I.

OBJETIVOS

II.-

El alumno:
El alumno conocer y aplicar el procedimiento de esterilizacin por calor
hmedo, as como las ventajas del procedimiento.
FUNDAMENTO TERICO
Agentes fsicos antimicrobianos.
A) CALOR HMEDO.- La temperatura elevada, combinada con una humedad
elevada, es uno de los mtodos ms efectivos para matar microorganismos. El
calor hmedo mata a los microorganismos coagulando sus protenas. Es mucho
ms rpido y efectivo que el calor seco. El vapor a presin proporciona
temperaturas por encima de las que se pueden obtener al hervir. Tiene la ventaja
de un calentamiento rpido, as como penetracin rpida y abundante humedad.
El aparato a esterilizar que utiliza vapor de agua a presin regulada se denomina
autoclave. Consta de una cmara de doble pared que se llena de vapor saturado
libre de aire y se mantiene a la temperatura indicada y a la presin establecida
durante un periodo de tiempo determinado. Generalmente el autoclave funciona a
una presin de 15 libras/ pulgada cuadrada a 121C ( 249F). El tiempo de
funcionamiento para lograr la esterilidad depende de la naturaleza del material
que se va a esterilizar, del tipo de envase y del volumen del material. Una
temperatura de l00C es la suficiente para matar a todas las formas bacterianas
en 2 o 3 minutos, excepto a las esporas, para matar a estas se requiere una
temperatura de 121C durante 15 minutos y a una presin de 15 libras.
Este mtodo es adecuado para esterilizar aparatos que tienen hule, jeringas que
contienen metal, para medios de cultivo que contienen un azcar especial como
dextrosa. El autoclave se puede sustituir por la olla de presin.
B) CALOR SECO.- En este tipo de esterilizacin existe una destruccin de los
microorganismos oxidando sus constituyentes qumicos, desnaturalizando las
protenas y los cidos nucleicos de las clulas as como fragmentando las
membranas celulares. Para materiales que deben permanecer secos como
ciertos instrumentos de vidrio de laboratorio tales como: cajas de petri, pipetas,
as como aceites, polvos (por ser impermeables al vapor), los materiales que no
se pueden esterilizar por calor seco son: Material textil (algodn, sedas, lino,
etc.), gomas y materiales sintticos Todo material que se altere a la temperatura
de trabajo se dispone de hornos elctricos por los que circula aire caliente, en
vista de que el calor es menos eficaz en materiales secos, se acostumbra a
aplicar una temperatura de 160C a 170C durante una hora o ms. Para
materiales de vidrio de laboratorio es suficiente una exposicin de dos horas de
duracin a 160C (320F) para que quede esterilizado. Otras formas tiles de
calor seco incluyen incineracin para objetos que deben ser destruidos y
flameados por pasaje de agujas o pequeos instrumentos a travs de la llama de
un mechero bunsen.

III.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Materiales:

Reloj
Agua destilada
Autoclave
Mechero bunsen
Material de cristalera limpio, seco y empacado

Procedimiento:
Esterilizacin por calor hmedo (vapor a presin)
1.- Lava el material que te proporcione tu profesor con mezclas adecuadas como
Extran, mezcla Crmica con concentraciones adecuadas tomando en cuenta lo
sucio del material, seca en estufa o en forma manual con papel absorbente y
empcalo. Tenlo listo para su esterilizacin.
2.- Coloca el agua necesaria en la autoclave u olla de presin hasta la marca e
introduce unas gradillas metlicas que servirn de base al material a esterilizar.
Coloca el material a esterilizar dentro de la autoclave u olla de presin, evitando
que el material toque las paredes.
3.- Cierra el autoclave u olla de presin, cuidando de dejar abierta la vlvula de
salida de vapor que ayudar a expulsar el aire contenido dentro y que ste es
desplazado por el vapor que se produce. Si el aire no fue eliminado totalmente de
la autoclave, el manmetro aumentar a 15 libras. Pero la temperatura no habr
alcanzado los 121C Por esto se debe medir el tiempo cuando la temperatura
llegue a l21C.
4.- Cierra la vlvula cuando el vapor sea continuo. La temperatura de l05C
indica que est libre de aire. Vigila el termmetro. Cuando vaya en 120C,
mantenla durante 15 minutos para que se efecte la esterilizacin (15 libras de
presin). Transcurrido este tiempo se apaga.
5.-Deja enfriar hasta que el manmetro marque cero. Abre la vlvula de salida de
vapor, para expulsar el vapor restante. Abre el autoclave y retira el material
6.- Si el material no est en estado lquido la vlvula se puede abrir rpido a la
salida de vapor, pero si est en estado lquido la rpida prdida de presin las
hace hervir o bien saltar los tapones. Por lo tanto se espera unos minutos a que
se enfre perfectamente.
IV.

