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Cocos Gram-positivos

Pontificia Universidad Javeriana


Departamento de Microbiologa
Facultad de Ciencias
Curso Bacteriologa 001343

rbol filogentico Universal

La separacin en tres dominios a partir de secuenciacin DNA, apoyan


una separacin en tres dominios, a partir de una ancestro comn para
todas las clulas

Manual Bergey de
Sistemtica
Autoridad reconocida
bacteriana

Bacteriologa
en

taxonoma

Manual se divide en cuatro volmenes


Cada volumen contiene secciones y cada
uno trata varios gneros relacionados.

Volumen I.
1984. Bacterias Gram-negativas de importancia mdica y
comercial
Volumen II.
1986. Bacterias Gram-positivas de importancia mdica y
comercial

Volumen III.
1989. Bacterias Gram-negativas restantes y Archaea
Volumen IV.
1989. Actinomicetos filamentosos y bacterias relacionadas

Volumen II

Seccin 12

Cocos Gram-positivos
Familia I: Micrococcaceae
Gnero I: Micrococcus
Gnero II: Stomatococcus
Gnero III: Planococcus
Gnero IV: Staphylococcus

Familia I Micrococcaceae
Cocos Gram-positivos
Gram-positivos, catalasa positivos, aislados
frecuentemente en diferentes muestras
clnicas.
Ampliamente distribuidos en la naturaleza,
son comensales de piel, membranas
mucosas y otros sitios del cuerpo en
humanos y animales.

Gnero Staphylococcus

Caractersticas importantes
Cocos Gram-positivos de
0.5

1.0
micras
agrupados en racimos.
Se dividen en dos planos.

Catalasa positivos
H2O2

O2 + H2O

Taxonoma del Gnero Staphylococcus


Producen pigmentos que varan desde el color
blanco hasta el amarillo

Todos poseen bajo contenido G + C en el DNA.


Tambin por anlisis RNAr 16S.
35 especies y 17 subespecies han sido reconocidas
por anlisis bioqumicos y por hibridacin DNADNA.

Especies de Staphylococcus
S. aureus (nariz) y S. epidermidis
(nariz y piel) son comensales
comunes pero poseen potencial
patgeno.
S. saprophyticus: produce infecciones
urinarias.
S.
haemolyticus,
S.simulans,
S.cohnii, S. warneri y S. lugdunensis
se han relacionado con infecciones en
el hombre.

Procesos infecciosos
S. epidermidis

Endocarditis
bacteriana

S. saprophyticus

Infecciones urinarias

Micrococcus spp.

Infecciones heridas
quirrgicas.
Ojo: contaminante

Staphylococcus aureus
Se diferencia de los dems estafilococos por la
produccin de coagulasa
La coagulasa: es una enzima que coagula el
plasma

Protrombina

Trombina

Fibringeno

COAGULO DE FIBRINA

S.aureus
Fermenta manitol
Produce hemlisis de los glbulos rojos
90% de cepas contienen plasmidos
codifican la produccin de B-lactamasas.

que

S. aureus resistentes a la meticilina (SARM)


S.aureus con resistencia
vancomicina (VISA)

intermedia

la

Staphylococcus aureus
Procesos infecciosos:

Fornculos, Foliculitis
Abscesos
Faringitis
Erisipela
Celulitis
Bacteriemia
Infecciones pigenas (Endocarditis, artritis
sptica y osteomielitis)
Intoxicacin alimentara
Sndrome de shock txico
Infecciones nosocomiales (neumona,
sepsis)

Factores de patogenicidad: S. aureus


Exotoxinas
Leucocidina: Lisis de leucocitos, necrosis tisular.
Toxina exfoliativa: Produce descamacin de la piel.
sindrome de la piel escaldada

Toxina del sndrome de choque toxico


Enterotoxinas: Intoxicacin alimentara

(TSST-1)

S. aureus:

Factores de patogenicidad

Hemolisina: alfa hemolisina y beta hemolisina.


