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Titulo:

EVALUACION DEL VALOR NUTRICIONAL DE UN EXTRACTO LIPIDICO Y UN


CONCENTRADO PROTENICO DE LANGOSTILLA (Pleuroncodes planipes) PARA EL
CAMARON BLANCO Litopenaeus vannamei

Tesis presentada para la obtencin del grado de


MAESTRO EN CIENCIAS PECUARIAS
ante el
POSGRADO INTERINSTITUCIONAL
EN CIENCIAS PECUARIAS
de la Universidad de Colima
por
Ernesto Goytorta Bores

COMIT TUTORIAL

DR. ROBERTO CIVERA CERECEDO


DRA. ELIZABETH CRUZ SUREZ
DR. DOMENICO VOLTOLINA LOBINA

Colima, Col., Mxico.

Septiembre 2000

NDICE

RESUMEN

........................................................ 1

ABSTRACT

........................................................ 2

I. INTRODUCCIN

II. HIPOTESIS
III. OBJETIVOS

................................................ 3

..................................................... 9
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

IV. REVISIN DE LITERATURA

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

4.1

Generalidades

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

4.2

Composicin qumica

4.3

Usos potenciales de la langostilla

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13

V. MATERIAL Y MTODOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Material biolgico y organis mo experimentales

. . . . . . . . . . . . . . . . 17

5.2

5.1
Materias

primas e ingredientes especiales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17


5.3

Alimento de referencia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
5.3.1

Composicin

5.3.2

Fabricacin

5.3.3

Estabilidad en agua
5.4

Sistema de cultivo para experimentos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

Experimento de crecimiento
5.5.1

Alimentos experimentales

5.5.2

Condiciones de cultivo y controles peridicos

5.5.3

Criterios de evaluacin

5.5.4

Anlisis estadsticos

5.6

Experimento de digestibilidad
5.6.1

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27

Alimentos experimentales

5.6.2

Condiciones de cultivo y controles peridicos

5.6.3

Criterios de evaluacin

5.5

5.6.4

Anlisis estadsticos

5.7

Anlisis qumicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5.7.1

Anlisis qumico proximal

5.7.2

Lpidos totales

30

Protena soluble
Energa bruta
Oxido crmico
Principales clases de lpidos
Electroforesis
Actividad enzimtica

VI. RESULTADOS

..............................................

6.1

Anlisis qumico proximal de ingredientes

6.2

Ensayo de crecimiento

6.3

Ensayo de digestibilidad

VII. DISCUSIN

...................

..................................
................................

Ensayo de crecimiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7.2

Ensayo de digestibilidad

VIII. CONCLUSIONES

IX. LITERATURA CITADA

APENDICE I
e minerales

36
37
41

.................................................

7.1

36

48

48

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56

............................................

........................................

66

68

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

........................

21

Tabla 4 Composicin de la premezcla de vitaminas

.......................

22

Tabla 5. Composicin de alimentos experimentales para experimento


de crecimiento

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . .

25

Tabla 6. Composicin de alimentos experimentales para experimento


de digestibilidad

...................................................

Tabla 7. Composicin qumica proximal de ingredietes

....................

28

36

Tabla 8. Composicin qumica proximal y estabilidad de los alimentos


experimentales utilizados en el experimento de crecimiento

................

37

..............

38

Tabla 9. Condiciones de cultivo del experimento de crecimiento

Tabla 10. Composicin qumica proximal y estabilidad de los alimentos


experimentales utilizados en el experimento de digestibilidad in vivo

Tabla 11. Condiciones de cultivo del experimento de digestibilidad

..........

42

...........

42

Tabla 12. Principales clases de lpidos en hepatopncreas de pre-adultos de


Litopenaeus vannamei alimentados con las dietas experimentales . . . . . . . . . . . . . .

46

Tabla 13. Indice hepatosomtico, protena soluble y actividad enzimtica de


camarones L. vannamei alimentados con los tratamientos experimentales

.....

47

NDICE DE FIGURAS

Figura 1. Usos potenciales para la langostilla Pleuroncodes planipes

. . . . . . . . . . . 13

Figura 2. Obrtencin de un concentrado protenico y un extracto lipdico de


langostilla (Pleuroncodes planipes)

.....................................

19

Figura 3. Sobrevivencia, tasa de crecimiento y alimento consumido promedio


por tratamiento

.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

Figura 4. Nmero promedio de mudas por tratamiento

39

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40

Figura 5. Factor de conversin alimenticia y eficiencia protenica promedio por


tratamiento

. . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

41

Figura 6. Digestibilidad aparente de protenas y de lpidos, energa disponible


promedio por tratamiento

............................................

44

Figura 7. Electroforesis en gel SDS-PAGE de msculo de juveniles de L. vannamei


alimentados con la diferentes tratamientos experimentales

. . . . . . . . . . . . . . . . . . 45

ESTE DOCUMENTO SE DEDICA A LA MEMORIA DE MI PAPA:

LIC. HORACIO GOYTORTUA RIVERA

Y A MI MAMA:

BERTHA BORES DE GOYTORTUA

A QUIENES LES DEBO TODO

AGRADECIMIENTOS:
A mi familia, muchas gracias por su amor y apoyo incondicional en todo momento.

Al Dr. Roberto Civera, quien no solo fue un excelente asesor, sino es un excelente amigo.

A Tere por todo el tiempo y cario brindado sin condiciones, en la buenas y en las malas.

A IBQ Sonia Rocha, cIBQ Dolores Rondero y Luis integrantes del Laboratorio de Anlisis Proximal, por
su apoyo.

A la palomilla, por ser amigos(as) en todos momentos, muchas gracias por el apoyo acadmico y personal
siempre brindando.

Al Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste, S.C. y a su director el Dr. Mario Martnez M. por la
facilidades prestadas para el buen desarrollo de esta investigacin.

Al CONACyT por la beca de estudios de Maestra con la cual fui apoyado.

A la Federacin Regional de Sociedades Cooperativas de la Industria Pesquera Baja California F.C.L., a


la S.C.P.P. Pescadores Nacionales de Abuln S.C. de R.L., a la S.C.P.P.R. Leyes de Reforma S.C. de
R.L., a la Promotora Industrial Acuasistemas S.A. de C.V., y al Ing. Cesar Garca gerente general de
Conservera San Carlos S.A. de C.V. por el apoyo brindado al proyecto CIB-96-COLAB-029FEDERACION, as como a los Acuacultores de la Paz (APSA) por el apoyo brindado.

A FOSIMAC por el apoyo brindado al proyecto Aprovechamiento Integral de la langostilla Pleuroncodes


planipes y su uso en la alimentacin de camarones peneidos. Clave 980106024.
Al Dr. Carlos Martnez Palacios y al personal de la Unidad de Investigacin y Desarrollo Tecnolgico en
Acuicultura y Manejo Ambiental del CIAD, A.C. por haberme permitido integrarme al grupo de
estudiantes de posgrado, a los cuales tambin agradezco profundamente su amistad y compaerismo.

Agradezco a los doctores. Miguel A. Galina Hidalgo y Enrique Silva Pea, a la Lic. Hermelinda
Rodrguez Montao y a todas las personas de la Universidad de Colima por el apoyo recibido en los
tramites y seminarios del PICP.

A mis sinodales Dra. Elizabeth Cruz Surez y Dr. Domenico Voltolina Lobina, por su tiempo invertido en
la lectura del presente documento y por las observaciones hechas para el mejoramiento del presente

documento.

A todos mi compaeros de trabajo por el tiempo dedicado a responder a mis dudas.

A todas aquellas personas; amigos, compaeros y conocidos que me ofrecieron su ayuda desinteresada
para la buena realizacin del presente trabajo.

RESUMEN
Se determin el valor nutricio de varios productos obtenidos a partir de langostilla mediante un
experimento de crecimiento y uno de digestibilidad con juveniles de Litopenaeus vannamei. La langostilla
liofilizada se someti a un proceso de extraccin con ter de petrleo dando como resultado un extracto
lipdico y un concentrado protenico. Los camarones fueron alimetandos con ocho dietas en las cuales la
harina de sardina y el aceite de atn fueron parcial, o totalmente, reemplazados por los subproductos de
langostilla.
Los resultados muestran que la fraccin protenica incrementa el crecimiento y el consumo de alimento
indicando la presencia del promotor de crecimiento. La inclusin de los productos de langostilla aumenta
el aprovechamiento de la protena dietaria. El extracto lipdico de langostilla y el aceite de langostilla
resultan ser excelentes sustitutos del aceite de atn en alimento balanceado para L. vannamei.

ABSTRACT
The nutritional value of several red crab products was evaluated throught two feeding trials
(growth and digestibility) on juvenile shrimp (Litopenaeus vannamei). Freeze-dried red crab was submited
to an petroleum ether extraction resulting in a lipid extract and a protein concentrated. The shrimp were
fed eigth diets in which sardine meal and tuna oil were partial, or total, replaced by the red crab products.
The results show the protein fraction enhances growth and feed consumption, indicating that it
may contain a growth promotor. The inclusion of red crab products in the diet increases protein
assimilation. Although the lipid extract and the red crab oil do not increase growth rate or protein
digestibility, they are excellent substitutes for tuna oil used in feeds for Litopenaeus vannamei.

I. INTRODUCCIN
La acuicultura es una de las disciplinas pecuarias que mayor crecimiento ha tenido a nivel mundial en los
ltimos aos. New (1997) reporta que de 1984 a 1995 la produccin mundial por acuicultura aument un
177%, y espera que dicha tendencia contine. Este incremento en la produccin es causado por la
aparicin de nuevas granjas, expansin en superficie de granjas existentes y por la intensificacin en el
sistema de cultivo, lo que a su vez tiene como consecuencia un incremento en el uso de alimento
balanceado, cuya produccin tambin se ha visto incrementada. Tacon (1999) reporta que la produccin
de estos alimentos fue de 11.5 millones de toneladas mtricas en 1997, y tomando en cuenta la tasa de
crecimiento del sector acucola calcula que para el ao 2000 se producir alrededor de 14.5 millones
toneladas mtricas.
Si bien podemos considerar que no existen problemas mayores con el abasto de alimento balanceado, ya
que la oferta cubre la demanda, no necesariamente su calidad es satisfactoria. El uso de alimento de baja
calidad representa un alto costo econmico y ecolgico, ya que si no proporciona los nutrientes requeridos
por la especie bajo cultivo aumenta el riesgo de enfermedades por desnutricin y/o afecta el crecimiento
de los organismos; adems el alimento no consumido y no digerido impacta directamente en la ecologa
del sistema de cultivo y su entorno. Por otro lado, el alimento representa el principal costo de produccin
en sistemas de cultivo semi-intensivo e intensivo (Daz, 1999) y su calidad y rentabilidad depende de los
ingredientes que lo componen, del proceso utilizado en su elaboracin y del manejo que se le de en la
granja (Subramanyam, 1994), por lo cual el uso de alimento elaborado a partir de ingredientes de buena
calidad y elaborados con tcnicas apropiadas, aumenta la probabilidad de xito de un cultivo en trminos
tanto econmicos como ecolgicos (Sudaryono, Hoxey, Kailis y Evans, 1995).
El ingrediente que mayor impacto tiene sobre la calidad del alimento es la fuente de protenas, que por su
costo y porcentaje de inclusin (hasta 60%) tiene un efecto directo sobre la economa del cultivo y que por
su naturaleza nitrogenada, puede impactar directamente la ecologa del entorno. Dos tercios de la protena
utilizada en alimentos acucolas proviene de harina de pescado (McCoy, 1990), por lo que la dependencia

de este insumo resulta ser un problema ya que la harina de pescado no solo es utilizada para la elaboracin
de alimento balanceado para acuicultura, sino adems es ampliamente utilizada por el sector avcola y el
sector porccola entre otros, que son los principales consumidores de este insumo (aproximadamente un 55
y 20% respectivamente), por lo que la adquisicin de harina de pescado es sumamente competida sobre
todo, cuando se trata de adquirir una harina de buena o excelente calidad, necesaria para los alimentos
acucolas de calidad.
Una harina de pescado de excelente calidad se caracteriza por tener una alta palatabilidad, protenas con
buena digestibilidad y nivel de aminocidos esenciales disponibles en cantidad suficiente para cubrir los
requerimientos de la especie bajo cultivo, adems de altos niveles de energa (Webster y Tidwell, 1992;
Hardy, 1998). Son estas caractersticas las que hacen a la harina de pescado un ingrediente muy solicitado
por la industria de alimentos balanceados, y el nivel de produccin de estas harinas es la principal
desventaja, ya que es un ingrediente escaso y con un futuro poco alentador ya que la captura de peces
destinados a la elaboracin de harinas, si bien mostr un crecimiento constante de los 60s a los 80s, se ha
mantenido constante desde entonces (Rumsey, 1993; Hardy, 1998), y se espera que estos niveles de
produccin no aumenten (Chamberlain y Rosenthal, 1995).
Debido a estos problemas diversos investigadores han dirigido su inters hacia la bsqueda de ingredientes
que sustituyan, parcial o totalmente, a la harina de pescado. Las fuentes protenicas que sustituyan a la
harina de pescado debern estar fcilmente disponibles, ser econmicamente accesibles y tener una
calidad nutricia adecuada (Mazid, Zaher, Begun, Ali y Nahar, 1997; Mendoza, Aguilera y Montemayor,
1998). Tratando de identificar ingredientes que cumplan estas caractersticas, se han evaluado ingredientes
tanto de origen vegetal como de origen animal (Mtailler y Guillaume, 1999).
Entre los ingredientes de origen vegetal analizados se encuentran subproductos de semillas de oleaginosas,
protenas unicelulares, concentrados protenicos, subproductos agro-industriales, macrofitas acuticas, as
como tambin semillas y hojas de leguminosas (Olvera-Novoa y Olivera-Castillo, 1998; MartnezPalacios, Chvez-Snchez, Olvera-Novoa y Abdo de la Parra, 1999). Los resultados de estas evaluaciones
son muy variados, pero predomina el hecho que niveles de inclusin altos de protena de origen vegetal en
alimentos acucolas producen una reduccin del crecimiento y una pobre eficiencia alimentaria en los
organismos que los consumen. Este efecto puede deberse al deficiente balance en nutrimentos requeridos
por los organismos, a la presencia de factores antinutricionales y/o a la disminucin de la palatabilidad y
estabilidad de los alimentos (Trevio y Celis, 1999). Aunque ya se cuenta con tecnologas mejoradas para
la remocin de factores antinutricionales de los ingredientes de origen vegetal, que permiten incrementar
su tasa de inclusin en alimentos acucolas (Chamberlain, 1999), persiste el problema de que niveles altos
de inclusin de estos ingredientes han mostrado reducir la palatabilidad de los alimentos, principalmente
en especies carnvoras. La soya es el ingrediente que mejor ejemplifica lo anterior y es tambin la fuente
protenica de origen vegetal ms estudiada (Lovell, 1991; Tacon y Akiyama, 1997; Trevio y Celis, 1999).
Tambin existen un gran nmero de investigaciones que evalan ingredientes de origen animal terrestre
como sustitutos de la harina de pescado, los cuales, si bien no contienen factores antinutricionales de
origen como el caso de los ingredientes vegetales, presentan otro tipo de desventaja como es un alto
contenido en cenizas y deficiencia en algunos de los aminocidos identificados como esenciales para
organismos acuticos. Los ingredientes obtenidos a partir de desechos de carniceras y rastros, como es el
caso de la harina de carne y hueso, son deficientes en metionina y tirosina, mientras que altos niveles de
inclusin de harina de sangre se ha reportado que provoca una deficiencia en isoleucina debido a un efecto
antagnico por el exceso en leucina sobre el metabolismo de la isoleucina (Tacon y Akiyama, 1997).
Aunque son pocos, existen trabajos que evalan el efecto de la inclusin de ingredientes obtenidos a partir
de subproductos avcolas sobre el desarrollo de especie acucolas (Mendoza y Montemayor, 1998). Dentro
de los ingredientes de origen animal destacan los provenientes del medio marino, ya que estos ingredientes
no solo contienen los nutrimentos requeridos por diferentes especies acucolas, sino que se ha reportado la
presencia de compuestos que actan como promotores de crecimiento.
Carrillo (1996) define a un factor o promotor de crecimiento como cualquier elemento que al ser
incorporado en pequeas cantidades a la dieta de una especie animal, sin variar de forma considerable su
composicin, logra una aceleracin del crecimiento que se refleja en aumento de talla y peso corporal.
Estos elementos pueden actuar de diferentes maneras, que pueden ser:
1.- Nutrientes suministrados en dosis superiores al requerimiento, que actan como antioxidantes o
estimulan la secrecin de hormonas. Por ejemplo se ha demostrado que la inclusin de levaduras en
alimento para camarn incrementa la tasa de crecimiento (Cuzon, 1999), y este se atribuye al aporte de

