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DE DURANGO
FACULTAD DE MEDICINA - campus GOMEZ PALACIO
MANUAL DE
LABORATORIO
DE
FARMACOLOGIA
II
MEDICO CIRUJANO QUINTO
SEMESTRE
Realiz: ROMAN BALAM
ii
Prefacio
El presente manual de laboratorio recopila cuidadosamente sencillos mtodos
farmacolgicos experimentales que son aceptados por asociaciones e
instituciones dedicadas a la investigacin farmacolgica que permitir al
estudiante comprobar la accin de diversos grupos de frmacos as como
estimular sus aptitudes de observacin crtica
Como una forma de reconocimiento, el nombre de los autores se incluyen en el
titulo de cada prctica. Los experimentos se han optimizado con los materiales,
reactivos e infraestructura existente en la FM-UJED campus Gmez Palacio.
En este trabajo tambin se incluyen prcticas mediante el uso de modelos por
computadora, especficamente con el programa ExPharm 2.0, con licencia
shareware.
Al finalizar el curso de laboratorio de farmacologa II, el estudiante habr
desarrollado habilidades en la manipulacin del material biolgico, observacin de
los efectos farmacolgicos, obtencin de resultados y la discusin de los mismos;
y destrezas que en adelante le permitirn aplicar en la terapia farmacolgica.
Por ltimo, este trabajo es perfectible, por tanto, se agradecern las opiniones que
se hagan llegar y que permitan mejorar este trabajo en beneficio de todos nuestros
alumnos y para fortalecimiento de nuestra querida Facultad de Medicina.
iii
Contenido
Practica no. 1......................................................................................................................................................................... 1
FORMAS FARMACEUTICAS ...................................................................................................................................... 1
Practica No. 2 ...................................................................................................................................................................... 11
PRESCRIPCION DE MEDICAMENTOS .................................................................................................................... 11
Prctica No. 3 ...................................................................................................................................................................... 20
INFLUENCIA DEL pH URINARIO EN LA EXCRECIN DE FRMACOS ........................................................... 20
Prctica No.4 ....................................................................................................................................................................... 27
ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE LOS FRMACOS EN EL ANIMAL INTEGRO - El perfil farmacolgico en la
rata. ................................................................................................................................................................................ 27
Practica No 5 ....................................................................................................................................................................... 33
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANTICONVULSIVA. .................................................................................... 33
Practica No.6 ....................................................................................................................................................................... 37
RELAJANTES MUSCULARES. Mecanismo de accin. ............................................................................................. 37
Practica No. 7 ...................................................................................................................................................................... 42
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANALGESICA ............................................................................................... 42
Practica No 8 ....................................................................................................................................................................... 49
FARMACOMETRIA.-.CURVA DE DOSIS-RESPUESTA CUANTAL. Determinacin de la susceptibilidad a los
efectos sedante, hipntico y letal del pentobarbital. ....................................................................................................... 49
Practica No.9 ....................................................................................................................................................................... 54
VALORACION DEL EFECTO ANTICOAGULANTE DE LA HEPARINA EN LA RATA ..................................... 54
Practica No. 10 .................................................................................................................................................................... 59
EFECTOS TXICOS DEL AC. ACETILSALICLICO EN ESTOMAGO DE RATA................................................ 59
Practica No11 ...................................................................................................................................................................... 61
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANTIDIARREICA.......................................................................................... 61
Practica No. 12 .................................................................................................................................................................... 66
CONTROL FARMACOLGICO DE LA GLUCEMIA accin de los hipoglucemiantes en la rata. ................................. 66
Practica No13 ...................................................................................................................................................................... 69
ADRENERGICOS Y ANTIADRENERGICOS ............................................................................................................ 69
Practica No. 14 (15)..................................................................................................................................................................................141
EFECTO DE FRMACOS SOBRE EL CORAZN AISLADO DE LA RANA
Practica No. 15 (16)145
BIOENSAYO PARA OBTENER UNA CURVA DOSIS RESPUESTA A LA HISTAMINA Y
DETERMINAR, POR COMPARACIN, LA CONCENTRACIN DE UNA SOLUCIN DE
HISTAMINA
Practica No. 16 (17)150.
FARMACOLOGIA OCULAR EN CONEJO
iv
DATOS GENERALES
Asignatura : FARMACOLOGA II
Semestre : 2013 - A
Actividad : PRCTICA DE LABORATORIO
Naturaleza del Curso : OBLIGATORIO
Profesor : Romn A. Prez Baln
METODOLOGA
Se motivar al estudiante a una participacin activa de las clases de prctica de
laboratorio:
Evaluaciones escritas y orales al inicio de cada practica de laboratorio del tema
correspondiente..
Preparacin de los materiales biolgicos y farmacolgicos .
Dominio del modelo experimental y administracin de los frmacos a los animales
de experimentacin.
Observacin de los resultados de acuerdo a los parmetros sealados en el modelo
experimental.
Interpretacin de los resultados observados.
Discusiones y conclusiones de la prctica de laboratorio mediante un reporte
(evidencia)
EVALUACIN DE COMPETENCIAS:
Los estudiantes sern evaluados en forma grupal e individual, considerando la valoracin
cognoscitiva, procedimental y actitudinal con la ayuda de las guas de observacin.
Evidencia de producto: reporte de las prcticas
Evidencias de desempeo:
Evidencias de conocimiento: exposicin oral de los resultados obtenidos en las prcticas
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
7
8
9
10
11
12
13
6
2-5
7
8
9
10
11
14
15
6-9
12
16
13
17
14
vii
viii
Nota: los datos de la bibliografa van hasta el final en el apartado para ellas. No poner
como pie de pgina.
(II) Objetivo(s) de la prctica. (por lo general solo hay que copiarlos de la practica) lo
mismo que las hiptesis.
(III) Material y mtodo.- hay que describir exactamente lo que se hizo en el
laboratorio, (no lo que se iba a hacer), Para un mejor desempeo conviene construir
un esquema o diagrama de flujo de lo que se va a realizar. Usar el mismo tiempo
verbal (pasado simple) y evitar el copy and paste del procedimiento.
(IV) Resultados y discusin: Mostrar sus resultados como TABLAS, GRFICAS y/ o
FIGURAS debidamente rotuladas con ttulo, unidades, y pie de tabla o figura. Cada
tabla y/o grafica deber estar numerada y existir una descripcin completa de la
misma en el texto. En problemas: Incluir clculos. En la discusin se deben comparar
los resultados obtenidos con los reportados por otras fuentes y justificar o explicar las
caractersticas de los datos obtenidos por el equipo en la prctica.
(V)Conclusiones: Sobre los resultados obtenidos y el tema de la prctica, la conclusin
debe ser precisa y concisa.
(VI)Referencias: (mnimo 5 referencias) En general se pueden mencionar dos estilos
principales para incorporar citas en los texto y en lista de referencias:
ix
Fecha:
Asignatura:
Periodo semestral:
INSTRUCCIONES
Marque en los apartados SI cuando la evidencia se cumple; en caso contrario marque NO. En la columna OBSERVACIONES
indicaciones que puedan ayudar al alumno a saber cules son las condiciones no cumplidas, si fuese necesario.
Valor del
reactivo
CUMPLE
SI
5%
5%
5%
5%
5%
5%
10%
25%
25%
10%
+5%
extra
-10%
-10%
-5%
-5%
-5%
-10%
105%
OBSERVACIONES
NO
xi
UJED-GP-Medicina
GUIA DE OBSERVACIN PARA EXPOSICIONES INDIVIDUALES Y POR EQUIPO
Fecha:
Asignatura:
semestre:
Valor del
reactivo
(%)
10
5
5
valor
Exposicin.
a. Utiliza las diapositivas como apoyo, no lectura total.
b. Dominio de los nervios
c. Organizacin de los integrantes del equipo
d. Expresin no verbal (gestos, miradas y lenguaje corporal)
Respeto de tiempo (minutos).
Presentacin de la metodologa, material, reactivos,
diagramas de flujo de lo que se hizo y como se hizo
Resultados y discusin.- Presenta graficas debidamente
explicadas y adems se compara los resultados obtenidos
con lo reportado en la literatura cientfica
Conclusin.- dice exactamente lo que se obtuvo
Preparacin de la exposicin. Dominio del tema. Habla con
seguridad.
Esquema de diapositiva. Colores y tamao de letra
apropiada. Sin saturar las diapositivas de texto.
Disciplina durante la presentacin
10
5
10
20
10
5
10
100
OBSERVACIONES
CALIFICACIN:
xii
Fecha:
Asignatura:
Periodo semestral:
INSTRUCCIONES
Revisar las actividades que se solicitan y marque en los apartados SI cuando la evidencia se cumple; en caso contrario marque NO. En la columna
OBSERVACIONES indicaciones que puedan ayudar al alumno a saber cules son las condiciones no cumplidas, si fuese necesario.
CUMPLE SI O NO
1
OBSERVACIONES
xiii
Practica no. 1
FORMAS FARMACEUTICAS
M. Lorenzana Jimnez, J. A. Rojas Ramrez y O. Amancio Chassin
INTRODUCCION.
Para su administracin los frmacos se someten a un proceso de manufactura cuyo
producto final es la forma farmacutica. A sta se le conoce con diversas denominaciones:
preparado, presentacin, formulacin o especialidad farmacutica, forma de dosificacin,
forma medicamentosa, medicamento o "medicina". La forma farmacutica debe reunir
caractersticas especificas como estabilidad, consistencia, pH neutro, olor, facilidades de
manejo, proteccin y almacenamiento, costo de manufactura y desde luego, aceptacin
por el paciente. La forma farmacutica est constituida por la(s) sustancia(s) activa(s), y
otros compuestos inertes desde el punto de vista biolgico. Estos ltimos reciben distintos
nombres de acuerdo a su uso farmacutico, tales como correctivo, vehculo, excipiente,
colorante, conservador o preservativo, saborizante u otros. La cantidad del compuesto
activo de la forma farmacutica generalmente se expresa en submltiplos del Sistema
Internacional de Medidas (g, mg, g mcg, y mL) o en Unidades Internacionales (UI).
El contenido del vehculo o del excipiente se expresa con las siglas c.b.p. (cuanto baste
para) y c.s.p. (cantidad suficiente para). El estado fsico de los componentes inertes,
permite obtener presentaciones farmacuticas en diferentes formas finales para su
administracin.
La importancia de las formas farmacuticas es tal que estn estrechamente ligadas a los
efectos farmacolgicos de los compuestos activos.
OBJETIVOS DE LA PRCTICA.
1. Conocer las caractersticas fsicas de cada una de las formas farmacuticas.
2. Determinar las diferencias y semejanzas entre ellas.
3. Establecer su relacin con la va de administracin.
MATERIAL Y METODOS.
a) Material.
- Cada equipo de trabajo deber colectar muestras de cada una de las diferentes
especialidades farmacuticas que a continuacin se enlistan:
Barra
Gragea
polvo
aerosol
Capsula
Granulado
pomada
ampolleta
carpule
jalea
solucin
espuma
crema
jarabe
supositorio
frasco mpula
colirio
linimento
suspensin
pasta
elixir
liquido voltil
tableta
pocin
emplasto
locin
tintura
emulsin
ovulo
trocisco
Enema
perla
ungento
1
PRESENTACIONES FARMACUTICAS
ENTERALES
CON DEGLUCION:
ORAL :
SIN DEGLUCION:
SUBLINGUAL :
RECTAL :
APLICACION:
TOPICA CUTANEA: FRICCION:
OTICA:
OCULAR:
VAGINAL :
PARENTERALES
TOPICA MUCOSA:
URETRAL :
RESPIRATORIA:
SUBCUTANEA:
INTRAMUSCULAR:
EXTRAVASCULAR: INTRAARTICULAR:
iNTRAPERI TONEAL :
INTRAMENINGEA:
INTRAVENOSA:
INTRAVASCULAR:
INTRAARTERIAL :
INTRACARDIACA:
TABLA I.- identificacin de las caractersticas organolpticas entre otras de las formas farmacuticas
No
Presentacin
farmacutica
Principio activo
Vas de
admon
Caractersticas
Forma
sabor
Olor
Grupo teraputico
No
Presentacin
farmacutica
Principio activo
Vas de
admon
Caractersticas
Forma
sabor
Olor
Grupo teraputico
No
Presentacin
farmacutica
Principio activo
Vas de
admon
Caractersticas
Forma
sabor
Olor
Grupo teraputico
ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
1) Enumere cinco caractersticas adicionales de las formas farmacuticas.
1)
2)
3)
4)
5)
2) Explique la funcin de las siguientes sustancias que forman parte de las
presentaciones farmacuticas.
Vehculo:
Excipiente:
Conservador:
Edulcorante:
Amortiguador:
Otro:
3) Explique el significado de las siglas c.b.p. y c.s.p., y su funcin en los preparados
farmacuticos.
c.b.p:
c.s.p:
4) Cual es la razn por la que debe conocerse la influencia del pH sobre un
medicamento?
5) En la Tabla IV anote a la derecha de cada va de administracin los nombres de
las presentaciones farmacuticas indicadas.
6) Mencione tres razones por las que un mismo medicamento tiene diferentes
presentaciones farmacuticas.
7) Que pruebas de Control de calidad se realizan al producto final para determinar
la biodisponibilidad y bioequivalencia de los medicamentos, que norma oficial
mexicana los regula?
8) Que importancia tiene determinar la biodisponibilidad y bioequivalencia de las
presentaciones farmacuticas?
9) Por que las emulsiones y las suspensiones deben agitarse siempre, antes de su
administracin?
10) Que objeto tiene el revestimiento entrico y que tipos de preparaciones lo
presentan?
11) Exprese con sus propias palabras el concepto de presentacin farmacutica.
12) Mencione cuatro sustancias que se emplean como placebo.
13) Mencione otras vas de administracin que no se hayan mencionado en esta
prctica
14) Mencione si existen otras formas farmacuticas adems de las aqu tratadas.
GLOSARIO
AEROSOL.- Son dispersiones finas de una solucin
en un gas llamado propelente o impulsor (aire,
oxgeno o un compuesto fluorocarbonado)
formndose nieblas (nebulizaciones) que se
generan en aparatos llamados nebulizadores. Existe
una variedad como las aspersiones que son
soluciones acuosas olegosas para aplicacin tpica
(nariz, faringe y laringe).
AMPOLLETA. Son pequeos recipientes de vidrio,
cilndricos, de paredes delgadas, con una base plana
y otra alargada en forma de llama, cerradas a fuego;
tienen un cuello con rodete que se rompe haciendo
presin. Su contenido puede ser soluciones,
suspensiones o polvos liofilizados estriles que
contienen la sustancia activa. Se administra por va
parenteral (inyectable o inyecciones) o por va oral
(ampolletas
ingeribles).
