HEMOGLOBINA

-ESTRUCTURA
-RELACION ESTRUCTURA-FUNCIN
-HEMOGLOBINAS FISIOLGICAS
-CATABOLISMO

CATEDRA DE HEMATOLOGIA- 2014

HEMOGLOBINA
Introduccin
El advenimiento de la Biologa molecular ha permitido, no slo conocer la
patologa molecular de las anemias hereditarias, sino tambin, correlacionar el
genotipo, fenotipo y en ocasiones, predecir la gravedad de la enfermedad que el
paciente padece. Actualmente se utilizan tcnicas de este tipo para el diagnstico
de anemias tales como las talasemias (ej: beta y alfa talasemias),
hemoglobinopatas estructurales, deficiencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenada,
las distintas formas de esferocitosis y ovalocitosis y algunas anemias
diseritropoyticas hereditarias.
Estos estudios pueden realizarse en todas las etapas de la vida, siendo de suma
importancia en la etapa prenatal, estudiando el ADN obtenido a partir de clulas
de vellosidad corinica.
Estructura de la Hemoglobina (Hb)
En 1912 Kuster estableci la estructura del hemo, sintetizado luego por Hans
Fischer en 1919. Pronto se evidenci que esta porfirina era adems, el grupo
prosttico de otras protenas tales como la mioglobina y los citocromos. El
desarrollo de la espectrofotometra, permiti la determinacin detallada de las
propiedades espectrales de la hemoglobina, de su producto de oxidacin, la
metahemoglobina y la de otros compuestos como la carboxihemoglobina. Hacia
1920 Adair, mediante la utilizacin de membranas coloidales estableci el peso
molecular (PM) de la Hb en 67000 daltons, valorando presin osmtica. Estos
resultados, fueron luego corroborados por Svedberg mediante centrifugacin
analtica con slo una diferencia de 1000 daltons (PM: 68000). En 1956 Ingram
separ los pptidos producidos por la hidrlisis de la Hb con tripsina y del nmero
de residuos obtenidos dedujo que la Hb estaba constituda por mitades idnticas.
En 1957 Rhinesmith, Schroeder y Pauling por una parte y Braunitzer por otra,
indicaron que la Hb era una tetrmero, compuesto de dos pares de cadenas
polipeptdicas distintas, las cuales fueron denominadas alfa () y beta () y
supusieron que cada cadena estaba pegada a un grupo hemo. A principios de los
60 los laboratorios de Braunitzer en Munich, Konigsberg y Hill en New York y
Schroeder en Pasadena establecieron la secuencia de aminocidos en las
cadenas de globinas humanas normales. Al mismo tiempo Max Perutz y
colaboradores determinaron la estructura tridimensional de la oxi y
desoxihemoglobina, trabajo por el cual le otorgaron el premio Nobel de Qumica en
1962.

ESTRUCTURA DE LA HEMOGLOBINA
estructura
secundaria

estructura
terciaria

estructura
cuaternaria

secuencia
de
aminocidos

a-hlice

plegamiento
tridimensional

ensamblaje de
subunidades

Dra. Prez Susana Mabel

estructura
primaria

Funcin de la Hemoglobina
El conocimiento de la estructura de la hemoglobina, llev a comprender el papel
fisiolgico en el transporte de O2 y CO2, as como sus mecanismos de accin
molecular. En 1904 Christian Bohr demostr la forma sigmoide de la curva de
disociacin de la Hb y que la misma era sensible a los cambios en la presin de
CO2. Esta curva fue comprobada por Krogh y fue definitivamente establecida por
Joseph Barcroft en 1928. La base fsica de esta curva sigmoidea atrajo la atencin
del matemtico A. V. Hill, quien la expres en forma de una ecuacin.
Posteriormente Adair describi ecuaciones que definen la unin de ligandos a la
hemoglobina. En 1936 Linus Pauling predijo la naturaleza de la unin del O2 al
hemo, considerando el comportamiento cooperativo de la Hb como un problema
qumico.
La unin del O2 a uno de los grupos hemo en el tetrmero ocasiona una alteracin
estructural en la protena, que hace al resto de los grupos hemos ms vidos por
el O2, representando el primer modelo alostrico de la funcin de la Hb.
El aumento de datos sobre el sistema CO2 y CO3H-, como buffer y sistema de
excrecin de cidos, permiti a Bohr, Hasselbach y Krogh, interpretar que el efecto
del CO2 sobre la afinidad de la Hb por el O2 es por el cambio que provoca en el pH.
Cuando el CO2 es eliminado de la sangre a travs de los pulmones, hay un
incremento correspondiente del pH, aumentando su afinidad por el O2,
favoreciendo la oxigenacin de la molcula de Hb. Por el contrario cuando la
sangre circula por los capilares tisulares, el CO2 entra al plasma y a los hemates,
formndose H2CO3 por accin de la anhidrasa carbnica. Rpidamente se disocia

a HCO3 - y H+. La disociacin del H2CO3 produce un descenso del pH intracelular y

esta disminucin del pH sera la responsable que la afinidad de la Hb por el O 2
est relativamente disminuida facilitando su liberacin. La variacin que tiene la
curva de disociacin de la Hb por efecto del pH, se conoce universalmente como
efecto Bohr.

FACTORES QUE DESPLAZAN LA CURVA HACIA LA DERECHA

20

FACTORES QUE DESPLAZAN LA

CURVA HACIA LA IZQUIERDA

Dra. Prez Susana Mabel

21

Hemoglobinas segn las etapas del desarrollo

Las cadenas de globinas humanas han sido denominadas con letras del alfabeto
griego: Alfa (), Beta (), Gamma(), Delta (), Epsilon () y Zeta (). De las
combinaciones dos a dos de las diferentes cadenas de globinas se van a formar
las distintas hemoglobinas, en los perodos embrionario, fetal, neonatal y adulto.

