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TABLE DES MATIERES


page

INTRODUCTION -------------------------------------------------------------------------- 6
CHAPITRE 1 -------------------------------------------------------------------------------- 7
1. LA COAGULATION PLASMATIQUE------------------------------------------ 7
1.1 LES FACTEURS DE LA COAGULATION -----------------------------------------7
1.1.1 NOMENCLATURE---------------------------------------------------------------7
1.1.2 LIEU DE SYNTHESE ------------------------------------------------------------7
1.1.3 MODE DACTION ---------------------------------------------------------------8
1.2 LES ETAPES ------------------------------------------------------------------------ 10
1.2.1 FORMATION DE LA PROTHROMBINASE --------------------------------- 10
1.2.1.1 VOIE EXOGENE ( EXTRINSEQUE) ------------------------------------- 10
1.2.1.2 VOIE ENDOGENE (INTRINSEQUE)------------------------------------- 10
1.2.2 FORMATION DE LA THROMBINE ------------------------------------------ 10
1.2.3 FORMATION DE LA FIBRINE------------------------------------------------ 11
1.2.4 DEVENIR DU CAILLOT------------------------------------------------------- 13
1.3 LES TESTS DEXPLORATION DE LA COAGULATION------------------------ 15
1.3.1 LES TESTS GLOBAUX -------------------------------------------------------- 15
1.3.1.1 LE TEMPS DE CEPHALINE-ACTIVATEUR :TCA--------------------- 16
1.3.1.2 LE TEMPS DE QUICK :TQ ----------------------------------------------- 18
1.3.1.3 LE TEMPS DE THROMBINE :TT---------------------------------------- 18
1.3.2 LES TESTS ANALYTIQUES -------------------------------------------------- 18
1.4 INTERET PRATIQUE DE CES TESTS -------------------------------------------- 19
1.4.1 INTERET DIAGNOSTIC ------------------------------------------------------- 19

1.4.2 INTERET DANS LE SUIVI THERAPEUTIQUE------------------------------ 20

CHAPITRE 2 -------------------------------------------------------------------------------22
2. ESSAI COMPARATIF DU SCA 2000 -------------------------------------------22
2.1 PROTOCOLE EXPERIMENTAL--------------------------------------------------- 22
2.1.1 LES ANIMAUX----------------------------------------------------------------- 22
2.1.2 LES PRELEVEMENTS --------------------------------------------------------- 22
2.1.2.1 REALISATION------------------------------------------------------------- 22
2.1.2.2 CONSERVATION --------------------------------------------------------- 24
2.1.3 REALISATION DES TESTS AVEC LE SCA2000 ---------------------------- 24
2.1.3.1 MATERIEL----------------------------------------------------------------- 24
2.1.3.2 PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT ------------------------------------- 24
2.1.3.3 METHODE DE REALISATION ------------------------------------------ 25
2.1.4 REALISATION DU TEMPS DE QUICK PAR LA METHODE
CHRONOMETRIQUE ---------------------------------------------------------------- 25
2.1.4.1 MATERIEL----------------------------------------------------------------- 25
2.1.4.2 METHODE ----------------------------------------------------------------- 26
2.1.5 REALISATION DU TEST DE CEPHALINE AVEC ACTIVATEUR PAR LA
METHODE CHRONOMETRIQUE -------------------------------------------------- 26
2.1.5.1 MATERIEL----------------------------------------------------------------- 26
2.1.5.2 METHODE ----------------------------------------------------------------- 26
2.1.6 TRAITEMENT DES RESULTATS -------------------------------------------- 27
2.1.6.1 REPETABILITE------------------------------------------------------------ 27
2.1.6.1 REPRODUCTIBILITE ----------------------------------------------------- 27
2.2 RESULTATS OBTENUS ----------------------------------------------------------- 27
2.2.1 REPETABILITE ---------------------------------------------------------------- 27
2.2.2 REPRODUCTIBILITE---------------------------------------------------------- 28

2.2.3 COMPARAISON DES RESULTATS OBTENUS PAR LES DEUX


METHODES -------------------------------------------------------------------------- 29
2.2.3.1 VALEURS OBTENUES CHEZ LES CHIENS SAINS-------------------- 29
2.2.3.2 RESULTATS POUR LE TEMPS DE QUICK ----------------------------- 30
2.2.3.3 RESULTATS POUR LE TEMPS DE CEPHALINE-ACTIVATEUR----- 32

CHAPITRE 3 -------------------------------------------------------------------------------34
3. DISCUSSION---------------------------------------------------------------------------34
PRECISION DE LA METHODE-------------------------------------------------------- 34
POUR LE TEMPS DE QUICK ------------------------------------------------------- 34
Rptabilit : ------------------------------------------------------------------------ 34
Reproductibilit :-------------------------------------------------------------------- 35
POUR LE TEMPS DE CEPHALINE-ACTIVATEUR ------------------------------- 35
Rptabilit : ------------------------------------------------------------------------ 35
Reproductibilit :-------------------------------------------------------------------- 35
COMMENTAIRE --------------------------------------------------------------------- 35
COMPARAISON DES RES ULTATS --------------------------------------------------- 35
ASPECTS PRATIQUES ----------------------------------------------------------------- 37

CONCLUSION-----------------------------------------------------------------------------38
ANNEXES ----------------------------------------------------------------------------------39
BIBLIOGRAPHIE -------------------------------------------------------------------------44

TABLE DES ILLUSTRATIONS

TABLEAUX
Tableau 1 :Les facteurs de la coagulation plasmatique ([3][9][10])..................................... 9
Tableau 2 : Modifications des tests au cours des principaux troubles de lhmostase du
chien et du chat ([8][11][17]) ......................................................................................... 21
Tableau 3 : affections rencontres dans lchantillon des chiens malades........................ 23
Tableau 4: Rptabilit pour le temps de Quick au SCA 2000 .......................................... 27
Tableau 5: Rptabilit pour le temps de Cphaline -Activateur au SCA 2000................ 28
Tableau 6: Apprciation de la reproductibilit par calcul des coefficients de variation
(CV).................................................................................................................................. 28
Tableau 7: Valeurs pour les diffrents tests et par les deux types de mthodes pour les 31
chiens sains ...................................................................................................................... 30
Tableau 8 : Rpartition des rsultats obtenus pour le temps de Quick pour les 68 chiens
malades............................................................................................................................ 30
Tableau 9 : Rpartition des rsultats obtenus pour le TCA pour les 68 chiens malades 32

GRAPHIQUES
Graphique 1: Corrlation entre les mesures de temps de Quick effectues par la
mthode chronomtrique et avec le SCA2000 pour lchantillon des chiens malades
(on a utilis les Log pour parpiller la distribution). .................................................. 31
Graphique 2: Corrlation entre les mesure de temps de Cphaline -Activateur ralises
par la mthode chronomtrique et avec le SCA 2000 pour lchantillon des chiens
malades (on a utilis les Log pour parpiller la distribution). ................................... 33

ANNEXES
Annexe 1 : Temps obtenus pour lchantillon des chiens sains (en secondes).................. 40
Annexe 2 : Temps obtenus pour lchantillon des chiens malades (en secondes)............. 42
Annexe 3 : mode demploi du SCA 2000 .............................................................................. 43

