Inmunidad y profilaxis antiviral

Inmunidad del hospedero a las infecciones virales

Inmunidad innata
Inmunidad adquirida
Inmunidad pasiva
Mecanismos virales de evasin y escape
Vacunas y vacunacin contra las enfermedades virales
Vacunas de virus atenuado
Vacunas de virus que no se replican (inactivados)
Vacunas producidas por ADN recombinante y tecnologas relacionadas
Mtodos para aumentar la inmunogenicidad de las vacunas virales
Factores que afectan la eficacia y seguridad de la vacunas
Polticas y esquemas de vacunacin
Vacunacin de aves y peces
Otras estrategias de profilaxis y tratamiento antiviral
Inmunizacin pasiva
Quimioterapia de las enfermedades virales
Virus como vectores en la terapia gnica

Al ser parsitos intracelulares obligados, los virus han tenido que co-evolucionar con sus respectivos
hospederos, y las clulas eucariticas de los organismos hospederos han desarrollado diversas y
sofisticadas defensas para protegerse contra las infecciones virales y sus enfermedades asociadas. A
su vez, los virus han desarrollado una gran variedad de estrategias para evitar o subvertir estas
defensas del hospedero. La inmunidad antiviral en los animales superiores es compleja y se refleja una
combinacin de mecanismos de respuesta inmune innata y adquirida (adaptativa), aunque hay una
considerable interaccin entre estas dos grandes categoras. Las citocinas, clulas dendrticas,
anticuerpos naturales y ciertos linfocitos T (clulas T ) proporcionan un puente de unin importante
entre las respuestas inmunes innata y adquirida. La inmunidad antiviral de los animales est mediada
por factores humorales y celulares, y la naturaleza de la respuesta inmune generada por diferentes
individuos infectados con el mismo virus pueden ser diversas, dependiendo de la constitucin gentica
individual, influencias ambientales y otros factores que pueden determinar el curso y patogenia de la
infeccin.
Las defensas inmunes innatas (tambin referidas como inmunidad natural o nativa) estn presentes
constantemente para proteger a los organismos multicelulares contra las infecciones virales, y no es
requerida una exposicin previa a un virus particular para activar estos mecanismos. En contraste, la
inmunidad adquirida se desarrolla solamente despus de la exposicin a un virus, y es especfica a ese
virus en particular y, algunas veces, a sus parientes ms cercanos. La inmunidad adquirida incluye
mecanismos efectores celulares y anticuerpos (humoral), mediados respectivamente por linfocitos T y
B. En contraste a la inmunidad innata, las respuestas inmunes adquiridas poseen memoria, de manera
que la respuesta puede ser rpidamente reactivada despus de la re-exposicin al mismo virus. En
muchas infecciones virales sistmicas, la memoria inmunolgica despus de una infeccin natural
confiere proteccin contra el virus de largo trmino y a veces para toda la vida.
El desarrollo de vacunas eficaces sustancialmente ha reducido el impacto nocivo de las enfermedades
virales en humanos y animales. El xito de la vacunacin es estimular las respuestas de inmunidad
adquirida para proteger a los animales a una posterior reinfeccin con virus especficos. Una creciente
variedad de tipos de vacunas estn ahora disponibles comercialmente para su uso en animales,
especialmente para los animales de produccin y compaa, incluyendo ganadera, avicultura y peces;
estas incluyen vacunas inactivadas (sinom. Muertas), atenuadas (sinom. Modificadas) y varios tipos de
recombinantes y de ingeniera gentica. Las vacunas son usadas extensivamente en programas
reguladores para el control de ciertas enfermedades virales del ganado, a menudo en combinacin con
procedimientos especficos de manejo. Otras estrategias para el tratamiento antiviral y profilaxis
involucran a drogas (medicamentos) que interfieren con la infeccin viral o la replicacin, as como
molculas que estimulan o imitan las respuestas protectoras del hospedero.

Inmunidad del Hospedero a las Infecciones Virales

Inmunidad Innata
Las defensas inmunes innatas no exhiben especificidad antignica, ni memoria, pero proporcionan una
primera lnea crtica de defensa contra las infecciones virales debido a que estn constantemente
presentes y operan inmediatamente despus de la infeccin viral. La inmunidad innata es a menudo se

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parada de las respuestas de la inmunidad adquirida, pero ellas estn fuertemente relacionadas, pues
las respuestas innatas modulan subsecuentemente a las respue3stas adquiridas en muchas maneras.
Diferentes actividades conforman a la defensa inmune innata, incluyendo: (1) barreras epiteliales; (2)
protenas sricas antimicrobianas, como el complemento (C); (3) anticuerpos naturales producidos por
linfocitos B1; actividades de clulas fagocticas como los neutrfilos, macrfagos y clulas dendrticas;
(5) clulas asesinas naturales (Natural Killer cells) que pueden lisar a las clulas infectadas por virus;
(6) diversos tipos de clula presentes en los sitios de invasin viral que poseen receptores que
genricamente reconocen y rpidamente responden a la invasin viral por activacin de transcriptores
que estimulan la produccin de una amplia variedad de molculas protectoras, por ejemplo, el sistema
del interfern (IFN) que es un componente especialmente crtico y central de la resistencia antiviral; (7)
apoptosis, un proceso de muerte celular programada que puede eliminar clulas infectadas; (8)
molculas de ARN pequeas que interfieren con la replicacin viral (ARNi).
Los virus que son transmitidos horizontalmente entre individuos primero deben romper las barreras en
su puerta de entrada antes de que causen infeccin y su respectivo hospedador. Por ejemplo, la
cubierta epitelial de la piel y aparatos respiratorio, gastrointestinal y urogenital proporciona una
barrera mecnica contra la infeccin en estos sitios comunes de entrada de virus. Las secreciones y
otras actividades de las superficies mucosas son una muy adecuada proteccin contra las infecciones
virales. Por ejemplo, los surfactantes y el aparato mucociliar dan una proteccin antimicrobiana no
especfica al aparato respiratorio. Similarmente, la proteccin antimicrobiana en el aparato
gastrointestinal est mediada por la barrera mucosa, los extremos del pH regional, la accin
esterilizante de secreciones (p- ej., del hgado (bilis) y pncreas), y pptidos antimicrobianos
especficos como las defensinas que estn presentes en la mucosa y sus secreciones.
Una gran variedad de protenas plasmticas poseen actividad antimicrobiana, incluyendo a las diversas
protenas del Complemento, protena C reactiva, protena que se une a manosa y anticuerpos naturales
reactivos en trminos generales. Estas protenas pueden ejecutar un efecto antimicrobiano directo, o
promover la captura de microorganismos en las clulas fagocticas al cubrir su superficie para facilitar
la unin de receptores (opsonizacin).
Las clulas fagocticasmacrfagos y neutrfilosproporcionan una crtica funcin antimicrobiana, as
como ellos son atrados a los sitios de inflamacin., en donde eficientemente ingieren y digieren
materiales extraos, incluyendo microorganismos. Estas clulas poseen la maquinaria intracelular para
destruir a los microbios ingeridos, particularmente bacterias, por las acciones de enzimas lisosomales
hidrolticas as como tambin la produccin de oxgeno activado y metabolitos de nitrgeno en las
vacuolas fagocticas. Varios mediadores solubles pueden atraer a estas clulas a los sitios de
inflamacin, y activarlos para aumentar su actividad antimicrobiana.
Las clulas dendrticas son jugadores clave en las inmunidades innata y adquirida de las infecciones
virales. Adems de ser altamente eficientes como clulas presentadoras de antgeno, son una fuente
especialmente importante de IFN tipo I y de otras diversas citocinas que inhiben las infecciones virales
y la replicacin. Las clulas dendrticas interdigitales son abundantes en las puertas de entrada de virus
(como los aparatos respiratorio, urogenital, gastrointestinal y la piel), y estn dotadas con Receptores
de Reconocimiento de Patrones que les permite rpidamente iniciar respuestas protectoras innatas a
los virus invasores.
Clulas Asesinas Naturales (Natural Killer Cells, NK)
Las clulas asesinas naturales son linfocitos especializados que son capaces de rpidamente matar a
clulas infectadas, de esa manera proporcionan resistencia temprana y no especfica contra las
infecciones virales. Especficamente, las clulas NK reconocen a las clulas del animal que expresan
niveles alterados de molculas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) tipo I y/o protenas de
choque trmico (o similares). La funcin de las clulas NK est fuertemente regulada por el balance de
seales de activacin e inhibicin expresadas en la superficie de las clulas blanco. Las clulas
infectadas tpicamente expresan reducidos niveles de molculas inhibitorias del CMH tipo I y elevados
niveles de ligandos especficos para activar receptores sobre las clulas NK. En resumen, las clulas NK
no son especficas de antgeno, ms bien, su activacin requiere de enlaces diferenciales de receptores
de superficie celular en combinacin con la estimulacin de citocinas protoinflamatorias (Figura 4.1).
Las clulas NK median la muerte de las clulas infectadas por la va de la apoptosis; esta actividad
citocida es central para el control de infecciones virales, debido a que puede eliminar a las clulas
infectadas antes de que ellas liberen la progenie de nuevos viriones. Estas clulas (NK) tambin poseen
receptores de superficie para la porcin Fc (fraccin cristalizable) de las molculas de anticuerpos, lo
que les permite unir y lisar clulas blanco cubiertas de anticuerpos, mediante el proceso de

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citotoxicidad mediada por anticuerpos. Por ltimo, las clulas NK sintetizan y liberan una variedad de
citocinas, incluyendo IFN tipo II y varias interleucinas (IL) que estimulan su proliferacin y actividad
citoltica.
Receptores Celulares de Reconocimiento de Patrones
Las clulas en las puertas de entrada de los virus poseen receptores de superficie (Receptores de
Reconocimiento de Patrones, PRR), que reconocen especficos Patrones Moleculares Asociados a la
Patogenicidad (PAPMS), los cuales son macromolculas presentes en los microbios pero no en las
clulas somticas. Estos receptores de reconocimiento de patrones son expresados sobre y dentro de
diferentes clulas incluyendo macrfagos, clulas dendrticas, neutrfilos, clulas NK, clulas
endoteliales y de las mucosas epiteliales. La unin de las macromolculas microbianas (PAMPs) a estos
receptores inmediatamente dispara las respuestas innatas que protegen al individuo de la invasin
microbiana. La activacin de estas respuestas no requiere exposicin previa del animal a ese virus
especfico.
Los receptores Tipo Toll (TLRs; el nombre refleja el parecido de estas protenas a las protenas Toll de
Drosophila) son importantes ejemplos de receptores de reconocimiento de patrones. Estando
localizados en la superficie y en vesculas endosmicas, lo cual permite a estos receptores detectar la
presencia de disparadores microbianos (PAMPs) en el ambiente extracelular, adems de aquellos
internados a la clula despus de la fagocitosis o endocitosis mediada por receptores. Hay al menos 10
TLRs en los mamferos, y diferentes TLRs reconocen diferentes PAMPs. El TLR3 es especialmente
importante para la inmunidad antiviral, porque su ligando es el ARN de doble cadena (dsARN), que es
producido en diferentes clulas infectadas. Todos los TLRs tienen una porcin extracelular que incluye
dominios ricos en leucina y cistena, y una porcin citoplsmica conservada que interacta con
protenas de sealizacin celular. Otros sistemas de reconocimiento/deteccin de patgenos tambin
son operacionales en el citoplasma celular, y la activacin de los TLRs y/o cualquiera de los otros
sensores provoca la activacin de rutas de sealizacin comn que involucran factores de transcripcin
celular, notablemente el factor nuclear B (NF-B) que causa dependiendo del tipo celular: (1)
Expresin de IFNs y citocinas inflamatorias como el factor de necrosis de tejidos (TNF) e
interleucinas 1 y 12 (IL-1, IL-12); (2) activacin de clulas fagocticas y endoteliales con produccin
aumentada de mediadores inflamatorios y molculas de adhesin de superficie celular; (3) produccin
en los fagocitos de productos microbicidas como el xido ntrico. Colectivamente, estas respuestas
celulares que son disparadas por la activacin de receptores de reconocimiento de patrones son
potentes estimuladores de la inflamacin e inhibidores de la infeccin y replicacin viral.
Citocinas

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Figura 4.1 Receptores que activan e inhiben a las clulas

asesinas naturales (NK). A. Clulas sanas que auto-expresan
molculas del CMH I, que son reconocidos por receptores
inhibidores, asegurando as que las clulas NK no las atacarn.
Note que las clulas sanas pueden expresar ligandos para la
activacin de receptores (no mostrado), o no pueden expresar
tales
ligandos
(mostrado),
perouna
no activan
a las
clulas
NK
Las
quimiocinas
son
familia
de
protenas
porque
estn enganchados
a los receptores
inhibidores.
incluyendo
entre muchas
otras a
la IL-8. Otras

Las citocinas son mensajeros de aparato inmune

que son responsables de la induccin y regulacin
de las respuestas inmunes innata y adquirida.
Especficamente, las citocinas son mediadores
solubles que facilitan la comunicacin entre
poblaciones celulares clave, incluyendo varias
subpoblaciones de linfocitos, macrfagos, clulas
dendrticas, endoteliales y neutrfilos. A modo de
propiedades
generales,
las
citocinas
son
tpicamente glicoprotenas inducibles que son
sintetizadas de forma transitoria despus de la
estimulacin apropiada de las clulas que las
produce. Ciertas citocinas son producidas por ms
de un tipo celular y realizan varias actividades,
frecuentemente divergentes. Hay mucho empalme
(redundancia) en la actividad de diferentes
citocinas; as sus interacciones y actividades son
altamente complejas. Las citocinas se unen a
receptores en la superficie de las clulas blanco,
con la subsecuente activacin de transcriptores de
esa clula. Estas actividades pueden manifestarse
como:
Efectos autcrinos sobre el mismo tipo de
clulas que las produce
Efectos parcrinos sobre clulas adyacentes
de diferentes tipos
Efectos endcrinos, los cuales son sistmicos
en muchos tipos celulares.

Las citocinas clave que estn involucradas con las

respuestas inmune innatas son: IFNs tipo I, factor de
necrosis de tejidos (TNF), IL-6, y las quimiocinas.
pequeas que son quimiotcticas para los leucocitos,
citocinas como IL-12 e IFN tipo II son crticas para las
B. En
las clulasinmunes
infectadas,
la expresin
del CMH
I est
respuestas
innata
y adquirida.
Los
IFNs son especialmente crticos para la inmunidad antiviral
reducida para que los receptores inhibidores no se
y son discutidos ms adelante.
enganchen, y los ligandos para la activacin de
receptores sean expresados. El resultado es que las
Interferones
clulas
NK son activadas y las clulas infectadas estn

Issacs y Lindenmann en 1957, reportaron que las clulas de la membrana corioalantoidea de los
huevos embrionados de gallina infectados con el virus de influenza liberan al medio una protena no
viralinterfern (IFN) que protege a clulas susceptibles contra el mismo o virus relacionados.
Desde entonces ha sido determinado que hay varios tipos y subtipos de interfern (IFN), y que estas
protenas son elementos clave de la resistencia antiviral y son centrales en las respuestas inmunes
innata y adquirida a las infecciones virales,
Hay tres tipos de IFN, designados como tipos I, II y III, y que cada uno utiliza diferentes receptores
celulares (Figura 4.2).

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Interfern Tipo I (IFN tipo I). Los IFNs I incluyen IFN-, del cual hay varios tipos dependiendo de
las especies, y un tipo de IFN-; muchas clases de clulas pueden producir estos tipos de IFN I.
Otros tipos de de IFNs tipo I con funciones especficas incluyen los IFN-, -, -, -, y . Los IFNs
tipo I se unen a receptores IFN-a (IFNAR), un heterodmero de IFNARs 1 y 2, para activar una
cascada de seales enzimticas incluyendo las cinasas de tirosina (TYK) y Janus (JAK),
transductores de seales y activadores de transcripcin (STATs), y el factor regulador de IFN 9
(IRF9). La activacin de esta cascada de seales finalmente resulta en la induccin de los genes
de respuesta de IFN [elementos estimulados de respuesta-IFN (ISRE)] en la clula tratada (Figura 4.2). La
importancia del IFN tipo I a la resistencia innata est grficamente confirmada por el hecho de
que ratones deficientes del receptor IFN (IFNAR) son altamente susceptibles a las infecciones
letales con virus, pero no con patgenos intracelulares como la bacteria Listeria
monocytogenes. Similarmente, humanos con deficiencias en las rutas de sealizacin
disparadas por IFN (STST, TYK, IFNAR) a menudo mueren de enfermedades virales.