Generalmente
son
utilizadas para una sola administracin. Existen
modalidades conocidas como intrayect y depot.
BARRA. Preparado slido de forma cilndrica o
prismtica. Algunas estn contenidas en un tubo;
las sustancias se aplican sobre la piel.
CAPSULA. Es cilndrico de bases redondas,
construido de gelatina solidificada (dura o blanda),
compuesto por dos piezas huecas alargadas que
generalmente se separan (otros estn sellados). Se
fabrican en varios tamaos, contienen en su interior
a la sustancia activa generalmente de olor y sabor
desagradable, en forma de polvo o grnulos. Existen
DISCUSION.
Analice los objetivos y desarrollo de esta prctica. Discuta la probable utilidad de este tipo
de conocimientos en su futura prctica mdica.
REFERENCIAS.
1. Brown, W.R.L. and Hadgraf J.V: Drug presentation and prescribing, 5a. edicin.
Pergamon Press. London, England, 1965.
2. Litter, M. Farmacologa Experimental y Clnica. 5a. edicin, "El Ateneo", Buenos
Aires, Argentina, 1975.
3. 3. Remington's Pharmaceutical Sciences. (ed. 17). Gennaro R.A. March Publishing
Company. Pensilvania, U.S.A., 1985.
4. Martin, E.W. Techniques of Medication. J.B. Lippincott Co. Philadelphia, U.S.A.,
1969.
10
Practica No. 2
PRESCRIPCION DE MEDICAMENTOS
C. Izazola Conde y M. Lujn Estrada
INTRODUCCION
a. Antecedentes
La elaboracin de un diagnstico representa la culminacin de una de las etapas ms
importantes en el proceso de investigacin que emprende el mdico con su paciente; la
administracin de una teraputica racional representa el principio de la siguiente, que
deber iniciarse con la elaboracin de la prescripcin adecuada e incluir el seguimiento
del paciente, de su padecimiento y de los efectos del tratamiento administrado. Para
prescribir se requiere de parte del mdico, la comprensin de un amplio espectro de
hechos cientficos y psicosociales. As, la receta mdica, que es el documento que contiene
la orden del mdico para preparar o administrar un tratamiento determinado a un
paciente, debe ser la consecuencia de un proceso de pensamiento lgico; adems, es la
evidencia de la habilidad diagnstica del mdico y la prueba de su capacidad para
seleccionar el rgimen teraputico ptimo para su paciente. Aunque la comunicacin oral
entre el paciente y el mdico en relacin al tratamiento es invaluable, no debe sustituir a
las instrucciones escritas, que deben ser legibles y precisas y quedar asentadas en la
receta mdica. Sin embargo, es comn que haya confusin en cuanto al contenido de una
receta y, en ocasiones, es difcil descifrar su mensaje. El cumplimiento de las ordenes
escritas en una receta puede verse influido por diversos factores, incluyendo la edad del
paciente, el tipo de su padecimiento, la cronicidad del tratamiento y, ciertamente, por la
prescripcin misma(1). As, se ha documentado que en la mayora de los casos en que un
paciente no sigue correctamente una prescripcin, la causa principal es la falta
de claridad en las instrucciones que el mdico ha dado verbalmente o, lo que es ms
grave, por escrito ien la receta! (2)
Prescribir no es un arte, sino consecuencia del quehacer cientfico del mdico. Una
prescripcin bien elaborada es aquella que adems de estar claramente escrita y ser
completa, se ha generado tomando en cuenta las bases farmacolgicas de la teraputica.
Siempre que se prescribe deben tomarse en cuenta tanto los efectos deseables como los
indeseables del medicamento y llevar a cabo una evaluacin del riesgo contra el beneficio
que potencialmente implica su administracin. Para que lo anterior sea posible el mdico
debe estar bien informado. En una encuesta realizada hace 18 aos entre mdicos
norteamericanos (4), se determin que la principal fuente de informacin de los mdicos
para prescribir medicamentos era una publicacin anual editada por la industria. Esa
prctica ha sido criticada por no proporcionar una base adecuada y objetiva para llevar a
cabo la evaluacin costo-beneficio, que es imprescindible antes de tomar una decisin
teraputica.
11
En Estados Unidos, no hay evidencia de que esta referencia haya sido sustituida, de tal
suerte que, aunque antigua, la encuesta sigue teniendo vigencia.
En Mxico, tambin es comn que los mdicos consulten una publicacin de esa
naturaleza, lo que, adems de la desventaja ya sealada, conduce al empleo de nombres
comerciales en las prescripciones. El uso de nombres comerciales, que parece ser una
prctica generalizada, tiene algunos inconvenientes, entre ellos se cuentan: la falta de
flexibilidad en la prescripcin (para sustituir el medicamento, en caso de que no se le
encuentre disponible, o por otro ms barato y de eficacia similar) y e l ms grave, ocultar
la ignorancia de quin prescribe en relacin a su contenido.
Finalmente, conviene hacer hincapi en que una receta bien elaborada es el principio de
un tratamiento con mayores probabilidades de xito (3).
b. Objetivos de la prctica:
l. Escribir las partes de una receta
2. Identificar los errores ms frecuentes en la elaboracin de una receta.
3. Elaborar correctamente una receta mdica.
4. Identificar algunos de los factores que influyen en el cumplimiento de la prescripcin
mdica.
c. Hiptesis de Trabajo:
1. En una muestra de recetas mdicas, es posible encontrar documentos ilegibles e
incompletos.
2. Generalmente se emplean nombres comerciales y no los nombres genricos para
describir a los medicamentos.
3. Las instrucciones del mdico sobre la forma de administracin de los medicamentos son
insuficientes.
4. La obediencia o adherencia al rgimen teraputico por parte de los pacientes no se
cumple en todos los casos.
MATERIAL Y METODOS
a) Material
- Recetas, al menos 5 por cada integrante de cada equipo
b) Marcha del ejercicio
1. Entre sus familiares y amigos debe haber personas que recientemente han visitado al
mdico, o tal vez ha sido usted quin lo ha hecho.
Colecte entre estas personas las recetas mdicas. Conserve las cinco ms recientes que
haya conseguido. Ahora trate de identificar en ellas los siguientes componentes de la
receta:
- Ficha del mdico
i. Nombre completo
ii. Especialidad
iii. Domicilio y telfono
iv. Nmero de cdula profesional
12
Nmero de recetas
individual
mesa
grupo
Nombre completo
Especificacin de la
especialidad
Domicilio
Telfono
No. de R.F.C.
Tabla II
Informacin sobre la ficha del mdico
Nmero de recetas
individual
mesa
/
/
/
/
/
/
grupo
/
/
/
14
TABLA III
Cuerpo de la receta
Cuerpo de la receta
Numero de recetas
individual
mesa
grupo
Fecha
Smbolo RX
B. Nombre genrico
Nombre comercial
Forma farmacutica
C. Dosis
Va de administracin
Horario de administracin
15
Tabla IV
Informacin sobre la ficha del mdico
Cumplimiento de la prescripcin
si
no
otra
No. de recetas
Individual
Equipo
Grupo
Analgsicos
Antibiticos
Antiparasitarios
Vitamnicos
Antihipertensivos
Diurticos
Hipoglucemiantes
Hormonales
Otros
16
equipo
grupo
DISCUSION
Discuta con su grupo y con su profesor los hallazgos realizados y su relacin con lo
expuesto en la Introduccin de la prctica. Finalmente, es conveniente que consulte la Ley
General de Salud en la versin ms reciente que sea posible, para saber a que grupo
pertenecen los medicamentos de las recetas que usted analiz, segn su forma de
preparacin y su naturaleza (Artculo 224), as como por sus denominaciones para uso y
comercializacin (Artculo 225) y para su venta y suministro al pblico (Artculo 226). A
continuacin, se reproducen los artculos mencionados as como algunos de los artculos
del Reglamento de Insumos para la Salud relacionados con las recetas.
ARTCULOS DEL CAPTULO IV DE LA LEY GENERAL DE SALUD
Artculo 225. Los medicamentos para su uso y comercializacin, sern distinguidos por sus
denominaciones genrica y distintiva. La identificacin genrica ser obligatoria. En la
denominacin distintiva no podr incluirse clara o veladamente la composicin del
medicamento o su accin teraputica. Tampoco indicaciones en relacin con
enfermedades, sndromes, sntomas, ni aquellas que recuerden datos anatmicos o0
fenmenos fisiolgicos, excepto en vacunas y productos biolgicos. Las disposiciones
reglamentarias determinarn la forma en que las denominaciones sealadas debern
usarse en la prescripcin, publicidad, etiquetado y en cualquier otra referencia.
Artculo 226. Los medicamentos, para su venta y suministro al pblico al pblico, se
consideran:
I. Medicamentos que slo pueden adquirirse con receta o permiso especial, expedido por
la Secretara de Salud, de acuerdo a los trminos sealados en el Captulo V de este Ttulo;
17
II. Medicamentos que requieren para su adquisicin receta mdica que deber retenerse
en la farmacia que la surta y ser registrada en los libros de control que al efecto se lleven,
de acuerdo con los trminos sealados en el captulo VI de este ttulo. El mdico tratante
podr prescribir dos presentaciones del mismo producto como mximo, especificando su
contenido. Esta prescripcin tendr vigencia de treinta das a partir de la fecha de
elaboracin de la misma.
III. Medicamentos que solamente pueden adquirirse con receta mdica que se podr
surtir hasta tres veces, la cual debe sellarse y registrarse cada vez en los libros de control
que al efecto se lleven. Esta prescripcin se deber retener por el establecimiento que la
surta en la tercera ocasin; el mdico tratante determinar, el nmero de presentaciones
del mismo producto y contenido de las mismas que se puedan adquirir en cada ocasin.
Se podr otorgar por prescripcin mdica, en casos excepcionales, autorizacin a los
pacientes para adquirir anticonvulsivos directamente en los laboratorios
correspondientes, cuando se requieren en cantidad superior a la que se pueda surtir en
las farmacias;
IV.Medicamentos que para adquirirse requieren receta mdica, pero que pueden
resurtirse tantas veces como lo indique el mdico que prescriba;
V. Medicamentos sin receta, autorizados para su venta exclusivamente en farmacias, y
VI.Medicamentos que para adquirirse no requieren receta mdica y que pueden
expenderse en otros establecimientos que no sean farmacias. No podrn venderse
medicamentos u otros insumos para la salud en puestos semifijos, mdulos mviles o
ambulantes.
ARTCULOS DEL REGLAMENTO DE INSUMOS PARA LA SALUD.
Artculo 2.
IV. Denominacin Distintiva, al nombre que como marca comercial le asigna el laboratorio
o fabricante a sus especialidades farmacuticas con el fin de distinguirla de otras similares,
previa aprobacin de la autoridad sanitaria y registro ante las autoridades competentes;
V. Denominacin Genrica, al nombre del medicamento, determinado a travs de un
mtodo preestablecido, que identifica al frmaco o sustancia activa reconocido
internacionalmente y aceptado por la autoridad sanitaria;
Artculo 29.
La receta mdica deber contener impreso el nombre y el domicilio completos y el
nmero de cdula profesional de quin prescribe, as como llevar la fecha y firma
autgrafa del emisor.
Artculo 30.
18
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. AMA Drug Evaluations. AMA Department of Drugs (5a. ed.) W.B. Saunders Co.
Philadelphia, 1983.
2. Blackwell, B.: Treatment adherence. Br . J. Psychiar. 129: 513-531, 1976.
3. Goodman Gilman, A., Goodman, L. A., Rall, T.W., y Murad, F.: The Pharmacological Basis
of Therapeutics. 7a. Ed. The Macmillan Publishing Co., Inc., New York, 1985.
4. Melmon, K. L. and Morrelli, H.: Clnica1 Pharmacology. Basis Principles in Therapeutics.
Macmillan Publishing Co., Inc., New York, 1978.
19
Prctica No. 3
INFLUENCIA DEL pH URINARIO EN LA EXCRECIN DE
FRMACOS
Hermelinda de la Cruz Durn
OBJETIVO
A travs de la cuantificacin de cido acetilsaliclico en orina el alumno determinar la
influencia del pH urinario en la excrecin de frmacos.
GENERALIDADES
El rin es el rgano de excrecin de principios activos y de metabolitos. Para esto,
ejecuta tres funciones: filtracin glomerular, secrecin tubular y reabsorcin tubular.
Filtracin glomerular: el paso del frmaco del plasma al filtrado glomerular se efecta a
travs de la pared del glomrulo por filtracin debido a un gradiente de presin.
Solamente pueden atravesar esta membrana las molculas que poseen un tamao lo
suficientemente reducido: las macromolculas, como la albmina, las globulinas y otras
protenas plasmticas no pueden atravesarla, ni mucho menos el frmaco que se
encuentre unido a ellas.
La velocidad de filtracin es funcin del flujo sanguneo renal, por lo que en casos de
insuficiencia cardiaca se producir un descenso de la excrecin renal de los frmacos. Se
trata de un proceso pasivo que no requiere gasto de energa.
Secrecin tubular: proceso que sigue un mecanismo de transporte activo, que se efecta
en el tbulo proximal, por el que algunos frmacos presentes en la sangre pasan a la luz
tubular. Se trata de un proceso saturable, existiendo, por lo tanto, mecanismo de
competencia por un mismo sistema de transporte activo.
Reabsorcin tubular: proceso por el que el frmaco que a llegado a la luz tubular, ya sea
por filtracin glomerular o por secrecin tubular, es reabsorbido a nivel tubular y pasa de
nuevo a la sangre. Este proceso se efecta por difusin pasiva, por lo que influyen
notablemente la liposolubilidad, el grado de ionizacin y el peso molecular del frmaco a
reabsorber.
Conviene recordar que el pH de la orina puede modificar el grado de ionizacin de
numerosos frmacos y, por tanto, su mayor o menor facilidad para poder ser reabsorbidos
y pasar a la sangre o, de forma alternativa, ser excretados en la orina. A la vista de todo lo
anterior, se puede afirmar que la velocidad de excrecin renal de un frmaco es igual a la
velocidad de filtracin ms la secrecin, menos la velocidad de reabsorcin.
METODO
A) El grupo se dividir en cuatro equipos.
Equipo No.1. Estudiar la excrecin de aspirina en un pH urinario alcalino.
Equipo N0.2: Estudiar la excrecin de aspirina en un pH urinario alcalino.
