Virologa

Importancia mdica
Los virus son los agentes causales de mucha enfermedades que afectan al hombre:
Enfermedades que pueden ser letales:
SIDA, poliomielitis, hepatitis, rabia, encefalitis.

Enfermedades que ocasionan malestar agudo:

Influenza, sarampin, paperas.
Anormalidades congnitas:
Rubola, citomegalovirus.

Tumores y cncer:
Cncer cervicouterino.

Importancia en la investigacin cientfica

Los virus tienen genomas ms pequeos que los organismos superiores (10-200 genes vs
100000 del genoma humano).
Estudio del ordenamiento, replicacin y expresin del material gentico, necesarios para la
prctica cientfica y mdica.

Naturaleza de los virus

Virus: clase heterognea de agentes

Complejidad

Espectro de huspedes
Como afectan al husped
comparten

Constituidos por un genoma de ADN o ARN, rodeados

por una cubierta proteica
Slo se multiplican en clulas vivas, dependencia
absoluta de la maquinaria energtica y de sntesis de
protenas de la clula husped
Separacin de sus genomas de sus cubiertas protectoras
como paso inicial en sus ciclos de multiplicacin

Deben considerarse como microorganismos vivos o como

organizaciones inertes de molculas?

Finales del siglo 19, teora del germen, microorganismos que pueden ser observados al
microscopio, cultivados en medio enriquecido y retenidos por filtros.
1892, Iwanowski demostr que el agente causal del mosaico del tabaco, pasaba a travs de
un filtro para bacterias y no era posible cultivarlo.
1898, Beijerinck repiti los experimentos y llam al nuevo agente infeccioso contagium vivum
fluidum.
1908, Ellerman y Bang reportaron la transmisin libre de clulas de la leucemia de pollo.

1911, Rous descubri que tumores slidos de pollo pueden ser transmitidos por filtrados libres
de clulas.

Origen de los virus

Hiptesis:

1. Los virus son los productos de la evolucin regresiva de clulas de vida libre. Se
ha sugerido una va evolutiva de este tipo para las mitocondrias, las que an
retienen vestigios de una organizacin celular, as como mecanismos para la
replicacin, transcripcin y traduccin de la informacin gentica. Los virus
animales de mayor tamao como los poxvirus, son tan complejos como
derivados de un ancestro celular.
2. Los virus derivan de material gentico celular que han adquirido la capacidad de
existir y funcionar de forma independiente. Esta hiptesis es la ms aceptada
para los virus (con la posible excepcin de los poxvirus).

Mtodos de estudio para los virus

virus
mtodos directos

Microscopa electrnica

mtodos indirectos

Multiplicacin en cultivos
Serologa
PCR

Seleccin del sistema de cultivo

Sistema de cultivo

Ventajas

Desventajas

Animal

Infeccin natural

Alto costo, variacin,

consideraciones ticas.

rgano

Infeccin natural, pocos

animales, menor variacin.

Muchos tipos celulares,

ausencia de procesos
homeostticos e inmunes.

Pueden ser clonadas,

variacin mnima. Mejor
para experimentos
bioqumicos, las condiciones
pueden ser controladas.

Tres tipos: clulas primarias,

lneas celulares y lneas
celulares permanentes.

Clula

Objetivo del experimento

Aislados de virus
Bioqumica de la multiplicacin
Estudios estructurales
Estudio de infecciones naturales

Detectar la presencia de virus en clulas infectadas

Efecto citopatolgico (CPE)

Cambios en la morfologa
celular (microscopa)

Lnea celular de mono

Clulas de embrin de pollo

HRSV

Estudios bioqumicos

Sistema celular

Produccin viral
Estudios de multiplicacin

Estudios de la infeccin
natural y enfermedad

Animales de
experimentacin

Cultivo de rganos

No Infectado

Infectado

rinovirus

Cultivo de clulas

Medio de cultivo:
Solucin isotnica (mezcla de sales).
(5-10%) Suero (mezcla compleja de
protenas y otros componentes).
Medio de crecimiento.
condiciones de esterilidad / uso de
antibiticos

Serologa
Anticuerpos: protenas producidas por el sistema inmune de vertebrados
superiores en respuesta a materiales extraos (antgenos). Son secretados en los
fluidos corporales como la sangre (suero).