Interfern Tipo II (IFN tipo II). Solo hay una forma de IFN tipo II, designado IFN-el cual es un
producto de las clulas T y NK. Las clulas T activadas son especialmente fuentes importantes para la produccin de
IFN-, el cual es importante para la expresin de la inmunidad mediada por clulas de la inmunidad adquirida. El IFN
tipo II se une al receptor IFN-, el cual es un tetrmero compuesto de dos heterodmeros de IFNGRs 1 y 2, para activar
las rutas de sealizacin celular (incluyendo JAK y STAT) para inducir sitio activo de IFN- (GAS). Esta activacin
transcripcional inducida por IFN- genera una amplia inmunidad antimicrobiana en las clulas tratadas, especialmente
macrfagos. El IFN-g es particularmente importante en conferir inmunidad a microorganismos intracelulares, adems de
los virus.
Interfern tipo III (IFN tipo III). El IFN tipo III representado por el IFN- fue descrito recientemente
y parece que representa un IFN tipo I ancestral, quiz con una funcin reguladora.

Adems de las importantes actividades antivirales, particularmente esas del IFN tipo I, los IFNs tambin
estimulan las respuestas de la inmunidad adquirida, incluyendo el incremento de la lisis celular
mediada por linfocitos T citotxicos mediante la expresin aumentada de CMH tipo I en clulas
infectadas. Similarmente, el IFN- promueve la expresin de CMH tipo II en macrfagos, activa
macrfagos y clulas NK y modula la sntesis de inmunoglobulinas por los linfocitos B. el IFN tipo II
tambin ejerce efectos sistmicos incluyendo pirexia y mialgia.

Figura 4.2 Receptor de activacin o complejo ensamblado de ligando-receptor por interferones (IFNs) tipos I, II o III. Los IFNs tipo I
(, y en credos; en rumiantes) interactan con IFN (a, b, ) con el receptor 1 (IFNAR1) e IFNAR2; el IFN- tipo II interacta con el
receptor 1 de IFN-(IFNGR1) e IFNGR2; los IFN- interactan con el receptor IFN- 1 (IFNRL1; tambin conocido como IL28RA) y el receptor 2 de IL-10
IL10R2; tambin conocido como IL10RB). El IFN-g tipo II es un homodmero no paralelo que exhibe dos ejes de simetra. Une dos cadenas de receptores IFNGR1,
ensamblando un complejo que est estabilizado por dos cadenas de IFNGR2. Estos receptores estn asociados con dos cinasas de la familia JAK: Janus 1 (JAK) y
tirosina (TYK2) para los IFNs tipos I y III.; JAK1 y JAK2 para el IFN tipo II. Todos los receptores para cadenas de IFN pertenecen a la clase 2 de la familia de
receptores para citocina helicoidal, lo cual es definido por la estructura de los dominios extracelulares de sus miembros: aproximadamente 200 amino cidos
distribuidos en dos subdominios de 100 amino cidos (mdulos de fibronectina tipo III), construidos por siete cadenas- arregladas en un sndwich-. Los dominios
de 200 amino cidos generalmente contienen el sitio de unin del ligando. Los receptores IFNAR2, IFNLR1, IL10R2, IFNGR1 e IFNGR2 son representantes clsicos
de esta familia, mientras que IFNAR1 es atpico, porque su dominio extracelular est duplicado.
GAS, sitio activado del IFN-IRF9, factor regulador 9 del IFN; ISGF3, factor 3 estimulador de genes de IFN (se refiere al complejo
STAT1STAT2IRF9); ISRE, elemento estimulador de respuesta del IFN; P, fosfato; STAT1/2, transductores de seales y activadores
de transcripcin 1/2.
[From E. C. Borden, G. C. Sen, G. Uze, R. H. Silverman, R. M. Ransohoff, G. R. Foster, G. R. Stark. Interferons at age 50: past, current

Induccin a la Produccin de IFN

La induccin del interfern tipo I involucra una activacin mediante los receptores de reconocimiento
de patrones, los cuales son sensores no especficos de infecciones virales que detectan estructuras
virales nicas (PAMPs), conduciendo a la transduccin de numerosos genes que codifican para
protenas que se emplean en las respuestas inmunes innata y adquirida, y entre ellas el IFN tipo I. De
manera muy importante, estas respuestas pueden ser activadas por varias rutas redundantes,
citoplsmicas y extracitoplsmicas (Figura 4.3). Los TLRs son por mucho, los responsables de la

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deteccin de patgenos en los ambientes extracelulares, y de la subsecuente induccin de produccin

de IFN tipo I. Los TLRs detectan PAMPs y seales por la va de los dominios de los receptores
citoplsmicos Toll/IL-1 (TIR) para que mediante transcripciones, activar genes crticos, incluyendo a los
que codifican para el IFN tipo I. Diferentes TLRs detectan diferentes PAMPs; as TLR7 y TLR8 detectan
ARN de cadena sencilla (ssARN) y son importantes en la produccin de IFN tipo I en infecciones de
influenza e inmunodeficiencia viral humana, el TLR9 detecta ADN viral, como en la infeccin por
herpesvirus, y el TLR3 detecta ARN de doble cadena (dsARN) que es caractersticamente producido
durante las infecciones virales pero no est presente en las clulas normales. Estos receptores estn
predominantemente ubicados en el endosoma, en donde pueden fcilmente detectar virus que
entraron por endocitosis, incluyendo virus o su cido nucleico liberado de clulas adyacentes
apoptticas o lisadas. La induccin de la transcripcin del IFN tipo I despus de la activacin de la ruta
extracitoplsmica es dependiente del TLR especfico que es activado; as el TLR3 utiliza un adaptador
especfico llamado TRIF (dominio TIR-que contiene el adaptador de induccin de IFN-) que media la
activacin de: (1) NF-B, (2) IRF3, y (3) activacin de la Protena 1 (AP1), que conduce a la regulacin
positiva de la transcripcin del gen IFN-. En contraste, la activacin de los TLRs 7, 8 y 9 es mediada
por diferenciacin mieloide de la protena 88 (MyD88) de respuesta primaria asociado al adaptador
molecular con el dominio TIR, lo cual provoca la activacin de IRF7, NF-B y AP1, que provoca la
activacin transcripcional de los genes de IFN- e IFN- (Figura 4.3). Especialmente altos niveles de
expresin de esta ltima ruta sucede en las clulas dendrticas, presumiblemente debido a su papel
central y crtico en ambas respuestas inmunes.
Las vas citoplsmicas para la deteccin de patgenos y la induccin de IFN tipo I tambin ocurren por
la va de la sealizacin independiente del TLR involucrando a protenas de ARN helicasa como el gen
inducible del cido retinoico (RIG-1) y el gen 5 asociado a la diferenciacin del melanoma (MDA-5)
(Figura 4.3). La ruta citoplsmica incluye la protena de sealizacin antiviral mitocondrial (MAVS;
tambin llamada IPS-1) y lleva a la activacin de NF-B, AP-1 e IRF3, teniendo como resultado la
activacin transcripcional de los genes de respuesta innata incluyendo el del IFN tipo I. Tambin hay
rutas de sealizacin independiente de TLR- y RIG-1 que proporcionan una mayor redundancia en la
deteccin de disparadores de los microorganismos (PAMPs), los cuales son crticos para montar una
pronta respuesta antiviral y, por supuesto la supervivencia del hospedero.

Figura 4.3 Rutas por endosomas y citoplsmicas para el reconocimiento de los virus y la produccin de IFN. En las clulas
dendrticas los TLR7 y TLR8 estn localizados en compartimientos endosmicos reconocen al ssARN viral mediante infeccin
directa o captura autofgica de material viral del citoplasma, o fagocitosis de partculas virales o de otras clulas infectadas. La
seal de ambos TLRs es por el adaptador MyD88, que hace interaccin con el complejo IRAK4-IRAK1-TRAF6 que conduce a la
fosforilacin y activacin del IRF7 y la subsecuente transcripcin del IFN. El TLR3 est localizado en los endosomas de DCs,
macrfagos, clulas epiteliales y fibroblastos, se activa al encontrar dsARN. Despus de su activacin, las seales del TLR3 pasan
a su adaptador, TRIF, el cual lleva a una activacin de cinasas IKK no reguladas (TBK1/IKK ) y la subsecuente fosforilacin y
translocacin nuclear del IFR3. El Factor Nuclear B (NF-B) tambin es activado por medio de seales del TRIF mediante cinasas
reguladas IKK (IKK , y ). El RIG-1 y el MDA5 localizados en el citoplasma son expresados en la mayora de las clulas y
reconocen al dsARN con 5 ppp o un dsARN largo, respectivamente. Estos dos sensores citoplsmicos una vez activados
interactan y marcan mediante el adaptador MAVS, localizado en la mitocondria. Esta ruta de sealizacin, anloga a la del TLR3,
lleva a la activacin de cinasas IKK reguladas y no reguladas y consecuente translocacin nuclear del NF-B y del IRF3. La
concurrente activacin positiva de IRF3 y NF-B permite la transcripcin de genes de IFN y su sntesis y exportacin.
DCs, clulas dendrticas; IKK, IB cinasas; IRAK, receptor de interleucinas asociadas a las cinasas; IRF, factor regulador de IFN;
MDA5, gen 5 asociado a la diferenciacin de melanoma; MVAS, protena de seales antivirales mitocondrial; RIG, gen inductor del

Actividad del IFN Tipo I

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El IFN tipo I producido y liberado por las clulas infectadas (como se describi antes) ejecuta sus
efectos en las clulas adyacentes mediante el receptor (IFNAR) con actividad de unir y sealar para
llevar a la induccin de la respuesta elemental del IFN, con la activacin transcripcional de ms de 300
genes de IFN (ISGs). La mayora de estos ISGs codifican receptores de reconocimientos de patrones
celulares o protenas que regulan las rutas de sealizacin o a los factores de transcripcin que
amplifican la produccin de IFN, mientras otros promueven un estado antiviral por la va de la
remodelacin del citoesqueleto, apoptosis, eventos post-transcripcin (edicin, particin y degradado
de ARNm), o modificacin post-traduccin (Figura 4.4).
Esas protenas que prueban ser crticas en la induccin de estado antiviral inducido por el IFN, incluyen:

ISG15, la cual es un homlogo de ubiquitina que no est constitutivamente en las clulas.

Adems de que la ubiquitina es una protena celular clave para la regulacin de la respuesta
innata, y la ISG15 aparentemente puede ejecutar funciones similares con ms de 150 protenas
blanco en clulas estimuladas por IFN. Las actividades de ISG15 pueden regular todos los
aspectos de la ruta del IFN, incluyendo la induccin, sealizacin y accin.
MxGTPasa es una enzima hidrolizante que, como la ISG15, no est constitutivamente
expresada. La enzima est localizada en el retculo endoplsmico liso, en donde afecta la
formacin de vesculas, especficamente actuando sobre el nucleocpside viral en las clulas
infectadas para prevenir la maduracin del virus.
La ruta de la proten-cinasa (PKR) est constitutivamente expresada en un nivel muy bajo, pero
se eleva rpidamente al estimulas el IFNAR. En la presencia de dsARN, hay fosforilacin de la
proten-cinasa, alargando (traduccin) al factor de iniciacin eIF-2 y previene la recirculacin de
los nucletidos cclicos (GDP), deteniendo la sntesis proteica. Esta ruta inducida por el IFN es
especialmente importante para inhibir la replicacin de reovirus, adenovirus, virus de viruela e
influenza entre muchos otros.
La ruta de la 2-5 oligoadenilato sintetasa (OAS), como la ruta de la PKR, est constitutivamente
expresada en un bajo nivel. Despus de la estimulacin del IFNAR y en la presencia de dsARN,
esta enzima produce oligoadenilatos con una unin 2-5 distintiva, en contraste con el linaje
normal 3-5. Estos oligoadenilatos 2-5 activan a la RNasa celular (ribonucleasa) que degrada al
ARN, escindiendo al ARN viral genmico y mensajero. Los picornavirus son especialmente
susceptibles a la inhibicin por esta ruta, como tambin el virus del oeste del Nilo.
Han sido identificadas otras rutas en cultivos celulares tratados con IFN, pero su importancia
individual parece se inequvocamente probada en ratones knockout.
Figura 4.4 El estado antiviral. (A) El
desarrollo del estado antiviral empieza con
la accin del interfern sobre una clula no
infectada. El resultado de la cascada de
seales de transduccin mostrado en la
Figura 4.2 es la induccin de la expresin
de ms de 300 genes de los cuales tres se
muestran aqu: RNasa L, el 2-5 oligo (A)
sintetasa (2-5 OS), y la proten-cinasa
(PKR) dependiente de ARN de doble
cadena (dsARN). Estas protenas estn
latentes hasta que son activadas por
infeccin viral. PKR y 2-5 OS, son
activadas por dsARN que es producido
durante la infeccin viral. Una vez activada
la PKR, se autofosforila y luego fosforila al
factor 2 de iniciacin eucaritico (EIF2). La
sintetasa
activada
produce
oligonucletidos trimricos que activan a la
RNasa L.
(B) El EIF2 fosforilado y la RNasa L activada
son caractersticos del estado antiviral
con el cual la clula eucaritica es
refractaria a la infeccin por una amplia
variedad de virus. El EIF2 fosforilado no
puede servir para iniciar la traduccin del
ARNm por los ribosomas, y la RNasa L
activada degrada al los ARNm virales y

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En resumen, el IFN tipo I es producido despus de la infeccin viral de muchos tipos de clulas, y el IFN
que es liberado de estas clulas entonces induce un estado antiviral en las clulas adyacentes (efecto
autcrino o parcrino). Las mltiples rutas antivirales que son activadas en las clulas tratadas con IFN
son intrnsecamente reguladas por requerimientos para la presencia de cofactores como el dsARN,
demostrando que estas rutas solo pueden ser activadas cuando las clulas tratadas con IFN son
subsecuentemente infectadas con un virus. Esta fuerte regulacin es necesaria debido a que algunos
de estos mecanismos de defensa antiviral tambin comprometen las funciones normales de las clulas.

Apoptosis
Desde siempre se ha credo que las clulas muertas por virus los hacan por medios directos como
usurpando su maquinaria celular o rompiendo la integridad de su membrana, finalmente, conduciendo
a la necrosis de la clula infectada. Sin embargo, est ahora claro que la apoptosis en un evento
importante y comn durante muchas infecciones virales. La Apoptosis es el proceso de muerte celular
programada, el cual es esencialmente un mecanismo de suicidio celular que activa el hospedero como
un ltimo intento de eliminar la fabricacin de virus antes de que la produccin de la progenie viral sea
completada. Hay dos rutas celulares diferentes que disparan la apoptosis (Figura 4.5), ambas culminan
en la activacin de las enzimas celulares caspasas que median la muerte celular (la llamada fase de
ejecucin). Una vez activadas, las caspasas son responsables de la degradacin del ADN y protenas
celulares. Las alteraciones de la membrana celular de la clula condenada promueven su
rconocimiento y remocin por clulas fagocticas. Las dos rutas de iniciacin son:
1. La Ruta Intrnseca (Mitocondrial). La ruta mitocondrial es activada como resultado de una
permeabilidad aumentada de las membranas de las mitocondrias subsecuente al dao celular,
que est asociado con la infeccin viral. Los daos severos alteran el delicado balance entre
molculas anti-apoptticas (p. ej., Bcl-2) y pre-apoptticas (p. ej., Bax) en la membrana de la
mitocondria y en el citosol, resultando en una progresiva licuacin de las protenas
mitocondriales (como el citocromo C) en el citosol en donde estas protenas activan a las
caspasas celulares.
2. La ruta extrnseca (el receptor de la Muerte). La ruta extrnseca es activada por la unin de
receptores especficos de membrana, con miembros de la familia de receptores TNF (TNF, Fas, y
otros). Esta unin de la citocina TNF a su receptor celular puede disparar la apoptosis.
Similarmente, linfocitos T citotxicos que reconocen clulas infectadas por virus en una manera
antgeno especfica, pueden unir el receptor Fas, activar el dominio de la muerte, y disparar la
ruta de la caspasa ejecutora que luego elimina a la clula antes de que ella se convierta en una
fbrica funcional de virus.
Adems de la citlisis mediada por el receptor de la muerte, los linfocitos T citotxicos y las clulas NK
pueden iniciar la apoptosis de clulas blanco infectadas por virus, utilizando mediadores preformados
tales como perforinas y granzimas que directamente activan las caspasas en la clula blanco

38

Figura 4.5 Mecanismos de apoptosis. Las dos rutas de la apoptosis difieren en su induccin y regulacin y ambas
culminan en la activacin de las caspasas ejecutadoras. [From Robbins & Cotran Pathologic Basis of Disease, V. Kumar, A. K.
Abbas, N. Fausto, J. Aster, 8th ed., p. 28. Copyright
Saunders/Elsevier (2010), with permission.]