20
21
1 pipeta de 5mL
1 pipeta de 1mL
1 vaso de precipitado de 250mL
Papel filtro
tableta efervescente de AAS
Papel indicador de pH (escala 3.0 8.0)
22
Tabla I.- Eliminacin de acido acetilsalisilico (AAS) determinado como silicatos en orina,
No
hora
pH
Vol
abs
g de AAS
% eliminado
% eliminado
acumulado
23
Hoja de Registro
Fecha:
Nombre del Voluntario:
Edad:
Peso:
Genero: M ( )
F( )
pH Orina
Volumen
Excretado
Observaciones
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Comentarios:
24
25
Referencias
De la Cruz Durn, H. (2008). Manual de laboratorio de Farmacologa, Universidad
Autnoma de Baja California.
26
Prctica No.4
ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE LOS FRMACOS EN EL
ANIMAL INTEGRO - El perfil farmacolgico en la rata.
M. Medina, E. Garca, M. Lujn, M.A. Mena y R. Rodrguez Carranza.
a. Antecedentes
El anlisis de los efectos de los frmacos en el animal integro es relativamente ms
complejo que cuando se emplea un tejido aislado, ya que los efectos observados pueden
ser consecuencia de acciones que se llevan a cabo simultneamente en sitios ubicados en
distintos aparatos y sistemas. Adems, tales efectos pueden reflejar alteraciones
fisiolgicas en la misma direccin, o bien en sentido opuesto. Ciertos efectos pueden estar
relacionados con el mecanismo de accin principal del frmaco y otros con mecanismos
adicionales. En el animal ntegro los efectos, o la magnitud de los mismos pueden
depender, al menos parcialmente, de la va de administracin y de la velocidad con que el
frmaco llega a los sitios de accin. Asimismo, de la influencia del sistema biolgico; es
decir, de los procesos de biotransformacin, distribucin y eliminacin que sufren las
substancias qumicas. A pesar de estas complicaciones, el estudio de los efectos
farmacolgicos en el animal ntegro es indispensable en la caracterizacin de los efectos
biolgicos de las substancias qumicas, sus resultados permiten suponer, con ciertas
limitaciones, cuales sern sus efectos y su comportamiento en los seres humanos.
Ninguna substancia qumica nueva se debe administrar al hombre sin antes haber sido
sujeta a estudios minuciosos en los animales de laboratorio. En los estudios preclnicos
predominan aquellos que utilizan al animal ntegro, ya que una de sus grandes ventajas es
que reflejan con mayor precisin los efectos clnicos.
A travs del curso prctico de farmacologa se manejaran diversos tipos de preparaciones
integras, las cuales estn diseadas para analizar efectos farmacolgicos diversos
(analgsico, anticonvulsivo, hipotensor, antidiarreico. etc.) y en cada caso se darn las
instrucciones necesarias para su manejo. Esta sesin fue diseada para familiarizar al
estudiante con el manejo del animal integro no anestesiado. Para ello se emplea un
modelo que permite el estudio de efectos farmacolgicos generales, particularmente de
aquellos que se llevan a cabo sobre el sistema nervioso central. Se fundamenta en el
procedimiento del prfil neurofarmacolgico desarrollado por Irwin (1,2,3).
Se trata de un mtodo sencillo y econmico que no requiere de equipo de laboratorio
sofisticado y en el que el proceso de observacin y de manipulacin de los animales de
laboratorio se ha sistematizado de tal manera que cualquier persona bien entrenada es
capaz de distinguir, con un alto nivel de precisin y consistencia, los efectos
neurofarmacolgicos primarios de las substancias qumicas de referencia y con esta
27
informacin delinear perfiles de actividad biolgica que son fundamento para el estudio y
caracterizacin de nuevos productos.
Este procedimiento que requiere una alta capacidad de observacin, utiliza habitualmente
ratones como animal experimental, los cuales reciben dosis diversas del compuesto en
estudio. El perfil general de efectos relacionados con la dosis es caracterstico para un
determinado tipo de frmacos y el mtodo es til para detectar actividad de tipo
neurofarmacolgico. Por ejemplo, los antipsicticos como la cloropromazina y el
haloperidol producen diversas alteraciones de la conducta y efectos neurolgicos y
autonmicos (disminucin de la actividad espontnea, del estado de alerta, de los reflejos,
aumento de la base de sustentacin, marcha anormal, pasividad, incoordinacin muscular,
catatonia, miosis, taquicardia, ptosis, etc,) que reflejan su efecto depresor sobre el SNC, y
dentro del conjunto general de efectos que pueden ser comunes a otros depresores del
SNC, destaca su accin sobre la actividad espontnea y su capacidad de producir ptosis y
catatonia. Los hipnticos, los ansioliticos, los antidepresores, los estimulantes, los
nrcoticos y diversos tipos de frmacos autonmicos producen una serie de
manifestaciones que en su conjunto determinan un patrn peculiar para cada tipo de
frmacos.
Con base en estos perfiles se identifican patrones de efectos semejantes o distintos para
los frmacos en estudio. El perfil neurofarmacolgico utiliza un sistema arbitrario de
cuantificacin para cada parmetro estudiado. La escala va del 0 al 8, y para los signos
normales el valor de referencia (basal) es 4; de tal manera que cuando el frmaco en
estudio disminuye la intensidad de una manifestacin normal el valor que se otorga puede
ser 3, 2, 1, , 0, dependiendo de la magnitud de la disminucin observada. Por el
contrario, si el frmaco aumenta la intensidad o la frecuencia de la manifestacin, el valor
que se otorga es de 5, 6, 7 u 8, dependiendo de la magnitud del aumento. Para los signos
que no se presentan habitualmente en el animal normal (temblor, catatonia) el valor de
referencia (basal) es de 0. Bajo el efecto de algn tratamiento se pueden presentar estas
manifestaciones, en cuyo caso el valor otorgado, dependiendo de la intensidad, ser 1, 2,
3, 4 .
b. Objetivos de la prctica
1. Adiestrar en el manejo del animal no anestesiado
2. Desarrollar en el estudiante su capacidad de observacin y su habilidad para identificar
y cuantificar los efectos inducidos por los frmacos en el animal integro.
3. Agrupar racionalmente las manifestaciones y establecer perfiles (sndromes) de
actividad biolgica.
4. Establecer el perfil neurofarmacolgico del pentobarbital en la rata.
c. Hiptesis de trabajo
De acuerdo a los antecedentes descritos y a la informacin disponible sobre el tema, se
pueden establecer las siguientes hiptesis de trabajo.
28
30
TABLA I
Frmaco:
mg/kg
Efectos
Actividad locomotora
Base de sustentacin
Marcha tambaleante
Temblor
Inmovilidad
Piloereccin
Signo de Straub
Estereotipia
Convulsiones
Pasividad
Escape
Vocalizacin
Facilidad de manejo
Tono muscular
Cuerda tirante
plano inclinado
Catatonia
Abertura palpebral
Exoftalmos
Lagrimeo
Salivacin
Reflejo nociceptivo
Muerte*
pento
3
6
12
diazepam
SS
4
0
0
0
0
0
0
0
0
0
4
0
4
4
4
4
0
4
0
0
0
4
31
DISCUSION
Revise en alguno de sus libros de texto la informacin sobre los efectos farmacolgicos del
diazepam y del pentobarbital, particularmente lo referente al sistema nervioso central
y al autnomo. Revise y compare los resultados obtenidos con cada uno de estos
frmacos, poniendo especial atencin en aquellos efectos que se presentaron
consistentemente y que mantienen relacin con la dosis administrada. Para cada caso,
intente definir un perfil (sndrome) de actividad farmacolgica. Discuta sus resultados en
funcin de los objetivos e hiptesis de trabajo.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Irwin, S: Drug screening and evaluative procedures. Science 136: 123, 1962.
2. Irwin. S: Drug screening and evaluation of new compounds in animals. In: Animal and
Clinical Pharmacological Techniques in Drug Evaluation. Eds. H. Nodine and P.E. Siegler,
Philadelphia, Year Book Med. Pubs. 1964, p. 36.
3. Irwin. S: Considerations for the preclinical evaluation of new psychiatric drugs: a case
study with phenotiazine-like tranquilizers. Psychopharmacologia 9: 259. 1966.
4. Rodrguez, R: Investigacin preclinica en el desarrollo de medicamentos. En: Estado
Actual del Conocimiento en Plantas Medicinales. Lozoya, L. (ed.). Instituto Mexicano para
el Estudio de las Plantas Medicinales. A.C. 1976, p. 173.
32
Practica No 5
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANTICONVULSIVA.
J.A. Galindo-Morales, J . L . Figueroa-Hernndez, E. Garca-Yaez y M.
Medina-Jimnez.
Generalidades
La bsqueda de nuevos agentes anticonvulsivantes implica el someter a prueba, en
modelos animales de "epilepsia", a todos los compuestos recin sintetizados. El
cernimiento inicial requiere del uso de dos modelos complementarios en roedores para
intentar identificar cualquier tipo de actividad "antiepilptica" (5). Uno de ellos,
ampliamente utilizado, es la prueba del electrochoque mximo (ECM), en el cual se evala
la capacidad de inhibir la extensin tnica de las extremidades posteriores inducida por el
electrochoque (3, 9). El segundo modelo es el de las convulsiones inducidas por un agente
qumico: el pentilentetrazol o metrazol, en el cual se evala la capacidad de los frmacos
para inhibir las convulsiones tnico-clnicas inducidas por dicho agente (4,7). Mientras que
la primera prueba es til para predecir la actividad contra las convulsiones tnico-clnicas
generalizadas (gran mal) y la crisis convulsiva focal cortical, la segunda tiene utilidad para
estudiar compuestos capaces de controlar las crisis de ausencia o petit mal. Y cabe
subrayar que en ambos casos se presentan excepciones a la regla(10). Recientemente se
han desarrollado otros modelos de epilepsia, como los modelos genticos de epilepsia en
monos, en los cuales las crisis convulsivas se presentan espontneamente o en respuesta
a estmulos sensoriales especficos. Estos modelos parecen reproducir con mayor
exactitud la epilepsia humana(6); sin embargo, a pesar de que los resultados en los
modelos en primates son ms confiables para predecir la eficacia antiepilptica, estas
pruebas son casi impracticables para propsitos de cernimiento, debido a su alto costo y a
la gran cantidad de nuevos agentes qumicos que se producen cada ao.
El pentilentetrazol es una herramienta muy til para la valoracin de la actividad
anticonvulsiva de los frmacos (7). En los modelos animales, la dosis convulsiva umbral del
frmaco produce actividad motora caracterizada por clonus de los maxilares y de las
extremidades anteriores; estas convulsiones semejan aquellas producidas por la
estimulacin elctrica del cerebro con corrientes de intensidad umbral. A dosis mayores,
el pentilentetrazol induce una crisis generalizada con movimientos clnicos asincrnicos
usualmente seguida por una convulsin tnica; tales convulsiones semejan aquellas
producidas por la estimulacin cerebral mxima (ECM), en las cuales los movimientos de
las extremidades en flexin son seguidas de movimientos tnicos de extensin. Por lo
tanto, las convulsiones del metrazol contrastan significativamente con las producidas por
la estricnina, las cuales se caracterizan por presentar nicamente movimientos de
extensin.
33
OBJETIVOS DE LA PRCTICA.
1. Caracterizar el patrn convulsivo inducido por el acido kainico en la rata.
2. Determinar la capacidad anticonvulsiva del pentobarbital sobre el modelo de epilepsia
inducido por el acido kainico en la rata.
HIPOTESIS DE TRABAJO.
Con base a los datos mencionados en los antecedentes, se pueden proponer las siguientes
hiptesis de trabajo:
1. El acido kainico produce un cuadro convulsivo cuyas caractersticas permiten el estudio
de frmacos con propiedades anticonvulsivas.
2. El pentobarbital inhibe el desarrollo del cuadro convulsivo inducido por acido kainico.
MATERIAL Y METODOS.
a) Material.
- 4 jeringas hipodrmicas de 1 mL tipo tuberculina
- 1 balanza para pesar animales
- 1 plumn para marcar animales
- 1 frasco con solucin salina
- 1 frasco con solucin de pentobarbital sdico a la concentracin de 2 mg/mL
- 7 ratas adultos machos de 200 a 300 g de peso por mesa
- 1 tubo conico con solucin de acido kainico a la concentracin de 15 mg/ 5 mL por mesa
- 1 caja de acrlico transparente.
b) Marcha del experimento.
1. Cada mesa de trabajo recibir 7 ratas; pselas y asgneles un nmero al azar,
2. En cada mesa, las ratas del No. 1 al 4 recibir solucin salina (0.1mL/10 g de peso, i.p.) y
la rata No. 1 ser considerado como control. Anote el tiempo de administracin y 15 min
despus inyecte por va intraperitoneal el acido kanico a las dosis de 10, 15 y 20 mg/kg a
los ratas 2, 3 y 4 respectivamente. Deposite los animales en la caja de acrlico, observe y
anote en la Tabla 1 las alteraciones que detecte en un lapso de 70 min.
3. Terminado lo anterior, administre por va intraperitoneal el pentobarbital sdico en
dosis de 8, 16 y 24 mg/kg a las ratas No. 5, 6 y 7 respectivamente, observe y anote en la
Tabla II la presencia (+) o la ausencia ( - ) de sedacin o inmovilidad de la rata.
4. Administre acido kanico (recin preparado) por va intraperitoneal 15min despus del
pretratamiento con pentobarbital a las dosis de 10, 15 y 20 mg/kg a las ratas 5, 6 y 7
respectivamente y deposite los animales en la caja de acrlico.
5. En todos los casos observe cuidadosamente, antes y despus de la aplicacin de acido
kanico a los animales y determine la presencia (+) o la ausencia ( - ) de crisis convulsivas
tnicas (etapa 4). El perodo mximo de observacin ser de 90 min en todos los casos.
Anote los resultados en la Tabla II.
6.- administre diazepam intraperitoneal a una dosis de XX mg/kg cuando se presente por
segunda vez la crisis severa
7. En la Tabla III anote los resultados obtenidos en el grupo.
34
DISCUSION.
Con base en los antecedentes descritos, la informacin disponible sobre el tema, y
considerando los objetivos e hiptesis de trabajo, discuta los resultados obtenidos en esta
sesin. Cual es el mecanismo de proteccin del pentobarbital y del diazepam contra los
efectos del KA, cree que el pentobarbital o el diazepam tuvo un efecto protector? Cmo
lo saben?
CUESTIONARIO
1. Explicar que es un ataque convulsivo y que es lo que le da origen.
2. Causas principales de los ataques convulsivos.
3. Tipos de epilepsia.
4. Sealar los medicamentos anticonvulsivos.
5. Mecanismos de accin de los barbitricos y el acido kainico.
6.-mencione al menos 3 frmacos para detener la actividad convulsiva
7.-mencione al menos 3 frmacos para prevenir la actividad convulsiva
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
1. Putnam, A.J. and Merritt, H.H.: Experimental determination of the anticonvulsant
properties of some phenyl derivatives. Science 85: 525-526, 1937.
