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capitulo XI Regeneracin

Captulo XI

Regeneracin
Jess Chimal-Monroy, Donovan Correa Gallegos
& Claudio Ivn Galvn Hernndez.
RESUMEN
La regeneracin es un fenmeno biolgico que consiste en la restauracin o
reemplazo de estructuras completas u rganos cuando stos han sido daados
o amputados. El ajolote es un animal que tiene la extraordinaria capacidad
de regenerar sus extremidades, su cola y parte de su corazn despus de una
amputacin. De igual manera, es sorprendente la capacidad regenerativa del
corazn y de la aleta del pez cebra. Uno de los animales ms sobresalientes por
su capacidad regenerativa, es la planaria, un gusano plano que es capaz de
regenerar un organismo completo prcticamente a partir de cualquier fragmento que haya sido cortado. En mamferos, la capacidad regenerativa vara;
se sabe por un lado, que el hgado tiene una alta capacidad regenerativa y por
otro, que en las extremidades slo la punta de los dedos, en edades perinatales, es capaz de regenerar. El por qu algunos animales tienen gran capacidad
regenerativa y otros no, es una pregunta que ha sido investigada a fondo por
muchos aos y aunque actualmente an no se tiene respuesta, este conocimiento ha sentado las bases de la medicina regenerativa para su aplicacin en
tratamientos de enfermedades crnico-degenerativas o bien de amputaciones
de extremidades en humanos.

INTRODUCCIN
Qu es la regeneracin?
El trmino regeneracin se ha usado ampliamente para explicar los fenmenos
de reemplazo homeosttico de los tejidos, por ejemplo: la piel, el linaje sanguneo y el epitelio intestinal. Muchos organismos, a lo largo de su vida, pierden
constantemente partes de su cuerpo y tienen la capacidad de reemplazarlos.
Por ejemplo, en la planaria y en los gusanos anlidos existe una alta capacidad
para regenerar todo su cuerpo. En vertebrados, algunos anfibios tienen la capacidad de reemplazar extremidades y colas, mientras que especies como el pez
cebra regeneran el corazn. Los venados, recambian peridicamente sus astas.
Los mamferos, incluido el humano, son capaces de reparar el tejido muscular
esqueltico daado o el tejido heptico; en las hembras, tras su perodo menstrual se lleva a cabo la renovacin del endometrio.

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CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

Mitologa de la regeneracin o de la inmortalidad


En la mitologa griega resaltan dos historias que reflejan la capacidad de regenerar rganos, lo que reflejaba la inmortalidad. En una de estas historias, Hrcules hijo de Zeus, luch contra el monstruo Hidra como parte de uno de sus 12
trabajos encomendados para purificarse. Este monstruo mitolgico de origen
acutico, tena forma de serpiente y muchas cabezas. En la leyenda, Hrcules
al intentar matar a la bestia cortaba cada una de las cabezas, sin embargo,
cada vez que lo haca, las cabezas regeneraban y se multiplicaban. Para evitar
el crecimiento y multiplicacin de las cabezas, Hrcules cauteriz las heridas de
los cuellos recin cortados, evitando con ello la regeneracin, al tiempo que
lograba vencer al monstruo (1). En una segunda historia, Prometeo intent burlar
a los dioses entregndole el fuego a los mortales, motivo por el cual Zeus orden
fuera encadenado. Bajo este castigo, en el da un guila devoraba su hgado,
y ste se regeneraba durante la noche, ciclo que se repeta todos los das (2, 3).

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En la mitologa mexica, para poner en movimiento al Quinto Sol y crear


a la humanidad, era necesario sacrificar a los dioses. Uno de ellos, Xlotl,
hermano mellizo de Quetzalcatl, rehuyendo a su destino se escondi en
la tierra transformndose inicialmente en maz, luego en maguey y finalmente en ajolote, cuyo nombre nhuatl es axolotl (Figura 1). Tal vez los
mexicas, al conocer la capacidad regenerativa del ajolote, lo asociaran
al Dios Xlotl y con ello a la inmortalidad (4, 5).

Figura 1. El ajolote (Ambystoma mexicanum). Variantes criadas en cautiverio y usadas en la investigacin de la biologa regenerativa.