Hialuronidasas
Proteasas
Lipasas
Desoxirribonucleasas

S. aureus: Factores de patogenicidad


La protena A es la principal protena de la
pared celular, se une a la porcin Fc de la IgG
e impide activacin del complemento, reduce la
opsonizacin
y
la
fagocitosis
de
los
microorganismos.
Algunas cepas estn recubiertas por una
microcpsula que es antifagoctica (serotipos
basados en el polisacrido capsular)

a - HEMOLISINA
Alfa hemolisina: efectos letales en una amplia
variedad
de
clulas:
polimorfonucleares,
hemates de varias especies animales
Es dermonecrtica en inyeccin subcutnea. Y
letal por va intravenosa. Es una potente
neurotoxina.
Responsable de la hemlisis beta observada en el
agar sangre con glbulos rojos de cordero.

b - LISINA
Es una esfingomielinasa. Acta sobre el
complejo lipocarbohidrato esfingomielina de
varios tipos celulares.
Es una hemolisina que se activa a bajas
temperaturas. Es la responsable del factor
CAMP, para identificacin presuntiva de
Streptococcus grupo B.

ENZIMAS
Catalasa: Inactiva los radicales libres y de
perxido de hidrgeno.

Coagulasa o Factor Clumping:


Acta
recubriendo a las bacterias con fibrina y as
impidiendo la opsonizacin y fagocitosis.

ENZIMAS
Estafiloquinasa: La estafiloquinasa se une al
plasmingeno y forma un complejo proteoltico
parecido a la plasmina que disuelve la fibrina.
Hialuronidasa: Hidroliza la matriz intercelular
de mucopolisacridos en tejidos y sirve como
un factor de diseminacin en el tejido.
Lipasas: Cepas de S. aureus, que producen
forunculosis crnica. La lipasa permite la
diseminacin de la bacteria en el tejido cutneo
y subcutneo.

Factores de virulencia Staphylococcus


aureus

Staphylococcus epidermidis
Flora Normal Piel.
Infecciones en catteres.
Infecciones prtesis (Ortopdicas o
Cardiovasculares).

Biopelcula de S. epidermidis

Caractersticas en el laboratorio
Staphylococcus son halo-tolerantes

Crecen en agar salado al 7.5% NaCl


Si se adiciona manitol al agar salado se
utiliza como medio diferencial de especies de
estafilococos

Caractersticas de laboratorio
1. Muestras:
- Pus.
- Sangre.
- Lquidos corporales.
2. Cultivo: A. sangre, A. chocolate, A. Baird-Parker
a 37 C
3. Coloracin de Gram: Cocos Gram-positivos
4. Prueba Catalasa:
H2O2 + Bacteria

H2O + O2

Diagnostico de laboratorio
Coloracin de GRAM: cocos gram
positivos
Catalasa positiva: Staphylococcus)
Coagulasa: Staphylococcus aureus
Novobiocina: S. saprophyticus

Coloracin de Gram

Prueba de la catalasa

Staphylococcus

Agar Manitol Salado

Prueba de susceptibilidad a la Novobiocina

Antibiticos de eleccin para S. aureus

Oxacilina
Vancomicina
Ampicilina o ampicilina sulbactam
Piperacilina/tazobactam
Clindamicina
Cefalosporinas

COCOS GRAM
POSITIVOS

Muestra clnica: Abscesos, heridas,


secreciones. LCR, hemocultivos.

Coloracin de Gram

Agar sangre
Catalasa

Streptococcus

Staphylococcus

Hemlisis
Coagulasa

-Optoquina

Bacitracina
Novobiocina

+
S. pneumoniae

--

Creci. Nacl
S. pyogenes

+
Enterococo

S. aureus

R
Prueba de
CAMP

-Bioqumicas

S
Pruebas de
(ver tabla)

S. saprophyticus

-S. epydermidis

S. agalactiae
S. viridans

Creci. Nacl
Enterococo

Volumen II - Seccin 12
Familia II: Deinococcaceae
Gnero I: Deinococcus
Otros gneros
Gnero: Streptococcus
Gnero: Leuconostoc
Gnero: Pediococcus
Gnero: Aerococcus
Gnero: Gemella
Gnero: Peptococcus
Gnero: Peptostreptococcus
Gnero: Ruminococcus
Gnero: Coprococcus
Gnero: Sarcina

Gnero Streptococcus
Cocos esfricos u ovoides Gram-positivos
Crecen formando pares y cadenas.
Son inmviles y no esporulados.
Metabolismo fermentativo.
Catalasa negativos, oxidasa negativos.

