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  • ADT-DO-334-004 Documento de Histotecnia Procesamiento, Control de Calidad, Manejo de Equipos y Temperatura. (Histotecnologia. Anexo1)

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    T DOCUMENTO DE HISTOTECNIA: CALIDAD, MANEJO DE EQUIPOS | ADT-D0-334-004 B&B | PROCESAMIENTO, CONTROL DE Cédigo: Hospital {HISTOTECNOLOGIA- ANEXO 4.) | Simén Bolvar ‘APOYODIAGNOSTICOY | | Y TEMPERATURA. TERAPEUTICO Version: 0 oH SERVICIO DE PATOLOGIA TABLA DE CONTENIDO OBJETIVO RESPONSABLES CONTENIDO |. COLORACIONES: COLORACION BASICA ( RUTINA) HEMATOXILINA-EOSINA, PAPANICOLAU TECNICA DE PAS (periodic acid schiff) PAS CON DIASTASA ( SALIVA ) ZIEHL-NEELSEN (ZN) TRICROMICO RETICULO GOMORY GOMORY MODIFICADO ELASTICA MUCICARMIN ROJO CONGO. GIEMSA HIERRO OBSERVACIONES MANEJO DE EQUIPOS CONTROL DE TEMPERATURA MANEJO DE DERRAMES CONTROL DE CALIDAD DE LAS LAMINAS HISTOLOGICAS caudasce ete session NESE, El ee 0) Ga Mame by APROBO: oO SQ Goxsk I se 235 de Patolog aided gerengia Cientifica_y F FECHA’ FECHA: ECHA: 24 de Febrero de 2014 __| 24 de Febrero de mul de Febrero de 2014 ] T DOCUMENTO DE HISTOTECNIA: B PROCESAMIENTO, CONTROL DE | Codigo: CALIDAD, MANEJO DE EQUIPOS | ADT-DO-334-004 Y TEMPERATURA. ‘again Hospital Simén Bolivar HISTOTECNOLOGIA- ANEXO ‘APOYO DIAGNOSTICO Y fags TERAPEUTICO __ Version: 0 SERVICIO DE PATOLOGIA OBJETIVO Elaborar un documento técnico anexo al procedimiento de Histotecnia que contenga la descripcién de la coloracién de bdsica (hematoxilina-eosina), PAP, las coloraciones especiales y sus controles; manejo de los equipos y control de temperatura RESPONSABLE Patélogos, Citohistotecndloga(o), lider de servicio, auxiliares de patologia. 4, COLORACIONES COLORACION BASICA ( RUTINA) HEMATOXILINA-EOSINA EI método supone la aplicacion de la tincién de hematoxilina, que por ser catiénica o basica, tie estructuras acidas (baséfilas) en tonos azul y purpura como por ejemplo os nucleos celulares; y el uso de eosina que tifie componentes basicos (acidofilas) en tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aniénica o dcida, como el citoplasma. PROCEDIMIENTO 1) Desparafinar las idminas: 20 min en el horno 3 xiloles por 5 min cada uno 3 alcoholes (etllico) por 5 min cada uno Lavar con agua 2) Hematoxilina por 4 min. Lavar con agua 3) Alcohol acido al 1% ( 1-2 pases ) Preparacién: 1 cle de acido clorhidrico y 100 de agua Lavar con agua 4) Agua amoniacal al 1% ( 1-2 pases ) Preparacién: 1 c/e de amoniaco y 100 cic de agua Lavar con agua 5) Eosina por 10-15 segundos Preparacién: 1 gr de eosina Y, 50 cc de alcohol etilico y 50 cc de agua (para preparar 100 cc de eosina) 6) Alcohol isopropanol ( pases ) Pee DOCUMENTO DE HISTOTECNI PROCESAMIENTO, CONTROL DE | Cécigo: w CALIDAD, MANEJO DE EQUIPOS | ADT-DO-324-004 Y TEMPERATURA. eae Hospital HISTOTECNOLOGIA- ANEXO 1.) - a Simén Bolivar APOYO DIAGNOSTICO Y teen ean TERAPEUTICO Version: 0 SERVICIO DE PATOLOGIA 7) Alcohol isopropanol ( pases ) 8) Alcohol isopropanol ( pases ) 9) Xilol (pases) 10)Xiiol (pases) 11)Xiiol (pases) Se ajustara los tiempos de acuerdo a la maduracién de la coloracion COLORACION DE PAPANICOLAU La tincién de Papanicolaou es un método de tincién poli-crémico que consta de una tincién nuclear y un contraste citoplasmatico, 1. Fijar en Alcohol 96° 2. Agua corriente. 3. Hematoxilina - 40 Seg 4, Lavar con agua corriente. 5. Alcohol 96° 10 pases 6, OGG — 1minuto 30 segundos 7, Alcohol 96° 10 pases. 8. EA 50-40 Seg 9. Alcohol 96° 10 pases. 10. Alcohol isopropilico 10 pases. 11, Aleohol isopropilico 10 pases. 