vitaminas del complejo B. La astaxantina es otro compuesto que ha mostrado tener un efecto positivo en el
desarrollo de camarones (Meyer, 1998). Ambos compuestos tienen capacidad antioxidante y es a sta
capacidad que se atribuye el efecto promotor de crecimiento. La astaxantina tambin ha mostrado tener un
efecto sobre la secrecin de hormonas, ya que su presencia reduce el ciclo de muda y la tasa de
ecdisteroides en poslarvas de Penaues japonicus (Petit, Ngre-Sadargues, Castillo y Tirlles, 1997).
2.- Hormonas que regulan los procesos de crecimiento, sntesis protenica y proliferacin celular. Se ha
demostrado que la adicin de hormonas estimulantes de la muda acelera la muda y el crecimiento en
Penaeus monodon (Qinse, Rui y Chuihong, 1996). Fernndez, Ramos, Huberman y Van Wormhoudt
(1998) estudiando el efecto de hormonas esteroides de vertebrados sobre clulas disociadas de
hepatopncreas de Palaemon serratus, observaron que el estradiol y la progesterona estimulaban la sntesis
protenica y al probarlas en un experimento in vivo con Litopenaeus schmitti observaron un acortamiento
del ciclo de muda y una mayor eficiencia alimentaria. Richardson, Anderson y Sara (1997) sugieren que la
adicin de pptidos semejantes a la insulina al alimento balanceado para langosta de agua dulce (Cherax
quadricarinatus) tiene influencia a nivel biolgico en procesos relacionados al metabolismo y al
crecimiento.
3.- Agentes antimicrobianos que reducen toxinas microbianas depresoras del crecimiento y la destruccin
microbiana de nutrientes esenciales en el tracto gastrointestinal (Visek, 1978). Trevio, Cruz y Ricque
(1999) citan que la presencia de antibiticos en alimento balanceado para animales mejora el desarrollo e
ndices de conversin alimenticia en organismos juveniles, y relacionan este efecto con el control de
grmenes no identificados y dbilmente patgenos que residen principalmente en el tracto digestivo.
Tambin comentan que cuando evaluaron el uso del antibitico flavofosfolipol (ingrediente activo
utilizado como promotor de crecimiento en terneros, cerdos y aves) en alimento para L. vannamei, dicho
producto acta como promotor de crecimiento mejorando la sobrevivencia, el nivel de produccin
(biomasa ganada) y la conversin alimenticia.
4. Enzimas que aumentan la actividad enzimtica en el tracto y por lo tanto aumentan la eficiencia de
utilizacin de los alimentos. Buchanan, Sarac, Poppi y Cowan (1997) trabajando con juveniles de P.
monodon, incrementaron el valor nutricio de alimentos balanceados, manufacturados con altos porcentajes
de ingredientes de origen vegetal, mediante la adicin de enzimas exgenas. Davis y Arnold (1998)
reportan una mejora en los valores de digestibilidad aparente en L. vannamei por el uso de una enzima
proteoltica en el alimento.
Forrellat (1998) evalu el uso de un producto multienzimtico obtenido de hepatopncreas de camarn
como aditivo alimentario, y observ que la inclusin de este aditivo en alimento para poslarvas de
camarn incrementa significativamente la tasa de crecimiento y estimula la actividad enzimtica digestiva
de los organismos.
5.- Otras sustancias que aumentan la eficiencia de absorcin y utilizacin de los nutrientes. Lpez,
Velasco, Hinrischsen, Lawrence y Rutman (1998) observaron que al incluir a un 2% de harina de krill a
alimento para L. vannamei se produca un incremento en la tasa de crecimiento, y lo atribuyen a un
aumento en el consumo de alimento y/o la presencia de un promotor de crecimiento, aunque no identifican
el origen y el mecanismo de accin de este compuesto.
En el mismo estado de conocimiento se encuentra la evaluacin de la langostilla (Pleuroncodes planipes)
como ingrediente protenico en alimento para camarn. Existen evidencias de que la presencia de harina
de langostilla en alimento para L. vannamei provoca un incremento en la tasa de crecimiento, en la
digestibilidad aparente de protenas y lpidos, en el consumo de alimento y en la frecuencia de muda,
aunque el contenido en aminocidos de la harina de langostilla y no difiere del descrito para la harina de
pescado y adems la digestibilidad aparente de protena de la harina de langostilla es menor a la de la
harina de pescado. Debido a todas estas evidencias se supone la presencia de un promotor de crecimiento
en la langostilla, aunque se desconoce su naturaleza y modo de accin.
Con el fin de conocer la naturaleza del promotor de crecimiento contenido en la langostilla, el presente
trabajo se propone fraccionar a la langostilla en una parte protenica y otra lipdica, sin que el proceso de
separacin afecte el valor nutricio de cada fraccin obtenida. El presente trabajo pretende enriquecer el
estado actual de conocimiento en el que se encuentran los estudios sobre el valor nutricio de la langostilla
planteando la hiptesis y los objetivos que se enlistan a continuacin.

II. HIPOTESIS
El incremento en la tasa de crecimiento de Litopenaeus vannamei alimentados con dietas balanceadas que
incluyen harina de langostilla puede ser debido a la accin de un promotor de crecimiento presente en la
fraccin protenica, a la lipdica o a un efecto combinado que puede ser sinrgico.
Los mecanismos de accin de este promotor de crecimiento puede ser el incremento en la digestibilidad
aparente de protenas y lpidos, un incremento en el consumo de alimento, o bien, un accin de tipo
hormonal.
III. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Obtener un extracto lipdico y un concentrado protenico a partir de la langostilla (Pleuroncodes planipes)
y determinar su valor nutricional para el camarn blanco Litopenaeus vannamei.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Obtener un concentrado protenico y un extracto lipdico a partir de langostilla, usando ter de petrleo
como solucin extractora.
Evaluar el valor nutricio del extracto lipdico y del concentrado protenico para juveniles de camarn
blanco Litopenaeus vannamei, midiendo el efecto de la inclusin de los extractos en alimentos
experimentales sobre el crecimiento ponderal, la sobrevivencia, el factor de conversin alimenticia, la
composicin qumica de los organismos y la digestibilidad aparente in vivo de protena y lpidos de los
alimentos.
IV. REVISIN DE LITERATURA.
4.1 GENERALIDADES
Existe en los litorales mexicanos un gran nmero de especies que no se explotan con fines comerciales,
probablemente porque son poco conocidas o porque no se han observado en una abundancia suficiente que
amerite su pesca comercial. Sin embargo, el hecho de que no tengan una demanda de mercado, no
significa que no puedan ser empleadas como insumo para alimentar otras especies de organismos
terrestres o acuticos, as como para otras industrias.
En las costas de Baja California se ha reportado como fauna de acompaamiento en las pesqueras de
camarn, atn y sardina el crustceo Pleuroncodes planipes en cantidades tan importantes que se le llega a
considerar como una plaga (Carrillo-Domnguez, 1993). Aurioles-Gamboa, Balart y Castro-Aguirre
(1995) calculan que el rendimiento de pesca durante el perodo verano-otoo es de 109,000 toneladas
mtricas, mientras que para el perodo fro (invierno-primavera) se ve reducida a 77,000 toneladas
mtricas, lo que significa que en promedio se pudieran pescar hasta 93,000 tm anuales. Sin embargo,
Aurioles et al. (1995) recomiendan que con el fin de no abatir el recurso, se tome como criterio que el
rendimiento potencial sea un 10% de la biomasa estimada, al menos durante los primeros aos de la
pesquera.
4.2 COMPOSICIN QUMICA
La composicin qumica de la langostilla esta en funcin de varios factores, siendo los ms importantes la
etapa de vida en que se encuentra, adems de la zona, profundidad y poca del ao en que se captura. La
protena (35 a 55%), los minerales (13 a 38% expresado como cenizas) y la quitina (6.8 a 12.1 %) son los
componentes qumicos ms abundantes en este recurso (Castro, Carrillo, Prez y Calvo, 1995), adems
como se puede observar en la Tabla 1, posee un buen balance y cantidad de aminocidos esenciales para el
desarrollo de peces y camarones (Spinelli, Lehman y Wieg, 1974; Gallardo, 1975).

Tabla 1. Composicin en aminocidos de la protena de la langostilla Pleuroncodes planipes reportada por


varios autores (g/100 g protena)

Aminocidos
Spinelli et al. (1974)
Gallardo (1975) Milln (1992)
Treonina@
5.4
3.9
2.9
Valina@
5.5
7.9
6.7
Metionina@
2.2
2.0
3.2
Isoleucina@
3.7
3.6
6.7
Leucina@
6.6
5.9
9.6
Fenilalanina@ 4.3
5.0
4.8
Lisina@ 6.1
6.6
10.6
Triptofano@
1.4
1.5
1.1
Acido asprtico 15.5
9.2
5.3
Acido glutmico 16.9
12.1
8.2
Serina 5.5
3.9
2.7
Prolina 3.8
4.2
4.5
Alanina 6.2
5.8
4.8
Glicina 6.3
6.0
7.4
Cisteina 1.4
0.8
0.8
Tirosina 3.2
9.1
4.3
Histidina@
3.4
2.6
4.8
Arginina@
7.2
7.6
6.7
@ Aminocidos esenciales para peces y camarones.

El contenido en lpidos de la langostilla vara de 4.7 a 14% y estos estn compuestos principalmente por
cidos grasos poliinsaturados (Pierce, Van der Veen y Olcott, 1969; Spenilli et al. 1974; Gallardo, 1975),
destacando el alto contenido en cido eicosapentaenoico (20:5n3) y en cido docosahexanoico (22:6n3).
Tambin destaca el alto contenido en carotenoides (10-16 mg/100g), lo que convierte a la langostilla en
una excelente fuente de pigmentos, especialmente en astaxantina (Spenilli et al. 1974; Wilkie, 1972).

4.3 USOS POTENCIALES DE LA LANGOSTILLA


El uso que se le pueda dar a la langostilla est en funcin de su tamao. Una mayor talla resulta apropiada
para la produccin de cola de langostilla en presentacin fresca-congelada, para el consumo humano,
como sucede en el caso de la explotacin comercial de la langostilla chilena Pleuroncodes monodon, ya
que aunque no se han llevado a cabo estudios sobre la biomasa de la langostilla bentnica (AuriolesGamboa et al. 1995), existen evidencias que indican grandes concentraciones de este recurso (Balart
comunicacin personal).
La langostilla de menor tamao, debido a su composicin qumica, puede ser utilizada como insumo para
las industrias del sector de alimentos, del farmacutico, del biotecnolgico y del acucola. Existen varios
estudios dirigidos al desarrollo de tecnologas que permitan su aprovechamiento. En la Figura 1 se
muestran los usos potenciales que presenta la langostilla. La mayor parte de los trabajos evalan a la
langostilla como insumo para alimentos acucolas, aunque existen trabajos en donde se propone a la
langostilla como insumo en dietas para avicultura y para consumo humano.

Figura 1. Usos potenciales para la langostilla Pleuroncodes planipes (Tomado de Civera, Goytorta,
Rocha, Vega y Nolasco, 1998).

La langostilla ha sido evaluada como ingrediente en la elaboracin de botanas (Gallardo, 1975; JimnezBeltrn, 1978), as como en dietas para aves de corral, ya sea como aceite y/o como harina, utilizados
como fuente de pigmentos obteniendo excelentes resultados (Carillo-Domngues, 1993; Carrillo, Prez,
Avila y Castro, 1995). Tambin ha sido utilizada como fuente de pigmentos en alimento para trucha
arcoiris dando buenos resultados, comparables con los obtenidos al utilizar pigmentos sintticos (Spinelli
et al. 1974; Spinelli y Mahnken, 1978; Coral, Huberman, De la Lanza y Monroy, 1997 y 1998). Roldn,
Molina, Cceres y Civera (1998) al evaluar el poder enriquecedor en cidos grasos del aceite de langostilla
en rotiferos, utilizados como presas vivas para el cultivo de la cabrilla arenera Paralabrax
maculatofasciatus, reportaron que es un excelente enriquecedor en cidos grasos y pigmentos.
Existen evidencias prcticas que muestran que la langostilla entera puede ser utilizada como alimento para
maduracin de camarones (Civera et al., 1998b). Van Olst, Ford, Carlberg y Dorband (1976) reportaron
mejores resultados cuando usaron langostilla entera congelada como alimento para la langosta Homarus
americanus, que cuando la usaron como harina en dietas balanceadas; Hernndez y Gonzlez (1989)
utilizaron harina de langostilla en la fabricacin de alimento balanceado para alimentar camarn azul
(Litopenaeus stylirostris) y camarn caf (Farfantepenaeus californiensis) en estanques con un sistema
semi-intensivo, reportando buenos niveles de produccin. Despus de este trabajo se han llevado a cabo
una serie de experimentos a nivel laboratorio, piloto y comercial para evaluar el efecto de la inclusin de
harina de langostilla en alimentos balanceados para camarones peneidos.
En 1990, Villarreal, Rivera y Milln reportaron que la harina de langostilla puede sustituir parcialmente a
la harina de pescado (16%) y a la pasta de soya (18%) en alimentos balanceados para poslarvas y juveniles
de camarn caf (F. californiensis), produciendo crecimientos significativamente superiores a los
obtenidos con las dietas sin langostilla. Villarreal y Castro (1992) evaluaron la calidad de alimentos
comerciales para camarn usando juveniles de L. vannamei, en esta evaluacin incluyeron un alimento
experimental en el cual se sustituy el 25% de la protena aportada por la harina de desechos de atn por
harina de langostilla, y reportaron que fue la dieta con harina de langostilla con la que se obtiene la tasa de
crecimiento ms elevada, tambin reportaron una mayor frecuencia de muda en los organismos
alimentados con la dieta experimental.
Goytorta (1993), al sustituir 13, 25 y 38% de la protena aportada por harina de desechos de atn en
dietas balanceadas para juveniles de L. vannamei, report que la inclusin de harina de langostilla a
cualquier nivel mejora el crecimiento y la digestibilidad aparente de protenas y lpidos, sin embargo, el
crecimiento solo se mejor significativamente cuando se sustituy el 38% de la harina de pescado,
mientras que la digestibilidad aparente de protenas se ve mejorada significativamente a cualquier nivel de
sustitucin. Tambin report un incremento significativo en la frecuencia de muda al incluir harina de
langostilla a cualquiera de los tres niveles, as como un incremento en el consumo de alimento.
Villarreal et al. (1994) evaluaron el efecto de la sustitucin de 33, 66 y 100% de la protena aportada por
harina de desechos de atn por harina de langostilla en dietas balanceadas para L. vannamei, y reportaron
que un 66% de sustitucin result ser el ms eficiente. Tambin observaron un incremento en el consumo
de alimento y en la frecuencia de muda al incluir langostilla en los alimentos. Civera et al. (1994)
observaron un comportamiento similar al evaluar las dietas anteriores pero con juveniles de F.
californiensis.
Goytorta y Civera (datos no publicados; Apndice I), con el fin de determinar el nivel ptimo de
sustitucin de harina de langostilla por harina de sardina en alimentos para camarn L. vannamei,
disearon ocho alimentos con niveles de sustitucin protenica de 35, 40, 45, 50, 55 y 65%. Los seis
niveles en que la harina de langostilla sustituye a la harina de pescado mejora significativamente la tasa de
crecimiento de los organismos, identificndose un margen de sustitucin ptimo que va de un 50 a un
65%.
Ezquerra, Garca y Haard (1997a) utilizaron juveniles de L. vannamei para evaluar la digestibilidad
aparente de protenas de la harina de langostilla, utilizando un mtodo in vitro y uno in vivo, y reportan
una digestibilidad de 69% y 66% respectivamente. Ezquerra, Garca, Civera y Haard (1997b) reporta tasas
de crecimiento similares entre los organismos alimentados con dietas a base de harina de anchoveta y
aquellos alimentados con una dieta con harina de langostilla.