Genes Silenciadores (ARN de Interferencia)

Las clulas utilizan molculas de ARN pequeas que causan interferencia (ARNi) para silenciar genes a
modo de regular el desarrollo normal y los procesos fisiolgicos, y potencialmente interfiere con la
replicacin viral. Los ARNi son producidos de segmentos largos de ssARN o dsARN, posterior a su
escisin por una endoribonucleasa (DICER). La produccin de ARNi inicia la formacin del complejo
ARN-silenciador que incluye una endonucleasa (argonauta) que degrada a los ARNm con una secuencia
que es complementaria a la del ARNi (Figura 4.6). Las clulas que utilizan este mecanismo para
interrumpir la replicacin viral por la produccin de ARNi que son complementarios a genes virales
especficos; sin embargo, los ARNi tambin pueden ser producidos durante las infecciones virales que
especficamente inhiben las rutas de proteccin celular antiviral

Inmunidad Adquirida
La inmunidad adquirida incluye componentes humorales y celulares. La inmunidad humoral es
principalmente mediada por anticuerpos (Abs) que son liberados por los linfocitos B, mientras que la
inmunidad celular es mediada por linfocitos T (Figura 4.7). Adems hay, clulas dendrticas,
macrfagos, clulas NK y citocinas siendo todos ellos crticos en las respuestas inmunes adquiridas. La
inmunidad adquirida es especfica de antgeno, as que estas respuestas toman tiempo (por lo
menos algunos das) para desarrollarse, y este tipo de inmunidad es mediada por linfocitos que poseen
receptores de superficie que son especficos para cada patgeno. La inmunidad adquirida estimula
memoria para mucho tiempo despus de la infeccin, significando esto que las respuestas inmunes
protectoras pueden rpidamente ser reactivadas con una re-exposicin del individuo al mismo
patgeno.

39

Figura 4.6 Mecanismos de interferencia de ARN. Molculas de dsARN largas (dsARN) son escindidas por la RNasa III y
subsecuentemente procesadas por DICER en pequeos ARNs de interferencia (ARNi), los cuales son dsARNs de 21-22
nucletidos (nt) con 2-nt sobrantes en el extremo 3. Entonces los ARNi introducen el complejo silenciador ARN
inducido (RISC), en donde la polaridad de la cadena de cido nucleico es selectivamente degradada. Los ARNmi son
codificados como horquillas auto-complementarios no totalmente en genomas virales y celulares. Ellos son escindidos
por Drosha en el ncleo y los pre-micro ARN (pre-miARN) son exportados al citoplasma por la Exportina 5.en donde
luego son tambin procesados por DICER. Los ARNsi silencian (bloquean) genes por unirse en el contexto del RISC a
los ARNm que son exactamente complementarios, y causan degradacin del ARNm. Los ASRNmi a menudo contienen
algunos errors y generalmente ejecutan su efecto en inhibir la traduccin. Los ARNsi tambin pueden entrar al
complejo silenciador transcripcional de ARNinducido (RITS), con el cual recluta una enzima para metilar al ADN en
cromatina, cambindola a cromatina inactiva. Los RITS y RISC contienen protenas argonautas (Agos). miRNP, micro

Las Citocinas fueron descritas en la seccin de inmunidad innata, pero ellas tambin son importantes en las respuestas de la
inmunidad adquirida, enfatizando la manera de cmo las respuestas inmunes adquiridas e innatas estn interrelacionadas. Las
citocinas que son especialmente importantes en la inmunidad adquirida son producidas principalmente por clulas T CD+ despus
de la estimulacin antignica, y promueven la proliferacin, diferenciacin y activacin de linfocitos. Entra las citocinas
importantes de la inmunidad adquirida, tenemos a las siguientes interleucinas: IL-2, IL-4, IL-5, e IL-17 y el IFN- (IFN tipo II)
Los linfocitos B producen anticuerpos (Abs, inmunoglobulinas, gamaglobulinas) que son responsables
de neutralizacin y eliminacin de virus libres. Los Abs tambin median una proteccin de mucho
tiempo contra la reinfeccin para muchos virus. Los linfocitos B expresan receptores de superficie que
especficos para antgenos particulares: despus de la exposicin al antgeno como una infeccin viral,
los linfocitos B evolucionan hacia clulas plasmticas que secretan anticuerpos con la misma
especificidad antignica como la que hay en los receptores de superficie de las clulas B, de los cuales
ellas se originaron. La diversidad de receptores es generada por rearreglos de los genes que codifican
porciones de molculas de inmunoglobulinas individuales. La respuesta adquirida de las clulas B a la
infeccin involucra conexiones de clases de inmunoglobulinas y una especificidad progresiva, conocida
como maduracin de afinidad.
Una subclase de linfocitos B, llamada clulas B1, secreta inmunoglobulinas ampliamente reactivas,
conocidas como anticuerpos naturales, que se produjeron sin un estmulo antignico especfico. De esta
manera, estos Abs naturales proporcionan una unin entre las respuestas humorales innata y adquirida
y proporcionan una primera lnea de defensa humoral.
Los linfocitos T tambin poseen receptores de superficie antgeno-especficos. Como el reconocimiento
antignico de las clulas B, la especificidad y diversidad del receptor es generada por rearreglo
somtico de los genes que codifican para el receptor de clulas T. hay dos clases importantes de
clulas T: unas en las que los receptores constan de un heterodmero de cadenas y /llamadas clulas
T ), y otras con el receptor compuesto por el heterodmero y (denominadas clulas T ). Las
clulas T reconocen pequeos pptidos expresados en la superficie de las clulas en asociacin con
antgenos CMH, los cuales confieren exquisita especificidad a los mecanismos inmunes celulares
mediado por estas clulas. En contraste, aunque las clulas T tambin reconocen pequeos pptidos
en las superficies celulares, ellos lo hacen sin la restriccin del CMH. Esta carencia de restriccin de

40

CMH, acoplada con el hecho de que las clulas T son especialmente abundantes en las superficies
mucosas que sirven de puerta de entrada de los virus (como la cubierta mucosa del aparato
gastrointestinal), sugiere que estas clulas pueden servir como centinelas para remover clulas
infectadas. As, probablemente las clulas T constituyen un puente entre la inmunidad antiviral
adquirida e innata.

Figura 4.7 Las principales clases de linfocitos y sus funciones en la inmunidad adquirida. [From Robbins & Cotran
Pathologic Basis of Disease, V.
Kumar, A. K. Abbas, N. Fausto, J. Aster, 8th ed., p. 185. Copyright Saunders/Elsevier (2010), with permission]

La inmunidad celular (inmunidad mediada por clulas), es realizada por linfocitos y macrfagos que
especficamente eliminan clulas infectadas por virus. Los linfocitos que median la lisis celular son los
linfocitos T citotxicos (CTLs) que tpicamente expresan (CD8) en su superficie (CTLs CD8+), que lisan
clulas que expresan antgenos virales en el contexto de molculas apropiadas del CMH clase I.
Porciones de protenas virales inmunognicas producidas en el citosol de la clula infectada son
transportados al retculo endoplsmico, en donde se asocia con las molculas del CMH tipo I. Este
complejo es dirigido a la superficie celular, en donde los pptidos virales puedan ser reconocidos por
linfocitos T citotxicos antgeno-especficos que entonces lisan a la clula infectada induciendo
apoptosis.
Las Clulas Dendrticas (DCs) tambin son jugadores importantes en la inmunidad innata y adquirida,
derivan sus nombres por filamentos citoplsmicos abundantes, finos (dendritas). Hay dos grupos
importantes de ellas:

41

Clulas Dendrticas Interdigitales son muy importantes clulas presentadoras de antgeno que
estn localizadas en las puertas de entrada de los virus, como la piel en/debajo de las
superficies epiteliales mucosas que cubren los aparatos gastrointestinal, respiratorio y
urogenital. Tambin estn presentes en el intersticio de virtualmente todos los tejidos. Estas DCs
expresan receptores de superficie de reconocimiento de patrones que pueden rpida y
genricamente responder a la presencia de estructuras virales (PAMPs) por la produccin y
liberacin de citocinas antivirales como el IFN. Adems, estas clulas migran a las regiones de
las clulas T en los tejidos linfoides, en donde pueden presentar el antgeno a las clulas T y,
debido a que expresan altos niveles de molculas estimulatorias como los antgenos CMH, son
potentes inductoras de la activacin de las clulas T.
Clulas dendrticas Foliculares aparecen en los centros germinales de los tejidos linfoides, como
los linfonodos y el bazo. Estas clulas capturan eficientemente (fagocitan) antgenos circulantes,
los cuales luego son presentados a los linfocitos B que expresan receptores de superficie con
una especificidad relevante, produciendo la activacin de las clulas B y el desarrollo de la
inmunidad humoral (mediada por anticuerpos)

Los Macrfagos son clulas importantes derivadas de la mdula sea que son responsables de
fagocitar microbios y matarlos. Ellas pueden ser activadas por citocinas como clulas efectoras que
median la inmunidad celular mediante su capacidad antimicrobiana aumentada. La activacin de los
macrfagos es mediada por IFN- que es liberado por clulas T especficas de antgeno y clulas NK.
Los Antgenos del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) son expresados en la superficie de
clulas importantes de la inmunidad adquirida. Los antgenos del CMH son protenas polimrficas y su
funcin ms importante es mostrar porciones de protenas inmunognicas a los linfocitos T antgenoespecficos (Figura 4.8). Las molculas CMH tipo I son expresadas en la superficie de todas las clulas
nucleadas, y cuando estn en la superficie de las clulas infectadas tpicamente muestran protenas
inmunognicas de los virus infectantes que son reconocidas por linfocitos T citotxicos antgenoespecficos. Normalmente, las protenas virales producidas en el citoplasma de las clulas infectadas
son degradadas en los proteosomas, y los fragmentos de estas protenas son entonces transportados
al retculo endoplsmico en donde son unidos a molculas de CMH tipo I recin sintetizadas. La
asociacin de la microglobulina 2con el complejo del CMH tipo I y el pptido viral forman un
heterodmero estable que es transportado a la superficie celular, en donde los antgenos virales pueden
ser reconocidos por linfocitos T citotxicos antgeno-especficos. La muerte mediada por esta clula T
est restringida a las clulas blanco que expresan el mismo haplotipo de CMH clase I. Las molculas del
CMH tipo II, en contraste, son expresadas principalmente en clulas presentadoras de antgeno,
denominadas linfocitos B, macrfagos y clulas dendrticas. Estas molculas exponen protenas virales
en la superficie celular que son reconocidas por linfocitos T CD4+ antgeno-especficosesto es, esas
con receptores de superficie que especficamente reconocen y se unen al pptido mostrado. En este
escenario, las protenas virales son degradadas hasta pptidos en las vesculas endocticas y luego son
asociados con molculas del CMH II que son sintetizadas en esas mismas vesculas. El complejo
molecular del CMH II y pptido viral es luego transportado a la superficie celular para mostrarlo y que
sea reconocido por linfocitos T CD4+ antgeno-especficos.

Inmunidad Pasiva
Los Abs especficos solos son altamente efectivos para
prevenir muchas infecciones virales. Por ejemplo, la
inmunizacin pasiva (inyeccin de Abs) temporalmente
protege a los animales contra infecciones con los virus
que causan distemper canino, panleucopenia y
sndrome reproductivo y respiratorio de los porcinos
(PRRS), entre otros. Es ms, la inmunizacin natural
pasivaesto es, la transferencia de Abs de la madre al
feto o recin nacidolo protege durante los primeros
meses de vida contra la mayora de las infecciones que
la madre ha experimentado.
La inmunidad natural pasiva es importante por dos
significativas razones: (1) es esencial para la proteccin
del animal joven, durante las primeras semanas o
meses de vida, de la mirada de microorganismos y
virus que estn presentes en el ambiente en el cual
nacen los animales; (2) los Abs derivados de la madre,
interfieren con la inmunizacin activa del recin nacido
y debe por lo tanto, ser tomada en cuenta cuando se
disean esquemas de vacunacin. Los Abs maternos
pueden ser transmitidos en la yema del huevo en las
aves, cruzar la placenta en primates y roedores, o por
la va del calostro y/o leche en ungulados y otros
mamferos.
Figura 4.8 Procesamiento de antgenos y exposicin por molculas del Complejo

Los mamferos difieren sorprendentemente en la ruta mayor de Histocompatibilidad (CMH). A. En la ruta de CMH I, los pptidos son
producidos de las protenas en el citosol y son transportadas al retculo
predominante de transferencia de Abs maternos, dependiendo
de (RE),
la estructura
la placenta
de cada
endoplsmico
en donde se unen de
a molculas
CMH I. Los complejos
CMHpptidos son transportados a la superficie celular y exhibidos para el
especie. En especies como los primates en las cuales la circulacin
sangunea
materna
y
fetal
est en
reconocimiento por las clulas TCD8+. B. En la ruta del CMH II, las protenas son
vesculas
y degradadas
a pptidos,
que se unen
las molculas
relativa fuerte aposicin, Abs de la inmunoglobulina (Ig) Gdigeridas
(peroenno
de la
IgM) son
capaces
de acruzar
la de
CMH II para ser transportados en las mismas vesculas. Estos complejos CMH IIplacenta, de esa manera la inmunidad materna es transmitida
principalmente
ruta. por
Algunas
pptido son expresados
en la superficiepor
celularesa
y reconocidos
clulas T CD+.
[From Robbins & Cotran Pathologic Basis of Disease, V. Kumar, A. K. Abbas, N.
especies con una placenta ms compleja, como los ratones,
los anticuerpos maternos son adquiridos
por los receptores de inmunoglobulinas que estn en el saco de la yema. En contraste, la placenta

42

compleja de la mayora de los animales domsticos sirve como una barrera a las inmunoglobulinas
maternas; en estas especies, esta inmunidad es transmitida al recin nacido por la va del calostro y, a
veces un poco por la leche. Algunas especies difieren en lo que se refiere en particular a las clases u
subclases de inmunoglobulinas que son transferidas principalmente al recin nacido en el calostro, pero
en la mayora de las especies domsticas es principalmente IgG. En los bovinos y ovinos hay una
transferencia selectiva de IgG1 desde el suero cruzando el epitelio alveolar de la glndula mamaria
durante las ltimas semanas de preez. Los Abs de la clase IgG1 son una proteccin importante contra
las infecciones entricas durante la lactacin.
Las grandes cantidades de IgG presentes en el calostro son ingeridas y translocadas a vesculas
intracitoplsmicas por clulas especializadas presentes en la prima parte del intestino delgado para
poder alcanzar la circulacin del recin nacido. Pequeas cantidades de otros Abs (IgM, IgA) presentes
en el calostro o leche pueden en algunas especies, tambin ser translocados por el intestino, pero
desaparecen pronto de la circulacin del animal joven. El periodo despus de nacer durante el cual los
Abs ingeridos en el calostro, son translocados, est perfectamente definido y es muy breve (alrededor
de 48 horas) en la mayora de los animales domsticos, pero puede ser muy prolongado en roedores;
los ratones continan adquiriendo IgG materna por ms de tres semanas.
En las aves hay una transferencia selectiva de IgG desde la circulacin materna, de manera que la IgG
es concentrada en el saco de la yema. La IgG entra a la circulacin vitelina (yema), y de ah al pollo,
desde el da 12 de incubacin. Alguna IgG tambin es transferida al lquido amnitico y es deglutida por
el pollo. Cerca del momento de la eclosin, el saco de la yema con el resto de inmunoglobulinas es
completamente capturado en la cavidad abdominal y absorbido por el pollo.
Los Abs maternos en la circulacin sangunea del mamfero recin nacido o ave recin eclosionada son
destruidos rpidamente, con una cintica primordial. La vida media, la cual es de alguna manera larga
en los adultos, tiene un rango de 21 das en la vaca y el caballo, 8-9 das en el perro y gato, a
solamente dos das en el ratn. Por supuesto, el recin nacido estar protegido contra la infeccin de
cualquier virus en particular, solamente si la madre contiene Abs IgG especficos, y la proteccin ser
mucho ms duradera que la de la vida media de una IgG si el ttulo inicial contra ese virus es alto.
Aunque las concentraciones de IgA transferidas por el calostro al intestino del recin nacido son
considerablemente bajas contra las de la IgG, Abs de este isotipo son importante en la proteccin del
neonato contra los virus entricos contra los cuales la madre ha desarrollado inmunidad. Es ms, hay
evidencia de que aunque la translocacin intestinal haya cesado, las inmunoglobulinas presentes en la
lecheprincipalmente IgA, pero tambin IgG e IgMpueden continuar proporcionando alguna
inmunidad protectora contra las infecciones intestinales. A menudo el recin nacido encuentra virus
mientras est parcialmente protegido. Bajo estas circunstancias los virus pueden alcanzar la
replicacin, pero solo en pequeas reas, estimulando una respuesta inmune sin causar una
significativa enfermedad, y el neonato infectado as adquiere inmunidad activa, parcialmente protegido
por la inmunidad materna.

