. Aparece tambin la
significacin estad [stka. Despus. esos muismos resultados los hemos representado grficamente
y para Ibeilitar lii cOIflpiCflsicfli, lo hemos hecho paralelamente, exponiendo CBD y CBN.

dc INIlACIl

CIII) <looigAg)

CON IXOL

CnN (>00 mgfl<g>

<tI 5.1MB!

l.091.0.22

.0,036,04

0,360.08

.12.2112,1>)

.16,843.29

-9,523,94

.6,732,45

IIA<?A .3) <>4)

U7.t0.til

3 I92kt,0i

10,970,86

11,210,99

II.ACN 1 i~u)

3 5.2Ut.o.4q

27,853,47

37,740,58

i8,0710,91

CAA! .liSIA(%>

264<0<10

8,340,89

1,890,47

28871I.16

t3,m7430

37,895,98

30,l23.58

76,258,01

m04,559,32

93,87868

NI <Cl

A, VElA!. (IlMn.i&1,>
Al I<.IRI/.tinov>

j,:U,05 control ~ irolilctra usuideauit p. tt)! <nutro

VI: Iucrcueto dc le ipcrntunu: MEl Mfixi

tx

2,870,58

problema (t.Studen0: m8, So representa la media cl errar estndar (xis).

3 AC LO:!laco, lamido da las patas delanteras

LACA II: [laco, <muido tic las pato> haseros; AVIlUr Actividad vertical; AlIORIZ. Actividad horizontal
un alevn posible;

IItPOTEIQtlA

3 IIMYr:l~NIIA (t.>

(.2

ti, it
ti
<1.1

It
CON lOO mg/Kg

fltNTlwl,
<III>

<>15
1

DOSIS

96

PARTE EXPERIMENTAL

CATALEPSIA

% INMOVILIDAD

lo

8
.

o
CONTROL~j
CBD

080 lOO mg/Kg

CnN [00 mg/Kg

2.64
6,34

CONTROL ~J

1,89

CEN

2,87

DOSIS

ANALGES!A FOCO

ANALGESIA (%MEP)

lo

20

DOSIS

97

PARTE EXPERIMENTAL

tACA (LAMIDO PATAS DELANTERAS)

ji

1)

(oNTlIwr~
<III)
~11

n.a?
33,1>2
10,07

<tiNIROI, jj~~jI

11,21

DOSIS

PLACA <LAMIDO PATAS TRASERAS)

It>

II

L~ 1
(O NT tU I(~~j

21

27.115

7.74
1007

98

PARTE EXPERIMENTAL

ACTIVIDAD (JOB IZONTAL

N MOVIMIENTOS

(20
(00
80
60
40

20
0

CONTROLE
CED

109.25
76,25

CONTROL E
GEN

04.55
93.67

DOSIS

ACTIVIDAD VERTICAL

N MOVIMIENTOS

.10

30
20
(0

O
CIJO lOO mg/Kg

CONTROL 5
CBD
5
CONTROLE
eDN
5

dEN lOO mg/Kg

26,8?
1387
37,89
30,12
DOSIS

99

-a

PARTE

EXPERIMENTAL

C.2.- i)ISCtJSIN DE LOS RESULTADOS

1 legados hasta este ptnto <le trabajo experimental, pareca lgico realizar un anlisis
farmacolgico general de otros compuestos cannabinlicos conocidos, que si bien se
encuentran en menor piopoicin en la resma, podran producir efectos similares a los del THC.

Para valorar la implicacin de otros cannabinoides en la produccin de los efectos

farmacolgicos ati buidos a Cannabis, decidimos administrar Cannabinol (CBN) y Cannabidiol
(CI3D). por ser dos dIc los cannabinoides ms conocidos y de los que disponamos con mayor
facilidad, La consulta de la bibliograila existente nos orient a escoger la dosis dc 100 mg/kg.
Por debajo de ella, utilizando la va intraperitoneal, no se detecta efecto alguno; por otro lado,
emplear una dosis mayor que sta tampoco pareca lgico, dada la pequea proporcin en que
se suelen encontrar dichos cannabinoides en las diferentes Inuestras. Por ello, se administraron
en paralelo a diferentes lotes, 100 mg/kg ce CBD y 100 mg/kg de CBN, vehiculizados en 0,2
ni! de aceite de ssamo. Siguiendo la misma metodologa empleada en los experimentos
anteriores, los animales se sometieron a los diferentes tests de la Batera Farmacolgica,
obtenindose los resultados expuestos anteriormente,

