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Curso: MICROBIOLOGA II
2015
MICROBIOLOGA II FCV-UNLP
2015
Objetivos
Contenidos
Clasificacin taxonmica, historia, caractersticas morfolgicas, culturales y metablicas. Composicin antignica,
mecanismos de patogenicidad y diagnstico de laboratorio del gnero Mycobacterium.
Clasificacin taxonmica, historia, caractersticas morfolgicas, culturales y metablicas. Composicin antignica,
mecanismos de patogenicidad y diagnstico de laboratorio de los gneros Rickettsia, Chlamydia y Chlamydophila
Saberes previos
Microbiologa I: Citologa bacteriana. Antgenos bacterianos: somtico (Ag O), cpsular (antgeno K), flagelar
(antgeno H), pilis (antgeno F). Observacin de microorganismos. Metabolismo. Cultivo de bacterias. Pruebas de
caracterizacin fenotpicas y genotpicas. Actividad patgena de las bacterias: diferencia entre endotoxina y
exotoxina.
Fsico-Qumica Aplicada a Fisiologa Veterinaria. Bioenergtica: metabolismo; vas metablicas; variacin de la
energa en el organismo; Compuestos de alta energa: ATP, GTO y otros intermediarios metablicos. Nucletidos
como reguladores alostricos (NAD, NADP, AMP, ADP, y ATP). Respiracin: biofsica de la respiracin;
respiracin celular: ciclo de Krebs; cadena respiratoria: componentes; relacin con el ciclo de Krebs; acoplamiento
de la cadena respiratoria. Metabolismo de protenas: procesos de degradacin de aminocidos. Desaminacin
oxidativa y no oxidativa. Decarboxilacin.
Autores: Dra. Emilia Bautista /Dra. Fabiana Moredo/Dra. Mercedes Gatti
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Histologa. Epitelios de revestimiento. Elementos constitutivos del tejido conjuntivo. Variedades del tejido
conjuntivo. Tejidos conjuntivos especializados. Componentes de la sangre. Hematopoyesis. Neuronas.
Histofisiologa del sistema nervioso. Tejido muscular.
Familia: Mycobacteriaceae
Gnero: Mycobacterium
Orden:
Familia:
Gnero:
Especies:
1.b- Mencione las caractersticas generales del gnero Mycobacterium detallando particularidades
determinadas por la complejidad de su estructura celular.
(para resaltar la complejidad de su pared celular, responsable de muchas de las propiedades caractersticas de las
bacterias: cido alcohol resistencia, crecimiento lento, resistencia a detergentes, resistencia a antimicrobianos
comunes, antigenicidad)
Hospedadores afectados
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M. tuberculosis
Imagen A
Imagen B
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Imagen C
6.-Antes de realizar el cultivo las muestras, estas deben ser homogeneizadas y descontaminadas. En la
imagen D se observa el procedimiento de descontaminacin de la muestra.
Imagen D
Mencionar la sustancia que se utiliza para hacerlo e indicar la finalidad del procedimiento.
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M. bovis
M. tuberculosis
Imagen E
Imagen F
M. avium
Imagen G
a.- Describir las caractersticas de las colonias que desarrollaron en las imgenes E, F y G.
Mencionar similitudes y diferencias
b.- Mencionar las caractersticas culturales del gnero Mycobacterium.
c- Considerando que las principales especies del gnero Mycobacterium, de importancia en
medicina veterinaria y salud pblica, son nutricionalmente exigentes, de crecimiento lento, mesfilos,
aerobias estrictas o microaerfilas, indicar las condiciones de incubacin que deben respetarse para
que estos microorganismos desarrollen: Tiempo, Temperatura, Condicin atmosfrica.
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8.- Los medios de cultivo generalmente utilizados para el aislamiento del gnero Mycobacterium son
enriquecidos y selectivos: Lowenstein Jensen, Stonebrink y Herrold.
a.- Indicar el medio que se utiliza para aislar M. tuberculosis, M. bovis y M. avium sub-especie
paratuberculosis.
c.- Indicar la sustancia que se utiliza para inhibir el crecimiento de Mycobacterium bovis.
d.- Completar la siguiente tabla.