2. Fritsch, G. & Hitzing, E: Ueber die electrische erregbarkest des grosshirns. Arch. Anat.
Physiol. Wissenseh. Med. 37: 300-332, 1870.
3. Toman, J.E.P., Swinyard, E.A. and Goodman, L.S.: Properties of maximal seizures and
their alteration by anticonvulsant drugs and other agents. J. Neurophysiol. 9: 231-240,
1946.
4. Hildebrandt, R.: Pentamethylentetrazol (cariazol). 1 Mitteilung Naunyn Schmiedebergs
Arch. Pharmacol. 1168:100-116, 1926.
5. Krall, R.L., Penry, J.K., White, B.G., Kupferberg, H.J. and Suinyard, A.E.: Antiepileptic drug
development: II anticonvulsant drug screening. Epilepsia 19:409-428, 1978.
6. Loscher, W.: Genetic animal models of epilepsy as a unique source for the evaluation of
anticonsulsant drugs, a review. Methods find. Exp. Clin. Pharmacol. 6 (9): 531-547, 1984.
7. Swinyard, E.A.: Laboratory evaluation o antiepileptic drugs. Review of laboratory
methods. Epilepsia. 10:107-119, 1969.
8. Gilman, S.L., Goodman, L.G. and Rall, T.: The pharmacological basis of therapeutics. 7th.
Ed. McMillan Co. New York, 1985.
9. Swinyard, E.A.: Laboratory assay of clinically effective antiepileptic drugs. J. Am. Pharm.
Asoc. 38: 201-204, 1949.
10.Woodbury, D.M., Penry, J.K. and Pippenger, C.E.: Antiepileptic drugs. 2th. Ed. Raven
press, New York, 1982.
35
Tiempo de admon
del pretratamiento
Rata
TABLA I
Registrar el tiempo en que apareci cada uno de los efectos y el tiempo de duracin
efectos (tiempo de latencia en minutos)
Dosis KA
Tiempo
de
admon
del KA
etapa 1
Inmovilidad,
salivacin,
chasquidos,
Sacudidas
etapa 2
extensin de
la cola o de la
extremidad
anterior,
postura rgida
etapa 3
movimientos
repetitivos,
meneo de
cabeza,
salivacin
etapa 4
etapa 5
cra y cada
convulsiones
clnico-tnicas
severas
1
2
3
4
5
6
7
36
Practica No.6
RELAJANTES MUSCULARES. Mecanismo de accin.
M. Lujn, A.E. Campos, M. Villarejo y J. Mijangos
INTRODUCCION
a. Antecedentes
El trmino de relajante muscular se usa para referirse a aquellos frmacos que producen una
parlisis selectiva o relajacin del msculo esqueltico (1). Se puede alcanzar algn grado de
relajacin muscular por el bloqueo de interneuronas espinales con frmacos del tipo de los
"tranquilizantes menores" (benzodiazepinas, derivados del propanediol, etc.); sin embargo, los
relajantes musculares de este tipo no son adecuados para producir una relajacin muscular
quirrgica y su uso se limita al tratamiento de espasmos musculares agudos asociados a
traumatismos e inflamacin (1).
Por otro lado, casi todos los anestsicos generales pueden inducir relajacin muscular; sin
embargo, esto slo se logra durante los estadios ms profundos de la anestesia general (2). De tal
forma que, una buena relajacin muscular que sea de utilidad en ciruga y que ayude a reducir las
concentraciones usadas de anestsico general ser aquella que interrumpa la transmisin de
impulsos en la unin neuromuscular (3).
Es bien conocido que la acetilcolina es el transmisor en la placa neuromuscular, por lo que la
transmisin a este nivel puede interrumpirse de varias maneras (3):
- Inhibicin de la liberacin de acetilcolina, por toxina botulinica, Mg++ y otros agentes.
- La despolarizacin de la placa neuromuscular puede evitarse al ocupar, por un
antagonista de la acetilcolina, el receptor colinrgico.
- Un exceso de acetilcolina, o frmacos con propiedades similares, pueden inducir una
despolarizacin prolongada y, despus de una respuesta inicial, la placa neuromuscular no
responder a impulsos nerviosos; es decir, permanece despolarizada.
El primer mtodo tiene la desventaja de ser difcil de controlar para un uso clnico, pero es de
importancia toxicolgica.
El segundo y tercero se usan en la clnica, conjuntamente con la administracin de anestsicos
generales y a los frmacos empleados se le conoce, respectivamente, como bloqueadores
competitivos y despolarizantes (4).
El ejemplo clsico del primer grupo es el curare o uno de sus alcaloides, la d-tubocurarina. Como
resultado de la ocupacin de receptores colinrgicos en la placa neuromuscular por la
d-tubocurarina, pocos receptores estn disponibles para interactuar con la acetilcolina; por lo
tanto, no es posible el inicio del potencial de accin, a menos que la d-tubocurarina fuera
desplazada del receptor por un exceso de acetilcolina. Los frmacos que se usan como
antagonistas del curare son los inhibidores reversibles de la colinesterasa. El curare produce una
parlisis flcida progresiva que se inicia con los msculos de la cara, despus los de las
extremidades y finalmente los respiratorios.
El ejemplo clsico de los relajantes despolarizantes es la succinilcolina. Acta como si existiera un
exceso de acetilcolina que no es hidrolizada por la acetilcolinesterasa (verdadera). Su inicio de
accin es rpido, pero su duracin es corta, debido a que es destruido rpidamente por la
butirilcolinesterasa (pseudo), excepto en los raros casos de deficiencia gentica de la enzima (5).
37
38
2. Distribyalos al azar en dos grupos, A y B. En cada caso, pselos, asgneles un nmero al azar,
mrquelos, y anote sta informacin en la Tabla I
3. Los ratones del grupo A recibirn por va subcutnea (s.c.) la solucin A en las dosis que se
indican en la Tabla I.
4. Los animales del grupo B recibirn por va subcutnea la solucin B en las dosis que se indican
en la Tabla II.
5. Prepare las diluciones necesarias a partir de la solucin patrn con el fin de administrar a razn
de 0.1 mL X 10 g de peso.
6. Simultneamente a la administracin de la primera dosis de la sustancia A a un ratn,
administre la primera dosis de sustancia B a otro ratn y as sucesivamente. Anote en la Tabla I el
tiempo correspondiente. Deje un intervalo de 10 min entre cada par de ratones.
7. Inmediatamente despus de la administracin, observe cuidadosamente durante 4 min a los
dos ratones y realice las anotaciones pertinentes.
8. Realice lo que se describe en el inciso No. 1 para cada ratn a los 5, 10, 20 y 40 despus de la
inyeccin s.c. y determine si permanecen (+) o no permanecen (-) sujetos a la tela de alambre. Se
considera que permanecen cuando duran 3 min sin soltarse. Anote el signo correspondiente y el
tiempo de permanencia en la Tabla I.
9. En la Tabla II, anote los resultados obtenidos por todo el grupo. Con estos datos construir una
curva de tiempo-efecto, anotando en las abscisas el tiempo en min despus de la administracin y
en las ordenadas el porcentaje de respuesta para cada dosis.
10. De los animales recuperados a los 40 min, seleccione dos ratones que hayan recibido solucin
A y dos que hayan recibido solucin B. Los A recibirn la dosis mayor de sustancia A (3 mg/kg), slo
que a uno de ellos se le administrar fisostigmina 0.3 mg/kg i.p., 5 min antes. Esto se repetir para
la sustancia B, usando en este caso la dosis mayor de sustancia B (10 mg/kg).
11. Realice los pasos 1, 6, 7 y 8. Observe y registre los efectos en la Tabla III.
12. DEMOSTRACION A CARGO DEL PROFESOR. Administrar 1 mg/kg de la sustancia A a uno de los
pollos y la misma dosis de la substancia B a otro. Pedir a los alumnos que observen
cuidadosamente y que anoten los efectos de estas substancias.
13. En los dos animales restantes, administrar 3 mg/kg de fisostigmina 5 min antes de la
administracin de las substancias A y B a las dosis indicadas. Pedir a los alumnos que observen
cuidadosamente y que anoten las diferencias en relacin a lo observado previamente.
14. Con los resultados obtenidos, identificar las substancias A y B.
15. El profesor podr cambiar de acuerdo a su criterio esta demostracin.
TABLA I
GRUPO A SOLUCION A
Ratn peso
Dosis
No.
mg/kg
1
0.03
2
0.1
3
0.3
4
1.0
5
3.0
Tiempo
admon.
Tiempo de la lectura
5 10
20
40
39
TABLA I (CONTINUACION)
GRUPO B SOLUCION B
Ratn
No.
6
7
8
9
10
peso
Dosis
mg/kg
0.1
0.3
1.0
3.0
10.0
Tiempo
admon.
Tiempo de la lectura
5 10
20
40
TABLA II
SUSTANCIA A
Dosis
mg/kg
Porcentaje de respuesta
5
10
20
40
0.01
0.03
0.1
1.3
1.0
SUSTANCIA B
Dosis
mg/kg
Porcentaje de respuesta
5
10
20
40
0.03
0.1
0.3
1.0
3.0
Solucin A 3 mg/kg
5
Tiempo lectura
10
20
40
40
Observaciones:
DISCUSION
Con fundamento en los antecedentes descritos, en la informacin disponible sobre los distintos
elementos del tema, en las hiptesis y objetivos de este estudio, analice los resultados obtenidos y
establezca la identidad de las sustancias A y B. En un cuadro distinga las diferencias observadas
con estos dos relajantes y discuta el porque de cada una de estas diferencias.
CUESTIONARIO
1.- explique el funcionamiento de placa mioneural. Describir los bloqueadores neuromusculares.
2.- Sealar los mecanismos de accin de las endorfinas despolarizantes y no despolarizantes.
3.- Diferencias entre acetilcolina y succinilcolina.
4.- Indicar la reaccin txica ms peligrosa del bloqueo neuromuscular en el humano.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. SEEMAN, P. y Cols.: Principles of Medical Pharmacology (3a. ed). The University of Toronto
Press, 1980.
2. GOODMAN GILMAN, A. y cols, : The Pharmacological Basis of Therapeutics (7a. ed.). The Mac
Millan Co., New York, 1985.
3. BOWMAN, U. C. and RAND, M. J.: Textbook of Pharmacology (2a. ed.). Blackwell Scientific
Publications, Oxford, 1980.
4. RODRIGUEZ R. y Cols.: Vademcum Acadmico de Medicamentos. Tomo II(1a. ed.). Programa de
Libros de Texto Universitario. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Mxico, D. F., 1984.
5. BEVAN, J. A. and THOMPSON,J.: Essentials of Pharmacology. (3a. ed.). Harper and Row
Publishers. Philadelphia, 1985.
6. BRUMBACK, R. A.: The neuromuscular junction. Part 1: Physiology and the effects of drugs and
toxins. Am. Fam. Phys. 23:188-193, 1981.
41
Practica No. 7
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANALGESICA
R. Rodrguez Carranza
I.-INTRODUCCION
A. Antecedentes
La medicina, en porcentaje elevado de casos, se refiere al tratamiento de los sntomas generados
por una lesin o por una enfermedad. El sntoma que con mayor frecuencia enfrenta el mdico
durante su ejercicio profesional es, probablemente, el dolor; sndrome de sensaciones
desagradables que experimentan inevitablemente casi todos los seres humanos y la principal
razn de que consuman medicamentos. Ante la presencia de dolor el mdico es requerido para su
alivio y para tratar las causas que lo generan.
En esta situacin, el dolor asume el carcter de enfermedad y la eficacia de su tratamiento
depende de la comprensin de los elementos anatmicos, fisiolgicos, bioqumicos y psicolgicos
subyacentes. La importancia que este sntoma tiene para los seres vivos y la trascendencia mdica
que representa su control ha generado un gran nmero de investigaciones que pretenden aclarar
su significado e identificar los mecanismos involucrados en su gnesis e integracin (1, 2). En los
ltimos 20 aos se han hecho avances considerables en la comprensin del dolor. Se ha
confirmado que el dolor es uno de los mecanismos de alarma ms valiosos del organismo, se han
caracterizado con detalle sus vas neurofisiolgicas y se han identificado un buen nmero de
substancias involucradas en este proceso (sustancia P, prostaglandinas, bradicinina, endorfinas);
de ellas, conviene subrayar por su importancia a las endorfinas, pptidos endgenos con efectos
biolgicos muy semejantes a los descritos para los opiceos.
El manejo del dolor es un problema tpicamente interdisciplinario, que va desde el empleo de
substancias qumicas de fcil administracin hasta procedimientos neuroquirrgicos
neosofisticados. Afortunadamente, en el mayor porcentaje de los casos se le puede controlar con
frmacos capaces de inducir un estado de analgesia; es decir, insensibilidad, o disminucin de la
sensacin, al dolor. A los frmacos capaces de aliviar el dolor, sin alterar significativamente el
estado de conciencia, se les denomina analgsicos. De hecho existe un gran nmero de frmacos
que, a travs de mecanismos diversos, alivian el dolor; sin embargo, tradicionalmente slo se
consideran como tales a los medicamentos que pertenecen a alguno de los siguientes grupos:
1. ANTIINFLAMATORIOS-ANTIPIRETICOS, cuyo prototipo es el cido acetilsaliclico.
2. OPIACEOS, dentro de estos se distinguen dos subgrupos:
a) agonistas, cuyo prototipo es la morfina.
b) agonistas-antagonistas, de los cuales solo la pentazocina tiene utilidad clnica.
Estos grupos se distinguen entre si claramente por sus propiedades farmacolgicas
y por su utilidad clnica.
Por otro lado, a pesar de la bsqueda intensa y sistemtica de analgsicos ms eficaces y seguros,
el cido acetilsaliclico y la morfina continan siendo prototipo de sus respectivos grupos. En
particular, no ha sido posible encontrar una sustancia analgsica tan potente como la morfina y
que carezca de sus reacciones adversas. Lo anterior parece atribuirse principalmente a los
siguientes hechos:
a) a la naturaleza subjetiva del dolor
42
43
44
4. por su semejanza estructural con los analgsicos conocidos, la sustancia "X tiene propiedades
antinociceptivas.
II.- MATERIAL Y METODOS
a) Material:
- 8 ratas hembras adultos (<250 g de peso) por mesa.
- 1 caimn recubierto con hule en sus extremos.
- 3 jeringas hipodrmicas de 1 mL, tipo tuberculina.