iras la adlmillistracin <le la dosis de CBD encontramos que se produce una hipotermia
de alrededor de 1 0C en los animales tratados, existiendo diferencias estadisticamente
significativas con respecto al control (p<0,0l). Por el contrario, la administracin de CBN,

muestra un electo mucho menor, aunque al compararlo con el control, se aprecian tambin
diferencias significativas.

Si observamos los resultados obtenidos en el test de la Catalepsia, ninguno de los dos

compuestos es capaz de producir un Indice de inmovilidad superior al 20%, con lo que se
puede decir que no tienen capacidad catalptica. Se obtienen diferencias significativas respecto
al cotrol en el caso del CI3D con un indice del 8,34%, que nos indica un ligero efecto sedante
<le este compuesto. Corroboramos as lo que I>ertwee demostr en cuanto a la ausencia de
efecto catalptico del Cannabidiol (Pertwce, 1972).
Respecto a la Actividad motora vemos que una vez ms solamente el Cannabidiol
consigue disminuir el nmero de movimientos con respecto al lote control, tanto en la

loo

PARTE EXPERIMENTAL

actividad vertical como en la horizontal Qp<0,05). Con la administracin de Cannabinol, los

animales muestran un comportamiento similar a los controles.
Lo mismo ocurre con las pruebas de analgesia: el CBN no posee efectos
antinociceptivos, como se puede comprobar observando los resultados obtenidos tanto con el
analgesmetro de la Placa caliente, como con el del Foco calorfico. Tras la administracin de
CBD, sin embargo, se provoca una ligera analgesia valorable principalmente empleando el
analgesmetro de la Placa Caliente, y tomando como umbral al dolor, el lamido de las patas
traseras. Este ligero efecto antinociceptivo no es apreciable con el test del Foco luminoso.
No hemos observado tampoco otros efectos conductuales que aparecieron sin embargo
en la administracin de resma o TI-IC como: disminucin de movimientos estereotipados,
posturas anormales, incoordinacin motora, etc,
Por todo lo dicho, podemos concluir que Cannabidiol y Cannabinol son dos
cannabinoides presentes en las muestras de hashish, que muestran una potencia farmacolgica
muy inferior al Tetrahidrocannabinol; los resultados demuestran, que de todos los efectos
ensayados con la Batera Fannacolgica de cannabinoides, el CBD a la dosis ensayada es

capaz de producir hipotermia, una ligera analgesia y una pequea disminucin de la actividad
motora, El CBN resulta an menos activo, observndose exclusivamente, un efecto ligeramente
hipotrn1ico. Queda por discutir si la combinacin de ambos, e incluso la presencia de otros
compuestos puedan contribuir a potenciar dichos efectos.

lo

PARTE EXPERIMENTAL

1).- Estudio (le l)osil)!c efecto de los otros componentes de la resma de Cannabis
Para abordILu este tema, se nos ocurri escoger cinco de las muestras de resinas de
Qn,ubix y admidstiarlas tal que la dosis del THC que contengan sea fija, igual para todas
ellas. As, ya no hablaramos dic dosis <le resma, sino de dosis de TIIC presente en la
muestra. Claro est, attiellas resinas que presenten una gran riqueza en dicho cannabinoide,
sern adruinsiradas en menor canudad que aquellas que, por su pobreza en TIIC requieran un
peso mucho mayor para lograr la proporcin escogida. Suponiendo que el THC fuera el nico
responsable de los efectos producidos por la resma, la administracin de las diferentes
muestras deba arrojar resultados similares, Si por el contrario, stos fueran muy diferentes,
cabra la posibilidad de que el esto ce los componentes presentes en la muestra, modificaran
ca una u otra ineclicla la actividad de los principios activos,
Basndonos en los resultados hasta entonces obtenidos, decidimos fijar la dosis de TI-IC
en 20 mg/kg. Para dlispoilei dc un mayor espectro de resultados, las muestras ensayadas deban
ser representativas tanto cte aquellas que posean una mnima, intermedia y elevadaproporcin
de FHC. Con enca una ce ellas, se realizaron todas Las pruebas de la batera farmacolgica
para ctlnllabifloidles, baio las nisinas condiciones de tratamientos establecidas en el capitulo
correspondiente y con la misma secuencia de desarrollo dc la experiencia.
En la tabla sigt.iiente recogemos las cinco muestras probadas con la dosis de resma
administrada (ng/kg) en cada caso una vez establecida la dosis de TI-IC en 20 mg/kg. De la
alisma manera, incluimos tambin la dosis correspondiente <le CBD y CBN (mg/kg, en funcin
de su contenido) para cada muestra, as como la proporcin conocida de cada uio de sus
cannabnoides, pues son datos que nos pueden servir de ayuda a la hora de analizar los
resultados.