Los resultados hasta ahora reportados ponen en evidencia que la inclusin de harina de langostilla en
sustitucin de harina de pescado y de pasta de soya, en alimento balanceado, incrementa la tasa de
crecimiento, el consumo de alimento y la frecuencia de muda de juveniles de L. vannamei. Tambin se ha
mostrado que incrementa la digestibilidad aparente de protenas y de lpidos de los alimentos, a pesar de
que la harina de langostilla no presenta valores altos de digestibilidad, y que su inclusin como sustituto
de la harina de pescado en el alimento no modifica el perfil de aminocidos de la dieta. Estos resultados
hacen suponer la presencia en la harina de langostilla de un compuesto que este actuando como promotor
de crecimiento, sin embargo, no se cuenta con la informacin necesaria para definir de qu se trata y cul
es su mecanismo de accin. A continuacin se presenta la metodologa seguida para tratar de identificar la
naturaleza de dicho compuesto, as como para lograr tener una primera aproximacin del posible
mecanismo de accin del mismo.
V. MATERIAL Y MTODOS.
El presente trabajo fue realizado en los laboratorios de Nutricin Acucola del Centro de Investigaciones
Biolgicas del Noroeste, S.C. (CIBNOR), en la ciudad de La Paz, Baja California Sur, Mxico.
5.1 MATERIAL BIOLGICO Y ORGANISMOS EXPERIMENTALES
La langostilla Pleuroncodes planipes utilizada fue capturada en las afueras de Baha Magdalena, frente a la
Isla Margarita en la costa del estado de Baja California Sur, Mxico, durante el perodo Noviembre a
Diciembre de 1996. Una vez capturada se mantuvo bajo congelacin ( -20C ) hasta su posterior uso en el
laboratorio.
Los camarones utilizados en el presente trabajo pertenecen a la especie Litopenaeus vannamei, y fueron
donados por la empresa Acuacultores de la Paz (APSA) ubicada en la ciudad de La Paz, B.C.S. Un primer
lote de cuatro mil poslarvas 30 (PL 30), proveniente del laboratorio de produccin larvaria, recibi un
proceso de aclimatacin en el laboratorio de Nutricin Experimental del CIBNOR en tanques de plstico
(2 500 l capacidad) y fue alimentado con una combinacin de nauplios de Artemia/calamar y
calamar/pelet comercial con 40% de protena, hasta que los organismos alcanzaran el tamao requerido
para el experimento de crecimiento.
El segundo lote de organismos donados consisti en 250 juveniles de Litopenaeus vannamei obtenidos de
la granja de engorda de la empresa APSA. Estos organismos fueron aclimatados en el laboratorio de
Nutricin Acucola alimentndolos con una dieta, con 40% de protena cruda, elaborada en la Planta de
Alimentos del CIBNOR hasta el momento de iniciar el experimento de digestibilidad.
5.2 MATERIAS PRIMAS E INGREDIENTES ESPECIALES
A excepcin de los ingredientes especiales, todas las dems materias primas utilizadas en el presente
trabajo fueron adquiridas de casas comerciales. A continuacin se describen a los ingredientes especiales:
Langostilla liofilizada (LL): Un lote de langostilla fue descongelado mediante almacenamiento a 5C. La
langostilla se pas a travs de un molino de carne con un dado de salida con orificio de 1 mm, y la pasta
de langostilla obtenida se someti a un proceso de secado por liofilizacin, y el producto liofilizado fue
molido en un molino de caf para obtener un tamao de partcula menor a 500 y almacenado bajo
refrigeracin a 5C.
Harina de langostilla (HL): La langostilla se someti a un proceso de escaldado en agua dulce a 100C por
cinco minutos, luego se dej escurrir sobre una malla y se sec en una estufa con circulacin de aire a
40C por 18 horas. Por ltimo se moli en un molino de martillo y se tamiz a 500 . Este producto se
almacen bajo refrigeracin (5C).
Concentrado protenico (CPL) y extracto lipdico de langostilla (ELL): Un lote de langostilla liofilizada se
someti a una doble extraccin en un aparato Soxhlet utilizando ter de petrleo como solvente. De estas
extracciones se obtuvieron dos fracciones, una fraccin insoluble en el solvente, denominada concentrado
protenico, y una segunda, fraccin, soluble en el solvente, denominada extracto lipdico. Para cada
extraccin se utiliz 400 ml de ter de petrleo por 4 gramos de muestra, el tiempo de extraccin fue de 6
horas a la temperatura de ebullicin del solvente (aproximadamente 45C). La muestra residual se someti
a una segunda extraccin con un volumen nuevo de solvente. El material extrado (ter de petrleo +

fraccin lipdica) se concentr en un rotavapor (35C y vaco) y el solvente residual fue evaporado
utilizando una corriente de nitrgeno, mientras que la fraccin slida residual (concentrado protenico) se
coloc bajo una campana de extraccin por 8 h, y por ltimo se someti a un secado en una estufa con
flujo de aire a 40C por 30 minutos, con lo que se asegur la eliminacin del solvente residual (Figura 2).

Langostilla liofilizada

Extraccin Soxhlet con


ter de petrleo por 6 h

Solucin de
ter de petrleo:lpidos

Fraccin slida no
soluble en ter de Petrleo

Extraccin Soxhlet con


ter de petrleo por 6 h

Solucin de
ter de petrleo:lpido

Concentracin en
Rotavapor

Fraccin slida no
soluble en ter de petrleo

Evaporacin de ter de
petrleo a 40C
por 30 min. en estufa

Secado con nitrgeno gaseoso

Extracto lipdico de langostilla

Concentrado protenico de langostilla

Figura 2. Obtencin de un concentrado protenico y un extracto lipdico de langostilla (Pleuroncodes


planipes).
Aceite de langostilla (AL): El aceite de langostilla fue el subproducto de la obtencin, a nivel industrial,
de harina de langostilla (Planta harinera de Conservera San Carlos, San Carlos B.C.S.), en donde la

langostilla sufre un cocimiento para luego ser prensada y el lquido de prensa es tamizado y centrifugado
obteniendo como producto al aceite de langostilla al cual se le aadio BHT como antioxidante (Civera et
al. 1998a).
Harina de cabeza de camarn: La harina de cabeza de camarn fue elaborada siguiendo el mismo
procedimiento descrito para la fabricacin de harina de langostilla. Esta harina se elabor a partir de
cabezas de camarn de la especie L. vannamei.
Concentrado protenico de sardina (CPP): Para obtener este concentrado protenico se utiliz a la harina de
sardina incluida en los alimentos a utilizar en el presente trabajo. La harina de sardina se someti a una
doble extraccin por 6 horas en un sistema Soxhlet, utilizando ter de petrleo como solvente a razn de 4
gramos de harina por 300 ml de solvente, dando como resultado el concentrado protenico de sardina. Para
asegurar el ausencia del solvente, el producto se coloc dentro de una campana de extraccin por 4 h
seguido de un proceso de secado ligero a 40C por dos horas.

5.3 ALIMENTO DE REFERENCIA


5.3.1 Composicin
Para la formulacin del alimento de referencia (DR) se tom como base los requerimientos nutricios
reportados para el camarn blanco Litopenaeus vannamei (Akiyama y Dominy, 1989; Camba, Pedrazzoli,
Yaguachi y Akiyama 1993), utilizando el software Mixit-2+ para el balanceo de nutrientes (Tabla 2). La
composicin de las premezclas de minerales y de vitaminas se muestran en las Tablas 3 y 4,
respectivamente. Estos mismos criterios fueron tomados en cuenta para la formulacin de los alimentos
experimentales.

Tabla 2. Composicin del alimento de referencia (g/100 g alimento)


INGREDIENTE DR
Harina de Sardina
25.00
Harina de Trigo 16.00
Almidn maz 11.60
Pasta de Soya 26.96
Harina de cabeza de camarn
10.00
Grenetina
4.00
Aceite de atn 1.00
Lecitina soya
1.50
Premezcla mineral1
3.50
Premezcla vitaminas2
0.26
Vitamina C (Stay C 25% a.a.)
0.12
Cloruro de colina 99%
0.04
1 y 2 La composicin de estas mezclas se describe en la Tabla 3 y 4 respectivamente.

Tabla 3. Composicin de la premezcla de minerales


Mineral Origen g/ 100g premezcla
g/kg de alimento
KCl
Sigma Co.
14.29 0.5
MgSO4.7H2O Sigma Co.
14.29 0.5
ZnSO4.7H2O
Sigma Co.
2.57
0.09
MnCl2.4H2O
Sigma Co.
0.67
0.0234
CuCl2.2H2O
Sigma Co.
0.15
0.005

KI
Sigma Co.
0.15
CoCl2.2H2O
Sigma Co.
NaHPO4
Sigma Co.

0.05
0.07
67.71

0.0025
2.37

Tabla 4. Composicin de premezcla de vitaminas


Vitaminas
Origen g/100g premezcla
mg/ kg alimento
Vitamina A acetato
ICN Biomedicals Inc.
0.01
0.516
Vitamina D3 (Colacalciferol)
ICN Biomedicals Inc.
3.72
0.06
Vitamina E (Tocoferol) ICN Biomedicals Inc.
7.93
400
Vitamina K3 Menadiona ICN Biomedicals Inc.
0.40
20
Tiamina (B1) mononitratoICN Biomedicals Inc.
2.98
150
Riboflavina (B2) ICN Biomedicals Inc.
1.98
100
Piridoxina (B6) hidroclorada
ICN Biomedicals Inc.
0.99
50
Acido D-pantotnico
ICN Biomedicals Inc.
1.98
100
Niacina (Ac. Nicotnico) ICN Biomedicals Inc.
5.95
300
D-Biotina
ICN Biomedicals Inc.
0.02
1
Inositol ICN Biomedicals Inc.
9.92
500
Acido flico
ICN Biomedicals Inc.
0.40
20
Cianocobalamina (B12) ICN Biomedicals Inc.
0.002 0.1
Celulosa (vehculo)
ICN Biomedicals Inc.
19.84 1000

5.3.2 Fabricacin
Los ingredientes slidos ha utilizar fueron finamente molidos en un molino de caf, y tamizados a travs
de un tamiz de 500 micras, para despus ser mezclados por 15 minutos en una mezcladora Kitchen
AidMR de 5 l, adicionando primero los macroingredientes secos (ingredientes incluidos en mayor
porcentaje), seguidos de la mezcla de microingredientes, adicionando posteriormente la emulsin de
aceite-lecitina. Una vez bien mezclados todos los ingredientes se agreg agua (alrededor del 50% en peso
de mezcla slida), y la pasta resultante fue pasada a travs de un molino de carne en dos ocasiones para
obtener pelets de 2 mm de dimetro, mismos que fueron cortados manualmente, y secados en una estufa
con flujo de aire a 35C por 5 horas aproximadamente, para luego ser almacenados bajo refrigeracin.

5.3.3 Estabilidad en agua


El alimento fue sometido a una prueba de estabilidad en agua siguiendo la metodologa a continuacin
descrita: 4 g de alimento (porcentaje de humedad conocido) se colocan en un matraz Erlenmeyer de 250
ml, el cual contiene 200 ml de agua destilada. Despus de una hora el contenido del matraz se filtra a
travs de un papel filtro Whatman No. 1, previamente secado y pesado, con la ayuda de una bomba de
vaco. El papel filtro con el alimento residual se somete a un secado en una estufa con flujo de aire a 40C
por 24 horas. La frmula utilizada para determinar la estabilidad de la muestra en el agua, calculado como
porcentaje de materia seca retenida, es la siguiente:

5.4 SISTEMA DE CULTIVO PARA EXPERIMENTOS


El sistema de cultivo utilizado para llevar a cabo las evaluaciones biolgicas del presente trabajo consiste
en una sala cerrada con clima y fotoperodo controlados, en la cual se encuentran 24 acuarios de plstico
(0.5 X 0.31 X 0.2 m) de 30 l de capacidad. La temperatura del agua de los acuarios se control

independientemente con la ayuda de un calentador sumergible (250 Watts) en cada acuario y el nivel de
oxgeno se mantuvo por medio de piedras difusoras alimentadas por un soplador de HP.
El sistema de alimentacin de agua consiste en un pozo, alimentado con agua de mar que pasa a travs de
un filtro de cama de arena. El agua es impulsada con una bomba de 3/4 HP hacia un aljibe con capacidad
de 1.5 m3. Del aljibe se bombea el agua, pasando por un filtro de cartucho de 10, hacia un tinaco de 1
m3, para despus ser descargada por gravedad hacia los distintos acuarios, pasando antes por un filtro de
luz ultravioleta.
5.5 EXPERIMENTO DE CRECIMIENTO
Despus de un perodo de engorda de 45 das se seleccionaron 240 organismos con un peso promedio de
0.225g 0.016 y se distribuyeron aleatoriamente en las 24 unidades experimentales de 30 l, a razn de 10
organismos por acuario, y se cont con tres rplicas por cada tratamiento alimenticio.
5.5.1 Alimentos experimentales
Para evaluar el valor nutricio de los diferentes ingredientes especiales (harina de langostilla, langostilla
liofilizada, concentrado protenico y extracto lipdico de langostilla, aceite de langostilla, concentrado
protenico de sardina) se disearon siete dietas isoprotenicas, isolipdicas e isocalricas.
Para el diseo de estos alimentos se tom como base al alimento de referencia, en donde cada uno de los
ingredientes especiales sustituy el 50% de la protena aportada por la harina de sardina y/o el 100% del
aceite de atn, segn se describe a continuacin :
Como referencia a trabajos anteriores se incluy harina de langostilla sustituyendo el 50% de la protena
aportada por la harina de sardina (dieta DHL). Para evaluar el efecto del tratamiento trmico sobre la
langostilla se diseo una dieta en la cual se incluy langostilla liofilizada en lugar de la harina (dieta
DLL). Mientras que para identificar en qu fraccin de la langostilla se encuentra el promotor de
crecimiento, en lugar de harina de langostilla se incluy al concentrado protenico de langostilla (dieta
DCPL), y en otra dieta se sustituy el 100% del aceite de atn por extracto lipdico de langostilla (dieta
DELL); para evaluar un posible efecto sinrgico entre los compuestos de estas fracciones, ambas fueron
incluidas en un alimento (dieta DCP+EL).
Para evaluar el efecto del proceso de extraccin sobre el concentrado protenico de langostilla, se dise
un alimento en el cual el sustituto protenico fue el concentrado protenico de sardina (dieta DCPP),
obtenido bajo las mismas condiciones que el de langostilla. Y por ltimo, se diseo un alimento en el cual
el aceite de atn fue reemplazado por aceite de langostilla obtenido bajo condiciones diferentes al extracto
lipdico (dieta DAL).

Tabla 5. Composicin de alimentos experimentales para experimento crecimiento


INGREDIENTES
DHL DLL
DCPL DELL DCP+EL
DCPP DAL
Harina de Sardina
12.5
12.5
12.5
25.0
12.5
---- ---Harina de langostilla
25.1
---- ---- ---- ------- ---Langostilla liofilizada
- - - - 24.3
---- ---- ------- ---Concentrado protenico de langostillla.
- - - - - - - - 23.1
- - - - 23.1
---- ---Extracto etreo de langostilla.
- - - - - - - - - - - - 1.59
1.59
---- ---Concentrado protenico de sardina - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 23.3
23.3
Aceite de langostilla
---- ---- ---- ---- ---- - - - 3.56
Aceite de atn 1.0
1.0
2.14
- - - - 1.0
3.34
---Harina de Trigo 15.1
15.9
15.9
16.0
15.5
16.0
16.0
Almidn maz - - - - - - - - - - - 11.0
- - - - 11.0
10.8
Los niveles de inclusin de la pasta de soya, harina de cabeza de camarn, grenetina, premezclas de
minerales y vitaminas, y lecitina de soya se mantuvieron constantes en todos los alimentos, segn se
muestra en la Tabla 2 (alimento de referencia).
5.5.2 Condiciones de cultivo y controles peridicos
Durante los treinta das experimentales se registr la temperatura, la salinidad, el nmero de mudas, el
nmero de muertos y la cantidad de alimento residual. Cada semana se seleccionaron aleatoreamente ocho

acuarios a los que se les determin pH, nitritos y amonio disuelto, para lo cual se utiliz un equipo
HACHMR para monitoreo de aguas.
El primer da de experimento se suministr tomando como criterio el 10% de la biomasa total, y a partir
del segundo da se corrigi dicha cantidad tomando como base la cantidad de alimento residual, estimado
por apreciacin visual cada maana, el alimento fue dosificado en dos porciones al da (10:00 y 15:00 h).
Una vez hecho el monitoreo diario se procedi a retirar, por medio de sifoneo, el alimento no consumido y
la materia residual; el porcentaje diario de recambio de agua fue de 90%. Los organismos se pesaron al
inicio, a los 15 das y al final del periodo experimental que fue de 30 das.
5.5.3 Criterios de evaluacin
Este experimento nos permite medir el efecto que tienen los diferentes alimentos experimentales sobre la
sobrevivencia, desarrollo (crecimiento y nmero de mudas) y consumo de alimento de los organismos
alimentados con dichos tratamientos durante un periodo de tiempo determinado. A continuacin se
presentan los criterios nutricios y las frmulas utilizadas para su clculo.

Sobrevivencia (%) = (organismos inicio - organismos final / organismos inicio) X 100

Tasa de Crecimiento (%) = ( (Peso final - peso inicial ) / peso inicial ) X 100

Incremento en peso corregido = Biomasa final + (1/2(peso promedio final + peso


promedio inicial) X nmero de muertos) - Biomasa inicial

5.5.4 Anlisis estadsticos


La normalidad de los datos se verific utilizando la Prueba de Lilliefors, mientras que la homogenidad de
varianzas se prob utilizando la Prueba de Barttlet (Nieves-Soto y Ramrez-Resndiz, 1993; Sokal, 1995;
Conover, 1980; Ott, 1992).
Los datos de peso final y tasa de crecimiento fueron los nicos que presentaron el nmero de
observaciones necesarias para ser sometidos a un anlisis de normalidad y de homoscedasticidad (n > 3).
Ambos criterios presentaron un comportamiento normal y homegenidad en sus varianzas por lo que para
llevar a cabo el ANAVA y la prueba de comparacin de mltiple de medias de estos datos se utiliz el
mtodo paramtrico de Tukey (Statgraphic Ver. 5.1). Para los dems criterios nutricios (sobrevivencia,
FCA, EP, nmero de mudas, alimento consumido) se utiliz el mtodo no paramtrico de Kruskall Wallis,
tanto para obtener su ANAVA y como para la prueba de comparacin mltiple. Para evaluar la posible
correlacin entre los diferentes criterios nutricios se utiliz el mtodo no paramtrico de correlacin por
rangos de Spearman (STATISTICA 6.0).