Titulacin por hemoaglutinacin

Virus dilution: 1/

Prueba de inhibicin de hemoaglutinacin

Antiserum dilution: 1/

Para detectar antgenos virales en clulas infectadas:

Microscopa
Anticuerpos marcados con:
Marca fluorescente (GFP, fluorescena)
Enzimas (peroxidasa, fosfatasa)
Marca radiactiva (S35, P32)
Molculas electrn-densas (partculas
de oro coloidal, ferritina)

ELISA

PCR

Estructura de los virus

50-90% protenas
1. Proteger a los cidos nucleicos de la degradacin por nucleasas.
2. Participar en la identificacin celular y los mecanismos de liberacin del
genoma viral.
3. En algunos virus, enzimas esenciales para la infectividad viral.
Estructura secundaria: a hlices, hojas b. Estructura terciaria: asimtricas

Virus simtricos construidos por subunidades asimtricas

Virus del mosaico

del tabaco

Bacterifago Si1

nmero reducido de unidades (formas) estructurales alta estabilidad gentica

Watson y Crick: prediccin de la estructura viral (fundamentos tericos).
Simetra helicoidal: material gentico extendido.
Simetra cbica: material gentico condensado.

Cpside: Cubierta o capa de protenas alrededor del genoma.

Nucleocpside: Cpside ms el cido nucleico.
Envoltura: Membrana que contiene lpidos y rodea algunas partculas virales.
Virin: Partcula viral completa, sirve para transferir el cido nucleico viral de
una clula a otra.

Cpsides
Subunidades simples: protenas nicas.
Subunidades complejas: capsmeros (varias protenas idnticas o diferentes).

Ventajas de la composicin de subunidades:

1. Disminuye la cantidad de informacin gentica necesaria
para la especificacin de la cpside.
2. Asegura que la cpside pueda ser ensamblada de forma
eficaz.

Doble funcin:
Proteger al genoma viral.
Introducir el genoma viral dentro de las clulas huspedes.

Estructura de virus filamentosos

Ruta para el arreglo simtrico de
componentes asimtricos

Colocar subunidades alrededor

de un crculo para formar discos

Discos: 2 dimensiones
Discos apilados: 3 dimensiones

El cido nucleico helicoidal no puede

estar unido equivalentemente en una
estructura de discos apilados, pero si en
estructuras helicoidales.

No es posible la formacin de
partculas helicoidales vacas.

Estructura de virus isomtricos

2a ruta para el arreglo simtrico
de componentes asimtricos

Arreglo de un pequeo nmero

de subunidades posibles sobre
los vrtices o caras de un objeto
con simetra cbica:

Tetraedro
Cubo
Octaedro
Dodecaedro

Icosaedro

Simetra icosadrica
20 caras triangulares (5 en la tapa, 5 en la
base, 10 en medio)
12 vrtices
Presentan una simetra de rotacin 5:3:2

Viriones simples: 60 protmeros

Virus satlite de la necrosis del tabaco. ARN de

1600 bases, 1 solo gen que codifica para el
protmero de la cpside. Solo se multiplica en
clulas infectadas con el virus de necrosis del
tabaco.
En condiciones adecuadas los protmeros se
pueden ensamblar espontneamente primero en
pentmeros que despus se autoacoplan para
formar las cpsides.

Virus icosadricos complejos

El tamao de la partcula define el tamao mximo del cido
nucleico que puede ser empaquetado en ella.
Hay virus con cpsides lo suficientemente grandes para
acomodar genomas muy grandes y contener ms de 60
subunidades.
T

nmero de subunidades (60T)

ejemplo

60

Virus satlite de la necrosis del tabaco

180

Picornavirus

240

Virus sindbis

16

960

Virus herpes

25

1500

Adenovirus.
T = nmero de tringulos por cara

T = nmero de tringulos por cara

T

nmero de subunidades (60T)

ejemplo

60

Virus satlite de la necrosis del tabaco

180

Picornavirus

240

Virus sindbis

16

960

Virus herpes

25

1500

Adenovirus.