lIB

. 3m

% t. UN

1> Rl dHA <mgcg)

1> WC (mg/I<g)

~ CDI) (n>glkg)

[3CliN (rngflg>

612

>2.35

(1,615

(>.212

2700

20

16,6

6,5

778

2.355

2.838

2,187

849

20

24

18,5

2~I

6<125

7<113

1,683

332

20

26,3

5,5

261

8,8(14

5,1<17

,oo

247

20

12,6

2,5

241(2

il,7t1

6,69<>

.272

116

20

9.7

,8

102

PARTE EXPERIMENTAL

Dl.- RESULTADOS
1 ~os<latos obtenidos tras la administracin de las distintas resinas fueron los siguientes:

t$( >N 1RO!

1:0<0 (%NtIIi

ItESINA 778

~,29.t0,56

2,070,17

2,420,15

3,070,22

I6,327,I>

0.2II,7.l

3,381.49

-3,763,78

2,313,79
(7,471,33

RESINA 291

RESINA 261

[ALA III t~M)

>,52:i.0,2

20,161131(

18.853,30

11,853.39

(7,842,45

PlACA 1:1 <SMi

friQtO,.lt>

>0,88 12. 15

29,312,15

29,0 33,37

27,843,9!

CArA! .IISIA (.)

1 <161<1.35

46.8611.57

54,173,17

36,443,64

55,293,16

34.7011 <>2

2.871,20

1,870,44

3,750,65

1,500,73

115.5.t3.14

l9.1213.6l

20,004,23

32.750,83

24,755,65

Al IUROflnwim)
rl, ~erelwcnc>tn l wda

RIiSINA 642

RESINA 241

2,100.19

28,043,07
30,713,16
2,870,74
3>625,21

cl cur e~iitiidnr U~;), 3,a sijaillcaein esadlsUca se reprcseiila nl pie de cada una <lo las grficas siguienes,
hIPOTERMIA RESINAS
O TIlO 2Omg/kg

te)

Iii It)IRN! lA (

ti

ti

<>11

,2I1

LhC>7

2,~I2

8,07

2,1

PRODUCTO
R642

CONTROL
1(612

*,

5.778

1(291

1(261

1(241/2

,.

*.

..

,,

1*

1(251

~<0,01;
$0,05 (NewrnnivKCtIl.

103

PARTE EXPERIMENTAL

CATALEPSIA RESINAS
D TFIC EOmg/kg

o>>

II

II

II>
1

[EL1) 2 LE WItEEE.I7

E<~ ~

86,29

30,71

PRODUCTO

CONIUOL

5.642

1(778

1(291

1(261

1(241/2

,,

,,

,,

..

,.

1(778
R26I
pc0,01; $0,05 (Newman.KeuIs)

104

PARTE EXPER(MENTAL

ANALGESIA FOCO RES(NAS

O (LIC EOmg/kg
tStIt)

(<Y

((Y

[OiLss~flLa2

,~;:,

0.21

4 6~~

4 1~

3~38

376

4
2~I
PRODUCTO

1(642
CONTROL

5.778

1(642
p~O.OI; PCO.OS (Ne~vman.KeuIs).

