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REPRODUCCION DE COLOSSOMAS

(Por Amaury Bezzerra da Silva)1

I. SELECCION Y CRIA DE REPRODUCTORES


A. Nmero de reproductores : densidad
1. Carga
La cantidad de reproductores necesaria es predeterminada por el nmero de alevines que
se desea obtener, as como el nmero de huevos, considerndose evidentemente, la
prdida por mortalidad. Para establecer el nmero de reproductores, pretendindose una
cantidad de alevines es preciso basarse en el peso de cada hembra. Normalmente, una
hembra de Colossoma desova en media 100.000 vulos por kg de peso corporal, esto
equivales a afirmar que una hembra de 6 kg podr producir 600.000 vulos. Dependiendo
del ndice de fertilizacin se podr o no obtener una significativa cantidad de larvas,
consecuentemente de alevines.
Una densidad conveniente de peces ir a asegurar condiciones ideales que influenciarn
en el desempeo de los progenitores. Para tal, una carga de 1 kg de peso corporal del
pez por metro cuadrado (1 kg/m2) es considerada buena. Para que esto se torne evidente,
el vivero tendr que poseer todas las condiciones de estabulacin, tal como agua en
calidad y cantidad, alimentacin adecuada, etc.
Deber tener una profundidad en torno de 1.5 m y contener agua en abundancia. Un
vivero de 1 ha de rea exigir 100200 m3 de agua por da, necesarios como para
completar la prdida de evaporacin durante la estacin de seca. De preferencia, la forma
deber ser rectangular, lo cual facilitar la captura de los peces. Los estanques debern
ser de 10004000 m2 de tamao.
Es conveniente disponer de la suficiente cantidad de reproductores para atender una
capacidad de produccin de alevines de la estacin alevinera.
1

Pesquisador de lo Segundo Directorio del DNOCS, Fortaleza-CE, Brasil

2. Produccin Relativa de Sexos


En los peces del sub-orden Charachoidei, el ms importante de los peces de agua dulce,
normalmente se utiliza la proporcin de 2 machos para 1 hembra (2:1), lo cual sirve para
garantizar una cantidad suficiente de semen durante los trabajos de reproduccin
inducida. Muchas veces un individuo macho no libera en elmomento que se practica la
fertilizacin artificial, la cantidad necesaria de esperma para fecundar los vulos de una
determinada hembra; es evidente que un macho en buenas condiciones de desove
proporciona volumen ms que suficiente para fertilizar vulos de una hembra o ms.
3. Diferenciacin de Sexos

La diferenciacin de los sexos en los peces del sub-orden Charachoidei slo es posible en
la poca de desove. Los machos presentan vientre comprimido y dejan fluir el semen
cuando se les presiona el abdomen. Se debe tener en cuenta que los machos en
condiciones para el desove presentan el semen viscoso y de color lechoso; individuos con
semen muy fluido y transparente deben evitarse.
Las hembras sexualmente maduras muestran un vientre flcido, no siempre voluminoso,
papila genital ligeramente dilatada. Debe evitarse utilizar peces con papila muy
prominente y muy colorada, eso demuestra que tales peces estan en un proceso
adelantado de reabsorcin de sus gnodas; forzar un desove enindividuos en esas
condiciones se tendr un resultado negativo. Si ocurre un desove, el producto sexual ser
de psima calidad comprometiendo as la sobrevivencia.
Los machos de pirapitinga, cuando estn prontos para desovar emiten ronquidos igual
que los Prochilodus machos, lo que no ocurre con el tambaqui.

B. Origen y Cra de Reproductores


Los reproductores pueden obtenerse directamente de su ambiente natural o de viveros de
la estacin. Adems de los traumas sufridos durante la captura, los reproductores
naturales no se adaptan fcilmente a la vida en cautiverio, se ponen nerviosos, agitados o
no se pueden alimentar. La ventaja de tener reproductores en cautiverio desde jvenes y
en condiciones favorables, es de que siempre se dispondr de individuos capaces de
desovar en el tiempo deseado. Tambin la captura de ejemplares criados en cautiverio
presentan menos tendencia al trauma, sta es una de las razones de inhibicin de desove
de los peces, principalmente de las hembras que dejan de liberar los vulos a pesar de
estar en condiciones para tal proceso.
La formacin de futuros planteles de reproductores debe ser una preocupacin constante
de una estacin de piscicultura. As se hace necesaria la seleccin de individuos jvenes
que preseten las caractersticas ideales para ser buenos reproductores.
La cra de reproductores exige cuidado especial con el medio en que viven. La falta de
espacio y una alimentacin deficiente son responsables por la degeneracin de los
productos sexuales. El espacio restringido puede ocasionar fallas en el crecimiento,
motivado por el desaparecimiento de ciertos trazos de substancias nutritivas o por la
alteracin de los mecanismos del metabolismo, ocasionado por los remanentes txicos
del medio ambiente.
La renovacin peridica del agua de los viveros mantendr los niveles de cualidad
ambiental en armona con la naturaleza del trabajo. Debe evitarse la excesiva luminosidad
de los viveros, pues los peces pueden sufrir un efecto negativo sobre el desenvolvimiento
de sus gnadas.

C. Factores que influenciaron el Potencial del Semen y Ovulos


1. Alimentacin

La alimentacin de los peces es de fundamental importancia para obtener productos


sexuales de buena calidad, para tal, la disponibilidad local de insumos de valor proteico y
vitamnico es de vital necesidad.
En falta de una buena alimentacin, la fase de vitelinognesis del desenvolvimiento del
huevo es afectada, en caso de que haya deficiencia en nutrientes esenciales,
particularmente en aminocidos, vitaminas o minerales, el desenvolvimiento del huevo es
fatalmente afectado en deterimento de una buena ovuacin que tiende a fracasar.
Es mejor criar un nmero de reproductores con dieta cualitativa y cuantitativa satisfactoria,
de que mantener un plantel inmenso y mal nutrido.
Los peces del gnero Colossoma son omnvoros de una manera general, siendo que en
el Amazonas el tambaqui se alimenta de frutas que caen al agua, zooplancton, algunos
vegetales y pequeos peces. En los azudes del Nordeste brasilero, se alimentan de algas
filamentosas (Spirogyra), moluscos gasteropoda, zooplancton y pequeos peces. En
cautiverio, son mantenidos a base de racin para crecimiento de aves (23% de protena),
en forma peletizada siempre se evita el abastecimiento de racin molida. El tambaqui y la
pirapitinga no tienen capacidad de aprehensin de alimento en esa forma,
consecuentemente habr sobra excesiva de racin en el fondo del vivero que se
descompone ocasionando deplecin de O2, niveles bajos de O2 conducen al pez a no
desovar. Paralelamente al uso de pelets, los peces se abastecen con frutos como
guayaba (Mirtacea), Mutamba (Esterculiacea), vegetales de hojas tiernas, restos de
productos hortigranjeros, Sandillas, etc. En general, es preciso conocer el rgimen
alimenticio y los hbitos alimentrios del pez cultivado, se debe evitar el uso excesivo de
alimentos ricos en carbohidratos, ya que producir exceso de gorduras en detrimento de
un buen desarrollo de las gnadas.
Puede mantenerse en el vivero la vegetacin acutica submersa en forma controlada
Hidrotix gardineri (Pontaderiacea), muy semejante a Chara sp, ese vegetal posee un tenor
de 23% de protenas, constituyendo un excelente alimento para esas especies, pero ante
todo, debe evitarse la demasiada proliferacin, porque en la noche se torna inevitable el
excessivo consumo de O2, ocasionando implicaciones negativas para los peces.
Para el control parcial de esta vegetacin se puede introducir un cierto nmero de machos
de cualquier especie de tilapia (Sarotherodon o Tilapia) es suficiente (100 200/ha), el
control mecnico puede ser hecho, sin embargo, es muy oneroso.
En cuanto a la capacidad de utilizacin de vegetales como alimento, la pirapitinga posee
un mayor potencial que el tambaqui, sin embargo, es ineficaz en el consumo de
zooplancton, ya que no posee filtros bronquiales com aquel.
1.1. Tasa de alimentacin

Se torn clsico el establecimiento de una tasa de alimentacin de 1 a 1.5 % para la fase


que comprende hasta las proximidades de la poca de reproduccin, cuando entonces los
peces tendran el alimento disminuido, pero como ambas especies poseen individuos
aptos a desovar durante casi todo el ao, sera difcil establecer una cantidad determinada
de racin para los mismos.

Desde el punto de vista prctico, la cantidad de racin a ser establecida ser en funcin
del grado de apetencia de los peces. Restos de alimento en el fondo del vivero,
presentando olor caracterstico de putrefaccin, indica que esthabiendo exceso de
abastecimiento, eso ser fcilmente detectado examinando peridicamente los locales de
alimentacin del vivero; constatando tal hecho se efecta el inmediato cambio de agua,
restablecindose as las condiciones normales del vivero, el abastecimiento de racin
ser gradual hasta que los peces se alimenten normalmente.
2. Edad y Peso
Hembras de tambaqui estn para el desolve en el 4 ao de vida, los machos alcanzan
ese estadio a los 3 aos de edad.
En el caso de pirapitinga, las hembras y machos estn en condiciones de desove a los 3
aos de vida.
Es evidente que eso ocurrir si las condiciones ideales de alimentacin. espacio uycalidad
de agua fueron establecidas. En la prtica, los mejores resultados son obtenidos con
ejemplares de edad superior a las descritas encima.
Ambas especies son fciles de ser manipuladas en los trabajos de coleccin de productos
sexuales. Entrento, se recomienda trabajar con individiuos de 4 a 8 kg de peso; en
determinado momento esos peces se movilizan bruscamente, dificultando su manejo, el
uso de individuos de menor porte significar la economa de hipfisis.
Despus de 5 aos de uso esos ejemplares pueden ser descartados/substituidos por
otros ms jvenes y de menor porte.

II. INDUCCION A LA OVULACION Y AL DESOVE


Naturalmente, la ovulacin de un pez es realizada a travs de la accin de la glndula
pituitria, que produce y almacena sus propias hormonas que estimulan la ovulacin.
Cuando las condiciones exigidas se tornan favorables, la hormona almacenada es
liberada en la sangre.
En el proceso de hipofisacin, entretanto, la hormona gonadotrpica es obtenida de un
pez (donador) para ser aplicada en otro pez (receptor).
La hipofisacin slo se tornar efectiva si los vulus hubieran alcanzando la fase de
latencia o de reposo que sigue inmediatamente despus de la vitelognesis, entonces con
los vulos estructuralmente prontos sigue la accin de la gonadotropina que los
desarrollar posteriormente.
Una condicin para el xito de una hipofisacin, es la coleccin de hipfisis frescas de
peces donadores; por consiguiente se hace necesario que las mismas contengan una
cantidad adecuada de hormonas gonadotrpicas almacenada.
El papel de la hipfisis es de un agente intermediario entre el cerebro y las gnadas, sus
clulas, producen y almacenan gonadotropinas, y las liberan cuando la glndula recibe el

comando necesario. La cantidad de gonadotropina vara durante las diferentes estaciones


y los diferentes estadios de la vida del pez. Los peces inmaduros poseen apenas
cantidades mnimas de esta hormona pituitaria, en cuanto los peces adultos presentan la
pituitaria completamente agotada despus del desove. A su vez, el nivel ms alto de
gonadotropina en trminos cuantitativos en la hipfisis de los peces sexualmente
maduros, ocurrir cuando sus gnadas alcancen la fase de reposo y durante toda esa
fase. Como la migracin para el desove es provocada por la gonadotropina, esa
substancia se encuentra en su nivel ms bajo; de ese modo, es importante escoger el
tiempo ideal para colectar hipfisis.

Dosaje
Durante una evolucin natural el pez es capaz de regular con precisin el dosaje de su
propia hormona. De esa manera, no hay ningn desperdicio. En el proceso de
hipofisacin en que la hormona procede de otra fuente externa (donador) hay un
considerable desperdici. Se torna difcil determinar una dosis exacta resultando en una
aplicacin ms que necesaria de hormona en los reproductores.
El proceso de ovulacin es lento, durante varias horas, la duracin es regulada por la
temperatura. La ovulacin puede ser diferenciada en 2 fases: pre-ovulacin y ovulacin.
En la fase de pre-ovulacin, la migracin del ncleo se completa y el huevo absorbe una
cantidad de fluido (hidratacin) siendo el tamao el mismo que al final de la ovulacin. En
caso de que en la hipofisacin no se obtenga xito en el desarrollo de los vulos, se
interrumpe en esta fase y el pez podr morir fcilmente, pues los mismos son necrosados
pudieron causar un envenamiento interno.
La ovulacin se inicia con el desaparecimiento de la membrana del ncleo y el
aparecimiento de los cromosomas, terminando con la primera divisin meitica, al mismo
tiempo, el folculo que mantiene el huevo fijo a la pared del ovario se rompe y se disuelve
parcialmente, ocasionanado la liberacin de los vulos en la cavidad del ovario; en ese
momento se produce el desove con el flujo de los vulos a travs de la abertura genial.
La variacin en el dosaje necesaria de la hormona puede variar significativamente para
cada ejemplar de una misma especie, o bien, como por la tcnica empleada.
Realmente, un dosaje depende del grado de preparacin de las hembras, edad, tamao,
sensibilidad y de muchos otros factores (Woynarovich, Horvath), segn stos, en reas
tropicales y sub-tropicales donde el metabolismo del pez es ms alto (debido a la
temperatura ms elevada) y donde la probabilidad de desperdicio de las hormona es por
tanto mayor que en regiones templadas, generalmente se administran 2 o ms dosis, la
introductoria y la final.

Aplicacin de dosis en las hembras


- Dosis preparatoria:
- Dosis final:

10% de la dosis total (34mg de hipfisis/kg)


90% de la dosis total

Intervalo de aplicacin entre 10 a 14 horas. Esto variar;a de acuerdo al grado de


preparacin de los peces.

Aplicacin en los machos

Se recomienda una dosi nica (11.5 mg/kg). Muchas veces se hacen 2 aplicaciones en
el intento de obtener una mayor liberacin de semen, quedando con todos los machos
sujetos a liberar espermas antes que las hembras estn prontas para ovular.
Se debe evitar dosis excesivas en la aplicacin preparatoria, pues la misma podr inducir
al pez a una ovulacin parcial en detrimento de la programacin normal.
En la dosi decisiva final, se puede aplicar un pequeo exceso como medida de seguridad
en orden de 10 a 15%.

Diluyente
Puede ser usado suero fisiolgico o agua destilada, para la dosis decisiva se debe usar
una cantidad de solvente de 0.5 ml por cada glndula (2.53. Omg).
La cantidad de hormonas slo es importante cuando es demasiado grande o pequea.
Cuando pequea la prdida de una gota de solucin significara la prdida de una
cantidad considerable de hormona en cuanto que la administracin de un gran volumen
de solucin se transformara en un problema difcil. Entonces, se recomienda que la
cantidad vare entre 15 ml.

Preparacin de la solucin de hipfisis


Para determinar el dosaje tiene que ser considerado el peso, nmero y sexo de
reproductores.
Para macerar la glndula se usa un mortero y brazo de prcelana. Se colocan las
glndulas y se van humedeciendo con el diluyente, se agrega ms diluyente cuando se
crea conveniente. Se usa jeringa graduada, retirar con la jeringa toda la mezcla que se
lleva a la centrfuga. Hecha la centrifugacin se colecta con la jeringa la solucin sobrante.
Se puede tambin usar glicerina adicionando una pequea cantidad de macerado.
Despus de eso, se adiciona el diluyente en cantidad necesaria y se colecta la solucin
con una jeringa graduada, esta solucin no precisa ser centrifugada, lo cual puede aplicar
inmediatamente.

Dnde aplicar la solucin hipofisiaria ?


De manera general, se aplica la hormona en los msculos dorsales encima de la lnea
lateral y debajo de la parte anterior de la aleta dorsal. Tambin se acostumbra aplicar la
hormona en la parte dorsal del pednculo caudal en caso de peces sensibles.
En los peces de escamas, la introduccin de la aguja se debe aplicar entre la
superposicin de las escamas.
Tambin es comn la aplicacin intraperitoneal, debajo de las aletas abdominales, en este
lugar se evita el reflujo de la solucin cuando comnmente se aplica en los msculos.

