ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA

1. INTRODUCCIN
Antes de realizar un anlisis lo primero que tenemos que hacer
es la toma de muestra. Es importante que la muestra sea
representativa. Adems a nivel microbiolgico es importante que esa
muestra no se contamine ni en la toma de muestras, ni en la
manipulacin o transporte.
Primero cogemos las muestras para el anlisis microbiolgico,
para que no se contamine la zona donde estn las muestras.
En anlisis fsico-qumico el material simplemente tiene que
estar limpio. En cambio para el anlisis microbiolgico, el material
tiene que estar esterilizado. Se puede utilizar material de vidrio, boro
silicatado, o plstico.
El material de vidrio o plstico tiene que tener la apertura de
frasco perfectamente cerrada con un tapn esmerilado, o tapn de
rosca.
Cmo se puede esterilizar un bote de vidrio: En el autoclave, y
si es muy resistente en estufa (180 durante una hora). Si es de
plstico ya vienen esterilizados, se esterilizan con xido de etileno,
radiaciones gamma.
Cul es el volumen para una muestra de agua:
Dependiendo de la muestra, si es para filtracin por membrana
como mnimo una muestra de 500 ml, para el NMP sera de 250 ml.
Conceptos previos:
Muestreo simple: aquel que se coge en un momento
determinado y en un punto.
Muestreo compuesto: en el mismo sitio pero a diferentes
tiempos.

Muestreo Integrado: de distintos sitios pero en el mismo

momento.
En el anlisis microbiolgico son siempre muestreos simples.
Muestra de agua clorada, un tipo de desinfectante, en el
transporte del agua, el cloro mata los microorganismos. Cmo
eliminar el cloro, echamos tiosulfato sdico, que es un reductor.
Reduce el cloro a cloruros.

Esterilizacin del frasco

Frasco de boca ancha, bote de 1000 ml. Se lava bien con agua
y jabn, se enjuaga con agua del grifo y luego con agua destilada.
Antes de esterilizar se echa el tiosulfato de sodio, tanto si est
clorada como no. En qu cantidad: 18 g/l. 0,1 ml de Na2S2O3 por cada
100 ml de agua que vayamos a coger.
Tanto el tapn como el cuello de la botella tienen que estar
cubiertos de papel de aluminio. Si le ponemos papel de aluminio, este
debe estar esterilizado.

Material que se utiliza para la toma de muestra.

Quitamos los filtros que tenga el grifo, lavamos bien el grifo,
con agua y jabn o alcohol. Dejamos correr el agua un tiempo, unos
10 minutos. Una vez que hemos hecho esto, tenemos que esterilizar
el grifo con alcohol etlico. Se flamea el grifo. Una vez que esta
esterilizado le damos otra vez al agua, unos 5 minutos. Procedemos a
la toma de muestra.
El tapn en la mano y en posicin invertida, ponemos el bote en
el grifo, pero no pegado al grifo. No lo llenamos totalmente, para que
luego podamos homogenizar el frasco.

Anlisis de un pozo:
Bomba de aspiracin. Si lleva bomba, se bombea y se esteriliza.
Si no tiene bomba, cogemos un frasco con una cuerda. Agitamos la
superficie para homogenizar. Tienen que estar lastrados. Tambin hay
frascos que se cierran solos dependiendo de la presin.

Anlisis del agua de un ro:

No debemos hacerlo en la orilla, sino en una profundidad
media, ni en zonas de estancamiento, debe hacerse donde haya
fluidez de agua. Le quitamos el tapn en sentido contrario a la
corriente.

Transporte de una muestra de agua:

Rpido.
Hacer el anlisis antes de 6 horas de la toma de
muestra. No se debe producir ningn tipo de cambio en la

muestra.
Introducimos la muestra de agua en una nevera. Los
microorganismos inhiben su crecimiento en una
temperatura de 4 5C. Se puede refrigerar un tiempo

mximo de 24 horas.
pH inferior a 7, crecen menos los microorganismos. Si el
agua tiene un pH bsico se tiene que echar algn tipo de
sustancia.

Determinaciones de anlisis qumico que se deben hacer in

situ:

El oxgeno disuelto.
Temperatura.
pH.
Cloruros disueltos

Material a nivel microbiolgico:

Un equipo de filtracin de membrana.

Estufa de incubacin, con batera.
Medios de cultivo.
Alcohol, en un recipiente metlico.