5.6 EXPERIMENTO DE DIGESTIBILIDAD


Despus de seis das de aclimatacin a las condiciones experimentales, se pes cada uno de los juveniles
de L. vannamei donados por la Granja APSA, de los cuales se seleccionaron 62 con un peso promedio de
13.870.32 g. La distribucin de organismos se llev a cabo de manera aleatorea en las 24 unidades
experimentales; en cada acuario se colocaron 3 organismos experimentales y cada tratamiento
experimental fue evaluado por tripicado.

5.6.1 Alimentos experimentales


Para la elaboracin de estos alimetos se utilizaron las mismas formulaciones empleadas en la
fabricacin de los alimentos utilizados en el experimento de crecimiento, solo que se les aadio 0.5% de
xido crmico disminuyendo en la misma proporcin la harina de trigo para ajustar a 100%.
Tabla 6. Composicin de alimentos experimentales para experimento de digestibilidad
INGREDIENTES
DHL DLL
DCPL DELL DCP+EL
DCPP DAL
Harina de Sardina
12.5
12.5
12.5
25.0
12.5
---- ---Harina de langostilla
26.1
---- ---- ---- ------- ---Langostilla liofilizada
- - - - 23.0
---- ---- ------- ---Concentrado protenico de langostillla.
- - - - - - - - 22.5
- - - - 22.5
---- ---Extracto etreo de langostilla.
- - - - - - - - - - - - 1.59
1.59
---- ---Concentrado protenico de sardina - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 23.3
23.3
Aceite de langostilla
---- ---- ---- ---- ---- - - - 3.56
Aceite de atn 1.0
1.0
2.14
- - - - 1.0
3.34
---Harina de Trigo 13.5
16.0
16.0
16.0
15.5
16.0
16.0
Almidn maz - - - - - - - - - - - 11.0
- - - - 11.0
10.8
Oxido crmico 0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Los niveles de inclusin de la pasta de soya, harina de cabeza de camarn, grenetina, premezclas de
minerales y vitaminas, y lecitina de soya se mantuvieron constantes en todos los alimentos, segn se
muestra en la Tabla 2 (alimento de referencia).
5.6.2 Condiciones de cultivo y controles peridicos
La temperatura, salinidad, pH y el amonio fueron registrados durante los 20 das de experimentacin.
Cada maana se retir la materia residual presente en las unidades experimentales por medio de sifoneo,
para luego llevar a cabo un recambio de agua equivalente al 90% del volumen total. Una vez limpios los
acuarios, se procedi a suministrar el alimento correspondiente, y una vez transcurridas dos horas se llev
a cabo la primera colecta de materia fecal en cada acuario. Luego de esta primera colecta se volvi a
proporcionar alimento, para luego de una hora proceder a una segunda colecta, dosificando alimento
nuevamente para, al cabo de una hora, realizar la tercera y ltima colecta del da (13:00, 15:00 y 17:00
respectivamente).
La colecta de materia fecal se llev a cabo por medio de sifoneo, en donde la materia fecal es colectada en
una criba con 0.5 mm de luz de malla para luego ser sometida a un lavado por inmersin en agua destilada
y posteriormente ser congelada a 40C para despus liofilizarla. A estas muestras se les cuantific el
contenido en xido crmico, protena total, lpidos y energa segn la metodologa descrita en la seccin
5.8
Al finalizar el experimento se pes cada uno de los organismos, y se identificaron a aquellos que se
encontraban en estadio C de intermuda. El estadio de muda se caracteriz en base a la setognesis de los
urpodos, para lo cual se utiliz un microscopio estereoscpico. A fin de tratar de homogenizar, en
medida de lo posible, la cantidad de alimento presente en los hepatopncreas de estos organismos, el
muestreo de cada organismo se llev una hora despus de la ltima alimentacin. A estos organismos
(intermuda C) se les extrajo el hepatopncreas, mismos que fueron mezclados y suspendidos en una
solucin buffer de fosfatos 10 nM (pH 7.0, 1:4 peso hmedo/ vol.), en un bao con hielo y agua, usando
un homogenizador de tejidos. Despus se centrifugaron (15,000 r.p.m., 5 min.) y el sobrenadante fue
removido y se mantuvo dentro de un vial (5 ml) a 20C hasta su utilizacin. Tambin se separaron
msculos caudales de estos organismos, los cuales se almacenaron a 20C hasta su posterior anlisis.

5.6.3 Criterios de evaluacin


Los alimentos fueron analizados en su composicin qumica proximal (humedad, protena cruda, lpidos
totales, fibra cruda, cenizas, extracto libre de nitrgeno), contenido energtico y xido crmico.
El uso de un marcador externo (xido crmico) nos permiti llevar a cabo una colecta parcial de la materia
fecal producida por los organismos alimentados con los tratamientos experimentales, y por medio de un
balance de materia, tomando como base al xido crmico, se estim la digestibilidad aparente de
protenas, lpidos y energa disponible con la ayuda de la siguiente frmula:

Con el fin de evaluar un posible efecto del tratamiento alimenticio sobre la composicin de algunos tejidos
de los organismos experimentales, se evalu el contenido protenico de los msculos, y el perfil de clases
de lpidos en hepatopncreas de organismos en estadio C de intermuda. Tambin se evalu el efecto del
alimento sobre la actividad especfica de proteasas, lipasas y amilasas en los hepatopncreas de estos
organismos.
5.6.4 Anlisis estadsticos
Los criterios nutricios utilizados en este experimento presentan las mismas caractersticas descritas para el
caso del experimento de crecimiento, esto es, un tamao de muestra menor de 3 (n < 3), por lo que el
anlisis de varianza (ANAVA), el anlisis de comparacin mltiple de medias y los anlisis de correlacin
fueron llevados a cabo utilizando mtodos no paramtricos, como es el caso del mtodo de KruskallWallis para el ANAVA y comparacin mltiple, y el mtodo de Spearman para los anlisis de correlacin.

5.7 ANLISIS QUMICOS


5.7.1 Anlisis qumico proximal
Para el anlisis qumico proximal se sigui la metodologa descrita en los manuales de la A.O.A.C.
(1995), en donde la humedad se determin por diferencia de peso; el contenido de cenizas se determin
por calcinacin en mufla a 550C; para la cuantificacin de protena bruta se utiliz un digestor y un
destilador automtico Tecator, siguiendo el mtodo de microkjeldhal, utilizando un factor general de 6.25;
el extracto etreo se cuantific utilizando un sistema Soxhlet, utilizando ter de petrleo como solucin
extractora; el contenido en fibra cruda se determin por hidrlisis sucesiva, cida y bsica (cido sulfrico
e hidrxido de sodio). Utilizando estos datos se calcul el extracto libre de nitrgeno, esto es, a 100 se le
resto los porcentajes de protena cruda, extracto etreo, fibra cruda y cenizas, cada uno expresado en base
seca.
5.7.2 Lpidos totales
Para obtener la cantidad de lpidos totales de las muestras (para el caso de los alimentos utilizados en el
experimento de digestibilidad y la muestras fecales colectadas) se tom como base la metodologa descrita
por Folch, Lees y Sloane-Stanley (1957). A 100 mg de muestra liofilizada se le agreg 6.3 ml de la mezcla
metanol:cloroformo:agua (2:1:0.8; v:v:v) como primer solucin extractora, se centrifug (2500 r.p.m. por
10 min.), y el residuo se someti a una doble extraccin con 5 ml de metanol:cloroformo (2ml y 3 ml
respectivamente). Por centrifugacin (2500 r.p.m. por 10 min.) se separ la mezcla cloroformo:lpidos, y
la fraccin metanol:agua:lpidos residuales se someti a un doble lavado con cloroformo (2 ml y 3 ml
respectivamente). A la mezcla cloroformo:lpidos se le aadi BHT como antioxidante (0.02% del
contenido de lpidos) y se someti a un proceso de destilacin en un rotavapor (20C); los lpidos
residuales se recuperaron utilizando 1 ml de cloroformo para ser vertidos en viales de 1 ml. El cloroformo
se evapor utilizando una corriente de nitrgeno. El porcentaje de lpidos totales se obtiene por la
diferencia entre el peso de la muestra inicial con lpidos y el peso de los lpidos recuperados.

5.7.3 Protena soluble


La protena soluble en hepatopncreas se determin usando el kit comercial Bio-Rad Protein Assay (1984)
siguiendo la metodologa descrita en el manual adjunto al kit el cual se basa en la metodologa descrita por
Bradford (1976).
5.7.4 Energa bruta
La energa bruta se determin por combustin de las muestras, bajo condiciones controladas, utilizando un
calormetro isoperiblico y se utiliz cido benzoico como estndar. Para el anlisis de la materia fecal

colectada se utiliz cido salicilico como vehculo (relacin 0.8:1.2), el cual tiene un valor calrico
aproximado de 5.235 kcal/g. Para obtener el valor calrico de la muestra se utiliz las siguientes frmulas:
Fraccin de muestra en la mezcla (Fs) =
Fraccin de vehculo en la mezcla (Fv)
Valor calrico de la mezcla (Em)
Valor calrico del vehculo (Ev)
Contribucin del vehculo en Em = Ev x Fv
Contribucin de la muestra en Em = Em (Ev x Fv)
Valor calrico de la muestra (Es) = (Em EvFv)/ Fs
5.7.5 xido crmico
Para calcular el porcentaje de xido crmico se utiliz el mtodo sugerido por Olvera-Novoa (1994). A
continuacin se describe:
50 mg de muestra finamente molida (< 500 micras) se colocaron en un tubo Tecator aforado a
100 ml y se les adicion 5 ml de HNO3 y se colocaron en en un digestor Tecator. Al trmino de la
reaccin, indicada por el color verdoso claro de la solucin, se dej enfriar. Una vez fra la solucin se le
agreg con cuidado 3 ml de cido perclrico y se someti a un proceso de digestin hasta que la solucin
vir de verde a amarillo limn. La confirmacin del final de la reaccin se observ por un anillo rojo que
se forma en la superficie de la solucin una vez fra. La solucin se pas a un matraz volumtrico de 25 ml
y se afor con agua destilada, y de ahi se tom una muestra para leer su absorvancia en un
espectrofotmetro a 350 nm.
Las frmulas utilizadas para el clculo del valor de xido crmico fueron:
X = ( (Y 0.0032) / 0.2089 ) / 4) en donde,
X = cantidad de xido de cromo presente en la muestra
Y = absorvancia
0.0032, 0.2089 y 4 son constantes
En donde:
% Oxido crmico = 100 x ( X / A )
A = Peso de la muestra
5.7.6 Principales clases de lpidos
Para determinar las principales clases de lpidos presentes en los extractos de
hepatopncreas de los organismos experimentales se utiliz un analizador Iatroscan MK5 (Iatron
Laboratories, Tokyo Japan) y el software T-Scan data como integrador, siguiendo la metodologa sugerida
por Fraser, Tocher y Sargent (1985). El detector de ionizacin por flama fue operado con un flujo de aire
de 2000 ml/min y una presin de hidrgeno de 0.7 kg/cm2. La velocidad de lectura se fij a 30 segundos
por lectura.
Para llevar a cabo la separacin los rods se alinearon en un tanque o cmara de cromatrogafa lnea
conteniendo una mezcla de hexano:acetato de etilo:ter etlico:cido frmico (91:6:3:1 v:v:v:v). El
corrimiento se detuvo hasta que el solvente se desplaz 10 cm del origen. Los rods fueron secado a 100C
por 2 minutos e inmediatamente escaneados en el Iatroscan.

5.7.7 Electroforesis
El anlisis electrofortico de los extractos protenicos obtenidos de los msculos de organismos en
intermuda C, se llev a cabo bajo condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE) segn la tcnica descrita
por Laemmli (1970). Las muestras fueron mezcladas con azul de bromofenol (0.01%) y sacarosa al 10%.
Se tomaron alcuotas de 25 l y fueron colocadas en el borde superior del gel. La electroforesis fu llevada
a cabo con un voltaje constante (200 volts) hasta que la banda de colorante (azl de bromofenol) lleg a
1.5 cm del borde inferior del gel. El patrn de protenas fu obtenido tiiendo el gel con azl de coomasie
al 0.1% (en 40% de metanol/10% cido actico) durante una hora y destiiendo con una solucin 40% de
metanol y 10% de cido actico durante 24 horas. Como marcadores de peso molecular se utiliz el kit
comercial SDS-PAGE std broad range de Biorad.

5.7.8 Actividad enzimtica


Para determinar la actividad especfica de proteasas se tom como base la metodologa descrita por VegaVillasante, Nolasco y Civera (1995), en donde 10 l de extracto protenicoco de hepatopncreas mezclado
en 240 l de Tris-HCl (50 mM, pH 7.2) fueron preincubados por 5 minutos a temperatura ambiente. A
esta suspensin se le adicion 500 l de azocasena (2% en Tris-HCl 50 mM, pH 7.2) como sustrato y se
dej en incubacin por 30 minutos a temperatura ambiente. Para detener la reaccin se adicion 500 l de
TCA (20%) y se centrifug a 10,000 rpm por 5 minutos, y al sobrenadante se le determin su absorbancia
a 440 nm. Para el caso de los testigos se sigui el mismo procedimiento agregando agua destilada y la
enzima fue adicionada despus de la adicin de TCA (20%).
Una unidad de proteasa fu definida como la cantidad de enzima que causa un incremento de 0.01
unidades de absorbancia a 440 nm, por minuto, en las condiciones establecidas.
La actividad especfica de lipasas se determin tomando como base la tcnica descrita por Versaw,
Cuppett, Winters y Williams (1989): 10 l de extracto extracto protenico de hepatopncreas mezclado en
1900 l de Tris-HCl (50 mM, pH 7.2) y 100 l de tauracolato de sodio (100 mM) fueron preincubados
por 5 minutos a temperatura ambiente. A esta suspensin se le adicion 20 l de -Naftil-caprilato (200
mM) como sustrato y se dej en incubacin por 30 minutos a temperatura ambiente. Para detener la
reaccin se adicion 200 l de TCA (0.72 N) y previo a la lectura en espectofotmetro se adicion 2.71 ml
de etanol:acetato de etilo (1:1 v/v), se agit en vortex y se ley absorbancia a 540 nm.
Una unidad de lipasa fu definida como la cantidad de enzima que causa un incremento de 0.01
unidades de absorbancia a 540 nm, por minuto, en las condiciones establecidas.
Para determinar actividad amilasas se utiliz como base el mtodo reportado por Vega-Villasante, Nolasco
y Civera (1993): se adicion 5 l de extracto extracto protenico de hepatopncreas a 500 l de Tris-HCl
(50 mM, pH 7.2) para luego ser preincubados por 5 minutos a temperatura ambiente. A esta suspensin se
le adicion 500 l de almidn soluble (1% en Tris-HCl) como sustrato y se dej en incubacin por 10
minutos a temperatura ambiente. Al producto de reaccin se le adicion 1.5 ml de reactivo DNS y se agit
para someterse a un bao Mara por 15 min. Se adicion 7.3 ml de agua destilada, se agit y se ley la
absorbancia en espectofotmetro a 550 nm.
Una unidad de amilasa fu definida como la cantidad de enzima que causa un incremento de 0.01
unidades de absorbancia a 550 nm, por minuto, en las condiciones establecidas.
VI. RESULTADOS.
6.1. ANALISIS QUIMICO PROXIMAL DE INGREDIENTES.
La composicin qumica de las principales fuentes protenicas utilizadas en el presente trabajo se muestra
en la Tabla 7, en donde se puede apreciar que la harina de sardina present un alto contenido protenico
(66.93%) siendo superado solo por el concentrado protenico de sardina que present una cantidad mayor
de protena (72.41%) y un reducido contenido de lpidos (1.13%) con respecto a su fuente original
(7.02%).
TABLA 7. Composicin qumica proximal de ingredientes.
%MS %PC
%E.E. %F.C. %C
%E.L.N Energa
cal/g
Harina de sardina96.3
66.93 11.80 0.00
14.07 7.20
Concentrado protenico de sardina 95.8
72.41 1.80
0.00
Pasta de soya
92.2
43.40 7.59
5.18
7.35
36.48
Harina de cabeza camarn98.0
53.61 10.65 4.26
17.95
Langostilla liofilizada
96.8
34.48 6.55
12.73 32.10
Harina de langostilla
97.7
33.38 7.02
13.20 32.26
Concentrado protenico de langostilla
94.7
36.30 1.13
Harina de trigo 91.8
14.38 8.97
1.09
2.43
73.13
Almidn de maz92.1
0.00
0.86
0.00
0.00
99.04
Extracto etreo langostilla N.D.
N.D.
N.D.
N.D.
N.D.
Aceite de langostilla
99.8
N.D.
98.50 N.D.
N.D.
Aceite de atn 100
0.71
99.15 0.00
0.14
0.00
Lecitina de soya 99.5
3.80
89.24 0.00
6.96
0.00

4809
14.00
4389
13.53
14.14
14.14
13.43
4049
4000
N.D.
N.D.
8952
8355

11.79

4613

4548
3228
3162
28.27

20.87

8059
8850

2905

Valores promedio de 3 repeticiones, expresados en base seca. MS: Materia seca; PC: Protena cruda
(NX6.25); E.E.: Extracto etreo; F.C.: Fibra cruda; C: Cenizas; E.L.N.: Extracto libre de nitrgeno; N.D.:
No determinado.
El contenido protenico de la langostilla liofilizada y la harina de langostilla result ser muy similar (34.38
y 34.48% respectivamente) siendo mayor en el caso del concentrado protenico de langostilla (36.3%). Un
comportamiento inverso se presenta para el contenido en extracto etreo, donde el concentrado protenico
de langostilla contiene nicamente 1.13%. Estos tres ingredientes presentan un alto contenido de cenizas.
Los ingredientes seleccionados como principal fuente de protena para los alimentos fueron la harina de
pescado, el concentrado protenico de pescado, la harina de langostilla, la langostilla liofilizada, el
concentrado protenico de langostilla, la harina de cabeza de camarn y la pasta de soya. Mientras que la
fuente de lpidos fue el aceite de pescado, la lecitina de soya, el extracto lipdico de langostilla y el aceite
de langostilla.

