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Caractersticas Biolgicas
La mayora de las aguas naturales contienen una amplia variedad de
microorganismo.
Por qu es importante conocer los tipos y cantidad de microorganismos
presentes en el agua?
porque algunos microorganismos causan:
Enfermedades
Representa un problema de salud.
CARACTERISTICAS BIOLOGICAS
Microorganismo
Organismos muy pequeos para ser vistos a simple vista.
Tienen clulas de estructuras simples. Pueden ser Procariotas, Eucariotas
y Virus.
Tipos de microorganismos
Virus.
Son la forma ms simple de un organismo
Tamao 0.01- 0.3 m
Consisten esencialmente de cido nucleico y protena.
Todos son parasitarios y no pueden crecer fuera de otro organismo vivo.
Presentes en heces humanas.
Producen enfermedades virales: viruela, hepatitis infecciosa, fiebre
amarilla, poliomelitis, enfermedades gastrointestinales.
Se inactivan por desinfeccin del agua.
Bacterias
Organismo unicelular.
Tamao 0.5- 5 m
Pueden ser: coco, bacilo, empirilo, vibrio.
Se reproducen por fisin binaria.
La mayora de las bacterias se desarrollan en La mayora de las bacterias se
desarrollan en
condiciones de pH neutras hasta altamente cido.
Desempean una funcin vital en los procesos
naturales de estabilizacin y se emplean en
tratamiento de aguas residuales orgnicas.
Se conocen alrededor de 1500 especies.
Pueden ser Aerobias, Anaerobias y facultativas
Bacterias
En el anlisis bacteriolgico es importante detectar un grupo
especifico de bacterias llamado Grupo Coliforme al cual
pertenece la Escherichia coli.
Puede determinarse : Puede determinarse :
Tubos mltiples en un caldo de cultivo para
fermentar adecuadamente. La generacin de gas
indica la presencia de coliformes. Se halla un valor
probabilstico llamado ndice Coliformes o Nmero
Ms Probable (NMP). No es un conteo directo
pero es til para estimar la calidad del agua.
Por filtro de membrana es un mtodo de conteo Por filtro de membrana, es
un mtodo de conteo
directo en placa.
Prueba de presencia-ausencia.
Colilert
En aguas naturales potables debe ser
NMP<10
Hongos
Plantas multicelulares aerobias
Los hongos forman menos materia celular que las
bacterias a partir de la misma cantidad de alimento.
Son capaces de degradar compuestos orgnicos
complejos
Existen ms 100000 especies.
Su estructura es una compleja masa ramificada de
hifas que parecen hilos.
Los hongos existen en las aguas contaminadas y
en plantas de tratamiento biolgico.
Pueden ser responsables de ciertos sabores y
olores en los abastecimientos de agua.
Actinomicetos
Apariencia similar a los hongos. Estructura filamentosa con
tamao casi igual al de las bacterias.
Pueden estar tanto en el suelo como en el agua.
Aerobios en su mayora.
Ocasionan problemas de sabor y olor.
Causan enfermedades en la piel (micosis)
Algas
Son plantas fotosintticas, multicelulares en su mayora.
Pueden ser: algas verde-azul, cafs o amarillas.
Existen como clulas solas que pueden ser inmviles o
mviles si tienen flagelos.
Tienen una relacin simbitica con las bacterias Tienen una relacin
simbitica con las bacterias
Protozoarios
Son organismos unicelulares de 10 a 100m de longitud.
Se reproducen por fisin binaria.
Abundan en el suelo y en el agua.
Hay 4 tipos principales: Sarcodarios, Mastigforos, Ciliados, Esporozoarios.
Parsitos
Parsitos, gusanos y larvas
Entamoeba histolytica
causa amibiasis intestinal Gusano de Guinea
(Drancunculus medinensis)
causa Dracontiasis
Quistes de Fasciola ocasiona
distomatosis
Otras enfermedades parasitarias: esquitomatosis, anquilostomiasis.
Son macroorganismos complejos, muchos visibles a simple vista.
Rotferos y Crustceos.
Caractersticas Fsicas
En la provisin de agua se debe tener especial cuidado con los sabores, olores,
colores y la turbidez del agua que se
brinda, en parte porque dan mal sabor, pero tambin a causa de su uso en la
elaboracin de bebidas, preparacin de alimentos y
fabricacin de textiles.
Los sabores y olores se deben a la presencia de substancias qumicas voltiles
y a la materia orgnica en
descomposicin. Las mediciones de los mismso se hacen con base en la
dilucin necesaria para reducirlos a un nivel apenas
detectable por observacin humana.