Caso: en el anlisis de agua Lanjarn sale un recuento con

unos datos que dicen que puede ser peligroso para la salud. En casos
de litigios. Se cogen tres muestras:

Primero se hace el anlisis en un laboratorio oficial o

privado acreditado.
Segundo: en el tiempo de cinco das, u perito, y en

presencia de esta persona la empresa hace un anlisis.

Tercero: si los datos no concuerdan, se hace un tercer
anlisis, en el tiempo de ocho das. Se tiene que acatar
los resultados de este tercer laboratorio oficial acreditado

Identificacin de la muestra.
Fichero de datos de la muestra: fecha, lugar, nombre y
direccin de la persona jurdica o fsica, nombre de la persona que ha
realizado la toma, sitio, fecha, hora, da, mes, ao. Un cdigo de
referencia para su identificacin, si ha ahabido algn tipo de anomala
2. MICROORGANISMOS INDICADORES

En el agua es probable que haya microorganismos patgenos.

Hay que hacer anlisis continuos. El agua puede provocar
enfermedades: clera, malaria, diarreas, virus, bacterifagos.
En el anlisis de agua no se hace un anlisis de todos los
microorganismos patgenos, por la gran cantidad de estos, adems
son muy difciles de detectar todos estos microorganismos.
Se detectan otros microorganismos, que estn en el agua y que
nos estn poniendo en alerta de que podemos tener microorganismos
patgenos.
A estos microorganismos se les llama microorganismos
indicadores. Deben ser inculos inofensivos para el hombre y los
animales, son fcilmente detectables y se pueden analizar en
cualquier laboratorio. Deben ser ms resistentes que los patgenos.
Tienen que estar relacionados cualitativa y cuantitativamente
con los microorganismos patgenos, es decir, que si hay este tipo de
microorganismos es muy posible que haya patgenos.
Si tenemos E.Coli es posible que haya Salmonella. La coli
dependiendo de la cepa no siempre es patgena.
Microorganismos indicadores:

Coliformes totales.
Coliformes fecales.
Estreptococcus fecales

Los colifomes pertenecen al gnero de las enterobacterias:

Enterobacterias ms importantes:

Escherichia coli
Salmonella.
Shigella.
Citrobacter.
Enterobacter.
Yersinia
Serratia.
Klebsiella.
5

Edwarsiella.
Proteus.
Erwinia
Hafnia.

Los coliformes son bacterias que pertenecen a la familia de

las enterobacterias. Son Gram -, aerobias o anaerobias facultativas,
no espolurados, que fermetan la lactosa a 37C produciendo cido y
gas en un tiempo mximo de 48 horas, y en presencia de sales
biliares
No todas las enterobacterias son coliformes.

2.1. COLIFORMES TOTALES

Escheria Coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter,
Serratia (a veces) son coliformes totales.
Los coliformes totales seran estas enterobacterias, no sabemos
de su origen, forman parte de la flora intestinal de los mamferos. No
viven solamente en el intestino.
Los coliformes totales su hbitat puede ser el intestino, pero
puede tener otros destinos (suelo). En el caso de la E.Coli, el agua
puede presentar contaminacin fecal; es el nico en el que el hbitat
es el intestino.

2.2. COLIFORMES FECALES

La E.Coli tiene un origen fecal, solamente su hbitat es el
intestino. La E.Coli puede fermentar la lactosa a una temperatura de
44-45C; el resto de los coliformes a esa temperatura moriran.

Los coliformes totales no conocemos su origen. Los coliformes

fecales son parte de los totales

2.3. ESTREPTOCOCCUS FECALES

Son Gram positivo, son cocos, fermentan la glucosa a 37C
produciendo cido. Su origen puede ser fecal (el agua estara
contaminada), puede tener otro origen, puede formar parte de la
flora intestinal de los animales.
Son ms resistentes fuera de su hbitat normal que lo
coliformes. En el agua es ms resistente que la E.Coli.
Son ms importantes como indicadores los coliformes totales y
fecales que los estreptococcus fecales, porque con la E.Coli estamos
seguros de cul es su hbitat, en los estreptococcus no se conoce el
origen.

3. TCNICA FILTRACIN SOBRE MEMBRANA FILTRANTE

La tcnica de filtracin por membrana se ha convertido en
el mtodo ms comn para evaluar las caractersticas microbiolgicas
del agua. Se pasa la muestra de agua a travs de un filtro de

membrana con diferente tamao de poro. El filtro con las bacterias

atrapadas se transfiere a la superficie de un medio slido. El uso del
medio apropiado permite la deteccin rpida de los coliformes totales,
fecales estreptococos fecales por sus colonias caractersticas.