capitulo XI Regeneracin

Historia de la regeneracin
El primero en realizar estudios cientficos sobre regeneracin fue Ren-Antoine
Ramur en 1712. Ramur estudi la capacidad de los cangrejos de ro para regenerar sus extremidades. Existe registro, en la Academia de Ciencias de Pars,
de los trabajos de Melchisedech Thevenot en 1686 y de Claude Perrault en 1688
sobre la regeneracin de la cola de la lagartija y de discusiones anecdticas,
en 1690, sobre la regeneracin de los dedos en humanos.
A partir de 1744, el estudio de la regeneracin adquiri notoriedad con los experimentos de Abraham Trembley, quien tratando de descifrar si las hidras eran
animales o plantas, realiz los primeros experimentos en zoologa. Para ello decidi cortarlas (6). Si era planta, la hidra sera capaz de regenerar, si era animal no
regenerara. Aunque en un principio, al observar un alto potencial de regeneracin, concluy que la hidra era una planta, observaciones ms cuidadosas le
llevaron a afirmar que era un animal. Tambin demostr, que tras hacer cortes
era posible generar organismos completos de sus pedazos y que al hacer cortes
parciales de un organismo regenerante, podra generar una hidra con muchas
cabezas (como el mitolgico monstruo griego). Los aportes de Trembley incluyen tambin las descripciones sobre la polaridad de la regeneracin, el proceso
de cerrado de herida, la cantidad mnima de tejido necesaria para regenerar
y la capacidad de reproduccin asexual de ciertos animales. En 1744, Charles
Bonnet, influenciado por los descubrimientos de Ramur y Trembley, describi la
capacidad regenerativa de las lombrices de tierra. En 1768, Lazzaro Spallanzani
estudi la capacidad de regeneracin en gusanos acuticos, babosas, caracoles, salamandras, renacuajos, ranas y sapos juveniles. Los experimentos de
Spallanzani en vertebrados tuvieron un mayor impacto, ya que permitan especular sobre la posible regeneracin en humanos (7).
En 1823, John Todd analiz la participacin de los nervios en la regeneracin
de la extremidad y de la cola de las salamandras (8). Sin embargo, sus descubrimientos no adquirieron importancia sino hasta el siglo XX. A finales del siglo XIX y
principios del XX, debido a la gran cantidad de informacin difusa sobre regeneracin, Thomas Morgan se dio a la tarea de definir la regeneracin como
el reemplazo de partes prdidas de un organismo, incluyendo el desarrollo de
todo un organismo a partir de una de sus partes. Para ello, acu los conceptos de morfalaxis y epimorfosis. Por un lado, Morgan (9) defini la morfalaxis
como la recuperacin de parte o de todo el organismo a travs de la remodelacin de los remanentes del propio organismo; por el otro, defini la epimorfosis
como la recuperacin de parte o de todo el organismo a travs de la formacin
de una estructura nueva que inclua un microambiente en la zona de dao; a
esta estructura se le denominara posteriormente blastema (10).
Durante la primera mitad del siglo XX, se refinaron las hiptesis sobre los mecanismos celulares de la capacidad regenerativa en diferentes modelos animales.

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Sin embargo, fue hasta la segunda mitad del mismo siglo que dichas hiptesis se
replantearon a la luz de las nuevas tcnicas de la Biologa molecular. Sin embargo, las preguntas sobre la regeneracin son las mismas desde los planteamientos de Ramur en 1712.

TABLA 1. LNEA DEL TIEMPO


Ao
1686

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Investigacin sobre regeneracin

1712

Thevenot y Perrault demostraron por primera vez la regeneracin de la cola de la


lagartija.
Ramur presenta evidencia emprica sobre la regeneracin de los cangrejos de ro.

1744

Trembley demuestra la regeneracin en la hidra.

1750

Bonnet confirma la regeneracin en gusanos.

1768

Spallanzani estudia la capacidad de regeneracin de gusanos de tierra, urodelos y


anuros. Sin saberlo fue el primero en describir la formacin de un blastema.

1823

Todd descubre la funcin del sistema nervioso en la regeneracin de la extremidad


de la salamandra.
Goodsir describe que en cada extremidad de los crustceos exista un cuerpo
parecido a una glndula que proporcionaba los precursores de las futuras patas.
Ernst Haeckel y Richard Greeff realizan experimentos de regeneracin en organismos
unicelulares.
Paul Frasse define las caractersticas celulares del proceso regenerativo. Trabaj
con la epidermis, las glndulas y rganos subepidrmicos, el sistema esqueltico en
vertebrados, el sistema nervioso, el muscular y el vascular.
Mortiz Nussbaum y Dietrich Barfurth demostraron en protozoarios que tanto el ncleo
como el protoplasma eran necesarios para la regeneracin.
Gustav Wolff realiz los experimentos de la regeneracin del lente en el ojo de la
salamandra. Mostr que ste regenera a partir del iris (no de la superficie del
ectodermo que es de donde se desarrolla).
Morgan define la Regeneracin e introduce los trminos epimorfosis y morfalaxis.

1844
1860
1885

1891
1894

1901
1911
1928
1930

1933
1939
1959
1961

Fritsch demuestra que la regeneracin se debe a la formacin de clulas del blastema


indiferenciadas.
Godlewski proporciona evidencia sobre el origen epidrmico de las clulas del
blastema.
Hellmich, siguiendo los trabajos de Collucci (1884), propuso que el origen celular del
blastema era sanguneo.
Butler propuso que el blastema se formaba por la capacidad del mesodermo del
mun a desdiferenciarse.
Weiss propuso que el origen celular del blastema era la existencia de reservas celulares,
lo que implicaba la existencia de clulas indiferenciadas de tejido conjuntivo.
Georges Math realiz el primer trasplante de mdula sea.
Hay y Fischman confirman la funcin de la desdiferenciacin en la formacin del
blastema mostrando la transicin de clulas msculares a clulas mononucleares.