El color del agua se debe a la presencia de minerales como hierro y
manganeso, materia orgnica y residuos coloridos
de las industrias. El color en el agua domstica puede manchar los accesorios
sanitario y opacar la ropa. Las pruebas se llevan
a cabo por comparacin con un conjunto estndar de concentraciones de una
sustancia qumica que produce un color similar al
que presenta el agua.
La turbidez adems de que es objetable desde el punto de vista esttico,
puede contener agentes patgenos adheridos a
las partculas en suspensin. El agua con suficientes partculas de arcilla en
suspensin (10 unidades de turbidez), se aprecia a
simple vista. Las fuentes de agua superficial varan desde 10 hasta 1.000
unidades de turbidez, y los ros muy opacos pueden
llegar a 10.000 unidades. Las mediciones de turbidez se basan en las
propiedades pticas de la suspensin que causan que la
luz se disperse o se absorba. Los resultados se comparan luego con los que se
obtienen de una suspensin estndar.
Caractersticas Qumicas
Los mltiples compuestos qumicos disueltos en el agua pueden ser de origen
natural o industrial y sern benficos o
dainos de acuerdo a su composicin y concentracin. Por ejemplo el hierro y
el manganeso en pequeas cantidades no solo
causan color, tambin se oxidan para formar depsitos de hidrxido frrico y
xido de manganeso dentro de las tuberas de
agua.
Las aguas duras son aquellas que requieren cantidades considerables de jabn
para producir espuma y tambin forma
incrustaciones en tuberas de agua caliente y calderas. La dureza del agua se
expresa en miligramos equivalentes de carbonato
de calcio por litro.
Recordemos que el agua qumicamente pura es la combinacin de oxgeno e
hidrgeno y puede obtenerse en
laboratorios por el fenmeno de electrlisis y en la naturaleza durante las
tormentas elctricas.
Veremos ahora los elementos qumicos que se encuentran en el agua natural y
que producen alcalinidad, dureza y
salinidad y se divide en cuatro grupos:
Caractersticas biolgicas
Las aguas poseen en su constitucin una gran variedad de elementos
biolgicos desde los microorganismos hasta los
peces.
El origen de los microorganismos puede ser natural, es decir constituyen su
hbitat natural, pero tambin provenir de
contaminacin por vertidos cloacales y/o industriales, como tambin por
arrastre de los existentes en el suelo por accin de la
lluvia.
La calidad y cantidad de microorganismos va acompaando las caractersticas
fsicas y qumicas del agua, ya que
o Cianofceas: tambin son mono o multicelulares, son las algas azul verdosas.
Algunas de ellas
comunican al agua olores muy desagradables y suelen desarrollarse con tal
abundancia que cubre los
embalses con una nata, siendo la ms caracterstica de ella el gnero
Anabaena.
o Bacilorofceas o diatomeas: generalmente se presentan como monocelulares,
son de color amarillo
verdoso y a menudo dan olores aromticos o cticos. Son tpicos los gneros
Asterionella, Navculo,
Sybedra y Fragilaria.
No es posible fijar de una manera general el volumen de agua a extraer para el anlisis
qumico, pues variara segn las determinaciones a efectuar entre 1 a 5 litros.
Examen fsico
Color:
Olor:
Est dado por diversas causas. Sin embargo los casos ms frecuentes son:
Sabor:
Est dado por sales disueltas en ella. Los sulfatos de hierro y manganeso dan sabor
amargo. En las calificaciones de un agua desempea un papel importante, pudiendo
ser agradable u objetable.
Determinacin de pH:
El pH ptimo de las aguas debe estar entre 6,5 y 8,5, es decir, entre neutra y
ligeramente alcalina, el mximo aceptado es 9. Las aguas de pH menor de 6,5, son
corrosivas, por el anhdrido carbnico, cidos o sales cidas que tienen en disolucin.
Para determinarlo usamos mtodos colorimtricos o potenciomtricos.
Para poder decidir sobre la potabilidad del agua se requiere el control de un nmero
elevado de parmetros qumicos y determinados parmetros bacteriolgicos. Dentro de
los primeros cobra especial importancia el amonio, los nitratos y nitritos, indicadores
de contaminacin por excelencia.
Amonio :
Este ion tiene escasa accin txica por s mismo, pero su existencia an en bajas
concentraciones, puede significar contenido aumentado de bacterias fecales, patgenos
etc., en el agua. La formacin del amonio se debe a la descomposicin bacteriana de
urea y protenas, siendo la primera etapa inorgnica del proceso.
