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Prctica de
microbiologa:
bacterias,
hongos y
protistas
Temas Selectos de Biologa
Equipo:
Jimnez Aguirre Laura Iliana
Ramrez Ramrez Ana Laura
Saldaa Prez Fabiola
Trujillo Olvera Claudia Ximena
Profesora: Martha
Corona Tinoco
Introduccin general
Grupo: 612-a
Tienen
funciones
fundamentales
para
el
bienestar de los habitantes del mundo, entre
ellas: ayudan a mantener el equilibrio de los
organismos vivos y las sustancias qumicas del
ambiente,
degradan
residuos
orgnicos,
incorporan nitrgeno del aire a los compuestos
orgnicos, reducen la contaminacin, etc.
Algunos de ellos son patgenos, aunque son la
minora. Tambin tienen usos comerciales, en
productos qumicos, industrias alimentarias, y en
la salud.
Objetivo:
Preparar adecuadamente los medios de
cultivo para bacterias.
Observar e identificar la morfologa de
bacterias que se desarrollan en alimentos
como frutas y verduras jugosas.
Distinguir su composicin de pared celular,
mediante
tincin
Gram
y
as
dar
clasificacin taxonmica.
Planteamiento del problema:
Hiptesis:
Si la pared de las bacterias obtenidas se tie
de morado, entonces es Gram positiva, si se
tie de rosa, entonces es Gram negativa.
Marco Terico: 2
Cclasificaciones:
Forma y agrupacin:
Se clasifican en 3 tipos: cocos, bacilos y
espirilos:
Cocos:
pueden
agruparse
en
pares
(diplococos),
en
cadenas
lineales
(estreptococos) y en racimos (estafilococos.)
Bacilos: por pares (diplobacilos), en cadenas
lineales (estreptocacilos).
Espirilos: cortos y largos.
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Pared Celular
Contribuye al mantenimiento de la forma de la
clula y est compuesta por pptidoglucano, que
es un disacrido repetitivo unido por polipptidos
que rodean y protegen a la clula. Su composicin
qumica permite establecer diferencias entre los
diferentes tipos de bacterias, un mtodo para ello
es la tincin diferencial de Gram, en la cual se
agregan diferentes reactivos que tie de cierto
color la pared celular dependiendo de la
estructura y composicin qumca de la bacteria,
de acuerdo a esto se dividen en Gran positivo y
Gram negativo.
Gram positiva: compuestas por varias capas de
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Taxonoma:
Esta clasificacin se basa en las caractersticas
de la pared celular, se dividen:
Fermicutes: bacterias con pared celular
gruesa, tincin morada (gram +).
Gracilicutes: pared celular delgada, tincin
rosa (gram -)
Mendocicutes: vara el grosor de la pared
celular, tincin rosa y morado.
Tenericutes: no tienen pared celular, por lo que
no responden a la tincin gram.
Diseo Experimental:
Material:
Uso de bata en todo el procedimiento del diseo
experimental.
Cabello recogido.
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Para medio
de cultivo:
Agar
Mac
Conkey
Agar
Bacteriolgico
Pesa
de
monoplano
Vidrio de reloj
Guantes
Agua destilada
Algodn
Matraz
Erlenmeyer
Mechero
de
Bunsen
Hisopo
Tubos
de
ensayo
Marcador
indeleble
Encendedor
Siembra:
Medios de
cultivo
natural
(frutas /y
verduras
jugosas)
Caja
de
petri
Tubos
de
ensayo
Asa
Algodn
Lmpara de
alcohol
Tincin
Gram:
Cristal
violeta
Azul
de
metilo
Portaobjetos
Agua
Alcohol
Safranina
Lugol
Guantes
Cubre boca
Microscopio
ptico
Procedimientos:
Para medio de cultivo:
Para ello se requerir ocupar: agar de sal
manitol.
Recordar que el rea de trabajo debe estar
previamente limpio por lo cual limpiamos antes
el lugar con cloro.
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Para tincin:
REALIZACIN DEL FROTIS
1. Colocar una pequea gota de agua en el centro de un
portaobjetos limpio.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones
aspticas, una pequea cantidad del cultivo bacteriano en
medio slido y transferirlo a la gota de agua. Remover la
mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensin
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Anlisis de resultados:
MEDIO
DE
CULTIVO:
Agar Mc
Conkey
SIEMBRA
S: Estra
simple y
en
cuadrant
e
cruzada.
Paso 5:
Paso 4:
Azul de
metilo (1
min)
Eliminar
exceso
Paso 6:
Lugol
(1min)
Paso
13:
Result
ados
TINCI
N
GRAM:
Paso 3:
Cristal
violeta
(1min).