capitulo XI Regeneracin

DEFINIENDO EL FENMENO
La regeneracin es un fenmeno biolgico que consiste en la restauracin o
reemplazo de rganos o estructuras complejas, como la extremidad (Figura 2) e
inclusive de organismos completos como la planaria, la hidra y la estrella de mar,
a partir de fragmentos cuando los organismos han sido daados o amputados.
Morgan (9) propuso dos estrategias distintas de regeneracin que enfatizaban los
dos modelos ms estudiados hasta entonces. Por una parte, la amputacin de la
extremidad de los anfibios urodelos (salamandras y tritones), lleva a la creacin
de una estructura fcilmente vista llamada blastema que sugiri se formaba
por la proliferacin de las clulas; a esta estrategia la llam epimorfosis. Por la
otra, para l durante la regeneracin de la planaria, no era evidente la formacin
de un blastema, pero s la plasticidad de todo el cuerpo para recuperar su morfologa. Es comn que cuando se corta en fragmentos pequeos a una planaria, se
forman planarias de dimensiones parecidas a los fragmentos y no al tamao original. Morgan supuso que en la regeneracin de la planaria, la modificacin global
del organismo para recuperar su morfologa era ms importante que la proliferacin celular; a este proceso lo llam morfalaxis. En la actualidad el uso de esta
clasificacin se ha conservado, no obstante diversos autores (9, 11-14) apuntan
que estos procesos no son excluyentes e incluso son complementarios durante la
regeneracin. Por ejemplo: 1) si se afecta de manera importante la proliferacin
como resultado de la denervacin, el blastema de las salamandras forma una
extremidad ms pequea por reorganizacin de las clulas adyacentes como
ocurre en la morfalaxis (12, 15); 2) en la planaria se forma un blastema en el sitio
de corte como consecuencia de la proliferacin de los neoblastos (16); y 3) en
la hidra dependiendo del nivel de amputacin o la estructura a regenerar se ha
descrito que se opta por alguna de estas dos estrategias, o por las dos (12, 17).

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Figura 2. Regeneracin de la extremidad del ajolote. Seguimiento fotogrfico de la regeneracin


de la extremidad del ajolote (A. mexicanum), a los 0, 10, 20, 30 y 60 das (d) post aumputacin.

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En trminos generales en este captulo consideramos que la regeneracin
puede ocurrir a travs de 4 mecanismos (18), aunque estos pueden ocurrir al
mismo tiempo en distintas especies:
La regeneracin mediada por clulas troncales. Uno de los ejemplos mejor
estudiados es el que ocurre en la mdula sea, que es la encargada del reemplazo incesante de las clulas sanguneas (Captulo IV). Este mecanismo, tambin es observado durante el reemplazo del epitelio intestinal o de la epidermis
y la formacin de los tejidos ocurre debido a que las clulas troncales residentes
del tejido reciben seales que les indican que deben iniciar el programa de diferenciacin celular (Captulo VII).
Epimorfosis. El trmino acuado por Morgan se ha extendido y actualmente
se refiere a la formacin de un tejido adulto a partir de una estructura compuesta de clulas indiferenciadas que da origen a una nueva estructura. Esta
estructura es llamada blastema y se ha especulado que este se forma a partir
de la desdiferenciacin de las clulas de los tejidos residentes y/o bien a partir
de clulas indiferenciadas y/o clulas troncales. Otra de las caractersticas de
este proceso es la proliferacin celular. Existen dos ejemplos muy claros de este
tipo de regeneracin; la amputacin de las extremidades de ajolotes y la regeneracin de las planarias (Figura 3a y 3b).
Morfalaxis. Este proceso, se caracteriza porque la regeneracin ocurre a partir
de una reorganizacin de los tejidos existentes, donde la proliferacin celular es

capitulo XI Regeneracin

muy reducida o nula. El mejor ejemplo de este tipo de regeneracin es la que lleva a cabo la hidra (Figura 3c). Este organismo es capaz de regenerarse por completo a partir de un fragmento de tejido y el organismo formado es exactamente
igual al organismo de origen, pero reducido en tamao. Sin embargo, despus
de la regeneracin el organismo crece hasta alcanzar su tamao original.
Regeneracin compensatoria. En este proceso ocurre la proliferacin de las
clulas diferenciadas para restaurar el tamao original del rgano daado. Hasta ahora no se ha observado que las clulas que proliferan se originen de clulas troncales o de un blastema. El mejor ejemplo de este tipo de regeneracin
se lleva a cabo en el hgado.
En cualquiera de los casos, es importante resaltar que las clulas a partir de
las cuales ocurrir la regeneracin son capaces de identificar su posicin y de
restablecer el patrn espacial de los tejidos formados, adems resulta interesante que las clulas indiferenciadas no slo se rediferencian en los tejidos, sino
que adems adquieren la forma adecuada que permite la funcionalidad de la
estructura regenerada, este proceso se llama morfognesis (19).

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Figura 3. Epimorfosis y morfalaxis. La regeneracin de la extremidad del ajolote (a) y de la planaria (b) estn mediadas por la proliferacin celular y formacin de un blastema en el sitio de corte,
por lo que son considerados procesos epimrficos. En el caso del ajolote, las clulas provienen de
los tejidos adyacentes, mientras que los neoblastos son la principal fuente celular en la planaria.
Por otro lado, en las hidras (c), la amputacin del pie y/o la decapitacin no forman blastemas y
no hay proliferacin en los sitios de corte, las clulas en los sitios de corte forman las estructuras a
regenerar por procesos morfalxicos. Pero en el caso de que el corte fuese a la mitad del cuerpo,
donde proliferan activamente las clulas troncales intersticiales, el proceso se vuelve epimrfico.

CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

La regeneracin mediada por clulas troncales.


En este proceso es importante la presencia de un nicho de clulas troncales,
uno de los ms conocidos, el hematopoytico, se explica en el captulo VII. El
epitelio intestinal, es otro de los ejemplos mejor conocidos en los que el recambio se lleva a cabo a partir de la activacin de las clulas troncales que residen
en las criptas. Las clulas troncales no entran inmediatamente al programa de
diferenciacin, antes llevan a cabo una amplificacin transitoria que da origen
a las clulas precursoras. Mientras ocurre la proliferacin, las clulas de la base
de las criptas migran hacia su parte superior en donde inicia su diferenciacin
(20). La sealizacin a travs de la va WNT, tiene una funcin muy importante
en este proceso de diferenciacin. Si la seal se reduce o elimina, el compartimento de clulas troncales se pierde y, por el contrario, al sobre activar la sealizacin WNT la poblacin de clulas troncales se incrementa; este proceso est
asociado a la generacin de tumores (21-23). Por lo tanto, para mantener la
homeostasis del epitelio intestinal, existen seales que contrarrestan los efectos
de la sealizacin WNT y promueven la diferenciacin del epitelio intestinal.