Falla de la Transferencia Materna de Anticuerpos

La falla (completa o parcial) de la transferencia de anticuerpos por la madre es la causa ms comn de
enfermedad por inmunodeficiencia en el ganado, y predispone a los animales afectados a las
enfermedades infecciosas, particularmente entricas y respiratorias. La inmunizacin materna asegura
proteccin pasiva a los neonatos por lo que es una estrategia importante en la prctica de la medicina
veterinaria, en conjuncin con adecuadas prcticas de manejo para asegurar que los recin nacidos
rpidamente reciban adecuadas cantidades de calostro.

Mecanismos Virales de Evasin y Escape

En la guerra declarada entre el hospedero y los agentes infecciosos, los virus han desarrollado
mecanismos muy sofisticados para evitar diversas respuestas protectoras del hospedero. Adems de
las diferentes estrategias utilizadas por los virus para facilitar la infeccin persistente [incluyendo el
crecimiento en clulas inmunes y/o en sitios inmunolgicamente privilegiados, integracin o deriva antignica], los virus han
desarrollado mecanismos diversos y complejos para evadir las respuestas protectoras inmunes innata y adquirida del hospedero.
Entre los ejemplos de estos mecanismos se incluyen los siguientes:

43

Inhibicin de sntesis de macromolculas del hospedero

Evasin de la muerte por CTL de clulas infectadas
Prevencin de la lisis por clulas NK de clulas infectadas
Interferencia con la apoptosis

Contra-defensa a las citocinas

Evasin del estado antiviral
Rutas de silenciamiento de genes virus especficos

Inhibicin de Sntesis de Macromolculas del Hospedero

Muchos virus, en seguida despus de la infeccin, inhiben la transcripcin y/o traduccin de protenas
celulares normales, y rpidamente quebrantan la maquinaria de la clula infectada para la produccin
de virus progenie. Este sbito apagado de la clula hospedera rpidamente modifica la respuesta
innata hacia el virus infectante, incluyendo la produccin de protenas crticas como las del CMH I,
citocinas antivirales como el IFN tipo I. El resultado es que sin respuestas inmunes innatas, el virus
infectante puede replicarse y diseminarse antes de que el animal pueda desarrollar una respuesta
inmune adquirida. Esta estrategia es ampliamente utilizada por los virus con ARN, muchos de los
cuales tienen ciclos de replicacin muy rpidos.

Evasin de la Muerte por CTL (linfocitos Tcitotxicos) de las Clulas Infectadas

La muerte de las clulas infectadas mediante los linfocitos T citotxicos (CTL) requiere de la
presentacin de antgenos virales en la superficie de la clula infectada en el contexto de una molcula
de CMH I apropiada; de esa manera los virus han desarrollado estrategias para suprimir la expresin
normal de molculas CMH I para inhibir la lisis mediante los CTL. Estas estrategias incluyen: (1)
supresin de produccin de molculas CMH I, mediante el apagado de sntesis proteica del hospedero;
(2) produccin de protenas codificadas por el virus que interrumpan la produccin de protenas del
CMH I, o su transporte desde el retculo endoplsmico al aparato de Golgi o a la superficie celular; (3)
produccin de protenas codificadas por el virus que interrumpan la funcin o la viabilidad de las
molculas CMH I; produccin de homlogos del las molculas del CMH I codificados por el virus, que
puedan unirse a la microglobulina 2 y pptidos virales, pero son disfuncionales desde el punto de vista
de la actividad de los CTL.

Prevencin de la Lisis Mediada por Clulas NK de las Clulas Infectadas

En contraste a la lisis mediada por los CTL que requieren la presencia de concentraciones apropiadas
de de antgeno CMH I en la superficie de las clulas infectadas, la citlisis mediada por las clulas NK es
promovida por reducidos niveles de antgeno CMH I en la superficie celular. Es tambin importante para
la actividad de las clulas NK, es el balance de molculas inhibitorias (como el antgeno CMH I) y
molculas estimuladoras (como las protenas de choque trmico) en la superficie celular, as algunos
virus selectivamente inhiben la produccin celular y la expresin de molculas que proporcionan
seales estimuladoras para la actividad de las clulas NK. Otros virus inhiben la produccin de la clula
hospedera por molculas inhibidoras y estimuladoras, de tal manera que la clula infectada est de
alguna manera protegida contra la lisis del CTL y de la clula NK.

Interferencia con la Apoptosis

Adems de la apoptosis inducida por las clulas NK o la lisis por los CTL, la sola infeccin viral puede
iniciar la apoptosis por la va extrnseca (receptor de la muerte) o intrnseca (mitocondrial). La
apoptosis es especialmente deletrea a los virus de ADN con relativo lento crecimiento, incluyendo los
poxvirus, herpesvirus y adenovirus, debido a que la apoptosis puede provocar la muerte de las clulas
infectadas con esos virus antes de que los niveles mximos de replicacin viral hayan sido
completados. As estos virus de ADN, en particular, han desarrollado una gran variedad de estrategias
para optimizar su replicacin por la inhibicin de varias rutas que normalmente conducen a la
apoptosis. La necesidad de estos virus para prevenir la apoptosis para promover su propia
supervivencia es reflejada en el hecho de que virus individuales pueden usar una combinacin de
estrategias, incluyendo: (1) inhibicin de la actividad ejecutora de las caspasas que median el dao
celularnotablemente por serpinas, las cuales son inhibidores de proteasas producidas por los poxvirus
que se unen y bloquean la actividad proteoltica de las caspasas; (2) inhibicin de la expresin,
activacin y sealizacin de los receptores de la muerte, como la produccin de receptores homlogos
que unen al TNF para que no inicie la ruta extrnseca, o molculas que especficamente bloquean la
estimulacin de la cascada que iniciara la activacin del receptor de la muerte; (3) la produccin de
protenas antiapoptticas homlogas codificadas por el virus como la Bcl-2; (4) produccin de protenas
que secuestran p53, la cual es una molcula pre-apopttica que se acumula en las clulas infectadas
con ciertos virus; (5) otros mecanismos todava poco entendido de inhibicin de apoptosis,
aparentemente usados por una mirada de protenas virales.

Contra Defensas a las Citocinas

44

Las citocinas son muy importantes en las respuestas inmunes de los animales a las infecciones virales,
de esta manera los virus tambin han desarrollado estrategias efectivas para combatir las funciones de
estos mediadores de la inmunidad antiviral. Ciertos virus han adquirido o modificado genes celulares,
creando genes virales que codifican para protenas que son homlogas a las citocinas o sus receptores.
Las citocinas homlogas codificadas por el virus pueden ser funcionales (llamadas virocinas) e imitan
los efectos biolgicos de la molcula autntica, o pueden ser no funcionales y simplemente unirse y
bloquear al receptor especfico de citocina para neutralizar su actividad. Similarmente, los receptores
homlogos de protenas codificados por virus tpicamente se unen y neutralizan a la citocina
respectiva. Otras protenas codificadas por virus interfieren con las rutas de activacin del receptor de
reconocimiento de patrones del dsARN activado 8como el TLR3 o RIG-1)que disparan la produccin de
IFN tipo I y otras citocinas virales, o con las rutas de sealizacin activadas por la unin del IFN a su
receptor (IFNAR)). Colectivamente, estas protenas codificadas por virus pueden modular las
actividades de una amplia variedad de citocinas importantes como IL-1, IL-6, IL-8, IFN tipos I y II, y TNF
para el beneficio replicativo del virus, por inhibir o promover las funciones mediadas por citocinas
especficas.

Evasin del Estado Antiviral

Como era de esperar, los virus tambin han evolucionado para elaborar estrategias que eviten la
actividad de los mecanismos efectores antivirales inducidos por el IFN, como los de las rutas de la
proten cinasa (PKR) y oligoadenilato sintetasa 2-5 (OAS). Estas incluyen la produccin de protenas
codificas por virus o molculas de ARN (ARNi) que se unen pero no activan a enzimas importantes (o
genes que las codifican) involucrados en estas rutas, la produccin de enzimas homlogas no
funcionales y la estimulacin de vas que desregulan la actividad y funcin de estas rutas protectoras
antivirales. Otras protenas codificadas por virus secuestran al dsARN, el cual es un co-factor crucial
para la PKR y la OAS. Los virus de diferentes familias de virus con ARN y ADN han incorporado
estrategias para evadir las rutas antivirales del hospedero, y sin duda en el futuro sern identificados
ms ejemplos de ello.

Rutas de Silenciamiento de Genes Virus Especficos

Los virus tambin han desarrollado contra defensas a las rutas de interferencia de ARN antiviral celular,
por la produccin de protenas codificadas por el virus o por molculas de ARNm pequeo de
interferencia (ARNsi) que inhiben pasos clave de la ruta celular, como se puede ver en la Figura 4.4.
Otros virus por si mismo producen molculas de ARNi para silenciar genes celulares clave involucrados
en la inmunidad antiviral.

Vacunas y vacunacin contra enfermedades virales

La vacunacin es la manera ms efectiva de prevenir las enfermedades virales. Aunque la deliberada
exposicin a virus virulentos tales como viruela humana (sinom. Variolizacin) fue reconocida como un
mtodo de profilaxis muy efectivo, aunque peligroso, el concepto de vacunacin es conocido que fue
ampliamente utilizado por Edward Jenner en 1798 para proteger a los humanos contra la viruela. Cerca
de un siglo despus, el concepto fue retomado por Louis Pasteur porque tena muchas aplicaciones y,
ms notablemente, podra ser usado para prevenir la rabia. Con la llegada de las tcnicas de cultivo
celular en los aos de 1950, una segunda era de vacunacin fue introducida y muchas vacunas de virus
atenuados (modificados) e inactivados fueron desarrolladas. Ms recientemente, el campo de la
vacunologa ha testificado la introduccin de muchas vacunas de nueva generacin producidas
mediante varias formas de ADN recombinante y tecnologas relacionadas. Mientras que las vacunas de
virus atenuados e inactivados de la segunda era continan siendo caballos de trabajo en la prctica
veterinaria, la nueva generacin de vacunas estn ahora complementndolas y crecientemente
reemplazndolas.
Hay algunas diferencias importantes entre las prcticas de vacunacin de animales y humanos. Las
restricciones econmicas son generalmente de menor importancia en la medicina humana que en la
medicina veterinaria. Tambin hay un mayor acuerdo en relacin a la seguridad y eficacia de las
vacunas para uso en medicina humana que la que hay en las vacunas para los animales y mejores
mecanismos para reportar las potenciales consecuencias adversas asociadas con el uso de productos
especficos. A nivel internacional, la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ejecuta un liderazgo
persuasivo en el uso de vacunas humanas, y mantiene varios programas que no tienen equivalente en
el uso de vacunas de uso animal por sus agencias hermanas, la Organizacin para la Agricultura y la
Alimentacin (FAO, siglas en ingls) y la oficina Internacional de Epizootias (OIE, sinom. Organizacin
Mundial de la Salud Animal). Es ms, en algunos pases, se ha permitido que en la manufactura y uso
de vacunas para enfermedades de los animales se empleen los patrones de manufactura de las
vacunas de uso humano.

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Antes de la reciente llegada de la nueva generacin de vacunas basadas en tecnologa de ADN

recombinante, hubo dos grandes estrategias para la produccin de vacunas virales: una empleando
cepas virales atenuadas (sinom. Modificadas) y la otra empleando preparaciones virales inactivadas
qumicamente. Las vacunas de virus atenuado se replican en animal receptor y, por lo tanto, amplifican
la cantidad de antgeno (virus) presentado al aparato inmune del hospedero. Hay muy importantes
beneficios en este planteamiento, porque la replicacin del virus vacunal imita a la infeccin en la
medida que la respuesta inmune es ms similar a la que ocurre despus de la infeccin natural que en
el caso de la vacunas inactivadas o las de subunidades. Cuando son producidas las vacunas de virus
inactivado, el tratamiento fsico o qumico usado para eliminar la infectividad, puede daarlas lo
suficiente como para disminuir la antigenicidad de esas vacunas, especialmente en la induccin de
respuestas inmunes mediadas por clulas especficas del virus. Teniendo como resultado que las
vacunas inactivadas a menudo inducen una respuesta inmune que es de muy corta duracin, reducida
en su espectro inmunognico, ms dbil sus respuestas inmunes celulares y de anticuerpos de las
mucosas y posiblemente menos efectiva en inducir inmunidad esterilizante. Sin embargo, vacunas
inactivadas muy tiles y seguras estn disponibles y son de ampliamente usadas.
La mayora de las vacunas de larga escala de produccin para el uso en animales continan incluyendo
virus atenuado o inactivado, sin embargo, la nueva generacin de vacunas desarrolladas mediante las
tecnologas de ADN recombinante ofrecen significativas mejoras y ventajas potenciales en trminos de
su seguridad y eficacia. Una gran variedad de tales vacunas han sido recientemente desarrolladas, y
muchas de ellas estn ahora en produccin comercial (MEEUSEN et AL. July 2007, CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, p. 489510
Vol. 20, No. 3; doi:10.1128/CMR.00005-07).

Vacunas de Virus Atenuados

Las vacunas de virus atenuados, cuando han sido probadas para ser seguras, histricamente han sido
las mejores de todas las vacunas. Varias de ellas han sido dramticamente exitosas en reducir la
incidencia de importantes enfermedades de animales y humanos. La mayora de las vacunas de virus
atenuado son inyectadas intradrmica, subcutnea o intramuscularmente, pero algunas pueden ser
aplicadas oralmente, y unas pocas por la va del aerosol o en las aves en el agua de bebida. Para que
estas vacunas sean exitosas, el virus vacunal debe replicarse en el animal receptor, provocando con
ello una respuesta inmune de larga duracin causando poco o ningn efecto secundario. En efecto, una
vacuna de virus atenuado imita una infeccin subclnica. Las cepas individuales de virus, incorporadas
en una vacuna de virus atenuado puede ser derivada de cualquiera de diversas fuentes.

Vacunas Producidas de Virus Atenuados Naturalmente

La vacuna original (vacca = vaca), introducida por Jenner en 1798 para el control de la viruela humana,
utiliz virus de viruela bovina, un patgeno natural de la vaca. Este virus solamente produjo infeccin y
lesiones leves en humanos, pero, por ser antignicamente relacionado al virus de la viruela humana,
confiere proteccin contra la enfermedad humana. El mismo principio ha sido aplicado a otras
enfermedadespor ejemplo, la proteccin del pollo contra la enfermedad de Marek empleando una
vacuna derivada de u rotavirus bovino. Similarmente, los conejos pueden ser efectivamente protegidos
contra la mixomatosis, con el virus de fibroma de Shope naturalmente avirulento.

Vacunas Producidas por Atenuacin del Virus por Pases Seriados en Cultivos Celulares
La mayora de las vacunas de virus atenuados actualmente en uso fueron obtenidas empricamente por
series de pases de virus de campo (calle) (sinom. Virus silvestre) en cultivos celulares. Las clulas
pueden ser de origen homlogo o, ms comnmente heterlogo. Tpicamente, la adaptacin de un
virus a un crecimiento vigorosa en un cultivo celular es acompaada por una progresiva prdida de la
virulencia para el hospedero natural. La prdida de virulencia puede ser demostrada inicialmente en un
modelo de laboratorio adecuado, antes de ser confirmada por ensayos clnicos en las especies de
inters. Debido a requerimientos prcticos del virus vacunal no debe estar tan atenuado que falle en
replicarse satisfactoriamente en el hospedador natural, algunas veces es necesario comprometerse con
el uso de cepas virales que repliquen suficientemente bien y puedan producir signos clnicos leves en
unos cuantos animales receptores (vacunados).
Durante los repetidos pases en cultivos celulares, los virus normalmente acumulan sustituciones de
nucletidos en su genoma, los cuales entonces llevan a la atenuacin. Con el reciente advenimiento de
cultivos de alto rendimiento, la secuenciacin del genoma, las bases genticas de la virulencia y la
atenuacin han sido establecidas en muchos virus, lo que permite mejores predicciones para la eficacia
y seguridad de la vacuna. Adems, es cada vez ms claro que varios genes pueden contribuir a la
virulencia y tropismo de los virus, y esto se realiza de diferentes maneras. Por ejemplo, en contraste

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con los virus de campo o silvestres asociados con infecciones sistmicas severas, las cepas vacunales
de virus atenuado de esos mismos virus aplicados por la va respiratoria pueden ser replicadas,
solamente en el aparato respiratorio superior, o sufrir solo una limitada replicacin en el epitelio
intestinal despus de la administracin oral.
A pesar del gran xito de las vacunas de virus atenuado por mtodos empricos, hay una fuerte
necesidad sentida para reemplazar lo que algunos veterinarios e investigadores consideran que es una
ruleta gentica con vacunas racional especficamente diseadas. En estas vacunas de virus
atenuados bajo diseo, las mutaciones asociadas con la atenuacin del virus paterno son definidas y
pronosticadas, as como tambin la potencial reversin a la virulencia.