Para tener xito en la hipofisacin tiene que tomarse en consideracin las condiciones
ambientales que son importantes, tales como: temperatura adecuada, elevado tenor de O2
libre y tranquilidad.
Cuando un pez recibe tratamiento hormonal necesita de ms del 50% de O2 que
normalmente, pues su metabolismo es ms acentuado, exigiendo mayor demanda de
este gas, esto tambin es vlido en relacin a temperaturas elevadas. El exceso de
manipulacin resulta en mayor consumo de O2, siendo por lo tanto necesario mantener a
los peces en ambientes tranquilos evitndoles traumas y con renovacin constante y
abundante de agua.

Uso de la gonadotropina corinica humana (GCH)


La fase de pre-ovulacin generalmente puede ser obtenida fcilmente administrndose
GCH, sin embargo, es ms difcil alcanzar la plena ovulacin a travs de este mtodo en
la mayora de los peces, a pesar de que muchos peces reaccionan positivamente.
Los peces bien preparados son los que ofrecen condiciones para desovar con el uso de
GCH.
El centro de investigaciones ictiolgicas Rodolpho von Iherin, en el Nordeste de Brasil,
obtuvo xito con Prochilodus ciarensis, con aplicacin nicamente de GCH. Con
Prochilodus argenteus se obtuvo desove con aplicacin de hipfisis de peces en las dos
primeras dosis, siendo que en la tercera, se hubo aplicado GCH.
Ya con pirapitinga, se obtuvo desove en la primera dosis con hipfisis, y en la segunda
con GCH.
As, para Colossoma, recomendamos:
1a. dosis: 2 mg de hipfisis/1 kg de peso corporal
2a. dosis: 5 U.I/g de peso corporal
Se pude ir a una 3a. dosis con 5 U.I./g.
Intervalo de aplicacin: 12 horas.
Los machos son inyectados cuando las hembras reciben su segunda aplicacin con dosis
de 5 U.I./g.

Hora grado
Como normalmente el proceso final de maduracin de los vulos depende de la
temperatura del agua, el mismo lleva determinado tiempo para tal. Desde el intervalo de
tiempo entre la ltima aplicacin de hormona y la ovulacin total, ese intervalo de tiempo
es expresado en hora grado. Cada hora se mide despus de la ltima inyeccin hasta la
completa ovulacin. Se suman las lecturas de cada hora para obtener la hora grado,
esto ayuda al piscicultor a saber exactamente cuando se debe de la ovulacin de la ltima
inyeccin. El valor de la hora grado depende de la especie del pez, del tipo de
tratamiento, del tama de la hembra y si el pez comienza a desovar inmediatamente
despus de la ovulacin o no.

En el caso de Colossoma a temperatura de 28C, la hora grado es 250300.

Estrucin de los productos sexuales


Algunos peces no desovan naturalmente, aun cuando son inducidos a desovar con
aplicaciones de suero pituitario, como en el caso de tambaqui pirapitinga alcanza este
estadio. Con todo, para un mejor aprovechamiento de los productos sexuales, la coleccin
de este material puede ser realizado por extrusin.
La ovulacin o proceso final de maduracin de los vulos no puede ser interrumpido o
anulado. Una vez iniciado el proceso los vulos tienen que ser expulsados o sometidos al
proceso de extrusin; si eso no ocurre, se torna demasiado maduros, sin condicin de ser
fertilizados.
De esta manera, toda hembra en esa condicin tiene que sufrir esta proceso, pues los
ovocitos ya alcanzan el estadio de maduracin que ocurre inmediatamente.
Esta maduracin sufre variaciones de acuerdo a la especie, siendo que en los peces
tropicales eso ocurre ms temprano que en los peces de zonas templadas.
La mayora de los vulos madura o se desarrolla y cae en la cavidad del ovario al mismo
tiempo, esto facilita la estrucin de modo que fluyen fcilmente.
El conocimiento de hora-grado del pez, ayuda a establecer la hora exacta de la ovulacin,
dentro de una variacin de 1020 minutos en media.
En las hembras saturadas, la flacidez del vientre y la presencia de algunos vulos entre
las saturas indicaran la maduracin, estando en condiciones de realizar la extrusin, a
veces los machos son usados como indicadores para las hembras maduras, inician el
cortejo a las hembras maduras flanquendolas constantemente.
Para colectar los vulos se hace uso de depsitos de plstico o de agata limpios y secos.
Se seca la hembra con una toalla suave eliminndose la orina y cuidando de las suturas.
Hembras maduras dejan fluir los vulos en chorros firmes y espesos. Resta apenas la
ltima camada de vulos que precisan sufrir leve presin para su total retirada. Una
extraccin forzada indica que el pez no est en condiciones y eso debe ser evitado, pues
los vulos no se presentaran a fertilizacin.
Simultneamente, se junta el semen de los machos con el uso de pipeta especial.
Tambin se puede colectar el semen directamente de lo macho, depositando sobre los
vulos recogidos mezclando lentamente los productos con una pluma de pato o una
cuchara de plstico; en ese caso tienen que limpiarse y enjugarse a los machos.
Poco despus se va adicionando agua y con determinado perodo de 5 a 10 minutos, se
colocan los huevos ya fertilizados en incubadoras.
Incubadoras con capacidad para 100 a 200 litros son las ms indicadas. Nunca se debe
colocar ms de 300.000 huevos en una incubadora de 200 litros. Al nacer, las larvas
pueden tener problemas con O2 disuelto en agua pudiendo morirse.

Incubacin de los huevos


Esa fase es de una importancia, pues la sobrevivencia de los huevos dependr de su
buen desarrollo. Por lo tanto, la necesidad de cuidados, especiales durante ese
desarrollo, con la temperatura, oxgeno, etc., que podrn intervenir en la calidad de los
mismos es necesaria.
Durante esa fase se exige una elevada concentracin de oxgeno, siendo que en los
estadios iniciales el consumo es insignificante, tornndose ms acentuado a medida que
su desarrollo avanza.
La temperatura ejerce un papel muy importante, debiendo estar en niveles idnticos a los
del ambiente de origen de los peces, evitando excsos mnimos o mximos, pues stos
iran a comprometer el xito de su desarrollo normal.
Otro requisito bsico es la limpieza del agua exenta de plancton. Determinados tenores de
materia orgnica orgnica favorecerel aparecimiento de innmeros problemas con
adversas condiciones de control. De la misma manera, los organismos constitutivos de
plancton, tales como Coppodos, Cyclops pueden destruir los huevos de manera
considerable, pues al agarrale a los huevos las partes de ese organismo de suma
aspereza, destruyen la membrana del huevo matndola.
La manutencin de un flujo contante de agua, eliminar las sustacias txicas producidas
por las huevos, tales como CO2 y NH3que podran comprometer la vida de los mismos.
De todas maneras el flujo del agua debe ser controlado para evitar los coques mecnicos
que podran en riesgo los huevos de los peces, en sus primeras fases de segmetacin
celular hasta mrula son extremadamente sensibles. Adems los cambios gaseosos son
ms intensos cuando los huevos ingresan a la fase de blstula, necesitando de mayor
oncentracin de oxgeno.
Cuando se refiere a luminosidad, los huevos y larvas de algunas especies de peces, son
sencibles a los rayos ultravioletas, como consecuencia, deben ser protegidos de los
excesos de luz.

Incubadoras
Varios son los tipos de incubadoras que podrn ser usadas en la incubacin de huevos y
larvas de peces del gnero Colossoma, que poseen huevos libres y de densidad mayor
que la del agua. Con todo, la forma ideal es la cnica, con parte del cuerpo cilndrica (10
%) y la restante cnica (90%) ese formato ayuda considerablemente a mantener las
larvas en constante movimiento, evitando as que los huevos se depositen en el fondo de
la incubadora, lo cual sera perjudicial para los mismos. Antes de la obsorcin del saco
vitelino el movimiento de larvas es en sentido vertical con impulsos peridicos.
Es recomendable el uso de incubadoras hechas de fibra de vidrio, por ser resistentes y
livianas, fciles de ser transportadas, incubadoras de zinc pueden ser usadas siempre
que la parte interna sea pintada neutra. Ambas pueden ser confeccionadas
artesanalmente para disminuir considerablemente los costos.

La entrada del agua deder ser colocada en la parte inferior de la incubadora con el uso
de ducha domstica, de manera que el flujo del agua en movimiento sea en sentido
vertical, de abajo para arriba. La salida del agua se dar por encima de la incubadora,
teniendo cuidado de usar un tela de malla de 350400 micras, a fin de impedir la fuga de
huevos o larvas permitiendo con esto que el flujo del agua no sea interrumpido. Mallas de
esa dimensin favorecer el pasaje de los residuos de la desintegracin de la camara de
los huevos. El implemento de ese flujo ocasionar el revalse de agua con la inevitable
prdida del material de incubacin.

Filtrado de agua para la incubacin


Unos de los problemas graves durante la fase de incubacin, es la presencia de
organismos indeseables como Cyclops que ocasionan daos en los huevos y larvas de
peces, causndoles la muerte. La construccin de un filtro capaz de retener esos
organismos se hace necesaria. Deder ser construido en ladrillos y concreto, constando
de secciones individules con arena gruesa y varillas slidas con dimensiones de acuerdo
con las necesidades de uso el agua destinada a las incubadoras deber pasar por ese
filtro.

Permanencia de larvas en las incubadoras


Larvas de peces del gnero Colossoma mantienen el saco vitelino hasta el 5 da de vida.
Entretanto, en el 3 el mismo ya se reduce bastante en esa fase, pues el pez ya posee
abertura bucal, alimentndose simultneamente del medio interno y externo, nada en
sentido horizontal y procura alimento del medio ambiente, pudiendo darse a las larvas,
huevo cocido licuado varias veces al da. La racin delhuevo no deber pasar del 3 da,
ya que ocasionar la muerte de las larvas que tendran dificultad en digerirlos y cuyo uso
se hace para distener el intestino facilitando el paso del alimento. Se puede ofrecer
zooplancton filtrado en mallas de 60 a 80 micras, con todo se trata de un trabajo lento y
oneroso.
La ideal sera que en el cual irn a residir las larvas, stas encuentren abundante
alimentacin, indispensable para un rpido desarrollo, evitando posibles problemas por la
deficiencia de alimentacin.

Cultivo de larvas en vivero


Aqu reside bsicamente el xito de toda la crianza, e implica cuidados especiales.
La colocacin de larvas en vivero, se dar entre el 3 y 4 das de vida, muchas veces
para evitar la predacin de coppodos las larvas son mantenidas en incubadoras no
mas de 48 horas. En esa fase la reserva nutricional todava es suficiente para la
manutencin de la larva.
La mejor hora para poblar de larvas el vivero, ser por la maana, cuando la temperatura
est baja y sin problemas de choque ambiental.
La colecta de larvas ser hecha mediante sistema de sifonaje y con mangueras de
plstico, de la incubadora a baldes del mismo material, tenindose cuidado de evitar
choques mecnicos durante esa manipulacin pueden ser utilizados tambin sacos

plsticos. Al llevar los recipientes con las larvas para el vivero, se debe dejar fluir el agua
lentamente en los anaqueles, a fin de equilibrar la temperatura del agua de esa manera,
las larvas van siendo colocadas tambin en el vivero, tetornando del balde o saco de
agua.
Es evidente que para recibir las larvas, el vivero deber estar debidamente preparado,
consistiendo en:
a. Graduacin del lecho del vivero.
b. Aplicacin de abono orgnico e inorganico esparcido en todo el rea del vivero, la
cantidad depender del tipo de suelo y edad de cada vivero, dos a tres toneladas
por hectrea durante la primera aplicacin. La experiencia de cada piscicultor
establecer la manera correcta de abonar y la frecuencia con que se haga. El
abonamiento a base de fosfato es necesario para la formacin de fitoplancton, que
servir de alimento a los rotferos que, a su vez constituyen el alimento inicial de
las larvas durante los seis primeros das de vida en el vivero.
c. Se debe llenar el vivero gradualmente, para que haya una concentracin gradual
de zooplancton al alcance de las larvas, stas, por su tierna edad, no poseen
energa suficiente para su locomocin en volumenes mayores para procurar su
aliemto por s mismas. Cada da se eleva el nivel del agua de tres o cinco
centmetros, de preferencia de noche, para que muy importante es el tamao de
los viveros para la crianza de larvas; stos dedern ser con dimensiones de 1.000
a 2.000 m2 cada uno, de mayores extensiones estan sujetos a los viveros que
causaran choques mecnicos con la consecuente mortalidad de las larvas.
Despus del surgimiento de organismos constituyentes de zooplancton, se hace
una seleccin de los mismos con el uso de insecticidas; Dipterex (1 ppm), Folidol,
etc., eliminando los coppodos y cladceros; los cladceros son consumidores en
potencia de fitoplancton, alimento substancial de los rotferos y los coppodos que
son predadores de las larvas de peces. Tampoco pueden por su tamao ser
ingeridad porlarvas de poca edad, pues la boca delas mismas no poseen la
bertura suficiente para esa funcin. Los coppodos constituyen tambin
predadores de rotferos.
Una manera de eliminar los organismos predadores de larvas de Coiossoma, es el
uso de cal viva, sin tener que sufrir hidratacin. De esta forma, el cuidado que
debe tenerse en el momento de su adquisicin debe ser enorme; la cal hidratada
no causa ningn efecto en los predadores de larvas de peces.
La cantidad de cal usada es aproximadamente de 200 a 400 g / m2, esparcida en
el lecho hmedo del vivero. constatada la eliminacin de predadores (ninfa de
Odonata, disticida, rantara, peces, etc.) el residuo de cal podrser eliminado
haciendo un lavado del viero antes del relleno normal del mismo. con la cal
efectunando la eliminacin del zooplancton y pasado el efecto residual de la
misma, se podr efectuar la inoculacin de rotferos capturados en otros viveros,
filtrados en mallas de 60 a 80 micras. En poco tiempo estar restablecida la fauna
planctnica del vivero.

d. La densidad es, generalmente, entre 100 a 100 larvas/m2. Debe tenerse todo
cuidado con cantidades excesivas de larvas, pues eso podra implicar en una
reduccin del crecimiento de las mismas causado por el poco volumen alimenticio.
Tambin el exceso de larvas, puede traer consigo el consumo exagerado de
oxgeno, el de la fauna planctnica que favorecera el aparecimiento de blooms
de algas nocivas. Constada esa densidad elevada, debr efectuarse previamente
preparados para recibirlos.
e. Algunos criadores prefieren alimentar a los pequeos alevines despus de los seis
das en los mismos viveros, pero la mayora prefiere hacerlo despus de completar
de los seis das en los mismos viveros, pero la mayora prefiere hacerlo despus
de completar el mes estabulado. Se usa una racin finamente molida, con alto
poder proteico (42%) que puede ser colocada en determinados puntos del vivero,
inicialemente en mrgenes humedecidos.
La aplicacin deber ser varias veces al da, siempre con el cuidado de no excederse
para evitar poluciones con el vivero. Usase tambin cuando se retiran las larvas de las
incubadoras, la yema de huevo cocida liquidificada para enjuagar el vivero, ello causar el
mismo efecto explicado ya anteriormente.
Despus de una semana de vida en el vida en el vivero, las larvas ya estarn aptas para
alimantarse con organismos mayores; a esa altura o nivel, la fauna de rotferos ya deber
estar bastante reducida por la accin de los peces, bien como por la presencia de
coppodos.
Cada 15 das, se deber realizar la captura de los peces en el vivero, a fin de certificar su
estado nutricional, como tambin el posible ataque de parsitos.

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Mar del Per. FAO, Proyecto PDUD/FAO-PER/76/022. Traduccin y Edicin del
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Manual de Extenso. FAO/CODEVASF/CNPq. Traduo Vera Lcia Mixto Chama.
Braslia.