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La sealizacin WNT es una ruta bastante conservada en la evolucin, se


caracteriza por la presencia de ligandos WNT que se unen a receptores tipo
Frizzled, al interactuar activan la protena -catenina promoviendo su liberacin
de un complejo que la lleva a degradacin (23, 24). La -catenina activada
regula positivamente la transcripcin de una gran variedad de genes.

Regeneracin por epimorfosis


Regeneracin de planarias.
La planarias son gusanos planos, no segmentados del filum de los Platyhelmintos,
con una porcin ceflica identificable con dos manchas oculares en la parte dorsal, una porcin central con una abertura ventral y una faringe dilatable y la cola
en la porcin posterior. Tienen gran capacidad de regenerar segmentos o la totalidad de su cuerpo, capacidad que es usada como una estrategia de reproduccin asexual al auto-segmentarse (25). Durante la regeneracin, las planarias
forman una estructura especializada o blastema en el sitio de dao. Este blastema
surge a consecuencia de la proliferacin de una poblacin de clulas troncales
pluripotentes llamadas neoblastos (16, 26). A partir de esta estructura, todos los
tejidos que se perdieron por la amputacin inician su formacin (27) (Figura 3b).
Uno de los aspectos ms sobresalientes del estudio de la regeneracin de las
planarias es que los fragmentos que son capaces de regenerar lo hacen estableciendo los distintos ejes de simetra, de manera que el organismo regenera de manera correcta (25). El fragmento del animal que se cort hacia la regin anterior es
capaz de formar una cabeza con mucha mayor frecuencia que lo que lo hace
un fragmento cortado hacia la regin posterior (asociado a la regeneracin de la

capitulo XI Regeneracin

cola). Esto sugiere la existencia de gradientes de sealizacin que le confieren la


polaridad antero-posterior al fragmento en regeneracin. Se ha descrito que la sealizacin WNT es sumamente importante para establecer esta polaridad anteroposterior. Una disminucin gradual de la sealizacin WNT o su ausencia lleva a la
generacin de individuos sin cola, con dos cabezas y dos faringes o con dos cabezas y faringes desorganizadas; la forma ms severa de alteracin en la polaridad es
una planaria con una gran cabeza con una simetra tipo radial (25, 28, 29).

Regeneracin de extremidades de urodelos


Los anfibios del orden de los urodelos como las salamandras, tritones y el ajolote
Ambystoma mexicanum (Figura 1), poseen un potencial regenerativo envidiable dentro de los vertebrados ya que son capaces de regenerar la cola, el ojo,
la mandbula, varios rganos internos y, en particular, estructuras tan complejas como la extremidad (Figura 2), que muestra paralelismos con el desarrollo
embrionario (30). Vertebrados como las aves, los reptiles y los mamferos carecen de la capacidad de regenerar sus extremidades, y en los anfibios anuros la
capacidad de regenerar sus extremidades se pierde una vez que los animales
salen de su etapa larvaria (asociado a cambios en los sistemas inmunolgico,
seo y endocrino). Al ser amputada una extremidad del ajolote, ocurren varios
procesos celulares que culminan con la regeneracin completa de todas las
estructuras de la extremidad (19) (Figura 3a). En primer lugar ocurre la reparacin de la herida, que es un proceso bastante rpido en el que se incluye una
gran remodelacin de la matriz extracelular. En mamferos, que carecen de la
capacidad de regenerar la extremidad, tambin se lleva a cabo el proceso de
cerrado de herida, sin embargo, a diferencia de los urodelos existe una respuesta inflamatoria que conlleva a la formacin de una cicatriz (31, 32).
Posterior al cerrado de la herida se forman dos estructuras que promueven la
regeneracin de la extremidad; 1) el blastema que se forma entre el epitelio que
cierra la herida y el tejido del mun y 2) la Capa Epidrmica Apical (AEC por
sus siglas en ingls) que se forma por debajo del epitelio que cubre la herida (18,
19). El blastema ha sido considerado como un grupo heterogneo de clulas que
conservan su memoria posicional y cuyo origen, es el tejido cercano a la herida
que se ha desdiferenciado hacia un estado pluripotencial, a partir de la cual pueden regenerarse todas las estructuras de la extremidad (33). Sin embargo, an no
se ha logrado establecer si el blastema alberga clulas troncales. Recientemente
se report que las extremidades en regeneracin de salamandra expresan marcadores de clulas pluripotenciales como Nanog, Sox2 y Klf4 (CaptuloXIII).
Una vez que la extremidad amputada ha cerrado la herida y formado el blastema ocurren muchos procesos que llevan a la morfognesis de la extremidad y el
establecimiento de los patrones de manera similar a lo que ocurre durante la formacin de la extremidad embrionaria. En la extremidad en regeneracin, se observa