- 3 agujas hipodrmicas No. 22.
- 1 reloj con segundero.
- 1 bscula para pesar animales.
- 1 plumn para marcar animales.
- 1 frasco con solucin salina.
- 5 frascos mpula.
- 1 frasco con una solucin de dextropropoxifeno a la concentracin de 9.0 mg/ml.
- 1 frasco con la solucin problema, marcado con "X".
b) Marcha del experimento (o procedimiento):
1. Cada mesa de trabajo recibir 8 ratas; pselos, numrelos y anote sta informacin en la tabla
No. 1.
2. Aplique el caimn a un centmetro de la base de la cola del ratn, procurando que la cola quede
colocada en la parte media de la zona de presin de la pinza. Esta maniobra provoca una
respuesta conductual caracterizada por vocalizacin, movimientos encaminados a encontrar la
pinza y moderdura de la pinza. Slo esta ltima respuesta ser considerada como una
manifestacin de dolor (+) y slo se utilizarn los animales que muerdan la pinza dentro de un
lapso de 10 segundos despus de su aplicacin. Deseche todos los animales que no respondan en
el lapso sealado.
3. Asigne la dosis de propoxifeno correspondiente a cada uno de las ratas seleccionados al azar o
bien mediante una tabla de nmeros aleatorios y colquelos en orden creciente de acuerdo a la
dosis. En este experimento se probarn las siguientes dosis de dextropropoxifeno:
1. 30 mg/kg de peso
2. 39 mg/kg de peso
3. 52 mg/kg de peso
4. 68 mg/kg de peso
5. 90 mg/kg de peso
4. la rata nmero 6 ser utilizada como control y recibir solucin salina (0.1 mL/100 g de peso).
5. Prepare las soluciones 1, 2, 3 y 4 a partir de la solucin patrn (9.0 mg/ml) y administre 0.1 de
mL x 100 g de peso.
6. Administre la dosis correspondiente por va intragastrica a cada uno de las ratas, con intervalos
de tres minutos entre cada administracin. Anote el tiempo de administracin en la columna
correspondiente de la Tabla 1.
7. Administre la substancia "X" por via intraperitoneal a razn de 0.1 mL/100 g de peso a la rata
No. 7 y de 0.2 mL/100 g de peso la rata No. 8.
8. Aplique la pinza arterial, como se describe en el inciso No. 2 , a los 10'. 20', 40' y 80'. Despus de
la administracin de los farmacos y determine si el animal muerde o no la pinza durante los 10
segundos despus de prensarle la cola.
45
Se considera que hay efecto analgsico (-) cuando el animal no muerde la pinza, anote los
resultados en los tiempos de lectura correspondiente. El animal que recibi solucin salina servir
como testigo (o control).
9. En la tabla No. 2 anote los resultados obtenidos por todo el grupo.
10. Construya una curva de tiempo-efecto anotando en las abcisas el tiempo en minutos despus
de la administracin y en las ordenadas el porcentaje de respuesta para cada una de la dosis.
11. Utilizando los resultados obtenidos en el tiempo de efectos mximo, calcule la dosis efectiva
media (DE50).
III.- Resultados
Tabla I
propoxifeno
rata
Peso
Dosis
Tiempo
admon
10
Tiempo de lectura
20
40
80
No. 1
No. 2
No. 3
No. 4
No. 5
No. 6
Solucin problema X
No. 7
No. 8
46
TABLA II
RESULTADOS OBTENIDOS POR EL GRUPO
PROPOXIFENO
Dosis
mg/kg
Porcentaje de respuesta
10
20
40
80
No. 1
No. 2
No. 3
No. 4
No. 5
No. 6
Solucin problema X
No. 7
No. 8
47
IV.-Discusin
Con fundamento en los antecedentes descritos, en la informacin disponible sobre los
distintos elementos del tema y en las hiptesis y objetivos de este estudio, analice los
resultados obtenidos. Discuta las razones por las cuales sus resultados confirmaron la
informacin previa o mostraron diferencias significativas. Analice los resultados obtenidos
con la solucin problema. Finalmente, derive conclusiones de este experimento, buscando
su relacin con las hiptesis y objetivos del estudio.
V.-. REFERENCIAS
1. Way. E. L: New concepts in pain and its clinical management. F. A. Davis Company,
Philadelphia, 1967.
2. Beks, J.W.F: El manejo del dolor. Ed. El manual Moderno, S. A, Mexico, D. F, 1980.
3. Haffner, D: Experimentalle Prfung Schmerzstillender Wittel. Dtsch. Med. Wschr.
55:731, 1929.
4. Banziger, R: Pharmacological techniques in drug evaluation. In: J. H. Nodine and P.E.
Siegler, Eds. Year Book Medical Publishers, Chicago, 1964.
5. Collier, H. O. J.: Evaluation of drug activities: Pharmacometrics. D.R. Laurence and A. L.
Bacharach, eds, Academic Press, London and New York, 1964.
6. Rodriguez R. and Pardo, E. G.: Drug reversal of pain induced functional impairment.
Arch. int . Pharmacodyn 172: 148, 1968.
7. Collier, H. O. J., Dinneen, L. C., Johnson, Ch. A, and Schneider, C: The abdominal
constriction response and its suppression by analgesic drugs in the mouse Br. J. Pharmac.
Chemother. 32:295, 1968.
48
Practica No 8
FARMACOMETRIA.-.CURVA DE DOSIS-RESPUESTA
CUANTAL. Determinacin de la susceptibilidad a los
efectos sedante, hipntico y letal del pentobarbital.
J. L. Figueroa-Hernndez, C. Izazola Conde, M. Medina y R. F. Rodrguez Carranza
INTRODUCCION
a. Antecedentes
Uno de los principios fundamentales de la farmacologa establece que la magnitud de la respuesta
generada por un frmaco es funcin de la dosis administrada. Asimismo, las respuestas biolgicas
a los frmacos son de tipo gradual; es decir, que la respuesta va aumentando en forma continua
hasta alcanzar la capacidad mxima de respuesta de un sistema determinado, cuando se va
administrando tambin en forma progresiva la concentracin del frmaco en cuestin.
Adems de conocer la capacidad de respuesta de un sistema especifico o de un animal integro
(unidad biolgica), es importante conocer la relacin que exista entre la dosis de un frmaco y la
proporcin de unidades u objetos biolgicos que exhiben un efecto farmacolgico determinado. A
este tipo de relacin dosis-efecto se le conoce como CUANTICO o CUANTAL o TODO o NADA y el
objeto biolgico puede ser un organismo intacto, un tejido, una clula o un sistema subcelular. En
este caso se asume que las unidades biolgicas responden con su mxima capacidad o no
responden; por ejemplo, se puede establecer la relacin que existe entre la dosis de un analgsico
y el nmero de individuos que reportan alivio total de un dolor especfico. Un ejemplo ms obvio
lo constituye la relacin entre la dosis y la presencia de una reaccin toxica determinada en un
grupo de individuos que recibieron un medicamento. En ambos casos, para explorar esta relacin
es necesario disponer de un buen nmero de unidades biolgicas y conocer cules y cuntas de
ellas respondieron o no a una dosis determinada. De lo anterior, se puede entender que la dosisrespuesta cuantal es una expresin de la FRECUENCIA con la cual una dosis de un frmaco produce
una respuesta; mientras que la dosis-respuesta gradual es una expresin de la INTENSIDAD de una
respuesta.
Por otro lado, cabe recordar que suelen existir grandes diferencias en la susceptibilidad de los
frmacos entre los animales de diferentes especies y an entre los miembros de una misma
especie; asimismo, que el grado de susceptibilidad a un frmaco se distribuye en la poblacin
como otros caracteres biolgicos, de manera que la sensibilidad individual varia alrededor de una
media en forma tal que si sta variacin se analiza grficamente se obtiene un histograma en
forma de campana. En su forma bsica, la curva de dosis-respuesta cuantal toma la forma de una
distribucin normal o gaussiana, modelo matemtico que se aproxima al lmite a que llegara el
histograma si el nmero de sujetos estudiados es muy grande y los intervalos de dosis muy
pequeos. Cuando se acumulan los porcentajes de los sujetos que han respondido a cada nivel de
dosis, la grfica se aproxima a la curva en S itlica (curva normal acumulada o integrada). La
construccin de una curva de esta naturaleza implica el haber administrado cada una de varias
dosis del frmaco en estudio a un grupo de sujetos y el haber establecido el porcentaje de estos
que reacciona con el efecto buscado. Estos porcentajes se usan para determinar puntos en una
grfica en la que las ordenadas representan la frecuencia de una respuesta y las abscisas la dosis
49
administrada. El lugar de los puntos resulta en una curva en S itlica, la que relaciona el porcentaje
de individuos que mostraron un efecto especfico con cada una de las dosis administradas.
Frecuentemente estas curvas muestran una distorsin definida en un extremo de la curva,
habitualmente el superior. Esta distorsin puede corregirse con una transformacin matemtica
apropiada de la dosis; la ms frecuentemente usada es la transformacin logartmica, en la cual la
dosis simplemente se convierte en el logaritmo de la dosis; esto mejora substancialmente la forma
y la simetra de las curvas. Las curvas normales integradas son generalmente lineales en la parte
central, comprendiendo del 16 al 84% de la respuesta; sin embargo, sus extremos no son
habitualmente lineales y, de hecho, slo se aproximan asintticamente a los lmites de respuesta
superior e inferior. Para hacer que las curvas de dosis respuesta cunticas sean lineales los datos
se trazan en una grfica en la que en las ordenadas se expresan en mltiplos de la desviacin tipo
que se llaman desviaciones equivalentes normales. Este sistema fue ulteriormente modificado con
la eliminacin de los signos positivo y negativo con la frmula de agregar 5 a cada desviacin. A
esta unidad de respuesta se le llama probita o probit y existen tablas que facilitan la conversin de
porcentajes a probits (ver al final). Todas estas transformaciones facilitan los clculos estadsticos.
La curva cuantal nos permite conocer la dosis mnima necesaria (umbral) para producir un efecto
determinado en una muestra de una poblacin de unidades biolgicas. En el mismo sistema, la
mediana de la curva es la dosis con la cual el 50% de la poblacin manifiesta un efecto especfico y
el 50% no presenta tal efecto. Por ello, el trmino de dosis efectiva media (DE50) o de dosis txica
media (DT50), se emplea para expresar la cantidad mnima necesaria de un frmaco para provocar
un efecto farmacolgico determinado en el 50% de la poblacin. Considerando la diversidad de
efectos farmacolgicos, es claro que para cada medicamento pueden establecerse varias DE50,
diferentes DT50 y la dosis letal media (DL50).
Por otro lado, es deseable que se tenga informacin sobre la seguridad o peligrosidad relativa de
los frmacos que se emplean en la teraputica y que el clnico conozca los fundamentos que
permiten juzgar estos aspectos.
Un ndice valioso es el llamado margen de seguridad (ndice teraputico), que se obtiene
experimentalmente al determinar y comparar las dosis que inducen un efecto farmacolgico til
(analgesia, hipotensin), con las dosis que producen efectos indeseables (diarrea, vmito,
incoordinacin muscular, muerte).
A nivel clnico, la seguridad de un medicamento depende del grado de separacin entre las dosis
que producen un efecto deseable y las dosis que producen reacciones adversas. Y cabe repetir que
la mayora de los medicamentos producen varios efectos biolgicos y que en ciertas dosis todos
los frmacos producen efectos indeseables y que por lo tanto ningn frmaco esta exento de
producir efectos txicos.
Las curvas de dosis-respuesta cuantal permiten una estimacin precisa de las DE50, y de las DT50,
con estos datos es posible conocer el MS50 (DL50/ DE50) otros mrgenes de seguridad (DT5 / DE95;
DT1 / DE99) diferentes al convencional y que tienen mayor significancia clnica:
b. Objetivo de la prctica:
1. Identificar los efectos sedante, hipntico y letal del pentobarbital en el ratn.
2. Identificar, si es posible, otros efectos distintos a los sealados.
3. Establecer la relacin dosis-respuesta a los efectos del fenobarbital en un grupo de ratones.
50
4. Determinar la DE50 para los efectos sedante e hipntico y la DL50 en esta especie.
5. Calcular el MS50 en esta especie.
C.- Hiptesis de trabajo:
De acuerdo a los antecedentes descritos y a la informacin disponible sobre el pentobarbital, se
pueden manejar las siguientes hiptesis de trabajo:
1. El pentobarbital produce todos los grados de depresin del sistema nervioso central, desde la
sedacin ligera hasta la anestesia general y la muerte.
2. La susceptibilidad de una muestra de una poblacin a los efectos de este frmaco observa una
distribucin normal.
3. El nmero de sujetos que presentan un efecto especfico es funcin de la dosis administrada.
4. La DE50 para el efecto sedante es inferior a la necesaria para lograr el efecto hipntico y ambas
son claramente menores a la DL50.
5. El MS50 del pentobarbital es superior a la unidad.
6. Es posible identificar otros efectos del pentobarbital tiles para la caracterizacin de su perfil
farmacolgico.
MATERIAL Y METODOS
a) Material
- 7 jeringas de 1 mL tipo tuberculina
- 7 agujas hipodrmicas No. 22 x 13
- 1 balanza para pesar animales
- 1 plumn para marcar a los animales
- 1 frasco con solucin salina (0.9%)
- 1 frasco con solucin de pentobarbital sdico a la concentracin de 31.25 mg/ml.
- 6 frascos mpula
- 32 ratones macho adultos (20-30 g de peso)
b) Marcha del experimento
1. Cada mesa de trabajo recibir 7 ratones; pselos; numrelos y anote sta informacin en la
tabla No. 1.
2. Asigne una dosis de pentobarbital a cada ratn utilizando de manera aleatoria. En este
experimento se probarn las siguientes dosis de pentobarbital sdico (Antelas en la tabla 1):
1.- 3.1 mg/kg de peso
2.- 8.0 mg/kg de peso
3.- 20.0 mg/kg de peso
4.- 50.0 mg/kg de peso
5.- 125.0 mg/kg de peso
6.- 312.5 mg/kg de peso
3. El ratn nmero 7 ser utilizado como control y recibir solucin salina (0.1 ml x 10 g de peso).
4. A partir de la solucin de pentobarbital que le fue proporcionada, prepare las soluciones con la
concentracin adecuada a las dosis que se indican.
5. Administre la dosis correspondiente por va i.p. a cada uno de los ratones, con intervalo de 1
min entre cada administracin; en todos los casos el volumen debe ser de 0.1 mL/kg de peso.
Anote el tiempo de administracin en la columna correspondiente de la tabla 1.