INTRODUCTION
Lhmostase est un tat dquilibre relativement instable qui peut tre
maintenu grce trois mcanismes successifs : lhmostase primaire qui aboutit
la formation du clou plaquettaire, la coagulation plasmatique dont rsulte la
formation du caillot et la fibrinolyse qui permettra terme la solubilisation de ce
caillot.
Une perturbation de lune de ces tapes aura pour consquence un dplacement
de lquilibre dans le sens dun syndrome hmorragique ou dun syndrome
thrombotique. Et si ces anomalies peuvent tre suspectes cliniquement, leur
diagnostic proprement dit passe par des examens complmentaires plus ou
moins complexes et donc plus ou moins accessibles au praticien, car difficiles
standardiser et interprter.
Ainsi la coagulation plasmatique ncessite pour son valuation de base:
Le temps de cphaline avec activateur (T.C.A.) qui explore la voie
endogne et la voie commune de la coagulation plasmatique
Le temps de Quick (T.Q.) qui explore la voie exogne et la voie
commune de la coagulation plasmatique
Le temps de thrombine (T.T.) qui explore la fibrinoformation, dernire
tape de la coagulation plasmatique.
Ces examens ncessitent, outre une certaine habitude de leur ralisation, de
comparer lchantillon test un chantillon tmoin, ce qui rend leur ralisation
plus lourde encore.
Le laboratoire SYNBIOTICS propose en commercialisant le SCA2000 une
mthode dobtention du T.C.A. et du T.Q. qui est rapide, automatise, ralisable
partir dun simple chantillon de sang total et ne requerrant pas de
comparaison un chantillon tmoin. Lobjet de ce travail et dapprcier, en la
comparant aux mthodes chronomtriques classiquement employes, la fiabilit
de cette mthode chez le chien.
Aprs un bref rappel des mcanismes mis en jeu lors de la coagulation
plasmatique, nous dcrirons les techniques employes, les mthodes utilises
pour les comparer et les rsultats obtenus. Enfin, nous valuerons lintrt de ces
mthodes, leurs limites et leur applicabilit en pratique courante.
6

CHAPITRE 1
1. LA COAGULATION PLASMATIQUE
Lhmostase est un tat dquilibre complexe qui dcoule de trois grands mcanismes. Le
1er dentre eux est lhmostase primaire qui aboutit la formation dun clou plaquettaire. La
coagulation plasmatique intervient ensuite pour renforcer ce clou plaquettaire grce la
synthse dun caillot de fibrine ( celui ci sera par la suite remani au cours de la 3me tape de
lhmostase que constitue la fibrinolyse). Elle fait intervenir de nombreux facteurs qui vont
interagir au cours dtapes ractionnelles successives.

1.1 LES FACTEURS DE LA COAGULATION ([3][9][10])


Cf. tableau 1
1.1.1 NOMENCLATURE
Ces facteurs sont pour la plupart des glycoprotines plasmatiques. Ils sont dsigns par
des chiffres romains suivi ou non dun a indiquant leur tat activ ou pas.
Ils sont au nombre de douze ( I,II,III,IV,V,VII,VIII,IX,X,XI,XII,XIII) auxquels il faut ajouter
deux facteurs dcouverts plus rcemment : le kininogne de haut poids molculaire (KHPM)
et la prkallicrine ( prK).
1.1.2 LIEU DE SYNTHESE ( [21])
La plupart de ces facteurs ont une synthse hpatique ( facteurs I,II,V,VII, VIIIc ?, IX,
X, XI, XII, XIII) , ce qui explique que des troubles de la coagulation peuvent faire partie des
anomalies biologiques rencontres lors dune affection hpatique.
Les facteurs II, VII, IX et X sont dits vitamine K dpendants car leur synthse est
tributaire de la prsence de vitamine K. Celle-ci permet en effet la fixation dun groupement
carboxyl dans la chane polypeptidique de ces facteurs, ce groupement confrant aux facteurs
en question la capacit de se lier au calcium et aux phospholipides. Un dficit en vitamine K
(classiquement rencontr en cas dintoxication par certains anticoagulants) se traduira donc
par la synthse de facteurs inactifs et donc par des troubles de la coagulation.

1.1.3 MODE DACTION


Les facteurs II, VII, IX, X, XI, XII et XIII sont des zymognes qui acquirent leur
fonctionnalit aprs activation par protolyse ( ce sont le plus souvent des srine-protases).

Les facteurs V et VIII sont eux des cofacteurs enzymatiques, vritables catalyseurs de
la coagulation plasmatique. Ils nont en effet pas dactivit enzymatique propre mais
participent, avec le Ca+ et les phospholipides, la formation des complexes activateurs
tnase et prothrombinase.

N.B. : le facteur VIII est en ralit la combinaison de deux protines relies par des liaisons
non covalentes : le facteur VIII coagulant ( VIIIc) et le facteur de Von Willebrand (FVW).

Dnomination

fibrinogne

Forme
active
fibrine

II

prothrombine

thrombine

III

absente

IV

thromboplastine
tissulaire
ion calcium

proacclrine

Va

VII

proconvertine

VII et VIIa

VIIIc

facteur antihmophilique A

VIIIa

Ca+

IX

facteur antihmophilique B

IXa

facteur Stuart

Xa

XI

facteur PTA

XIa

XII

facteur
Hageman

XIIa

XIII

facteur
stabilisant de la
fibrine

XIIIa

prK

prkallicrine

kallicrine

KHPM

kininogne de
haut poids
molculaire

idem

Lieu de
synthse
foie

consommation DemiRle
vie
oui
2-4 Monomre protique se
jours polymrisant pour donner la
fibrine
foie avec
oui
3-4 Hydrolyse le fibrinogne.
vitamine K
jours Active les facteurs
II,V,VII,VIII,XI & XIII
tissus
----- Active le facteur X dans le
complexe prothrombinase
------- Ncessaire la plupart des
tapes de la coagulation
foie et SMM
oui
36-48 Cofacteur du X dans le
heures complexe prothrombinase
foie avec
non
4
VIIa et facteur tissulaire
vitamine K
heures activent le X
foie?
oui
10-16 Cofacteur du IX dans le
Cellules
heures complexe antihmophilique,
endothliales
constitue avec les
phospholipides, le Ca+ et
le IXa le complexe tnase
permettant l'activation du X
foie avec
non
24 Entre dans la composition
vitamine K
heures du complexe tnase
permettant l'activation du X
par voie endogne
foie avec
non
36-48 Donne le Xa faisant partie
vitamine K
heures du complexe
prothrombinase et active les
facteurs VII et IX
foie?
peu consomm 2-3 Donne le XIa qui active le
jours facteur IX en prsence de
calcium
foie ?
peu consomm
48 Systme contact. Active le
heures XI. Participe au systme
fibrinolytique et au systme
des kinines
foie ?
oui
7 jours Donne en prsence d'ions
calcium le XIIIa (
transaminase) qui
transforme la firine soluble
en fibrine insoluble
------- Systme contact. Active le
XII,le systme des kinines,
la prornine et le
plaminogne
------- Systme contact. Active la
prkallicrine en prsence
de XIIa

Tableau 1 :Les facteurs de la coagulation plasmatique ([3][9][10])