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CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

que las clulas indiferenciadas dentro del blastema responden a las seales especficas que inducen la formacin de los distintos linajes celulares, que dan origen a los
distintos tejidos de la extremidad con una organizacin espacio-temporal que lleva
al desarrollo correcto y funcional de la extremidad. Este ltimo proceso depende
de la AEC la cual es muy similar a la cresta ectodrmica apical que se forma en el
primordio de la extremidad embrionaria. La regeneracin de la extremidad puede
bloquearse si en algn momento del proceso estas estructuras (epitelio de cierre de
herida, blastema y la AEC) son eliminadas. Hay reportes que sugieren una participacin importante de la sealizacin WNT en la regeneracin de las extremidades
(34, 35). Si se bloquea la sealizacin de WNT en extremidades en regeneracin,
sta se inhibe, mientras que si se activa, se promueve. Por ejemplo, si se bloquea la
seal WNT en extremidades de ajolotes durante la regeneracin, esta es inhibida,
mientras que si se activa en la rana africana Xenopus laevis, se promueve la regeneracin de las extremidades incluso en etapas en las que normalmente no regenera.

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Es importante resaltar que las extremidades en regeneracin normalmente


recuperan las partes faltantes. Sin embargo, el uso de frmacos que inhiben o
sobre activan los gradientes de sealizacin generan anomalas en el proceso
de regeneracin. Por ejemplo, un exceso de cido retinoico es capaz de inducir la regeneracin de una extremidad completa sin importar el nivel al que se
corta, generando una duplicacin prximo-distal.
Otro de los factores que se ha considerado en el estudio de la regeneracin
es la innervacin, ya que se sabe que los factores neurotrficos son capaces de
estimular la expresin de genes implicados en ella (36, 37).

Regeneracin de las aletas de peces.


A diferencia de la extremidad de los urodelos, las aletas de los peces son mucho
ms simples y carecen de musculatura. Esta relativa simplicidad permite regenerar completamente las estructuras prdidas en menos de dos semanas (38).
El componente principal de las aletas son los radios espinales, de los cuales se
forman blastemas independientes en el sitio de corte durante la regeneracin.
Particularmente, el blastema del pez cebra se divide en dos subpoblaciones funcionalmente distintas. La primera subpoblacion corresponde al blastema distal,
que prolifera lentamente y se cree dirige el crecimiento regenerativo, mientras
que la segunda subpoblacin corresponde al blastema proximal que prolifera
rpidamente (39). No se ha reportado hasta la fecha, algn estudio que sugiera el origen de las clulas que forman el blastema durante la regeneracin de
la aleta, pero la evidencia apoya la hiptesis de que el blastema se forma por
desdiferenciacin de las clulas presentes como ocurren con el ajolote. El proceso de regeneracin en la aleta del pez cebra difiere de la regeneracin de la
extremidad en otros vertebrados, en que el proceso de cerrado de herida slo
implica la migracin celular, este proceso dura menos de dos das y est regu-

capitulo XI Regeneracin

lado por la sobre expresin de molculas de las que resaltan algunos miembros
de la familia WNT. Si la sealizacin WNT/ -catenina se altera en las primeras 6
horas de amputacin, el epitelio que cubre la herida no se desarrollar de manera correcta (40). Se sabe que la expresin diferencial de WNT a lo largo del eje
prximo-distal participa en la formacin del blastema, en la proliferacin celular
y en el crecimiento adecuado de la aleta al regular la expresin de genes y la
activacin de otras rutas de sealizacin (40, 41).

Regeneracin por morfalaxis


Regeneracin de hidras.
Las hidras son cnidarios del grupo de los hidrozoos, y al igual que los ajolotes llegan a la madurez sexual manteniendo caractersticas fsicas juveniles. Su cuerpo
se divide en tres segmentos: en la base del cuerpo est el disco basal o pie con
el que se aferran a algn sustrato, el cuerpo columnar en el que se ubica el intestino y la cabeza donde se encuentra el hipostoma que contiene una boca
primitiva y los tentculos motiles. La distribucin y diferenciacin de las clulas estn determinadas por la constante divisin de clulas troncales en el cuerpo columnar (Figura 3c), por una migracin activa y un desplazamiento pasivo de las
clulas hacia los dos polos (cabeza-pie) (12, 17, 42). Dentro del cuerpo columnar
de la hidra hay tres poblaciones celulares que cumplen los criterios de troncalidad: las clulas troncales intersticiales -con gran capacidad mittica-, las clulas troncales endodermales y las clulas troncales ectodermales con una menor
capacidad mittica (42). Durante la regeneracin de la cabeza de la hidra no
hay proliferacin celular evidente, las clulas endodermales en el sitio de corte
pasan por un estado transitorio donde pierden sus uniones y su polaridad apicalbasal, adquiriendo una morfologa redonda y desorganizada semejante a un
blastema. Despus las clulas recuperan su polaridad y cambian su morfologa
para regenerar las estructuras de la cabeza por el mecanismo de morfalaxis. Sin
embargo, si el corte se realiza a la mitad de cuerpo columnar se lleva a cabo la
regeneracin de la cabeza por un mecanismo epimrfico (17, 42). Esta diferencia en el proceso de regeneracin de la cabeza dependiente del nivel de corte
se ha asociado a dos cosas: 1) la presencia de un morfgeno que regula la polaridad antero-posterior y 2) los niveles de apoptosis. En la regeneracin del pie,
por otra parte, las clulas ms basales al sitio de corte adquieren la identidad de
disco basal. En este caso la regeneracin depende nicamente de la proliferacin de las clulas troncales y su migracin activa y pasiva (43).
La regeneracin de la hidra es tambin un excelente modelo para estudiar la
formacin de los patrones espaciales. Se sabe que en la cabeza, existe un centro organizador o morfgeno que emite una seal de WNT que promueve su formacin (17, 42). Tras una decapitacin, WNT inicia su expresin a los 15 minutos
y mantiene su expresin hasta que termina el proceso. Su expresin mantiene

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CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

la regeneracin, regula la correcta formacin de los ejes y brinda las seales


necesarias para activar el programa regenerativo y no limitarse a un simple cerrado de herida. Existe otra seal proveniente de la parte inferior del cuerpo que
es capaz de inhibir la formacin de la cabeza.