Gnero Streptococcus
Anaerobios facultativos, algunos capnofilcos
Hbitat: piel, glndulas y mucosas del hombre
y animales
Se distinguen por morfologa de la colonia,
patrn
de
hemlisis
en
agar
sangre,
composicin antignica de la pared celular
Clasificacin por antgenos de la pared por
Rebeca Lancefield.

Infecciones por Streptococcus


Grupo
Lancefield

Especie

Hemlisis

Infecciones ms frecuentes

S. pyogenes

Faringitis, piel, heridas, neumona, tejidos profundos


sndromes por toxinas, fiebre reumtica

S. agalactiae

Sepsis neonatal, neumona, meningitis, osteomielitis

Enterococcus

,a, b

Sepsis neonatal, peritonitis, ITU, oportunista

E. faecalis

Endocarditis

E. faecium

No Enterococcus
S. bovis

Sepsis puerperal, piel, heridas, endocarditis, artritis

a, , b

NA

S. pneumoniae

NA

S. viridans*

a o

Endocarditis

Neumona, otitis, meningitis

Endocarditis, septicemia, diente, catteres

*S. viridans: S. sanguis, S. mutans, S.mitis, S. gordoni, S. salivarus,S.


anginosus, S. milleri, S. intermedius

S. pyogenes
Faringitis,
celulitis,
endocarditis

sinusitis,
artritis,

Es o no flora normal?

Fiebre
reumtica,
glomerulonefritis poststreptococcica.

Streptococcus pyogenes
Produce enfermedad mediante tres mecanismos:
1.

Inflamacin piognica: Localmente, en el tejido


donde estn los microorganismos

2.

Produccin de exotoxinas: reas donde no se


encuentra el microorganismo

3.

Inmunolgicos: Acs contra un componente del


microorganismo reaccionan con el tejido normal o
forman complejos inmunes

S. pyogenes:

Factores de virulencia

Protena M: Se une a la protena de unin a la fibronectina


(Protena F). Inhibe la fagocitosis.
Cpsula de cido hialurnico: Inhibe la

fagocitosis.

Invasinas:
Estreptoquinasa (fibrinolisina: disuelve los cogulos de fibrina)
Estreptodornasa (DNAsa: despolimeriza el DNA en los
exudados y tejidos necrticos)
Hialuronidasa (degrada acido hialurnico, sustancia intercelular
del tejido subcutneo) y estreptolisina.

S. pyogenes: Factores de virulencia


Toxina eritrognica: Acta como superantigeno,
similar a la (TSST S.aureus). Produce el salpullido de la
escarlatina
Estreptolisina O: Hemolisina antignica y determina la
produccin de Acs (ASLO, ASO, ASTO)
Estreptolisina S: Hemolisina
Exotoxina A pirognica: Toxina responsable del
sndrome del shock txico. Acta como super-antigeno,
causa liberacin de citoquinas, LT y macrofagos

S. pyogenes o B-hemoltico del grupo A

Pared celular: Unidades repetidas


acetilglucosamina y N- acetilmurmico.

de

Antgenos pared: Descritos


Lancefield,
quien
estableci
antgnicos especficos.

Rebeca
grupos

por
8

N-

Grupo A: es un dmero de N- acetilglucosamina


y ramnosa. Tambin ha sido llamado substancia
C o grupo antgenico de carbohidratos.

Sptreptococcus pyogenes

S. pyogenes: Infecciones humanos

Streptococcus pneumoniae
Cocos lanceolados Gram-positivos
Disposicin en diplococos o cadenas cortas.
Presentan cpsula (polisacrido)= virulencia.
Son habitantes normales
de las vas
respiratorias superiores en 5 a 50% de los
humanos sanos

Pueden causar neumona, sinusitis,


bronquitis, bacteriemia, meningitis.

otitis,

Streptococcus pneumoniae

S. pneumoniae: Factores de virulencia


Cpsula Polisacarida, es inmunognica 90 tipos
distintos.

Posee un Hidrato de carbono en la pared celular


denominada sustancia C
El acido lipoteicoico, activa complemento e induce la
produccin de citocinas inflamatorias (sndrome shock
sptico)
La neumolisina (Hemolisina)
Producen proteasa de IgA que potencia la colonizacin

Cpsula S. pneumoniae

Caractersticas de Laboratorio
Sensible a optoquina y es lisado por sales
biliares.
Alfa hemoltico (hemlisis parcial: verde)
Requieren 5-10% CO2 para crecer.
Sensibles a penicilina y eritromicina.