Bacteria
Sustancia
indispensable para el
crecimiento
Medio de
cultivo
slido
M. tuberculosis
M. bovis
M. avium subsp
paratuberculosis
9.- La tipificacin fenotpica de las especies de Mycobacterium ms importantes que afectan al hombre
y al ganado se realiza a travs de las siguientes pruebas entre otras.
Completar la tabla
M. tuberculosis
M. bovis
M. avium subsp
avium
M. avium subsp.
paratuberculosis
10.- Koch obtuvo un antgeno proteico global a partir de filtrados de cultivos que concentr por calor y
llam tuberculina. Seibert precipit protenas a partir de un filtrado de M. tuberculosis y a ese antgeno
lo llam PPD (derivado proteico purificado). Hay PPD estndares internacionales para cada especie
micobacteriana aunque poseen componentes antignicos comunes. Indicar el motivo por el cual se
utiliza la PPD.
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11.- En la imagen G se observa a las micobacterias agrupadas formando haces o cuerdas. Se trata de
otro componente antignico. Indicar el componente produce ese efecto y su importancia en la
patogenicidad de la bacteria.
Imagen G
12.- Otros factores de patogenicidad, intervienen para convertir a las micobacterias en parsitos
intracelulares facultativos que persisten dentro de los macrfagos y clulas del sistema inmune.
a.- Completar el cuadro siguiente.
Factores de virulencia
Mecanismo de accin
Sulftidos
Glucolpidos de trehalosa
Cera D
DIAGNSTICO DE LABORATORIO
13- Ante una sospecha clnica de tuberculosis bovina el veterinario debe remitir muestras al laboratorio.
a.- Qu muestras enva, cmo lo hace y a qu temperatura se conservan?
b.- Para qu utiliza la tcnica de spoligotiping?
c.-Qu muestras enva para diagnostico de paratuberculosis bovina?
d.- Qu otro tipo de diagnstico no microbiolgico se pueden emplear para la TBC?
Autores: Dra. Emilia Bautista /Dra. Fabiana Moredo/Dra. Mercedes Gatti
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Tanto las Chlamydias como las Rickettsias son procariotes que tienen DNA y RNA y ribosomas, siendo
el tamao celular variable. Se caracterizan por ser parsitos intracelulares obligados.
Familia: Rickettsiaceae
Gnero: Rickettsia
Las rickettsiosis constituyen un complejo y variado conjunto de enfermedades zoonticas distribuidas ampliamente
por todo el mundo, involucrando diversas especies de reservorios vertebrados y vectores (artrpodos) y
condiciones ambientales para el mantenimiento y la emergencia de las mismas. El espectro clnico vara desde
fiebre indiferenciada, fiebre con exantema (papuloso, purprico o vesiculoso) hasta cuadros sistmicos graves.
Las rickettsias pertenecen a la divisin proteobacterias. Morfolgicamente son pequeos cocos o bacilos
gram negativos, con tamao entre 0,3-0,7 m de ancho y 1-2 m de largo. Con una sola excepcin, son parsitos
intracelulares estrictos y an no pudieron cultivarse en ausencia de sus clulas hospedadoras. A diferencia de
otros patgenos intracelulares, poseen un complejo enzimtico que les permite mantener un metabolismo
independiente y produccin propia de energa. Tampoco realizan su ciclo intracelular dentro de una vacuola.
Slo pueden cultivarse en lneas celulares o recuperarse por inoculacin en animales de laboratorio. En
forma indirecta, se reconocen en muestras de tejidos por inmunofluorescencia, tcnicas histoqumicas o reaccin
en cadena de la polimerasa. Las coloraciones como Gimnez y otras, se abandonaron por su baja sensibilidad.