R291

1(261

5.241/2

4.

4.

**

Y.

los

PARTE EXPERIMENTAL

PlACA (LAMIDO LATAS DELANTERAS) RESINAS

TIIC

rrs

(sg)

ti

4
::~t), Iii

4
3 RUS

4
7,85

17.84

4
7.47
PRODUCTO

CONTROL

R642

1(778

1(291

1(261

.,

.*

**

1(241/2

p<O.OI: p<O,OS (NownasvKeuls).

106

PARTE EXPERIMENTAL

PLACA <LAMIDO PAPAS TRASERAS) RESINAS

O THC 20rng/kg

TIEMPO (sg)

50

40
3D

20
(0

<u

~t
4

16,39

40,88

4
29.31

4
29,01

27,84

28.04
PRODUCTO
1(291

1(261

CONTROL

*4

44

1(642

4*

*4

1(642

1(718

R241d2

p<O,OI; ~,c0.05 (NewmauvKeus).

107

PARTE EXPERIMENTAL

ACTIVIDAD VERTICAL RESINAS

D TIlO 2Omg/tcg

Mt\IMIF:NIO

/
1<1

u,

:1
:> ti
Y

(1

t,ct
4

<ir

2>3?

1.1.17

+
1,75

1.5

21
2,87

PRODUCTO

1(642

5.778

CONTROL

pc0,O1I pc0,05 (NewmmvKeuls>.

5.291

1(261

1(241/2

4*

los

PARTE EXPERIMENTAL

ACTIVIDAD hORIZONTAL RESINAS

D TIIC ROmg/kg

N MOVIMIENTOS

20

(00
80
SO
40
20

<u
Q

115,5

t$

4 ti

19,12

4
20

32,75

24,75

4
31,62
PRODUCTO
R642

R7fl

CONTROL
~
*,
pc0,0I; p<O,Oi (Newman-KCUIS).

R29I

R26I

(241/2

**

*4

4*

09

PARTE EXPERIMENTAL

D.2.- t)ISCIJSION Dl: LOS RESULTADOS

[ras la adniustracin de las distintas muestras de resma de Cannabis (una vez fijada
la dosis de 1ll( en 20 mg/kg), podemos observar que se produce en todos los casos los
diferentes efectos farmacolgicos y coiipoitame.ntales caractersticos de dicha droga; si bien,
es cierto, que eiconttIflos notables diferencias entre unas y otras, despus de comparar los
esultaclos. Nuestro objetivo es conocer si estos efectos son debidos al THC, o si por el
contrario a los otios cannabinoides u otros componentes pueden contribuir a la actividad; de
ah, el que huyamos decidido equiparar todas las muestras en lo que se refiere a la proporcin
de letrahidocaiiiabinol administrada. llacemos a continuacin una valoracin de cada uno
de los tests realizados, compatalidlo el resultado de unas resinas con otras.
Respecto a la hipotermia, es la resma 642 la que logra una disminucin de la
tcmpelUtLIILI corporal mayor, ciue alcanza los 50C. El resto, provoca un efecto tambin notable,
pero intemior. 1 leuos encontrado diferencias estadisticamente significativas con respecto al
control en Lodos los casos; adienls, como hemos apuntado en la tabla anterior, tambin existen
diferencias entre el erecto de la resma 642 y el resto de las muestras.
1:1 efecto cs.talplco tambin se deja notar tras la administracin de todas las muestras
dc resma. En este caso el erecto mayor se logra con las muestras 261 y 778. Una vez ms,
todas ellas producen resultados con diferencias estadisticamente significativas respecto al
control. lneontrwwos Induces <le inmovilidad que van desde el 30% hasta el 55%, en funcin
<le la muestra. Las diferencias estadsticas entre las diferentes resinas, quedan resumidas al pie
ce la grfica correspond ente.
Curiosamente, en el caso de la actividad motora, se produce una reduccin de
movimientos similar en todas ellas, no encontrndose diferencias significativas entre unas y
otas, pero, por supuesto, s entre cada una de ellas y el control, Vemos en los grficos la
marcada hipoactividad tanto vertical como horizontal que acusan los animales despus del
tratamiento. Valorando al mismo tiempo los efectos conductuales, encontrarnos en la mayora
dc los casos: disminucin ce movimientos estereotipados, sedacin, posturas anormales,
incoordinacin motora, etc.

110

PARTE EXPERIMENTAL

En el caso de los test de analgesia, es la resma nmero 642 la que de nuevo destaca
por su mayor poder antinociceptivo, apreciable con los dos analgesirnetros empleados. El resto
dc las muestras presentan un efecto analgsico detectado principalmente con el analgesrnetro
de la Placa caliente, corno podemos apreciar al obtener mayores diferencias con respecto al
control empleando dicho test, y especialmente considerando como umbral doloroso el lamido
de las patas traseras.
Placiendo un resumen que destaque

los efectos

mayoritarios

de cada una de las resinas

ensayadas, podemos apreciar que:

La muestra n0 642
hipoactividad.
-

produce marcados efectos

de hipotermia, catalepsia, analgesia e

La segunda resma (778) destaca por la accin catalptica , superior incluso a la de

la muestra anterior, hipoactividad motora y disminucin considerable de la temperatura
corporal.
-

marcada

La muestra n0 291 con efectos moderados de hipotermia y catalepsia, presenta

hipoactividad y cierto efecto analgsico.

De la resma 261 destacar principalmente el potente efecto catalptico, as como la

fuerte hipoactividad que manifiestan los animales tratados con ella, Respecto a los otros tests,
se presentan caractersticas similares al resto de las dems muestras, con excepcin de la 642.
-

Por ltimo, la muestra 241/2 aunque presenta todos los efectos descritos
anteriormente, es menor en la mayor!a de los casos.
-

Como ya hemos dicho, las dosis de resma administradas estn ajustadas respecto a la
de THC. Queriendo encontrar un cannabinoide responsable de la potenciacin de los efectos,
hemos ido comparando muestra por muestra, estudiando la proporcin de CBD y CBN
presente en cada una de ellas. Es ahora cuando nos apoyamos en la tabla que recoge la
relacin entre proporcin y dosis de estos dos cannabinoides en funcin de la dosis
administrada de resma una vez establecida la de THC. Resulta difcil establecer una relacin
clara y congruente con la que podamos responsabilizar a uno u otro cannbinoide de la

Ji

PARTE EXPERIMENTAL

los efectos farmacolgicos, Podemos comprobar, que precisamente la muestra

642, que resulta ser una de las ms potentes, es la ms pobre en lo que se refiere a % de
cannabinoides; por ello, llegamos a la conclusin de que al tener que administrar una cantidad
(en mg) mayor tic mesina para lograr establecer los 20 mg/kg de THC establecidos, sean el
resto de los componentes resinicos los que produzcan esa potenciacin de los efectos.
Precisamente, la muesta 241/2, que presenta mayor riqueza en THC y por tanto es
administrada en nltnoI <losis resinica, es la que produce efectos menores, aunque ciertamente
los produzca.
inplicaci6n en

112

PARTE

EXPERIMENTAL

E.- Potenciacin o inhibicin <tel efecto farmacolgico de los diferentes principios

activos tras tina administracin conjunta
Por ltimo, y para completar este anlisis farmacolgico de la resma dc Cannabis y los
principales cannabinoides, decidimos estudiar la posible modificacin de los efectos
farmacolgicos de estos principios activos al ser administrados conjuntamente; comparando
ste con el efecto de cada uno cte ellos por separado, intentamos elucidar si son ellos mismos
los causantes de la potenciacin o inhibicin de dichos efectos.
El planteamiento <tel experimento, en este caso, fue sencillo:
-

Administrar en pmimer lugar CBD+CBN conjuntamente a un lote problema (por supuesto,

coitrastado siempre con un lote coitrol), y someterlo a los tests de la tantas veces nombrada
Batera Farmacolgica para Cannabinoides.

En segundo lugar, y cte la misma manera, hacer una administracin triple, es decir, inyectar
los tres cannabinoides (THCI-CBD+CBN), todos ellos disueltos en un volumen de 0,2 ml/ratn
<le vehculo adecuado (aceite de ssamo), y esttdiar los efectos producidos.
-

EN tercero y ltimo lugar, comparar los resultados con los obtenidos tras la administracin
del principal principio activo (ThC).
-

Con todo esto, y los datos obtenidos en el resto de los experimentos planteados
anteriormente, podramos sacar informacin interesante para nuestros propsitos.
Las dosis escogidas para la administracin simultnea de dichos compuestos fXeron las
siguientes: 100 mg/kg para el CI3D; 100 mg/kg para el CBN y 50 mg/kg para el THC, todos
ellos siempre administrados en un volumen de 0,2 ml/ratn del vehculo.
I,os animales fueron sometidos a todos los tests de la Batera Farmacolgica, siguiendo
el orden establecido en un primicipio y bajo las mismas condiciones que en el resto de los
experimentos desarrollados aiteriormente. Paralelamente, trabajamos con un lote control; los
resultados se sometieron al test estactistico de Newman-Keuls para valorar las diferencias
estadsticas existentes entre los diferentes lotes establecidos.

113

-u

PARTE EXPERIMENTAL

LI.- RIISXJLIADOS

II

CONtROl.
O.0S1O.0I

lId.
0,817.90

CIII)
1.090,22

CliN
0,360,08

CBD+CIIN [ TI-IC+CBO+CRN
0,020,03
1,090.13

7,572,55

.16,843,29

-6,143.45

-6,713.19

2,552,93

3:fl<<1 (%N111)

.IG,52I,I6

PlACA Ib u<g~

>5710,35

13,2610,83

II,92I,0I

11,210,99

11,540,79

13,890,75

PlACA IT (sg)

19.390.35

31.131,38

27,853,47

18,070,91

21,821,29

29,421,52

CAIAI,IWSIA(%)

1,9210,26

3I,I4I,13

8,340,89

2,870,58

10,592,81

70,5516,81

A,VRRIXI>ffiOV)

35.582,82

2.000,75

13,874,30

30,123,58

19,004,62

1,870,64

AIIOItltIflflov)

1 II,I5l.70

26,375,65

76.258,01

93,878,68

67,258,48

20,125,30

(8. Se tC(YftSCflhtt

LI

inedia 1 cl error cs><Iar (xc).la Slg((IIlCflCI(> esladsltca SC represena al pe da cada una de las grficas siguientes.
HIPOTERMIA

0.2
ti

1,00

0,36

1,09

0,02

PRODUCTO
lijO

CONTROL

CIII)

CBD+CIIN

44

*4

CBD+CI3N+TI4C

,IIIC

4.

CDI)
ClIN

CliN

.,

Y.

.4

p<0,OI; pcO,O5 (NoIvnW.KCUIS)

14

PARTE EXPERIMENTAl.

CATALEPSIA

re

(Y.

r
Y.
<Y

,~.

Y.4,
Lfl7

o~

y?

<7

0,39

[lIC
<2L)l<flto)I.

PRODUCTO
70,66
COD

ClIN

CDD+CBN

CDD+CDN411C

4,

,,

44

4*

.4

4.

4,

lIc
nld.ellod:BN

1v~t>,05 (Nc~vmanKCUIt)

lis

PARTE EXPERIMENTAL

ANALGESIA FOCO

ANALGESIA (%MEP>

10
5

o
5
(O
(5

20

101

10.52

7,57

16,84

6,74

631

2,55

PRODUCTO

rHC

CBD

CliN

CBD+CBN

CIID+CBN*THC

CONTROL

lic

.4

THC+CBD-fCBN

4.

4,

pcG.OI; pc005 (Newman.KeUIS).

116

(ARTE EXPERIMENTAL

PLACA

(LAMInO PATAS DELANTERAS)

TIEMPO (sg)

(6
(4
(2
(O

a
6
4

2
o

13.26

11.92

11.21

11.64

13.89
PRODUCTO

[HO

CONTROL

CBD

CliN

CBD+CRN

CBD+CBN+THC
**

p<Q,OI; p.CO05 (Newman-KCUIS).

1)7

PARlE EXPERIMENTAL

PLACA <LAM(DO PATAS TRASERAS)

TIEMPO (sg)

ny..

40

35

30
25
20

Ib
10
5

u,>

(4

<u
e?

<9
L

19.39

31.14

27,05

8.07

(4K

st

j 21.82

34,42

PRODUCTO

CONTROL

1110

CIII)

44

*4

ORN

CBD+OHN

CBD+OI3N+TEO
**

lijO

4.

nJO+CBD+OBN

4*

4*

p.Z0,0I; p<0.O5 (Newasan-KeuIs).

118

PARTE EXPERIMENTAL

ACTIVIDAD VERTICAL

It

(Y

fth

1 tI.

ao, 2
19
1,87
_________________________________________________

11,117

PRODUCTO

CONTROL

1110

CDI)

**

4*

n.b

CliN

CIII)+CBN

CBD+CBN+TIIC

**

**

**

**

TIlOlODO 0DM
~~~O,0I;
po,OS tNewmanKeulS).

119

PARTE EXPERIMENTAL

ACTIVIDAD hORIZONTAL

N~ Nl 0V INI KNTOS

(<Y

III

[U.

<9

e?
1

<9

93W?

e?
1

67,25

20,12

PRODUCTO

1110

CIII)

CliN

OIID+CIIN

CI3I)+CBN+1IIC

*4

4*

**

**

TI lO

**

4*

*4

11 ICCB04CDN

4*

44

*4

CONTROL

1 ,<O.OS <Newnian.KcuIS).

120

PARTE EXPERIMENTAL

ES.- DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

Para terminar con este estudio farmacolgico de la resma de Cannabis y de sus
principios activos, no podamos dejar a un lado el estudio de la potenciacin de los propios
cannabinoides entre s. Por ello, al disponer de tres de ellos, decidimos administrarlos
conjuntamente, con el fin de establecer una analoga con la resma entera, y luego comparar
su efecto con el de ellos mismos por separado.
En la representacin grfica correspondiente a la medida de la temperatura, podemos
observar la existencia de hipotermia principalmente en los lotes administrados con THC (50
rng/kg), CBD (100 mg/kg), siendo mucho menor despus de la administracin de CBN (100
mg/kg). Tras la administracin de los dos cannabinoides minoritarios (CBD+CBN, 100 mg/kg~,
se produce sorprendentemente una inhibicin del efecto hipotrmico del CBD. Sin embargo
la administracin concomitante de los tres produce una ligera potenciacin del efecto inicial
de TI-IC. En todos los casos se observan diferencias estadsticamente significativas con respecto
al control.
Respecto a la

catalepsia, ya habamos visto

el TI-IC es el cannabinoide responsable

de dicho fenmeno; no obstante se logra una gran potenciacin del efecto una vez
administrados en conjunto, pasando de un Indice para el THC del 30% a ms del 70%. La
estadstica nos lo demuestra, pues se obtienen diferencias significativas Cp.<0,01> entre el lote
TFIC+CBD+CBN y el resto de los lotes establecidos.
que

En cuanto a la actividad motora, tenemos que decir que tanto para la vertical corno
para la horizontal, la administracin de CBD+CBN consigue una disminucin del nmero de
movimientos mayor que la administracin de dichos cannabinoides por separado. Los animales
tratados con la mezcla de los tres cannabinoides muestran una fuerte disminucin motora, que
es similar a la que presentan aquellos tratados exclusivamente con TI-JC, sin que exista
potenciacin del efecto; as podemos ver que entre estos dos grupos no se observan diferencias
estadisticarnente significativas.
Por ltimo, siguiendo el orden establecido desde el principio, valoraremos ahora los
resultados obtenidos en los test de analgesia. En el primer caso, con el analgesimetro del Foco
luminoso, el lote de animales que presenta un %MEP mayor es el tratado con THC,

121

PARTE EXPERIMENTAL

obtenindose diferencias estadisticamente significativas respecto al resto de los lotes, salvo el

lote UllC-CIDCBN,respecto al cual no existen diferencias. En este caso no podemos decir
del eltoto antinociceptivo del TI-fC, aunque s es cierto que cl conjunto
produzca un efecto mayor que por si solos. Con el analgesimetro de la Placa
observamos una ligera potenciacin tras la administracin conjunta de los tres
c estudio, considerando el umbral doloroso el lamido de patas delanteras y

que exista potenciacin

dte

los

tres

caliente, si
compuestos