6.2 EXPERIMENTO DE CRECIMIENTO


La composicin proximal de los alimentos empleados en el experimento de crecimiento se presentan en la
Tabla 8. En base a estos resultados se puede observar que cada uno de los alimentos cumpli con los
requerimientos nutricios reportados para Litopenaeus vannamei (Akiyama y Dominy, 1989; Camba et al.,
1993). El contenido protenico vari de 41.29% a 42.37% sin presentar diferencias significativas (P >
0.05).
Tabla 8. Composicin qumica proximal y estabilidad de los alimentos experimentales utilizados en el
experimento de crecimiento
DR
DHL
DLL
DCPL DELL DCP+EL
DCPP DAL
Materia seca (%) 92.7
92.9
92.4
93.3
92.3
93.0
91.5
93.3
Protena cruda1 42.24 41.75 41.61 42.37 41.90 42.01 41.54 41.29
Extracto etreo1 6.49
5.73
6.17
6.36
6.20
6.25
7.18
7.26
Fibra cruda1
2.97
3.87
3.13
2.70
3.85
2.44
2.78
2.71
Cenizas1
11.68 18.58 19.17 18.57 11.80 18.51 11.62 11.59
E.L.N. 136.32 30.07 29.92 30.00 36.25 30.79 36.88 37.15
Energa (cal/g) 1 4605
4332
4277
4361
4675
4418
4704
4757
Estabilidad1,2 87.2
86.6
82.7
81.7
89.2
83.4
89.1
86.6
1 Valor promedio de tres repeticiones, expresados en base seca. E.L.N. Extracto libre de nitrgeno. 2
Medido como porcentaje de materia seca retenida.
Las dietas DCPP y DAL son las que presentaron los valores ms altos de lpidos, mientras que el menor
valor se present con la dieta DHL. La inclusin de la fraccin slida de la langostilla (fraccin protenica)
incrementa el contenido de cenizas de las dietas que lo contienen. Los valores de estabilidad de los
alimentos en el agua, expresada como porcentaje de materia seca retenida, fueron superiores al 80% en
todos los alimentos.
En la Tabla 9 se pueden observar las condiciones de cultivo mantenidas durante el experimento de
crecimiento.
Tabla 9. Condiciones de cultivo del experimento de crecimiento
Especie: Litopenaeus vannamei
Temperatura: 27.9 0.07C
Peso inicial: 0.225 g
Salinidad: 40.97 0.05 partes por mil
Acuarios: 30 l (0.50 X 0.31 X 0.20 m)
pH: 8.26 0.26
Densidad: 64.5 camarones/m2
Nitritos: 0.297 0.13 mg/l
Duracin: 30 das
Amonio disuelto: No detectado
Recambio de agua: 90% diario
Alimentacin: Ad libitum, dos veces al da
Diseo: 10 org por acuario y 3 acuarios por tratamiento
Fotoperodo: 12 h luz (07:00 a 19:00 h); 12
h oscuridad

La sobrevivencia vari de 86.7 a 100%, sin observarse alguna relacin con el tipo de alimento
suministrado. Los alimentos que contenan el concentrado protenico (dietas DCPL y DCPL+EL)
presentaron una tasa de crecimiento significativamente superior a las obtenidas con los dems alimentos;
mientras que los alimentos que no contenan al concentrado protenico (DHL, DLL, DELL, DCPP y DAL)
no difirieron entre ellas. Sin embargo, se observa una mayor tasa de crecimiento con aquellas dietas que
contienen algn producto de langostilla (Figura 3).

Figura 3. Sobrevivencia (A), tasa de crecimiento (B) y alimento consumido (C) promedio por tratamiento
obtenidos despus de 30 das de experimentacin con juveniles de Litopenaeus vannamei con un peso
promedio inicial de 0.225 g 0.016. Letras diferentes sobre las barras indican diferencias significativas (P
< 0.05)
Los valores de TdeC (%) presentaron correlacin con los valores de consumo de alimento (r = 0.91). Los
organismos alimentados con las dietas DCPL y DCP+EL presentan un consumo de alimento
significativamente mayor (P<0.025) a los alimentados con las otras dietas, a excepcin de los alimentados
con la dieta DLL. Se observa que aquellas dietas que no contenan ningn producto protenico de
langostilla (DR, DELL, DCPP y DAL) presentan los consumos de alimento ms bajos (Figura 3).
La inclusin del concentrado protenico de langostilla increment significativamente la frecuencia de
muda, y de los alimentos con aceite o extracto lipdico de langostilla, presentaron valores similares a los
alimentos que no contenian ninguna fraccin de langostilla (Figura 4).
Figura 4. Nmero promedio de mudas por tratamiento alimenticio obtenidos despus de 30 das de
experimentacin con juveniles de Litopenaeus vannamei con un peso promedio inicial de 0.225 g 0.016.
Letras diferentes sobre las barras indican diferencias significativas (P < 0.05)
El factor de conversin alimenticia vara de 1.40 para la dieta con langostilla liofilizada (DLL) hasta 1.16
para la dieta con aceite de langostilla (DAL), pero no se detectan diferencias significativas entre ninguno
de los diversos tratamientos alimenticios (P>0.025). Existe una correlacin entre los valores de FCA y la
eficiencia protenica (r = 0.71), en donde la dieta DAL es la que presenta el valor ms alto de eficiencia
protenica y la dieta DHL el ms bajo (Figura 5). Los valores de eficiencia protenica presentan un
tendencia a disminuir conforme se incrementa el contenido de cenizas en el alimento, aunque no existe
una correlacin significativa (r = -0.60)
Figura 5. Factor de conversin alimenticia (FCA) y eficiencia protenica promedio por tratamiento
obtenidos despus de 30 das de experimentacin con juveniles de Litopenaeus vannamei con un peso
promedio inicial de 0.225 g 0.016. Letras diferentes sobre las barras indican diferencias significativas (P
< 0.05).

6.3 EXPERIMENTO DE DIGESTIBILIDAD


Los alimentos utilizados en el experimento de digestibilidad presentaron una distribucin uniforme del
xido crmico, cuyo contenido vari de 0.39 a 0.49 %. No se observ diferencia en el contenido
protenico de los alimentos, el cual vari de 42.48 a 43.58% (Tabla 10). El contenido de cenizas presenta
un comportamiento similar al observado en las dietas utilizadas en el experimento anterior (experimento
de crecimiento), esto es, existe un incremento de cenizas en los alimentos que contienen la fraccin
protenica de la langostilla con respecto a aquellos alimentos que no la contienen. La estabilidad de estos
alimentos vari del 80 al 86%.
Tabla 10. Composicin qumica proximal y estabilidad de los alimentos experimentales utilizados en el
experimento de digestibilidad in vivo.
INGREDIENTE
Materia seca (%)
Protena cruda1
Extracto etreo1

DR
90.3
43.23
5.49

DHL
92.4
42.73
4.43

DLL
90.9
43.49
5.21

DCPL
91.3
43.58
4.95

DELL
92.2
43.49
5.66

DCP+EL
91.9
93.1
43.08 42.48
4.75
6.68

DCPP
93.6
42.48
6.57

DAL

Fibra cruda1
2.69
2.65
2.91
2.14
1.50
2.27
2.05
0.88
Cenizas1
10.96 17.81 18.10 17.31 10.85 17.51 10.77 11.41
E.L.N.1 37.63 32.38 30.29 32.02 38.50 32.39 38.02 38.66
Oxido crmico1 0.435 0.425 0.406 0.490 0.418 0.462 0.383 0.38
Energa (cal/g) 1 4566
4316
4494
4417
4713
4439
4606
4592
Estabilidad
83.7
80.8
83.2
79.9
85.3
79.6
84.1
85.6
1 Valor promedio de tres repeticiones y estn expresados en base seca. E.L.N. Extracto libre de nitrgeno
Las condiciones de cultivo mantenidas en el transcurso del presente experimento (Tabla 11) se
mantuvieron homogneas entre los diferentes acuarios, y no se evidenci efecto alguno debido a
variaciones en dichas condiciones, por lo que suponemos que el alimento fue la variable aleatoria del
experimento.
Tabla 11. Condiciones de cultivo del experimento de digestibilidad
Especie: Litopenaeus vannamei
Temperatura: 28.3 0.4C
Peso inicial: 13.870.32 g Salinidad: 35.6 0.6 partes por mil
Acuarios: 30 l (0.50 x 0.31 x 0.20 m)
pH: 7.56 0.09
Densidad: 19 camarones/m2
Nitritos: 0.32 0.02 mg/l
Duracin: 40 das
Amonio disuelto: 1.77 0.51
Recambio de agua: 90% diario
Diseo: 3 organismos por acuario y
Alimentacin: Ad libitum, 3 veces al da
13:00, 15:00 y 17:00 h
3 acuarios por tratamiento Fotoperodo: 6 h luz (09:00 a 15:00 h) ; 18 h oscuridad
La digestibilidad aparente de protena se increment significativamente con respecto a la dieta de
referencia (65%) cuando se incluy langostilla a las dietas (Figura 8), aunque este efecto no se present en
la dieta que contena el extracto lipdico de langostilla (DELL; 69.8%), la cual no difiere
significativamente de la dieta de referencia. La digestibilidad de protenas de las dietas que contienen la
fraccin protenica de la langostilla vari de 72.7 a 78.9 %. Las dietas DCPP y DAL presentan una
digestibilidad protenica (72.8 y 73.6%) significativamente mayor a la que se present en la dieta de
referencia (Figura 6, grfica A)
Los valores de digestibilidad aparente de lpidos y de energa disponible, se observan en las grficas B y C
de la Figura 6. A excepcin de la dieta DHL que contiene harina de langostilla, las dems dietas con
subproductos de langostilla no presentan un incremento significativo en los valores de digestibilidad
lipdica, sin embargo s se observa un incremento en dichos valores con respecto a la dieta de referencia
(DR). Las dietas DCPP y DAL presentan los valores ms altos de digestibilidad de lpidos, siendo
significativamente mayores a la dieta DR.
El alimento DHL presenta el valor ms alto de energa disponible (80 %), y la dieta de referencia presenta
el menor valor (60.5 %), siendo significativa dicha diferencia (P < 0.05). Con excepcin de las dietas DHL
y DCPL las dems dietas a las cuales se les incluy langostilla presentan un ligero incremento en los
valores de energa disponible con respecto a la dieta de referencia, sin embargo dicho incremento no es
significativo (P > 0.05).

Figura 6. Digestibilidad aparente de protenas (A) y de lpidos (B), energa disponible (C) promedio por
tratamiento medidos en camarones Litopenaeus vannamei con peso promedio de 13.9 0.3 g. Letras
diferentes sobre las barras indican diferencias significativas (P < 0.05)

El contenido en protena total (N x 6.25) de los ocho extractos, obtenidos a partir de los msculos de los
organismos alimentados con los ocho dietas experimentales, vari de 83 a 86%, mientras que el perfil
electrofortico de estas ocho muestras evidencian la presencia de cinco bandas con un peso molecular
entre los 45,000 y los 14,400 daltons (Figura 7).

Figura 7. Electroforesis en gel SDS-PAGE de msculo de juveniles de L. vannamei alimentados con los
diferentes tratamientos experimentales. Linea A, marcador de peso molecular; linea B, dieta DR (84.9%);
linea C, dieta DHL (84.4); linea D, dieta DLL (83.4%); linea E, dieta DCPL (85.7%); linea F, dieta DELL
(85.4%); linea G, dieta DCP+EL (84.5%); linea H, dieta DCPP (85.6%); linea I, dieta DAL (85.2%).
Valores entre parentesis representa el contenido protenico del msculo expresado en base seca y es el
promedio de tres determinaciones.

El resultado del anlisis de las principales clases de lpidos de los diferentes hepatopncreas se presentan
en la Tabla 12, destacndose el alto contenido en lpidos polares, principalmente fosfolpidos, y un bajo
contenido en steres de colesterol.
Tabla 12. Principales clases de lpidos en hepatopncreas de pre-adultos de Litopeneaus vannamei
alimentados con las dietas experimentales.
DR
DHL
DLL
DCPL DELL DCP+EL
DCPP DAL
Esteres de colesterol
0.82
0.50
0.97
0.56
1.09
0.53
0.87
0.62
Triglicridos
4.83
2.98
0.56
3.78
3.07
7.81
1.29
9.32
Acidos grasos libres
16.82 16.43 8.14
16.52 11.62 7.81
10.05 15.92
Colesterol
1.78
1.84
1.58
ND
ND
1.86
1.61
3.47
Diglicridos
4.82
3.69
0.94
3.86
0.95
2.00
2.39
4.73
Lpidos polares 70.93 74.55 87.81 75.28 83.28 79.99 83.78 65.94
Los valores expresan el porcentaje que representa cada clase del total de lpidos determinados. ND: No
detectado.

La Tabla 13 resume los resultados de los anlisis qumicos hechos a los extractos protenicos obtenidos a
partir de los hepatopncreas de los organismos, en estadio de intermuda C, alimentados con las diferentes
dietas experimentales.
La actividad total de proteasas disminuy al incorporar cualquier producto de langostilla a la dieta,
tomando como criterio los valores reportados para la dieta de referencia. Un comportamiento inverso se
observa cuando la actividad proteoltica se expresa como actividad especfica
La actividad especfica de proteasas vari de 0.73 a 0.89 U/mg siendo la dieta DHL el que present
valores mayores y la dieta DLL la menor. Al comparar los resultados de actividad obtenidos de los
organismos alimentados con la dieta DHL con las dems, se observa que con excepcin de las dietas
DCPL, DELL y DAL, existe una diferencia significativa con los obtenidos de los organismos alimentados
con las dems dietas. No existe correlacin entre estos valores y los valores de digestibilidad aparente de
protenas.
La actividad total de lipasas vari de 73 a 226 U/ml, mientras que la actividad especfica vari de 1.9 a 4
U/mg de protena, existiendo una correlacin entre ambos criterios (r = 0.88). La actividad especfica de
lipasas de los organismos alimentados con las dietas DLL y DCPL presentan valores significativamente

superiores (4.08 y 4.00 U/mg respectivamente) a los obtenidos con las dems dietas, siendo la dieta DCPP
la que presenta una actividad especfica de lipasas significativamente inferior a las dems (1.90 U/mg).
Tabla 13. Indice hepatosomtico, protena soluble y actividad enzimtica de camarones L. vannamei
alimentados con los tratamientos experimentales
Dieta Indice Protena Actividad
total
(U/ml) 1 Actividad
Especfica
(U/mg) 1
Hepatoso
mtico1 soluble (mg/ml) ProteasaLipasas Amilasas
Proteasas
Lipasas Amilasas
DR
0.037
(0.01) 50.09 ab
(1.69) 40.79 a
(3.15) 137.9c
(13.44) 2556.7
(600.1) 0.81c
(0.06) 2.60 c
(0.08) 51.04 c
(11.98)
DHL 0.043
(0.01) 38.16 e
(1.89) 33.86 cd
(1.38) 115.5c
(6.9)
2976.1
(363.8) 0.89 a
(0.04) 2.92 bc
(0.05) 78.00 a
(9.54)
DLL
0.044
(0.01) 51.11 a
(0.51) 37.47 abc
(0.18) 225.6a
(30.1) 2847.3
(159.2) 0.73 d
(0.01) 4.08 a
(0.02) 55.70 bc
(3.11)
DCPL 0.039
(0.01) 45.41 bc
(2.04) 38.52 ab
(0.72) 182.1b
(1.10) 2638.1
(308.1) 0.85 abc
(0.02) 4.00 a
(0.01) 58.10 bc
(6.79)
DELL 0.041
(0.01) 40.56 cde
(3.56) 35.24 bcd
(0.85) 138.3c
(13.49) 2596.9
(112.3) 0.87 ab
(0.02) 3.22 b
(0.04) 64.02 b
(2.77)
DCP+EL
0.042
(0.01) 39.65 de
(0.90) 32.41 d