Ventajas de la tcnica de filtracin sobre membrana:

Se pueden utilizar grandes volmenes de agua.

Se utiliza para aguas poco contaminadas.

Es un mtodo ms rpido y preciso que el NMP.

Se puede realizar una anlisis insitu, con el NMP no se

puede hacer en caso de emergencias

Material que se utiliza:

Matraz kitasato, una capacidad de 250 ml

Membrana portafiltro.
Un embudo, capacidad de 250 ml, se puede medir
directamente en el embudo

Cmo se filtra:
El embudo y la membrana deben estar esterilizados, al igual
que la probeta donde midamos la muestra de agua.
Para aguas potables se puede filtrar u volumen de 100ml, para
aguas envasadas 250 ml. Tambin se puede filtrar para volmenes
ms pequeos o hacer diluciones. Si se desconoce la procedencia del
agua tenemos que filtrar menos volumen.
PROCEDIMIENTO:
1. Flameamos la punta de las pinzas metlicas, no estriadas,
con alcohol etlico.

2. En condiciones aspticas se coge el filtro de membrana

estril por el borde y se coloca sobre el soporte del embudo de
filtracin, con la cuadrcula hacia arriba. Dejamos las pinzas en el
vaso de etanol. El embudo debe estar bien sujeto, que ajuste
adecuadamente. Esta parte del embudo tiene que estar esterilizada.
3. Homogeneizamos la muestra y vertimos un volumen de 100
ml enrasando en el embudo de filtracin.
4. Aplicamos el vaco, a travs de la trompa de agua, al sistema
de filtracin, para que la muestra atraviese en su totalidad el filtro.
5. Una vez filtrada la muestra se enjuaga el embudo un par de
veces con la solucin tamponada estril (con unos 30 ml de solucin
tamponada si filtramos 100 ml de agua), para arrastrar las bacterias
adheridas.
Si el volumen est comprendido entre 1-30 ml, (porque
est muy contaminada) se diluye aqu mismo. Sobre el embudo
echamos 30 ml de solucin tamponada ms la muestra de agua, y
filtramos sin tener el vaco funcionando. Se tiene que enjuagar un par
de veces.
Si tenemos distintas muestras tenemos que hacer una
desinfeccin entre muestra y muestra. Se coge la membrana filtrante
y se pone en un vaso con agua destilada hirviendo, se deja al lado del
mechero hasta que se seque. Otra forma sera sumergirla en alcohol
hasta que se evapore. Hay que tener cuidado de que el alcohol etlico
se evapore totalmente, sino puede matar las bacterias.
6. Flameamos de nuevo la punta de las pinzas en alcohol
etlico.
7. Retiramos aspticamente el filtro de membrana estril,
tomndolo por el borde y lo colocamos sobre el medio de cultivo, con
la cuadrcula hacia arriba. Hay que procurara que no queden burbujas
de aire entre el medio de cultivo y el filtro de membrana.
9

8. Rotulamos las placas para identificarlas.

9. Incubamos las placas.
El uso del medio apropiado permite la deteccin rpida de los
coliformes totales, fecales estreptococos fecales por sus colonias
caractersticas.

PRCTICAS EN CLASE:
COLIFORMES TOTALES

Volumen de muestra: 50 ml medidos en probeta

esterilizada.
Medio de cultivo: Agar m-Endo
Temperatura de incubacin: 37C
Tiempo: 24 horas.
Interpretacin de los resultados:
Los coliformes totales aparecern como colonias rojas con
brillo metlico.

COLIFORMES FECALES

Volumen de muestra: 50 ml medidos en probeta

esterilizada.
Medio de cultivo: Agar eosina azul de metileno (Agar

Levine).
Temperatura de incubacin: 44C
Tiempo: 24 horas.
Los dos indicadores inhiben el crecimiento de las bacterias
Gram positivo, inhiben el crecimiento de las bacterias que

no son coliformes.
No es un agar especfico de coliformes totales, solo

crecer en este medio la E.Coli, a temperatura de 44C

Interpretacin de los resultados: colonias de color
verde, con un punto negro y un brillo metlico

10

ESTREPTOCOCOS FECALES

Volumen de muestra: 50 ml medidos en probeta

esterilizada.
Medio de cultivo: Agar Slanetz- Bartley
Temperatura de incubacin: 37C
Tiempo: 24 horas.
Interpretacin de los resultados: colonias rojas, prueba

positiva.
El medio lleva cida sdica, no se puede esterilizar, inhibe
el crecimiento de las Gram negativa. Tambin tiene
cloruro de tetrazodio (precipitado de color rojo en el
interior de la clula, las colonias se ven de color rojo).