Nitritos:
Nitratos:
Cloruros:
Todas las aguas contienen cloruros. Una gran cantidad puede ser ndice de
contaminacin ya que las materias residuales de origen animal siempre tienen
considerables cantidades de estas sales. Un agua con alto tenor de oxidabilidad,
amonaco, nitrato, nitrito, caracteriza una contaminacin y por lo tanto los cloruros
tienen ese origen. Pero si estas sustancias faltan ese alto tenor se debe a que el agua
atraviesa terrenos ricos en cloruros. Los cloruros son inocuos de por s, pero en
cantidades altas dan sabor desagradable.
Valor mximo aceptable: 350 mg/l.
Mtodo de Mohr
Generalidades:
Reactivos:
Tcnica:
Clculo:
Reactivo:
Solucin de ortotoluidina.
Tcnica:
Tcnica:
Se tara una cpsula de porcelana que se coloca sobre Bao Mara, se miden 100 ml de
agua y se vierte sobre la cpsula hasta evaporacin. Se coloca luego en estufa a 105
C y se deja durante 2 horas. Se retira, se deja enfriar en desecador sulfrico y se
pesa. El aumento de peso es el residuo por evaporacin correspondiente al volumen de
agua tomado. Los resultados se expresan en mg/l.
Valor mximo aceptable: 1.500 mg/l.
Dureza:
Se habla de aguas duras o blandas para determinar calidad de las mismas. Las
primeras tienen alto tenor de sales de calcio y magnesio disueltas. Las blandas son
pobres en estas sales.
Puede haber tambin nitratos, fosfatos, silicatos, etc. (dureza permanente). El agua
debe tener una dureza comprendida entre 60 y 100 mg/l. no siendo conveniente aguas
de dureza inferiores a 40 mg/l, por su accin corrosiva.
valor mximo aceptable de Dureza Total (CaCO3) 400 mg/l.
Alcalinidad:
Esta representada por sus contenidos en carbonatos y bicarbonatos. Eventualmente se
puede deber a hidrxidos, boratos, silicatos, fosfatos. Las soluciones acuosas de
boratos tienen un pH 8,3 y las de cido carbnico 4,3. Por estas razones se toman
estos pH como puntos finales. Como indicadores de estos puntos se utilizan
fenolftaleina (pH 8,3) y heliantina (pH 4,2).
Reactivos:
Tcnica:
Expresin de resultados:
Generalidades:
Existe un grupo de enfermedades conocidas como enfermedades hdricas, pues su va
de transmisin se debe a la ingestin de agua contaminada. Es entonces conveniente
determinar la potabilidad desde el punto de vista bacteriolgico.
Buscar grmenes como Salmonella, Shigella, trae inconvenientes, pues normalmente
aparecen en escasa cantidad. Por otra parte su supervivencia en este medio
desfavorable y la carencia de mtodos sencillos y rpidos, llevan a que su investigacin
no sea satisfactoria, mxime cuando se hallen en nmero reducido.
En vista de estos inconvenientes se ha buscado un mtodo mas seguro para establecer
la calidad higinica de las aguas, mtodo que se basa en la investigacin de bacterias
coliformes como indicadores de contaminacin fecal.
El agua que contenga bacterias de ese grupo se considera potencialmente peligrosa,
pues en cualquier momento puede llegar a vehiculizar bacterias patgenas,
provenientes de portadores sanos, individuos enfermos o animales.
Enfermedad
Agente
Origen bacteriano
Origen viral
Origen parasitario
Toma de muestra:
Envase:
Se deben utilizar frascos esterilizados y con envoltura externa. La capacidad debe ser
de 200 a 250 cc.
Envo de muestras:
1.
2.
3.
4.
5.
Se abre con cuidado y se deja salir agua durante medio minuto en forma tal
que el chorro no sea intenso y se llene el envase.
Anlisis bacteriolgico
Caractersticas microbiolgicas segn Art. 982 del C.A.A. (modificado por resolucin
494/94)
Bacterias mesfilas viables: en agar Plate Count 24 hs. a 37C, no mas de 500
UFC/ml
2.
3.
4.
Generalidades:
Diluyentes:
Se preparan tubos estriles con 9 ml de diluyente. Para hacer las diluciones se agita,
repetidas veces, la muestra. Luego se flamea la boca del frasco, se destapa, se vuelca
Incubacin:
Bacterias coliformes:
Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas, no esporuladas, que
fermentan la lactosa con produccin de cido y gas.
A) Ensayo presuntivo:
Siembra:
Se puede hacer por triplicado en tubos que tengan caldo Mc Conckey o Lactosa bilis
verde brillante (LBVB), con la Campana de Durham.