(0.66) 106.3cd
(5.82) 2378.1
(280.4) 0.82 bc
(0.02) 2.63 c
(0.16) 59.99 bc
(7.07)
DCPP 0.034
(0.01) 35.52 e
(0.64) 26.28 e
(1.05) 72.9 d
(10.45) 2092.9
(220.2) 0.74 d
(0.03) 1.90 d
(0.17) 58.92 bc
(6.20)
DAL 0.041
(0.01) 43.28 cd
(1.32) 37.36 abc
(0.25) 120.6 c
(5.2)
2696.9
(281.1) 0.86 abc
(0.01) 2.72 c
(0.07) 62.32 bc
(6.50)
Nivel sig -nificancia
0.3545 0.000 0.000 0.000 0.0970 0.000 0.000 0.0175
1 Valores promedio de tres determinaciones (desviacin estndar). Valores por columna con diferente
letras difieren significativamente (P < 0.05).
La actividad total de amilasas no presenta diferencias significativas entre los tratamientos, mientras que
los valores de actividad especfica s. El valor ms alto de actividad especfica de amilasas lo presentan los
organismos alimentados con la dieta DHL (78.0 U/mg), siendo significativamente superior a los obtenidos
con los dems tratamientos. Los organismos alimentados con la dieta DR presentan el valor ms bajo
(51.04 U/mg) difiriendo significativamente a los obtenidos con las dietas DHL y DELL. Existe una
correlacin entre los valores de actividad especfica de proteasas y amilasas (r = 0.71).
VII. DISCUSIN
7.1 EXPERIMENTO DE CRECIMIENTO
Segn los parmetros fsico-qumicos registrados, las condiciones de calidad del agua fueron adecuadas
para el desarrollo normal de los organismos (Hewitt 1992) bajo experimentacin.
En una revisin sobre requerimientos nutricios de crustceos, Cuzon y Guillaume (1999) mencionan que
30% de protena en el alimento resulta ser el nivel ptimo para juveniles de Litopenaeus vannamei,
aunque establecen que este requerimiento depende de la etapa de desarrollo en que se encuentre el
organismo. Creswell (1993) recomienda un 45% de protena para camarones omnvoros desde poslarva PL
25 hasta juveniles de 1 gramo. Aranyakananda y Lawrence (1999) tambin recomiendan este nivel
protenico, pero cuando se utilizan alimentos semi-purificados sin Artemia liofilizada para alimentar
juveniles de L. vannamei, sin embargo este requerimiento puede disminuir a 25% cuando el alimento
semi-purificado contiene 2% de Artemia liofilizada. Con base a esta informacin se puede afirmar que el
contenido en protena bruta de los alimentos usados en el presente trabajo (41.29 a 42.37%) fueron
adecuados para el buen desarrollo de los juveniles de L. vannamei (0.225 g peso inicial a 2.0 g peso final
mximo).
El mtodo de Kjeldhal utilizado en el presente trabajo para la determinacin de protena cruda, parte del
principio que la protena en su mayor parte contiene nitrgeno, de tal manera que la determinacin de
nitrgeno total es muchas veces un estimado del contenido total de protenas. Este mtodo determina el
nitrgeno total, tanto protenico como nitrgeno no protenico (urea, aminocidos, quitina, etc.). Se sabe
que los crustceos son una fuente muy rica de quitina, polmero de n-acetilglucosamina y glucosamina,
fuentes ricas en nitrgeno, por lo que la adicin de ingredientes que contienen quitina como lo son la

harina de cabeza de camarn y los subproductos de langostilla, con excepcin del extracto lipdico,
sobrestiman el valor de nitrgeno y el contenido de protena en los alimentos. Lo anterior dejara pensar
que el nivel de protena de los alimentos pudiera verse afectado de manera importante, sin embargo, CruzSurez, Rique-Marie, Martnez-Vega y Wesche-Ebeling (1993) reportan que la harina de cabeza de
camarn que ellos evaluaron como ingrediente en alimentos para camarn, contena en promedio 10.56%
de quitina, mientras que Calvo, Castro, Snchezarmas y Prez (1995) estiman un 8.75% de quitina en
harina de langostilla, datos que coinciden con lo encontrado por Goytorta y Civera (datos no publicados)
tambin en harina de langostilla. En base a estos reportes se calcul el porcentaje terico de participacin
del nitrgeno de la quitina aportada por la harina de cabeza de camarn y por los subproductos de
langostilla, llegando a la conclusin que dicha contribucin no resulta significativa en el valor total de
protena, ya que solo sobrestima con aproximadamente dos puntos porcentuales el contenido de protena,
con lo que el contenido protenico de los alimentos que contienen la fraccin slida de langostilla (DHL,
DLL, DCPL Y DCP+EL) en realidad sera de 39.29 a 40.37%.
Diversas investigaciones han puesto en evidencia que la harina de langostilla, al sustituir parcial o
totalmente a la harina de sardina en alimento para juveniles de L. vannamei, incrementa significativamente
la tasa de crecimiento. Goytorta (1993) trabajando bajo condiciones similares a las aqu reportadas,
encontr que la inclusin de 15% de harina de langostilla en el alimento (42% protena cruda),
sustituyendo en un 33% la protena aportada por la harina de pescado (desechos de atn), mejoraba
significativamente la tasa de crecimiento. Civera et al. (1994) observan este mismo efecto con porcentajes
de sustitucin de 30 a 100%, reportando como ptimo sustituciones entre 50 y 66% en L. vannamei, nivel
ptimo que coincide con lo encontrado por Goytorta y Civera (datos no publicados) trabajando con la
misma especie (Ver anexo I). En el presente trabajo dicho fenmeno no fue tan evidente, ya que el
alimento con harina de langostilla (DHL) increment el crecimiento, pero sin llegar a ser estadsticamente
diferente al alimento de referencia. Los valores de las tasas de crecimiento obtenidos aqu son ligeramente
superiores a los reportados por Goytorta (1993), bajo condiciones de cultivo similares, aunque las
diferencias principales fueron, bsicamente, el origen y la calidad de las harinas de pescado empleadas en
ambos experimentos.
Dentro de los criterios tomados en cuenta para certificar las harinas de pescado como premium, esto es,
de excelente calidad, se encuentra la composicin qumica proximal, y dentro de sta los puntos que
mayor peso tienen son el contenido en protena y en cenizas (Romero, Castro, Daz, Rveco y Zaldvar
1994; Cruz-Surez, Ricque, Nieto y Salazar, 1998). La relacin protena/cenizas puede indicar el origen de
la harina; cuando contiene un alto porcentaje de protenas (65%) y bajo porcentaje de cenizas (14%)
podemos pensar que esta harina fue elaborada a partir de peces enteros, mientras que un bajo contenido
protenico (58%) y alto contenido en cenizas (23%) indica que procede de desechos de peces. En base a
estos criterios y tomando en cuenta que la harina de sardina utilizada en el presente trabajo proviene de
organismos enteros (66.9 y 14% de protena y cenizas respectivamente) y no de desechos de atn (57.30%
protena y 26.8% cenizas), como fue el caso de la harina utilizada por Goytorta (1993), se podran
explicar las diferencias en las respuestas de crecimiento obtenidas en estos trabajos.
La tasa de crecimiento de los organismos alimentados con la dieta DHL no vari significativamente con
respecto a aquellos alimentados con la dieta con langostilla liofilizada por lo que, tomando en cuenta la
tasa de crecimiento como criterio, las operaciones unitarias empleadas en la elaboracin de la harina de
langostilla (cocimiento y secado) no afectaron la calidad de la langostilla. Sin embargo, el proceso de
extraccin con ter de petrleo al que fue sometida la langostilla liofilizada para obtener su respectivo
concentrado protenico, s tiene un efecto tratndose de un efecto positivo ya que los organismos
alimentados con las dietas que contienen esta fraccin (DCPL y DCP+EL ) presentaron una tasa de
crecimiento significativamente mayor a los del alimento con langostilla liofilizada (DLL) y a los del
alimento de referencia. Es probable que el ter de petrleo (solvento poco polar) utilizado en el presente
trabajo haya tenido un efecto desnaturalizante sobre la protena de la langostilla logrando con esto un
incremento en la disponibilidad de nutrientes. Tomando en cuenta estos resultados, adems del hecho que
la adicin del concentrado protenico de sardina obtenido bajo el mismo proceso empleado en la obtencin
del concentrado de langostilla no mejore la tasa de crecimiento de los organismos, pone en evidencia que
en la fraccin protenica de la langostilla es donde se localiza el promotor de crecimiento sugerido en
reportes anteriores (Goytorta 1993; Civera et al., 1994; Civera et al., 1998b), y que el proceso de
extraccin potencia el efecto promotor de crecimiento de este compuesto.

Existen otros reportes en donde han observado un incremento en la tasa de crecimiento de camarones
alimentados con concentrados, o aislados protenicos, con respecto a su fuente original (Cruz-Surez,
1983; Akiyama, Coelho, Lawrence y Robinson, 1989; Shiau, Lin y Chiou, 1992), de hecho Castell, et al.
(1989) recomiendan el uso de un concentrado protenico de cangrejo como fuente protenica de referencia
en estudios de nutricin en crustceos. Di Cesare, Moioli y Pestalozza (1982) al utilizar isopropanol como
solucin extractora para la obtencin de un concentrado protenico de anchoveta, reportan que el solvente
modifica las propiedades funcionales (caractersticas fisico-qumicas) de las protenas contenidas en la
anchoveta pero no modifica la disponibilidad de la lisina, con lo que concluyen que el valor biolgico del
concentrado protenico no se ve modificado. La prdida o modificacin de las propiedades funcionales de
las protenas se debe al poder desnaturalizante que ejerce el solvente sobre la conformacin o estructura de
la molcula nativa de las protena, modificacin exclusiva de la hidrlisis de los enlaces covalentes
primarios, lo que excluye la protelisis o ruptura de enlaces disulfuro (Badui, 1986). Sin embargo, un
resultado de la desnaturalizacin es una mejor susceptibilidad a la protelisis, ya que con la
desnaturalizacin se expone a ciertos constituyentes funcionales, como los grupos disulfuro de la cistina o
el grupo fenlico de la tirosina, que en la protena original se pudieran encontrar inaccesibles (Desrosier,
1984).
En el presente trabajo no solo se observ una mejora en la tasa de crecimiento, sino que tambin existi
un incremento en el consumo de alimento. Esta correlacin (r = 0.91) podra indicar que el incremento en
la tasa de crecimiento es consecuencia del incremento en el consumo de alimento, tal como lo comentan
Cruz-Surez et al. (1993), sin embargo, resultados anteriores obtenidos por el grupo de Nutricin Acucola
del CIBNOR, muestran que la inclusin de langostilla incrementa significativamente la tasa de
crecimiento de juveniles de L. vannamei sin aumentar el consumo de alimento (Hernnez, 1999;
Goytorta y Civera, datos no publicados). Se sabe que compuestos nitrogenados (p. ej. nucletidos,
aminas ternarias, pptidos) son capaces de reaccionar con los quimioreceptores de los camarones actuando
como atractantes y/o estimulantes alimenticios (Mackie, 1973; Carr 1978; Zimmer-Faust, 1987); tambin
se conoce que los crustceos son una excelente fuente de estos compuestos, Holland y Borski (1993)
identificaron una fraccin de bajo peso molecular que, en conjunto con otros compuestos diferentes a
aminocidos presentes en un extracto de cabeza de camarn, estimularon la ingesta de alimento en
juveniles de L. vannamei. Montemayor et al. (1998) reportan que un prensado de langostilla resulta ser
excelente atractante en alimentos para camarn, por lo que es muy probable que la langostilla incremente
la tasa de crecimiento adems de incrementar el consumo de alimento, tal como sucede con el calamar.
Cruz-Surez, Guillaume, Cuzon y AQUACOP (1987) fraccionaron, con el uso de solventes, al calamar en
una fraccin lipdica, una fraccin hidroalcohol-soluble y una fraccin protenica, determinando que en
esta ltima se encuentra un pptido de bajo peso molecular que estimula el crecimiento de los camarones,
sin incrementar el consumo de alimento, mientras que la fraccin hidroalcohol-soluble incrementa el
consumo de alimento y no la tasa de crecimiento.
La inclusin de la fraccin lipdica de langostilla, en sustitucin del aceite de atn (Dieta DELL), no
mostr mejorar significativamente la tasa de crecimiento y el consumo de alimento de los organismos. Es
ya conocido el importante papel que desempean los lpidos en el metabolismo de los camarones (Cuzon y
Guillaume, 1999), y tambin se ha reportado como la cantidad y calidad de la fuente de lpidos en los
alimentos influyen en el crecimiento de camarones (Merican y Shim, 1995; DAbramo 1997), por lo que
resulta importante tomar en cuenta el mtodo empleado para la extraccin de la fraccin lipdica (mtodo
de Soxhlet), ya que es posible que la temperatura que alcanza el solvente (hasta 50C) tenga un efecto
negativo sobre el valor biolgico del extracto obtenido. Cruz-Surez, et al. (1998) reportaron que el uso de
aceites altamente oxidados (100 meq perxidos/kg dieta) en dietas para camarn reducen el consumo de
alimento como principal efecto, mientras que aceites baja y medianamente oxidados (6 y 50 meq
perxido/kg dieta, respectivamente) no produjeron diferencias significativas en la tasa de crecimiento y
consumo de alimento. Al comparar la tasa de crecimiento y el consumo de alimento entre los organismos
alimentados con la dieta DELL y los alimentados con la dieta que contiene langostilla liofilizada, en
donde la fraccin lipdica de langostilla no sufre ningn tratamiento trmico drstico (Dieta DLL), no se
observa un detrimento en estos criterios nutricios, por lo que podemos suponer que el grado de oxidacin
del extracto lipdico de langostilla es de bajo a mediano. No obstante, en base a estos resultados se puede
considerar que el extracto lipdico y el aceite de langostilla son buenos sustitutos del aceite de atn en
alimento para juveniles de L. vannamei.
Otros compuestos que pudieron haber presentado cierto grado de oxidacin son los pigmentos presentes
en el extracto lipdico de langostilla. Los pigmentos carotenoides presentan varias funciones fenolgicas y

fisiolgicas en especies acuticas (Meyers y Latscha, 1997), en donde la adicin de stos al alimento
balanceado para crustceos, adems de haber mostrado que resulta ser nutrientes indispensables (Meyers,
1998; Arango, 1999), se han relacionado con un incremento en la tasa de crecimiento en la langosta
Homarus americanus (Bordner, DAbramo, Conklin y Baum, 1986) y en el camarn L. vannamei
(Arango, 1999). Contrariamente, Ngre-Sadargues et al. (1993) sugieren que la adicin de astaxantina y
cantaxantina a los alimentos no incrementa la tasa de crecimiento de juveniles de L. japonicus, lo cual
coincide con lo reportado por Yamada, Tanaka, Sameshima e Ito (1990), y con lo encontrado en el
presente trabajo ya que la adicin del extracto lipdico y del aceite de langostilla, no mejora la tasa de
crecimiento de juveniles de L. vannamei. Se ha reportado que la astaxantina incrementa la tolerancia al
estrs y mejora la respuesta inmune de los camarones (Menasveta, 1993), por lo que se puede pensar que
el efecto promotor de crecimiento de los pigmentos se manifestara cuando los organismos se encuentran
bajo condiciones estresantes, y no bajo las condiciones descritas para el presente trabajo.
Meyers y Latscha (1997) reportan que la adicin de astanxantina a los alimentos reducen el perodo de
desarrollo poslarval de L. japonicus, sugiriendo que este pigmento induce variaciones cuantitativas en las
hormonas de la muda (ecdisonas), al respecto Ngre-Sadargues et al. (1993) coinciden en que la presencia
de astaxantina tiene un efecto en la frecuencia de muda. Sin embargo en el presente trabajo, la fraccin
lipdica de la langostilla (extracto y aceite) no tuvo efecto sobre la frecuencia de muda, mientras que la
fraccin protenica si afect la frecuencia de muda, ya que los alimentos DHL, DLL, DCPL y DCPL+EL
incrementaron significativamente el nmero de mudas con respecto a todos los dems alimentos,
incluyendo a los alimentos que contienen nicamente la fraccin lipdica de langostilla (DELL y DAL).
Este incremento en el nmero de mudas coincide con lo reportado en trabajos anteriores (Civera,
Goytorta, Rocha y Greene, 1992; Goytorta, 1993; Civera et al., 1994; Villarreal et al., 1994) donde se
evalu la harina de langostilla en alimento para camarn.
El crecimiento de los crustceos es un proceso discontinuo regulado por el proceso de muda (Fernndez,
1998), esto es, el organismo necesita mudar para poder crecer. Bajo la hiptesis de que a una mayor
frecuencia de muda, ser mayor la tasa de crecimiento, Qinse et al. (1996) adicionaron una hormona
estimuladora de la muda a los alimentos para L. monodon y Metapenaeus ensis reportando un incremento
en la frecuencia de muda y en la tasa de crecimiento de los camarones. Sin embargo no necesariamente a
una mayor frecuencia de muda corresponde un mayor crecimiento, por ejemplo, condiciones estresantes
pueden incrementar la frecuencia de muda sin que el crecimiento se vea incrementado, al menos no
significativamente. En el presente trabajo no se observ una correlacin entre la frecuencia de muda y la
tasa de crecimiento, lo que evidencia que no necesariamente a una frecuencia de muda mayor corresponde
una mayor tasa de crecimiento, fenmeno que se ha detectado en otros trabajos en los cuales se incluye
harina de langostilla al alimento (Anexo I), sin embargo para poder afirmar esto se requiere medir el
crecimiento a la muda de los organismos alimentados con dietas que contengan langostilla. El proceso de
muda o ecdisis es regulado por la hormona inhibidora de la muda (MIH) y por la hormona de la muda
(MH), en donde la hormona de la muda se expresa cuando el balance entre los niveles de las dos hormonas
le favorece, mientras esto ocurre la hormona inhibidora retarda el inicio del proceso de muda (Fernndez,
1998). Es posible que un compuesto presente en la langostilla induzca un desbalance entre la hormona
MIH y la MH provocando con esto un mayor nmero de mudas sin que necesariamente incremente la tasa
de crecimiento de juveniles de L. vannamei. Al momento no contamos con datos suficientes para
identificar la naturaleza de dicho compuesto, sin embargo existen en la langostilla dos elementos que se
sabe participan en el proceso de muda, estos son la quitina y el calcio, y posiblemente exista un tercero
que es una hormona aceleradora de la muda. Esta ltima ya ha sido reportada en crustceos y su funcin es
la de estimular la produccin de ecdiesteroides por el rgano Y (Zeller 1992; Withers 1992).
En la langostilla se ha identificado la presencia de un pptido inmunologicamente similar a la insulina
humana, el cual pudiera tener actividad estimulante de crecimiento en camarones (Vega-Villasante, com.
pers.), similar a la que ha sido identificada en crustceos (Sanders, 1983a; Richardson et al. 1997). Segn
Sanders (1983b) la funcin ms importante de la insulina inmunoreactiva en los crustceos es la
estimulacin de la sntesis de protenas con el consiguiente efecto sobre el crecimiento. Con anterioridad
se ha comprobado que estos pptidos estimularon el crecimiento de larvas de camarn L. schmitti y de
juveniles de camarn L. vannamei al ser suministrados en forma oral, mezclados con un alimento
convencional balanceado (Gallardo et al. 1994; Galindo, Gallardo, Medina y Villagrama, 1995; Gallardo
1998), por lo que se puede suponer que al adicionar langostilla al alimento de camarn L. vannamei
estamos adicionando este tipo de hormona, sin embargo, no contamos con evidencia para afirmar esto, as
como desconocemos el efecto que pudiera tener el ter de petrleo sobre la actividad de este compuesto.