RESULTADOS REPRESENTATIVOS

Coliformes totales: de 20 a 100.

Coliformes fecales: de 20 a 80.
Estreptococos fecales: de 20 a 60.

3. CLOSTRIDIUM SULFITO-REDUCTORES
Son bacilos Gram positivo, anaerobios estrictos, forman
esporas y son capaces de reducir el sulfito a sulfuro (con actividad
sulfito reductora)
Indican si hay contaminacin fecal o no. Los clostridium duran
mucho tiempo fuera de su hbitat, puede indicarnos una
contaminacin remota. Indicador de contaminacin fecal.
El medio de cultivo: SPS (Sulfito Polimixina Sulfadiazina). Los
dos ltimos inhiben el crecimiento de las Gram negativas. El sulfito

11

reduce a sulfuro y en presencia de una sal de hierro forma un

precipitado de color negro.
Material de siembra: pipeta graduada de 10 ml.
Tcnica:
1. Fundir el medio a 50C.
2. Calentar 100 ml de agua que se va a inocular, para eliminar
las clulas vegetativas y dejar las esporas. A 80C durante 5 minutos.
3. Enfriar el agua hasta 50C
4. Sembrar. Con una pipeta cogemos 10 ml, hasta el fondo y
conforme vamos ascendiendo vamos saltando el lquido.
5. Como son anaerobios estrictos, aadimos un ml de vaselina
en la parte superior del tubo
6. Incubar a 37C durante 48 horas.
7. Interpretacin de los resultados: Si a las 24 horas
observamos colonias de color negro esfricas, tiene clostridium, sino
dejamos otras 48 horas

Cmo se leen los resultados:

Coliformes totales: por 100 ml

Coliformes fecales: por 100 ml
Estreptococos fecales: por 20ml (Realmente se deben
utilizar 20 ml de medio de cultivo, pero en la prctica se
utiliz 10 m de medio de cultivo, por eso el resultado
obtenido se multiplica por 2).

12

ANALISIS MICROBIOLOGICO DE LOS ALIMENTOS

1. INTRODUCCIN
La contaminacin de los alimentos puede venir de:

Ambiente
Suelo.
Superficie de contacto de los alimentos
Del propio animal.
De los manipuladores

Calidad en la manipulacin de los alimentos, la legislacin ha

establecido una serie de normas para llevar a cabo con rigor este
anlisis.
Tipos de anlisis microbiolgicos de los alimentos que se
van a realizar:

Bacterias aerobias a 37C.

Enterobacterias.
E.Coli.
Salmonella.
Estafilococos Aureus.
Clostridium Sulfito Reductores.
13

1. BACTERIAS AEROBIAS A 37C

Un nmero elevado de bacterias aerobias indican que las
condiciones en las que se ha elaborado o manipulado ese alimento no
son las adecuadas.
Si tiene un nmero bajo, esto no quiere decir que no haya
microorganismos patgenos, y a la inversa, un nmero elevado no
quiere decir que haya microorganismos patgenos. Pero si indica que
no ha sido almacenado, transportado, elaborado o manipulado de la
forma adecuada.
El resultado se expresa en g o ml de alimento (muestra lquida
ml, muestra slida gramo).
Primero: Preparacin de diluciones decimales.
Tomamos 5 gramos de carne, lo trituramos y lo introducimos
de forma asptica en un matraz erlenmeyer esterilizado. Utilizamos
como diluyente agua de peptona tamponada. Qu cantidad de
diluyente se aade? El nmero que hemos pesado de alimento
multiplicado por 9; en este caso 45 ml

5
50

= 0,1 = 10-1

A partir de aqu (suspensin madre)

preparamos las restantes diluciones decimales

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Puntas de pipetas esterilizadas, para

cada dilucin una pipeta esterilizada

Una vez hechas las diluciones seriadas, desde su preparacin

hasta los posteriores anlisis no debe transcurrir ms de dos horas.

Tcnica: Vertido en placa.