6. En todos los casos, determine si se presenta (+) o no (-), en un lapso de 30 min, sedacin
(disminucin de la actividad locomotora, marcha irregular, tambaleante), hipnosis (prdida de
51
Peso (g)
Dosis
Tiempo
admn.
Efectos*
S
1
2
3
4
5
6
Solucin salina
7
Log (dosis)
Porciento de Efecto
H
3.1
8.0
20.0
50.0
125.0
312.5
52
DISCUSION
Con fundamento en los antecedentes descritos. en la informacin disponible sobre los distintos
elementos del tema, y considerando las hiptesis de trabajo y los objetivos del estudio analice
crticamente los resultados obtenidos. Discuta las razones por las cuales sus resultados
confirmaron los datos disponibles sobre el tema o mostraron diferencias significativas. Comente
sobre otros efectos del pentobarbital observados durante el experimento. Finalmente, derive
conclusiones de este estudio. Buscando su relacin con los objetivos e hiptesis de trabajo.
Tabla probit.- para convertir porcentajes en unidades probit
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Levine, R. R. y Clark; B. B.: Farmacologa: acciones y reacciones medicamentosas. Salvat
Editores, Barcelona, Espaa. 1982.
2. Tallarida, R. J. y Jacob, L. C.: The dose-response relation in pharmacology. Springer-Verlag, New
York, 1979.
3. Goldstein, A.: Biostatistics: and introductory text. Macmillan, New York. 1964.
4. Di Palma, J. R.: Drill/Farmacologa Mdica. La Prensa Mdica Mexicana, Mxico. 1978.
53
Practica No.9
VALORACION DEL EFECTO ANTICOAGULANTE DE LA
HEPARINA EN LA RATA
A.E. Campos Seplveda, E. Zavala, G. Silva y C. Rubio Pool
Generalidades
a.-Antecedentes
El proceso de la coagulacin es un fenmeno dinmico y complejo. La fluidez y en ciertas
situaciones la coagulacin de la sangre se mantiene por la participacin de numerosos factores
que son activados o inactivados en respuesta a diversos estmulos. En condiciones normales
predominan activos los mecanismos anticoagulantes que garantizan la continuidad circulatoria de
la sangre; pero en presencia de lesin vascular, se origina el proceso hemosttico que detiene la
hemorragia de los vasos sanguneos daados. Contribuyen a este fenmeno diversos factores
vasculares: la constriccin arteriolar, la retraccin capilar, la migracin y adhesividad plaquetaria
por la liberacin plaquetaria de adenosindifosfato y la sntesis y liberacin de tromboxanos, que
estimula la agregacin plaquetaria y la trombognesis (1, 2. 5).
Los estudios de las dos ltimas dcadas han contribuido notable mente al entendimiento de los
mecanismos involucrados en e l proceso de la coagulacin. As, se ha identificado la participacin
de por lo menos trece factores proteicos que se originan en dos sistemas independientes que
conducen a la formacin de fibrina; un sistema intrnseco cuyos factores proteicos necesarios para
la coagulacin estn presentes en la sangre circulante y un sistema extrnseco cuyos factores se
localizan a nivel del tejido vascular. Ambos sistemas coinciden, mediante una serie de reacciones
proteolticas en cascada. en la activacin del factor X ( Stuart ) que cataliza la conversin de
protrombina a trombina en presencia de Ca++, del factor lbil y de fosfolpidos. Finalmente, la
trombina induce la conversin del fibringeno a monmero de fibrina soluble que polimeriza en
presencia del factor XIII activado (estabilizante de fibrina) y se insolubiliza (3-5).
Por otro lado, varios de los factores de la coagulacin son dependientes de vitamina K para su
sntesis, por ello algunos de los anticoagulantes con utilidad clnica, como los anticoagulantes
orales (cumarinas), ejercen su efecto por interferir con la biosntesis de tales factores; en tanto
que otros, como la heparina ejerce su efecto anticoagulante in vivo e in vitro por inhibir la accin
de uno o ms factores de la coagulacin (4, 5).
El efecto anticoagulante de la heparina que se manifiesta tanto in vivo como in vitro, se logra
rpidamente, a diferencia de los anticoagulantes orales que requieren de varias horas para que la
accin sea aparente; sin embargo, ambos tipos de anticoagulantes son de utilidad en ciertas
situaciones clnicas y su efecto se controla mediante la medicin de la capacidad sangunea para
coagular y ms comnmente, por la medicin del tiempo de protrombina; en estas circunstancias.
la dosis del anticoagulante se ajusta para mantener el efecto dentro de ciertos lmites ptimos
habitualmente se procura que el tiempo de coagulacin se prolongue unas tres veces de la cifra
normal y/o prolongar el tiempo de protrombina unas dos a dos veces y media del valor normal.
54
55
5. Haga tres marcas transversales con un plumn fino a una distancia de 2, 4.5 y 6.5 cm, a partir de
uno de los extremos del capilar (extremo A), que corresponden a la marcas 1, 2 y 3
respectivamente (Fig.1).
7. Quince minutos despus de la administracin de cada una de las soluciones (A y B), sujete e
inmovilice al animal y sumerja la cola de la rata en un bao con agua caliente a 40 C para dilatar
la vena y facilitar la fluidez de la sangre (Fig. 2 ) . Inmediatamente despus, seque la cola del
animal y con un bistur haga una incisin muy pequea y profunda en la base de la cola. Coloque el
extremo A del tubo capilar en contacto con la parte sangrante de la cola. Llene por capilaridad el
tubo capilar hasta la marca 2, esto permite tomar un volumen constante de 25 L de sangre
Bisturi
capilar
Figura 3.- llenado del capilar con sangre, haciendo una incisin muy pequea en la base de la cola
de la rata
56
Ratn
Tiempo de
coagulacin
1
2
3
57
Solucin B
vino
1
2
3
4
DISCUSIN
BIBLIOGRAFIA
1. Moncada, S and Vane, J.R.: Arachidonic acid metabolites and the interactions between
platelets and blood vessel walls. N. Engl. J. Med. 300:1142-1147. 1979.
2. Bowman, W.C. y Rand. M.J.: Farmacologa. Bases Bioqumicas y Patolgicas.
Interamericana, Mxico, D.F., 2a. Ed., 1984.
3. Esnouf, M.P.: Biochemistry of blood coagulation. Br. Med. Bull. 33:213-218, 1977.
4. Katzung, B.G.: Farmacologa Bsica y clnica. El Manual Moderno. Mxico, D.F., 1984.
5. Gilman, A.G., Goodman, L.S., Rall, T.W. y Murad, F.: Las Bases Farmacolgicas de la
Teraputica. Panamericana, Buenos Aires, Argentina. 7a. Ed., 1986.
6. Mandoki, J.J., Zavala, E., Silva, G., Mendoza Patio, N.. Rubio-Poo. C., MedinaMartinez, y Dominguez-Escoto, P.: The dual effects of estrogens on blood clotting
time. Proc. West. Pharmacol. Soc. 20:45, 1983.
58
Practica No. 10
EFECTOS TXICOS DEL AC. ACETILSALICLICO EN
ESTOMAGO DE RATA
1. OBJETIVO:
El alumno demostrara las principales manifestaciones toxicas de las aspirinas
El alumno verificara los efectos de una sobredosis.
El alumno explicara los efectos de la sobredosis
2. FUNDAMENTO:
Las intoxicaciones por sobredosis de un medicamento son sumamente frecuentes en nuestro
medio, y se deben a dos causas principalmente:
a) INTENTO DE SUICIDIO
b) POR AUTOMEDICACION
En los casos de intento de suicidio, los medicamentos mas utilizados son los barbitricos.
La automedicacin en la actualidad ha alcanzado una frecuencia alarmante, y es debida
generalmente a la gran propaganda comercial que realiza la industria qumico-farmacutica.
La intoxicacin por SALICILATOS es quiz la mas frecuente de las producidas por automedicacin y
puede ser debida a cualquiera de los derivados del cido saliclico, siendo los ms frecuentes el
Salicilato de Metilo (administracin tpica), y el cido Acetilsaliclico (aspirina), a cuya intoxicacin
dedicaremos la presente sesin.
3. MATERIAL
3.-Ratas macho adultas.
cido acetilsaliclico (suspensin al 25%)
Pentobarbital 1 %
Solucin salina
Sonda gstrica
Material quirrgico
4. PROCEDIMIENTO:
El objetivo de presente experimento, es el demostrar las principales manifestaciones toxicas de la
aspirina y llegar a producir la muerte por sobredosis.
MANIOBRAS PREVIAS:
Todos los animales que sern utilizados deben estar en ayunas desde el da anterior al
experimento.
PROCEDIMIENTO 2 HORAS ANTES DEL EXPERIMENTO
1.-Administre a una rata (a) por mesa, 600 mg/Kg. de la suspensin de aspirina por va
oral y observe cuidadosamente los efectos.
59
2.- Administre a una rata (b) por mesa, 1.2 grs./Kg., de aspirina por va oral y observe
cuidadosamente los efectos.
3.- Administre a una rata (c) 1mL de la solucin salina.
4.- Sacrifique a todos los animales una hora despus de iniciada la sesin, con una dosis letal de
pentobarbital y haga lo siguiente:
I.- Realice las necropsias de las ratas.
II.- Observe cuidadosamente la mucosa gstrica
III.- Revise la presencia de hemorragias en dichas mucosas
IV.- Lave la mucosa gstrica con solucin salina y observe si hay lesiones o hiperemia visible.
5. RESULTADOS:
TABULACION DE RESULTADO
PRIMERA HORA DE LA SESION (ANTES DE SACRIFICAR A LOS ANIMALES
Rata
Tiempo de latencia
Tipo de
respiracin
Conducta
Otras
A
B
C
Rata
Estado de la
mucosa gstrica
Hemorragias
Ulceraciones
CONCLUSIONES
REFERENCIAS
Osuna Garca J.L; 2005. Manual de laboratorio de Farmacologa. Laboratorio 2. Universidad
autnoma de Baja California. Facultad de medicina Tijuana.
60
Practica No11
VALORACION DE LA ACTIVIDAD ANTIDIARREICA
R. Rodrguez Carranza, J. Garca Mondragn, Y. Rojas Meja y - J.L. Figueroa Hernndez.
INTRODUCCION
a. Antecedentes
Los antidiarreicos son substancias empleadas en el tratamiento sintomtico de la diarrea. Slo
estn indicados como medidas secundarias al uso de agentes ms especficos, generalmente de
tipo antiinfeccioso. Y slo se prescriben con el objeto de reducir las molestias del paciente.
El mdico que prescribe antidiarreicos no debe olvidar que la restauracin del equilibrio
hidroelectroltico es la medida ms importante en el tratamiento de la diarrea aguda; asimismo,
que los antidiarreicos suelen estar contraindicados en los nios menores de 2 aos.
Los antidiarreicos ms efectivos son los alcaloides del opio, los cuales producen un efecto
constipante muy poderoso; sin embargo, su empleo conlleva el riesgo de producir dependencia de
tipo narctico. Est limitante dio lugar a la bsqueda sistemtica de estructuras que mantuvieran
la actividad antidiarreica y carecieran de otros efectos de tipo opiceo.
El difenoxilato, que tiene relacin estructural con la meperidina, es producto de estos esfuerzos ( 1
, 2 ) . En dosis altas produce analgesia y efectos centrales semejantes a los producidos por la
morfina; adems, su administracin repetida produce tolerancia y dependencia fsica; sin
embargo, en dosis bajas sus efectos opioides son escasos o no se presentan y su efecto
constipante es muy importante. Su accin de inhibir la motilidad intestinal fundamenta su empleo
en el control sintomtico de la diarrea.
Es prcticamente insoluble en agua, caracterstica que impide su administracin parenteral y evita
su abuso. La loperamida, al igual que el difenoxilato, es un derivado piperidnico con efectos
relativamente especficos sobre la motilidad gastrointestinal ( 3 , 4 ) . Se postula que su efecto
constipante es debido, por lo menos en parte, a su unin a los receptores morfnicos del tejido
nervioso intestinal y se ha reportado que en el hombre es tan potente como el difenoxilato en el
control de la diarrea. Tambin es insoluble en agua y se ha sealado que sus efectos sistmicos de
tipo narctico son menores que los observados con difenoxilato.
Existen otros productos que se han utilizado para el manejo de la diarrea; entre ellos estn los
astringentes, que tienen la propiedad de precipitar las protenas formando una capa insoluble de
sales proteicas sobre la mucosa intestinal que la protege de substancias irritantes e inhibe la
secrecin. Su eficacia clnica como antidiarreicos es dudosa. Tambin se pueden mencionar a los
adsorbentes, que son tiles para la eliminacin de gases, toxinas o bacterias, y a los protectores
que ejercen esta accin depositndose sobre la mucosa gastrointestinal.
b. Objetivos de la prctica
1. Medir el peristaltismo intestinal en la rata por medio de la prueba de desplazamiento del
carbn activado.
2. Determinar si el difenoxilato y la loperamida disminuyen el peristaltismo intestinal y establecer
si este efecto es funcin de la dosis administrada.
3. Establecer la potencia relativa de ambos productos.
4. Determinar si las dosis que producen constipacin tambin inducen efectos sistmicos de tipo
narctico.
61
c. Hiptesis de trabajo
De acuerdo a los antecedentes descritos y a la informacin disponible,
sobre el tema, se pueden proponer las siguientes hiptesis de trabajo:
1.El difenoxilato y la loperamida inhiben claramente el peristaltismo intestinal y la magnitud de su
efecto es funcin de la dosis administrada.
2. La potencia relativa de estos productos es equivalente.
3. En dosis altas el difenoxilato produce efectos sistmicos de tipo narctico, efectos que no se
observan con la loperamida.
MATERIAL Y METODOS:
a) Material:
- 7 ratas adultas hembras, por mesa y con ayuno de 18-24 hs.
- 3 jeringas hipodrmicas de 1 ml, tipo tuberculina.
- sonda intragastrica
- 1 balanza para pesar animales.
- 1 plumn para marcar animales.
- 3 frascos con 2 mL de una suspensin de difenoxilato a las concentraciones de 0.2, 0.8 y 3.2
mg/ml (la preparacin contiene adems sulfato de atropina).
- 3 frascos con 2 m1 de una suspensin que contiene loperamida a las concentraciones de 0.2, 0.8
y 3.2 mg/ml.
- 1 frasco con 5 mL de suspensin acuosa de carbn vegetal al 5% y goma de tragacanto al 5%.
- 1 frasco con 2 mL de metilcelulosa al 0.2%.
- 7 pesas de 5 g cada una, con un gancho en un extremo.
- 1 cinta mtrica.
- 1 reloj.