De la muestra de agua se sembrarn:
se realiza mediante el alambre recto, con el objeto de no llevar a los tubos con
citrato el material nutritivo del cultivo original. Se consideran positivos los tubos
que dieron turbiedad en Citrato Koser o cambio de color en Citrato de Simmons,
lo que es originado por el desarrollo de bacterias I.A.C.. En casos dudosos se
puede dilucidar agregando gotas del indicador Azul de Bromotimol al medio
Citrato de Koser, que carece del mismo. El lquido permanece verde claro si no
ha habido desarrollo, virando al azulado si el citrato ha sido utilizando por las
bacterias. Simultneamente con el desarrollo se produce cambio de pH.
2.
Confirmar con los tubos de caldo Mc Conckey o LBVB seleccionados que son
positivos de organismos coliformes, sembrando por estras una ansada de ellos
en agar Endo o Eosina azul de metileno (EMB). Incubar las placas invertidas a
32 - 35 C examinarlas a las 24 - 48 horas. Observar en estos medios slidos
de confirmacin si existen colonias tpicas de coliformes. La formacin en el
agar EMB de colonias negras o con el centro negro, con la periferia transparente
incolora o la formacin en el agar Endo de colonias rojas rodeadas de un halo
rojo, confirma la presencia de coliformes.
Tabla de Hoskins
Nmero de tubos positivos del total de:
3 tubos de 10 ml
3 tubos de 1 ml
3 tubos 0,1 ml
11
11
14
15
20
21
28
23
39
64
43
75
120
93
150
210
240
460
1100
1.
Escoger tubos gas positivos del caldo Mc Conkey o Lactosa bilis verde brillante
(Brila) procedentes del recuento de bacterias coliformes (NMP/100ml).
2.
1.
2.
3.
Incubar los tubos de caldo Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C y ver si son
positivos de formacin de gas a las 24 hs. y a las 48 hs.
4.
Los tubos de caldo Mc Conckey o Brila que presenten gas son positivos tambin
de organismos coliformes fecales ya que a esta temperatura solo el bacilo coli
fecal produce cido y gas.
5.
Los cultivos gas positivos en Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C, y que produzcan
indol en agua de peptona, pueden considerarse como positivos de coliformes fecales.
3.
1.
Prueba de oxidasa
2.
3.
4.
Prueba de gluconato
5.
Prueba de Citrato
Pseudomona
aeruginosa
Gram
Oxidasa
Nitrato
Gluconato
Gelatina
de 6,2. La incubacin debe hacerse durante 6-18 horas, a una temperatura de 35C.
Estrense las culturas en agar DXL cuando hayan transcurrido 6 y 18 horas. Somtanse
las colonias sospechosas a pruebas de seleccin bioqumica y confrmese las colonias
sospechosas con antisueros deShigella (sueros polivalentes y de tipo especfico).
Vibriones del clera y de otro tipo
Como forma de enriquecimiento primario se utiliza principalmente el agua alcalina de
peptona y el agua de taurocolato telurita de peptona, los subcultivos se harn
utilizando como medios selectivos un agar de tiosulfato, citrato, bilis, sal y sucrosa o
un agar de gelatina de taurocolato y telurito. Los cultivos que sean sospechosos se
inocularn en agar de hierro Kligler. Despus de 18 horas de incubacin, los V.
cholerae producen un caracterstico color amarillo, sin ninguna produccin de gas.
Estos cultivos se depurarn despus para determinar la actividad de ureasa y oxidasa;
las cepas que demuestren ser negativas respecto a rea y positivas en cuanto a
oxidasa debern ser remitidas a un laboratorio de referencia para que se realicen otras
pruebas bioqumicas y de agrupamiento serolgico.
Coli enteropatgenos
En este caso se utilizan las tcnicas para la deteccin de bacterias coliformes fecales en
el agua. Las colonias se confirmarn como E. coli y si la evidencia epidemiolgica as lo
garantiza, los subcultivos pueden ser remitidos a un laboratorio de referencia para
agrupamiento serolgico y, en caso necesario, para realizar las pruebas que
determinan la enterotoxigenicidad.
Yersinia enterocolitica
Se ha encontrado que el agar M-Endo es el medio de cultivo ms conveniente y de
mltiple utilidad debido a las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias
cuando se incuban tanto a 25 como a 35C. Despus de transcurridas 72 horas de
incubacin, las colonias aparecern bien definidas y con una coloracin roja oscura.
Tambin da buenos resultados para el desarrollo bacteriano utilizar agar de
MacConkey, siempre que la incubacin se haga a 25C. Todos los grupos aislados que
resulten sospechosos debern ser depurados bioqumicamente a 25C y 35C
utilizando ramnosa, rafinosa y melibiosa. Si existe evidencia epidemiolgica que lo
garantice, debern enviarse los subcultivos a un laboratorio de referencia para formar
los grupos serolgicos y efectuar las pruebas de susceptibilidad a los antibiticos..