1. Lo ideal sera utilizar placas vacas y esterilizadas para cada
dilucin. Aadimos a cada placa vaca un ml de la muestra.
Para cada dilucin utilizamos una punta de micropipeta o
pipeta esterilizada.
2. Vertimos en cada una de ellas medio de cultivo agar nutritivo
o agar PCA a 50-45C. No puede transcurrir ms de diez
minutos desde que echamos el inculo hasta que aadimos
el agar.
3. En cada placa anotamos la dilucin correspondiente, para
posteriormente hacer el recuento.
4. Movemos la placa suavemente, de izquierda a derecha, de
arriba abajo, y viceversa, de manera que se extienda.
5. En posicin invertida la metemos en la estufa a incuba
durante 24-48 horas a 37C

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2. ENTEROBACTERIAS
La familia enterobacterias est compuesta por
microorganismos bacilares, Gram negativos, aerobios y anaerobios
facultativos, no esporulados, mviles e inmviles, fermentadores de
la glucosa, redutores de nitratos anitritos, oxidasa negativos y
capaces de crecer en medios con sales biliares.
Medio de cultivo:
Agar Mac Conkey
Las sales biliares y cristal violeta inhiben el crecimiento de las
Gram positiva. Es un medio selectivo y diferencial (entre coliformes y
no coliformes.
Tcnica de siembra: Extensin en placa
1. Cogemos tres placas con medio de cultivo de agar Mac
Conkey solidificado y fro.
2. Se utiliza la micropipeta o una pipeta esterilizada para tomar
0,1 ml de las diluciones seriadas 10-2, 10-3, 10-4 ( no se toma
de la suspensin madre)
16

3. Antes de pipetear el inculo se homogeniza la muestra.

4. Aadimos con la micropipeta 0,1 ml de la muestra en la
placa con agar solidificado, y la extendemos con el asa de
Dygrasky. Primero, tenemos que introducirla en alcohol y
flamearla, esperamos a que se enfre. Se homogeniza dando
vueltas, pero no llegando con el asa a los bordes de la
placa.
5. Una vez extendido el inculo dejamos que se seque.
6. Hacemos la misma operacin con las otras placas. En cada
extensin esterilizamos el asa de Dygrasky, antes de limpiar
con alcohol y flamearla, se introduce en un vaso con leja.
7. Invertimos la placa y se incuba a 37C, 24 -48 horas.
Interpretacin de resultados:

Coliformes: colonias rosas.

No coliformes: colonias incoloras

En las placas de colonias rosas podemos determinar si

son o no coliformes fecales.

3. DETERMINACIN DE LA E.COLI
Medio de cultivo:
Agar Eosina Azul de Metileno (Agar Levine). Placas
grandes.
Material de siembra: el asa.
Tcnica de siembra:

Agotamiento por estras. Aquellas colonias de color

rosa en el agar Mac Conkey se recogen con el asa de
siembra para realizarles un aislamiento en el medio de

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agar Levine. Sembramos de cada placa donde hayan

aparecido colonias rosas. Lo ideal sera sembrar de cada
una de las colonias para determinarlas.
Temperatura de incubacin: 37C.
Tiempo: 24-48 horas.
Interpretacin de los resultados:

No coliformes: colonias incoloras.

Coliformes totales: colonias rosas.
E.Coli: colonias verde con brillo metlico
La eosina y el azul de metileno son dos indicadores que
inhiben el crecimiento de las Gram positivas.

4. DETERMINACIN DE ESTAFILOCOCOS AUREUS

Estafilococos aureus es un microorganismo de forma coccea
que se agrupa en forma de racimos. Es anaerobio facultativo, Gram
positivo. No todos son patgenos. Puede producir intoxicaciones
alimentarias por produccin de enterotoxinas que persisten en el
alimento.
Primero: Se realizar un enriquecimiento para aislarlo del resto
de estafilococos.
Medio de cultivo: Caldo Gliolitti - Cantoni

Contiene una gran cantidad de cloruro sdico, los nicos

microorganismos que pueden crecer en concentraciones

de hasta 75 g/l son los estafilococos aureus.

Lleva otros dos compuestos: el manitol (es un azcar,
hidrato de carbono) y el cloruro de litio que inhibe el

crecimiento de las Gram negativas.

Tambin se puede hacer la prueba de la catalasa:
estafilococos positivos.