Vacunas Producidas por Atenuacin Viral por Pases Seriados en Hospederos Heterlogos
La seriacin de pases en hospederos heterlogos fue un medio importante histricamente para la
atenuacin emprica de los virus para su uso en vacunas. Por ejemplo, los virus de peste bovina y fiebre
porcina clsica cada uno fue adaptado a crecer en conejos, y luego de muchos pases quedar
suficientemente atenuado para ser empleado como vacuna. Otros virus fueron pasados en huevos
embrionados de gallina de manera similar, aunque algunos de esos virus (pasados) adquirieron nuevas
y muy indeseables propiedades. Por ejemplo, las vacunas atenuadas del virus de la lengua azul
propagado en huevos embrionados pueden cruzar la placenta de los rumiantes vacunados durante la
preez, provocando infeccin fetal y desarrollo de defectos o prdida. Similarmente, el virus de la peste
equina africana propagado en huevos embrionados caus devastadoras consecuencias en humanos
infectados por exposicin en aerosol al virus vacunal.

Vacunas Producidas por Atenuacin Viral por Seleccin de Mutantes Termosensibles y

Rearreglos
La observacin de que los mutantes termosensibles (virus que son incapaces de replicar
satisfactoriamente en temperaturas mayores a la corporal) generalmente muestran una virulencia
reducida lo que sugiri de que podran hacerse con ellos vacunas atenuadas satisfactoriamente,
aunque algunos virus con mutaciones termosensibles han presentado una tendencia perturbadora a
revertir a la virulencia durante la replicacin en los animales vacunados. La atencin se est dirigiendo
hacia mutantes que se han desarrollado a temperaturas fras, derivadas de la adaptacin del virus de
crecer a temperaturas subptimas. Lo racional es que tales virus mutados seran vacunas ms seguras
para la administracin intranasal, porque se replicaran en las temperaturas bajas de la cavidad nasal
(alrededor de 33 C en la mayora de los mamferos), pero no en temperaturas ms vulnerables del
aparato respiratorio inferior o en los alveolos. Las vacunas de influenza termosensibles que contienen
mutaciones en la mayora de los genes virales, no revierten a la virulencia, y las vacunas de influenza
basadas en tales mutaciones estn siendo permitidas ahora para uso humano; las vacunas contra la
influenza equina han sido desarrolladas utilizando el mismo principio.

Vacunas con Virus no Replicantes

Vacunas Producidas con virus Inactivados
Las vacunas con virus inactivados generalmente son producidas con virus virulentos; agentes qumicos
o fsicos son usados para destruir su infectividad pero manteniendo su inmunogenicidad. Cuando se
elaboran adecuadamente, tales vacunas son muy seguras, pero necesitan contener relativamente
grandes cantidades de antgeno (virus) para obtener una buena respuesta de Abs como la que inducira
con una dosis mucho ms pequea de la vacuna con virus atenuado. Normalmente, el primer esquema
de vacunacin comprende dos o tres inyecciones y posteriormente ms dosis (refuerzo) pueden ser
requeridas a intervalos regulares para mantener la inmunidad.
Las vacunas inactivadas generalmente deben preparadas con adyuvantes qumicos para aumentar la
respuesta inmune, pero esto puede provocar reacciones adversas a la vacunacin. Los agentes
inactivadores ms usados son formol, -propiolactona y etilenimina. Una de las ventajas de la bpropiolactona, la cual es usada en la manufactura de las vacunas de rabia, y la etilenimina, la cual es
usada en la manufactura de las vacunas de fiebre aftosa, es que son completamente hidrolizadas a
productos no txicos, en horas. Debido a que los viriones en el centro de agregados pueden ser
protegidos de la inactivacin, es importante que los agregados sean rotos antes de inactivarlos. En el
pasado, la falla en esto ocasionalmente provocaba brotes de enfermedad asociados a la vacunacin
por ejemplo, varios brotes de fiebre aftosa han sido rastreados en relacin a este problema.

Vacunas Producidas de Protenas Virales Nativas Naturales

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Los solventes de lpidos como el deoxicolato de sodio son empleados en caso de virus envueltos, para
solubilizar al virion y liberar sus componentes, incluyendo las espculas de glicoprotena de la envoltura
viral. La centrifugacin diferencial es empleada para semipurificar estas glicoprotenas, las cuales son
luego preparadas para usarlas como vacunas fraccionadas. Ejemplos de estas vacunas con agentes
como herpesvirus, influenzavirus y coronavirus.

Vacunas Producidas por ADN Recombinante y Tecnologas Relacionadas

El relativo reciente advenimiento de la biologa molecular y sus tecnologas asociadas han facilitado el
desarrollo de nuevas estrategias de vacunacin, cada una con inherentes ventajas potenciales y, en
algunos casos, desventajas cuando se comparan con las de las vacunas tradicionales. Estas nuevas
tecnologas han sido usadas para la creacin de nuevas vacunas que ya estn en uso y, teniendo
substanciales ventajas potenciales, y se prev que la disponibilidad y tipos de tales productos
solamente aumentarn en el futuro.

Vacunas producidas por Atenuacin Viral Mediante la Delecin (Supresin) de Genes o

Mutagnesis Dirigida
El problema de la reversin a la virulencia de las vacunas atenuadas (p. ej., una mutacin por la cual el
virus vacunal recupera la virulencia) puede ser evita de mejor manera por la deliberada insercin de
varias mutaciones atenuantes en genes virales clave, o por la delecin completa de genes no
esenciales que contribuyan a la virulencia. La delecin de genes es especialmente factible con los virus
de ADN grandes que portan muchos genes que no son esenciales para la replicacin, al menos para la
replicacin en cultivos celulares. La ciruga gentica es usada para elaborar mutantes por delecin
que son estables an despus de muchos pases. Varias vacunas de herpesvirus han sido construidas
usando esta estrategia; incluyendo una delecin de timidina cinasa (TK) en la vacuna de pseudorabia
(enfermedad de Aujeszky) para cerdos que tambin incluye una delecin de un gen de una
glicoprotena (gE). La glicoprotena suprimida puede ser usada como antgeno de captura en una
prueba inmuno absorbente de enzima ligada (ELISA), as que los cerdos vacunados, no infectados
provocaran una prueba negativa, pudiendo ser distinguidos de los cerdos naturalmente infectados [la
estrategia de diferenciacin/discriminacin de animales infectados de los vacunados (DIVA)], facilitando
que los programas de erradicacin puedan ser llevados en paralelo con la vacunacin. Una vacuna
marcadora carente del gen gE tambin est disponible para el virus de rinotraquetis infecciosa bovina
(herpesvirus bovino-1).
La mutagnesis dirigida facilita la introduccin de sustituciones definidas de nucletidos en genes
virales a voluntad. Conforme se han continuamente definiendo los genes particulares que influencian la
virulencia y patogenicidad de virus individuales, se ha anticipado que existen vacunas de virus
atenuados realizadas empricamente que sern reemplazadas por las que se han atenuado mediante
ingeniera gentica mediante la alteracin de genes importantes al gusto del cliente. La produccin
de vacunas de virus atenuados de clones moleculares facilita la deliberada introduccin de nucletidos
que provocan atenuacin definida en los virus vacunales, y la consistente produccin vacunas de
semillas virales genticamente definidas. Esta estrategia tambin potencialmente permite el uso de
pruebas serolgicas diferenciales para distinguir a los animales infectados naturalmente de los
vacunados (DIVA).

Vacunas de Subunidades Producidas por Expresin de Protenas Virales en Eucariotes

(Levaduras, Mamferos e Insectos) Bacterias y Clulas Vegetales
La expresin de protenas en vectores eucariotes ofrece el potencial de la produccin en gran escala de
protenas virales que pueden ser purificadas fcilmente y elaborar vacunas. Una vez que ha sido
identificada la protena importante para conferir proteccin, su gen [o en el caso de virus de ARN, un
ADN complementario (cADN) de una copia del gen] puede ser clonada en una gran gama de plsmidos
de expresin y producida en diversos sistemas celulares. Las clulas de mamferos ofrecen la ventaja
sobre las clulas de eucariotes inferiores en que es ms probable que posean la maquinaria adecuada
para el proceso correcto de post-traduccin y una autntica maduracin del complejo de protenas
virales.
Entre los sistemas de expresin eucaritica ms empleados incluyen clulas de plantas y levaduras
(Saccharomyces cerevisiae), clulas de insectos (Spodoptera frugiperda) y diversas clulas de
mamferos. Las levaduras ofrecen la ventaja de que hay mucha experiencia en la produccin industrial
a escala de ellas; la primera vacuna producida por expresin de un gen clonado, la vacuna de la
hepatitis B humana, fue producida en levaduras. Las clulas de insectos ofrecen la ventaja de la simple
tecnologa derivada de la industria de la seda: los cultivos celulares de mariposas (o gusanos) pueden
ser preparados para expresar grandes cantidades de protenas virales mediante la infeccin con

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baculovirus recombinantes portando el gen (genes) del virus de inters. El promotor del gen que
codifica para la protena polihedrina del baculovirus, es tan fuerte que el producto de un gen viral de
inters insertado en el gen polihedrn del baculovirus puede incluir ms de la mitad de la protena que
producen las clulas infectadas. Por ejemplo, la inmunizacin de cerdos con la protena del capside del
circovirus porcino 2 expresado en clulas de insectos de un vector de baculovirus recombinante
confiere inmunidad protectora contra las enfermedades asociadas al circovirus porcino como la
enfermedad multisistmica desgastante. Similarmente, la protena E2 expresada en baculovirus
solamente da una vacuna de subunidades recombinante efectiva contra la fiebre porcina clsica. La
expresin de antgenos virales protectores en clulas de plantas puede tericamente proporcionar un
mtodo eficiente y costo-efectivo (barato) de vacunar animales de produccin. Por ejemplo, han sido
desarrolladas lneas celulares de plantas que expresan las protenas hemaglutinina y neuraminidasa del
virus de la enfermedad de Newcastle para una inmunizacin protectora de aves.
Vacunas Producidas por Expresin de Protenas Virales que se Autoensamblan en Partculas
Parecidas a Virus
La expresin de genes que codifican para protenas de capside de virus de ciertas familias que son
icosaedros, desnudos conducen al autoensamblaje de protenas de capside en partculas parecidas a
virus (VLPs) que pueden usarse como una vacuna. Esta estrategia ha sido desarrollada para varios
picornavirus, calicivirus, rotavirus y orbivirus, y una vacuna-VLP
efectiva ha sido fabricada
recientemente contra los papilomavirus genitales humanos. La ventaja de la VLP-recombinantes sobre
las vacunas tradicionales inactivadas es que ellas estn desprovistas del cido nucleico viral, y por lo
tanto son completamente seguras. Ellas equivalen a una vacuna inactivada de virus completo, pero sin
el potencial dao de la prdida de la inmunogenicidad que es acompaada con la inactivacin qumica.
Sin embargo, la limitacin potencial de la estrategia incluye los costos de produccin y los bajos
rendimientos, as como la estabilidad del VLP despus de la produccin, y la inmunidad menos efectiva
comparada a las vacunas existentes.

Vacunas que Usan Virus como Vectores para la Expresin de otros Antgenos Virales
(Heterlogos)
Las tcnicas de AND recombinante permite que genes extraos puedan ser introducidos a regiones
especficas en el genoma de virus de ADN o ARN, y el producto del gen extrao es entonces portado y
expresado en la clula blanco. Especficamente, el gen (genes) que codifican para antgenos
protectores clave (antgenos importantes contra los cuales el hospedero genera inmunidad) de los virus
que causan enfermedades de inters son insertados en el genoma de un virus avirulento (el vector
recombinante, vacuna vectoreada). Este virus avirulento modificado es luego aplicado como un
vector de virus atenuado o un vector no replicante de expresin (suicida). Las clulas infectadas en el
hospedero inmunizado expresan la protena extraa, contra la cual entonces el animal montar una
repuesta inmune adquirida (humoral y/o celular). El mtodo es seguro, porque solo uno o dos genes del
virus causal son insertados en el vector de expresin, y porque solamente virus bien caracterizados
pueden ser empleados como vectores de expresin (como los que existen en las vacunas atenuadas).
Es ms, los animales inmunizados con esas vacunas recombinantes pueden ser distinguidos fcilmente
de los animales infectados (o de los vacunados con virus modificados) usando pruebas serolgicas que
detectan Abs a las protenas virales que no fueron incluidas en la vacuna fabricada (la as llamada
estrategia DIVA).
Virus de ADN como Vectores
Genes individuales que codifican para antgenos de una variedad de virus han sido incorporados el
genoma de viriones de ADN, especialmente viruela bovina y otros poxvirus, adenovirus, herpesvirus y
virus adeno-asociados (como los parvovirus).
La inmunizacin de animales con una gran cantidad de diferentes vacunas construidas con vectores
recombinantes de poxvirus efectivamente ha generado respuestas inmunes mediadas por Abs y/o
clulas que confieren fuerte inmunidad protectora en los animales receptores contra el reto con cepas
virulentas de virus heterlogos de los cuales los genes fueron derivados. Por ejemplo, vacunas de rabia
con vectores recombinantes de viruela bovina incorporada a cebos administrados oralmente para
proteger zorros y mapaches contra esta enfermedad zoontica; esta vacuna contiene solamente el gen
que codifica para la glicoprotena (G) del virus de la rabia. Similarmente, los poxvirus aviarios han sido
usados cada vez ms como vectores de expresin de genes heterlogos en vacunas recombinantes. El
virus de viruela aviar es una eleccin lgica como un vector para las vacunas de las aves pero, quiz
sorprendentemente, los virus de viruela aviar tambin han sido muy tiles como vectores de expresin
en mamferos: aunque este virus, y un pariente cercano el poxvirus de canarios, no completan su ciclo
de replicacin en las clulas de mamferos, los genes insertados son expresados e inducen fuertes

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respuestas inmunes humorales y celulares en los animales inoculados. Debido a que los poxvirus tienen
un gran genoma ah se pueden acomodar una docena de genes extraos y ser empacados
satisfactoriamente en el virin, de esta manera, es tericamente posible construir, como un
vector, a virus recombinante sencillo capaz de proteger contra diferentes enfermedades
virales.
Las vacunas de vectores con poxvirus recombinantes han sido ampliamente usadas para inmunizar
mamferos incluyen a la combinacin rabia-viruela bovina empleada para la inmunizacin de zorros en
Europa y mapaches y coyotes en los Estados Unidos de Amrica, el virus de la viruela del canario ha
servido como vector de los virus de influenza y de la encefalitis equina del oeste del Nilo en caballos,
distemper en perros, hurones y ciertos animales de zoolgico/animales silvestres, y leucemia felina y
rabia en gatos. Entre muchos otros, vacunas experimentales de vectores con el virus de la viruela del
canario recombinante se han desarrollado exitosamente para prevenir la fiebre equina africana, lengua
azul, encefalitis japonesa y Nipah, tambin se han realizado interesantes ensayos en humanos con una
vacuna experimental con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Los poxvirus de mapache,
cabra y otros poxvirus se han desarrollado como vectores de expresin recombinantes
para uso
potencial como vacunas de mamferos. Los conejos pueden ser efectivamente inmunizados contra
mixomatosis (un poxvirus) y la enfermedad hemorrgica viral (calicivirus) con una vacuna atenuada
con el virus de mixoma que expresa en gen VP60 del virus de la enfermedad hemorrgica del conejo.
Esta estrategia de vacunacin combinada tiene la considerable ventaja de que el virus de la
enfermedad hemorrgica del conejo no puede crecer en cultivos celulares, as que la vacunacin contra
esta enfermedad solamente requiere la inactivacin del virus colectado de hgado de conejos
infectados.
Una gran cantidad de vacunas de vectores con virus de ADN han sido desarrollados para su uso en
avicultura, incluyendo vacunas de vectores con herpesvirus de pavo recombinante con el virus de
Newcastle, virus de laringotraquetis infecciosa y virus de bursitis infecciosa (enfermedad de Gumboro);
estas vacunas solamente incluyen genes que codifican para antgenos protectores de los virus
heterlogos, de esa manera ellas generan inmunidad protectora en los pollos contra enfermedad de
Marek y otra enfermedad (enfermedad de Newcastle, laringotraquetis infecciosa, bursitis infecciosa).
Las vacunas de vectores con el virus de la viruela aviar y enfermedad de Newcastle y virus de influenza
H5 tambin han sido desarrollado, y han sido ampliamente en Mxico y Amrica Central.
Virus quimricos de AND tambin se han usado como vacunas en los cuales los genes de un virus
virulento son insertados en el soporte gentico de un virus relacionado pero avirulento. Por ejemplo,
una vacuna de circovirus quimrico usada en cerdos incluye un soporte gentico de circovirus porcino
1, el cual es avirulento (no patognico) en cerdos, con el gen que codifica protenas de capside del
circovirus 2 que si es patognico. Los anticuerpos contra las protenas de capside del circovirus porcino
2 confieren inmunidad a los cerdos vacunados. Debido a que el circovirus porcino 1, el virus quimrico
replica con alto ttulo en cultivos celulares, es posible producir una vacuna ms eficiente y barata.
Se ha vaticinado que vacunas veterinarias disponibles comercialmente que utilizan vectores de
expresin de virus con ADN sern aplicadas cada da ms, debido a sus ventajas inherentes en
trminos de seguridad y eficacia, y la habilidad de que en los programas de control de enfermedades
poder distinguir a los animales vacunados de los expuestos al virus infeccioso (DIVA).
Virus de ARN como Vectores
As como con las vacunas de vectores de virus con ADN, los virus con ARN, especialmente las cepas
virales que se3 han probado como seguras, tambin pueden usarse como soportes genticos, por la
insercin de genes importantes inmunolgicamente de otros virus (heterlogos). Los virus quimricos
de ARN utilizan la maqui8naria replicativa de un virus para la expresin de antgenos protectores de los
virus heterlogos. Por ejemplo, se han elaborado vacunas en las cuales los genes codifican para
protenas de envoltura de las cepas vacunales de virus atenuados tradicionales del virus de la fiebre
amarilla, han sido reemplazados con los genes correspondientes de otros flavivirus como el de la
encefalitis japonesa, virus del oeste del Nilo o del virus del dengue, o con genes que codifican para
protenas muy inmunognicas de otros virus como el de la influenza. Una vacuna quimrica basada en
el virus de la fiebre amarilla que incluye protenas de premembrana (preM) y envoltura (E)del virus del
oeste del Nilo, fue empleado para inmunizacin de equinos.
Los virus de ARN de polaridad positiva son especialmente convenientes para su uso como clones
moleculares para la insercin de genes extraos porque el genoma de esos virus es por s mismo
infeccioso. No obstante, los clones infecciosos tambin se han elaborado a partir de virus de ARN con

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polaridad negativa, con la inclusin de protenas de replicasa en la transfeccin. En avicultura, una

vacuna de virus de la enfermedad de Newcastle recombinante que expresa el gen H5 del virus de
influenza se ha desarrollado y usado ampliamente en China para la inmunizacin de las aves contra la
enfermedad de Newcastle e influenza aviar H5. Otros virus de ARN de polaridad negativa como los
rhabdovirus tambin han sido evaluados como potenciales vectores de genes, junto con virus de ARN
de polaridad positiva como los Nidovirus (coronavirus, arterivirus).
Las partculas de replicn recombinante ofrecen una estrategia similar pero algo diferente de la que se
ha desarrollado para ciertos virus de ARN, incluyendo flavivirus y alfavirus como encefalitis equina
venezolana, Semliki Forest y Sindbis. Las partculas de replicn recombinante de los alfavirus son
creadas exclusivamente de protenas naturales de alfavirus donadores, pero el genoma de ARN
contenido en estas partculas es quimrico, esto es que los genes que codifican para las protenas
estructurales del replicn de alfavirus son reemplazadas por algunas de virus heterlogos. Como un
ejemplo, partculas de replicn derivadas de la cepa vacunal de virus de la encefalitis equina
venezolana que co-expresan las protenas de envoltura GP5 y M del virus de la arteritis equina, inducen
Abs neutralizantes y protectores en los equinos inmunizados; ni el virus de la encefalitis equina
venezolana, ni el virus de la arteritis equina son producidos en los equinos inmunizados, porque el
genoma del replicn incluye solamente genes de protenas no estructurales del virus de la
encefalitis equina venezolana y genes de protenas estructurales del virus de la arteritis equina.
Para los virus de influenza y otros con genomas segmentados, el principio de virus quimricos fue bien
establecido antes del advenimiento de la tecnologa del ADN recombinante. Los rearreglos en los virus
fueron producidos por reagrupamiento homlogo (intercambio de segmentos) por el co-cultivo de
una cepa vacunal existente con un aislamiento viral nuevo. Los virus vacunales con propiedades
deseables de crecimiento pero con propiedades inmunognicas del aislamiento reciente fueron
seleccionados, clonados y usados como vacuna. Por ejemplo, un virus quimrico de influenza H5N3
inactivado ha sido desarrollado como vacuna para su uso en avicultura.

Usando el ADN Viral como Vacuna (Vacunas de ADN)

El descubrimiento, a principios de los aos de 1990, de que el ADN viral por s mismo podra ser
utilizado para inmunizacin protectora ofreci un nuevo aporte potencialmente revolucionario para la
vacunacin. Especficamente, se conform un plsmido que contena el gen de la -galactosidasa,
enzima que fue expresada por ms de 60 das despus de que haba inoculado intramuscularmente en
ratones. A partir de esta observacin ha habido una gran explosin en el inters en el desarrollo de
vacunas de ADN y esta metodologa ha sido empleada experimentalmente en un amplio rango de
aplicaciones potenciales. La primera vacuna de ADN disponible comercialmente fue desarrollada para
proteger al salmn contra el virus de la necrosis hematopoytica infecciosa, ahora ya est disponible
una vacuna basada en el ADN para prevenir la enfermedad del oeste del Nilo para equinos. Sin
embargo, el uso comercial utilizando esta estrategia en vacunas veterinarias ha sido de crecimiento
lento.
En retrospectiva, el descubrimiento de que el ADN por si mismo conferira inmunidad protectora quiz
no caus mucha sorpresa. Por los aos de 1960, se demostr que la inoculacin intradrmica de ADN
de los papilomavirus de Shope, inducan papilomas en el sitio de inoculacin en la piel de los conejos.
Posteriormente, se demostr para muchos virus que los genomas virales de ADN, ARN, o ADNc de ARN
viral, completaban el ciclo completo de replicacin despus de la transfeccin en clulas. La estrategia
de las vacunas de ADN es construir un plsmido recombinante que contenga genes que codifiquen para
antgenos virales clave. El inserto de ADN en el plsmido, las clulas transfectadas y la protena
expresada provocan por inyeccin una respuesta inmune que estimula una respuesta a la infeccin
viral respectiva. Las vacunas de ADN generalmente consisten de un plsmido de E. coli con un fuerte
promotor con amplia especificidad celular, como el del promotor de inicio del citomegalovirus humano.
El plsmido es amplificado, comnmente en E. coli, purificado y luego simplemente inyectado en el
hospedador. La inmunizacin intramuscular es la ms efectiva. Una mejora significativa en respuesta a
la vacunacin ha sido lograda al cubrir al plsmido con micropartculasgeneralmente partculas de
oro de 1-3 m de dimetroe inyectados por un bombardeo utilizando un aparato como pistola con
gas helio (la pistola de genes).
Las ventajas tericas de las vacunas de ADN incluyen la pureza, estabilidad fsico-qumica, simplicidad,
un relativo bajo costo de produccin, distribucin y disposicin, adems del potencial para la inclusin
de varios antgenos en un solo plsmido, y la expresin de antgenos en su forma nativa (por lo tanto
facilitando el procesamiento y presentacin al aparato inmune). Repetidas inyecciones pueden darse
sin interferencia, y la inmunizacin con ADN puede inducir inmunidad en la presencia de Abs maternos.

51

Sin embargo, todava no se utiliza ampliamente, porque las aplicaciones prcticas de la tecnologa son
considerablemente ms retadoras en humanos y animales de granja que en los animales de
laboratorio. Preocupaciones sin fundamento tambin han aparecido con respecto al destino y
potenciales efectos colaterales del ADN extrao, modificado por ingeniera, y para los animales que
entran en la ceda alimentaria del hombre, los costos para proporcionar seguridad que son muy altos.

Otras Estrategias de Vacunas Potenciales

Vacunas que Utilizan Bacterias como Vectores para la Expresin de Antgenos Virales
Las protenas virales (o regiones inmunognicas de las mismas) pueden ser expresadas en la superficie
de bacterias genticamente modificadas que infectan al hospedero directamente. La idea general es
insertar el ADN que codifica para antgenos protectores en una regin del genoma de una bacteria, o
en uno de sus plsmidos, que codifique para protenas de superficie. Siempre que la protena viral
agregada no interfiera seriamente con el transporte, estabilidad o funcin de las protenas bacterianas,
que la bacteria se pue3da multiplicar y presentar los epitopos virales al aparato inmune del
hospedador. Las bacterias entricas que se multiplican naturalmente en el intestino son los vectores de
expresin adecuado para exponer los epitopos (determinantes antignicos) protectores de viriones
virulentos entricos al tejido linfoide asociado al intestino, y cepas atenuadas de E. coli, Salmonella
spp., y Mycobacterium spp., estn siendo evaluados para la inmunizacin contra patgenos entricos,
incluyendo virus, y/o para la estimulacin preferente de la inmunidad local (de mucosas).
Vacunas de Pptidos Sintticos
Con la creciente habilidad para localizar y definir epitopos importantes de protenas virales, es posible
tambin sintetizar pptidos qumicamente que correspondan a esos determinantes antignicos.
Apropiadamente diseados los pptidos sintticos, pueden estimular Abs neutralizantes contra muchos
virus, incluyendo el virus de la fiebre aftosa y el de la rabia, pero en general esta idea ha sido
frustrante probablemente debido a la naturaleza conformacional de muchos epitopos importantes
incluidos en la protena original. Especialmente los epitopos conformacionales no son componentes de
aminocidos contiguos en lnea, estos son colocados en ese lugar por los pliegues de la (s) cadena (s)
de polipptido (s). Un estmulo antignico efectivo requiere que la conformacin tri-dimensional de un
epitopo de la molcula de protena, o de la partcula vrica sea mantenida en la vacuna. Debido a que
los pptidos sintticos cortos carecen de conformacin terciaria o cuaternaria, la mayora de los Abs
contra estas molculas, son incapaces de unirse a los viriones, de ah que los ttulos de Abs
neutralizantes deben en orden de magnitud un poco menor que los inducidos por las vacunas de virus
completos inactivados o por protenas intactas purificadas. En contraste, los epitopos reconocidos por
los linfocitos T son pptidos lineales cortos (unidos a molculas de CMH). Algunas de estos epitopos
para clulas T estn conservadas entre las cepas de virus y por lo tanto permiten una respuesta
cruzada de clulas T.
Vacunas que Emplean Anticuerpos Anti-idiotipos
El sitio de unin de antgeno (Fraccin de unin del Anticuerpo, Fab), producido por cada clula B,
contiene una secuencia de aminocidos nica que es conocida como IDIOTIPO o Determinante
Idiotpico. Debido a que Abs anti-idiotipo son capaces de unirse al mismo idiotipo como se une el
epitopo combinante en el antgeno original, el Ab anti-idiotipo imita la conformacin de ese epitopo. De
esta manera, el Ab anti-idiotipo acta contra los Abs monoclonales neutralizantes de un virus en
particular, y pueden ser adecuadamente usados como una vacuna. Esto permanece incierto si esto
apunta hacia la estrategia de vacunas prcticas, pero hay situaciones, probablemente en medicina de
humanos ms que en la de animales en las cuales tales vacunas, si son eficientes, tendran muchas
ventajas sobre las vacunas ortodoxas principalmente por su seguridad.

Mtodos para Aumentar la Inmunogenicidad de las Vacunas Virales

La inmunogenicidad de las vacunas inactivadas, especialmente les de protenas purificadas y pptidos
sintticos, generalmente necesita ser aumentada; esto puede ser realizado al mezclar al antgeno con
un adyuvante, la incorporacin de los antgenos a liposomas, o a un complejo inmuno-estimulante.
Mtodos similares han sido usados para aumentar la inmunogenicidad de las vacunas recombinantes y
la inmunogenicidad de ellas puede ser potenciada an ms por la incorporacin de agentes
inmunopotenciadores o junto con el vector de expresin. Hay un considerable esfuerzo en la
investigacin actual enfocada a las estrategias para entrega de antgeno ms eficiente y efectiva para
la vacunacin.
Los adyuvantes son formulaciones que cuando se mezclan con el antgeno, potencias la respuesta
inmune humoral y/o celular, de manera que una menor cantidad de antgeno y/o menores dosis sern

52

suficientes. Los adyuvantes difieren grandemente en su qumica y modos de accin, pero tpicamente
pueden prolongar el proceso de la degradacin y liberacin antignica y/o aumentar la
inmunogenicidad de la vacuna por el reclute y activacin de clulas inmunes clave (macrfagos,
linfocitos y clulas dendrticas) en el sitio en donde se deposit el antgeno. El alumbre y aceites
minerales han sido ampliamente usados en vacunas para animales, pero muchos otros han sido
desarrollados o actualmente estn en investigacin, algunos todava con propiedad intelectual. Entre
muchos ejemplos: polmeros biodegradables sintticos como el polifospazano que sirve como un
potente adyuvante, especialmente cuando se usa con agujas muy delgadas (calibre 27 o ms) para la
inoculacin intradrmica del antgeno. El planteamiento de los inmunomoduladores para aumentar la
inmunogenicidad de las vacunas contina en investigacinespecficamente, molculas que aumenten
las respuestas de inmunidad innata y adquirida o que inhiban la respuesta de ella misma.
Los liposomas consisten en esferas de membranas lipdicas artificiales dentro de las cuales pueden ser
incorporadas protenas virales. Cuando es usada una protena purificada viral de la envoltura, los
resultantes virosomas (o inmunosomas) de alguna manera recuerdan la envoltura original del
virin. Esto no solamente facilita la reconstitucin de estructuras como la envoltura viral carente de
cido nucleico, sino que tambin permite la incorporacin de lpidos no pirgenos con actividad de
adyuvante. Cuando las glicoprotenas de la envoltura viral o pptidos sintticos son mezclados con
colesterol ms un glicsido conocido como Quil-A, estructuras esfricas huecas de unos 40 nm de
dimetro son formadas. Muchas vacunas veterinarias incluyen esta tecnologa del complejo
inmunoestimulante (ISCOM).
El reconocimiento de que la inmunidad innata est definida por los receptores de reconocimiento de
patrones (PRR) que median una estimulacin de las citocinas de transcripcin y protenas reguladoras y
de esa manera se puede establecer una unin entre la inmunidad innata y la adquirida. Han sido
muchos los intentos para mejorar la respuesta inmune adquirida utilizando a la inmunidad innata. El
TLR-9 reconoce molculas de ADN con patrones de metilacin no comnmente encontrados en clulas
eucariticas. Los oligonucletidos de citocina guanina (ODNs CpG) han sido desarrollados para activar
la ruta del TLR-9 en conjuncin con varios antgenos y vacunas de ADN. Aunque los aumentos de las
respuestas inmunes han observados en modelos de ratones, las respuestas positivas pueden estar
vinculadas a determinadas especies y a la secuencia y tamao del ODN CpG. Los oligonucletidos de
CpG no aceleraron una respuesta inmune con la vacuna del virus de la fiebre aftosa, pero se
observaron respuestas positivas en pollos inmunizados con una vacuna de virus de influenza inactivado
y ODNs CpG. La produccin elevada de citocinas inducida por la respuesta inmune innata se puede
lograr por la expresin de citocinas en un vector de expresin viral junto con el antgeno de inters.
Alternativamente, una vacuna de ADN que exprese un antgeno viral puede ser dada al mismo tiempo
que una vacuna de ADN que codifique para una citocina dada. Muchos estudios han demostrado
respuestas inmunes aumentadas cuando las citocinas son usadas para aumentar la respuesta
naturalmente inducida en un proceso de inmunizacin.
Dado el reciente desarrollo y aumento de la produccin comercial de nuevos tipos de vacunas y
adyuvantes, sean naturales o artificiales, se ha vaticinado que las formulaciones de las vacunas y sus
mtodos de aplicacin cambiarn rpidamente en los prximos aos.