Orden:
Familia:
Una clasificacin moderna basada en el anlisis del genoma completo, divide las especies del
gnero Rickettsia en tres grupos:
Mencinelos:
2.- Las rickettsiosis son el tpico grupo de enfermedades transmitidas por vectores, con una amplia
gama de reservorios animales.
a.- Mencione los principales vectores
b.- Esquematice el ciclo biolgico de las rickettsiosis
c.- Mencionar las variables que dan complejidad al ciclo biolgico de las rickettsiosis.
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4.- Analice la imagen B, realice una bsqueda bibliogrfica complementaria y posteriormente, describa
la patogenia de Rickettsia spp.
Imagen B
Familia: Chlamydiaceae
La familia Chlamydiaceae est conformada por un grupo de bacterias de tamao
pequeo, cuya principal caracterstica es el ciclo replicativo intracelular, lo cual las
convierte en parsitos intracelulares obligados.
1.- Mencione la clasificacin taxonmica de las especies con conforman la Flia. Chlamydiaceae
Orden:
Familia:
Gneros (mencionar los gneros pertenecientes a la familia):
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Analizar las especies bacterianas abordadas en la APO 3/intracelulares obligados y citar las que son
consideradas ZOONTICAS.
Analizar las especies bacterianas abordadas en la APO 3/intracelulares obligados y citar las que
ocasionan ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS.
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Situaciones problemticas
A- Un lote de 10 cerdos de raza Landrace de 6 meses de edad comenz con prdida de peso,
tos, caquexia y diarrea. Los animales eran alimentados con restos de comida de un hospital
cercano.
La necropsia de dos animales evidenci lesiones granulomatosas en ganglios retro farngeos y
submaxilares,pulmn, hgado, bazo, riones, ganglios mesentricos y retroperitoneales.
El estudio bacteriolgico arroj como agente etiolgico a Mycobacterium tuberculosis
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B- Se estudiaron muestras de una gallina sedosa del Japn hembra de dos aos y de un and
hembra de tres aos, provenientes del zoolgico "La Mxima" de la ciudad de Olavarra. Las aves
fueron halladas muertas, se les realiz la necropsia y en ambos casos se observaron lesiones
granulomatosas compatibles con tuberculosis aviar en los rganos viscerales. El and hembra
present decaimiento una semana previa a la muerte e importante prdida de masa muscular .
En la observacin de una impronta de ganglio, aparecieron bacilos acido alcohol resistentes (BAAR)
muy finos, de longitud irregular, ms bien cortos, sueltos, sin formar cordones ni agrupaciones,
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C- Por convencin las infecciones causadas por Mycobacterium tuberculosis y bovis son
denominadas Tuberculosis y las infecciones causadas por el resto de las micobacterias se
denominan Micobacteriosis. Entre las micobacteriosis, las de crecimiento rpido son denominadas
atpicas, son las ms comunes y se presentan en gatos causando lesiones limitadas en piel
(dermatitis granulomatosas a piogranulomatosas y paniculitis). Las de crecimiento lento son raras en
pequeas especies y suelen tener una presentacin diseminada.
Se presenta a consulta un hurn macho de 2 aos de edad adquirido en una tienda de mascotas
a los 3 meses de edad; el motivo de las consulta es por disminucin de peso. A la revisin presenta
constantes fisiolgicas dentro de los rangos de referencia, aumento de tamao de linfondulos
prescapulares y poplteos, lesiones pustulares en dedos del miembro posterior derecho.
C1- Qu muestra reviste importancia para el diagnstico, sospechando de la bacteria en estudio en esta
APO como agente etiolgico?
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Imgenes C2
C3- Mencionar los recursos de la marcha bacteriolgica que permiten confirmar el agente etiolgico
involucrado:
Imgenes C4
C4- De acuerdo a las caractersticas fenotpicas observadas en el cultivo, mencionar el grupo bacteriano
al que puede corresponder el agente etiolgico del caso clnico C.
C5- Teniendo en cuenta el crecimiento lento, con desarrollo en los cultivos a 25 C, 37 C. (no a 45C) y
de acuerdo al resultado de las pruebas de tipificacin propuestas en la imagen C5, Qu
microorganismo se presume y cmo se confirma la identificacin del aislamiento?.