Regeneracin compensatoria
Regeneracin del hgado.

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El hgado es el nico rgano de mamferos con una gran capacidad regenerativa,


se sabe que es capaz de recuperarse aun despus de la eliminacin de un 70%
de su masa tisular. En humanos este proceso ocurre en un lapso de tiempo de 3 a
6 meses (18), lo que refleja la importancia del hgado como un rgano vital en el
metabolismo del individuo. La prdida del tejido heptico puede ocurrir por muchas causas, pero una de las principales se debe a la muerte celular provocada
por la ingesta de toxinas o por infecciones virales. El tipo celular ms abundante
del hgado es el hepatocito, que inicia su ciclo celular una vez que comienza la
regeneracin (44). Es importante resaltar que en este proceso los hepatocitos no se
desdiferencian. Los hepatocitos son el primer linaje celular que prolifera en el proceso de regeneracin; posteriormente lo harn los otros tipos celulares residentes
del hgado. Se ha establecido que en la regeneracin del hgado podran participar clulas progenitoras residentes, probablemente, en los canales de Hering en el
rbol biliar, llamadas clulas ovales. Por un lado, se ha observado que estas clulas
progenitoras se diferencian hacia hepatocitos. Por otro, se ha observado que en el
hgado en regeneracin, los hepatocitos son capaces de transdiferenciarse hacia
clulas epiteliales biliares en condiciones en las que estas clulas no seran capaces
de proliferar, o cuando esta capacidad est limitada por factores externos (44).
Resulta interesante mencionar que la arquitectura correcta del hgado no se
lleva a cabo hasta finalizar el proceso de la regeneracin, momento en el cual
se restablece toda la organizacin de los hepatocitos, las clulas de Kuppfer, las
clulas del epitelio biliar y los endotelios.
En la regeneracin heptica se sabe que participa la ruta WNT. Esta promueve
la diferenciacin de las clulas progenitoras ovales hacia hepatocitos. En ausencia de WNT, las clulas ovales se diferencian hacia clulas del epitelio biliar (24, 45).

OTROS MODELOS DE REGENERACIN


Regeneracin de la punta de los dedos en mamferos
Un modelo que ha planteado dudas acerca de la regeneracin en mamferos,
es la regeneracin de la punta del dedo de ratones perinatales (46). Cuando se
corta la falange terminal del dgito de las extremidades de ratones de hasta 3

capitulo XI Regeneracin

semanas de nacidos se ha observado que regeneran (Figura 4). Aunque el proceso de regeneracin en la falange terminal del dgito generar una falange
nueva, esta tendr una forma de gancho y ser ms corta (Figura 4K, 4L, 4O y
4P). La regeneracin de la falange terminal implica un proceso dual de osificacin (mientras que la parte que queda prxima a falange medial inicia un proceso de osificacin endocondral, la parte ms distal inicia un proceso de osificacin directa). De manera general, en la regeneracin del dgito, la mdula sea
se transforma en tejido seo (Figura 4H 4L y 4P). Se ha sugerido, sin demostrarse,
que la regeneracin del dgito se debe a la existencia de clulas troncales en la
regin ungueal (zona de formacin de la ua) (Figura 4B 4F y 4H). Por lo tanto,
se hace relevante determinar la presencia de clulas troncales en la punta de
los dedos de animales en edades con capacidad regenerativa y compararlos
con animales que han perdido esta capacidad, ya sea por su edad o por que
la amputacin se realiza en una zona diferente a la falange terminal.
La capacidad regenerativa de la punta del dedo disminuye mientras ms
proximal sea el nivel de la amputacin. Cortar la cuarta parte ms distal de la
ltima falange conlleva a una adecuada regeneracin, cortes en la mitad de
la falange afecta importantemente la capacidad regenerativa y amputaciones ms proximales no pueden recuperarse. Este proceso de regeneracin se
cree que es parecido a los urodelos, mediado por la creacin de un blastema
formado de clulas de origen mesenquimal, principalmente de los fibroblastos
en el tejido conjuntivo. El origen exacto de las clulas que forman el blastema y
su naturaleza se desconoce. Pocos laboratorios en el mundo han desarrollado
estrategias para encontrar la identidad celular del blastema. Un estudio comparativo entre distintas cepas de ratones, mostr que la cepa MRL posee un mayor potencial regenerativo que otras cepas. Dicha capacidad, es parecida a la
mostrada en anfibios (47). Esto alienta la idea de que al entender semejanzas y
diferencias entre mamferos y anfibios se pueda mejorar la capacidad regenerativa en roedores y en ltima instancia, en humanos (46).