Factores que Afectan la Seguridad y Eficacia de las Vacunas

En muchas partes del mundo las vacunas son elaboradas bajo un amplio conjunto de directrices,
denominadas Buenas prcticas de Manufactura. Todas las vacunas correctamente preparadas y
probadas deberan ser seguras en los animales inmunocompetentes. Con un estndar mnimo, las
autoridades sanitarias insisten en pruebas de seguridad rigurosas en relacin a la infecciosidad residual
de las vacunas inactivadas. Hay otros problemas de seguridad que son inherentes a las vacunas de
virus atenuados y, potencialmente, a la nueva generacin de vacunas recombinantes.
El objetivo de la vacunacin es proteger a los animales contra la enfermedad, e idealmente, para
prevenir la infeccin y transmisin viral en la poblacin a riesgo. Si ocurre la infeccin con el virus
silvestre cuando decaiga la inmunidad despus de la vacunacin, la infeccin debera ser subclnica,
pero esto puede reforzar a la inmunidad. Pera virus endmicos, esto ocurre frecuentemente en los
animales de granja, perros y gatos en los refugios y las aves en sus galeras.
La eficacia de las vacunas atenuadas aplicadas por va oral o nasal, es crtica porque depende de la
subsecuente replicacin de los virus inoculados por esas rutas. Puede ocurrir interferencia entre el virus
vacunal y los virus de intestino o aparato respiratorio, infectando incidentalmente al animal en el
momento de la vacunacin. En el pasado, esta interferencia tambin ocurra entre los diferentes virus

53

atenuados contenidos en ciertas vacunas; por ejemplo, ha sido propuesto que la infeccin con
parvovirus canino puede ser tan inmunosupresor que interfiera con la respuesta a la vacunacin del
perro contra el virus del distemper canino.
La inmunoglobulina A (IgA) es la clase de gamaglobulina ms importante para la prevencin de la
infeccin en las superficies mucosas, como las del aparato respiratorio, digestivo, gnito-urinario y
epitelio ocular. Una de las ventajas implcitas en las vacunas de virus atenuados aplicadas por va oral
es que a menudo inducen prolongada sntesis local de anticuerpos IgA, que confieren una inmunidad
relativamente duradera contra los efectos patgenos de virus respiratorios y digestivos, los cuales se
manifiestan principalmente en esas vas de entrada. En contraste, la IgG proporciona una inmunidad
muy larga, a veces por toda la vida, a la reinfeccin contra la mayora de los virus que alcanzan sus
rganos blanco mediante diseminacin por vas sistmicas (viremia). As el principal objetivo de la
vacunacin es remedar la infeccin naturalesto es, propiciar un ttulo alto de Abs neutralizantes de la
clase apropiada IgG y/o IgA, dirigidos contra los epitopos relevantes del virin con la esperanza de
prevenir la infeccin.
Se deben atender dificultades especiales contra los virus que establecen infecciones persistentes como
los herpesvirus y retrovirus: una vacuna debe ser perfectamente efectiva si es para prevenir, no solo
sobre la enfermedad primaria, sino tambin contra el establecimiento de una larga latencia. Las
vacunas de virus atenuados son generalmente ms efectivas al estimular inmunidad mediada por
clulas que las inactivadas; sin embargo, conllevan el riesgo de establecer infecciones persistentes en
el hospedero inmunizado.

Efectos Adversos de las Vacunas de Virus Atenuados

Mala Atenuacin
Algunas vacunas de virus atenuados pueden causar signos clnicos al aplicarse en algunos animales
en efecto, un caso leve de enfermedad. Por ejemplo, algunas de las primeras vacunas de parvovirus
canino que se elaboraron con relativos pocos pases en cultivo celular, produjeron una inaceptable alta
incidencia de la enfermedad. Sin embargo, los intentos para atenuar la virulencia por ms pases de
cultivo celular pueden llevar a la declinacin de la habilidad del virus para replicarse en el animal
vacunado, con la correspondiente prdida de inmunogenicidad
Estos efectos colaterales ahora son mnimos con las vacunas actuales para animales, y no constituyen
un desaliento importante para la vacunacin. Sin embargo, es importante sealar que las vacunas
atenuadas solamente deben ser usadas en las especies para las cuales fueron producidas;
por ejemplo, las vacunas de distemper canino causan mortalidad en algunos miembros de la familia
Mustelidae, como el hurn de patas negras, de manera que para ellos se deben emplear vacunas
recombinantes o inactivadas.
Inestabilidad Gentica
Algunas cepas de virus vacunal pueden revertir a la virulencia durante la replicacin en el receptor o en
animales contacto hacia los cuales el virus vacunal haya escapado. Idealmente, las vacunas de virus
atenuados son incapaces de tal escape, pero si esto ocurre, podra ser por una acumulacin de
mutaciones regresivas que gradualmente pueden provocar la restauracin de la virulencia. El ejemplo
ms demostrativo de este fenmeno es la muy rara reversin a la virulencia de la vacuna oral humana
del poliovirus Sabin tipo 3, que finalmente oblig a su reemplazo por una vacuna ms segura con un
virus no replicante, aunque no necesariamente ms eficaz. Las cepas mutantes termosensibles del
virus de la diarrea viral bovina tambin se ha demostrado que son genticamente inestables.
Labilidad Trmica
Las vacunas de virus atenuados son vulnerables a la inactivacin por las temperaturas altas, un
problema importante en los trpicos, en donde el mantenimiento de la cadena fra desde el
fabricante hasta el lugar de aplicacin a los animales es muy remoto, el calor de las reas rurales es un
gran reto. Para disminuir un poco el problema se han agregado agentes estabilizantes a las vacunas, la
seleccin de cepas vacunales que sean inherentemente ms termo-estables y empacadas bajo
liofilizacin para la reconstitucin inmediatamente antes de la aplicacin. Son muy tiles los
refrigeradores simples porttiles que se emplean en los vehculos o en los laboratorios mviles.
Presencia de Virus Contaminantes
Debido a que las vacunas son elaboradas en animales o en clulas derivadas de ellos, siempre hay la
posibilidad de que una vacuna est contaminada con otro virus de ese animal o del medio usado para
el cultivo de sus clulas. Hay un ejemplo que llev a crear las restricciones en el comercio internacional

54

de las vacunas y sueros hiperinmunes que an es vigente, fue por la introduccin a los Estados Unidos
de Amrica en 1908 del virus de la fiebre aftosa como un contaminante de vacunas de viruela
producidas en becerros. Similarmente, el uso de huevos embrionados para producir vacunas para
usarlas en pollos, posee los mismos problemas (p. ej., la contaminacin de las vacunas del virus de
Marek con el virus de la retculoendoteliosis). Otra importante fuente de contaminantes virales es el
suero fetal bovino, que es usado universalmente en los cultivos celulares; todos los lotes veden ser
perfectamente examinados por la contaminacin en particular, con el virus de la diarrea viral bovina.
De la misma manera, el parvovirus porcino es un contaminante habitual de las preparaciones crudas de
tripsina elaborada a partir de pancreasas de cerdo, que es muy usada en la preparacin de cultivo de
clulas de animales. El riesgo de virus contaminantes es mayor con las vacunas de virus atenuado,
pero tambin puede ocurrir con las de virus inactivados, as como algunos virus son ms resistentes a
la inactivacin que otros; por ejemplo, los priones son notoriamente resistentes a los mtodos de
esterilizacin tradicionales.
Efectos Adversos en Animales Gestantes
Las vacunas de virus atenuado no son generalmente recomendadas para su uso en hembras preadas,
porque pueden ser abortignicos o teratognicos. Por ejemplo, las vacunas de virus atenuado de
rinotraquetis infecciosa bovina pueden ser abortignicas; y las vacunas de virus atenuado de
panleucopenia felina, fiebre porcina clsica, diarrea viral bovina, fiebre del valle del Rift y lengua azul
son todas ellas teratognicas si cruzan la placenta e infectan al feto en estadios crticos de la
gestacin. Estos efectos adversos son generalmente de la primoinmunizacin de un animal preado no
inmune en un tercio crtico de la preez, de manera que es preferible vacunar a los animales preados
con inmungenos inactivados, o emplear vacunas atenuadas en las hembras antes de la monta
(inseminacin). Los virus contaminantes en las vacunas muchas veces pasan desapercibidos hasta su
empleo en hembras preadas, por ejemplo, el descubrimiento inesperado de que el virus de la lengua
azul como contaminante de vacunas caninas, causara abortos y muerte de las perras gestantes.

Efectos Adversos de Vacunas no Replicantes

Se ha encontrado que algunas vacunas de virus inactivado potencian la enfermedad. Las primeras
observaciones fueron realizadas con las vacunas inactivadas para virus de sarampin y virus sincitial
respiratorio humano, cuando los individuos inmunizados desarrollaron una enfermedad ms severa que
los que permanecieron como no inmunizados antes de la infeccin. Eventos similares han ocurrido en
medicina veterinaria, incluyendo el aumento de la aparicin de peritonitis infecciosa felina en gatos
inmunizados con una vacuna de virus recombinante que expresaba la protena E2 del coronavirus felino
antes de la infeccin retadora. A pesar de la produccin de Abs neutralizantes despus de la
inmunizacin, los gatitos no fueron protegidos y murieron rpidamente de peritonitis infecciosa felina
despus del reto. Hay numerosos casos de enfermedad inducida por la inactivacin incompleta de
vacunas de virus no replicantes, y en otras los virus contaminantes sobrevivieron al proceso de
inactivacin.

Frecuencia de Vacunacin y Reacciones en los Sitios de Inoculacin

Ms all de los esquemas de vacunacin primaria, hay muy poco acuerdo y mucho debate actual de
que tan seguido los animales deben ser revacunados. Para la mayora de las vacunas, hay
comparativamente poca informacin definitiva, disponible sobre la duracin de la inmunidad. Por
ejemplo, es bien reconocido que la inmunidad despus de la vacunacin con virus atenuado de
distemper canino es de larga duracin, quiz para toda la vida. Sin embargo, la duracin de la
inmunidad a otros virus o componentes de vacunas combinadas puede no ser de tan larga duracin. En
la clnica de animales de compaa, el costo de la vacunacin, relativa a otros costos, es pequea
cuando los clientes visitan al veterinario, as que se ha discutido que si la revacunacin no daa, debe
ser considerada como un componente justificado de la revisin anual de rutina en la cual se necesita
un amplio espectro de necesidades de programas de cuidados de salud, aunque lo racional para esta
idea es pura conjetura en el mejor de los casos.
Este concepto de vacunacin anual fue pronto alterado en la mitad de los aos de 1990, por reportes
de fibrosarcomas subcutneos agresivos en gatos en los sitios de vacunacin (a menudo detrs de la
escpula). Los factores responsables de estos cnceres asociados a la vacunacin an quedan por
probarse; sin embargo, un virus contaminante en la vacuna no es responsable por s mismo, y la
sospecha prevaleciente es que la lesin fue inducida por los constituyentes de la vacuna. De cualquier
forma, este debate reaviv la frecuencia de vacunacin en los animales de compaa, conduciendo a
nuevas recomendaciones sobre los sitios preferibles para la vacunacin, sus intervalos (fueron
extendidos de 1 a 3 aos para algunas vacunas) y los sistemas para el reporte de respuestas adversas.

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Polticas y Esquemas de Vacunacin

El rango de vacunas disponibles, a menudo formulaciones multivalentes y de alguna manera con

diferentes recombinaciones de cada laboratorio con respecto a los esquemas de vacunacin, significa
que los veterinarios necesitan estar en educacin continua en relacin a la seleccin de vacunas y su
uso. Las formulaciones de vacunas multivalentes confieren ms ventajas prcticas en relacin de las
visitas que debe hacer el propietario al mdico. Tambin las vacunas multivalentes permiten un mayor
empleo de vacunas contra agentes de importancia secundaria. Sin embargo, a diferencia de situacin
en la medicina humana, en donde hay un acuerdo general en las formulaciones de las vacunas y
esquemas de vacunacin contra las enfermedades virales comunes de la infancia, no habiendo tal
consenso en medicina veterinaria. Adems, a diferencia de la situacin en medicina humana en donde
hay pocos laboratorios productores de vacunas, en medicina veterinaria hay muchos, cada uno
promoviendo sus propios productos.

Edad ptima para la Vacunacin

El riesgo de enfermedad de la mayora de las enfermedades virales es en los animales jvenes. La
mayora de las vacunas por lo tanto debern ser aplicadas durante los primeros 6 meses de edad. Los
Abs maternos, si son transferidos transplacentariamente en primates o, como en los animales
domsticos y aves, en el calostro o por la va del saco de la yema, inhiben la respuesta del recin
nacido a las vacunas. ptimamente, la vacunacin debera ser retardada hasta que los Abs maternos
en el animal joven hayan declinado hasta un valor cercano al cero. Sin embargo, cualquier, dilacin en
la administracin de vacunas puede dejar al animal indefenso durante una ventana de
susceptibilidad. Esto es potencialmente amenazador en ambientes de hacinamiento, altamente
contaminados o en donde hay una intensa actividad de vectores artrpodos. Hay una gran cantidad de
metodologas para manejar este problema en diferentes especies animales, pero ninguna es
completamente satisfactoria. El problema se complica debido a que los animales jvenes no
necesariamente responden a las vacunas de la misma manera que los hacen los mayores. Por ejemplo,
en caballos las respuestas de Abs a las vacunas de virus inactivados de influenza son pobres hasta que
los receptores llegan al ao de edad.
Debido a que el ttulo de Abs adquiridos por el recin nacido, despus de haber ingerido calostro, es
proporcional al de la madre, y porque la tasa de subsecuente desaparicin en diferentes especies
animales ya es conocida, es posible estimar, para un ttulo dado de Abs maternos, la edad ya no haya
Abs medibles en el recin nacido. Esto puede ser dibujado como un nomgrafo, en el cual se pueda leer
la edad ptima de vacunacin contra cualquier enfermedad dada. El mtodo es usado por varios, pero
debe ser considerado para los animales excepcionalmente valiosos en alto riesgo ambiental.
En la prctica, relativamente pocas fallas vacunales se encuentran si uno simplemente sigue las
instrucciones de los fabricantes de las vacunas, los cuales han usado datos del promedio de niveles de
Abs maternos y la tasa de eliminacin de IgG en la especie animal determinada, para estimar la ptima
edad de vacunacin. Es recomendado comnmente, aun para las vacunas de virus atenuados, que un
nmero de dosis de vacunas para ser administradas, debera tener un intervalo mensual, para cubrir la
ventana de susceptibilidad en los animales con particularmente ttulos altos de Abs maternos. Esta
precaucin es ms relevante para las formulaciones de vacunas multivalentes, debido a los diferentes
ttulos de anticuerpos maternos contra cada virus.

Vacunacin de la Madre
El propsito de la vacunacin es para la proteccin de los vacunados. Esto generalmente es as, pero
en el caso de ciertas vacunas [ p. ej., las de herpesvirus equino-1 (abortos), infeccin por rotavirus en
bovinos, infeccin por rotavirus en cerdos, bursitis infecciosa de los pollos] el objetivo es proteger a la
progenie de los vacunados, sea in utero (p. ej., aborto equino) o como para un neonato. Esto es
realizado por la vacunacin de la madre. Para los recin nacidos, el nivel de Abs maternos
transferidos en el calostro y leche o en el huevo, asegura que la prole tiene un nivel protector de Abs
durante los crticos primeros das de edad. Debido a muchas vacunas de virus atenuados son
abortignicas o teratognicas, son recomendadas las vacunas de virus inactivados para la vacunacin
de las madres.