Paso 8:
Alcohol (510 gotas)
Paso 7:
Eliminar
exceso
Paso
Paso
Observ
ar en
micros
copio
Secar
al aire
Paso 11:
Eliminar
exceso
Morfologa
colonial
13:
12: en placa de agar.
Paso 1: Poner
en portaobjetos
un poco de
cultivo
bacteriano.
Paso 2:
Fijar
muestra
(Frotis).
Paso 9:
Eliminar
exceso
Paso
10:
Safrani
naPgina
Pera
Forma: fusiforme
Bordes: ondulado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: amarillo
Salsa:
Crecimiento superficial: floculento
Opacidad: ligera
Sedimento: compacto
Cantidad de sedimento: abundante
Pltano:
Forma: puntiforme
Bordes: crenado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: naranja-cafe
Aguacate:
Forma: fusiforme
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Bordes: lobulado
Elevacin: plana
Textura: butirosa
Color: blanco
Exudado:
Forma: puntiforme
Bordes: ondulado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: blanco
Conclusin:
Podemos decir que la hiptesis planteada fue correcta,
ya que el resultado fue que en la tincin sali color
morado en las muestras realizadas lo cual nos dice
que es positiva y al dar positivo, la bacteria es
fermicute pues su paredes celulares eran gruesas.
Si el resultado fuera negativo saldra de color rosa y
sera una gracilicutes lo cual no fue el caso.
As mismo cada una de las muestras se pudo clasificar
morfolgicamente como se vio anteriormente.
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Bibliografa:
Microbiologa clnica:
http://danival.org/600%20microbio/6200microclin/bhim/bhim_
2-3.html
http://es.scribd.com/doc/30061600/concepto-y-definicionde-microbiologia
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC
%20CONKEY.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_bacteriologico.pdf
http://www.joseacortes.com/practicas/frotisbact.htm
.
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PRCTICA
DE
HONGOS
OBJETIVO:
Crear cultivos exitosos de hongos a partir de
frutas
y
verduras
jugosas
en
descomposicin.
Observar e identificar la morfologa de los
hongos que se desarrollan en los alimentos
utilizados.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:
Crear
cultivos
exitosos
de
hongos
identificarlos
en
alimentos
jugosos
descomposicin por medio del microscopio.
e
en
HIPOTESIS:
Si se reproducen hongos en las preparaciones
realizadas, entonces podremos observar e
identificar los hongos resultantes.
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MARCO TEORICO:
La ciencia que se dedica a su estudio es la micologa.
Son eucariontes, es decir, que tienen un ncleo
delimitado por una membrana nuclear. Pueden ser
unicelulares o pluricelulares, estos ltimos son
grandes como las setas, son semejantes a las plantas
pero sin la posibilidad de hacer fotosntesis. Los
hongos
verdaderos
tienen
paredes
celulares
compuestas de glucano y sobretodo, de quitina.
Forman una masa visible llamada micelio que est
compuesta por filamentos largos (hifas) que se
ramifican e entrelazan. Su reproduccin puede ser
sexual (esporas sexuales) o
asexual (por
fragmentacin de sus hifas) y en ambos casos hay
formacin de esporas (pueden ser sexuales o
asexuales), la cual despus de separarse de la clula
que le dio origen y germina para formar un hongo
filamentoso nuevo (en caso de tratarse de un hongo
filamentoso), se forman a partir de hifas areas de
distintas formas dependiendo de la especie, por ello,
se pueden diferenciar dependiendo del tipo de espora.
Las esporas tambin les sirven para proteger al
hongo cuando se encuentra en condiciones poco
favorables para su existencia, pueden permanecer en
forma de espora por aos, aunque no soportan
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Basidiomicota
Hongos filamentosos
con hifas tabicadas y
algunas
levaduras.
Con esporangios tipo
asca. Asexualmente se
reproducen
por
gemacin,
fisin,
fragmentacin
y
desarrollo de conidios
que producen esporas.
Sexualmente
por
conjugacin,
gametangia
y
gametangogamia.
Poseen
hifas
tabicadas.
Las
basidioesporas
se
forman
sobre
un
basidio que son sus
rganos frtiles donde
llevan a cabo su
reproduccin sexual y
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Zygomycota
Oomycota
Deuteromycot
a
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Acrasiomycota
Mohos mucilaginosos
celulares, suelen darse
en el estircol, suelo,
restos vegetales, etc.
No tienen ncleo y
suelen
carecen
de
flagelos.