1.2 LES ETAPES ([2][3][5][9])


Cf. Schma 1
La coagulation plasmatique consiste en une cascade enzymatique qui va voir se former
la prothrombinase, une enzyme responsable de la transformation de la prothrombine en
thrombine. Celle-ci, une protase, permettra le clivage de la molcule de fibrinogne en
fibrine.
1.2.1 FORMATION DE LA PROTHROMBINASE
Cest lenzyme permettant le clivage de la prothrombine (II) en thrombine (IIa). Elle
rsulte de lassociation, sur une matrice de phospholipides, du facteur Stuart (Xa), de la
proacclrine (Va) et de calcium. Lassociation de ces facteurs peut tre dclenche par deux
mcanismes diffrents :
1.2.1.1 VOIE EXOGENE ( EXTRINSEQUE)
Cest le contact du plasma et du facteur tissulaire avec le facteur VIIa qui va entraner
lactivation du facteur X. celui-ci va alors former la prothrombinase en sassociant au facteur
Va en prsence de Ca+.
1.2.1.2 VOIE ENDOGENE (INTRINSEQUE)
Elle est initie par le Systme contact (= facteur XII + KHPM + prkallicrine) qui
est activ par lexposition du sous endothlium au niveau dune lsion vasculaire. Sensuit
alors lactivation en cascade des facteurs XI puis IX. Les facteurs IXa et VIIIC vont alors
sassocier, en prsence de Ca+ et sur une matrice phospholipidique, formant ainsi le
complexe Tnase. Celui-ci induit lactivation du facteur X et donc la formation de la
prothrombinase.
1.2.2 FORMATION DE LA THROMBINE
Elle rsulte de laction de la prothrombinase sur la prothrombine. La thrombine ainsi
forme possde trois rles majeurs :

Cliver le fibrinogne en fibrine

Favoriser lagrgation plaquettaire

10

Activer le facteur XIII ( en prsence de Ca+)


1.2.3 FORMATION DE LA FIBRINE

La thrombine clive le fibrinogne en deux fibrinopeptides ( A et B) et un monomre


de fibrine. Ces monomres vont se polymriser en fibrine soluble. Cest le facteur XIIIa qui
va renforcer la cohsion entre les monomres et rendre ainsi la fibrine insoluble : le caillot est
form.

11

VOIE ENDOGENE

VOIE EXOGENE

Systme contact
KHPM + prK +XIIa
XI

complexe
tnase

XIa
IXa

IX

Facteur tissulaire
+ VIIa

VIIIC

Ca++ Facteur 3 pl.


complexe
prothrombinase
X

Xa

Va

Ca++ Facteur 3 pl.


N

N
I
II
V
VII
VIIIc

IX

X
XI
XII
XIII

Facteur
Fibrino
gne
Prothrombine
Proacclerine
Proconvertine
Facteur
antihmophilique
A
Facteur
antihmophilique
B
Facteur Stuart
Facteur PTA
Facteur
Hageman
Facteur
stabilisant
de
la fibrine

V
O
I
E

II
I

C
O
M
M
U
N
E

Monomres de
fibrine

IIa
XIII

XIIIa

Fibrine stable

CAILLOT

Schma 1 : La coagulation plasmatique ([2][3][23][24])

12

1.2.4 DEVENIR DU CAILLOT


Cf. Schma 2
Pour permettre la repermabilisation du vaisseau, ce caillot sera ensuite remani au
cours de la troisime tape constitutive de lhmostase :la fibrinolyse. Elle consiste
essentiellement en lactivation du plasminogne en plasmine, une enzyme protolytique
capable de lyser la fibrine et le fibrinogne ( on appelle PDF les produits de cette
dgradation). Le rle de cette enzyme est aussi de dgrader certains facteurs de la coagulation
(facteurs V, VII, XIIa ) et dactiver certaines fractions du complment.

13

V
O
I
E
E
N
D
O
G
E
N
E

Phospholipides
Collagne (contact)

XII

XIIa

KHPM

Fragments de XIIa

Kallicrine

Prkallicrine
Activation
du
complment

Kinines
Activateur
plasmatique
( pro-UK)

Activateur
tissulaire
(t-PA)

Plasminogne

Plasmine
Anti-plasmines

Streptokinase

Urokinase

Dgradation du V, duVIII
Du fibrinogne et de la fibrine

VOIE
EXOGENE
PDF

Schma 2 : La fibrinolyse ([3][10])

14

1.3 LES TESTS DEXPLORATION DE LA COAGULATION


([7][13])
Le diagnostic des affections lies des troubles de lhmostase passe par lexploration des
trois temps qui la composent.

En pratique on explorera lhmostase primaire en ralisant deux examens de base : la


mesure du temps de saignement (valeurs normales de 2 4 min chez le chien pour une
incision gingivale au niveau de la lvre suprieure) et la numration plaquettaire ( valeurs
normales de 200 500 .109 /L). Ces examens pourront ventuellement tre complts par une
ponction de moelle ( pour identifier le caractre central ou priphrique dune thrombopnie)
et/ou par la ralisation, via un laboratoire spcialis, de tests fonctionnels valuant les
capacits dadhsion, dagrgation et de libration de constituants au niveau plaquettaire (
tests toutefois peu usits en mdecine vtrinaire).

La fibrinolyse sera explore par la mesure du temps de lyse des euglobulines du


plasma ou, de manire plus classique aujourdhui, par le dosage des PDF dans le plasma : une
fibrinolyse anormalement leve entranera une augmentation de leur concentration ( on
considre comme pathologique une concentration en PDF suprieure 10 g/mL).

Pour ce qui est de la coagulation plasmatique, on dispose principalement de trois tests


permettant une approche globale ( ces tests sont les plus couramment raliss en pratique mais
il en existe dautres). Ce sont les mesures des temps de Cphaline-Activateur, de Quick et de
Thrombine.
Ces tests peuvent tre complts le cas chant par des tests analytiques, bass sur le dosage
dun des facteurs de la coagulation ou de ses produits de dgradation.
1.3.1 LES TESTS GLOBAUX
Ces tests seffectuent partir de sang prlev dans des tubes citrats ( on prconise un
ratio gal 1 volume de citrate pour 9 volumes de sang). Il est important de raliser ces tests
rapidement aprs la prise de sang ( dlai maximum de 3-4h).
Parmi toutes les mthodes, les plus utilises en pratique sont les mthodes chronomtriques
bases sur la mesure par loprateur du temps ncessaire lobtention dun caillot aprs mise
en contact avec les ractifs.

15

1.3.1.1 LE TEMPS DE CEPHALINE-ACTIVATEUR :TCA

Cf. Schma 3
Cest par dfinition le temps de coagulation dun plasma pauvre en plaquettes ( i.e.
centrifug

4000

tours

pendant

5-10

min)

mis

en

prsence

dune

suspension

phospholipidique, dun activateur et de calcium. Lactivateur le plus souvent employ est le


kaolin : on parle alors de temps de cphaline-kaolin ( TCK).
Ce test nest pas parfaitement reproductible. Il est donc prfrable de comparer le plasma test
un plasma de chien tmoin : on considrera comme allong un TCA suprieur 1.3 fois le
TCA du tmoin.
Le TCA dpend de lensemble des facteurs de la voie endogne et de la voie commune. Il
explore donc les facteurs I, II, V, VIII, IX, X, XI et XII. Nanmoins, la disponibilit dun
facteur devant tre rduite dau moins 70% par rapport la normale pour observer un
allongement de ces temps, il peut arriver que certains individus htrozygotes ( hmophiles A
ou B par exemple) ne soient pas dtects ( car lactivit du facteur est encore comprise entre
40 et 60 % de son activit normale).

A lE.N.V.Toulouse, les valeurs de TCA considres comme normales chez le chien sont
comprises entre 10 et 14 sec.

16

Voie
endogne

Voie
exogne

Voie
commune
Temps de
CphalineActivateur

Temps de
Quick
Fibrinogne

Temps de
Thrombine

Caillot

Schma 3 : Etapes de la coagulation explores par les 3 principaux paramtres ([4][5])

17

1.3.1.2 LE TEMPS DE QUICK :TQ


Le TQ est le temps de coagulation dun plasma pauvre en plaquettes mis en prsence
dun excs de facteur tissulaire ( thromboplastine) et de Ca++. Il explore la voie exogne et la
voie commune de la coagulation, cest dire les facteurs I, II, V, VII et X.
Le dficit en facteur tissulaire ne semble pas possible car il est prsent dans tous les tissus.
Cest le test de choix en cas de suspicion dintoxication au antivitamine K car il est le premier
modifi, la demi-vie du facteur VII ( synthse vitamine K dpendante) tant la plus courte (
environ 4 heures).
Une hypofibrinognmie peut aussi tre responsable dun allongement du TQ.

A lE.N.V.Toulouse, les valeurs de TQ considres comme normales chez le chien sont


comprises entre 6 et 7 sec.(en utilisant une thromboplastine extraite dencphale de lapin).
On peut exprimer cette valeur en pourcentage par rapport un tmoin : on parle alors de taux
de prothrombine.
1.3.1.3 LE TEMPS DE THROMBINE :TT
Il explore la fibrinoformation, dernire tape de la voie commune.
Cest le temps de coagulation dun plasma pauvre en plaquettes mis en prsence de
thrombine.
Lallongement de ce temps rsulte soit dun dficit quantitatif ( hypofibrinognmie) ou
qualitatif en fibrinogne, soit de la prsence dinhibiteurs de la thrombine ( hparine,
antithrombine III) ou de la polymrisation des monomres de fibrine ( PDF).

A lE.N.V.Toulouse, les valeurs de TT considres comme normales chez le chien sont


comprises entre 18 et 30 sec. (en utilisant une thrombine dorigine bovine dilue au 1/20me ).
1.3.2 LES TESTS ANALYTIQUES ([9])
Ces tests, bass eux aussi sur des mthodes chronomtriques, permettent de doser un
facteur de la coagulation en particulier. Chez le chien, on recherche plus particulirement les
facteurs I, II, V, VIIIC et X ainsi que lensemble VII+X.
Le principe est relativement simple : on recherche le temps de coagulation dun plasma
chimre, mlange du plasma tester et dun plasma spcifique du commerce contenant tous
les facteurs sauf celui recherch. On effectue alors un temps de Quick sil sagit dun facteur
18

de la voie commune ou exogne, un temps de Cphaline-Activateur sil sagit dun facteur de


la voie endogne. Les rsultats sont exprims en pourcentage par rapport un plasma
tmoin :on considre comme normal un temps compris entre 70 et 120 % du temps obtenu
avec le plasma tmoin.
Pour le fibrinogne, on peut accder la valeur de la fibrinognmie par ce type de mthode.
En effet, en prsence de concentration leve de thrombine et de concentration faible de
fibrinogne (plasma dilu), on peut tablir un lien entre le temps obtenu et la fibrinognmie
(via une relation bilogarithmique).
Les valeurs usuelles de fibrinognmie chez le chien sont de 2-4 g/L.

Il est galement possible de doser lantithrombine III dont le taux diminue lors dactivation de
la coagulation, dinsuffisance hpatique et de syndrome nphrotique. On ralise ce dosage en
ajoutant au plasma de lhparine et de la thrombine et en mesurant lactivit de la thrombine
rsiduelle sur un substrat synthtique. Les rsultats ainsi obtenus sont exprims en
pourcentage par rapport un plasma tmoin : on considre comme normales des valeurs
comprises entre 80 et 120 % de celles obtenues avec le tmoin.

Enfin il faut citer le dosage des PDF qui permet de dpister une activation de la coagulation
suivie de thrombolyse ou bien une hyperfibrinolyse primitive. Il seffectue laide de kits
spcifiques bass sur des techniques dagglutination de particules de latex recouvertes
danticorps anti-PDF.
Chez le chien, des valeurs de PDF suprieures 10 g/mL sont considres comme
anormales et des valeurs suprieures 30-40 g/mL sont fortement vocatrices dune CIVD
([14]).

1.4 INTERET PRATIQUE DE CES TESTS


Ils jouent un rle la fois dans le diagnostic et le suivi thrapeutique.
1.4.1 INTERET DIAGNOSTIC
Une suspicion clinique de trouble de lhmostase est caractrise par un syndrome danmie
(le plus souvent sans hmolyse) associ la survenue de saignements multiples et/ou rpts
(quils soient extrioriss, intra-articulaires ou intracavitaires). Dans certains cas, cette
situation ncessite de prendre des dispositions durgence (remplissage vasculaire, assistance

19

respiratoire). Un diagnostic rapide est alors primordial. Celui-ci passe en premier lieu par
un bilan associant un hmogramme, le dosage des protines plasmatiques et lexploration de
la coagulation plasmatique par la ralisation dun TQ, dun TCA et dun TT (ou dune
fibrinognmie).

Ce premier bilan lui permettra dcarter ou de confirmer un trouble de lhmostase voire de


lidentifier de manire prcise, permettant ainsi la mise en place dune thrapeutique adapte.

Cf. tableau 2
1.4.2 INTERET DANS LE SUIVI THERAPEUTIQUE
Ces tests ont aussi pour vocation de suivre lvolution du patient au cours de son traitement.

Ainsi un animal intoxiqu aux rodenticides anti-vitamine K sera trait classiquement par
ladministration quotidienne de vitamine K1 (5 mg/Kg) pendant 3 semaines. On vrifiera
lefficacit du traitement en effectuant un TQ 48 heures aprs larrt du traitement : si celui-ci
est encore allong, on prescrira 10 jours de traitement supplmentaires ([16]).

Le TCA pourra par exemple tre utile la surveillance dun animal ayant prsent une CIVD
et trait lhparine : une volution favorable se signe par une normalisation du TCA
concomitante dune diminution des PDF plasmatiques.

20

Troubles de
lhmostase
Intoxication
aux antivitamines K
CIVD aigu

TQ

TCA

TT

Fibrinogne

++

++

Numration
plaquettaire

= (ou )

Autres
tests
ventuels
F II
FV=

PDF

Insuffisance
hpatique

Parfois
associe 1
CIVD

Hmophilies
=
Dficit en F
VII
Dficit en F I

Dficit en F
XII
Anticoagulants
circulants
Thrombopnies
( sauf CIVD)
Mie de Von
Willebrand
Trouble des
fonctions
plaquettaires

Ou =
=

Facteurs VIII
ou IX
Tps
saignement =

F VII

Temps
corrigs par
apport de
plasma

F XII

Ou =
=

Temps non
corrigs par
apport de
plasma

Ou =
=

=
++

=
=

+
=

=
=

=
=

=
=

Temps de
saignement
F Willebrand
Temps de
saignement

Tableau 2 : Modifications des tests au cours des principaux troubles de lhmostase du


chien et du chat ([8][11][17])

21

CHAPITRE 2
2. ESSAI COMPARATIF DU SCA 2000
2.1 PROTOCOLE EXPERIMENTAL
On se propose de comparer ici les temps de Quick et les temps de Cphaline avec Activateur
donns par le SCA2000 avec ceux obtenus par les mthodes chronomtriques classiques
utilises en routine au Laboratoire dHmatologie du service de Mdecine de lENVT.
2.1.1 LES ANIMAUX
cf. tableau 3
On dispose dun pool de 98 animaux pour lesquels une exploration de lhmostase a t
demande. Ils sont rpartis en deux chantillons.
Lchantillon des chiens malades comprend 68 individus, prsents pour diffrentes
raisons la consultation. Une trentaine dentre eux prsente effectivement des perturbations
de la coagulation plasmatique.
Lchantillon des chiens sains est quant lui constitu de 31 animaux cliniquement sains
appartenant lENVT (animaux destins lenseignement pratique) ou des tudiants, ou
bien vus en consultation pour des oprations de convenance ( strilisation par exemple).
2.1.2 LES PRELEVEMENTS
2.1.2.1 REALISATION
Les tests sont effectus partir de sang veineux. Le prlvement est obtenu par ponction
jugulaire franche aprs compression manuelle. On utilise un systme de type vacutainer
associant une aiguille, un porte-aiguille et un tube sous vide contenant un milieu de
prlvement citrat ( tube de 5 mL contenant 0,5 mL de citrate de soude 3,8%). Le tube est
rempli au trait dans le but davoir un rapport entre la quantit de sang et lanticoagulant
proche de 9 pour 1.
On effectue les mesures laide du SCA 2000 avec du sang total. Celui-ci est ensuite
centrifug pour donner le plasma pauvre en plaquettes ncessaire la ralisation des tests par
la mthode chronomtrique.

22

CN
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68

Tableau

3:

affections

Motif de la demande
Rhinite - Epistaxis
Saignements
post op
post op
pr op
post op
suivi intoxication
Hmaturie
Mlna
suivi intoxication
atteinte hpatique
atteinte hpatique
retard de croissance
CIVD dcompense
Ascite
saignements
anmie chronique
Choc
suivi torsion
Mga sophage
atteinte hpatique
panchement pricardique
post op (pritonite)
CIVD
Suivi mtastases
Saignements
Prop
abdomen aigu
CIVD
CIVD
epistaxis-hmaturie
epistaxis unilatrale
Saignements
atteinte hpatique
Suivi tumeur hpatique
post op
suivi intoxication
Hmaturie
hparinothrapie
hparinothrapie
atteinte hpatique
suivi intoxication
suivi IRC
Epanchement pleural
Leishmaniose
Mlna
anmie-choc
hyperthermie
post op
post op
post op
suivi
CIVD?
CIVD post op
post op
Ictre
suivi 56
Pr op
retard de croissance
Apathie
ascite-ictre
suivi 61
suivi 61 62

vomissements chroniques

rencontres

Diagnostic de laffection
aspergillose
tumeur vaginale
ovariohysterectomie
pyomtre
pyomtre
ovariohysterectomie
intoxication-anticoagulants
Cystite
Gastro-entrite
intoxication-anticoagulants
shunt portocave
lymphome
foie?
tumeurs mammaires
foie?
Hernie discale avec
Myelosclrose
torsion estomac
torsion estomac
shunt portocave
tumeur hpatique
tumeur pricardique
Pyomtre
Pritonite
tumeurs mammaires
intoxication-anticoagulants
Ovariectomie
Pritonite
pritonite-ncrose intestinale
Suivi 28 et 29
L.A.M.
Rhinite
tumeur hpatique
hypothyroidie
ovariectomie
intoxication-anticoagulants
Cystite
CIVD
CIVD
?
intoxication-anticoagulants
insuffisance rnale
lymphome

histiocytose
arthrite septique
pyomtre
tumeur abdominale
pyomtre
piroplasmose
tumeur rate
ovariectomie
pyomtre
lithiase foie
lithiase foie
cytoponctions pulmonaires
Atteinte hpatique
shunt portocave
intoxication-anticoagulants
atteinte hpatique

anticoagulants circulants
atteinte hpatique
atteinte hpatique

dans
23

lchantillon

des

chiens

malades

2.1.2.2 CONSERVATION
Le prlvement sur citrate permet de diffrer la ralisation des tests mais on considre que
pass 2 heures aprs le prlvement, les rsultats obtenus sont altrs.
Certains des tests ont t raliss partir dchantillons de plasma congel remis
temprature avant la ralisation de ces tests, ceci dans le but de grouper les manipulations.
Cette mthode courante dentreposage naltre de toute faon en rien lvaluation de la
fonction hmostatique ([1]).

2.1.3 REALISATION DES TESTS AVEC LE SCA2000


2.1.3.1 MATERIEL
On dispose dun automate SCA2000 et des cartouches correspondant aux tests pratiquer (
dnomination APTT citrat et TP citrat ). Ces cartouches usage unique contiennent
sous forme dshydrate les ractifs ncessaires la ralisation du test.

Ainsi la cartouche pour temps de Quick est pourvue dune chambre-test contenant une
prparation dshydrate de thromboplastine, de sels de calcium et dagents stabilisants.
La cartouche pour temps de Cphaline Activateur est elle pourvue dune prparation
dshydrate de kaolin, de phospholipides, de sels de calcium et dagents stabilisants.

2.1.3.2 PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT


Le mcanisme de dtection du caillot est bas sur un systme optique qui va mesurer la
vitesse laquelle lchantillon (sang + ractifs) circule entre des dtecteurs. Au fur et
mesure que le caillot se forme, le flux sanguin ralenti. Quand la vitesse chute sous un seuil
prdtermin, lanalyseur considre que la formation du caillot est acheve et affiche le temps
quil a fallu ce caillot pour se former.

24

2.1.3.3 METHODE DE REALISATION ([22])


cf. Annexe 3
La dmarche suivie est celle dcrite par le fabricant dans la notice de lappareil. La
manipulation est simple :

On sort la cartouche correspondant au test pratiquer du rfrigrateur quelques temps


avant

son

utilisation,

le

fabricant

recommandant

dutiliser

ces

cartouches

temprature ambiante.

La cartouche est ensuite insre dans lappareil qui va lidentifier et procder une
tape de prchauffage visant amener les ractifs quelle contient la temprature
idale.

Loprateur dpose ensuite laide dune seringue ou dune pipette une goutte de
sang dans le puits de la cartouche, sans bulle dair, et lance lanalyse en poussant le
bouton Start . Lanalyseur aspire ensuite prcisment la quantit juste de sang
ncessaire lanalyse (soit 15L).

Le rsultat du test est lu sur lcran de lappareil : il sagit dune valeur donne en
secondes.
2.1.4 REALISATION DU TEMPS DE QUICK PAR LA METHODE
CHRONOMETRIQUE

Ce test consiste activer in vitro la prothrombine prsente dans lchantillon par addition de
thromboplastine calcique. On obtient alors de la thrombine qui hydrolyse le fibrinogne en
fibrine et permet la formation du caillot.
2.1.4.1 MATERIEL
On dispose dun bain-marie rgl 37C, de pipettes, de tubes hmolyse, dun crochet et
dun chronomtre.
La source de thromboplastine calcique est une prparation lyophilise base de cervelle de
lapin (Thromboplastine calcique bioMrieux) que lon reconstitue avant usage en y ajoutant
un volume donn deau distille.

25

2.1.4.2 METHODE
On travaille partir dun plasma pauvre en plaquettes obtenu en centrifugeant le sang citrat
du patient 4000 tr pendant 5-8 minutes. On peut travailler partir de plasma frais ou
dcongel.
La premire tape consiste pr-incuber au bain-marie 0,1mL de plasma et 0,2 mL de ractif
pendant quelques minutes.
On mlange ensuite les 2 composants et on dclenche le chronomtre. Le mlange est
continuellement sond laide du crochet jusqu ce que le caillot form ait t crochet. On
arrte alors le chronomtre et le temps indiqu est not (en secondes).
Cette mthode est la mthode de rfrence classiquement employe dans les tudes
concernant le temps de Quick ([18]).
2.1.5 REALISATION DU TEST DE CEPHALINE AVEC ACTIVATEUR
PAR LA METHODE CHRONOMETRIQUE
Ce test consiste provoquer la coagulation dun plasma in vitro en le mettant en prsence
dune suspension phospholipidique, dun activateur et de calcium.
2.1.5.1 MATERIEL
On emploie le mme matriel que celui employ pour la mesure du temps de Quick.
On utilise un kit de dtermination du temps de cphaline-kaolin produit par les laboratoires
Diagnostica Stago. Il est compos de 2 flacons, lun contenant de la cphaline lyophilise,
lautre contenant une solution tamponne de kaolin 5 mg/mL. Le ractif est prpar une
demi-heure avant emploi par transvasement de la solution dans le flacon contenant la
cphaline lyophilise et homognisation.
On emploie un deuxime ractif qui est une solution de CaCl2 0,025M prte lemploi.
Cette mthode est la mthode de rfrence classiquement employe dans les tudes
concernant le temps de Cphaline-Activateur ([6]).
2.1.5.2 METHODE
On pr-incube dans le bain-marie 0,1 mL de plasma, 0,1 mL de ractif que lon aura bien
homognis au pralable et 0,1 mL de solution calcique. On mlange tout dabord le plasma
et le ractif puis on laisse incuber 3 minutes. On ajoute alors la solution calcique et on
dclenche le chronomtre. Le caillot est alors crochet laide du crochet et on note le temps
correspondant (en secondes).
26

2.1.6 TRAITEMENT DES RESULTATS


2.1.6.1 REPETABILITE
Les tests avec le SCA2000 ont ts raliss 5 fois de suite sur 2 prlvements de sang citrat
avec TQ et TCA non modifis (chiens n 23 et 26) et sur 2 prlvements avec TQ et TCA
allongs (chiens n 63 et 59) .
On estime la rptabilit par le coefficient de variation :

Coefficient de variation (%) = (cart-type/moyenne)x100

2.1.6.1 REPRODUCTIBILITE
Ltude de la reproductibilit est base sur la rptition des tests de rptabilit. En effet les 5
tests successifs sont raliss dans les 30 minutes suivant la prise de sang puis une nouvelle
srie de 5 tests est ralise 1h30 aprs la prise de sang.
Elle est estime par la mme technique.

2.2 RESULTATS OBTENUS


2.2.1 REPETABILITE
Les rsultats obtenus sont prsents dans les tableaux suivants :

Prlvements physiologiques
N
M+

(CV)
23 (30min)
14.4+0.55
(3.8%)
23 (1h30)
14.4+0.55
(3.8%)
26 (30 min)
14.2+0.45
(3.1%)
26 (1h30)
13.2+1.10
(8.3%)

Prlvements pathologiques
N
M+

(CV)
63 (30min)
20.6+1.67
(8.1%)
63 (1h30)
22+1.41
(6.4%)
59 (10min)
25.6+1.52
(6%)

Tableau 4: Rptabilit pour le temps de Quick au SCA 2000

27

Prlvements physiologiques
N
M+

(CV)
23 (30min)
65.4+2.07
(3.2%)
23 (1h30)
74.6+2.30
(3.1%)
26 (30 min)
74.2+3.00
(4.1%)
26 (1h30)
72.4+1.34
(1.9%)

Prlvements pathologiques
N
M+

(CV)
63 (30min)
89.8+5.54
(6.2%)
63 (1h30)
100+4.74
(4.7%)
59 (30 min)
101+3.67
(4%)

Tableau 5: Rptabilit pour le temps de Cphaline -Activateur au SCA 2000

On constate que, pour le temps de Quick comme pour le temps de Cphaline-Activateur, les
rsultats obtenus sont assez homognes et caractriss par des coefficients de variation peu
levs. La rptabilit des tests pratiqus laide du SCA2000 semble donc satisfaisante.

Il faut souligner que si lon a pas test la rptabilit pour les tests pratiqus par la mthode
chronomtrique cest que lon considre que cette mthode est connue pour tre fiable et
dote dune bonne rptabilit dans la mesure o la personne ralisant les tests est toujours la
mme, ce qui est le cas ici.
2.2.2 REPRODUCTIBILITE
Les rsultats obtenus pour la reproductibilit sont prsents dans le tableau suivant:

N
23
26
63

CV pour TQ
0
5.2
4.6

CV pour TCA
9.3
1.7
7.6

Tableau 6: Apprciation de la reproductibilit par calcul des coefficients de variation


(CV)

28

On constate qu en ce qui concerne le temps de Quick, les rsultats sont plutt bons dans la
mesure o les coefficients de variation sont relativement peu levs et proche de ceux calculs
pour la rptabilit. Ils semblent par ailleurs tre assez homognes entre eux.

En revanche, les rsultats semblent un peu moins bons pour le temps de Cphaline-Activateur
car les coefficients de variations sont relativement levs et peu homognes entre eux.

Nanmoins ces rsultats, mme sils ne sont pas excellents, sont acceptables.

2.2.3 COMPARAISON DES RESULTATS OBTENUS PAR LES DEUX


METHODES
2.2.3.1 VALEURS OBTENUES CHEZ LES CHIENS SAINS
Les rsultats obtenus pour les chiens sains sont concluants dans la mesure o les valeurs
sont normales pour tous les chiens par les 2 mthodes pour le TQ comme pour le TCA.
On note cependant que les valeurs obtenues avec le SCA 2000 dlimitent des intervalles un
peu diffrents de ceux donns par le constructeur ( Cf. Annexe 1).

29

Valeurs du TQ
Valeurs du TCA

Mthode chronomtrique
5 6.7 sec (m=6+0.44)
11 14 sec (m=12.7+0.87)

Mthode SCA2000
12 15 sec (m=13.8+0.99)
51 92 sec (m=74.1+10.53)

Tableau 7: Valeurs pour les diffrents tests et par les deux types de mthodes pour les 31
chiens sains

2.2.3.2 RESULTATS POUR LE TEMPS DE QUICK


Les rsultats obtenus pour le temps de Quick chez les chiens malades sont exposs en Annexe
2.
TQ rfrence et TQ SCA2000 normaux
TQ rfrence et TQ SCA2000 augments
TQ rfrence normal et TQ SCA augment

Nombre de chiens
44
23
1

Tableau 8 : Rpartition des rsultats obtenus pour le temps de Quick pour les 68 chiens
malades

Les deux mthodes dobtention du temps de Quick sont caractrises par un trs fort
coefficient de corrlation : = 0.967

30

2,5

Log(TQ SCA 2000)

1,5

= 0.967

0,5

0
0

0,5

1,5

log(TQ Rfrence)

Graphique 1: Corrlation entre les mesures de temps de Quick effectues par la


mthode chronomtrique et avec le SCA2000 pour lchantillon des chiens malades
(on a utilis les Log pour parpiller la distribution).

31

2.2.3.3 RESULTATS POUR LE TEMPS DE CEPHALINEACTIVATEUR


Les rsultats obtenus pour le temps de Cphaline-Activateur sont exposs en Annexe 2.

TCA normal par les 2 mthodes


TCA allong par les 2 mthodes
TCA rfrence normal et TCA SCA 2000 allong
TCA rfrence allong et TCA SCA 2000 normal

Nombre de chiens
29
24
6
9

Tableau 9 : Rpartition des rsultats obtenus pour le TCA pour les 68 chiens malades
La comparaison des deux mthodes par la mthode du coefficient de corrlation donne ici
encore dexcellents rsultats puisque on a un coefficient l aussi trs fort : = 0.977.

32

2,5

Log (TCA SCA 2000)

1,5

= 0.977
0,5

0
0

0,5

1,5

Log (TCA Rfrence)

Graphique 2: Corrlation entre les mesure de temps de Cphaline -Activateur ralises


par la mthode chronomtrique et avec le SCA 2000 pour lchantillon des chiens
malades (on a utilis les Log pour parpiller la distribution).

33

CHAPITRE 3
3. DISCUSSION
Avec le SCA 2000, la possibilit soffre dutiliser une mthode rapide, simple et automatise
de mesure du temps de Quick et de Cphaline-Activateur. En permettant la mise en uvre de
2 des tests les plus usits en premire intention lors de suspicion de troubles de lhmostase,
cet appareil rpondrait donc une vraie attente du praticien vtrinaire. On a donc cherch
dmontrer que les rsultats fournis par cet appareil savrent aussi fiables que ceux fournis par
la mthode chronomtrique classique.

La rpartition des troubles observs sur lchantillon des 68 chiens malades t la suivante :
v Pas de modification : 31 cas.
v C.I.V.D. : 20 cas.
v Insuffisance hpatique : 6 cas.
v Intoxication aux anti-vitamine K : 6 cas.
v Autres : 5 cas.

La gamme des temps observs pour le TQ et le TCA stends des valeurs usuelles des
rsultats extrmes ( incoagulable dans 4 cas).

Cette diversit permet donc une tude comparative intressante.

PRECISION DE LA METHODE
Dans ltude de la prcision de cette technique, mene pour les 2 tests, nous avons observ :
POUR LE TEMPS DE QUICK
Rptabilit :
Les coefficients de variation que lon a obtenu sont voisins de 6% en moyenne. Un travail
antrieur men au sein du Laboratoire du Service de Mdecine de lEcole Nationale
Vtrinaire de Toulouse sur le temps de Quick ([20]) donne des coefficients de variation pour
la mthode chronomtrique classique de lordre de 1.8%. On a donc une prcision un peu

34

moindre par la mthode au SCA 2000 mais ces coefficients de variation restent tout fait
compatibles avec une interprtation diagnostique.
Reproductibilit :
Les valeurs de coefficients de variation obtenues sont proches de 5% ce qui sans doute moins
bon que pour la mthode manuelle mais reste acceptable.

POUR LE TEMPS DE CEPHALINE-ACTIVATEUR


Rptabilit :
Les coefficients de variation sont peu levs puisque proches de 4% en moyenne. On ne
dispose

pas

de

donnes

bibliographiques

sur

les

valeurs

concernant

la

mthode

chronomtrique mais l aussi on peut supposer que ces valeurs sont compatibles avec une
interprtation clinique.
Reproductibilit :
Les valeurs de coefficients de variation, proches de 6% en moyenne, sont compatibles avec
une utilisation diagnostique de la mthode.
COMMENTAIRE
Dans lensemble, lutilisation du SCA 2000 est une mthode un peu moins prcise que la
mthode chronomtrique classique au crochet . Nanmoins, les coefficients de variation
observs restent tout fait raisonnables et lon peut donc considrer que les rsultats obtenus
seront cliniquement pertinents.

COMPARAISON DES RESULTATS


Les 2 mthodes donnent des rsultats diffrents en valeur absolue, ce qui ncessite de
modifier lintervalle des valeurs usuelles selon la technique que lon emploie.
Ainsi pour le TQ on obtient avec le SCA 2000 pour lchantillon des chiens sains des
valeurs de 12 15 s, les valeurs fournies par le constructeur tant de 12 17 s. Or les valeurs
comprises entre 15 et 17 s correspondent, au laboratoire dhmatologie de lENVT, des
valeurs de 7 8.3 s qui sont considres comme modrment moyennement allonges et
donc anormales.

35

Pour le TCA, les valeurs observes sur lchantillon des chiens sains stendent de 51
92 s. Les valeurs figurant dans la notice du constructeur vont de 71 102 s.

Les rsultats obtenus par les 2 techniques sont fortement corrls pour le temps de Quick
comme pour le temps de Cphaline-Activateur. On considre donc que les rsultats obtenus
avec le SCA 2000 ont la mme signification clinique et diagnostique que ceux obtenus
manuellement par la mthode au crochet .

On notera cependant que dans quelques cas de chiens malades et pour des valeurs situes
aux limites de lintervalle des valeurs usuelles, on a obtenu des discordances entre les 2
mthodes. Ces anomalies concernent essentiellement la mesure du temps de CphalineActivateur : en effet, sur les 68 chiens malades tests, on a observ une divergence chez
15 animaux.
Pour 6 dentre eux (chiens n 7, 19, 20, 33, 58 et 67) on note un TCA rfrence normal
et un TCA SCA 2000 augment. Parmi eux, les chiens n 20, 33, 58 et 67 ont un TCA SCA
2000 trs faiblement augment (93 94 s). Le chien n 7, souffrant dune intoxication aux
anti-vitamine K traite 48 heures auparavant avec de la vitamine K probablement vu sont
TCA rfrence sous estim. En effet son TQ est encore assez lev et on pourrait sattendre
ce quil en soit de mme pour son TCA.
On note aussi pour 9 chiens (n17, 24, 28, 31, 41, 46, 50, 55 et 63) un TCA SCA 2000
normal et un TCA rfrence augment. Cette divergence est faible pour 6 dentre eux : TCA
rfrence allant de 14.8 15.5 s cest dire trs modrment allong. Pour les 3 autres,
lallongement est plus marqu ( de 15.6 16.2 s). Ces chiens prsentaient :

Une leucmie aigu mylode ( chien n 31)

Une C.I.V.D. (chiens n 50 et 63)

Dans la mesure o ces chantillons nont pas t traits diffremment des autres, on peut se
demander si ces anomalies ne sont pas lies au prlvement lui-mme. On sait par exemple
que des variations de paramtres hmatologiques de lchantillon tels que le taux dhmolyse,
la lipmie ou la bilirubinmie sont susceptibles dinfluer lgrement sur les valeurs de TQ et
de TCA mesure laide dun coagulomtre bille dacier et de ractifs du commerce ([15]).
On pourrait donc imaginer que la technique employe par le SCA 2000 soit plus sensible
ces variations.

36

Dautres auteurs voque des perturbations de ces tests lies une anmie marque ou un
hyperviscosit sanguine ([19]).
Un rle possible des PDF est aussi envisager pour expliquer ces perturbations des tests.

Dans le doute, il parat donc souhaitable de renouveler le prlvement et le test en cas de TCA
SCA 2000 compris entre 92 et 100 s, surtout si le contexte clinique et les autres paramtres
biologiques sont vocateurs dun trouble de la coagulation.

ASPECTS PRATIQUES
La mthode employant le SCA 2000 est incontestablement plus pratique que la mthode
chronomtrique :

Elle ncessite peu de matriel : seulement de quoi effectuer


le prlvement sur milieu citrat et une pipette pour placer
lchantillon dans le puits de la cartouche-test.

Elle

ncessite

prlvement

un

effectu,

minimum
il

suffit

de

manipulations :
dallumer

le

lappareil,

dintroduire la cartouche-test et dy dposer lchantillon


tester. Cest donc un acte de faible technicit, ne ncessitant
pas de formation particulire et pouvant donc tre dlgu
un auxiliaire vtrinaire par exemple.

Cest un appareil peu encombrant, portable mme puisquil


fonctionne aussi sur batterie. Il est donc adapt aux petites
structures et peut suivre le vtrinaire lors de ses visites.

Le SCA 2000 est donc un appareil adapt la pratique vtrinaire que se soit dans une simple
cabinet ( pour le diagnostic et le suivi des intoxications aux rodenticides de type anti-vitamine
K par exemple) comme dans une structure beaucoup plus lourde, vocation spcialise telle
quun bloc chirurgical ( pour la surveillance des patients problmes) ou une structure
urgentiste ( pour lvaluation rapide des fonctions hmostatiques dun patient choqu par
exemple).

37

CONCLUSION
Lorsquune exploration de lhmostase savre ncessaire, les temps de Quick et
de Cphaline-Activateur sont parmi les premiers paramtres demands. Le
praticien vtrinaire sadresse classiquement des laboratoires danalyse car les
mthodes manuelles classiques de dtermination de ces temps sont peu pratiques
raliser et les mthodes automatises font appel des appareils issus de la
mdecine humaine (et donc coteux). Le SCA 2000 est donc une alternative
intressante puisquil propose une mthode automatise adapte la pratique de
la mdecine vtrinaire avec un cot plus accessible.
Nous avons donc test un chantillon de 31 chiens sains et de 68 chiens
malades avec la mthode chronomtrique au crochet employe
classiquement au Laboratoire de Mdecine de lEcole Nationale Vtrinaire de
Toulouse et avec la mthode automatise propose par le SCA 2000.
Les rsultats obtenus sont assez concluants, montrant une bonne corrlation
entre les deux mthodes mme si on a pu pour quelques cas dans la mesure du
TCA constater des divergences.
Le SCA 2000, avec des intervalles de valeurs usuelles adapts a cette mthode,
est donc un moyen tout fait valable dexploration de lhmostase chez le chien.
Il est de plus trs intressant car, en se rfrant des valeurs chronomtriques de
normalit, il permet denvisager de ne plus comparer lchantillon un tmoin.

38

ANNEXES
1. Tableau dtaill des rsultats obtenus pour les temps de Quick et de CphalineActivateur par les deux mthodes avec lchantillon des chiens sains .
2. Tableau dtaill des rsultats obtenus pour les temps de Quick et de CphalineActivateur par les deux mthodes avec lchantillon des chiens malades .
3. Schma dutilisation du SCA 2000 ([22]).

39

CN TQ chronomtrique TQ SCA2000 TCA chronomtrique TCA SCA2000


1
6,5
15
13,4
57
2
6,3
14
13,7
78
3
6,2
15
13,5
72
4
6,4
15
13,6
79
5
6,1
14
13,1
78
6
6,1
15
12,2
86
7
6,3
13
12,1
74
8
6,5
13
12,9
78
9
5,9
13
13,2
87
10
6,4
13
12
71
11
6,3
14
11,9
66
12
6,7
15
11,5
61
13
5,2
13
11,2
66
14
5,3
13
12
59
15
5,8
13
12,5
60
16
5,2
13
12,8
51
17
5,9
12
13,3
60
18
5
13
13
86
19
5,9
12
11
74
20
6
13
14
75
21
6,1
12
14
76
22
6
15
12
87
23
6,2
14
13,2
66
24
5,8
14
13,5
81
25
6,1
15
13,4
80
26
6,4
14
13,2
79
27
6
14
11,2
66
28
5,8
15
12,2
87
29
6,4
14
12
92
30
5,1
14
14
82
31
6
15
12,8
83

Annexe 1 : Temps obtenus pour lchantillon des chiens sains (en secondes)

40

CN TQ chronomtrique TQ SCA2000 TCA chronomtrique TCA SCA2000


1
6
14
12,2
87
2
5
12
10
71
3
5
14
12
93
4
5
14
13
90
5
6
12
11
77
6
5
14
11
72
7
9
26
14
105
8
5,2
12
13,3
84
9
5
11
11
76
10
7,5
18
15,1
117
11
7
16
15
100
12
9
23
13,8
90
13
6,6
14
14
89
14
60
100
60
400
15
5
12
13
74
16
6
14
13,5
76
17
6
11
14,8
52
18
5,4
14
13
83
19
5,4
11
14
100
20
5
14
13
94
21
7
19
12
65
22
5
10
13,2
72
23
6
14
15
102
24
6
12
15
83
25
5,2
13
13
91
26
60
100
60
400
27
6
12
12,5
72
28
6,5
15
15
89
29
8
21
16,3
133
30
13,4
60
48
400
31
6
12
16
78
32
5
14
13
65
33
5
12
12
94
34
6
12
14
83
35
6,8
12
14
93
36
6
12
13
58
37
9
19
13,1
82
38
6,1
14
12
78
39
6,8
15
17
104
40
5,8
15
21
149
41
7,5
16
15
92
42
20
48
17,2
123
43
5,2
12
13,1
71
44
8,2
17
11
79
45
6
14
17
97
46
6,7
13
15
84
47
6
11
16
99

41

48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68

6
6
8
6,2
6
6
6
6,2
8
7,3
6
9,2
5
60
7,8
8,1
7
6,1
6,5
6
8

12
12
16
14
14
15
14
14
18
16
14
27
13
100
19
19
16
16
14
12
19

12
11
16
13,8
15
17
19
15,5
16,3
24
13
23
13
60
17
16,2
15
18
19,8
13
16,8

81
88
91
84
100
110
125
90
152
172
93
101
91
400
109
85
93
114
115
93
110

Annexe 2 : Temps obtenus pour lchantillon des chiens malades (en secondes)

42

Annexe 3 : mode demploi du SCA 2000

43

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