Vacunas Disponibles y Recomendadas

Hay claramente enorme variacin geogrfica en los requerimientos de vacunas, particularmente para
enfermedades de alta regulacin como la fiebre aftosa. Tambin hay diferentes requerimientos
apropiados a los varios tipos de manejo de los animales (p. ej., ganado lechero, pie de cra y sus
becerros, o ganado en engorde y aves para criadores, postura comercial y engorde de pollos).
Similarmente, los esquemas de vacunacin para perros, gatos, equinos, aves (mascotas), y otras

56

especies como conejos reflejaran criterios cientficos para los particulares individuos en riesgo. Se
recomienda leer publicaciones de organizaciones especializadas que publican las guas para la
vacunacin de, por ejemplo: equinos [la Sociedad Americana de Veterinarios Especialistas en Equinos
(http://www.aaep.org/vaccination_guidelines.htm)], gatos [la Sociedad Americana de Veterinarios Especialistas en
de Felinos (http://www.catvets.com/professionals/guidelines/publications/?Id=176)], y perros [la Sociedad Americana
de
Hospitales
de
Animales
(http://secure.aahanet.org/eweb/dynamicpage.aspx?
site=resource&webcode=CanineVaccineGuidelines)].
Relativamente
pocas
vacunas
son
ampliamente
recomendadas para aves mascotas, pero entre ellas se recomiendan la virus del polioma, la
enfermedad del virus Pacheco, viruela del canario y para reas endmicas contra el virus del oeste del
Nilo.
Para algunas especies, incluyendo los animales de produccin, la proteccin contra las infecciones y
enfermedades virales es por exclusin. Por ejemplo, los roedores de laboratorio son mantenidos en
diversos tipos de ambientes con barreras microbianas. Es muy raro que los ratones de laboratorio en
alto riesgo para la infeccin del virus de la ectromelia en casos de brotes deban ser inoculados con la
cepa vacunal IHD-T del virus de viruela bovina.
Los conejos para uso comercial, as como los empleados como mascotas, a menudo son vacunados
contra el virus de mixoma y la enfermedad hemorrgica viral, en lugares en donde estos agentes son
altamente prevalentes, como Europa. Estas enfermedades de conejos tambin ilustran el contexto
poltico de la vacunacin de animales: ciertos productos no estn disponibles en algunos pases, como
en los Estados Unidos de Amrica, porque la vacunacin podra entorpecer la vigilancia epidemiolgica
contra los brotes naturales de esta enfermedad.

Vacunacin de Pollos y Peces

Solamente en los Estados Unidos de Amrica, la produccin anual de aves (pollos) excede $22 billones
de dlares. Todas las aves producidas comercialmente son vacunadas contra diferentes enfermedades
virales, aunque hay una gran variacin en los tipos de vacunas usadas en los diferentes pases. La
estrategia de vacunacin de las aves contra las enfermedades virales no tan diferentes como la de los
mamferos, pero el costo de cada dosis vacunal es pequeo; mucho de esta economa de escala est
ligada al bajo costo de sistemas de aplicacin (aerosol o agua de bebida). Mayores economas se han
realizado por la introduccin de la inmunizacin in ovo a los huevos embrionados a los 18 das de
incubacin; un instrumento (llamado Inovoject), es capaz de inocular 40,000 huevos por hora. La
vacuna ms frecuentemente usada es contra la el virus de la enfermedad de Marek; antes los pollitos
eran inoculados a un da de edad; ahora son inmunizados por esta va. Ms del 95% de los pollos de
engorde, en el ao 2009, en los Estados Unidos de Amrica fueron vacunados por este mtodo.
La vacunacin es usada para prevenir la necrosis hematopoytica infecciosa y la necrosis pancretica
infecciosa en los peces. Los inmungenos para estas enfermedades incluyen vacunas de ADN y de
subunidades de protenas que son aplicadas por inyeccin o por la va oral. El objetivo de la vacunacin
en peces es el mismo que el de los mamferos; tan es as, que el origen del aparato inmune de los
vertebrados puede ser trazado a los primeros vertebrados con mandbulas, incluyendo a los peces
seos (telesteos). La inmunidad antiviral, aunque es menos entendida en los peces, comparada con la
de mamferos y aves, abarca los mecanismos de respuesta inmune innata y adquirida.
Especficamente, las respuestas innatas celular y humoral incluyen tipos celulares, molculas de
sealizacin y factores solubles similares a los encontrados en los mamferos. Estos incluyen fagocitos
equipados con receptores de reconocimiento de patrones (PRRs) como los TLR que llevan a respuestas
pro-inflamatorias e induccin de interfern; la induccin de los interferones como del tipo -1 es esencial
para las respuestas inmunes innatas de los peces, y su produccin es estimulada por dsARN vas de
sealizacin en una manera anloga a la de los mamferos. Hay evidencia en desarrollo que demuestra
que la respuesta inmune innata induce un estado antiviral en adicin a la inmunidad adquirida
activada. Similarmente, las respuestas adquiridas incluyen linfocitos T y B y la produccin de
inmunoglobulinas especficas que son crticas para la inmunidad antiviral en los peces. La estr4uctura
del complejo receptor de la clula T () se ha mantenido virtualmente constante a lo largo de la
evolucin de los primeros peces (cartilaginosos), incluyendo a los telesteos, mientras que la
organizacin y empleo de los receptores de las clulas B en los peces vara hasta los vertebrados
superiores, como los peces poseen dos lneas diferentes de linfocitos B (sIgM+ or sIg /+)las cuales
son importantes para la inmunidad antiviral y para la maduracin por afinidad de las inmunoglobulinas
y tienen una respuesta de memoria menor a la que presentan mamferos y aves. Debido a que los
peces son poiquilotermos, la magnitud de la respuesta inmune en la mayora de los peces est
profundamente influenciada por la temperatura del agua, la cual puede jugar un papel causal en los
patrones de enfermedades virales estacionales en las poblaciones de peces cautivos y silvestres.

57

Otras Estrategias para la Profilaxis y Tratamiento Antiviral

Inmunizacin Pasiva
Es posible conferir por corto tiempo proteccin a enfermedades virales especficas por la aplicacin
subcutnea de un Ab apropiado, como con sueros inmunes, inmunoglobulinas o Abs monoclonales. Las
inmunoglobulinas homlogas (de la misma especie) son preferidas porque las heterlogas (de otra
especie animal) pueden provocar una respuesta de hipersensibilidad, as como tambin ser ms
rpidamente eliminadas por el receptor. Mezclas de inmunoglobulinas normales contienen una
suficientemente alta concentracin de anticuerpos contra los virus comunes que causan enfermedades
sistmicas en las especies respectivas. Los ttulos ms altos aparecen en el suero de los animales
donadores convalecientes de una infeccin o que han sido hiperinmunizados por vacunaciones
repetidas; esas globulinas hiperinmunes son preferidas si estn disponibles comercialmente.
Una prctica ms comn es vacunar (preferentemente usando una vacunas de virus inactivado) a la
hembra preada o al ave hembra aproximadamente 3 semanas antes del parto o del inicio de la puesta
de huevos. Esto provee al recin nacido de inmunidad pasiva (materna) por los Abs presentes en el
huevo (aves) o en el calostro mamferos). Esto es particularmente importante para enfermedades cuyo
mayor impacto ocurre durante las primeras semanas de vida, cuando la inmunizacin activa del
neonato no puede ser realizada completamente. Adems, esta estrategia evita el uso de vacunas de
virus atenuados que pueden ser por s mismas patgenas para los neonatos.

Quimioterapia de las Enfermedades Virales

En el caso de las enfermedades infecciosas bacterianas de los animales domsticos existe una larga
seleccin de drogas para la quimioterapia antibacteriana. Sin embargo, los antibiticos que han sido
tan efectivos contra las enfermedades infecciosas bacterianas, tienen una muy pequea contra-parte
en la batera de armas contra las enfermedades infecciosas virales. La razn es que los virus son
ntimamente dependientes de las vas metablicas de su clula hospedera para su replicacin, de ah
que la mayora de los agentes que interfieren con la replicacin viral son txicos para las clulas. Sin
embargo, en aos recientes y estimulado en gran parte por la investigacin de enfermedades virales
humanas devastadoras, como el sndrome de la inmunodeficiencia adquirida, influenza y hepatitis B, se
ha aumentado el conocimiento de la bioqumica de la replicacin viral que ha conducido a un
planteamiento ms racional en la investigacin de los agentes quimioteraputicos antivirales, y han
aparecido una gran cantidad de tales compuestos que se han vuelto una parte estndar del arsenal
contra virus humanos en particular. Los agentes quimioteraputicos antivirales no son de uso comn en
la clnica veterinaria, parcialmente por su alto costo, pero algunas de las drogas antivirales empleadas
en medicina humana ya han sido usadas en veterinaria. Como debe ser, es preciso exponer
brevemente algunos desarrollos potenciales en este campo.
Varios pasos en el ciclo de la replicacin viral representan blancos potenciales para un ataque selectivo
antiviral. Tericamente, todos las enzimas codificadas por los virus son vulnerables, como es en todos
los procesos (enzimticos o no) que son ms esenciales para la replicacin viral que para la
supervivencia de la clula. Cuadro 4.1
Several steps in the virus replication cycle represent potential targets for selective antiviral drug attack.
Theoretically, all virus-encoded enzymes are vulnerable, as are all processes (enzymatic or nonenzymatic) that are more essential to the replication of the virus than to the survival of the cell. Cuadro
4.1, establece los pasos ms vulnerables y proporciona ejemplos de drogas antivirales que muestran
actividad, indicando algunas drogas que ya han permitidas para el uso en personas.
Cuadro 4.1 Posible Blancos para la Quimioterapia Antiviral en
Medicina Veterinaria

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Blanco

Droga Prototipo

Adhesin del virus a su receptor celular

Anlogos de receptores

Desnudamiento

Rimantadina

Transcripcin primaria del genoma viral

Inhibidores de Transcriptasa

Transcripcin Reversa

Zidovudina

Regulacin de la Transcripcin
Procesamiento de Transcritos de ARN

Inhibidores tat de los Lentivirus

Ribavirina

AZT

Traduccin de ARN Viral a Protena

Interferones

Escisin Post-traduccin de Protenas

Inhibidores de Proteasa

Replicacin de Genoma Viral de ADN

Acicloguanosina (Aciclovir a)

Replicacin de Genoma Viral de ARN

Inhibidores de Replicasas

Un planteamiento lgico en el desarrollo de una nueva droga antiviral es aislar o sintetizar alguna
substancia que predeciblemente sirva como inhibidora de una enzima codificada por el virus como la
transcriptasa, replicasa o proteasa. Anlogos de esta droga prototipo son luego sintetizados con miras a
aumentar su actividad y/o selectividad. Un refinamiento posterior a esta idea est bien lustrado por el
anlogo de nuclesidos, acicloguanosina (Aciclovir) un inhibidor de la polimerasa de ADN de los
herpesvirus. Aciclovir es de hecho una prodroga inactiva que requiere otra enzima codificada por
herpesvirus, la timidina cinasa, para fosforilarla hacia la forma activa. Debido a que esta enzima
solamente aparece en las clulas infectadas, el Aciclovir no es txico para clulas sanas, pero es muy
efectivo en clulas infectadas por herpesvirus. El Aciclovir y anlogos relacionados (p. ej., valaciclovir,
ganciclovir) est ahora disponibles para el tratamiento de infecciones por herpesvirus en humanos, y
tambin han sido usados en una escala limitada en medicina veterinaria para el tratamiento de lceras
corneales inducidas por el herpesvirus felino-1 y la encefalomielitis producida por herpesvirus equino-1.
Ellos tambin han sido usados en humanos expuestos a herpesvirus zoonticos de macacos,
herpesvirus de simios (B), que pueden ser de consecuencias catastrficas en humanos infectados.
Algunas drogas tambin han sido desarrolladas para el tratamiento de infecciones por influenzavirus en
personas y, potencialmente en animales. Por ejemplo, el fosfato de oseltamivir (tamiflu) es una
prodroga que, despus de su metabolismo en el hgado, libera un metabolito activo que inhibe la
neuraminidasa, la enzima viral que libera los viriones por protrusin de yemas (gemacin) desde la
superficie de las clulas infectadas y escinde al receptor del virus que liber a los viriones y no se
adhieran a clulas ya infectadas. La inhibicin de la neuraminidasa, por lo tanto, hace lenta la
diseminacin del virus, dando al aparato inmune la oportunidad de capturarlo y mediar la eliminacin
viral.
La ribavirina es tambin una prodroga que es degradada a metabolitos de ARN purina que interfieren
con el metabolismo del ARN que es requerido para la replicacin del virus. Esta droga ha sido usada en
el tratamiento de humanos con infecciones por virus sincitial respiratorio y hepatitis C.
La cristalografa de rayos-X ha abierto un nuevo sendero en la investigacin de las drogas antivirales.
Ahora que la estructura tridimensional de muchos virus es conocida, ha sido posible caracterizar los
sitios receptor-ligando en las protenas del capside a un nivel de resolucin atmico. Los complejos de
protenas virales con su unin a los receptores celulares pueden ser cristalizados y examinados
directamente. Por ejemplo, para algunos rinovirus, los sitios de unin receptor-virus son caones
esto es, hendiduras en la superficie del capside. Se han encontrado drogas que quedan adecuadas en
esas hendiduras, para as prevenir la adhesin del virus a la clula hospedera. En el futuro se tendr
informacin al mapear la posicin de residuos de aminocidos particulares que conforman dichas
hendiduras, permitiendo el diseo de drogas que sean ms adecuadas e interfieran mejor con los
procesos de infeccin viral. Esta metodologa tambin proporciona por s misma, el desarrollo de drogas
que bloqueen la penetracin a la clula o el desnudamiento del virus una vez dentro de la clula
hospedera. Si alguna de estas estrategias son exitosas en medicina humana, la adaptacin para el uso
en veterinaria es el siguiente paso.

Virus como Vectores de Terapia Gnica

Adems de su papel central como patgenos, los virus tambin han contribuido mucho al actual
entendimiento de la biologa celular y molecular. Ciertos virus, o componentes de ellos han sido
explotados como herramientas moleculares, y los virus tambin ofrecen un sistema novedoso y til
para la expresin de genes heterlogos. Especficamente, con el advenimiento de la manipulacin
gentica y de clones, los genes ajenos pueden fcilmente ser insertados en el genoma de muchos virus
de manera que puedan ser usados como vectores de expresin. Estos vectores de genes virales
incluyen a los entregan el gen de inters sin replicarse en el hospedador (vectores suicidas) y de esos
que se replican en el animal, con o sin integracin al genoma.
El uso de virus tanto de ARN, como de ADN como vectores en vacunas recombinantes fue descrito
arriba, pero esta misma estrategia tambin puede ser potencialmente explotada para uso teraputico.
Las estrategias de terapia de vectores de genes virales ofrecen un novedoso y especialmente atractivo
mtodo para la correccin de desrdenes genticos especficos, particularmente los que son definidos

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por la prdida o disfuncin de un gen. La correccin de tales desrdenes requiere la expresin

prolongada de la protena especfica que est ausente o disfuncional; as los virus con la capacidad de
insertar de manera segura y estable el gen determinado en el genoma del individuo afectado son la
lgica eleccin como vectores para este propsito. Con este fin, han sido evaluados una variedad de
viriones como potenciales vectores de genes, incluyendo a los retrovirus porque ellos tienen la
inherente capacidad de integrarse al genoma del hospedero, as como poxvirus, adenovirus, virus
adeno-asociados (como los parvocirus), herpesvirus y varios virus de ARN con polaridad positiva y
negativa.
Los virus adeno-asociados han recibido mucha atencin recientemente como potenciales vectores para
terapia de genes. Ellos son virus de ASDN pequeos (familia Parvoviridae, gnero Dependovirus), que
pueden infectar clulas en divisin o no, y pueden insertar su genoma en el de la clula. Es ms, la
integracin del genoma de los virus adeno-asociados ocurre en sitios especficos en el genoma del
hospedador, como opuesto a los retrovirus, cuya insercin es tpicamente al azar y potencialmente
mutagnicos. Los virus adeno-asociados son considerados como avirulentos (no patgenos), y la
capacidad para la integracin es fcilmente abolida por manipulacin gentica. Los virus adenoasociados recombinantes que expresan protenas apropiadas han sido evaluados para la correccin de
un gran nmero de desrdenes genticos humanos, entre los que se encuentran la hemofilia y la
distrofia muscular.
La estrategia de la entrega dirigida de genes es tambin potencialmente aplicable para la intervencin
teraputica para insertar molculas con capacidad para modular procesos de enfermedad,
especialmente enfermedades crnicas con patogenia mediada por inmunidad que podran ser
susceptibles a la expresin regional de molculas inmunomoduladoras.
Otra potencial aplicacin de la entrega dirigida de genes usando virus recombinantes es para el control
de la reproduccin de las especies animales silvestres y ferales, incluyendo a las especies que son
consideradas como plagas, por la insercin de protenas inmunognicas importantes para la actividad
reproductiva.

Tomado de Fenners Veterinary Virology fourth edition 2011

Edited by N. James MacLachlan and Edward J. Dubovi
Elsevier & Academic Press
Traducido con fines didcticos por Nicols Alejandro De Miguel Valera
Catedrtico titular de Virologa Veterinaria
Universidad Veracruzana
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Veracruz, Ver.
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