Los valores de eficiencia protenica se han sugerido como un buen criterio para evaluar fuentes protenicas
en alimentos balanceados (Cruz-Surez, 1994), sin embargo la interpretacin que se haga de estos valores
tiene que ser hecha con cuidado, ya que el mtodo presume que toda la protena es utilizada para
crecimiento (Tacon, 1989), por lo que dicho criterio no necesariamente es biolgico, sino ms bien resulta
ser econmico. Alvarez, Galindo, Barbaro-Jaime y Pelegrn (1999) reportan una disminucin en los
valores de eficiencia protenica conforme incrementan el nivel de protena en alimentos prcticos para la
engorda del camarn L. schmitti. La relacin inversa entre la eficiencia protenica y la protena diettica
ha sido tambin reportada por Colvin (1976), Sedwick (1979) y Cousin, Cuzon, Blanchet y Ruelle (1991)
en L. indicus, L. merguiensis y L. vannamei, respectivamente, lo que sugiere que cuando los aminocidos
dietticos exceden los niveles requeridos para sntesis protenica, estos son catabolizados y por lo tanto no
soportan el crecimiento (Molina, 1998). La incorporacin de langostilla a los alimentos no mejora los
valores de eficiencia protenica en juveniles de L. vannamei, con respecto a los obtenidos con los
organismos alimentados con la dieta de referencia, esto se debe a que el contenido de protena de los
alimentos fue alto, por lo que el exceso en protena es utilizado como fuente de energa.
Un comportamiento similar a la eficiencia protenica se observ con los valores de factor de conversin
alimenticia (FCA), ya que para calcular el primero se utiliza la cantidad de protena consumida y para el
segundo la cantidad de alimento consumido y al tratarse de alimentos isoprotenicos la cantidad de
protena ingerida est en funcin de la cantidad de alimento consumido o viceversa. Los valores de FCA
aqu obtenidos (1.26 0.09 promedio), aunque son buenos ya que indican que para incrementar el peso
del organismo en 1 g se requiere de 1.26 g de alimento, existe la posibilidad de mejorarlos. Se ha
reportado que el contenido de cenizas y de quitina tienen un efecto sobre la estabilidad de los alimentos
(Fox, Blow, Brown y Watson, 1994), lo que puede traer como consecuencia un aumento en los valores de
FCA, por lo que una disminucin de estos compuestos pudiera tienen un efecto positivo sobre el FCA, de
ah que resulte importante el identificar bien la funcin de los nutrientes presentes en la fraccin protenica
de la langostilla, para que una vez identificado dicho factor, se pueda incrementar su valor por medio de la
extraccin de sustancias que estn actuando de manera adversa, como pudiera ser el caso del efecto del
contenido de cenizas sobre la conversin alimenticia.
Los resultados del presente trabajo demuestran que las fracciones de langostilla obtenidas por extraccin
con ter de petrleo tienen efectos diferentes sobre los juveniles de L. vannamei. La fraccin protenica
tiene un marcado efecto benfico sobre el crecimiento en peso, el consumo del alimento y la frecuencia de
muda de los camarones, mientras que la fraccin lipdica no produce esas mismas respuestas. Esto nos
permite pensar que el concentrado protenico efectivamente contiene un promotor de crecimiento, sin
embargo, se requiere realizar ms estudios para identificar l o los compuesto(s) involucrado(s), as como
el modo de accin.

7.2 EXPERIMENTO DE DIGESTIBILIDAD


Varios autores que han utilizado xido crmico como marcador en evaluaciones de digestibilidad aparente
en camarones, toman a la apariencia (color y consistencia) de la materia fecal colectada como criterio para
comparar el efecto del marcador sobre la velocidad de transito del alimento y del mismo marcador (Leavitt
1981; Brown, Williams, Robinson, Akiyama y Lawrence, 1986; Cousin, Cuzon y Guillaume, 1996). La
materia fecal colectada en el presente trabajo present un color verde homogneo, por lo que se puede
suponer que el xido crmico y el resto del bolo alimenticio pasaron a travs del tracto digestivo de los
organismos a una misma velocidad.
La protena es el ingrediente ms crtico en los alimentos para camarn, tanto desde el punto de vista de
costos como en respuesta de crecimiento (Sudaryano, 1995), adems de ser un criterio muy importante
desde el punto de vista ecolgico. El nitrgeno proveniente de los alimentos es uno de los principales
factores que contribuyen a la contaminacin del sistema de cultivo y su entorno (Davis y Arnold, 1998).
Una manera de reducir de forma directa y eficiente la produccin de desechos nitrogenados al medio, es
hacer uso del conocimiento que proporcione la determinacin de los valores de digestibilidad aparente de
los alimentos y/o ingredientes utilizados. Los valores de digestibilidad aparente indican la disponibilidad
de un ingrediente o de un alimento (Cruz-Surez, Ricque-Marie y Nieto-Lpez, 1999), de manera tal que
es convertido en el aparato digestivo en sustancias tiles para la nutricin. Esto quiere decir que, a un
mayor valor de digestibilidad aparente de protena mayor ser la cantidad de nitrgeno retenido por el
organismo, y por lo tanto, menor ser el nitrgeno desechado al medio ambiente.

Uno de los criterios que hay que tomar en cuenta para la obtencin de un alimento con alta digestibilidad,
es la seleccin de ingredientes que hayan mostrado valores altos de digestibilidad en los organismos hacia
los que va dirigido. Cruz-Surez et al. (1998) recomiendan el uso de harina de pescado con valores de
digestibilidad protenica mayores a 85%, sin embargo, este criterio no es suficiente para asegurar la
calidad de dicho ingrediente, ya que puede darse el caso de que un ingrediente, con valores no muy altos
de digestibilidad, tenga un efecto benfico sobre la digestibilidad del alimento en el cual esta incluido
(Brown, Robinson, Clark y Lawrence, 1989). Colvin (1976) encontr que la harina de camarn resulta ser
una mejor fuente protenica para P. indicus que la harina de pescado, pero una mezcla de las dos resulta
ser todava mejor. Tal es el caso de la harina de langostilla, para la cual Ezquerra et al. (1997a) reportan
una digestibilidad protenica significativamente menor a la obtenida con una harina de anchoveta (73 y
84% respectivamente) en juveniles de L. vannamei, sin embargo, Goytorta (1993) al incluir harina de
langostilla como sustituto de harina de desechos de atn en dietas para juveniles de L. vannamei, reporta
un incremento significativo en la digestibilidad protenica al compararlos con los obtenidos con la dieta de
referencia sin harina de langostilla.
Los resultados obtenidos en el presente trabajo confirman lo anterior, ya que la inclusin de langostilla a
las dietas incremento la digestibilidad protenica de las mismas con respecto a la dieta de referencia sin
langostilla, siendo significativo dicho aumento solo con la dietas que no incluyeron al extracto lipdico de
langostilla (DHL, DLL y DCPL). Existen varios factores que afectan a la digestibilidad de un nutriente
como lo son la especie y edad del organismo, factores ambientales y la calidad del alimento suministrado
(Lee y Lawrence, 1997); la calidad y cantidad de nutrientes, asociacin entre nutrientes y/o palatabilidad
de los alimentos, as como una modificacin en la actividad enzimtica digestiva son factores que afectan
la digestibilidad de los nutrientes por parte de los organismos. Se sabe que la harina de langostilla no es
superior a la harina de pescado en trminos de su composicin en aminocidos (Villarreal et al. 1994;
Ezquerra et al. 1999) y de su digestibilidad protenica aparente (Ezquerra et al., 1997a). Basados en estos
conocimiento previos, adems de que las dietas evaluadas en el presente trabajo eran isoprotenicas, se
puede descartar que el incremento en los valores de digestibilidad protenicas obtenidos se deba a un
incremento en la calidad y/o cantidad de protenas suministradas en la dieta.
Varios investigadores, al estar trabajando con crustceos y alimentos peletizados, mencionan la existencia
de efectos asociativos entre ingredientes, sin embargo aun no existen datos necesarios con los cuales se
entienda mejor dicho fenmeno (Lee y Lawrence, 1997; Mendoza, 1999; Cruz-Surez, 1999). Segn
describen Brown et al. (1989) un efecto asociativo se puede entender como el cambio en la digestibilidad
de un ingrediente (o compuesto especfico de dicho ingrediente y/o dieta) al adicionar otro, en donde dicha
asociacin puede ser positiva (aumenta disponibilidad) o negativa (disminuye disponibilidad). Es probable
que se est presentando un efecto asociativo entre los nutrientes de la langostilla y los nutrientes de los
dems ingredientes contenidos en los alimentos, de manera tal que la digestibilidad protenica se ve
incrementada, al menos para el caso de las dietas DHL, DLL y DCPL, ya que para el caso de las dietas
DELL y DCP+EL se present una asociacin negativa entre compuestos. Estas dos ultimas dietas no
presentaron valores de digestibilidad protenica significativamente mayores a los obtenidos con la dieta de
referencia, probablemente debido a la incorporacin del extracto lipdico de langostilla, el cual
seguramente present cierto grado de oxidacin (de leve a moderado, segn se coment anteriormente), en
donde los productos de la oxidacin pudieron haber reaccionado con ciertos aminocidos ligados a las
protenas con lo cual reduce su disponibilidad (Nielsen et al., 1985 citado por Mendoza, 1999), esto
coincide con lo reportado por Cruz-Surez et al. (1998) quienes indican que uno de los efectos del uso de
lpidos oxidados en dietas para camarn es una reduccin en la digestibilidad de protenas.
Un factor relacionado con la digestibilidad al cual se le ha puesto poca atencin es la palatabilidad del
alimento. Este factor resulta importante, ya que como definen Lee y Lawrence (1997) debido a que la
ingestin precede a la digestin, la palatabilidad de un alimento determina finalmente qu nutrientes estn
disponibles para la digestin. Si bien esto es cierto, el consumo de alimento se ha visto mas relacionado
con la digestibilidad de materia seca que con respecto a la digestibilidad de protenas (Brown et al., 1986),
aunque no se descarta la posibilidad de que para el caso de la langostilla, la palatabilidad este teniendo un
efecto sobre la digestibilidad de los alimentos, sin embargo habr de evaluar en un mismo experimento
ambas variables.
La digestin qumica de los alimentos en camarones se realiza gracias a la accin de enzimas digestivas
siendo la tripsina la enzima predominante en el sistema digestivo de los camarones y en conjunto con otras
proteasas se encargan de la digestin y aprovechamiento de la protena dietaria (Ceccaldi, 1997; Cahu,
1999; Cruz-Surez, 1999), por lo que cualquier modificacin en el accionar de dichas enzimas tendr

como consecuencia una modificacin en la digestibilidad de los alimentos. Le Moullac, Van Wormhoudt y
AQUACOP (1994) demostraron que la calidad protenica de los alimentos puede ejercer una induccin
especfica de enzimas. Smith, Lee, Lawrence y Strawn, (1985) sealan que el contenido de cenizas y de
humedad de un alimento son factores importantes para obtener una mejor digestibilidad total de los
alimentos. De hecho Lan y Pan (1993) atribuyen una mejor digestibilidad al contenido de cenizas (Ca,
NaCl y fosfatos) de alimentos peletizados para camarones con respecto a la misma formulacin antes de
ser peletizados, argumentando que las cenizas actuaran como activadores de proteasas (Mendoza, 1999),
por lo que tomando en cuenta que la inclusin de langostilla incrementa en contenido de cenizas en las
dietas, se podra esperar un incremento en la actividad enzimtica de proteasas lo que a su vez
incrementara la digestibilidad protenica, sin embargo al comparar los valores de digestibilidad protenica
con la actividad especfica de proteasas, se observa que no existe correlacin ( r = 0.01), a pesar de que
existe un ligero incremento en la actividad especfica de proteasas al incluir productos de langostilla al
alimento.
Este comportamiento coincide con lo reportado por Vega-Villasante (1998) quien observ que la
substitucin de insumos (harina de pescado, pasta de soya o harina de cabeza de camarn) por harina de
langostilla en alimentos para juveniles de F. californiensis ejerce un efecto positivo en la ganancia en peso
de los camarones, sin embargo este efecto no corresponde al comportamiento de la actividad enzimtica
digestiva global de proteasas, en donde la tendencia fue la de mantener los valores de actividad muy
cercanos al reportado para el alimento control. Esta falta de relacin de la actividad especfica de proteasas
con el alimento reportados en el presente trabajo, en primer lugar puede ser atribuido a que se trat de
alimentos isoprotenicos y aparentemente con un perfil de aminocidos similar, aunado a la posibilidad de
que las adaptaciones fisiolgicas de las actividades enzimticas digestivas pudieran estar enmascaradas
por otros procesos en el momento de determinar estas actividades (Vega-Villasante, 1998). Lee, Smith y
Lawrence (1984) encontraron que las actividades totales (actividad enzimtica/min/g de hapatopcreas)
demostraron ser ms afectadas por el alimento que al considerar la actividad especfica (U/mg protena),
sin embargo Ezquerra et al. (1997b y 1999) reportan que sustituciones de 15% de ingredientes protenicos
en alimentos para juveniles de L. vannamei tienen un efecto directo en la actividad especfica de proteasas.
El proceso utilizado en la preparacin de alimentos acuticos tiene un papel significante en la
disponibilidad de nutrientes presentes en el alimento (Lee y Lawrence, 1997), lo mismo se puede aplicar
para los ingredientes que reciben algn tipo de tratamiento antes de ser integrados al alimento.
Ingredientes purificados o procesados han mostrado ser mejor digeridos por crustceos que cuando se
encuentran en su forma original (Akiyama, Coelho, Lawrence y Robinson, 1989; Shiau et al., 1992; Lee y
Lawrence, 1997), esto se debe a que el proceso anablico de las protenas, iniciado por la accin de
proteasas, es ms eficiente en un sustrato predigerido ya que los aminocidos estn ms disponibles para
la accin enzimtica (Achupallas, 1998). Esto pudiera explicar el hecho de que el alimento al cual se le
adicion harina de langostilla (DHL) presente mejores valores de digestibilidad protenica, aunque no
existe diferencia significativa, en comparacin con aquellos alimentos que incluyeron langostilla
liofilizada (DLL) o al concentrado protenico (DCPL); es posible que el proceso trmico al que fue
sometida la langostilla para su conversin a harina (escaldado y secado) haya provocado una hidrlisis de
las protenas, con lo que los aminocidos estructurales queden ms expuestos al ataque enzimtico
mejorando con esto la digestibilidad protenica del alimento.
La inclusin de langostilla a los alimentos mostr tener un efecto sobre el crecimiento y la digestibilidad
de los camarones L. vannamei, sin embargo este efecto no se ve reflejado a nivel de la composicin
protenica del msculo de los organismos, fenmeno similar al reportado por Alvarez et al. (1999) quienes
reportan que el nivel protenico de los alimentos consumidos por camarones P. schimitti no mostr tener
efecto en el contenido protenico muscular.
Aunque en el presente trabajo no se observa correlacin entre la respuesta en tasa de crecimiento obtenida
en el ensayo de crecimiento y la digestibilidad protenica obtenida en el de digestibilidad, se ha reportado
que una mejora en la digestibilidad protenica incrementa la tasa de crecimiento de los organismos y
adems permite disminuir la descarga de nitrgeno al medio (Davis y Arnold, 1998), lo cual por s solo es
de gran importancia. Un ejemplo del beneficio que puede traer el conocimiento de los valores de
digestibilidad de los alimentos se presenta en el caso de la industria de cultivo de salmn en Chile, ya que
segn cita Achupayas (1998) esta industria vio disminuido en un 133% los slidos fecales por cada
tonelada de alimento, al utilizar un alimento con una digestibilidad adecuada (mayor a 90%) en vez de un
alimento comercial con digestibilidad reducida (63%). En base a esto se puede pensar que con el uso de