ASPECTOS METODOLOGICOS DE LA REPRODUCCION


INDUCIDA DE PECES REOFILICOS
(Fernando Alcntara Bocanegra)2

INTRODUCCION
La reproduccin inducida de peces reoflicos en la regin de la Amazona peruana, ha
cobrado mucho inters durante los ltimos aos, debido al desarrollo que est alcanzando
la piscicultura de las especies nativas. A la fecha, se ha logrado inducir la reproduccin de
boquichico, Prochilodus nigricans (Pezo y Sicchar, 1979; Eckman, 1980; Alcntara, 1982;
Ruiz et al. 1985); sbalo, Brycon sp (Eckman, 1980); gamitana, Colossoma macropomum
(Alcntara, 1985) y paco Colossoma brachypomum (Alcntara y Guerra, 1986). El grado
de avance es variado, siendo Alcntara y Guerra (1986) quienes lograron un avance
significativo en la produccin se semilla de gamitana y paco para el cultivo.
El xito en las operaciones de reproduccin inducida, est determinado por factores
inherentes al pez as como por factores externos. Entre los primeros estan, el estado
nutritivo del soma y el estado de desarrollo gonadal, aspectos primarios que determinan la
calidad de los productos sexuales. Entre los segundos estan, el tipo de hormona
necesaria, la dosis adecuada, los cuidados en el manejo de los reproductores a travs del
tratamiento hormonal.
El presente trabajo tiene por objeto efectuar una sntesis de las normas y procedimientos
generales de la reproduccin inducida de las especies reoflicas, con la finalidad de
orientar los operativos de produccin de semilla de las especies de inters para el cultivo
en la amazona peruana.
No se pretende hacer un documento definitivo, ni que el mismo cubra todo el
conocimiento sobre los asuntos tratados. La intencin es la de proponer una gua prctica
y accesible a todos aquellos que pretenden dedicarse a la produccin de semilla, por
medio de la reproduccin inducida.
Se ha omitido los aspectos de la fisiologa de la reproduccin intencionalmente, por lo que
consideramos necesario sugerir que para fines experimentales se revisen estos aspectos
que han sido tratados con amplitud, por diversos autores, tales como: Pickford y Atz
(1957), Clemens y Sneed (1962), Harvey y Hoar (1979), Woynarovich y Hovath (1981),
etc.
2

Instituto de Investigacin de la Amazonia Peruana, Iquitos-Per

1. SELECCION DE REPRODUCTORES
1.1 Determinacin del Estado de Madurez a travs de la medicin del
dimetro de los ovocitos

El dimetro de los ovocitos debe ser conocido para todos los estadios de madurez de una
especie en particular, elaborndose un atlas del desarrollo de los mismos. El dimetro
de los ovocitos puede ser usado adecuadamente como un indicador del estado de
maduracin.
1.1.1 En especies que no se conoce el tamao medio de los ovocitos segn el
estado de madurez sexual:
a. se extraen los ovarios de la cavidad abdominal;
b. se cortan logitudinalmente sus membranas en toda su extensin
c. se colocan los ovarios en solucin Gilson (1:3). Ver anexo;
d. despus de 15 minutos se agita fuertemente el frasco para que ocurra el primer
fraccionamiento de la masa de vulos;
e. se deja los ovarios en Gilson por varias horas, agitando frecuentemente el frasco
hasta que se produzca la separacin de las membranas, para no dificultar la
limpieza del material;
f.

los ovarios disociados se transfieren a una placa de Petri, o un recipiente


adecuado para retirar las membranas mediante una pinza o un pincel;

g. la masa de ovocitos disociados se transfieren a una solucin de alcohol 70%;


h. se lavan los ovocitos varias veces en alcohol 70% para eliminar todos los residuos
de tejidos;
i.

se conservan los ovocitos en alcohol 70%

j.

se homogeniza la masa de ovocitos;

k. se toma una muestra mediante una pipeta Stempel;


l.

se lleva la muestra a observacin haciendo uso de una lupa con ocular


micromtrico;

m. se mide el dimetro de los ovocitos agrupndolos en intervalos de clase de 50u;


n. se calcula la frecuencia relativa (%) de los ovocitos para cada clase de dimetro y
se lanzan los resultados en grficos: abscisa, clase de dimetro, ordenanda,
frecuencia relativa por clase. Este procedimiento debe efectuarse por cada
individuo.
Nota: El anlisis de tales grficos nos proporcionan informacin sobre el grado de
desarrollo de los ovarios (la moda ms avanzada corresponde al grupo de ovocitos ms
desarrollados). Adicionalmente nos proporcionada informacin sobre el tipo de desove de
la especie en cuestin (el nmero de modas indica los lotes de ovovcitos en desarrollo en
distintas fases). Nash y Shehadeh (1980), Vazzoler (1982).

Figura 1. Distribucin de frecuencia del dimetro de los ovocitos de la especie.


R = Lote de reserva
M = Lote de maduracin
1.1.2 En especies de tamao medio de los ovocitos conocidos, segn el estado de
madurez sexual:
a. ediante biopsias practicadas a travs de la pared abdominal o del oviducto, se
toman muestras de ovocitos de la porcin media del ovario;
b. e lava la muestra en suero fisiolgico;
c. e preserva la muestra en una solucin de formalina 1% en cloruro de sodio 0.6%;
d. se llevan a observacin en una placa de Petri;
e. se efctun las mediciones del dimetro de los ovocitos mediante la lupa con ocular
micromtrico;
f.

se procede como en el paso m del procedimiento anterior;

g. la moda del dimetro medio de los ovocitos, nos indicar el estado de madurez de
la especie en cuestin, comparando tales observaciones, con un cuadro de
distribucin de frecuecias del dimetro de la especie, determinado en una poca
de maduracin anterior.

1.2 Determinacin del Estado de Madurez segn la posicin del ncleo


A travs de las diferencias fases de desarrollo gonadal, los ovocitos muestran su ncleo
en posicin centra o perifrica, Agostinho et al. (1982). Para fines prcticos, un ovocito
con su ncleo en posicin central se considera inmaduro o en maduracin y en posicin
perifrica, se considera maduro.
Para la observacin de la posicin del ncleo, se sigue el siguiente procedimiento:

a. mediante biopsias del ovario, practicadas por va intraperitonal o genital, se toman


muestras de ovocitos;
b. se lavan los ovocitos en suero fisiolgico;
c. se los coloca en solucin por unos minutos (ver anexo);
d. se llevan a observacin.

1.3 Determinacin del Estado de madurez segn el aspecto externo


Este es un criterio subjetivo y ha sido empleado por muchos investigadores. El xito en la
seleccin segn este mtodo estsupeditado a la experiencia y habilidad del operador.
En la seleccin de las hembras se tiene en cuenta el grado de desarrollo de la barriga y
en algunos casos, la dilataccin de la papila genital, adems de la observacin anterior.
En la seleccin de los machos se tiene en cuenta la emisin de esperma por presin del
vientre con dedos, en la regin genital.

2. DOSIFICACION
Las dosis pueden ser preparatorias o estimulantes y definitivas o desencadenantes. Las
dosis desencadenantes son de mayor concetracin. El nmero de dosis estimulante y
desencadenantes vara segn los autores, no obstante se considera que el menor nmero
de dosis, adems de facilitar el trabajo, disminuye las posibilidades de que los peces
reproductores se perjudiquen o lleguen al stress. En un tratamiento prolongado, de tres
a cuatro das, es frecuente observar problemas de micosis (Saprolegnia).

2.1 Administracin de glndulas hipfisis


La administracin de glndulas hipfisis se realiza en trminos de nmeros de glndulas
por unidad de peso (Fontenele, 1959; Pezo y Sicchar, 1979; Eckman, 1980; Da silva,
1981; Alcntara, 1983; etc), entrminos de porcentaje de glndula (Bermdez et al. 1979),
o en trminos de miligramos por unidad de peso (Alcntara, 1985).
En la tabla 1 se sealan algunas dosis empleadas segn autores.
Los aspectos filogenticos no parecen tener importancia. En las prcticas de piscicultura
se ha demostrado que muchos peces responden bien a la administracin de extractos
hormonales heteroplsticos y a la carpa, Cyprinus carpio, se ha sealado como un
donador universal (Kazanskii, 1951, revisado por Pickford y Atz, 1957). En las especies
nativas de inters para la piscucultura, se ha demostrado que aceptan bien los extractos
heteroplsticos de glndula pituitaria, como inductores gonadotrficos, como se observa
en la tabla que antecede.

2.2. Administracin de gonadotrofina


Se ha utilizado con xito, diferentes gonadotrofinas para la reproduccin de los peces.
Entre ellas, se han utilizado gonadotrofinas de origen y su uso humano, as como

veterinarios. Estos productos se los adquiere en el mercado local con los nombres
comerciales de Pregnyl, Antern y otros.
Tabla 1
Dosis empleadas para inducir la reproduccin, segn especies y autores.
ESPECIE RECEPTORA

ESPECIE DONADORA

DOSIS 1 2 3 4 5

AUTOR

Prochilogus argenteus

idem

0.1 0.2 0.3 0.41

Fontenele 1959

Prochilodus nigricans

idem Abramisbrama

1.45 id id2

Eckman 1980

Prochilodus nigricans

idem

0.5 1.0 1.52

Alcntara 1982

Colossoma macropomum

Cyprinus carpio

0.5 1.0 1.5 3.03

Alcntara 1985

Colossoma macropomum

Arapaima gigas

Colossoma macropomum

Prochilodus nigricans

idem
1.2 2.0 4.04

Alcntara 1985
Da Silva 1981

Nota:
1
Nmero de pituitaria
2
Glndulas/kg
3
mg/2kg
4
Glndulas/2kg

Adicionalmente, se ha utilizado con xito un anlogo de la hormona liberadora luteinizante


(LH-RH anlogo) que se comercializa con el nombre de Conceptal, (Tabla 2). Ruiz et al.
(1985).

2.3 Administracin de glndulas hipfisis y gonadotrodinas


Un tercer mtodo combina los dos anteriores, as por ejemplo. Da silva (1981) recomienda
utilizar las siguientes dosis para inducir la reproduccin de gamitana, Colossoma
macropomum, con glndulas pituitaria de boquichico, Prochilodus nigricans:
1a. dosis: 1 hipfisis/2kg de peso corporal
2a. dosis: 5U.I./g de peso corporal
3a. dosis: 5U.I./g de peso corporal
La dosis de hormona necesaria puede variar notablemente de un pez a otros dentro de
una misma especie y segn la tcnica que se emplee. La dosis efectiva depende del
grado de "preparacin: de la hembra, de su edad, talla y sensibilidad. Woynarovich
(1981).
Es preciso sealar adems, que la dosis vara con los sexos. Tratndose de machos que
prestan esperma flido en el momento de la seleccin, no se requiere de dosificacin. En
todo caso, la dosis es menor que para las hembras.
Tabla 2
Hormonas anlogas empleadas en la reproduccin de peces
ESPECIE RECEPTORA

INTRODUCTOR

DOSIS 1 2 3 4 5

AUTOR

Prochilodus nigricans

Buserelina1

0.02

Ruiz et al. 1985

Prochilodus nigricans

GCH 2

Ruiz et al. 1985

Colossoma macropomum

GCH 3

0.3 0.3 0.3 1.5 3.0


- - - 0.55 0.45

Saldaa y Ascn 1985

1 mg/kg
2 UI/g
3 UI/g

3. PREPARACION DEL EXTRACTO


3.1 Vehculo
El vehculo puede ser suero fisiolgico o agua destilada y en cada ocasin, se recomienda
involucrar un volumen menor de un centrmetro de un cbico. Harvey y Hoar (1979).

3.2 Procedimiento
a. Determinada la dosis a administrar, se coloca la glndula hipfisi (entera o en
polvo) en un mortero o cpsula de superficie lisa.
b. Se procede a moler el producto, mediante un pistilo suave, agregando una gota de
agua destilada, hasta conseguir la homogeinizacin completa.
c. Se agrega agua destilada por gotas hasta conseguir concentrar el producto,
cuidando de no emplear ms de 1 cc.
d. Se succiona el producto mediante una jeringa hipodrmica.
e. Se elimina las burbujas de aire de la jeringa, para proceder a la inoculacin.

3.3 Comentario
En la preparacin del extracto, algunos autores han centrifugado el producto (Fontenele,
1959; Alcntara, 1983), para inocular solamente el sobrenadante. Sin embargo, en las
prcticas de campo, se ha eliminado este procedimiento.

4. INOCULACION
4.1 Vas de inoculacin
Se ha utilizado tres vas de inoculacin de los extractos hormonales: va intracraneal, va
intraperotoneal y va intramuscular. La va intramuscular es la va ms utilizada y las
inoculaciones se efectan a nivel de los msculos dorsales delante de la aleta dorsal y
sobre la lnea lateral, adicionalmente puede inocularse en los msculos dorsales, por
delante del pendlo caudal.

4.2 Procedimientos
a. Se sujetan los reproductores con el mayor cuidado posible y una vez elegida la
zona de inoculacin, se procede a levantar una escama levemente, para pasar la
aguja por debajo de ella.

b. Se introduce la aguja inoculando el lquido de la jeringa.


c. Se procede a dar masajes con los dedos, en la zonas de inoculacin por unos
segundos, para evitar que el lquido inyectado regrese y se pierda.
d. Al comprobar que no regresa el lquido inyectando, se devuelven los reproductores
al estanque de tratamiento hormonal.

4.3 Recomendacin
Al iniciar la inoculacin de un pez debe registrarse la temperatura del estanque de
tratamiento hormonal y continuar el registro hasta la ovulacin. Esto ser muy importante
para determinar el tiempo de ovulacin de cada especie, el cual es altamente dependiente
de la temperatura.

5. OVULACION
La administracin de extractos hormonales gonadotrficos tiene por objeto desencadenar
la ovulacin en los peces.
La ovulacin es un proceso complicado, que requiere varias horas y cuya duracin exacta
depende de la temperatura. Es posible dividir la ovulacin en dos fases: preovulacin
propiamente dicha. Durante la fase de preovulacin se completa el ncleo y el huevo
absorbe gran cantidad de fido (hidratacin), alcanzando un tamao casi igual al que
tendr en el momento de la ovulacin. En el medio natural, este proceso se cumple
durante la migracin de reproduccin y en condiciones controladas, luego de la
administracin de los extractos de glndula hipfica, en las operaciones de reporduccin
inducida. Sin embargo, si la hipofisacin no da resultado, los huevos interrumpen su
desarrollo en la fase y el pez puede morir por necrosis necrosis de los huevos, que
pueden provocar un envenamiento interno. Woynarovich (1981).

6. ESTRUJAMIENTO
El estrujamiento es la operacin consistente en la obtencin de los productos sexuales
mediante suaves masajes del vientre, tanto de la hembra como del macho, durante los
trabajos de reproduccin inducida.
Una vez extrado el pez (hembra o macho) se procede a secarlo cuidadosamente con una
toalla absorbente, manteniendo ligeramente inclinado al pez, con la cabeza hacia abajo, a
fin de posibilitar la eliminacin de agua de la cavidad bucal y regin bronquial.
Una vez seco el pez, se sujeta firmemente y se procede a masajear suavemente la regin
ventral aplicando presin y avanzando desde la regin pectoral hacia la regin ventral. En
esta operacin, debe evitarse deslizar la mano, de otro modo se desprender las
escamas de la regin comprometida, perjudicando el estado general del pez. Esta
precaucin debe ser extremada tratndose de peces menores como el boquichico.
Prochilodus nigricans y los sbalos, Brycon sp.
Los vulos deben obtenerse nicamente con lquido ovrico y la prevencin de evitar el
contacto con el agua se debe a que esta acelera el tiempo de cierre del micrpilo,

disminuyendo las posibilidades de fecundacin. Por lo tanto, los vulos deben recibirse en
un recipiente seco y limpio.
Finalizando el estrujamiento de la hembra, se sigue el mismo procedimiento con el
macho, efectundose presin del vientre del pez a la altura de los testculos. Durante esta
operacin, debe evitarse la obtencin de esperma con sangre ya que la misma limitar la
viabilidad de los espermatozoides para la fecundacin.