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Tcnica: NMP (Prueba Presuntiva)

De las diluciones 10-1, 10-2, 10-3 tomamos 1 ml y lo

aadimos a cada serie de tubo. Para cada dilucin una

pipeta distinta.
Se cubre la superficie del caldo con vaselina estril

Tiempo de incubacin: 37C durante 48 horas

Interpretacin de los resultados:
Ennegrecimiento de los tubos: Posibles
estafilococos.
Luego consultamos las tablas del NMP

Prueba Confirmativa

Medio de cultivo: Agar Manito-Sal

Es un medio selectivo y diferencial, lleva una gran
cantidad de sal que inhibe el crecimiento de las
Gram positivas.el manitol es un azcar, solo los
estafilococos lo fermetan, produciendo cido.
Tambin lleva un indicador, rojo de fenol; al
principio es de color rojo, al vira se convierte en
amarillo, o un punto negro (sulfuro ferroso).

Tcnica: Extensin en placa

De los tubos positivos de la prueba presuntiva
sembramos con la tcnica de extensin en placa.

Tiempo de incubacin: 37C durante 48 horas.

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Interpretacin de los resultados: colonias que

presenten un halo amarillo.
A las colonias positivas en Manito-Sal se les puede
someter a la prueba de la DNAsa.

5. CLOSTRIDIUM SULFITO-REDUCTORES
Son bacilos Gram positivo, anaerobios estrictos, forman
esporas y son capaces de reducir el sulfito a sulfuro (con actividad
sulfito reductora)
Indican si hay contaminacin fecal o no. Los clostridium duran
mucho tiempo fuera de su hbitat, puede indicarnos una
contaminacin remota. Indicador de contaminacin fecal.
El medio de cultivo: SPS (Sulfito Polimixina Sulfadiazina). Los
dos ltimos inhiben el crecimiento de las Gram negativas. El sulfito
reduce a sulfuro y en presencia de una sal de hierro forma un
precipitado de color negro.

Material de siembra: pipeta graduada de 10 ml.

Tcnica:
1. Fundir el medio a 45C-50C.
4. Sembrar. Con una pipeta esterilizada cogemos 1 ml de la
suspensin madre hasta el fondo, sin soltar el lquido y conforme
vamos ascendiendo vamos saltando el lquido.

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5. Como son anaerobios estrictos, aadimos un ml de vaselina

en la parte superior del tubo
6. Incubar a 37C durante 24 horas.
7. Interpretacin de los resultados: Si a las 24 horas
observamos colonias de color negro esfricas, tiene clostridium.

6. DETERMINACIN DE SALMONELLA
La Salmonella es una enterobacteria, pero no es un coliforme.
Se realizan varias etapas:
1. Preenriquecimiento en medio lquido no selectivo

La suspensin madre 10-1 constituida por 25 g de

alimento en 225 ml de Agua de Peptona Tamponada, se
lleva a incubacin en un matraz de 500 ml a 37C
durante un tiempo mximo de 24 horas.

2. Enriquecimiento en medio lquido selectivo

Medio de cultivo: Caldo Selenito-Cistina CSC

Este medio no se esteriliza en autoclave, se calienta
nicamente para su disolucin, se reparte en matraces
esterilizados de 100ml y para uso exclusivo en el da

de la preparacin
Tcnica:
1. Se agita la suspensin madre tras 24 horas mximo
de incubacin y se traspasa 10 ml de la misma a 100ml del
medio CSC
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Tiempo de incubacin: 37C durante 24 horas

3. Aislamiento diferencial sobre medios slidos selectivos

Medio de cultivo: Agar Hecktoen

Tcnica:
Con el asa de siembra se recoger un poco de medio
selectivo de enriquecimiento y se realizar una siembra

en superficie
Tiempo de incubacin: 37C durante 24-48 horas.

Interpretacin de los resultados: las colonias de

salmonella no producirn viraje del indicador, pues no
fermentan estos azcares, a veces se puede observar un
precipitado negro central (algunas cepas de Salmonella
son capaces de reducir el sulfato).

4. Prueba confirmativa
Prueba Kligler:
Tubo en pico de flauta, se siembra por estra en la
superficie del tubo y por picadura hacia el interior del

medio.
Tiempo de incubacin: 37C durante 24 horas.

Interpretacin de los datos: en el caso de la

salmonella, el pico de flauta aparecer siempre rojo
22

porque no fermentan la lactosa, sin embargo, la base del

tubo ser amarilla por la fermentacin de la glucosa

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