Inflamacin (2)

Exudacin celular
Quimiotaxis y Fagocitosis
Defectos en la funcin leucocitaria

En los campos de la observacin la suerte solo

favorece a las mentes preparadas (L. Pasteur)

Premisas
Los neutrfilos son las principales celulas efectoras
en la inflamacin aguda pero tienen una vida
media corta.

La activacin del endotelio es un proceso

Imprescindible en la inflamacin aguda

Los macrfagos y/o monocitos intervienen en

menor numero pero sobreviven mucho mas
tiempo.

Venulas
flujo normal

Noxa

disminucin de la velocidad del flujo

inflamacin

MARGINACION de leucocitos
Acumulo de leucocitos
sobre el endotelio vascular
adhesin progresiva

RODAMIENTO
Endotelio revestido
por leucocitos

PAVIMENTACION

INFLAMACION AGUDA
Integrinas/IG

Citoquinas
(IL-1, TNF)

LFA1
MAC1

ICAM1VLA4/ VCAM1

Rodamiento Activacin

Adhesin
Estable

PECAM-1 (CD31)

Transmigracin

Quimiocinas

Quimiotaxis

Trombina
PAF
Histamina

6 a 24 horas

24-48 horas

MARGINACION Y RODAMIENTO
Marginacin = Acumulacin leucocitaria en la
periferia de los vasos
Rodamiento = Mediante adhesiones dbiles los
leucocitos ruedan sobre la superficie
endotelial (rodadura)
Familia de molculas de adhesin
- Selectina E (CD26E) en cels.endoteliales
- Selectina P (CD26P) en endotelio y plaquetas
- Selectina L (CD26L) en leucocitos

ADHESION Y TRANSMIGRACION
Presencia de receptores especificos en las membranas
celulares de los leucocitos
El leucocito emite un pseudpodo para su movimiento
al atravesar la membrana basal del endotelio

Mediadores quimicos

Molculas de adhesin

Citoquinas (IL-1, TNF)

Factores quimiotcticos
Inmunoglobulinas
Selectinas, Integrinas
Glucoproteinas (mucinas)

Activacin endotelial
Participacin de leucocitos neutrfilos
1 Marginacin, rodamiento y adhesin
(intravascular)

Transmigracin a travs del endotelio

(diapedsis)

Migracin en el intersticio hacia el

estimulo quimiotctico
(quimiotaxis /extravascular)

Mecanismos Moleculares
en la activacin de la clula
endotelial

1.- Redistribucin de las molculas de adhesin hacia la <

superficie celular (cuerpos de Weibel-Palade (1) y
P- selectinas (2)

(importante en el rodamiento)
2.- Induccin de las molculas de adhesin sobre el
endotelio por parte de las citoquinas (IL-1 y TNF)

Molculas de adhesin
leucocito - endotelio
Selectinas
Superficie endotelial

E-selectina (ELAM-1) endotelio

P-selectina (endotelio y plaquetas)
L-selectina (LAM-1) la mayoria de leucocitos

Glucoproteinas tipo mucina

Superficie leucocitos

Inmunoglobulinas
Superficie endotelial

Integrinas

Superficie leucocitos

GlyCAM, PSGL-1, ESL-1, CD34

Adhesin labil
ICAM-1

VCAM-1
LFA-1, MAC-1
VLA-4, LPAM-1

Adhesin fuerte

LFA-1
ICAM-1

ELAM-1

Clula endotelial estimulada

3.- Aumento de la intensidad de fijacin a travs de las

integrinas activadas.

E-Selectina

IL-1

ICAM

TNF

4.- Transmigracin a travs de las uniones intercelulares

a travs de la PECAM-1 (CD31) platelet endothelial
cell adhesion

PECAM-1 (CD31)

DIAPEDESIS

DIAPEDESIS LEUCOCITARIA
Fijacin de los agentes quimiotcticos a receptores especficos
Desencadenamiento de cadena activacin para liberacin de
calcio citoslico

El leucocito emite de un pseudpodo (lamelipodo) que tira

de la clula en direccin de la extensin.
El lamelipodo posee un complejo de filamentos de actina-miosina
Efecto de iones calcio y fosfoinositol sobre proteinas
reguladoras de la actina: - filamina
- gelsolina
- profilina
- calmodulina

CONTRACCIN Y MOVIMIENTO

Agente quimiotctico

Fosfolipasa C

PIP2
Dacilglicerol
DAG

Receptor
Prot. G activa

IP3 Inositol trifosfato

RE

Ca++

Ca++

Ensamblaje de filamentos actina-miosina

Aumento del n y afinidad

De las molculas de adhesin (LFA-1)

PSEUDPODO

Resumen del reclutamiento de los

leucocitos al foco inflamatorio
Activacion endotelial (que incrementa la expresion de
selectinas y sus ligandos)
Rodamiento de los leucocitos (facilitado por la adherencia
o union laxa de selectinas a sus ligandos de hidratos de carbono)

Adherencia firme leucocitos-celulas endoteliales

(mediada por quimiocinas en las que las integrinas se unen a
sus ligandos endoteliales)

Transmigracin de los leucocitos (entre las celulas

endoteliales mediante las interacciones de PECAM-1 y salida
a espacio extravascular)

 QUIMIOTAXIS
Locomocin orientada de las clulas en el
intersticio segn un gradiente qumico
Las clulas inflamatorias: leucocitos, monocitos y en menor
grado los linfocitos responden a estimulos quimiotcticos
con grados diferentes de velocidad.