7. FECUNDACION
La fecundacin debe efectuarse en seco, mezclando los productos sexuales suavemente
con una pluma de ave.
El tiempo de viabilidad de los espermatozoides es muy breve y tratndose de gamitana,
Colossoma macropomum, los espermatozoides son viables durante 12 minutos; sin
embargo, este tiempo puede prolongarse durante unos minutos mediante la adicin de
carbamida (rea). Woynarovich (1981).
Para la fecundacin es preciso tener en cuenta que el tiempo de ovulacin tambin es
relativamente corto. En Prochilodus sp Woynarovich (1981), report sobremaduracin al
cabo de 2030 minutos desde la ovulacin, en el 50% de los vulos.
Finalizada la fecundacin se procede a lavar los huevos, eliminando los restos de sangre,
esperma coagulado y escamas, luego se llevan los huevos a las incubadoras.
Tan pronto como los huevos toman contacto con el proceso de hidratacin final se acelera
y los huevos de dilatan hasta alcanzar, aproximadamente el doble de su dimetro, al
momento de la ovulacin.

8. INCUBACION
La incubacin debe efectuarse a flujo lento de manera que se posibilite un ligero
movimiento de los huevos en la base de la incubadora. Debe evitarse que los huevos
ocupen toda la columna de agua de la incubadora, seal que indicar un flujo excesivo
que puede ser cause de la muerte de los huevos.
El perodo de incubacin vara en funcin de la temperatura media del agua, entre 16 y 20
horas.
Son diversos los modelos de incubadora utilizados en la incubacin de huevos de peces
reoflicos, pero todos se basan en dos principios bsicos: eliminacin de los catablicos
NH3 y CO2 y provisin de oxgeno necesario a travs del proceso de embriognesis.
A travs del proceso de incubacin se registra la muerte de algunos huevos que se van
degradando, esto aumenta la demanda de oxgeno disuelto en la incubadora, por lo cual
no debe deternerse el flujo de agua.

9. CUANTIFICACION DE OVULOS

Para fines de produccin es necesario reportar informacin cuantitativa. En relacin al


nmero de vulos se procede de la siguiente manera (Alcntara y Guerra, 1986):
a. Al momento del estrujamiento de la hembra se toma una pequea muestra de
vulos (aproximadamente de un gramo).
b. Se pesa el total de ulos en una placa de Petri de peso conocido.
c. Se pesa el total de vulos obtenidos (en seco).
d. Se agrega un poco de agua a la muestra para propiciar la hidratacin final de los
vulos que aumentar de tama
e. Luego de diez minutos, se efecta el conteo de los vulos de la muestra.
f.

Se efecta el clculo del nmero de huevos aplicando una regla de tres simple.

10. CUANTIFICACION DE LARVAS


El nmero de larvas puede estimarse de acuerdo al mtodo de Rothbard (1982):

Donde k = Nmero de muestras (k 1)


n1 = Nmero de larvas en la muestra
V = Volmen del recipiente de larvas
N = Nmero total de larvas

11. ALIMENTACION DE LARVAS


Luego de la eclosin, las larvas estan provistas de un saco vitelino constituido por material
nutritivo que la larva utiliza para sus procesos metablicos durante los primeros das, en
los cuales no ingiere alimento. La alimentacin se inicia entre los 34 primeros das, antes
que se agoten las sustancias de reserva del saco vitelino y cuando esto se produce, las
larvas pasan por un perodo crtico, dependiendo totalmente de la disponibilidad de
alimento en su medio para satisfacer sus necesidades energticas.
El alimento natural de las larvas lo constituyen el plancton, sin embargo, las larvas
aceptan tambin alimento artifical diverso.

11.1 Alimento natural


El alimento natural de origen planctnico de mayor importancia para las larvas es el
zooplancton. En tal razn, la cra con alimento natural en condiciones controladas de
laboratorio, implica la produccin paraleta de fito y zooplancton; en este sentido, se han
utilizado por ejemplo, Chlorella sp, y Brachionus sp, alga y rotfero, respectivamente.

En los programas de produccin de semilla, sim embargo, se practica el tratamiento


previo de los estanques de larvicultura, a fin de propiciar una rpida y abundante
produccin planctnica.
En la preparacin de los estanques para larvicultura puede seguirse el siguiente
procedimiento:
a. El primer da se realiza el vaciado del estanque.
b. Se aplica insecticida al fondo y paredes del estanque. Puede usarse NEGUVON
(TRICLOROFORMO) a razn de 60g/120m2.
c. El segundo da se realiza el encalado y abonado del estanque. El encalado se
realiza a razn de 9001.050kg/da. Pagn et al. (1983). El abonado puede
realizarse con gallinaza a razn de 160kg/ha. Una vez aplicada la cal y el abono,
se pasa un rastrillo en el fondo del estanque par favorecer la mezcia adecuada de
estos productos. Con este procedimiento se produce un Pique de rotferos entre
el sptimo y octavo das despues del inicio del llenado y luego cominezan a
oscilar.
d. El tercer da se aplica abono verde, constituido por hierbas diversas que pueden
cortarse en el permetro de los estanques. La proporcin es de 100 a 130kg por
10.000 alevinos sembrados. Despus de 34 das de colocada el abono verde se
le da vuelta y entre 710 das despus se sacan las hierbas que no se han
podrido. En estos casos debe tenerse cuidado con la disponibilidad de oxgeno
disuelto.
e. El cuarto da se produce a la siembra de las larvas a razn de 2.000 larvas/m2.

11.2. Alimento artificial


Appelbaum (1976 en Rothbard, 1982) encotr que el comportamiento de la larva no
depende de estmulos pticos y otros estmulos y que las larvas empiezan a alimentarse
con alimento artificial o natural si estos estan disponibles.
Segn Pagn et al. (1983) en la cra de alevines de carpas chinas se emplea como
alimento suplementario el salvado de arroz a razn de 1kg/10.000 alevines cada 5 das.
Otro alimento suplemetado de gran disponibilidad lo constituyen los huevos de gallina. En
acuicultura los huevos de gallina son un excelente alimento para las larvas de peces, en
forma de yema de huevos cocidos o en suspensin en agua. La yema de huevo puede
ser utilizada luego de concinarla, debido a su especial textura granular.
11.2.1 Preparacin de alimento micro-encapsulado para dietas de peces (segn
Chow, 1980 en Rothbard, 1982).
Mtodo A
a. Romper un huevo en un recipiente resistente al calor.
b. Batir el huevo hasta la homogenizacin (in licuador).
c. Agregar agua hirviendo (150cc por cada huevo) mientras se agita constantemente.

d. Dejar enfriar, 50g de huevos contienen cerca de 12g de materia seca.


e. Administrar por cucharadas directamente a las larvas.
f.

Guardar lo sobrante en refrigeracin.

Mtodo B
a. Proceda como en A.
b. Proceda como en A.
c. Agregar el homogenizador directamente al agua hirviendo. La agitacin depende
del tamao de pticula deseada. Inicialmente se forma tiras de huevo cocido. La
yema se mantiene encapsulada por la albmina (desnaturalizada).
d. Proceda como en A.
e. a suspensin alimentica est lista para las larvas.
f.

Proceda como en A.

12. CONTROL DE PREDADORES


Los invertebrados predadores en fase larval o adulta pueden desarrollarse juntamente con
los organismos planctnicos, o infriltarse desde estanques contquos.
Los predadores ms voraces de las larvas y pequeos alevines son insectos. Entre los
ms perjudiciales estan las ninfas de Odonata. Sympetra sp,; adultos de Hemiptera
(Belostoma sp., Repa sp., Notonecta sp.) y ninfas de Coleoptera.
Para erradicar estos predadores se aplica petrleo a los estanques durante la maana,
cuando no hay viento, en dosis 2030 litros por hectrea. El tratamiento puede iniciarse
23 horas antes de sembrar las larvas y se repite 23 veces cada dos das. El aceite
dorma una pelcula muy fina sobre la superficie del agua y mata los insectos por asfixia en
muy corto tiempo. Las larvas crecen rpidamente en el estanque y despus de una
semana (34 tratamientos), son lo suficientemente grandes para eludir los predadores.
Rothbard (1982).

13. PRECAUCIONES PARA EL MANIPULEO DE LOS REPRODUCTORES


Desde el momento de la seleccin de los peces en el estanque de preparacin de
reproductores y a travs de todo el proceso de tratamiento hormonal, debe tenerse
especial cuidado para el manejo de los reproductores, evitndoles esfuerzos extremos,
golpes, incidencia directa de los rayos solares en los ojos, etc., lo que puede ser causa de
aparacin de cuadros de stress en los peces y posterior regresin gonadal.
Asimismo, cabe senlar que en todo momento deben tenerse presente las normas de
asepsia, en especial con los materiales y equipos a emplearse en el proceso de
preparacin del extracto e inoculacin.
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ANEXO
1. SOLUCION DE GILSON (Simpson, 1951)
100 ml alcohol 60%
880 ml agua destilada
15 ml cido ntrico 80%
20 g bicloruro de mercurio
18 ml cido actico glacial
2. SOLUCION SERRA
60% alcohol
30% formol
10% cido actico glacial
3. SOLUCION DE FERTILIZACION CARBAMIDA - SAL
(Woynarovich, 1981)
30 g de carbamida (rea)
40 g de sal comn (NaCl)
10 litros de agua
Nota: La solucin se aade en 1020% del volumen de huevos.

Manual de reproduccin de peces


Colossoma sp, pacu y tambaqui (cont.)
SOBRE INDUCCION FINAL DE MADURACION, OVULACION Y
ESPERMIACION EN PECES CULTIVADOS
(J.E. Vinatea) 3

I. INTRODUCCION
En las ltimas decadas se ha experimentado una gran dependencia del hombre en
relacin a los peces cultivados como una valiosa fuente alimenticia. En tal virtud, tambin
se han incrementado los esfuerzos de los cientficos y especialistas, para dominar las
tcnicas de reproduccin y rpida propagacin de alevines y jaramugos en estanques y
en muchos cuerpos de aguas libres y/o controladas, como represas, embalses, atajados,
jagueyes, etc., as como lagos, lagunas y ros.
Naturalmente, se debe reconocer que el avance de la acuicultura en relacin a la crianza
de animales domsticos, bovinos, ovinos, conejos, aves y otros, es pequeo y reciente, es
decir, hablando estrictamente de su desarrollo tcnico - cientfico. No obstante, formas de
acuicultura ms o menos efectivas, ya eran practicadas por las civilizaciones chinas y
egipcias desde hace ms de dos mil aos A.C., claro est, como una actividad ornamental
fundamentalmente y una fuente subsidiaria de alimentos, en donde primaba el arte y la
belleza como criterio bsico.
3

Experto Principal de Capacitacin. Proyecto FAO/GCP/RLA/075/ITA, Brasilia, Brasil.

Para la descripcin de este captulo, nos basamos en el trabajo de Donaldson, E.M. y


G.A. Hunter (1983) quienes afirman que el primer estudio de control hormonal de la
reproduccin de peces se realiz en Argentina por Houssay, B.A. (1930), al tratar de
incluir la ovulacin en el bagre Cnesterodon decemaculatus, mediante inoculacin
intraperitoneal de glndulas pituitaria de Prochilodus platensis. Estas tcnicas fueron
rpidamente puestas en prctica en Brasil por Von Ihering y Azevedo, 1934: Von Ihering
1935, 1937) para inducir el desove de Prochilodus argenteus. Los resultados de los
brasileos fueron seguidos con xito en la Unin Sovitica por Gerbilsku, 1938, para
inducir el desove del esturin y con el desove inducido de especies de peces
norteamericanos (Hasler et al., 1939, 1940). Donaldson, E.M. y G.A. Hunter, 1983, hacen
referencia que todos aquellos estudios y los susiguientes fueron detenidamente revisados

por G.E. Pickford y J.W. Atz, 1957 en su bien documentado tratado sobre la glndula
pituitaria de los peces. A partir de entonces, millares de publicaciones han aparecido para
informar los avances del proceso reproductivo de teosteos. G.E. Pickford, 1964); E.M.
Donaldson (1977) y C.G. Swann y E.M. Donaldson (1980) y muchos otros autores ms
comunican sobre el control del proceso reproductivo, entre los que cabe resaltar estan:
Pickford y ATz (1957), Atz y Pickford (1959), Clement y Sneed (1962), Donaldson (1973,
1975), Shehadeh (1975), Fontaine (1976), Harvey y Hoar (1979), Chondar (1980),
Woynarovich y Horvath (1980), Pullin y Kuo (1981), Davy y Chovinard (1981), Sundararaj
(1981), Lam (1982), Billard (1983) y Fostier y Jalabert (1982).

2. INDUCCION DE LA MADURACION EN PISCICULTURA


Es de todo conocido que existen en la naturaleza peces que se reproducen
espontneamente, tanto en aguas libres como en estanques, y otros que se caracterizan
por su aparente inhibicin de hacerlo en aguas confinadas, ya sea porque no encuentran
el medio ni las condiciones favorables para el desove, o simple y llanamente, porque el
cautiverio los estrese fisiolgicamente, impidiendo como consecuencia la produccin y
liberacin normal de hormonas sexuales estimulantes.
Donaldson y Hunter (1983), sealan claramente que hay dos razones fundamentales para
que ciertas especies de peces de mucha importancia alimenticia y econmica, alser
mantenidos en cautiverio, no quieran reproducirse, como son:
i.

Especies cultivadas fuera de su rango natural en donde las condiciones naturales


no son favorables para completar su maduracin sexual normal, ejemplo, la carpa
forrajera, Ctenopharyngodon idella, el cual es nativo de China y el que viene
siendo culticado en Eurpoa, Amrica y el Sudeste Asitico.

ii.

Las condiciones ambientales en los estanques son dismiles de aquellas


prevalecientes en el medio natural la poca del desove. Los factores ambientales
que actan en contra del desove normal podran inducir sobre respuestas
fisiolgicas especficas, o tambin fallar en la culminacin del ciclo reproductivo
normal, por ejemplo, salinidad inapropiada, temperatura, fotoperodo, presin
hidrosttica y ausencia de un subtrato favorable para el desove. Alternativamente,
el ambiente de cultivo podra inducir a una respuesta de estress generalizada en el
pez que inhibe e incapacita el proceso reproductivo, como sucede con los
siguientes factores: densidad, calidad del agua, tasa del flujo, temperaturas
extremas, fotoperodo y salinidad.

En algunas circunstancias, es posible alterar el ambiente de los estanques de los


reproductores para permitir completar el desarrollo sexual y el desove normal. En otras
situaciones resulta rutinaro la prctica para inducir la madurain final, ovulacin y
espermiacin mediante el tratamiento de hormonas.
Por otra parte, se conoce que la induccin hormonal es mayormente aplicada en aquellas
especies refilas y de aguas calmas, que al ser confinadas, presisan de elementos
estimulantes para desovar y producir la cantidad suficiente de semillas de peces que se
requieren para la prctica normal de acuicultura. Sin embargo, por razones de orden
logstico, de disponibilidad de alevines para atender la produccin seriada de peces en las
granjas en cantidad y calidad de acuerdo a la demanda de consumidor, tambin se aplica

la induccin de reproduccin aun en las especies que desovan fcilmente en cautiverio,


como sucede con la carpa comn, Cyprinius carpio, y los salmonidos, Salmo irideus, S.
gairdniri, Oncorhynchus sp, etc. La reproduccin de tales especies cultivadas
comunmente, estan restringidas a un perodo y estacin determinados cuando las
condiciones ambientales son ptimas. El tratamiento con hormonas puede ser utilizado
para:

obtener gametos variables fuera de la estacin normal de desove, y de ese modo,


permitir la hibridacin interespecfica de stocks genticamente distintos que se
presentan por tanto, pocas de maduracin diferentes;
permitir la hibridacin interespecfica de especies relacionadas pero que presentan
diferentes estaciones de desove;

obtencin de gametos en una poca ms temprana, y de esa suerte, se alargar el


perodo de disponibilidad para criar a los alevines durante un tiempo ms
prolongado y con anterioridad a las actividades del estabulamiento, transplante o
liberacin. (Donaldson et al., 1981 a.b; Hunter et al., 1981);

mejorar la eficiencia de la produccin gracias a la sincronizacin de grupos de


reproductores para ovular y espermiar en pocas predeterminadas (Donaldson et
al., 1981 a.b; Hunter et al., 1981);

facilitar la coleccin de gametos de reproductores silvestres en localidades


remotas, en donde las facilidades para mantener a los adultos son mnimas;

minimizar las prdidas de gametos atribuidas a la mortalidad antes del desove


debido a la aceleracin de la maduracin en los reproductores cautivos, los que
son mantenidos en las instalaciones del vivero a veces, bajo condiciones
ambientales que son ptimas (Hunter et al., 1978, 1979, Sower et al., 1982);

maximizar la sobrevivencia de a pregenie mediante la mayor produccin de


gametos, fertilizacin e incubacin bajo condiciones relativas de asepsia en lugar
de practicar el cultivo en estanques semi naturales;

estimular el comportamiento de desove en un pequeo nmero de individuos, los


que son estabulados con una gran cantidad de peces sin tratamiento, para inducir
el desove y producir ovas con un tiempo conocido de ovulacin para estudios
experimentales como la ginognesis o triploda (Donaldson y Hunter, 1982; Refstie
et al., 1982).