Combinacin de cadenas de
globinas.

Cromosoma 11

G AA
3

Hb Gower 1

Hb Gower 2

22

a22
Embrionaria

Dra. Prez Susana Mabel

Cromosoma 16

a a

Hb
Portland

22

Hb F

Hb A2

Hb A

a22

a22

a22

Fetal

Adulta

Hemoglobinas en el perodo embrionario, fetal, neonatal y adulto

Huehns y colaboradores descubrieron en 1961 dos tipos de hemoglobinas en la

sangre de embriones humanos. Dichos autores observaron que eran diferentes de
la Hb A (de adulto) y Hb F (del feto) y fueron denominadas como Gower I y Gower
II. Posteriormente Capp y colaboradores denominaron Hb Portland I a una nueva
hemoglobina, con propiedades electroforticas semejantes a la Hb A a pH
alcalino, pero que migra ms rpidamente que sta a pH cido. En 1984
Randhawa y colaboradores descubrieron la Hb Portland II. Las hemoglobinas
embrionarias, estructuralmente, estn formadas de la siguiente manera: Hb Gower
I (22); Hb Gower II (22); Hb Portland (22). Siendo la cadena -like
y la -like. Todas ellas transportan el O2, pero muestran una afinidad
aumentada para este gas. En el recin nacido, la Hb F (22) constituye del 60 al
95 % del total de Hb. Dichos niveles descienden progresivamente durante los seis
primeros meses de vida donde alcanzan el 2 %, que ser el valor encontrado en
los adultos. La Hb F es una hemoglobina heterognea, cuya cadena difiere de
la en 39 de los 146 aminocidos.

Schroeder y colaboradores en 1968 demostraron la existencia de dos cadenas

gamma, llamadas G (cadena con un residuo glicina en la posicin gamma 136) y
A (cadena con un residuo de alanina en la posicin gamma 136). Esta cadena
A tambin puede tener cido actico ligado al residuo glicina N-terminal. En el
recin nacido el 68 - 75 % es G y el 25-32 % es A (relacin 3: 1). Por el
contrario, en el adulto, la pequea cantidad que posee de Hb F contiene 40 % de
COMPOSICIN DE
HEMOGLOBINAS

nacido:
70-80%
20-30%
rastros

Adulto
Hb A: 95%
Hb F:
2%
Hb A2: 3%

Dra. Prez Susana Mabel

Recin
Hb F:
Hb A:
Hb A2:

35

Gy

60 % de A (relacin 2: 3) teniendo lugar dicha transicin en el primer ao

de vida.
Desde el punto de vista funcional la Hb F tiene una mayor afinidad por el O2 que la
Hb A, como consecuencia de la incapacidad de la cadena de Hb F para unirse
al 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG). Esto le confiere a la Hb F una ventaja funcional
en la captacin de O2 a presiones bajas (PO2 de 45 mm de Hg), como sucede en
el intercambio placentario. Los niveles de Hb F en el adulto se sitan por debajo
del 2 %.
La Hb de Bart se encuentra en cantidades menores al 2 % en los neonatos
normales. Es un tetrmero 4 funcionalmente anmalo, mostrando una afinidad
aumentada por el O2 y ausencia de la interaccin hemo-hemo y efecto Bohr.
Organizacin y estructura de los genes de globinas humanas
En el conocimiento de la estructura y del control gentico de las hemoglobinas
humanas pueden considerarse dos fases. Una primera, derivada de la
observacin del patrn de herencia y de los tipos de hemoglobinas descubiertos.
La estructura y el nmero de las diferentes hemoglobinas humanas normales
hacan suponer la existencia de un gen diferente para cada una de las distintas
cadenas de globina. El estudio de variantes de hemoglobina y el anlisis de la
heterogeneidad bioqumica de las cadenas gamma en la Hb F, aportaba datos
para suponer que los genes y estaban duplicados. El patrn de herencia de
variantes y sugera, al segregarse independientemente en hijos de padres
doblemente heterocigotos, que los genes y deban estar en cromosomas
separados. El estudio de variantes de Hb que contenan cadenas de globinas
fusionadas como la Hb Lepore (-) y la Hb Kenya (A-) permiti establecer,
que los genes , y , estaban situados prximos, en el mismo cromosoma.
La segunda fase, que corresponde a los descubrimientos realizados en los ltimos

30 aos se deben al advenimiento de la denominada Tecnologa de ADN

recombinante. Entre 1976 y 1978 Deisseroth y colaboradores establecieron con
tcnicas de hibridacin en solucin, que los genes de globina y residan en
cromosomas diferentes, localizando el gen sobre el cromosoma 16 y el
sobre el cromosoma 11. Con el empleo de enzimas de restriccin se ha llegado al
conocimiento exacto de la organizacin cromosmica del grupo de genes y no
, as como los genes asociados a cada patologa. En 1977 se logra conocer que
los genes son discontinuos, constituidos por intrones y exones, siendo en los
genes de globina donde esto se observa por primera vez. Desde 1980 a 1986, las
mutaciones responsables de anomalas en la molcula de hemoglobina fueron
estudiadas ampliamente mediante tcnicas de biologa molecular.

GENES DE BETA Y ALFA GLOBINA

Las cadenas alfa y beta estn codificadas por

locus distintos. Su expresin est coordinada
para asegurar produccin equilibrada de las
mismas

30

CATABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA