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RA: 33890.
RA: 34229.
RA: 33875.
Abril 2007
INTRODUO
A espectrofotometria o mtodo de anlise ptico mais usado nas investigaes
biolgicas e fisico-qumicas. O espectrofotmetro um instrumento que permite comparar
a radiao absorvida ou transmitida por uma soluo que contm uma quantidade
desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substncia. Todas as
substncias podem absorver energia radiante, mesmo o vidro que parece completamente
transparente absorve comprimentos de ondas que pertencem ao espectro visvel. A gua
absorve fortemente na regio do infravermelho. A absoro das radiaes ultravioletas,
visveis e infravermelhas dependem das estruturas das molculas, e caracterstica para
cada substncia qumica. Quando a luz atravessa uma substncia, parte da energia
absorvida: a energia radiante no pode produzir nenhum efeito sem ser absorvida. A cor das
substncias se deve a absoro de certos comprimentos de ondas da luz branca que incide
sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas
no absorvidos. O instrumento usado na espectroscopia UV/VIS chamado de
espectrofotmetro. Para se obter informao sobre a absoro de uma amostra, ela
inserida no caminho ptico do aparelho. Ento, luz UV e/ou visvel em certo comprimento
de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) passada pela amostra. O
espectrofotmetro mede o quanto de luz foi absorvida pela amostra. A intensidade da luz
antes de passar pela amostra simbolizada por I 0, e a intensidade da luz depois de passar
pela amostra simbolizada por I. A transmitncia da amostra definida pela razo (I / I0), a
qual normalmente expressa em porcentagem de transmitncia (%T). A partir dessa
informao, a absorbncia de ambos determinada para esse certo comprimento de onda ou
como uma funo de uma faixa de comprimentos de onda. Os espectrofotmetros mais
sofisticados normalmente fazem isso automaticamente. Existem dois tipos de
espectrofotmetros: de feixe simples e de feixe duplo.
Os espectrofotmetros so instrumentos de anlise que permitem:
Comp. de onda ( ) nm
Absorbncia
450
0,012
460
0,013
470
0,014
480
0,016
490
0,021
500
0,027
510
0,031
520
0,036
530
0,035
540
0,034
550
0,028
560
0,019
570
0,016
580
0,011
590
0,007
600
0,006
Balo
Comp. de onda
( ) nm
Absorbncia
520
0,026
520
0,031
520
0,037
520
0,043
520
0,050
* Amostra Problema
520
0,046
O valor do comprimento de onda mximo (mx.) 520 nm utilizado na tabela acima para
medir a absorbncia das cinco solues, foi encontrado na etapa 1. Na etapa 2, foi medida
tambm a absorbncia de uma amostra problema (*), de concentrao desconhecida.
Posteriormente, pode-se calcular as concentraes finais dos cinco bales analisados:
Balo 1:
1,5 ml soluo KMnO4 0,002 mol/L
C1 . V1= C2 . V2
0,002 . 1,5 = C2 . 25
C2 = 1,2x10-4 mol/L
Balo 2:
2,0ml soluo KMnO4 0,002 mol/L
C1 . V1= C2 . V2
0,002 . 2,0 = C2 . 25
C2 = 1,6x10-4 mol/L
Balo 3:
2,5ml soluo KMnO4 0,002 mol/L
C1 . V1= C2 . V2
0,002 . 2,5 = C2 . 25
C2 = 2,0x10-4 mol/L
Balo 4:
3,0ml soluo KMnO4 0,002 mol/L
C1 . V1= C2 . V2
0,002 . 3,0 = C2 . 25
C2 = 2,4x10-4 mol/L
Balo 5:
3,5ml soluo KMnO4 0,002 mol/L
C1 . V1= C2 . V2
0,002 . 3,5 = C2 . 25
C2 = 2,8x10-4 mol/L
Depois de encontrados os valores das concentraes finais das solues dos cinco
bales analisados, pde-se montar a seguinte tabela demonstrativa:
Tab.3 Tabela demonstrativa de dados.