3. MADURACION Y OVULACION INDUCIDA


La reproduccin en las hembras de teleosteos est controlada por el eje hipotlamopituitaria-ovario (Donaldson, 1973). Este mecanismo secuencial permite la intervencin en
varios niveles para promover o interferir en el proceso de maduracin. Hasta mediados de
la dcada del 70, Los procedimientos de la ovulacin inducida en los peces estaban
limitados a lo que se conoci como la tcnica de la primera generacin. Esta, estaba
constituida por la hipofisacin (Von Ihering, 1937), al utilizar inyecciones de extractos de
pituitaria homoplstica y heteroplstica que contenan gonadotropinas. En los primeros

aos de la dcada del 70, esta tcnica fue refinada por Donaldson et al., 1972;
Donaldson, 1973 en producciones a escala experimental, piloto y finalmente de aplicacin
de gonadotropinas pisciarias parcialmente purificadas expresamente con el propsito de
inducir la maduracin y ovulacin final de teleosteos. Durante la misma poca, se
obtuvieron desoves exitosos con substancias inductoras de origen animal, tales como la
gonadotropina corinica humana (HGC), ya sea sola o mezclada con extractos pituitarios
de peces.
El tamao y la complejidad de la molcula gonadotrpica lo hace difcil para ser obtenido
sintticamente en escala industrial dentro de un futuro cercano, a menos, que ella sea
producida con la ayuda de la ingeniera gentica en micro-organismos, como han sido
recientemente producidas la hormona del crecimiento humano y la insulina.
Justamente la bsqueda de alternativas de la gonadotropina sinttica en los aos 70, ha
conducido al desarrollo de tcnicas de la segunda generacin para la induccin final de
maduracin, ovulacin y espermiacin en los peces. Estas tcnicas operan o en niveles
ms elevados del eje mediante el estmulo de la produccin y/o liberacin de
gonadotropina en la glndula pituitaria (por ejemplo, anti-estrgeno y hormonas
liberadoras de gonadotropina) o tambin ellos operan en niveles ms bajos del eje, al
suplir hormonas a los ovarios (ej., 172, 2013-dihidroporgesterona y prostaglandinas), las
que podra normalmente ser estimuladas por gonadotropinas endgenas o exgenas.
Estos inductores de la ovulacin de la segunda generacin son todos molculas
pequeas relativas a la gonadotropina, y por eso mismo, pueden ser producidas
sintticamente. Tambin se espera que ellas sean relativamente libres de la especificidad
de la especie. (Ver Fig 1, los posibles niveles de intervencin en el eje hipotalmicopituitario-ovrico) de Hoar, Randall y Donaldson, volumen IX, FISH PHYSIOLOGY, 1983.
Fig.1
Niveles de intervencin extrerna en el eje hipotlamopituitaria-ovario, que pueden ser
utilizados para inducir la maduracin y ovulacin en teleosteos.
HIPOTALAMO
Hormona liberadora de
gonadotropina (Gn RH)

Intervencin exgena
Antiestrgena Dopamina
Antagonstica

GLANDULA PITUITARIA
Gonadotropina (GtH)

GnRH y GnRH (anlogos)

OVARIO

Extractos pituitarios
Preparaciones GtH

OOCISTO
Maduracin final
Ovulacin

Progestenos
Corticoesteroides
Prostagladines
Catecolaminas

OVA Ovulos

4. USO ESPECIFICO DE LOS COMPUESTOS

4.1 Antiestrgenos
La secrecin de gonadotropina en teleosteos como en vertebrados superiores, es
regulado por la retroalimentacin de esteroides gonadales. En la hembra de bagre
Heteropneustes fossilis, inyecciones de estradiol y/o testosterona inhiban la vitelognesis
y causaban atesia de los oocitos maduros (Sundarraj y Goswani, 1968), y el estradiol, el
crecimiento compensatorio ovrico despus de una ovariosectoma unilateral (Goswani y
Sundararaj, 1968). El el salmn Oncorynchus nerka, la gonadoctoma bilateral causaba la
activacin de gonadotropos (Mc Brile y Van Overbeeke, 1969), el que se hizo reversible
por tratamiento con estradiol cepionato (Van Overbeek and Mc Bride, 1971). La presencia
de este control retroalimenticio negativo de secrecin de gonadotropinas por el estrgeno,
condujo a pruebas de desove con antiestrgenos. Los antiestrgenos son compuestos
sintticos que son capaces de competir con el estrgeno al alcanzar lugares con los
receptores de estrgeno. Dos de estos compuestos nonesteriodales de las series de
trifeniletileno, que han sido usados en vertebrados superiores e inferiores son el citrato
clourifeno y tamoxifeno. La induccin con xito de la ovulacin en la mujer con clourifeno
fue informado por Greenblatt et al. (1961) y con tamoxifeno por Klopper y Hall (1971). La
accin de estos anestrgenos no ha sido debidamente aclarada en los vertebrados
superiores.
Los primeros estudios de la ovulacin inducida con un antiestrgeno en teleosteos, fueron
conducidos en el golfish (Carassius auratus). Las hembras grvidas mantenidas a 13C y
16 horas de fotoperodo fueron diariamente inyectadas intraperitonealmente con 1 mg/kg10mg/kg de clourifeno en 0.6% de salinidad. En ambos grupos, 90% de los peces
ovularon entre 1 a 4 das despus del tratamiento, sin embargo, ninguna del grupo de
control ovul (Pandey y Hoar, 1972). Los goldfishes hipofisectomizados, 4a 7 horas antes
de la inyeccin dejaron de ovular luego del tratamiento con clourfeno.
La inyeccin en la locha Misgurnus anguillicaudatus con clourfeno, 1 a 10mg/kg
diariamente a 1722C ovul entre 2 a 4 das en dosaje bajo, y en 2 a 3 das con dosage
alto.
Donaldson et al (1978b, 1981b) examinaron la factibilidad de inducir la ovulacin final en
el salmn del Pacfico con el antiestrgeno tamoxifeno. El salmo cho (Oncorynchus
kisutch) recibi una primera inyeccin de 0.1 mg/kg de gonadotropina parcialmente
purificada de salmn (SG-G 100), seguida en el tercer da por inyecciones
intraperitoneales de 1 a 10mg/kg de tamoxifeno en aceite de man. Los vulos de ambos
grupos tratados sufrieron la ruptura de la vescula germinativa (GVBD) y 85% de
ovulacin, comparadas al 84.6% (GVBD) y 77% de ovulacin en el grupo de control.

4.2 Hormonas liberadoras de gonadotropina


Hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH). El descubrimiento de que la
produccin y liberacin de gonadotropina de la pituitaria es regulado en los mamferos por
un pptido que se origina en el hipotlamo, cre una nueva va de investigacin par el
control de reproduccin en los teleosteos. El decapptido de la LHRH fue aislado y
caracterizado primariamente de hipotlamo de los cerdos y ovinos en 1971 (Schally, 1978;
Guillemen, 1978). La secuencia del mismo cido de la gonadotropina de mamferos
(LHRH).

plro Glu-Hls-Trp-Ser-Tyr-Glu-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Muy pronto se hizo evidente que este pptido carece de especificidad para las especies
(Schally y Kastin, 1972).

4.3 Dopaminas Antagnicas


Basndose en los experimentos llevados a cabo con el factor de liberacin-inhibicin de
gonadotropina (GRIF) en el goldfish Peter et al. (1978) Peter y Paulenco (1980) Peter
(1982), surgieron otro mecanismo para inducir la ovulacin en aquellos teleosteos en
donde GRIF est presente. La catecolamina, dopamina y sus antagnicos como la
apomorfina, reducen el incremento de concentracin en el plasma de las gondotropinas
asociadas con las lesiones prepticas, lo que sugiere que GRIF en el goldfish podra ser
dopamina (Chang and Peter, 1982, 1983a; Chang et al., 1983), aun ms, inyeccin de
pimozide, un anatagnico de dopamina en un goldfish intacto, caus un aumento en la
concentracin de plasma de gonadotropina (Chang y Peter, 1982, 1983a).

4.4 Gonadotropinas
Ellas son glicoprotenas hormonales de origen pituitario o placentario, que estimulan su
desarrollo y funcin.
Las gonadotropinas utilizadas para inducir la ovulacin en los peces pueden ser de dos
orgenes: de mamferos y/o de peces. Las primeras pueden ser de naturaleza pituitaria
como la hormona luteinizante (LH), y hormona estimulante del folculo (FSH)o de origen
placentario, tal como la gonadotropina corinica humana (HCG) y la gonadotropina del
suero de yegua (PMSG). Las preparaciones de gonadotropina de peces pueden
subdividirse segn el grado de purificacin variando desde los extractos acuosos de
glndulas pituitarias completas usadas en los procedimientos tradicionales de hipofisacin
mediante el polvo de pituitaria en etanol, hasta las gonadotropinas parcialmente
purificadas preparadas por filtracin del gel, con o sin intercambio de in cromatogrfico, o
por afinidad de cromatografa de concanavalina A-sefarosa.
La gonadotropina de teleosteos tiene un peso molecular de 30.000(Burzawa-Gerard,
1971, 1974; Donaldson et al., 1972b; Idler et al. 1975a), y consiste de dos unidades
(Donaldson, 1973; Burzawa-Gerard et al. 1976; Pierce et al., 1976; Lo et al., 1981) al igual
que las gonadotropinas de otros vertebrados (Licht et al, 1977). Adems de esta
gonadotropina que normalmente contiene carbohidratos, puede existir una segunda
hormona pituitaria en los peces de bajo contenido en carbohidratos presentan dos
funciones gonadotrpicas, tal como la habilidad de acelerar la captacin de vitelo en el
oocito durante la vitelognesis (Idler et al, 1975a; Idler y Ng, 1979; Ng y Idler, 1978b,
1979).

4.5 Extractos pituitarios de peces


Como se indicara anteriormente, en los primeros tiempos eran empleados extractos de
glndulas pituitarias homoplsticas y/o heteroplsticas. Las ventajas de esa tcnica eran:
i.

su simplicidad, requeriendo muy poco material y capital;

ii.

no requiere de un almacenamiento refrigerado;

iii.

el doseje puede ser facilmente calculado basndose entre las relaciones del peso
corporal del recipiente y donador; y

iv.

otras hormonas presentes en el extracto pueden tener un efecto sinergtico.

Las desventajas:
i.
ii.

la falta de potencia de estandarizacin;


el pez donante que generalmente es de igual o menor valor que el recipiente, debe
ser muerto en el lugar de desove para extraerle la glndula pituitaria;

iii.

el pez podr desarrollar una reaccin de inmunidad a la gonadotropina y otras


protenas del extracto en un determinado perodo de tiempo, especialmente en el
caso de pituitarias heteroplsticas;

iv.

las hormonas no gonadotrpicas existentes en el extracto crudo, podran causar


efectos delectreos y negar o modificar el efeto de la gonadotropina; y

v.

es concebible, que la inyeccin de un extracto fresco de pituitaria podra transmitir


alguna anfermedad del donante al recipiente. En las carpas comunes, las cabezas
conservadas por 24 horas a 4C, antes de extirparles las pituitarias, no desarrollan
la potencia gonadotrpica, lo mismo, pituitarias obtenidas de peces maduros
pequeos presentaron el mismo contenido gonadotropina como los peces ms
grandes. (Yaron et al., 1982).

La actividad de hipofisacin fue debidamente revisada por Harvey and Hoar (1979);
Sundararaj (1981); Rothbard (1981); Lam (1982), El proceso normal incluye 2 inyecciones
intramusculares de extractos acuosos de pituitarias. La secuencia de esta actividad
consta de los siguientes pasos:
1. seleccin de las especies donantes y grado de madurez;
2. evaluacin de madurez del recipiente;
3. tcnica de homogenizacin y temperatura;
4. separacin del extracto de los residuos por centrifugacin, filtracin o
sedimentacin;
5. adicin de otros componentes, ejemplo, glicerina para incrementar la viscosidad y
de ese modo prevenir prdida despus de la inyeccin, o prolongar la captacin;
6. localizacin de la inyeccin;
7. volumen de inyeccin;
8. temperatura del agua en el momento de la inyeccin;

9. divisin de la dosis, entre la primera (preparatoria) y la segunda (desencadenante);


10. hora del da cuando la primera inyeccin ser suministrada;
11. intervalo entre la primera y segunda inyeccin;
12. determinacin de la prontitud de la hora del desove;
13. uso de un anastsico; y
14. decisin entre el desove natural y/o la extrusin.
La existencia de este gran nmero de variables, ha significado que en la prctica ningn
estudio con una sla especie, o con varias especies hayan investigado todoas las
variables relevantes.
Las variables de mayor importancia son:
i.
ii.

especies donantes;
madurez de los desovantes;

iii.

dosage;

iv.

divisn del dosage;

v.

determinacin del tiempo; y

vi.

temperatura.

El prximo paso del procedimiento bsico de hipofisacin con extracto fresco de pituitaria,
involucra el uso de glndulas pituitarias y extractos preservados. Las glndulas completas
pueden ser deshidratadas y desgrasadas con polvillo de acetona fra, y luego
almacenadas as completas o pulverizadas, o tambin las mismas, podran ser liofilizadas
o conservadas a -24, o por debajo, durante varios aos sin prdida significativa de su
potencia (Donaldson et al, 1978a).
Alternativamente, puede prepararse un extracto acuoso de las glndulas pituitarias o del
polvo en acetona y luego conservarlo en forma liofilizada, o tambin, en presencia de una
substancia preservante como el glicerol. En este ltimo caso, el material puede ser
conservado en ampolletas de vidrio. La ventaja del polvo en acetona o de los extractos
preservados, es de que ellos pueden ser preparados en forma homognea a partir de una
buena cantidad de glndulas pituitarias, y posteriormente estandarizadas por bio ensayos
de una pequea alicuota. Otras ventajas son, que las glndulas de los peces donantes
pueden ser colectadas y procesadas en varias veces y en localidades, eliminando as la
necesidad de tener que ser donante de la propia localidad donde se va a realizar la
hipofisacin. Las pituitarias disecadas en acetona fueron originalmente empleadas por
von Ihering y Azevedo (1936) para desovar Astyanax taenistus y A. bimaculatus, habiendo
continuado el procedimiento extensivamente (Pickford y Atz, 1957). La pituitaria de carpa
discecada en acetona ha sido utilizada con xito despus de 10 aos de conservacin

(A.D. Hasler, R.K. Meyer and W.K. Meyer, and W.J. Wisby, 1950 en Pickford y Atz 1957).
Las glndulas de pituitarias frescas pueden colocarse directamente en acetona enfriada
en hielo seco (Burrows et al., 1952; Palmer et al., 1954); empero, podra ser ms
conveniente congelar las glndulas pituitarias frescas en una capa de hielo seco en un
depsito de isopor y luego, porceder al secado o al proceso de extraccin en el
laboratorio. El uso del hielo seco la necesidad de utilizar un equipo elctrico de
regrigeracin en el campo. En general, se recomienda que la acetona sea cambiada dos o
tres veces para asegurar la deshidratacin y desgrasado completo.
Una alternativa al secado en acetona es hacerlo en alcohol absoluto (de Azevedo y
Oliveira, 1939; Fontenele, 1955; Pickford y Atz, 1957; Ibrahim y Chandhuri, 1966;
Chondar, 1980; Rothbard, 1981). El peso de la pituitaria seca y desgrasada es 13
17%del peso hmedo (Pickford y Atz, 1957) y el peso de las glndulas pituitarias del
salmn del Pacfico despus de la liofilizacin es 17% del peso hmedo (E.M. Donaldson,
no publicado).
Los extractos acuosos de pituitarias frescas y/o secas pueden ser conservadas con la
adicin de glicerina 2:1 (Ribeiro and Neto, 1944, Ibrahim and Chandhuri, 1966; Ibrahim,
1969 2,b) o por liofilizacin. En goldfishes, la inyeccin de soluciones que contengan ms
del 10% de glicerina causa inflamacin peritoneal (Clemens y Sneed, 1962).
Los extractos de glndulas pituitarias preservadas en etanol y acdo tricloroactico no han
dado resultado satisfactorios (Bhowmick y Chaudhuri, 1968).
En general, para inducir la ovulacin, se podra recomendar como solucin prctica, el
empleo de extractos de glndulas pituitarias frescas y/o preservadas de peces maduros.

4.6 Preparaciones purificadas de gonadotropinas de peces


Se han producido preparaciones puras y/o parcialmente purificadas de gonadotropinas de
peces desde el inicio de la dcada del 70, y las mismas tienen una mayor especialidad en
su actividad comparadas con las soluciones de hipfisis completas. Todos los procesos de
purificacin implican alguna prdida de su activad gonadotrpica y como consecuencia,
elproducto dinal tiene mayor actividad fonadotrpica por unidad de peso, pero contiene
menor actividad total que el material inicial.
Sin embargo, el material purificado resulta de ms utilidades en estudios de investigacin
que en la aplicacin directa para la piscicultura. Naturalmente, desde el punto de vista de
la investigacin, se pueden anotar las ventajas siguientes:
1. son ms o menos libres de otras hormonas pituitarias;
2. pueden ser estandarizadas por bioensayos in vivo e in vitro, ensayo radioreceptor
y/o radioinmuno ensayo;
3. puede ser almacenado durante muchos aos;y
4. son facilmente solubles en agua y suero sin dejar residuos.
Estas gonadotropinas purificadas total o parcialmente a partir de glndulas pituitarias de
teleosteos, ha sido preparadas con el empleo combinado de procedimientos de extractos

y cromatogrficos, Entre ellos se incluyen a los provenientes de carpa comn Cyprinus


carpio (Burzawa Gerard, 1971, 1974; Idler y Ng, 1979), salmn chinook, Oncorhynchus
tshawytscha (Donaldson et al., 1972b; Donaldson, 1973; Pierce et al., 1976), salmn
chum, Oncorhynchus keta (Idler et al. 1975 a, b; Yoneda y Yamazaki, 1976; Idler and
Hwang, 1978; trucha arco iris Salmo gairdneri (Breton et al., 1976), tilapias (Farmer y
Papkoff, 1977). En resumen se han extrado extractos puros o semipurificados de muchas
especies, carpin, anguila, lenguado, inclusive del pacu, Colossoma mitrei (Castagnolli y
Donaldson, 1981).
En referencia al dosage de gonadotropinas parcialmente purificado requerido para inducir
la ovulacin, son importantes dos factores, primero: la especificidad de la especie; los
salmnidos precisan de dosis menores de SE-G100 que algunos otros peces, por ejeplo,
lisas, Mugil cephalus (Kuo et al., 1974); segundo: el estadio de madurez del ovario en el
momento del tratamiento es muy importante. Cuanto ms maduro est el pez, menor ser
la dosis requerida, esta afirmacin ha sido claramente corroborada en las lisas, habiendo
sido correlacionada con el dimetro de los huevos (Kuo y Nash, 1975, revisado por NASH
Y Shehadeh, 1980). En el lucio, la gonadotrofina del salmn fue mucho ms efectiva
cuando era suministrada en el mismo da de captura. La tasa de ovulacin cay desde el
96% al 40% despus de tres das de la captura u fue atribudo a la degeneracin de los
oocitos asociados al stress sufrido durante la captura y confinamiento (De Montalembert
et al., 1978b).

4.7 Gonadotropinas de mamferos


Estas gonadotropinas son de origen pituitario y/o placentario. LH y FSH se derivan de la
primer, mientras que HCG y PMSG, provienen de la segunda fuente. Estas hormonas son
disponilbes individualmente bajo sus nombres genricos, as como bajo sus nombres
comerciales y tambin como resultado de la combinacin de gonadotropinas de origen
pituitario y placental. el producto comercial conocido como Synahorin, se situa dentro de
un preparado combinado. Estas hormonas de mamferos presentan ventajas sobre
aquellas derivadas de los peces, ellas son:
1. fcilmente disponibles;
2. pueden almacenarse por tiempo prolongado;
3. son uniformes y estandarizadas;
4. de costos competitivos;
5. eliminan la necesidad de sacrificar a los peces donadores; y
6. eliminan las tareas de coleccin, procesamiento y preservacin de los extractos
pituitarios (Shehadeh, 1975).
Sin embargo, desde 1975, se dispone de venta en el comercio, de extractos
estandarizados de pituitarias con ventajas similares a las indicadas anteriormente. Estas
pueden ser adquiridas en laboratorios de prestigio como los de Syndel y otros. En adicin
a estos productos comerciales que se encuentran en grado clnico, HCG puede ser
preparado tambin en la localidad a partir de orina de mujer grvida (Katzman y Doisy,
1932; Pullin y Kuo, 1980), ha sido empleado HCG para inducir la ovulacin en la carpa de

la India Labeo rohita (Bhowmick, 1979). El aspecto negativo de HCG es de que el uso
repetido de esa hormona puede hacer de inmunizacin. Los altos preparados de
gonadotropinas placentarias derivadas de PMSG, ha sido utilizadas solas en algunas
especies como Heteropneustes fossiles (Sundararaj y Goswami, 1966).
La LH ha demostrado ser un efectivo inductor de la ovulacin en los peces (Sundararaj y
Goswami, 1966, 1969; Arrand y Sundararaj, Kapoor, 1976, y no efrece ninguna ventaja de
precio en relacin al aspecto de costo y/o de efectividad.

4.8 Esteroides
La accin de las gonadotropinas a nivel del ovario se considera que se debe grandemente
a las hormonas esteriodes (Jalabert, 1976). Se han llevado a cabo numerosos estudios
para determinar la factibilidad de inducir la maduracin final y ovulacin con los
esteriodes, en lugar de hacerlos con gonadotropinas u otras substancias de naturaleza
hipotalmica. En general los esteroides, desde su sntesis hasta convertirloen un producto
puro, con una duracin de almacenaje de muchos aos, podrn ser producidos en escala
comercial.
4.8.1 Progestinas
Derivados de progesterona (Prog) 17-hydroxiprogesterona (17 Prog) y 17-hidroxi-20Bdihidroprogesterona (17-20B-Prog) fueron detectados en cantidades significativas en el
plasma del salmn Oncorhynchus nerka (Idler et al. (1960), Schmidt and Idler (1962).
Estas progestinas, en particular 17, 20B-Prog tambin mostraron ser efectivas inductoras
de la maduracin final (migracin de la vescula germinal y ruptura) en los oocistos de los
teleosteos (Jalabert, 1976). Fue inducido con xito en vivo la induccin en truchas
maduras que contenan oocitos con la vescula en el estadio subperiferal, utilizando
2mg/kg 17-20B-Prog, o Prog despus de 9 das, aproximadamente el 80% de los 17-20BProg, 55% del grupo Prog, y 30% del grupo de control habin ovulado. La progesterona
podra haber formado un substrato para 17, 20-Prog biosntesis (Jalabert et al., 1976).
Cuando las truchas arco iris fueron inyectadas dos veces con 3mg/kg 17, 20-Prog, 48
semanas antes del desove y antes de la migracin de la vescula germinal, 94%
alcanzaron la maduracin final, pero solamente el 24% ovularon. La ovulacin fue
nuevamente inducida en truchas que presentaban los oocitos con la vescula germinal en
posicin perifrica (Jalabert et al., 1980; Bry, 1981). Al monitor la gonadotropina del
plasma indic una cada en su concentracin 24 horas despus de la inyeccin, quizs,
como resultado de una retroalimentacin negativa, seguida de un incremento gradual, la
que continu despus, especialmente en peces que no fueron sometidos a la estrusin.
4.8.2 Corticoesteroides
Son en su mayora de origen renal, aunque tambin pueden ser sintetizados en el tejido
gonadal (Colombo et al., 1973). Las concentraciones de corticoesteroides y su tasa de
secresin tienden a incrementarse en muchos teleosteos durante el desarrollo
reproductivo y el desove (donaldson y Fegerlund, 1970; Fagerlun y Donaldson, 1970; Katz
y Eksein, 1974; Wingfield y Grimm, 1977; Cook et al., 1980). El primer empleo que tuvo
xito fue al inyectar corticoesteroides al Misgurnus fossilis locha, en la que aplic una
simple dosis de Img de DOCA/pez y se logr inducir la ovulacin (Kirshenblatt, 1952, en
Pickford y Atz, 1957, Kirshenblatt, 1959). Tambin se ha inducido la ovulacin con DOCA

en el bagre de la India que haba sido hipofisectomizado (Ramaswami, 1962; Sundararaj y


Goswami, 1966, 1972). En un estudio posterior, bagres intactos mantenidos a 25C
empezaron a ovular 6 horas despus de una sla inyeccin de 5mg DOCA por pez,
comparados a 8 horas desps de la inyeccin de LH, acetato de cortisol y acetato de
cortisona, fueron igualmente efectivos en bagres con 25 mg/pez (Sundararaj Gaswam,
1966). El bagre Claria lazera fue inducido para reproducirse en estanques mediante
inyecciones intraperitoneales de hembra con 50 mg/kg DOCA suspendido en aceite
(Hogendorn, 1979).
La dosis de 10mg de DOCA result ms efectivo que 1000 UI de GCG, un tratamiento
combinado de 300 UI de HCG seguido despus de 1 da por 5mg de cortisol demostr ser
tan efectivo como 10mg de cortisol y mucho ms efectivo que HCG sola. La inyeccin de
cortisol o de HCG acrecent tanto el contenido de agua como la concentracin de sodio
en el ovario (Hirose y Ishida, 1974b). Efectos similares han sido registrados en Tilapias
despus de recibir inyecciones de corticoesteroides. En cambio, en carpas las
inyecciones de DOCA a 1mg/kg fueron inefectivas (Jalabert et al., 1977).
Los corticoesteroides son indiscutiblemente eficaces para inducir la ovulacin en la
mayora de los teleosteos cuando ellos son suministrados en dosis suficientemente altas
solas y/o combinadas con gonadotropinas.
4.8.3 Estrgenos y Andrgenos
Las concentraciones del estrgeno en el plasma de los peces teleosteos hembras declina
despus de completarse la vitelognesis y antes de la maduracin final y ovulacin
(Wingfield y Grimm, 1977). Esta disminucin en la concentracin de estrgeno coincide
con el incremento de concentraciones de 17-20B-Prog en el plasma, esto podra sugerir
que los estrgenos podran ser inapropiados para la induccin de la maduracin final y
ovulacin. Esta est amparada en base a los datos encontrados en la maduracin final in
vitro, que indicaron que 17B-estradiol inhibe ligeramente el efecto de la gonadotropina
(Jalabert, 1975, 1976). Sin embargo, en Tilapia nilotica 17B-estradiol a 190 mg/kg
aument la concentracin de sodio en el ovario e indujo la ovulacin en 66% de las
hembras. Administraciones de estrona o estril en dosis superiores de 65 a 245 mg/kg
fallaron en inducir la ovulacin (Baliker e Ibrahim, 1979). No fue de utilidad en la carpa
forrajera ni en la carpa plateada el intento de inducir la ovulacin empleando el estrgeno
sinttico, el dispropianato estilbestrol en combinacin con PMSG (Brandt y Schoonbee,
1980).
Los andrgenos estan presentes en las hembras de teleosteos, pueden inducir in vitro la
ovulacin final (Goetz y Bergman, 1978; Iwamaysu, 1978), y puede bajar la dosis media
efectiva para inducir in vitro la maduracin final de la trucha arco iris (jalabert, 1975,
1976).

4.9 Prostaglandinas
Estas estn involucradas en el ruptura folicular de los peces (Jalabert y Szollosi, 1975;
Kagawa y Nagahama, 1981).
De varias prostaglandinas probadas, la PGF2 result comunmenete la ms efectiva. La
indometacin, un agente anti-inflamatorio que bloquea la sntesis de la prostaglandina,

inhibe la ovulacin. Naturalmente esta inhibicin puede neutralizarse con el suministro de


prostaglandina exgena (Stacey y Pandey, 1975; Kapur, 1979). En el plasma del goldfish
se incrementaron los niveles de PGF seis veces despus de la induccin de la ovulacin a
base de HCG (Fanfford), 1979, en Stacey y Goetz, 1982). No obstante, los resultados
prometedores en los estudios experimentales, pocos investigadores han intentado usar
las prostaglandinas para inducir la ovulacin como rutina prctica. En bagre
Heteropneustes fossilis, inyecciones diarias de PGE o PGF2 (100mg/pez con 41 a 47g de
peso corporal) di como resultado ovulaciones del 97% despus de 5 a 6 das de
tratamiento.
Las prostaglandinas tienen un evidente potencial como inyecciones desencadenantes
despus de haber tenido la accin de una inyeccin preparadora. En la trucha arco iris,
los oocitos, en los cuales la induccin final de maduracin haba sido aplicada in vitro,
ovularon in vitro utilizando PGF2 (Jalabert et al., 1978b). El hecho de que las
prostaglandinas estan involucradas en la regulacin central del comportamiento de
desove, puede permitir estimular el desove natural bajo condiciones de cultivo.

5. OTROS FACTORES
Muchas hormonas, adems de las mencionadas y discutidas, previamente juegan un rol
en la reproduccin (Fontaine, 1976), estas, inclueyn las catecolaminas, calcitonicas (Wats
et al, 1975), las hormonas tiroides, las hormonas de la urohipfisis (Lederis, 1972), la
hormona del crecimiento y la prolactina. Sin embargo, existe notoria diferencia entre una
hormona que es conocida y/o sospechada accin directa o indirecta en uno o ms
aspectos sobre el desarrollo de la reproduccin, y la factibilidad del empleo de la hormona
como una aplicacin prctica y de rutina.
En el caso de las catecolaminas, han demostrado su capacidad de inducir in vitro la
ovulacin de los oocitos de truchas que haban alcanzado la maduracin final in vitro. La
potencia de las catecolaminas probadas estuvieron en el orden epinefrina - fenilefrina isoproterenol. El tiempo de respuesta fue de 2024 horas en 15C comparado entre 18 a
20 horas para PGF2 (Jalabert, 1976). Los inhibidores de los rganos (lugares)
adrenergticos previnieron el efecto de las catecolaminas en la ovulacin. Jalabert (1976)
propuso que las catecolaminas podran causar la contraccin folicular directamente y ms
an por estmulo de la prostaglandina, la sntesis y/o la liberacin. Se han hecho algunos
ensayos invivo con las catecolaminas aplicadas a truchas de arroyo Salvelinus fontinalis,
en proporciones de 100mg de epinefrina cada dos das durante 4 semanas notndose en
consecuencia la aceleracin del desarrollo sexual en machos y hembras, (Strand, 1958).
Las hormonas tiroides han sido consideradas desde hace mucho, por tener un rol
importante en la reproduccin de peces (Fontaine, 1976). En el esturin, Acipenser
stellatus, los estudios en laboratorio indicaron que las hembras maduras alcanzan la
maduracin final y ovulacin cuando eran mantenidas a temperatura baja. Inyecciones de
triyodotironina (T3) juntamente con el extracto de pituitaria facilit la maduracin y
ovulacin.

6. ESPERMIACION INDUCIDA
6.1 Niveles de intervencin

En los peces machos, el desarrollo testicular est regulado por el eje hipotalmicopituitario-testicular. La estructura, desarrollo y la endocrinologa en los peces teleosteos
fueron revisados por Crier (1981), Nagahama et al. (1982), Billard et al, (1982). El rango
de hormonas que pueden inyectarse para la espermatognesis y/o la espermiacin es
relativamente limitado comparado con la situacin de las hembras. Sin embargo, el
piscicultor tiene an la opcin de intervenir con las hormonas derivadas del hipotlmo,
hipfisis y gnadas. Es mucho ms fcil inducir a un macho inmaduro de teleosteos para
desarrollar la vitelognesis y la espermiacin, debido a la simplicidad del control endcrino
comparado con las hembras que no responden con tanta facilidad al tratamiento. En
varias especies cultivadas, elmacho eyacula espontneamente, pero en ms de una
especie, el macho que est en cautiverio se niega a eyacular o producir una pequea
cantidad de semen viscoso. Felizmente, es posible aumentar el volumen y la calidad del
esperma con una sla inyeccin de hormona. Si el macho es inmaduro y se niega a
producir semen, habr que inyectarle varias veces o implantar alguna hormona en el
alimento peletizado para estimular la espertognesis y subsecuentemente la
espermiacin.

6.2 Empleo de compuestos especficos


6.2.1 Hormonas liberadoras de gonatrofinas
Todava es muy escasa la literatura sobre la espermiacin inducida en teleosteos
mediante el uso de LHRH o sus anlogos. El deca y nonapptido ha mostrado resultados
positivos en anfibios. La espermiacin ha sido inducida en la rama Hilla regilla con
inyeccin de LHRH con 45mg/kg (Licht, 1974). En la Rana esculenta, una sla inyeccin
de LHRH a un nivel de 220 mg/kg indujo la espermiacin del 100% entre 0.5 a 1 hora a
15C. En una dosis ms alta, la duracin de la respuesta fue de 2 das, comparados a 5
das luego de recibir 100 UI/kg HCG (Billard et al., 1975).
En el goldfish, macho maduro, inyeccin de LHRH o LHRH a D-Ala indujo el incremento
de la concentracin de gonadotropina en el plasma, aunque nada se informa sobre la
espermiacin (Peter, 1980). En el salmn del Atlntico, Salmo salar, macho maduro, con
90g de peso corporal, mantenido a 8C, se indujo la espermiacin por una inyeccin intra
peritonal de 0.75 mg/kg LHRH a D-Ala6 en suero o en glicol propileno, y tambin por
implantacin de 1,5 mg/kg LHRH a D-Ala6, o 25 mg/pez D-Mal (2)6 LHRH en pelets de
colesterol. La respuesta de espermiacin fue notada en varios grupos de peces despus
de 8 a 12 das. En el grupo de control, la espermiacin se produjo el da dcimo segundo.
El volumen de esperma producido se correlacion con la concentracin de gonadotropina
en el plasma (Weil and Crim, 1982).
6.2.2 Gonadotropinas
6.2.2.1 Extractos pituitarios de peces

En las carpas chinas, indias y europeas, con las que por costumbre se induce la ovulacin
de las hembras, con dos inyecciones de extractos pituitarios, homoplsticos y
heteroplsticos, tambin es correcto recomendar el suministro de una sla dosis de
extracto pituitario a los machos en el da que la hembra recibe la segunda inyeccin, para
asegurar la espermiacin satisfactoria del macho en el momento de ovulacin de la
hembra. En las carpas de la India, rohu (Labeo rohita); catla (Catla catla) se les aplic

a los machos una sola inyeccin de 23 mg/kg de extracto de pituitaria de carpa, y a dos
machos se les permiti una hembra para el desove (Chandhuri, 1976; Blowmick et al.,
1977). Sin embargo, al finalizar la estacin de desove, es necesario inyectar al macho de
catla dos veces para obtener una respuesta satisfactoria (Blowmick et al., 1978). En la
carpa comn la inyeccin de un extracto acuoso de polvo de pituitaria de carpa disecada
en acetona, en dosis de 22 y 22mg/kg produj un incremento de volumen de esperma
dentro de un perodo de 24 horas a 22C desde 0.12 ml en el grupo de control hasta 2.90
ml en el nivel ms alto de la dosis (Clemens y Grant, 1965). En Israel, consiguieron que
los machos de carpa comn eyacularon en 24 horas a 16C cuando aran inyectados con
pituitarias homogenizadas de carpa en una dosis de 1 glndula/kg, sin tener relacin con
el mes en que fueran colectadas las glndulas pituitarias (Rothbard y Rothbard, 1982). En
un estudio experimental, en un goldfish hiposectomizado se indujo la espermiacin con 50
mg/kg de extracto de hipfisis de trucha (Billard, 1977). Cuando la espermiacin fue
cuantificada midiendo la produccin de semen, en el momento de la respuesta mxima
(12 das), el extracto de pituitaria proviene de una especie emparentada con la carpa,
proporcion los mejores resultados.
6.2.2.2 Preparaciones purificadas de gonadotropina de peces

Aunque casi siempre se han empleado los extractos de pituitaria entera, se han llevado a
cabo muchos estudios experimentales para inducir la espermiacin con el empleo de
gonadotropinas de peces purificadas y/o parcialmente purificadas. Indujieron en el
goldfish la espermatognesis, como la espermiacin por inyecciones cada 3 das a 24C
con 10, 20, 60 o 120mg/kg de gonadotropina de pituitaria de carpa parcialmente purificada
(Clemens y Reed, 1967). Con la dosis ms alta, se produjo la espermiacin a los 42 das.
En un macho maduro hipofisectomizado de goldfish, una sla inyeccin intraperitonal de
gonadotropina parcialmente purificada de salmn (SG_G100) con un rango de 0.1 a 3.0
mg/kg, induj la espermiacin en 24 horas a 20C (Yamasaki y Donaldson, 1968a). La
espermiacin ha sido tambin inducida en el lucio utilizando gonadotropina purificada de
salmn en cantidades varibles de 5 a 100 mg/kg (Billard y Marcel, 1980).
6.2.2.3 Gonadotropinas de mamferos

Entre varias gonadotropinas de mamferos, la ms efectiva parece ser la HCG para


inducir la espermiacin en lo teleosteos. La espermiacin ha sido confirmada en truchas
(Clemens y Grant, 1965), en la hembra marina Sparus aurata (Arias, 1976), el sabalote
Chanos chanos (Juario, 1981), anguila japonesa, Anguilla japnica, utilizando Synahorin
(Ymamoto et al., 1972; Yamamoto y Yamauchi, 1974). La respuesta positiva del macho
Pontius ticto a una dosis elevdada de FSH de ovinos que result ser una excepcin al
fracaso general del FSH de mamferos para inducir la espermiacin en teleosteos
(Kapoor, 1978). La capacidad de inducir la espermiacin mediante las preparaciones
pituitarias en goldfishes hiposectomizados, fue estudiada por Billard (1977). Respuestas
significativas se obtuvieron con extractos pituitarios de corderos a 200mg/kg y LH de
ovinos a 2 mg/kg y no a 200 mg/kg, la prolactina ovina a 100mg/kg y ACTH a 10.000IV/kg.
Las respuestas de FSH de ovinos a 200mg/kg y PMSG a 500mg/kg no fueron
significativas.

6.3 Esteroides
6.3.1 Andrgenos

Yamazaki y Donaldson (1969) fueron los primeros en demostrarla espermiacin de


teleosteos. Machos maduros de goldfish que haban sido hiposectomizados 3 a 7 das
antes, se les administr intra peritonealmente una sla inyeccin de 0.10 a 1 mg/kg de
metiltestosterona o dehidroepiandroesterona y/o 10200mg/kg 11 ketotestosterona. La
dosis mnima que provoc la respuesta de espermiacin fue de 50 a 100mg, y las
mximas respuestas slo fueron observadas con dosis muy altas. El metiltestosterona fue
ms efectivo que testosterona proionato. Con macho intactos, la respuesta a 100mg/kg de
metiltestosterona fue similar a aquella obtenida con 10.000 IU/kg HCG (Billard, 1976). Sin
embargo, en el goldfish hiposectomizado, 1mg/kg de metltestosterona result equivalente
a 10.000 IU/kg HCG o 3mg/kg SG-G100 (Yamazaki y Donaldson 1968 a 1969). En la liza,
Mugil cephalus, la espermiacin ha sido inducida con metiltestosterona (Shehadeh et al.,
1973b); en el salmn se utiliz 11-Ketestosterona (Idler et al., 1961), en la trucha arco iris
se obtuvo resultado con testosterona, pero no as con 11- ketotesterona (Billard et al.,
1981).
Ultimamente, se viene usando una preparacin comercial de andrgeno, Durandron Forte
250, habiendo tenido xito con el sabolete, Chanos chanos en el cual se ha inducido la
espermiacin. Esta preparacin contiene 30mg de testosterona propianato, 60mg de
testosterona isocaproato y 100mg de testosterona decanoato en 1 ml de vehculo y
cuando inyectado a una tasa de 1 ml/pez (24kg), indujo la respuesta de la espermiacin,
la que dur 8 das comparada con 3 das despus de una sla inyeccin de 5.000 IU de
HCG (Juario y Natividad, 1980; Juario, 1981). Por lo tanto, una sla inyeccin en dosis de
andrgeno en un vehculo apropiado, es un medio efectivo para inducir en trminos
prcticos.
6.3.2 Otros esteroides
La progesterona fue encontrada como un esteroide potente que el metilestosterona, tanto
en goldfish intactos como en el hiposectomizado con una dosis cuyo rango oscil de 1 a
100 mg/kg, (Billard, 1976). 100mg/kg de cortisona indujo la respuesta en peces que eran
de tamao mayor que aquellos fueron inducidos por 10mg/kg metiltestosterona. Tambin
se obtuvo la induccin de la espermiacin baja el estradiol en dosis bajas y no se obtuvo
respuesta con dosis altas.
La superioridad de la progesterona sobre metiltestosterona en la induccin de la
espermiacin que fuera indicada por Billard (1976), ha sido confirmada en el lucio del
Norte, donde la progesterona fue ms efectiva que la testosterona (De Montalambert et
al., 1978b). En la trucha arco iris, Scott y Baynes (1982), descubrieron que en la iniciacin
de la espermiacin se produce una cada rpida de la concentracin de andrgeno y un
aumento en el plasma de los niveles de concentracin de 17-hidroxiprogesterona y 17hidro XY-20B-b deshidroprogesterona. Los niveles de progesterona permanecieron altos
durante la espermiacin y fueron positivos en correlacin al volumen de esperma y al
incremento de la produccin de K + - Na+.

7. GUIA PARA EL DESOVE INDUCIDO, MADURACION Y REVERSION


SEXUAL EN ACUICULTURA
7.1 Introduccin

La prctica de la acuicultura es un arte muy antiguo cuya meta principal es el suministro


de una fuente adicional de protena de alta calidad en la dieta alimenticia. hoy en da la
acuicultura aunque todavi es por mucho an un arte, ha llegado ha convertirse en una
ciencia, en las ltimas dcadas se ha experimentado un tremendo desarrollo de la
acuicultura a nivel mundial. Esto es como resultado de la declinacin de las capturas
ocenicas y del futuro incierto sobre la posibilidad de seguir contando con las pescas
nativas como una fuente barata y segura de protenas tiles en la dieta humana.
Aparejados a estos factores estan la demanda creciente de miles de productos cultivados
y el incremento substancial de los mtodos de cultivo, y, de aquellos que tratan de
optimizar la produccin en cantidad y calidad.
Durante los ltimos 30 aos, muchas nuevas herramientas/equipos/reactivos, etc han
creado para ayudar al acuicultor. En realidad, el acuicultor puede escoger una amplia
variedad de vestimenta, equipos, frmacos, sustancias qumicas, uchas de las cuales
estan especificamente diseados para satisfacer sus necesidades y para fortalecer la
productividad de sus operaciones de entendimiento del rol crucial que juega la
endocrinologa en la acuicultura. Para este fin, numerosas hormonas han sido
experimentadas y descubiertas de que tienen aplicaciones importantes.
Ya que el fin ulterior de la acuicultura es proporcionar una fuente segura, rentable y
altamente rica en protenas, cualquier herramienta/instrumento que se utilice ser
altamente valorizado. Son 5 las reas principales de la piscicultura que resultan
beneficiadas por el uso de los hormonas. Esas son la reproduccin inducida, carnicultura,
estmulo del crecimiento, control del sexo y maduracin inducida. El uso apropiado de
hormonas ayudar eficazmente a todas reas y mejorar significativamente la rentabilidad
de una operacin de acuicultura.
El uso de hormonas para controlar la reproduccin por la induccin selectiva del desove
en los peces fue originalmente examinado en Argentina, en 1930. Poco tiempo despus el
mtodo pionero de los argentinos fue tratado por los brasileros, los soviticos y
americanos. A partir de entonces, el empleo de hormonas se ha difundido como lo ha sido
los estudios sobre fisiologa de peces. Al estar capacitado el acuicultor de inducir el
desove cuando le significa ventajoso, hoy, este acuicultor dispone de un valioso
instrumento de manejo que le puede permitir incremetar su produccin y rentabilidad.
El mayor problema que a menudo se ha encontrado en la crianza de larvas es la
extremadamente alta tasa de mortalidad. En efecto, una vez que la dificultad de la
induccin de maduracin y desove ha sido superada, la inhabilidad de criar peces hasta
sobrepasar el estado larval ha llevado por el suelo el xito de muchos acuicultores.
Aunque el empleo de hormonas que permiten el sustancial aumento y mejora, todava no
s una prctica comn, sin embargo, hay evidencia como para sugerir que las hormonas
pueden mejorar significativamente la sobrevivencia larval.
Las hormonas han sido tambin utilizadas exitosamente para el crecimiento, aunque el
uso de hormonas para acelerar el crecimiento est mundialmente discriminado en el
ganado y otros animales desde hade mucho tiempo, en la piscicultura la produccin en
escala comercial de esas hormonas estimulantes ha adquirido a parir de la ltima dcada
espectacular importancia en piscicultura. La ventaja de estas condicines de aumentar
selectivamente la tasa de crecimiento de determinado pez habla por s sla de la

eficiencia de las hormonas. Sin duda alguna, el uso de hormonas aumentar en el afan de
incrementar la tasa de produccin de peces.