Imgen C5
Reduccin de nitrato
Reaccin positiva
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Reduccin de telurito
Reaccin negativa
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Situacin D- El aborto enzotico de los pequeos rumiantes o aborto enzotico ovino (AEO), es
una enfermedad de distribucin mundial, y es la principal causa de aborto infeccioso en pequeos
rumiantes en numerosos pases.
El contagio suele producirse por va oral mediante la ingestin de bacterias presentes en el
agua o comida contaminadas, o mediante el lamido e ingesta de restos placentarios. Otra va de
infeccin es la aergena, a travs de la inhalacin de aerosoles presentes en ambientes
contaminados. Existen otras vas de transmisin posibles pero menos significativas como son la
venrea, la orofecal y a travs de la secrecin lctea en el caso del ganado caprino.
gestacin,
se diseminan va
desencadenando el aborto, 2-3 semanas antes de la fecha estimada de parto, o un parto a trmino
de corderos muertos o muy dbiles que mueren pocos das despus (Imagen D1) .
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Imagen D2
Imagen D3
Nombre de la tcnica
Fundamento
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Imagen D4
4 - Mencionar recursos para el aislamiento del agente responsable del cuadro clnico.
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Situacin E - Psitacosis (palabra que procede del griego psittakos, que significa loro) es una
enfermedad aguda que produce fiebre y genera una neumona, as como sntomas generales
parecidos a los de la gripe en el humano. En las aves produce una enfermedad sistmica; segn la
cepa del organismo, especie, edad y la condicin del ave, las infecciones pueden ser asintomticas o
resultar en signos clnicos leves a graves.
genotipo A que generalmente se encuentra en las aves psitcidas y puede provocar una enfermedad
grave en esta especie da el nombre genrico a la enfermedad. El genotipo B con frecuencia se
asocia con las torcazas, pero tambin se han informado casos en las aves psitcidas y en los pavos.
El genotipo C aparece en los patos y los gansos. El genotipo D ha sido aislado principalmente de los
pavos y se considera el ms virulento para esta especie; este genotipo tambin se ha encontrado en
las garcetas y en las gaviotas. El genotipo E tiene un rango diverso de huspedes, aparece en las
torcazas y adems ha sido aislado de ratites (avestruces y andes), patos y pavos enfermos. El
genotipo F, que se ha encontrado en un pavo y en un ave psitcida, aparentemente es muy poco
frecuente entre las especies domsticas. Se han informado casos del genotipo E/B, que fueron
descritos por primera vez en el 2005, en los patos, pavos y las torcazas; es posible que se
descubran huspedes adicionales. En ocasiones se han informado casos de infeccin en mamferos,
tales como los perros, gatos, caballos, bovinos (cepa WC) y las ratas almizcleras (cepa M56).
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2.- Fundamentar la siguiente afirmacin, en relacin al diagnstico del agente etiolgico indicado
en el tem anterior (1) y mencionar tipos de muestra a recolectar.
Las muestras slo deben enviarse bajo condiciones seguras y a laboratorios autorizados
para evitar la propagacin de la enfermedad.
3 - Mencionar recursos y tcnicas para el diagnstico del agente propuesto en el item 1
(Situacin E) a partir de las muestras propuestas en el item 2 (Sit E).
4- Indique el nombre de las forma infecciosa (imagen E1) del agente propuesto en el item 1
(Situacin E) que se encuentra fuera de las clula y se caracteriza por ser resistente a la
desecacin, permanecer viable durante meses si est protegida por detritos orgnicos;
sobrevivir hasta 2 meses en el alimento de aves, 15 das en el vidrio y 20 das en la paja.
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Imagen F1
1.- Mencione la entidad clnica (grupo) al que pertenece el agente bacteriano mencionado
teniendo en cuenta las manifestaciones clnicas descriptas.
2.- Esquematice el ciclo biolgico de Rickettsia conorii y mencione el "rgano blanco" del
agente bacteriano en el animal afectado que explica la manifestacin que caracteriza el cuadro
clnico.
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