Citocromo P450

El citocromo P450 (abreviado CYP en ingls, o CIP en espaol, o simplemente P450) es

una enorme y diversa superfamilia de hemoprotenas encontradas
en bacterias,archaea y eucariotas.1 Las protenas del citocromo P450 usan un amplio
rango de compuestos exgenos y endgenos como sustratos de sus reacciones
enzimticas. Por lo general forman parte de cadenas de transferencia de electrones con
multicomponentes, denominadas sistemas contenedoras de P450. La reaccin ms
comn catalizada por el citocromo P450 es una reaccin monooxigenasa, es decir, la
insercin de un tomo de oxgeno proveniente de oxgeno molecular (O2) en un sustrato
orgnico (RH) a la vez que el otro tomo de oxgeno es reducido a agua:
RH + O2 + 2H+ + 2e ROH + H2O
Historia[editar]
Se identific en 1958 como un pigmento celular reducido y unido a membrana con un pico
de absorcin inusual a los 450 nm.2 3Posteriormente, en 1964, se sugiere el nombre de
Citocromo P450 por Omura y Sato, nombre por el que se conoce actualmente.4 5
Distribucin[editar]
Las enzimas CIP han sido identificadas en todas los linajes de vida orgnica, incluyendo
los mamferos, aves, peces, insectos, gusanos,plantas, hongos, etc. Se conocen ms de
7.700 secuencias de CYP (para septiembre de 2007).
Etimologa[editar]
El nombre citocromo P450 proviene del hecho que stas son protenas celulares (cito)
coloreadas (cromo), con un pigmento que absorbe luz a una longitud de onda de
450 nanmetros, justo donde el hierro del grupo hemo es reducido y forma complejos con
el monxido de carbono.
Nomenclatura[editar]
Los genes que codifican a las enzimas CIP, y las enzimas mismas, se designan con la
abreviacin CYP o CIP, seguida de un numeral que indica la familia del gen, luego una
letra mayscula que indica la subfamilia y otro nmero para el gen individual. Por
convencin se escribe el nombre en cursiva cuando la abreviacin se refiere al gen. Por
ejemplo, el CYP2E1 es el gen que codifica a la enzimaCYP2E1una de las enzimas
asociadas con el metabolismo del paracetamol (acetaminofn). A pesar de que sta es la
nomenclatura preferida en la literatura, existen ciertas variaciones para algunos genes o
enzimas que hace hincapi en la actividad cataltica y el nombre del compuesto que usa
como sustrato. Algunos ejemplos incluyen al CYP5, tromboxano A2 sintasa, abreviado
TXAS (TromboXano A2 Sintasa), y CYP51, lanosterol 14--demetilasa, abreviada LDM
por razn de su sustrato (Lanosterol) y su actividad (DeMetilacin).6
Las normativas de la nomenclatura actual sugiere que los miembros de las nuevas
familias de CYP comparten ms del 40% de su identidad en aminocidos, mientras que
los miembros de las subfamilias comparten ms del 55% de identidad en aminocidos. Un
comit de nomenclatura es el organismo encargado de hacer seguimiento y asignar
nuevos nombres.
CYP en el hombre[editar]

Los CYP en el hombre son protenas asociadas a las membranas

citoplasmtica, mitocondrial y del retculo endoplsmico, donde actan metabolizando
cientos de sustancias endgenas y exgenas.

Mitocondrias de mamfero al microscopio electrnico.

La mayora de los CYP actan sobre varios sustratos, pudiendo algunas de ellas catalizar
varios tipos de reacciones. In vivo, estos sustratos incluyen a los xenobiticos o a
componentes txicos derivados de metabolismo, como es el caso de la bilirrubina. Las
enzimas del citocromo p450 estn presentes en la mayora de los tejidos del organismo,
jugando un papel fundamental en
la sntesis de hormonas (incluyendo estrgenos ytestosterona), colesterol o vitamina D3,
an cuando son las CYP del hgado las ms estudiadas.

Versin simplificada de la sntesis deesteroides

Por otra parte, el CYP constituye el mayor complejo enzimtico involucrado en el
metabolismo de los frmacos en nuestro organismo, al jugar un papel fundamental en
lafase oxidativa del metabolismo (conocida como fase I). Algunos de estos frmacos
tienen la capacidad de aumentar o disminuir la actividad de las enzimas (fenmenos
conocidos como induccin enzimtica e inhibicin enzimtica, respectivamente). Esto
tiene una trascendencia fundamental en la valoracin de las interacciones de frmacos
entre s. Si, por ejemplo, un frmaco inhibe la enzima que degrada a un segundo frmaco,
en presencia de ambos el segundo frmaco aumentar sus niveles en sangre y,

subsiguientemente, las posibilidades de dar patologa por sobredosis. De forma inversa, si

lo que hace es inducir el metabolismo, las concentraciones del segundo frmaco
disminuirn, estando por debajo de los niveles teraputicos, factor de vital importancia por
ejemplo en los antibiticos. Esto nos lleva a que sea necesario un completo conocimiento
de las enzimas implicadas en el metabolismo de los frmacos utilizados en el hombre
para evitar errores de ventana teraputica o de efectos secundarios. Especialmente los
laboratorios farmacuticos estn muy interesados en estos estudios por las posibilidades
que presentan.
No slo los frmacos son objeto de estudio en relacin con las interacciones. As mismo,
se estn investigando efectos similares con sustancias naturales. Por ejemplo, se ha
descubierto que los zumos de algunos frutos, como el zumo de pomelo, tienen capacidad
de inhibir la actividad de la CYP3A4, enzima implicada en el metabolismo de algunos
frmacos, actividad que realizan a travs de sustancias como la bergamotina, la dihidroxibergamotina o la paradisina A. Otras interacciones de inters pueden ser las de algunas
plantas (Hypericum perforatum), inductora de CYP3A4 o el humo del tabaco, inductor de
CYP1A2.
Para hacernos una idea ms cercana de la trascendencia del tema referido, podemos ver
a continuacin una relacin de los frmacos ms importantes que pueden ver alterada su
eficacia si se toma de forma concomitante zumo de pomelo:

Benzodiazepinas como el triazolam o alprazolam.

Ritonavir.

Estatinas como la atorvastatina, lovastatina y simvastatina.

Dihidropiridinas incluyendo el felodipino, nicardipino, difedipino, nisoldipino o

el nitrendipino.

Losartn.

Repaglinida.

Verapamil.

Antiarrtmicos incluyendo amiodarona, quinidina, disopiramina, propafenona y carv

edilol.

Frmacos para la impotencia como el sildenafil, tadalafil y vardenafil.

Los antimigraosos como la ergotamina y nimodipino.

Fluvoxamina.

Codena y Tramadol.

Ciclosporina.

Familias del CYP humano.[editar]

El ser humano tiene 57 genes y ms de 59 pseudogenes agrupados en 18 familias y 43
subfamilias.7 La siguiente tabla muestra un resumen de los genes y de las protenas que
codifican. Para informacin ms detallada, acceder a la pgina del Comit de
Nomenclatura del Citocromo P450.8
Fa
mi Funcin
lia

Mie
mbr
os

Nombres.

3
subf
Metabolismo
amili
C de drogas
as, 3
Y yesteroides (e gene CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1
P1 specialmentee s,
strgenos)
1pse
udog
en

C Metabolismo
Y de drogas y
P2 esteroides

13
subf
amili
as,
CYP2A6, CYP2A7, CYP2A13, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9
16
, CYP2C18,CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, CYP2F1, CYP2J
gene
2, CYP2R1, CYP2S1,CYP2U1, CYP2W1
s, 16
pseu
doge
nes

1
subf
Metabolismo
amili
C de drogas y
a, 4
Y esteroides
gene CYP3A4, CYP3A5, CYP3A7, CYP3A43
P3 (incluyendotes s, 2
tosterona)
pseu
doge
nes

C Metabolismo
Y del cido
P4 araquidnico

6
subf
amili
as,
CYP4A11, CYP4A22, CYP4B1, CYP4F2, CYP4F3, CYP4F8
11
,CYP4F11, CYP4F12, CYP4F22, CYP4V2, CYP4X1, CYP4
gene
Z1
s, 10
pseu
doge
nes

C
Tromboxano
Y
A2 sintetasa
P5

1
subf
amili
a, 1
gen

Biosntesis de
las sales
C biliares (7Y alpha
P7 hidroxilasa del
ncleo
esteroideo)

2
subf
amili
CYP7A1, CYP7B1
as, 2
gene
s

C
Y Variada
P8

2
subf
amili CYP8A1 (prostaciclin sintetasa), CYP8B1 (biosntesis de
as, 2 sales biliares)
gene
s

C
Y Biosntesis de
P1 esteroides
1

2
subf
amili
CYP11A1, CYP11B1, CYP11B2
as, 3
gene
s

C Biosntesis de
Y esteroides 17P1 alfa

1
subf
amili

CYP5A1

CYP17A1

hidroxilasa

a, 1
gen

C
Y Biosntesis de
P1 esteroides
9

1
subf
amili
a, 1
gen

CYP19A1

C
Y
Desconocida
P2
0

1
subf
amili
a, 1
gen

CYP20A1

C
Y Biosntesis de
P2 esteroides
1

2
subf
amili
as, 2
gene CYP21A2
s, 1
pseu
doge
n

C
Degradacin
Y
de la vitamina
P2
D
4

1
subf
amili
a, 1
gen

C
Hidroxilasa
Y
del cido
P2
retinico
6

3
subf
amili
CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1
as, 3
gene
s

C
Y

3
subf

Variada

CYP24A1

CYP27A1 (biosntesis de sales

biliares), CYP27B1 (vitamina D3 1-alfa

P2
7

amili
as, 3
hydroxylase), CYP27C1 (funcin desconocida)
gene
s

7-alfa
C
hidroxilacin
Y
del 24P3
hidroxicolester
9
ol

1
subf
amili
a, 1
gen

CYP39A1

C
Y Colesterol 24P4 hidroxilasa
6

1
subf
amili
a, 1
gen

CYP46A1

1
subf
amili
C
a, 1
Y Biosntesis del
gen, CYP51A1 (lanosterol 14-alfa demetilasa)
P5 colesterol
3
1
pseu
doge
nes

Bioqumica[editar]
El sitio activo del citocromo P450 contiene un centro hierro asociado al grupo hemo.
El hierro est enlazado a la protena P450 por medio de un ligando de tiolato que proviene
de un residuo de cistena. Esa cistena y otros residuos circunvecinos (RXCXG) son
altamente conservados entre los CYP conocidos,7 queriendo decir que existe poca
variedad entre un CYP y otro en su sitio de unin con el hierro. Debido a la gran variedad
de reacciones catalizadas por los CYP, sus actividades y propiedades varan entre un
miembro y el otro en muchos aspectos. Las principales propiedades de una enzima P450
incluyen:
1. El estado en reposo de la protena contiene un grupo Fe3+ (oxidado).
2. La unin de un sustrato inicia el transporte de electrones y los enlaces al oxgeno.

3. Los electrones son donados al CYP por otra protena, bien sea un citocromo P450
reductasa, ferredoxina o citocromo b5, con el fin de reducir el hierro del hemo.
4. El oxgeno molecular se une con y es reducido por el hierro del hemo.
5. Un oxidante unido al hierro, oxida el sustrato bien sea a un alcohol o a un epxido,
regenerando es estado de reposo del CYP.

Caractersticas generales del citocromo P450

El sistema de monooxigenasas es un complejo multienzimtico cuya oxidasa final es una
hemoprotena denominada citocromo P450 (CYP). Este sistema se encuentra presente en
diferentes tejidos como el rin, pulmn, piel, intestino, corteza adrenal, testculos,
placenta y otros, pero es particularmente activo en el hgado2. Adems de participar en el
metabolismo de sustratos de naturaleza exgena como drogas, pesticidas,
procarcingenos, anestsicos, solventes orgnicos, entre muchos otros3, el CYP participa
en el metabolismo de sustratos endgenos de importancia biolgica como colesterol,
cidos biliares, hormonas esteroidales y cidos grasos4. En los mamferos, el CYP se
encuentra presente en la mitocondria y en diversos tipos de membranas celulares, siendo
particularmente abundante en el retculo endoplsmico liso (microsomas)3. La
denominacin citocromo P450 proviene de la caracterstica de que esta hemoprotena en
su forma reducida y unida a monxido de carbono, presenta un mximo de absorbancia a
los 450 nm6.
Las diversas especies de enzimas CYP se caracterizan por ser fcilmente inducibles
inclusive por las mismas drogas a ser biotransformadas, lo que tiene consecuencias
clnicas puesto que aproximadamente 50% de los frmacos que consume el hombre son
metabolizados por estas enzimas. Adems, su expresin y actividad son influenciadas por
diversos factores como la edad, sexo, dieta, especie, tejido y estado hormonal y, a
diferencia de las enzimas clsicas, presentan especificidad superpuesta para algunos
sustratos7.
La mayora de los CYP estn formados por 400-500 aminocidos de los cuales cerca de
55% son de naturaleza apolar; la mitad heme es protoporfirina IX y el ligando axial para el
hierro es un residuo cistena ubicado cerca del extremo carboxi-terminal de la protena.
Numerosos agentes que reaccionan con los grupos sulfidrilos o que rompen interacciones
hidrofbicas, convierten al CYP a una forma inactiva llamada P4207.

Actividad cataltica. El CYP cataliza la biotransformacin de un sinnmero de

xenobiticos, proceso que se realiza principalmente en el hgado, pero en ste y otros
rganos participa adems en el metabolismo de una serie de compuestos de naturaleza
endgena. La gran gama de reacciones qumicas catalizada y la amplia especificidad de
sustrato caracterstico de estas enzimas, hacen del CYP uno de los catalizadores ms
verstiles conocidos8.
Como se observa en la Figura 1, aunque la principal funcin del CYP es participar en
reacciones de detoxificacin transformando un compuesto farmacolgicamente activo en
inactivo excretado por la orina, tambin participa en procesos de activacin metablica, de
manera que compuestos inertes y poco reactivos son convertidos en otros de gran
reactividad qumica que son txicos para el organismo. Por ejemplo, el acetominofn es
metabolizado por el CYP2E1 a N-acetil-p-benzoquinoneimina (NAPQI), un compuesto
muy hepatotxico1.

El CYP cataliza una amplia variedad de reacciones, incluyendo epoxidaciones, Ndeaquilaciones, O-deaquilaciones, S-oxidaciones e hidroxilaxiones de sustratos
aromticos y alifticos y, dependiendo de la disponibilidad de oxgeno en el tejido,
reacciones de reduccin9. La mayora de las reacciones catalizadas requieren de un paso
inicial, que involucra la insercin de un grupo hidroxilo en el sustrato para formar un
intermediario hidroxilado el cual puede, dependiendo de la naturaleza del sustrato y la
estabilidad del intermediario, sufrir posteriores reacciones de dealquilacin, deaminacin,
etc10.
La reaccin general catalizada por el CYP es la siguiente:
RH + NADPH + H+ + O2 ROH + NADP+ + H2O
El CYP tiene requerimiento absoluto de NADPH y oxgeno molecular para la catlisis de la
monooxigenacin. En la Figura 2, se muestra cmo los electrones necesarios para activar

al oxgeno pasan del NADPH al CYP a travs de la accin de la enzima NADPHcitocromo P450 reductasa, la que junto con el CYP, estn insertas en la membrana11.
Mecanismos de accin de las reacciones catalizadas por el CYP. En la Figura 3, se
muestra una simplificacin del ciclo de xido-reduccin del CYP y su sustrato, propuesto
por Coon7. El mecanismo de accin es complejo y an no est bien esclarecido debido a
la baja vida media de sus intermediarios. Existen evidencias de que en el proceso se
generaran especies reactivas de oxgeno como el anin superxido (O2-) y perxido de
hidrgeno (H2O2), adems del radical libre sustrato (R) el que al unirse a un radical
hidroxilo, generara finalmente el producto hidroxilado (ROH).
La descomposicin del CYP oxigenado es descrita como una de las mayores fuentes de
radicales superxido de los sistemas biolgicos y su produccin depende de la isoforma
del CYP, la naturaleza del sustrato unido (si lo hay) y de la eficiencia en la entrada del
segundo electrn (etapa 4)8.
Nomenclatura. Algunas isoformas de CYP presentan una alta homologa en su secuencia
de aminocidos, lo que se evidencia en estudios con anticuerpos como el Western-blot,
donde generalmente se observa una reaccin cruzada entre las diversas enzimas.
Ms de 160 formas han sido caracterizadas utilizando una nueva nomenclatura basada en
su homologa estructural, deducida a partir de sus correspondientes cDNAs12. Aquellas
protenas CYP de cualquier fuente que presentan 40% o ms de identidad en su
secuencia, son incluidas en la misma familia, designada por un nmero arbico, el que va
despus del trmino CYP (ej: CYP2A6 y CYP2B6 son enzimas que pertenecen a la familia
2); las isoformas con ms de 55% de identidad, son incluidas en la misma subfamilia,
designada por una letra mayscula y a las enzimas individuales se les asigna un nmero
arbitrario especfico12. Actualmente, se han descubierto ms de 160 genes de CYP
diferentes en eucariontes y al menos 17 familias han sido descritas en mamferos.
Figura 2.
Traspaso
de
electrones
desde el
NADPH al
citocromo
P450,
catalizado
por la
enzima de
membran
a NADPH
citocromo
P450
reductasa.

Figura 3. Mecanismo de
accin del citocromo
P450. Este esquema es
una simplificacin del
mecanismo de accin
del citocromo P450
(CYP) propuesto por
Coon7. En l, el
Fe3+ representa al hierro
del grupo heme del CYP
oxidado, RH y ROH a
los sustratos y productos
respectivamente. En
este ciclo de xidoreduccin se liberan
anin superxido (O2-) y
perxido de hidrgeno
(H2O2).