traseras.
Vistos los cstltados alteriores y haciendo un anlisis comparativo de los datos
obtenidos llegamos a la conclusin de que CBD y CBN pueden potenciar en mayor o menor
medula algunos dc los efectos del THC; tal es el caso de la catalepsia, la hipotermia y la
analgesia. Si bien, paicce claro dtC es el Tetrahidrocannabinol el cannabinoide responsable de
la mayora ce las acciones. Por otro lado, la interaccin de estos compuestos puede ser
inctilerente o incluso ligeramente inhibitoria cii el resto de las propiedades estudiadas,

22

CONCLUSIONES

ara la ~o/icia, una aneiWZa para los tq/icanles, un lucro peligroso;..

CONCLtJSION ES
El letrLthidrocannabinol es el responsable no slo de los

efectos farmacolgicos,

sino tambin cte la letalidadt que poseen las muestras de Camo: amayor proporcin de THC,
menor 01.5~). Sin embargo, se puede considerar la resma de Gannabis como atxica en cuanto
a lCtLIl idtid, ttIdltIs las ~

5(1

tan elevadas que se obtienen con las muestras ensayadas.

2.- (oi el mtodo empleado y bajo nuestras condiciones experimentales, podemosdecir

dIUC el /ashs/ indtuce una insuficiencia cardaca de tipo aguda, que se manifiesta por

congestin geneialii.a<lci, especialmente a nivel pulmonar con edema y microhemorragias; en

ldgato se observan cambios iiespeciiieos iniciales, y posteriormente alteraciones
citoplasmticas de tipo txico similares a las observadas en la hepatopata alcohlica
humana.
3.- lanto la esina como otros derivados de Cannabis, as corno los principales
cannab noides, son capaces de pro<tucir hipotermia, analgesia, disminucin de la actividad
motora y eatelepsia.
4.- Con el estudlio farmacolgico realizado con el hashish, se demuestra que la mayora
de las pruebas de la Batera Farmacolgica para cannabinoides guardan una relacin
dosis/electo lineal. Por el contrario, encontramos gran variabilidad en la valoracin de la
analgesia; esta piucha farmacolgica puede sufrir grandes variaciones en funcin de mltiples
factores (va cte adninistracin, sexo <tel animal, estacin del ao, hora del da,...).
5.- Hemos confirmado la mayor potencia farmacolgica del Tetrahidrocannabinol
respecto al testo de cannabinoides estudiados, Cannabidiol y Cannabinol, siendo a su vez el
Cl3D ms activo dlue el ClIN, listos dos cannabinoides, administrados por va intraperitoneal
muestran act vidad hipotermizante, y una ligera disminucin motora y analgsica.
6. La administracin de la resma entera proporciona efectos mayores que los
proctucidlos tias la admiiistraeit~ de dosis equivalentes de THC; esto hace suponer que en la
resma dc (2an,wbis existen otros componentes, cannabinlicos o no, que contribuyen en los
efectos descritos.

23

CONCLUSIONES

7.- Podemos decir que tras la administracin conjunta de los tres cannabinoides
mayoritarios de La resma dc (.apicl;is, se produce una ligera potenciacin dcl efecto inicial
del letahidrocannabinol. Sin embargo, todo parece indicar que scan el resto de los
componentes tesinicos los principales responsables de la potenciacin de dichos efectos,

Qteda por elucidar cules son los compuestos implicados en la potenciacin

farmacolgica de los cannabinoides, estudio que ser objeto de futuras investigaciones.
Consideramos tambin due sera preciso profundizar en el estudio histolgico evolutivo, no
slo a iivel ultraestructural sino tambin a nivel histoquimico. El modelo experimental
empleado para el estudio de toxicidad aguda, dada su sencillez y el escaso tiempo necesario
para su realizacin, podra ser til para el mejor conocimiento de los cambios inespecificos
hepatoctarios que se indtucen frente a mltiples agentes agresores tanto txicos como
iiifece i 0505.

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