CUESTIONARIO:
1.- Cul material se puede esterilizar por calor seco y cul no y Por qu?
-

Se pueden esterilizar por calor seco: Instrumental quirrgico cromado, materiales

de vidrio, aluminio o porcelana, aceites, parafina, sustancias grasas, vaselina,
polvos (talco).
No se pueden esterilizar en calor seco:
Material textil, gomas, materiales sintticos.
Esta clasificacin es debida a que ciertos materiales pueden cambiar o alterar su
estado en el calor hmedo.
2.- Qu tipo de material se puede esterilizar por calor hmedo?

Material textil, material de vidrio, material de goma, elementos con mercurio,

instrumental quirrgico de acero inoxidable, soluciones acuosas y todo aquel
material cuyo fabricante certifique que pueda ser esterilizado con vapor.
3.- A qu condiciones de temperatura y presin se destruyen todas las formas
vegetativas?
Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura
que debe estar a l00C que es lo suficiente para matar a todas las formas
bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condicin es la presin de 15 libras
al cual se somete el microorganismo, a excepcin de las esporas.
4.- A qu condiciones de temperatura y presin se destruyen las esporas?
La condicin para matar o destruir una espora es la temperatura de 121C
durante 15 minutos y la otra condicin es a una presin de 15 libras.
5.- Cules son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para
esterilizar por calor seco?
Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la
temperatura correcta, el mismo proceso de esterilizar y el perodo de enfriar
suele tardar dos veces el tiempo que aqu se menciona
TEMPERATURA
170 grados
160 grados
150 grados
140 grados

TIEMPO
C 1 horas
C 2 horas
C 2,5 horas
C 3 horas

Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o

puntiagudos, incluso las agujas, no se debern esterilizar estos objetos a una
temperatura que pase 160 grados C.
6.- Cules son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para
esterilizar por calor hmedo?
La temperatura alcanzada en el autoclave son 121.5C y una presin de 15
(Lb/in2), por lo tanto el tiempo requerido para la destruccin de la mayora de las
bacterias resistentes es aproximadamente 15 min. Para objetos ms densos,
sern requeridos ms de 30 minutos, sin olvidar que las condiciones deben de
ser controladas cuidadosamente para asegurar la correcta esterilizacin.
7.-Cmo acta la esterilizacin por calor seco en los microorganismos?
El calor cambia las protenas microbianas por las reacciones de oxidacin y crea
un medio interno rido, as quema a los microorganismos lentamente.
8.- Cmo acta la esterilizacin por calor hmedo en los microorganismos?
Mata microorganismos por la coagulacin de protenas (desnaturalizacin), lo
que es causado por la rotura de los puentes de hidrgeno que son los que

mantienen a las protenas en su forma tridimensional; las protenas por lo tanto

regresan a su estructura secundaria, se coagulan y se convierten en protenas no
funcionales. El calor hmedo puede penetrar ms rpidamente que el calor seco
porque las molculas de agua conducen mejor el calor que las molculas de aire.
Por ello el calor hmedo puede ser usado a temperaturas ms bajas y menor
tiempo de exposicin que el calor seco.
9.- Qu tipo de esterilizacin es ms recomendable y por qu?
La esterilizacin ms recomendable es por calor hmedo porque hay rpido
calentamiento y penetracin, destruye las bacterias y esporas en poco tiempo, no
deja residuos txicos, es econmico y hay un bajo deterioro del material.
V.

BIBLIOGRAFA:
1. http://es.slideshare.net/Prymer/esterilizacin
2. http://www.soportehospitalario.com.ar/info_materiales_de_esterilizacion.ph
p
3. http://www.unavarra.es/genmic/microgral/03_eliminacion
%20microorganimos%20MG%2008-09.pdf
4. BROCK, TH. D: 1998. Biologa de los Microorganismos. Editorial Prentice
Hall.