- 1 tendedero de laboratorio con 10 ganchos por mesa.
b) Marcha del experimento:
1. Cada mesa de trabajo recibir 7 ratas; pselos y asgneles un nmero al azar, empleando la tabla
de nmeros aleatorios.
2. En cada mesa, la rata No. 1 recibir 0.1 mL/100 g de la suspensin de metilcelulosa al 0.2%; las
ratas 2, 3 y 4 recibirn difenoxilato a la dosis de 2, 8 y 32 mg/kg. respectivamente, y las ratas 5, 6 y
7 recibirn loperamida a razn de 2, 8 y 32 mg/kg. El volmen administrado ser igual al
empleado en el animal control. Anote estos datos en la columna correspondiente de la Tabla 1.
3. Administre por va intragstrica lo correspondiente, dejando un intervalo de 10 min entre cada
administracin. Anote el tiempo de administracin en la Tabla 1.
4. 30 min despus de la administracin del vehculo o de los frmacos en estudio, administre por
va intragstrica la suspensin de carbn a razn de 0.25 mL por rata. Anote el tiempo de
administracin en la Tabla l. Antes del siguiente paso, observe cuidadosamente a los animales y
anote en la Tabla 2 las manifestaciones que llamen su atencin.
5. Sacrifique a los animales e la cmara de ter o por dislocacin cervical (estiramiento) 30 min
despus del tiempo de administracin de la suspensin de carbn.
6. Realice una laparotoma media, diseque y remueva el tracto gastrointestinal completo (desde
estmago hasta ciego) y librelo del epipln.
7. Inserte un gancho al nivel del ploro, cuelgue el intestino y aplique una pesa de 5 g a nivel de la
vlvula ileocecal. Recuerde que dispone de 10 min para llevar a cabo esta diseccin en cada rata.
62
8. Mida la distancia recorrida por la suspensin de carbn, aplicando la cinta mtrica a partir del
ploro. Est medida ser indicativa del trnsito gastrointestinal. Anote el desplazamiento para cada
rata en la columna correspondiente de la Tabla 1.
9. En la Tabla No. 3 anote los resultados obtenidos en todas las mesas.
10. Calcule la media y el error tipo para los animales control y para cada dosis empleada.
11. Con los datos anteriores construya una grfica utilizando la hoja de papel milimtrico. En las
ordenadas anote el desplazamiento en cm y en las abscisas la dosis correspondiente, dejando un
espacio inicial para el valor de los animales control. No se olvide de poner' los errores tipo de cada
punto.
12. Finalmente, marque la lnea apropiada en cada caso y calcule la potencia relativa.
13. cabe mencionarse que la tcnica utilizada en este estudio es una adaptacin (5) de la descrita
por Macht y Baba-Goce en 1931 (6).
Tabla I
rata
Peso(g)
Dosis
(mg/kg)
Tiempo
admon
Tiempo
admon
carbn
Tiempo de
sacrificio
desplazamiento
Metilcelulosa
No 1
Difenoxilato
No.2
No.3
No.4
Loperamida
No.5
No.6
No.7
63
TABLA 2
Alteraciones observadas
rata
No.1
No.2
No.3
No.4
No.5
No.6
No.7
Tabla 3
tratamiento
media
Desviacin
estndar
Metilcelulosa %
2
Difenoxilato mg/kg
2
8
32
Loperamida mg/kg
2
8
32
64
DISCUSION
Con fundamento en los antecedentes descritos. en la informacin disponible sobre el tema. y
considerando las hiptesis y objetivos del estudio, analice los resultados obtenidos. Discuta las
razones por las cuales los resultados obtenidos confirmaron o no confirmaron la informacin
disponible y las hiptesis planteadas y derive conclusiones validas. Finalmente, seale los riesgos
ms importantes del empleo de antidiarricos en los nios.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Jaffe, J.H. y Martin, W.R.: Analgsicos y antagonistas opiceos. En: -- Las Bases Famacolgicas de
la Teraputica de Goodman y Gilman (A. Goodman Gilman. L.S. Goodman, T.W. Rall y F. Murad,
eds.). Panamericana. Buenos Aires, 1985.
2. Karin. A., Raney, R.E. and Evensen, K.L.: Pharmacokinetics and metabolism of diphenoxylate in
man. Clin. Pharmacol. Ther. 13:407-419,1972.
3. stahi. K.D., .Van Bever, W.. Jansen, P. and Simon, E.J.: Receptor affinity and pharmacological
potency of a series of narcotic analgesic, antidiarrheal and neuroleptic drugs. Eur. J. Pharmacol.
46:199-205, 1977.
4. Heel, R.C., Brodgen, R.N. and Speight, T.M.: Loperamide: a review of its pharmacological
properties and therapeutic efficacy in diarrhea. Drugs 15:33-52, 1978.
5. Rodriguez. R. and Villarreal, J.E.: Graded quantitation of morphine tolerance and dependence on
the same phyisiological pystem in the mouse. Committee on problems of drug dependence 453459, 1974.
6. Macht, D.I. and Baba-Gose, J.: Two pharmacological comparison of in soluble purgatives. J.
Amer. Pharm. Ass. 20:558-564. 1931.
65
Practica No. 12
CONTROL FARMACOLGICO DE LA GLUCEMIA accin
de los hipoglucemiantes en la rata.
Ricardo Borges Jurado y Manuel Feria Rodrguez Necesita revisin del profesor
INTRODUCCION
En aos recientes, la humanidad ha sido testigo del incremento explosivo de la obesidad y la
diabetes mellitus, vinculada predominantemente con modificaciones del estilo de vida.
La nutricin es un elemento del modo de vida que puede afectar directamente a la salud. Existen
evidencias que sugieren que el aumento en el consumo de carbohidratos, particularmente de
azucares refinados ricos en fructosa, son un importante factor que contribuyen de manera directa
en el aumento del colesterol y los triglicridos, desarrollo de la obesidad e incremento de la
diabetes mellitus.
La diabetes mellitus es una enfermedad debida a una deficiencia absoluta o relativa de la
produccin o secrecin de insulina por parte de las clulas beta del pncreas, caracterizada por
hiperglucemia, glucosuria, poliuria, polidipsia, polifagia y cetosis; con severas complicaciones.
Actualmente, la diabetes mellitus se clasifica en cuatro categoras:
tipo 1, diabetes dependiente de insulina;
tipo 2, diabetes no dependiente de insulina;
tipo 3, otras y
tipo 4, diabetes mellitus gestacional.
La hormona insulina es una protena pequea sintetizada y liberada por los islotes de Langerhans
del pncreas, cuya funcin es la de regular la concentracin plasmtica de glucosa y el
metabolismo de los carbohidratos para la produccin de energa. Es una molcula, constituida por
dos cadenas de pptidos unidas por puentes bisulfuro. La cadena A de 21 aminocidos y la cadena
B de 30 aminocidos. En personas con diabetes, el pncreas no produce, o produce poca insulina,
es el caso de la diabetes tipo 1; o se secreta poca y adems, las clulas del cuerpo no responden a
la insulina que se produce, causando la diabetes tipo 2. Por lo tanto, el azcar se acumula en la
sangre y fluye hacia la orina, saliendo del cuerpo sin que se haya usado. De esta manera, el
organismo se ve privado de una importante fuente de energa.
Dado el alarmante incremento de diabetes mellitus y sus complicaciones, es necesario conocer el
manejo de la enfermedad y los frmacos utilizados en su control. En esta enfermedad es
importante considerar el tipo de diabetes, las condiciones del paciente, la dieta, el ejercicio, la
administracin de insulina, hipoglucemiantes orales o el manejo con medicina alternativa como la
herbolaria.
Actualmente, el tratamiento farmacolgico utiliza cuatro grupos de medicamentos antidiabticos
de administracin por va oral (hipoglucemiantes orales): secretagogos de insulina como las
sulfonilureas (tolbutamida, gliburida, etc.); meglitinidas (repaglinida) y derivados de la Dfenilalanina como la nateglinida. Biguanidas (metformina); tiazolidinedionas (pioglitazona y la
rosiglitazona) y los inhibidores de la alfa glucosidasa como la acarbosa y el miglitol.
66
Inhibidores de la alfa glucosidasa. Slo los monosacridos como la glucosa y fructosa pueden ser
transportados desde la luz intestinal hacia el torrente sanguneo. Los almidones complejos,
oligosacridos y disacridos (sacarosa) deben fraccionarse en monosacridos individuales antes de
su absorcin en el duodeno y yeyuno proximal. Este proceso de digestin se facilita a travs de la
accin de las enzimas intestinales, incluyendo la alfa amilasa pancretica y alfa glucosidasa que se
encuentran unidas al borde en cepillo de las clulas intestinales. La acarbosa y el miglitol son
inhibidores competitivos de la alfa glucosidasa intestinal, por lo que reducen la digestin y
absorcin posprandial de almidones y disacridos, disminuyendo as los niveles de glucosa
sangunea.
La acarbosa, un pseudotetrasacrido de origen microbiano est indicada en la diabetes tipo 2 en la
que el tratamiento diettico resulta insuficiente o como coadyuvante al tratamiento con
sulfonilureas, biguanidas o insulina. Los efectos adversos gastrointestinales son: flatulencia,
diarrea y dolor abdominal. La acarbosa presenta un perfil de seguridad excelente.
La disminucin de los niveles de glucosa sangunea se puede lograr mediante el bloqueo de la
accin de la alfa-glucosidasa que inhibe la absorcin de almidones y disacridos
Objetivo.
- Analizar el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratas sin y con sobrecarga de glucosa.
Tratamiento de la hiperglucemia.
- Aprender el uso correcto de un sistema de medicin de glucemia a travs de tiras reactivas.
Desarrollo.
Utilizaremos Insulina humana mono componente (Actrapid HM) y glucosa en ratas SpragueDawley. Para la cuantificacin se emplear un medidor comercial de glucemia (Reflolux,
Glucocard Memory-2) y las tiras reactivas correspondientes (BM-test-glycemia 20-800R,
Glucocard Memory Strips).
Cada grupo dispondr de 2 ratas en ayunas de 18 horas. Tras pesar e identificar los animales, se
procede a extraer una muestra de sangre (0,05 ml) por puncin cardaca. En dichas muestras se
determinarn los valores de glucemia basal. A continuacin, a la rata 1 se le administra una
sobrecarga de glucosa (3 g/Kg) por (3g/ml en agua destilada) va i.p. y, a la rata 2, 3 UI de insulina
por va i.m.
Rata 1: Se procede a extraer sangre a los 15 y 60 min tras la administracin de glucosa. Antense
los valores de glucemia en la tabla. A continuacin, se administra a este animal 3 UI de insulina por
va i.m., repitiendo la extraccin de sangre y determinacin de glucemia a los 30' de la
administracin de la insulina.
Rata 2: Se extrae la sangre a los 60 minutos de la administracin de la insulina y tras valorar la
hipoglucemia, se administran 3 g/kg de glucosa. A los 30 minutos de esta administracin se extrae
sangre nuevamente y se valora la glucemia.
La valoracin de la glucemia se realiza por medio de un sistema rpido y automtico de lectura de
tiras reactivas. Las tiras se impregnan en una zona sensible (o se toman por capilaridad segn el
modelo de medidor) y tras un contacto de 30-60 segundos (mirar las instrucciones del medidor).
67
Tiempo (min)
15
60
I + 60
G + 60
RATA 1
RATA 2
Adicionalmente, cada alumno podr determinar su propia glucemia. A tal fin, deber limpiarse
bien las manos con agua y jabn y alcohol etlico y extraer, usando una lanceta esterilizada, una
gota de sangre de la yema de un dedo, procediendo a continuacin de la forma anteriormente
descrita.
ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
1. Niveles normales de glucosa sangunea por dl de sangre.
2. Tipos de insulina.
3. Insulina de aplicacin intravenosa.
4. Principal efecto adverso de la insulina.
5. Antdoto para una sobredosis de insulina.
6. Sulfonilurea de accin prolongada.
7. Principal interaccin de las sulfonilureas.
8. Mencione dos meglitinidas.
9. De un ejemplo de tiazolidindionas.
10. Investigar la farmacocintica y la farmacodinamia de la acarbosa.
Referencias
Gabriel Flix Burgos, Ofelia Flores Jurez, Vctor Valverde Molina, Miguel ngel Rosas
Lezama, Martha Patricia Jurez Morales, Mara Celia Calcneo Altamirano, Lilia Sevilla
Romero; MANUAL DE PRCTICAS DE FARMACOLOGA, Licenciatura En Enfermera Y
Obstetricia 2009; Escuela Nacional De Enfermera Y Obstetricia; UNAM
Ricardo Borges Jurado y Manuel Feria Rodrguez; Farmacologa, Prcticas de laboratorio
para alumnos universitarios. Universidad de La Laguna Tenerife. Espaa. R. Borges y M.
Feria, Universidad de La Laguna, La Laguna, Espaa. 2005.
68
Practica No13
ADRENERGICOS Y ANTIADRENERGICOS
I. INTRODUCCIN
En los ltimos decenios del siglo XIX, Langley y Ehrlich propusieron una hiptesis para explicar la
accin de algunos frmacos. Postularon que existen sitios sensibles o receptores especficos con
los cuales interactuan los frmacos para producir sus efectos. En 1948, Ahlquist dedujo que las
acciones de la adrenalina y de otros compuestos parecidos en diversos tejidos aislados se deben a
la estimulacin de dos tipos de receptores a los cuales denomin y . Desde entonces, se ha
comprobado la existencia de numerosos tipos y subtipos de receptores sobre los cuales actan los
diversos ligandos endgenos conocidos.
El descubrimiento de estos receptores ha sido posible mediante la aplicacin conjunta de tcnicas
de biologa molecular, que permiten el conocimiento de la estructura de los receptores y su
eventual clonacin, de tcnicas bioqumicas para identificar los procesos de transduccin de
seales iniciadas por su activacin, y de tcnicas farmacolgicas para determinar las consecuencias
funcionales de su activacin o bloqueo. Para esto ltimo es necesario contar con modelos
experimentales capaces de generar respuestas fisiolgicas cuantificables mediadas por agonistas
especficos susceptibles de ser inhibidas por antagonistas igualmente especficos. El uso de
agonistas y antagonistas cada vez ms selectivos para un subtipo particular de receptor, ha sido de
capital importancia en su caracterizacin farmacolgica.