265

CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

266

Figura 4. Regeneracin del dgito de ratn. (A) Vista ventral de la pata posterior del ratn. Tincin de
esqueleto con azul alciano y rojo alizarina. Se muestra la identidad de los dgitos (1-5) en el eje anteroposterior. La falange terminal (f.t.) tiene forma de garra y se embebe en la ua. (B) Vista sagital del
dgito en el da 11 posnatal. Tincin tricrmica de Masson donde se aprecian: (m.u.) matriz ungueal,
(f.m.) falange medial, (f.t.) falange terminal, (c.) cojinete y (u.) ua. (C) Vista sagital del dgito amputado a nivel distal. La amputacin se realiz a la mitad de la falange terminal eliminando la regin
correspondiente de la ua y un pedazo del cojinete del dedo (este incluye la epidermis, dermis y glndulas). La matriz ungueal quedo intacta. (D) Secuencia temporal de regeneracin. Se obtuvieron
los dedos 2 (control) y 3 (amputado) a los 7, 25, y 35 das post amputacin (pa). La amputacin del
dedo 3 se realiz el da 11 post natal. El proceso de regeneracin del dgito de ratn dura aproximadamente 30 das. A los 7 das post amputacin el dedo 3 (G-H vs E-F) esta inflamado, lo que queda de
la f.t. est en un proceso de osificacin endocondral y el cojinete ha desaparecido. En el dgito regenerante, la mdula sea (m.o.) se transforma en tejido seo (t.o.) (L-P). A lo largo de la f.t. del dgito
regenerante se observan islotes de hueso que se est separando. El cojinete, que se ha perdido en la
amputacin, no se recupera durante el proceso de regeneracin (H, L, P). Durante la regeneracin, la
f.t. adquiere una forma de gancho (L,P), es ms gruesa que la del control (J, N) y su longitud es menor.
Barras de escala: (A) 1 mm, (M) 228 mm y (E, F, G, H, I, J, K, L, N, O, P) 200 mm.

capitulo XI Regeneracin

Regeneracin de las astas


Las astas de los crvidos (renos, venados, alces) son un modelo interesante de
regeneracin (48), ya que anualmente producen un par de nuevas astas a partir de protrusiones en el crneo llamadas pedculos, esto en respuesta a picos
de testosterona temporales. La capacidad para regenerar las astas reside en el
periosteo frontal del pedculo, tambin llamado periosteo asterognico (AP). La
evidencia experimental sugiere que existe una poblacin de clulas troncales
dentro del AP responsables de la regeneracin de tejidos mesoblsticos en las
astas (msculo liso, cartlago, vasculatura y dermis). Aunque este proceso no
est descrito a profundidad se presume que ocurre por epimorfosis.

Regeneracin en otros organismos


Los organismos que se reproducen asexualmente, por medio de la fragmentacin mantienen una gran capacidad regenerativa (49). Los gusanos anlidos
del gnero Enquitraeus pueden auto-segmentarse y formar hasta 10 organismos independientes en dos semanas (50). La recuperacin de los segmentos,
perdidos durante la autotoma (proceso de auto-segmentacin), surge a partir
de la formacin de un blastema en la parte ms anterior para formar la cabeza
y otro posterior para la cola, la regeneracin de los segmentos intermedios se da
por la morfalaxis de los anillos originales. Al igual que en la planaria, el blastema
de estos gusanos anlidos se forma por la accin de neoblastos y adems, por
la desdiferenciacin de clulas intestinales y epiteliales (50).
Tambin se ha sugerido, la accin de clulas troncales multipotentes en otros
organismos con gran capacidad regenerativa como los equinodermos: lirios de
mar, erizos de mar, estrellas de mar, as como en los protocordados ascidias (5155). Sin embargo, la falta de herramientas moleculares dificultan su estudio.

EVOLUCIN Y REGENERACIN
Una de las preguntas que surge del estudio de la regeneracin se refiere a la
aparicin del proceso en la evolucin de los organismos. Dicha pregunta se
plante incluso antes de los postulados de adaptacin natural y evolucin de
Lamarck y Darwin con las descripciones de Ramur, Trembley, Bonnet y Spallanzani, al percatarse que incluso en animales parecidos variaba la capacidad
regenerativa (Figura 5). Asimismo, los pioneros en el estudio cientfico de la regeneracin se percataron de la importancia de otros factores, por ejemplo medio
ambientales (la disposicin del alimento, el ciclo de muda de exoesqueleto y la
propensin de las extremidades a ser amputados). Aunque el debate fue desestimado por Morgan (9), la necesidad de proponer argumentos slidos inici dos
tipos de estudios: los ecolgicos y los evolutivos. Se empez a investigar sobre fe-

267

CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

nmenos indirectos de la regeneracin: el xito reproductivo, la sobrevivencia,


el costo de regenerar y el costo de no regenerar (10, 56).
Se ha considerado a la regeneracin, como un proceso evolutivamente conservado que sera el mismo o muy parecido entre todas las especies y que involucrara mecanismos conservados del mantenimiento de la homeostasis de los
tejidos (12, 17, 49, 57, 58). Bely (57) ha propuesto analizar la regeneracin comparando el cerrado de herida, la formacin de una zona inductora, la formacin
de un blastema y la consolidacin del mismo en distintas especies. El sugiere considerar la regeneracin como un proceso conservado a lo largo del rbol filogentico y que se perdi en distintas especies por presiones ambientales (Figura 5).