12. Xilol 10 pases 13. Montar. Resultados: la membrana nuclear y fa cromatina se tifien de color azul oscuro, los citoplasmas y el fondo tien de naranja, gris-verdoso. TECNICA DE PAS ( Periodic Acid Schiff) Descubierta por Hotchkinss, Me Manus y Lillie (1948). Consiste en oxidar los tejidos mediante el acido peryodico para incrementar el nimero de grupos carbonilos presentes en ellos, para ser demostrados posteriormente mediante el reactivo de schiff. Identifica: Glucégeno, membrana basal, hongos. SOLUCIONES ata DOCUMENTO DE HISTOTECNIA: & PROCESAMIENTO, CONTROL DE | Cédigo: ¥ CALIDAD, MANEJO DE EQUIPOS | ADT-DO-334-004 Y TEMPERATURA. | ‘acatanon Hospital [HISTOTECNOLOGIA- ANEXO 1.) — ‘Simén Bolivar ‘APOYO DIAGNOSTICO Y ee, | TERAPEUTICO | Version: 0 i" SERVICIO DE PATOLOGIA a aif - ACIDO PERYODICOAL 0.5 % : ‘Acido peryodico 0.5 gr Agua destilada 100 ml - ACIDO HIDROCLORHIDRICO NORMAL - HEMATOXILINA DE HARRIS SOLUCION DE COLEMAN SCHIFF : Disolver 1 gr de fush ina basica (pararosanilina) en 200 ml de agua destilada caliente o tibia, enfriar; agregar 2 gr de meta bisulfito de potasio y 2 ml de acido clothidrico normal, Guardar 24 horas en sitio oscuro, luego agregar 0,5 gr de carbén activado y revolver por un minuto, filtrar en un recipiente seco y limpio hasta que la solucién sea incolora, Si sale rosada agregar més carbén activado y volver a filtrar y guardar en la nevera - PAS CON DIASTASA ( SALIVA ) : 15 a 20 min antes para disolver moco PROCEDIMIENTO 1) Desparafinar e hidratar 2) Oxidar en acido peryodico por 5 min (separa los puentes de hidrato de carbono). 3) Lavar 4) Colocar en schiff por 30 min 5) Lavar con agua 8) Contrastar con hematoxilina por 1 min 7) Lavar 8) Diferenciar con agua amoniacal 9) Lavar 10)Deshidratar, actarar, montar RESULTADOS: ROJO: glucégeno, membrana basal, hongos AZUL: niicleo ZIEHL-NEELSEN (ZN) La tincion de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tincién diferencial répida, usada para la identificacién de microorganismos pat6genos, como M. tuberculosis. Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un bacteriélogo, y Friedrich Neelsen, un pat6logo. feet ay eeee See DOCUMENTO DE HISTOTECNIA: PROCESAMIENTO, CONTROL DE | Cédigo: CALIDAD, MANEJO DE EQUIPOS | ADT-00-334-004 Y TEMPERATURA. cwotien | Hospital (HISTOTECNOLOGIA- ANEXO 4.) 2 Se | Simén Bolivar APOYO DIAGNOSTICO Y See TERAPEUTICO Versién: 0 SERVICIO DE PATOLOGIA ‘ PROCEDIMIENTO 1) Desparafinar: horno por 20 min 3 Xiloles por 5 min cada uno. 3 Alcoholes por 5 min cada uno. 2) Lavar 3) Aplicar fucsina-fenicada (solucién con fenol y mayor concentracién de fucsina). {se coloca calor hasta la emisin de vapores o se deja por una hora ) Lavar con agua 4) Decolorar con alcohol acido. Lavar con agua 5) Contrastar con verde brillante 6) Aclarar 7) Montar Resultado: bacterias acido alcohol resistentes: color rojo intenso o fuscia. TRICROMICO Es una técnica de coloracién especial que permite visualizar claramente las fibras de colageno tipo | que forman fibras gruesas 0 haces, disefiados para dar resistencia; también evidencia, aunque en menor intensidad, las fibras reticulares 1) Desparafinar: hoo por 20 min 3 Xiloles por § min cada uno. 3 Aleoholes por 5 min cada uno. 2) Solucién fjadora de Bouin por 1 hora a 60 grados 3) Enfriar y lavar hasta que desaparezca el color amarillo. 4) Hematoxilina por 4 min. 5) Lavar 6) Biebris Escarlata por 3 min 7) Lavar 8) Solucion de cides por 10 minutos Preparacién: acido fosfotungstico § gr y acide fosfomolibdico § gr en 200 cc de agua. 9) Lavar 10)Diferenciar con solucién de acido acético glacial al 1% por 3 minutos 11) Anilina azul por 2 min, 12)Lavar 13)Aclarar 14)Montar Bécine

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