Fig 1.- Lugares de accin de los productos hormonales


Las hormonas han sido tambin empleadas para controlar el sexo de los peces, un medio
de ecelerar el crecimiento mediante la prevencin del drenaje de energa de las
actividades reproductoras. Esta es un actividad ampliamente usada con Tilapia y
Salmonidos quienes han recibido la mayor atencin. La produccin de monosexos, o
peces estriles pueden proporcionar al acuicultor un filn competitivo.
Hasta hace poco, el acuicultor tena que confiar slo en las estaciones y en el ciclo de
crecimiento de aquellas especies de valor comercial que estuvieran para reproducirse por
induccin. Haba un perodo relativamente corto de tiempo en el cual la reproduccin
podra inducirse con xito, es decir, en la poca en la que el pez estaba aproximdamente
a la madurez. La manipulacin hormonal ha sido exitosamente utilizado en una variedad
de especies para acelerar la erpematognesis y vitelognesis. Esta prctica tiene an que
ser usado ampliamente.
Para resumir, el uso de las hormonas como herramienta para mejorar la calidad y
rentabilidad de las actividades de acuicultura tiene un potencial muy amplio. Este
potencial est siendo explotado y el gran futuro econmico rentable apenas se est
vislumbrando.
Los mecanismos mediante los cuales actan las hormonas son complejos. Las hormonas
son sustancias qumicas mensajeras intrecelulares liberadas por tejidos especficos
dentro del sistema endcrino tales como la glndula pituitaria. En el pez, la reproduccin
est controlada por la inter-accin del hipotlamo, pituitaria y por las glndulas del ovario

y testculos (ver fig. 1). Las hormonas del crecimiento y las feminizantes, 17 alfametiltestosterona y 17 beta-estradiol no tienen un efecto inmediato sobre la reproduccin
y no estan representados en la figura.
Los cuatro mayores preparados de hormonas que existe en el mercado (Argent
Laboratories) para la induccin del desove en escala comercial, (dos de ellos son las
hormonas purificadas) como LHRH, HCG, SPE y CPE deshidratados en acetona, son
extractos obtenidos de la pituitaria completa de salmn y carpa, respectivamente.
La LHRH (a) es una protena sinttica que ha demostrado inducir la secrecin de
gonadotropina en teleosteos. hormonas similares, aunque muchos menos potentes, son
producidas probablemente en la glndula pituitaria de los peces. La LHRH es un inductor
pobre de gonadotropina, LHRH (a) ha sido usada para acelerar la ovulacin y
espermiacin en varias especies en estadios de desove, incluyendo a la carpa y salmn.
No es especfico de especies. Ha sido empleado sla o en conjunto con una fuente de
gonadotropina.
La gonadotropina corinica humana (HCG) es una gonadotropina humana purificada que
encubre (mimetiza) a las gonadotropinas endgenas. Ya que existe una correlacin entre
los niveles de sangre de la gonadotropina y la disponibilidad para el desove mediante el
aumento de niveles de suero de la hormona gonadotropina en los animales que ya estan
maduros. Muchas especies de peces han sido y son rutinariamente descovados por el
uso de inyecciones de HCG. Es stos se incluye a los bagres, lobina listada y carpa. AGC
es empleada ocasionalmente en combinacin con extractos de glndula pituitaria pura, no
refinada. Esto mismo ha sido tambin aplicado con pexito en lisas, esturiones y sabalotes
(milk fish).
SPE y CPE son preparados de glndula pituitaria completa cruda y deshidratada en
acetona. Ellas son disueltas enteras o reducidas en polvo y deshidratas, como ellas son
fuentes naturales de gonadotropinas de peces, no requieren tcnicas complejas de
purificacin de stesis para producirlas, son ampliamente usadas para inducir el desove en
muchsimas especies de peces. En general, cuanto ms cerca sea la afinidad filogentica
del pez donador, mayor ser la posibilidad de xito del desove del pez recipiente sin
requerir de dosis adicionales. Por esa razn, los salmnidos responden mejor,
inmediatamente cuando son inyectados con extractos de hipfisis de otros salmnidos. La
carpa, el bagre, etc. responden mejor a los extractos pituitarios de carpas. Sin embargo,
una amplia gama de especificidad ha sido observada notablemente con SPE. Se ha
empleado con mucho xito para el desove de peces tropicales, tales como carpas y
bagres.

7.2 Aplicaciones recomendadas de hormonas


Las tablas siguientes podrn ser de utilidad en la determinacin de los dosajes de
hormonas que deberan ser inyectadas y/o suministradas con el alimento. Los valores en
esta tabla indican un muestreo de los resultados de una serie de estudios llevados a cabo
por muchos investigadores. Los dosajes naturales que pueden estar basados en estos
valores pero deberan adaptarse a sus aplicaiones particulares. Sin embargo, se
proporcionan ms abajo indicadores especficas. Cuando se administra hormonas a los
peces, resulta mucho mejor evaluar antes un rgimen particular en un pequeo numero
de peces. Muchas variables, que incluyen su caracterstica gentica, la condicin general

de la salud del pez, el estadio de madurez sexual, tamao delpez y su historia previa
sobre factores tienen que ver en el impacto dela capacidad de las hormonas para
funcionar efectivamente y que est en condiciones de ser reproducibles.
Tabla 1
LHRH (A) Niveles encontrados como efectivos en el desove inducido
NIVEL

REGIMEN

ESPECIES

COMENTARIOS

24 mg/1b
(4.59 mg/kg)

dosis simple

carpa herbvora

4 mg& 1b
(9 mg/kg)

dosis simple

carpa negra

Combinado con 1 mg CPE

4 mg/1b
(9 mg/kg)

dosis simple

carpa plateada

Pez sin desove previo

90 mg/1b

dosis simple
Mg = microgramos =
106 (o).000001g

salmn coho

Una o dos inyecciones slas o en


combinacin con SPE

Como los datos indican, LHRH (a) ha sido usado con xito para inducir el desove en
carpas y salmnidos, su uso sin embargo, est an considerado en estado experimental
por lo que debera emplearse con precaucin. Es muy potente, requiriendo para su
efectividad slo de unos cuantos microorgamismos. A menudo, lo utilizan en combinacin
con extractos pituitarios.
HCG es til para el desove en una variedad de especies. La regla general para determinar
el nivel apropiado del dosaje es considerar aproximadamente 1 IU por gramo de pescado.
La inyeccin intramuscular (IM) es la ms empleada. Muchos acuicultores emplean HCG
en combinacin con extractos crudos y purificados de glndula pituitaria ya sea junto o en
inyecciones separadas.
(xx IU = Unidad internacional de actividad de 1 HCG.
Tabla 2
HCG Niveles usados para inducir el desove
NIVEL

REGIMEN

VIA

ESPECIE

125150 IU/1b
(275330 IU/kg

dosis simple

IM

lobina listada

270900 IU/1b
(600200 IU/kg)

dosis simple

IM

bagre de canal

IM/IP

varias especies de carpas


(goldfis/perca)

300500 IU/1b
(6601100IU/pez 70 dosis simple
IU/pez)

COMENTARIOS

inyectado 72hrs aparte


(intervalo)

1500 IU/pez

dosis simple

IM

lobina de mar

Tabla 3
Hormona pituitaria - Niveles del extracto usado para inducir el desove
NIVEL

FUENTE

VIA

ESPECIE

COMENTARIOS

2.0 mgxxx
(4.4 mg/kg)

CPE

IM

bagre

3 inyecciones

0.9 mg/1b
2.0 mg/kg
3.6 mg/1b
(8.0 mg/kg)

CPE

IM

carpa india

2 inyecciones
36 horas intervalo

1.8 mg/1b
4.0 mg/kg
5.0 mg/1b
(11.0 mg/kg)

CPE

IM

carpa china

2 inyecciones
36 horas intervalo

1.4 mg/1b

CPE

IM

cyprnidos

2 inyecciones
2 horas intervalo

0.7 mg/1b

SPE

IM

salmnidos

2 inyecciones
3 das intervalo

1.5 mg/1b
2.7 mg/kg
6.0 mg/kg
xxx

mg = miligramos o 10-3 gramo- .001 gramo

Como la inyeccin de pituitaria es mas utilizada para inducir el desove ya que hay
literalmente cientos de ejemplos de su uso eficaz. Muchas especies de peces han
desovado efectivamente usando CEP o SPE, ya sea slos o en combinacin con HCG
que con otras hormonas acuosas. La metodologa involucra el empleo de 2 a 3
inyecciones intramusculares de un preparado acuoso. El dosaje exacto vara de especie y
debera ser determinado experimentalmente para los tres grupos de peces mencionados
en la Tabla 3, un rango de 0.7 a 5.0mg de material seco por libra (1.5 a 8.0mg de materia,
secado por kg) de pescado se ha encontrado ser suficiente en la mayora de casos para
inducir el desove.
Tabla 4
Algunos ejemplos de induccin hormonal de maduracin gonadal.
NIVEL

ESPECIES

COMENTARIOS

14 mg/1b
(30 mg/kg)

anguila

Inyeccin de CPE IP 3 veces a la semana durante 2


meses.

21 mg/1b

salmnidos

Inyeccin de SPE IM una vez por una semana durante 70

(45 mg/kg)
5 ppm en dieta

das.
trucha arco iris

Alimentado con metiltestosterona aproximadamente


durante 4 semanas. Se increment el ndice gonadal
significativamente de acuerdo a los controles.

Aunque hay evidencia buena que las hormonas deben ser usadas para acelerar la tasa en
la que el pez madura, hay sin embargo pocos datos disponibles sobre el mejor mtodo a
ser utilizado para una especie dada. La mayora de los mtodos incluyen inyecciones
repetidas haciendolo un mtodo poco deseable cuando sse trata de aplicaciones en gran
escala. Mayor xito se ha tenido en peces machos al acelerar con ms facilidad la
maduracin, aunque el metiltestosterona aplicado por va oral trabaja en ambos casos.
Incrementando la tasa de crecimiento del pez no indica necesariamente que ellos
madurarn precocemente. Metiltestosterona ha sido empleado experimentalmente para
acelerar la tasa de crecimiento del goldfish y de varias especies de salmnidos, cuando
alimentados por un perodo de 8 semanas a un nivel de 1ppm a 10% de incremento en el
peso del pez en estudio, se not diferencia en aquel pez sin tratamiento.
Tabla 5
Uso de metiltestosterona para el control de sexo
NIVEL

ESPECIE

COMENTARIOS

23 mg/1b alimento
(50 mg/kg)
Tilapia
30 mg/kg

Alimento durante 28 das, produjo todos machos.


Un mes despus de nacer todos se conviertieron en
machos

1.4 mg/1b
alimento
(3.0 mg/kg)

Trucha arco iris

Alimento por 90 das, 94% machos.

45.0 mg/1b
alimento
(100 mg/kg)

Carpa

Alimentado 36 das a partir de 8 a 62 das de post eclocin,


71.4 a 89% de machos.

Adems de acelerar la tasa de crecimiento, metiltestosterona ha sido utilizado tambin


para producir una descencadenada slo de machos, a un porcentaje mucho mayor de
machos que lo usual. La hormona puede ser administrado en el alimento y en el agua, sin
embargo, la va preferida es la oral. Hay variaciones considerables sobre el dosaje ptimo
para una determinada especie.
Tabla 6
Uso del 17 Beta estradiol para feminizar a los peces
NIVEL
9.0 mg/1b

ESPECIES
Trucha arco iris

COMENTARIOS
Alimentado 30 das desde la alimentacin inicial, 100% de
hembras

1.0 mg/gal
(250 mg/I)

Trucha arco iris

Inmerciones de embriones, oculados (huevo oculados), de


2 en 2 horas y alevines, 3056 das desde su primera
alimentacin, 100% hembras.

1.3 mg/gal

Salmn coho

Alimentados 2484 das, 100% hembras.

Las hormonas pueden tambin ser empleadas para feminizar poblaciones de peces.
Estradiol ha sido usado para producir poblaciones con todos los individuos hembras en
varias especies. Como metiltestosterona que pueden emplearse ya sea oralmente o por
inmersin. Ambos mtodos han dado resultados eficaces.
Tabla 7
Uso de hormonas para producir peces estriles.
NIVEL
22 mg/lb
alimento
(50 mg/kg)

HORMONA

ESPECIE

Metiltestosterona Tilapia

COMETARIOS
Alimentado 60 das, 100% esterilidad

11 mg/lb
alimento
11 mg/lb
alimento

"
"

"
"

Trucha Arco
iris

Alimentados 110 das, 60% esterilidad

100800
mg/gal

"

"

Salmn coho

2-2 horas inmersin de huevos oculados y alevines


alimentados 7,0 das, 94100% estriles.

9 mg/lb
(20 mg/kg
alimento)

La metilestosterona, cuando es utilizada a niveles mucho ms altos que los


recomendados para iducir todos los machos, tiene el efecto de hacer que los peces se
conviertan en estriles. Puede emplearse por inmersin o en el alimento, siendo con la
alimentacin el mtodo preferido.

7.3 Recornendaciones generales para el uso


Cuando se est utilizando hormona para inducir el desove, se recomienda los siguientes
procedimientos:

El pez deber ser examinado externamene para asegurar si est listo para el
desove.
Observar la distencin abdominal debido a los ovarios, preferiblemente despus
que el tracto digestivo haya sido vaciado.
Examinar la condicin de la abertura genital.

Examinar la coloracin del pez, el grado de flacidez abdominal y cualquier patrn


de comportamiento que se conocen como seales indicativas del comportamiento
de predesove.

Para los machos, observaciones de sus actitudes frente a las hembras y en relacin a
otros machos. podran ser tiles para determinar el estadio relativo a la proparacin
sexual. Un entendimiento completo de qu cambios fisiolgicos externos esten
conectados con el desove, facilitarn para determinar cuales de los peces estan listos
para desovar. Para algunas especies, el manipuleo del ambiente externo podra jugar un
rol esencial al asegurar que las hormonas funcionan tan efectivamente como sea posible.
Hay muchas tcnicas diferentes disponibles para manejar el pez durante la inyeccin de
hormonas tricaine metanosulfonato (MS 222) Finquel marca comercial servir
anestsico y luego el pez ser inyectado con una dosis de extracto pituitario h/o otroas
hormonas mezcladas en agua. Como se indic anteriormente, el nivel exacto de hormona
inyectada ser dependiente de una serie de variables. Las indicaciones sugeridas estan
en las tablas siguientes. Estas son slo recomendaciones sugeridas. La experiencia
propia podra ser a favor de otras dosis aplicadas y que tengan resultado buenas.
Para peces ms pequeos, tales como los ornamentales, menos de 3 pugladas, el pez
ser inyectado con no ms de 0.2ml de material, usando una aguja de calibre 26 0 menor.
Para peces ms grandes, se puede inyectar mayor volumen pudiendose, como mucho,
inyectarse hasta 2 ml en un pez grande utilizando una aguja de hasta 2ml, en un pez muy
grande, utilizando una aguja de calibre 19 a 21.
Como previamente se recomend, habr de tenerse en cuenta el rol crusial que
desempea las variables ambientales que pueden afectar la eficiencia de cualquier
preparacin ambiental apropiada, el flujo de agua y la temperatura que son esenciales
para asegurar que las hormonas funcionen efectivamente.
Hormona

Forma de dosaje/Uso recomendado

LHRH (a)

Viene en paquetitos de 1mg, esto es equivalente a 1.000 microgramos. Al diluir


este material, remueva cuidadosamente para disolver el contenido. No agite,
ya que ello podra afectar a la potencia del preparado. Consulte la tabla
intitulada: Preparando las diluciones para la preparacin de las
concentraciones apropiadas de las materiales.

HCG

Viene empacado en folletos de 5.000 a 10.000 UI. Para reconstituirlo agregue


esterilizada con una geringa. Remueva con cuidado para disolver el contenido.
Cuando reconstituido habr 50100 IU por 0.1 ml, dependiendo de la
concentracin en la ampolleta original.

SPE/CPE

El peso apropiado del material entero o en polvo, deber suspenderse en agua


de mode que el material suficiente pueda ser inyectado entre 0.1cc,
dependiendo del tamao del pez.

17 alfa metil
testosterona/ 17
beta estradiol.

Deber ser agregada al alimento en nivel deseado, justo antes de alimentarse


a los peces. Puede ser disuelto en agua y mezclado con aceites para que se
adhieran a la dieta.

Gua sugerida para el uso de hormonas en la induccin del desove


HORMONA

METODO DE
ADMINISTRACION

DOSAJE

COMENTARIOS

LHRH

4.5 mg/1b
9.0 mg/lb

Intraperitoneal

Una simple dosis usualmente efectiva

HCG

450 lU/kg

Intramuscular

Dosis simple puede usarse con SPE o


CPE

CPE/SPE

4.5 a
55mg/1b
10 a 12
mg/kg

Intramuscular

Doble dosis. Segn las especies,


depender el intervalo de tiempo y se
emplear con HCG

Gua sugerida para el uso de hormonas en la reversin sexual


HORMONA

DOSAJE

METODO DE
ADMINISTRACION

COMENTARIOS

17 alfa metil
testosterona

05045
mg/1b

Incorporado, adherido al
alimento

Dosaje y durain de la alirnentacin


depende de las especies

17 beta estradiol

29 mg/1b

Incorporado, adherido al
alimento

Dosaje y durain de la alimentacin


depende de las especies

Una vez que el dosaje apropiado ha sido decidido y el efecto deseado se ha determinado,
as como todo el material y equipo se tiene listo, entonces Ud. estar preparado para
administrar la hormona. La siguiente tabla desribe la forma de dosaje de cada producto
disponible y proporcionado por los laboratorios Argent.
CONCENTRACION
INICIAL

CANTIDAD DE AGUA
AGREGADA

CONCETRACION
FINAL

LHRH (a)

10 ml
1 ml

10 microgramos/0.1 ml
1 microgramo/0.1 ml

HGC -5000 IU

10 ml
1 ml

50 IU/0.1 ml
500 IU/0.1 ml

HCG -10000 IU

10 ml
1 ml

100 IU/0.1 ml
1000 IU/0.1 ml

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