Esta prctica ilustra los efectos producidos por la activacin de receptores adrenrgicos que se
encuentran sistema cardiovascular del animal ntegro. Se utilizan los cambios de la frecuencia
cardiaca y de la presin arterial que resultan de esta activacin, como indicadores de las
interacciones entre frmacos agonistas y receptores y . Para obtener respuestas
cardiovasculares que ilustren con claridad las consecuencias de la activacin de estos receptores,
es indispensable evitar la influencia refleja del sistema nervioso autnomo sobre los parmetros
estudiados, lo cual se logra mediante la seccin bilateral de los nervios vagos, de los nervios del
seno carotdeo y de los nervios depresores articos. Mediante estas maniobras se suprime la
funcin de los barorreceptores, elementos principales en el control reflejo de la presin arterial y
la frecuencia cardiaca.
El modelo experimental computarizado que aparece en esta prctica imita el comportamiento del
sistema cardiovascular del perro anestesiado con pentobarbital y libre de reflejos, ante la
estimulacin adrenrgica con diversos frmacos agonistas. Reproduce adems las interacciones
farmacolgicas inducidas por la administracin de agentes antagonistas. El modelo se construy
con datos obtenidos en experimentos reales, cuyos resultados fueron analizados estadsticamente
para obtener las variables que definen el comportamiento farma-codinmico, farmacocintico y
aleatorio de las respuestas, lo cual ha permitido su reproduccin matemtica en el programa
ADREN II.
En este ejercicio, el anlisis cuidadoso de las respuestas obtenidas permitir deducir algunos
hechos relacionados con el mecanismo de accin, los sistemas de inactivacin, la afectacin de
parmetros cardiovasculares distintos a la presin arterial y la frecuencia cardiaca, etctera.
Algunas de las caractersticas de las respuestas que pueden analizarse son:
a) Signo. Hipertensin o hipotensin (o ambas); taquicardia o bradicardia.
b) Duracin.
69
70
71
3. Discuta los motivos que sugieren que son dos receptores diferentes los que intervienen en estas
respuestas. Escriba los conceptos fundamentales:
SEGUNDA PARTE
Objetivos
1. Se observarn los cambios en la presin arterial y la frecuencia cardiaca inducidos con 2 3
dosis de frmacos bloqueadores.
3. Se analizarn y discutirn los resultados grficos de la prazosina y del propranolol.
y Propranolol (antagonista )
- Tome en cuenta el peso del perro que indique el programa; calcule las dosis de los frmacos que
se sealan en las tablas correspondientes, y adminstrelas. Ulilice los botones de control del
programa como se ha indicado, recordando que en este caso se trata de frmacos de efectos
prolongados, por lo que es indispensable usar el botn Eliminar antes de aplicar la segunda de las
dosis.
- Con base en estos resultados explique los efectos de la prazosina y del propranolol, teniendo en
cunta que no se administr adrenalina o noradrenalina.
72
TERCERA PARTE
Objetivos
1. Se disearn los experimentos solicitados.
2. Se discutirn los diseos con el profesor.
3. Se llevarn a cabo los experimentos en la
computadora. 4. Se anotarn los diseos y los resultados grficos en el Manual.
Diseos experimentales
Para comprobar sus diseos experimentales, utilice cualquier dosis de las tablas 14.1 a la 14.7
dosis intermedias.
1. Disee y realice un experimento en el que demuestre que la prazosina (bloqueador ) inhibe los
efectos de la metoxamina. Tenga en cuenta que existen diferentes formas de disminuir la presin
arterial que no necesariamente involucran receptores . Por ejemplo: la estimulacin de
receptores . Anote a continuacin los pasos esenciales:
2. Disee y realice un experimento que demuestre que el propranolol (bloqueador ) inhibe los
efectos de isoprenalina. Anote a continuacin los pasos esenciales:
3. Disee y realice los experimentos que permitan detectar si un frmaco tiene efectos sobre
receptores , o en ambos. Anote a continuacin los pasos esenciales:
4. Con los diseos anteriores verifique sus hiptesis de la tabla 14.5 para la adrenalina. Anote los
pasos esenciales y copie las grficas:
73
74
75
IV. REFERENCIAS
1. Ahlquist RP. A study of adrenotropic receptors. Am J Physiol 1948; 153:586-600.
2. Beltrn L, Lpez E, Lujn M, Rodrguez Carranza R. Programa simulador de los efectos de los
frmacos adrenrgicos sobre la presin arterial y la frecuencia cardiaca. IX Congreso Nacional de
Farmacologa, Tampico, Tamps., marzo de 1985. p.39.
3. Stanaszek WF, Kellerman D, Brogden RN, Romankiewicz JA. Prazosin update. A review of its
pharmacological propierties and therapeutic use in hypertension and congestive heart failure.
Drugs 1983; 25: 339-384.
4. Nies AS, Shand DG. Clinical pharmacology of propranolol. Circulation 1975; 52: 6-15.
5. Wilson C, Lincoln C. b-adrenoceptor subtypes in human, rat, guinea pig, and rabbit atria. J
Cardiovasc Pharmacol 1984; 6:1216-21.
6. Van Zwieten PA. Antihypertensive drugs interacting with a- and b-adrenoceptors. A review of
basic pharmacology. Drugs 1988; 35 (Supl 6): 6-19.
7. Bylund DB, Eikenberg DC, Hieble JP, Langer SZ, Lefkowitz RJ, Minneman KP, Molinoff PB, Ruffolo
R, Trendelenburg U. Nomenclature of adrenoceptors. Pharmacol Rev 1994; 46:121-136.
76
Objetivo general.
Observar el efecto de algunos frmacos sobre el corazn aislado de la rana.
Objetivos particulares.
a. Observar el efecto de cada frmaco en forma individual en el corazn aislado de rana
b. Identificar un frmaco desconocido comparando el efecto con el del frmaco conocido y con el resultado de la
interaccin con otros frmacos
c. Para ver si el frmaco desconocido se compara con la acetilcolina o adrenalina sobre su efecto sobre la frecuencia
cardiaca use mtodos estadsticos
Instrucciones.
1. Encienda su PC.
2. Vaya a la barra de INICIO y haga click en PROGRAMAS.
3. Elija el icono que dice Expharm2000.
4. Al abrir el programa se despliega una pantalla mostrando Ex Pharm 2.0.00. En segundos, el logo desaparece y despliega
el siguiente panel
77
Tabla interacciones
Frmaco
Interaccin
Dosis
Respuesta
basal (HR)
Epinefrina
Dosis: 2 g
Norepinefrina
Isoprenalina
CaCl
Propanolol
Acetilconlina
KCl
Atropina
2
2
2000
200
2
2000
20
62
63
62
62
63
62
62
Respuesta
durante
la
aplicacin (HR)
45
68
67
72
68
71
69
Respuesta
durante la
interaccin
62
90
1
44
52
1
66
78
SESIONES PRCTICAS
141
15
EFECTO DE FRMACOS SOBRE EL CORAZN AISLADO DE LA
RANA*
Raveendran R. Expharm 2000. Indian Journal of Pharmacology 2003; 35 (6)
Introduccin
Diversos frmacos tienen accin sobre el
corazn. Frmacos adrenrgicos y colinrgicos
producen efectos opuestos. Estos frmacos
actan a travs de receptores. Algunos actan
directamente sobre el corazn. Este experimento
muestra el efecto de algunos frmacos (agonista,
antagonistas, calcio y potasio) sobre el corazn
aislado de la rana
Objetivo general.
Observar el efecto de algunos frmacos sobre el
corazn aislado de la rana.
y haga click en
2. Vaya a la barra de
PROGRAMAS.
3. Elija el icono que dice Expharm2000.
4. Al abrir el programa se despliega una pantalla
mostrando Ex pharm T1.00. En segundos, el logo
desaparece y despliega el siguiente panel
Instrucciones.
1. Encienda su PC.
Objetivos particulares.
a. Observar el efecto de cada frmaco en forma
individual en el corazn aislado de rana
141
7. Presione el cuadro
8. Aparece el siguiente panel
1.
Observamos
los
iconos
Nota: Dar suficiente tiempo para que se registre la
contraccin por la administracin el frmaco
4.
.
Al cambiar el frmaco, automticamente la
dosis cambia.
Presione
la
flecha
del
icono
5. Presione el icono
para poder
inyectar el frmaco siguiente.
6. Repita 3., 4. y 5. con cada frmaco
7. Presione el icono STOP.
8. Con la barra de desplazamiento recorra el
registro y anote en la Tabla 1 la respuesta basal
(BHR) y la respuesta obtenida (HR) durante la
administracin de cada uno de los frmacos.
2. Presione el icono
para poder
inyectar el frmaco epinefrina a la dosis de 2
g.
3. En la pantalla de registro aparece el efecto
provocado por el frmaco aplicado.
142
Frmaco
Epinefrina
Norepinefrina
Isoprenalina
CaCl
Propanolol
acetilcolina
KCl
Atropina
Dosis
(g)
2
2
2
2000
200
2
2000
20
Respuesta
basal (BHR).
Tabla 1
Respuesta durante
la aplicacin (HR).
Amplitud
Tono
Interaccin Farmacolgica
Ejemplo:
Inyecte isoprenalina. Registre la respuesta y
anote los valores y los cambios en la Tabla
2.
Inyecte
propranolol
y
en
seguida
isoprenalina. Registre la respuesta y anote
los valores y los cambios en la Tabla 2.
Frmaco
Dosis
(g)
Respuesta
Basal
Tabla 2
Respuesta durante
la aplicacin
Respuesta durante
la interaccin
Amplitud
Tono
Isoprenalina
Propranolol
seguido de
Isoprenalina
accede al panel
exit, da la salida del programa.
donde al
143
que al oprimir
* Traduccin y adaptacin preparada por Luz Elena Pelez Garca y Jos Antonio Rojas Ramrez (ciclo 2008-2009)
144
79
SESIONES PRCTICAS
145
16
BIOENSAYO PARA OBTENER UNA CURVA DOSIS RESPUESTA A LA
HISTAMINA Y DETERMINAR, POR COMPARACIN, LA CONCENTRACIN
DE UNA SOLUCIN DE HISTAMINA*
Raveendran R. Expharm 2000. Indian Journal of Pharmacology 2003; 35 (6)
Introduccin
El bioensayo consiste en la estimacin de la
concentracin de una sustancia mediante la
medicin de su actividad biolgica en un
sistema
apropiado.
Se
emplea
principalmente para cuantificar sustancias
con actividad biolgica para las que no se
han establecido procedimientos qumicos u
otros procedimientos de ensayo. En este
experimento se muestra la forma en que se
obtiene una curva dosis-respuesta gradual
en un ensayo de histamina sobre el leon
aislado de cobayo.
Objetivo
Obtener una curva dosis-respuesta gradual a la
histamina y determinar la concentracin de una
solucin desconocida de esta sustancia.
Instrucciones
1. Encienda su PC
2. Vaya a la barra de
y haga click en
PROGRAMAS
3. Elija el icono que dice Expharm2000
4. Al abrir el programa se despliega una pantalla
mostrando Ex pharm T1.00. En segundos, el logo
desaparece y despliega el siguiente panel:
145
5.-
Pulse
en
el
icono
que
muestra
un
ratn.
6.- Aparecen nuevamente una pantalla con el
nombre de la sesin.
Inicie con
Presione
146
Paso 2.
Observe que se alcanza la respuesta mxima del
leon a la histamina.
Las respuestas representan una curva dosisrespuesta gradual a la histamina.
Oprima
Paso 4.
De la curva dosis-respuesta estndar que ha
obtenido elija una dosis que provoque una respuesta
menor a la respuesta mxima.
Presione OK
147
Paso 6.
Ingrese
alternativamente
Oprima
Presione Compute.
Aparece el siguiente texto:
,
que indica la concentracin de histamina en la solucin desconocida.
148
Al presionar
* Traduccin y adaptacin preparada por Luz Elena Pelez Garca y Jos Antonio Rojas Ramrez (ciclo 2008-2009)
149
ojo
Salina
Der
Epinefrina
Izq
Salina
Der
Atropina
Izq
Salina
Der
Efedrina
Izq
Salina
Der
Fisostigmina
Izq
Salina
Der
Lidocana
Izq
dimetro pupilar
(mm)
antes
despus
tensin intraocular
(B/N/A)
antes
despus
reflejo luz
(+/-)
antes
despus
conejo 1
conejo 2
conejo 3
conejo 4
conejo 5
80
SESIONES PRCTICAS
150
17
FARMACOLOGIA OCULAR EN CONEJO
Raveendran R. Expharm 2000. Indian Journal of Pharmacology 2003; 35(6)
Objetivos particulares.
a) Identificar los frmacos con base es su efecto
sobre el ojo del conejo.
b) Proponer un experimento tendiente a encontrar si
el frmaco desconocido tiene algn efecto sobre la
pupila del conejo.
Introduccin
El iris esta compuesto por dos tipos de fibras
musculares, circulares o redondas y radiales.
Las primeras estn inervadas por nervios del
parasimptico y las segundas por nervios del
simptico. La estimulacin de los nervios del
simptico y del parasimptico producen
midriasis y miosis, respectivamente. La
parlisis de las mismas provoca los efectos
opuestos.
Algunos frmacos simulan los efectos del
sistema nervioso autnomo, produciendo los
efectos mencionados arriba. En este
experimento se observa el efecto de algunos
frmacos sobre el ojo del conejo.
Instrucciones
1. Encienda su PC
y haga click en
2. Vaya a la barra de
PROGRAMAS
3. Elija el icono que dice Expharm2000
4. Al abrir el programa se despliega una pantalla
mostrando Ex pharm T1.00. En segundos, el logo
desaparece y despliega el siguiente panel:
Objetivo general.
Observar el efecto de los frmacos sobre el
tamao de la pupila, el reflejo de la luz y
tensin intraocular en el ojo del conejo.
150
datos)
Para terminar el experimento y desplegar
el cuestionario que tiene que responder
Para salir y regresar al men.
151
Procedimiento
1.- Antes de instilar solucin salina o algn
frmaco, deber medirse la pupila del conejo con
la escala que se proporciona.
2.- Registrar los parmetros en la tabla 1. El
tamao de la pupila se mide sobre la imagen.
Usar la linterna
y el algodn
el ojo como estmulos.
5. Presionar en el icono
o
y el cursor
se transformar en linterna o algodn. Llevar la
herramienta al ojo para probar. Observa la respuesta.
Presiona otra vez el icono y desaparecer la
herramienta.
sobre
6. Presiona el botn
y coloca el gotero en
el ojo derecho o en el izquierdo para aplicar el
frmaco.
TABLA 1
Frmaco
Ojo derecho
Frmaco
Dimetro pupilar
(mm)
Antes
Despus
Salina
Salina
Salina
Salina
Salina
Ojo izquierdo
Dimetro pupilar
(mm)
Antes
Despus
Epinefrina
Atropina
Efedrina
Fisostigmina
Ligcaina
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Tensin
intraocular
Antes Despus
Reflejo a la luz
Antes
Despus