Streptococcus agalactiae (B)


Forma parte de la flora normal del aparato
genital femenino
Son causa importante de septicemia y meningitis
neonatal
Conjuntivitis, otitis, pericarditis, osteomielitis
Resistentes a la bacitracina, hidrolizan el hipurato

Streptococcus viridans
Incluye S. mitis, S. mutans, S. sanguis
Optoquina no inhibe su crecimiento, colonia no
soluble en bilis
Miembros prevalentes de la flora normal de las
vas respiratorias superiores

Causa importante de endocarditis


Gnesis de caries dental

Streptococcus viridans

Flora normal?

Endocarditis infecciosa (30-40%). S.mitis.

Infecciones de valvla mitral(29%), lesiones


valvulares degenerativas(21%). Bacteriemias
(S. mitis).
Placa dental (S. mutans), meningitis, abscesos
cerebrales, artritis spticas (S. anginosus).

Enterococcus spp
Enterococcus faecalis es el ms comn, causa el 85 a
90% de las infecciones enterococcicas
Enterococcus faecium causa
infecciones enterococicas

el

10%

de

las

Son las causa ms comunes de infeccin nosocomial,


sobre todo en UCI, meningitis bacteriana, endocarditis

Se transmiten por las manos del personal del hospital

Mayor problema es que los Enterococcus son muy


resistentes a los antibiticos

PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO

1. Muestra :
- Frotis farngeo
- Pus
- Sangre
2. Cultivo: Agar Sangre, 5-10 % CO2,
Hemlisis
3. Prueba Serolgica: ASTOS.

Diagnstico microbiolgico
COLORACION GRAM: Cocos Gram-positivos
CATALASA: Negativa
PRODUCCIN DE HEMOLISIS
ALFA HEMOLISIS:
Optoquina
BETA HEMOLISIS:

Bacitracina
CAMP

GAMA HEMOLISIS:

NaCl 6.5%
Bilis esculina

Coloracin de Gram

OPTOQUINA
Objetivo: Determinar la sensibilidad a la optoquina.
Principio: Prueba la fragilidad de la membrana a la
tensin superficial ejercida por el clorhidrato de
etilhidrocupreina (0.02ml.)

Interpretacin:
(S) S. pneumoniae (>16 mm)
(R) S. grupo viridans (<14mm)

Optoquina

BACITRACINA: (0.04 U)
Objetivo: Determinar la sensibilidad a la
bacitracina.
Principio: Antibitico que inhibe la pared
celular.
Interpretacin: (S) S. pyogenes Grupo A
(R) S. no pyogenes.

BACITRACINA:

Prueba de CAMP
Objetivo: diferenciar S. agalactiae de otros
Streptococcus.
Principio: Capacidad de producir y
elaborar el factor CAMP que actua
sinergicamente con la B-lisina del
Estafilococo sobre los GR.
Interpretacin: (+) S. agalactiae
(-) Otros Streptococcus.

Prueba de CAMP

Prueba de NaCl 6.5%


Objetivo: Diferenciar enterococos de
otros del grupo D
Principio: Capacidad de tolerar
concentraciones de NaCl.
Interpretacin:
Crece: Grupo D tipo Enterococo
No crece: Otros Grupo D.

Prueba de NaCl 6.5%

Bilis esculina agar

Hemlisis

Beta

Alfa

Gama

Diferenciacin cocos aerobios

COCOS GRAM
POSITIVOS

Muestra clnica: Abscesos, heridas,


secreciones. LCR, hemocultivos.

Coloracin de Gram

Agar sangre
Catalasa

Streptococcus

Staphylococcus

Hemlisis
Coagulasa

-Optoquina

Bacitracina
Noboviocina

+
S. pneumoniae

--

Creci. Nacl
S. pyogenes

+
Enterococo

S. aureus

R
Prueba de
CAMP

-Bioqumicas

S
Pruebas de
(ver tabla)

S. saprophyticus

-S. epydermidis

S. agalactiae
S. viridans

Creci. Nacl
Enterococo