DISEO EXPERIMENTAL:
PROCEDIMIENTO
Hongos
El equipo se prepara, siguiendo
las indicaciones de utilizar: bata,
guantes, cubre boca, y cabello
recogido.
Se pasan por alcoholes de 75,
50,
30 y para
10 para
queexcesos
se
Se lava
quitar
rehidrate.
Se esteriliza la zona de
trabajo antes de iniciar con
la prctica.
Se coloca una muestra en un
porta objetos, y se flamea la
muestra,
se truena
el
Ya
que sesiseco
la muestra,
Pgina
portaobjetos
utilizaxilol
unoa
se
procede a se
ponerle
nuevo.
la
muestra (1)
Fruta en
descomposicin
Exudado
farngeo.
Se encienden los
mecheros, dejando entre
s un espacio de aprox.
40 cm
Se le pone hematoxilina y
eosina (1) (30 s)
respectivamente
Se en
lava
Alcoholes
orden
creciente
Se seca
Se cubre con el
cubreobjetos y
se mira en el
microscopio
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ANALISIS DE RESULTADOS:
Medio de cultivo tortilla, naranja y pan
Eliminar
exceso
Sin siembra.
Poner
directamente del
cultivo.
Calentar hasta
emisin de
vapores
LAVADO
Para empezar la
muestra, se pone
a calentar el asa de
siembra para
desinfectarla
Agregar verde
malaquita (esperar
5minutos)
Tincin:
Agregar alcohol
Ziehl-neelsen
Frotis
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Eliminar
exceso
Lavado
Agregar azul de
metileno
(esperar 1
Eliminar exceso
minuto)
Lavado
Finalmente observar
al microscopio
Secar
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CONCLUSIONES:
A pesar de que en la muestras de fruta, se
utilizaron diferentes de las mismas, se
encontraron hongos con diferentes formas,
bordes y elevaciones por lo que se podra decir
que dependiendo del lugar donde se encuentra
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Objetivos:
Realizar
adecuadamente
la
tincin
hematoxilina-eosina para la fijacin del
tejido biolgico, a fin de que sea posible su
estudio por medio del microscopio.
PLATEAMIENTO DEL PROBLEMA:
Mantener la composicin estructural y
qumica lo mas inalterada posible, de tal
forma que sus componentes celulares
mantengan las mismas caractersticas que
cuando el tejido estaba en su medio
habitual.
Hiptesis:
Si se pueden observar protozoarios en el
microscopio, entonces el agua utilizada
tiene las condiciones necesarias para la vida
de los mismos.
Marco terico:
Las clulas procariotas son las clulas ms extendidas y
abundantes de la biosfera y se encuentran en nuestro medio
en grandes cantidades activas o en forma de esporas.
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Hematoxilina
Se utiliza en histologa para teir los componentes aninicos
(cidos) de los tejidos, a los que da una coloracin violeta.
Tie intensamente los ncleos de las clulas, dado que estos
contienen cidos nucleicos ricos en radicales cidos.
Eosina
Se trata de una solucin de eosina.
Colorante cido. Utilizado como colorante de contraste de la
hematoxilina en la tincin Hematoxilina-Eosina.
Aplicaciones:
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Espora
s
Bacteri
as
METOD
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DISEO EXPERIMENTAL:
Materiales
Microscopio
Mechero de alcohol
Portaobjetos
Cubreobjetos
Asa microbiolgica o pipeta Pasteur.
Frasco lavador
Solucin de azul de metileno
Solucin de fucsina
Pinzas para portaobjetos
Agua de lago
Procedimientos:
Preparacin del material:
Limpiar bien el portaobjetos
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RESULTADOS:
Esterilizar el
rea de trabajo
Medio de
cultivo
Siembra
USAR BATA,
GUANTES Y
CUBREBOCAS
Deshidratacin
gradual 10, 30, 50,
70, 96.
Xilol
Producto
Lavado
Hematoxilina
Hematoxilina
Lavado
Fijar muestra
Eosina
Xilol
Hidratacin
gradual 96, 70,
50, 30, 10.10, 30,
50, 70, 96.
Lavado
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Imgenes
obtenidas de las
muestras
Conclusin:
Nuestros productos fueron diversos tipos de
protozoos
o
protozoarios;
organismos
hetertrofos que viven en ambientes hmedos
o directamente en medios acuticos, ya sean
aguas saladas o aguas dulces, por lo tanto,
podemos decir que nuestra hiptesis fue
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Bibliografa:
http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/5-general.php
http://medicina.unmsm.edu.pe/publicaiones_online/LIBRO
%20HISTOLOGIA/Cap%201_T%C3%89CNICAS%20MICROSC
%C3%93PICAS%20FINAL.pdf
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