268

Ya desde el siglo XVIII se saba sobre las posibles alteraciones en la extremidad


regenerada, sin embargo, no se haban desarrollado investigaciones sobre la influencia de la regeneracin en el desempeo del propio organismo en su medio
ambiente. Los estudios ecolgicos se han centrado en la evaluacin de las ventajas
evolutivas que representa para un organismo regenerar, se han utilizado dos estrategias; comparar organismos que no regeneran contra organismos que si regeneran
y comparar organismos que se auto-amputan y regeneran contra organismos que
se auto-amputan y no regeneran. Aunque la amputacin de la extremidad implica una ventaja inmediata ya que podra sobrevivir al escapar de un depredador,
durante el proceso de reparacin del tejido se tendran consecuencias en la locomocin, forrajeo, reproduccin (fecundidad, conducta de apareamiento), crecimiento y tener consecuencias metablicas, alterando as la sobrevivencia (56, 58).
A nivel molecular, es sobresaliente la identificacin de rutas de sealizacin
comunes que han aparecido con la evolucin de los metazoarios. En este captulo nos hemos enfocado principalmente a la sealizacin WNT, aunque sta
no es la nica ni la ms importante, pero su participacin en el desarrollo y en
la regeneracin es innegable. Por lo tanto, cabra preguntarse si el proceso de
regeneracin y los procesos de diferenciacin celular, establecimiento de patrones y polaridad que ocurren en los embriones de los metazoarios durante su
desarrollo, as como la homeostasis de los tejidos adultos tienen algo en comn.
De igual manera hay que resaltar que esta misma sealizacin, es muy importante en la generacin de tumores y stos principalmente se forman porque las
clulas troncales son las afectadas.

capitulo XI Regeneracin

Figura 5. Evolucin de la regeneracin. rbol filogentico que muestra organismos con capacidades regenerativas. Note que la capacidad regenerativa disminuye mientras ms complejo es
el organismo (representado por el degradado).

MEDICINA REGENERATIVA
Una de las metas de la medicina regenerativa es el aplicar el conocimiento obtenido sobre el estudio de los distintos modelos animales, para el tratamiento de
enfermedades degenerativas y en el mejor de los casos inducir la regeneracin
de tejidos y rganos. De los aspectos ms importantes que se debe tener en
mente, es que las clulas a partir de las cuales ocurrir la regeneracin deben
ser capaces de identificar su posicin y de restablecer el patrn espacial de los
tejidos formados.
Existen dos alternativas para el tratamiento de enfermedades crnico-degenerativas. Una primera, enfocada principalmente a la terapia celular, al hacer uso de las clulas troncales directamente. Sin embargo, se debe tener en
cuenta que estas clulas, tienen la capacidad de autorrenovacin y presentan
divisin celular asimtrica, de manera que si en el tejido hospedero, las clulas
troncales no son capaces de diferenciarse en el tipo celular correcto, se corre
el peligro de que esta poblacin se mantenga en su estado troncal con una
alta probabilidad de generar tumores. Por lo tanto, debe considerase como
alternativa el inducir la diferenciacin celular hacia un linaje especfico a partir
de las clulas troncales, y mantener este estado diferenciado. Esta estrategia,
en principio evitara la formacin de tumores, por lo que el reto importante, es el
que se logre la integracin de la poblacin celular diferenciada. Una segunda
alternativa que se debe considerar, y en la que actualmente se estn desarrollando investigaciones en este campo, es la creacin de rganos completos

269

CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

in vitro, a partir de controlar la diferenciacin celular y morfognesis del rgano


formado. Finalmente, uno de los retos ms importantes, es lograr inducir la regeneracin de estructuras completas con el uso de pequeas molculas que actan como agonistas o antagonistas de distintas rutas de sealizacin. Un reto
importante de la medicina regenerativa es lograr inducir la regeneracin de las
extremidades en humanos de manera similar a como ocurren en los urodelos.
Por otro lado, es importante tener en cuenta de que para lograr tratamientos exitosos no es suficiente con inducir la diferenciacin celular correcta de
los tejidos, sino que es necesario que las clulas logren generar la organizacin
tridimensional correcta en el tejido hospedero, evento que favorecer la funcionalidad del tejido u rgano.

Conclusiones

270

Desde la antigedad, el humano se ha interesado en el proceso de la regeneracin, probablemente por el deseo de recuperar estructuras del cuerpo prdidas por alguna lesin o enfermedad. El estudio de la regeneracin, ha llevado
considerar a proceso como un mecanismos molecular evolutivamente conservado. Para fines de estudio, podemos decir que la regeneracin ocurre por
4 mecanismos: I) la regeneracin mediada por clulas troncales residentes. II)
La epimorfosis caracterizada por la formacin de un blastema, III) La morfalaxis,
en la cual el tejido restante se reorganiza para reconstruir la morfologa original
y IV) la regeneracin compensatoria, que se enfoca en la recuperacin de la
funcin, y no de la forma, mediante la proliferacin y restauracin de la masa
tisular funcional. El conocimiento generado a partir de los estudios bsicos en
modelos animales, permite generar la expectativa que en un futuro la Medicina
Regenerativa logre avances importantes y proponga pensar en la restauracin
o reemplazo de tejidos, rganos o estructuras complejas en los humanos.

Agradecimientos
Los autores quieren agradecer el apoyo bibliogrfico a la Lic. Luca Brito. Este
trabajo fue apoyado por los financiamientos del CONACYT No 53484 y por PAPIIT-DGAPA No IN220808. Donavan Correa Gallegos recibi beca por parte del
Observatorio de Visualizacin Ixtli de la UNAM y la Red FARMED del CONACYT.
Claudio Ivn Galvn Hernndez recibi beca por parte de la Fundacin Lorena
Alejandra Gallardo, i.a.p. y la Red FARMED del CONACYT.

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