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EXTRACCION Y PURIFICACION
Las saponinas por su carcter glicosdico, son insolubles en solventes apolares. Para
obtenerlas de las plantas o animales, el material seco y molido se desengrasa previamente
con un solvente apolar (generalmente ter de petrleo o n-hexano). El marco se extrae con
etanol, metanol, n-butanol, mezclas de diferentes proporciones de estos alcoholes y agua.
El extracto acuoso (libre de alcohol) se liofiliza o se concentra en rotavapor, y se hace pasar
por resinas de intercambio inico a fin de eliminar sustancias inicas. El eluato acuoso se
pasa luego a travs de materiales como el Sephadex LH-20 para separar las saponinas de
otras molculas como pptidas y macromolculas que dificultan su purificacin
cromatogrfica.
Una vez obtenidas las saponinas crudas, se pueden purificar por cromatografa en columna
o lquida de alta eficiencia. En el caso de la cromatografa en columna, se puede utilizar
slica gel y eluentes como los BAW y mezclas Cloroformo-Metanol-Agua. Para el anlisis
por cromatografa en capa fina pueden utilizarse condiciones como las reportadas para el
anlisis de saponinas en frutas.
Los triterpenoides que se encuentra bajo la forma de glicosidos son altamente solubles en
agua , lo que dificulta su separacin de azcares , polihideoxifenoles y otros compuestos
polares . la seleccin de un solvente de polaridad intermedia etanol ,metanol , permite
aislarlos como un crudo total del material biolgico .este crudo deber ser fraccionado y
para ellos la tcnica generalmebte aplicada es la cromatografia en sus diferentes variantes ,
si se trata dw saponinas altamente solubles en agua la separacin puede llevarse a cabo
mediante la cromatografa en fase reversa y contracorriente , por otro lado el crudo total se
hidrolizar y ka parte no saponificable las geninas se aislan del medio acuoso por
extraccin con un solvente orgnico en el aislamiento de triterpenoifes superiores es
aconsejable desgrasar previamente el material biolgico y sobre la fraccion de grasa
comprobar la ausencia de triterpenoifes antes de desecharla La separacin cromatografca
generalmente se lleva a cabo en columna de adsorcin y el proceso se sigue por TLC Y Los
reactivos reveladores comprenden vapores de yodo y reactivos de rociado