productos de langostilla en alimento para juveniles de L. vannamei no solo se mejorar la tasa de


crecimiento, sino que tambin se disminuir el grado de contaminacin por desechos nitrogenados.
Molina (1998) reporta una reduccin sensible en la descarga de compuestos nitrogenados al medio
ambiente al disminuir la concentracin de protena en los alimentos para L. vannamei. El utilizar fuentes
protenicas con alta digestibilidad puede permitir disminuir la concentracin protenica de los alimentos,
pero para que esto resulte se requiere conocer el requerimiento en protenas de los organismos a cultivar.
Pensamos que en el presente trabajo se excedi en la concentracin de protena en los alimentos y esta
puede ser una de las causas por las que los valores de digestibilidad protenica obtenidos sean menores a
los reportados por Goytorta (1993) trabajando con L. vannamei, pero con un peso menor (3.3 g peso
promedio inicial). Molina (1998) concluye que un alimento de 20% de protena y 40% de almidn
gelatinizado rindi los mayores beneficios a los camarones P. indicus y L. vannamei que una de 40% en
trminos de alto consumo, crecimiento y digestibilidad, sin embargo esta disminucin en el contenido
protenico del alimento no solo esta en funcin del tamao del organismo, sino que depende tambin de la
adicin de nutrientes que provean de energa al organismo de manera tal que la protena no sea
catabolizada para la obtencin de energa.
Se ha reportado que los lpidos y los carbohidratos tienen poca participacin en el metabolismo energtico
de los camarones peneidos (Bartley, Carlberg, Van Olst y Ford, 1980; Smith y Dall, 1991) y en general de
los crustceos (Claybrock, 1983), y se sugiere que una parte importante de las protenas del alimento
deben de ser metabolizadas para la obtencin de energa directa (Rosas, Gaxiola y Snchez, 1998) sobre
todo cuando se conjunta un nivel de protena superior al requerido y un suministro de fuentes de energa
poco aprovechables por los organismos. El hecho de que exista una correlacin entre los valores de
digestibilidad protenica y energa disponible (r = 0.758), y no entre digestibilidad lipdica y la energa
disponible (r = 0.424), hace suponer que una parte importante de la protena suministrada en el alimento
fue catabolizada por parte de los organismo para la obtencin de energa. El alimento DHL present una
energa disponible significativamente mayor al obtenido con el alimento DR as como una actividad
amiloltica significativamente mayor, esto podra indicar que el proceso de coccin al cual se someti la
langostilla para transformarla a harina sirvi para predigerir compuestos glucosdicos presentes en la
langostilla volvindolos ms susceptibles a la accin de amilasas. A excepcin de la harina, la inclusin de
los dems subproductos de langostilla a alimentos de pre-adultos de L. vannamei parece no tener
influencia sobre la actividad especfica de amilasas. El hecho de que la protena excedente del alimento
est siendo catabolizada para la obtencin de energa no es recomendable no solo por su participacin en
la produccin de desechos nitrogenados, sino que implica un incremento en los costos de produccin
debido al costo que representa la protena en el alimento.
Aunque los carbohidratos y las protenas alimenticias pueden ser metabolizados por peces y crustceos
como fuente de energa, los lpidos neutros, particularmente los triglicridos, son una buena fuente de
energa (Cruz-Surez, Ricque y Domnguez, 1999). La harina de langostilla mostr tener un efecto sobre
la digestibilidad lipdica de camarones L. vannamei tal como lo report Goytorta (1993), sin embargo los
dems subproductos de langostilla parecen no haber tenido ningn efecto sobre la digestibilidad de
lpidos. Si bien no existe correlacin entre los valores digestibilidad lipdica y la energa disponible se
observa como los alimentos DCPP y DAL presentan los valores ms altos de digestibilidad y
disponibilidad de estos nutrimentos. Estos alimentos se diferencian del alimento DR en que la harina de
sardina utilizada en ella fue sometida a un proceso de extraccin de lpidos (ver Materiales y Mtodos),
por lo que a fin de contar con alimentos isolipdicos, los lpidos extrados de la harina de sardina se
sustituyeron por aceite de atn (DCPP) y aceite de langostilla (DAL). Esto pudiera explicar el hecho de
que sean estas dietas las que produzcan valores ms altos de digestibilidad lipdica con respecto a la dieta
DR, ya que es posible que los lpidos residuales en la harina de sardina sufran un proceso de oxidacin
causada por tratamiento trmico al cual se somete la sardina en el proceso de obtencin de harina como ha
sido reportado por Hardy y Masumoto (1991). Opstevedt (1973) trabajando con pollos, reporta que la
digestibilidad aparente de lpidos residuales de una harina de arenque secada al vaco fue mayor que la
harina obtenida con por un proceso de secado con alta temperatura. Esta diferencia la atribuye a la
oxidacin de lpidos por el tratamiento trmico, y los productos de la oxidacin, al no ser fcilmente
esterificados, son pobremente digeridos por los pollos, dando una digestibilidad de lpidos totales baja.
Merican y Shim (1995) reportan que adultos de P. monodon (20 g) digieren muy bien a los triglicridos
(96-100%) mientras que los cidos grasos libres son los que menores valores de digestibilidad presentan
(6-74%). Applenford y Anderson (1997) al trabajar con carpa comn (Cyprinus carpio) reportan que al
aumentar de 4 a 13.6% la inclusin de aceite de atn al alimento de los organismos se mejoran los valores

de digestibilidad lipdica, y esto se ve reflejado en un incremento significativo en los valores de energa


disponible.
La digestin de los lpidos est asegurada por las lipasas y esterasas (Cruz-Surez 1999). En el
hepatopncreas los lpidos sufren dos tipos de transformaciones antes de ser absorbidos: una
emulsificacin y una hidrlisis, en donde las lipasas actan sobre los lpidos emulsionados y las esterasas
continan la digestin enzimtica sobre los productos hidrosolubles obtenidos (Cruz-Surez, 1999). A
diferencia de la actividad proteoltica, la actividad de lipasas se ve incrementada por la adicin de
langostilla a los alimentos, siendo significativo dicho incremento cuando se incluyen subproductos de la
langostilla liofilizada. Por los resultados obtenidos es posible pensar que la actividad lipasa puede
utilizarse como un indicador biolgico para monitorear el tratamiento trmico que se le de a un
determinado ingrediente o alimento dirigido a la alimentacin de camarones L. vannamei, sin embargo no
contamos con evidencias suficientes para sostener esta hiptesis y se requieren ms estudios para
corroborarlo.
El ndice hepatosomtico ha sido utilizado como un ndice de condicin de peces y crustceos
(Penaflorida y Millamena, 1990; Jimnez, Garca, Gandonou y Oliva, 1995: Moccia, Gurure, Atkinson y
Vandenberg, 1998; Watsons, Milani y Hedrik, 1998; entre otros), o sea, como un indicador del estado de
salud de los organismos. Para el presente trabajo, segn los diferentes ndices hepatosomticos, se asume
que la salud de los organismos no se vio afectada por el tratamiento alimenticio suministrado, dado que los
valores encontrados son muy semejantes.
Al analizar las clases de lpidos en el hepatopncreas de los camarones, se apreci que aquellos
organismos alimentados con los alimentos DLL y DCP+EL presentan los valores ms bajos de cidos
grasos libres (8.14 y 7.81 g/100g lpidos), coincidiendo con que tambin son dos de los tres alimentos que
presentan los valores ms bajos de digestibilidad lipdica, lo que apoya la hiptesis de que el uso de
concentrado protenico de sardina reduce la cantidad de cidos grasos libres. Sin embargo, los organismos
alimentados con el alimento DR presentan valores altos de cidos grasos libres (16.8 g/100 g lpidos) y
bajos valores de digestibilidad de lpidos (57.1 %) no existiendo correlacin entre las clases de lpidos
presentes en los hepatopncreas de los camarones y los valores de digestibilidad lipdica obtenidos.
Los resultados del presente trabajo muestran que el compuesto promotor de crecimiento presente en la
langostilla se encuentra en la fraccin insoluble en ter de petrleo (concentrado protenico de langostilla),
y que el proceso de extraccin con este solvente potencia el efecto promotor de crecimiento e incrementa
el consumo de alimento.
Estos resultados hacen suponer la presencia de tres compuestos diferentes que modifican el desarrollo de
los organismos, estos son: un compuesto promotor de crecimiento, el cual se presume pueda tratarse de un
pptido; un compuesto que incrementa el consumo de alimento, posiblemente debido a compuestos
nitrogenados; y un compuesto que incrementa la frecuencia de muda, cuyo origen esta menos definido,
pudiendo tratarse de una alteracin en el sistema de produccin hormonal, o bien a una adicin de las
hormonas presentes en la langostilla. Por el potencial que presentan estos tres compuestos en la nutricin
acucola, se recomienda continuar con esta lnea de investigacin de manera que se corrobore la existencia
o no de estos compuestos, y de estar presentes no solo identificarlos, sino determinar tambin su
mecanismo de accin.
Tambin es recomendable investigar si el incremento en la digestibilidad protenica reportado en el
presente trabajo tiene un impacto sobre la produccin de desechos nitrogenados, as como evaluar el uso
del aceite de langostilla en nutricin acucola (i.e. sustituto de aceite de atn, enriquecedor de presas vivas,
etc.).

VIII. CONCLUSIONES.
Las variables ambientales que ejercen una influencia directa sobre el desarrollo y crecimiento de los
camarones bajo cultivo (salinidad, temperatura, etc.) se monitorearon y controlaron, mantenindolas
uniformes entre cada unidad experimental, por lo que los efectos observados en ambos experimentos se
pueden atribuir a los alimentos suministrados.
La tasa de crecimiento se increment significativamente al incluir el concentrado protenico en
alimentos para camarn, mientras que la inclusin de la fraccin lipidica no produce un incremento en la
tasa de crecimiento, por lo que se concluye que el factor de crecimiento presente en la langostilla se

encuentra en la fraccin protenica (concentrado protenico) y aparentemente no se debe a un efecto


sinrgico entre el concentrado protenico y el extracto lipdico de la langostilla.
El uso de harina de langostilla o de langostilla liofilizada en alimentos balanceados para camarn
blanco (L. vannamei) producen tasas de crecimiento similares entre si, por lo que podemos afirmar que el
proceso trmico aplicado a la langostilla para su conversin a harina no tiene un efecto negativo sobre su
valor nutricio, al menos en trminos de crecimiento.
La digestibilidad protenica obtenida con la dieta que incluye al concentrado protenico de
langostilla result significativamente mayor a la obtenida con la dieta de referencia, mientras que la
digestibilidad de protenas obtenida con la dieta que contiene al extracto lipdico de langostilla result
similar a la obtenida con la dieta de referencia, pero significativamente menor a la dieta con el
concentrado protenico, por lo que podemos afirmar que el incremento en la digestiblidad de protena no
se debe a un efecto sinrgico entre las fracciones protenicas y lipidicas de la langostilla.

El proceso de extraccin con ter de petrleo incrementa el efecto benfico del promotor de
crecimiento presente en la fraccin protenica de la langostilla, as como tambin incrementa el efecto
estimulante de la ingesta de alimento, mientras que no afecta la digestibilidad protenica. A excepcin del
extracto lipdico, la inclusin de productos de langostilla mejora la digestibilidad protenica, lo que puede
indicar que el uso de langostilla en alimento para camarn puede reducir la produccin de desechos
nitrogenados. Tomando como base todo lo anterior se recomienda el uso de harina de langostilla para la
engorda de juveniles de Litopenaeus vannamei, aunque es an mejor el uso del concentrado protenico, el
cual contiene un promotor de crecimiento para el camarn.
IX LITERATURA CITADA
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APNDICE I
Resumen de resultados reportados al evaluar la harina de langostilla como sustituo, parcial y
total de la harina de pescado en alimentos balanceados para camarones peneidos.

Control4
CIB9045
CIB9056
DC 17
DC 27
CIB108
Control4
CIB108
CIB159
Control4
S66%P10
Control4
S66%P10
Control4
S66%P10

Protena
(%)
37.65
38.94
38.23
25
35
43.76
44.46
43.76
42.22
38.45
38.23
38.1
37.4
38.45
38.23

Peso
Inicial
0.13
0.13
0.13
0.382
0.382
0.382
0.261
0.26
0.26
0.054
0.054
0.09
0.09
0.51
0.52

Peso
final
2.78
3.55
3.24
0.96
1.33
1.48
1.396
1.424
1.678
0.77
1.23
2.39
3.36
1.56
1.94

TdeC1
(%)
2038.5
2630.8
2392.3
151.3
248.2
287.4
434.9
447.7
545.4
1325.9
2177.8
2555.6
3633.3
205.9
273.1

Control4
S35P10
S50P10
S65P10

41.89
41.89
41.17
41.39

0.476
0.469
0.47
0.478

2.193
2.528
2.817
2.849

360.7
439.0
499.4
496.0

25.42
28.76
28.98
27.75

1.48
1.4
1.23
1.15

1.79
1.79
1.79

3.52
3.42
3.45

109.2
99.6
113.4

31.3
29.4
30.8

1.97
1.8
1.94

0.035
0.034
0.034

0.152
0.266
0.231

7.61
10.05
8.84

1.67
3.16
2.48

Alimento

Anchoveta11
Desechos de atn 11
Langostilla 11
Control4
DHL2012
DHL4012

37.14
37.93
37.14

Alimento FCA 2 Mudas


consumido
NR
5
NR
4
NR
3.8
54
5.24
7
44
2.91
12
88
2.55
46
79
1.54
54
75
1.57
49
89
1.41
95
64.76
3.08
18
88.51
2.64
20
0.09
1.71
69
0.133
1.7
159
186.8
4.4
25
197.7
3.2
23

DAP3
(%)

Duracin
(das)

Especie
Penaeus
californiensis

79.68
83.56
84.02

82.08
72.52
63.93

Villarreal et al

30

Penaeus
vannamei

Villarreal y Castro,
1992

30

Penaeus
vannamei

Goytorta, 1993

30

Penaeus
californiensis
Penaeus
vannamei
Penaeus
Californiensis

Civera et al. 1994

45

11.33
15.33
18.33
22.33

Referencia

30

Penaeus
vannamei

30

Penaeus
vannamei

30

Villarreal et al
Fernndez, 1996

Goytorta y
Datos no publicados
Civera

Ezquerra et al

Penaus
vannamei

Tasa de crecimiento. 2 F.C.A.: Factor de conversin alimenticia. 3 Digestibilidad aparente de protenas. 4


Alimento control sin langostilla. 10 Porcentajes de sustitucin de la protena aportada por la harina de
pescado por harina de langostilla. 11 Se trata de los ingredientes incluidos a un 15% en alimento control.

APNDICE II

Nivel de inclusin de las principales fuentes de protena contenidas en dos alimentos


utilizados en el experimento llavado a cabo por Villarreal et. al. (1994).
Alimento Control
Alimento S66P
Ingrediente
%
%
Harina de pescado
25
8.0
Harina de langostilla
0
25.0
Harina de cabeza de camarn
10.0
10.0
Pasta de soya
25.5
25.5
Protena (% en base seca)
Lpidos (% en base seca)

38.1
6.4

37.3
6.7

Aminocidos

Alimento Control

Alimento S66P

Hernndez, 1999.

(g/100g muestra seca)


cido asprtico
Acido glutmico
Serina
Histidina
Glicina
Trenina
Arginina
Alanina
Tirosina
Metionina
Valina
Fenilalanina
Isoleucina
Leucina
Lisina
Triptfano
Total

88

3.09
5.47
1.65
0.70
2.45
1.73
2.27
1.76
1.02
0.93
1.56
1.57
1.36
2.56
1.94
0.75
30.79

(g/100 g muestra seca)


3.07
5.38
1.79
0.76
2.38
1.60
2.31
1.79
1.25
0.90
1.65
1.58
1.33
2.45
1.89
0.61
30.76

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