Balo
Comp. de onda
( ) nm
Absorbncia
Concentrao
520
0,026
1,2E-4
520
0,031
1,6E-4
520
0,037
2,0E-4
520
0,043
2,4E-4
520
0,05
2,8E-4
A tabela acima mostra as concentraes finais encontradas para cada soluo (exceto a
soluo problema), suas respectivas absorbncias em funo de um comprimento de onda
determinado. A partir destas, pde-se montar o seguinte grfico:
Balo 2:
1 mol KMnO4 ---------- 158,04 g/mol
1,6 .10-4 mol
---------- x
x = 0,02529 g/L
Como:
1 mg --------- 10-3g/L
x ------------- 0,02529 g/L
x = 25,29 mg/L ou 25,29 ppm
Balo 3:
1 mol KMnO4 ---------- 158,04 g/mol
2,0 .10-4 mol
---------- x
x = 0,03161 g/L
Como:
1 mg --------- 10-3g/L
x ------------- 0,03161 g/L
x = 31,61 mg/L ou 31,61 ppm
Balo 4:
1 mol KMnO4 ---------- 158,04 g/mol
2,4 .10-4 mol
---------- x
x = 0,03793 g/L
Como:
1 mg --------- 10-3g/L
x ------------- 0,03793 g/L
x = 37,93 mg/L ou 37 ,93 ppm
Balo 5:
1 mol KMnO4 ---------- 158,04 g/mol
2,8 .10-4 mol
---------- x
x = 0,04425 g/L
Como:
1 mg --------- 10-3g/L
x ------------- 0,04425 g/L
x = 44,25 mg/L ou 44,25 ppm
Para melhor visualizao, os valores calculados foram dispostos na tabela de dados
abaixo:
Tab.4 - Converso da concentrao (mol/L) de KMnO4 em ppm.
Balo
Conc. (Mol/L)
Conc. (ppm)
1
1,20E-04
18,96
2
1,60E-04
25,28
2,00E-04
31,6
2,40E-04
37,93
2,80E-04
44,25
* Amostra Problema
2,57E-04
40,67
CONCLUSES
Com base nos resultados observados, pde-se concluir que a curva de calibrao est
de forma linear com os pontos obtidos das concentraes das solues analisadas, e que a
margem de erro foi pequena, tendo em vista que o coeficiente linear (R) apresentou um
valor muito prximo de 1, aproximadamente 0,99835. Contudo, imprescindvel ressaltar
que para se obter uma curva de calibrao perfeita, e/ou com a menor margem de erro
possvel, a fim de no comprometer os resultados do experimento; deve-se estar atento
durante toda execuo do procedimento, tanto para pipetar a quantidade correta de soluo,
bem como cuidar para no ultrapassar a marcao do menisco ao preencher o volume dos
bales. Deve-se tambm, tomar o mximo cuidado ao manusear as cubetas a fim de evitar
as perdas por reflexo e espalhamento, lembrando-se que a cubeta de referncia deve conter
o mesmo solvente utilizado (branco). Outro fator relevante, diz respeito ao nmero de
pontos para construo da curva de calibrao, que deve ser de no mnimo 5 ou 6, para
maior certeza na determinao da concentrao da amostra.
Atravs do grfico (fig.2) pode-se gerar a equao da reta, e assim pode-se e calcular e
obter o valor da concentrao da amostra problema, de 2,573.10-4 mol/L e/ou 40,67 ppm.
BIBLIOGRAFIAS
SKOOG, Douglas A., HOLLER, F. James, NIENAM, Timothy A. Princpios de anlise
instrumental; Traduo: Ignez Caracelli et al. 5 ed. Bookman: Porto Alegre, 2002, p. 194,
276-297.
<http://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometria> Acesso em: 04 abr 2007.