MEDIADORES QUIMICOS
EXOGENOS :

Productos del agente patgeno( bacterianos)

ENDOGENOS
Componentes del sistema del complemento: C5a
Productos via lipooxigenasa: LTB4, AA
Citocinas (quimiocinas) : IL-8

qu tipo de leucocitos migran ?

En la mayoria de las formas de inflamacin aguda
predominan los neutrfilos durante las primeras 6 a 24
horas y son sustituidos por monocitos/macrfagos a las
24- 48 horas

Excepciones
En la inflamacion aguda por Pseudomonas el reclutamiento de
neutrfilos es continuo durante varios dias
En las Infecciones viricas los linfocitos son los primeros es
activarse
En las infecciones parasitarias el reclutamiento es de eosinfilos.

 FAGOCITOSIS
1.- Reconocimiento y adherencia de la particula
2.- Englobamiento de la partcula

3.- Destruccin o degradacin de lo fagocitado

C3b
Fc

Fijacin

Englobamiento

Formacin de
Fagolisosomas y
Degranulacin

1. Reconocimiento y adhesin de la particula (1)

Los leucocitos expresan varios RECEPTORES que reconocen

estimulos externos y emiten seales activadoras:
a) RECEPTORES DE TIPO SEUELO /TLR (para los
productos microbianos)
b) RECEPTORES ACOPLADOS A LA PROTEINA G
(reconocen peptidos bacterianos cortos , algunas
quimiocinas y productos de degradacin del complemento
como C5a)
c) RECEPTORES PARA LAS OPSONINAS

1. Reconocimiento y adhesin de la particula(2)

La particula a fagocitar ha de estar revestida de factores sricos
denominados
- Fc de la IgG

OPSONINAS

- C3b
- colectinas

Las particulas opsonizadas se

unen a receptores situados en la
superficie de neutrfilos y macrfagos

RECEPTORES

- FcR
- CR1,2,3
- c1q

2. Englobamiento de la partcula
(interiorizacin)
- La clula (neutrfilo o monocito) emite extensiones citoplasmticas
o pseudpodos que rodean a la particula hasta quedar englobada
dentro de un FAGOSOMA cuya membrana procede de la membrana
de la clula.

- Esta membrana del fagosoma se fusiona con la membrana

limitante de un granulo lisosomal produciendose la descarga del
contenido del lisosoma en el FAGOLISOSOMA

Degranulacin paulatina del neutrfilo y/o monocito

y escape de las sustancias al espacio exterior.

Formas de liberacin de productos leucocitarios

1.- Regurgitacin durante la ingestin
2.- Endocitosis inversa
(captacin de particulas ingeribles encima
de superficies planas endotelios-)
3.- Citolsis : muerte del leucocito

3.- Degradacin y destruccin de la particula (I)

a) Mecanismos dependientes del oxigeno
La fagocitosis estimula el consumo de Oxigeno (O2)
Produccin de peroxido de hidrgeno en el interior del lisosoma

NADPH
NADPH oxidasa

2 O2 + e +
2 O2 . + 2 H

2 O 2 + NADP

Dismutacin espontnea

Ion superxido

Bactericida
mas eficaz
de neutrfilos

HOCL-

CL-

H O
2 2

Mieloperoxidasa
(MPO) en granulos
azurfilos

Radical hipocloroso (antioxidante y antimicrobiano)

3.- Degradacin y destruccin de la particula (II)

b) Mecanismos independientes del oxigeno
Por sustancias contenidas en los grnulos de los leucocitos
- Proteina bactericida por incremento de la permeabilidad (BPI)
- Lisozima
- Lactoferrina

- Proteina Bsica principal

- Defensinas
Disminucin pH (4-5)

Accin de enzimas lisosomales

Agente quimiotctico
Fosfolipasa C

Receptor
PIP2

Prot. G activa

Diglicerol
DAG

Estallido oxidativo
DAG

Proteina cinasa C

Fosforilacin
proteica

O2

NADPH

H2O2

Granulo secretorio

BACTERIA EN
DEGRADACION

OH

OCL

Granulos lisosomales de los leucocitos

Granulos especficos

- Lactoferrina
-- Lisozima
-- Fosfatasa alcalina
-- Colagenasa tipo IV
-- Moleculas de adhesin
-- Activacin del plasmingeno
-- Fosfolipasa A2

- Mieloperoxidasa

Granulos azurfilos

- Lisozima
-- Proteinas catinicas
-- Elastasa
-- BPI

-- Defensinas
-- Catepsina G
-- Fosfolipasa A

Defectos en la funcin leucocitaria

1.- Defecto en el NUMERO de leucocitos (leucopenia<5000)
En los tratamientos inmunosupresores por cancer o trasplantados

2.- Dficit de ADHERENCIA leucocitaria

defectos genticos de las moleculas de adhesin:

- LAD1 (deficit de integrinas 2 o CD18)

- LAD2 (deficit carbohidrato receptor selectinas)

3.-Defectos de la MIGRACION Y QUIMIOTAXIS (1)

a) Anomalia intrinseca de los leucocitos

- Diabetes
- Sindrome de Chdiak- Higashi
b) Defecto en la generacin de factores quimiotcticos
(Congnitos o adquiridos del C5 o Ig)

- Sde del Leucocito Perezoso

- Sde de Job

Sindrome de Chdiak-Higashi
Enfermedad autosomica recesiva .Mutacion del gen
regulador del trafico lisosomal (LYST) Presencia de
lisososomas gigantes en varios tipos de celulas (neutrofilos)
con agranulocitosis, disfagocitosis.
Presentan infecciones de repeticin. Defectos somticos y
neurolgicos. Albinismo.

Sindrome del leucocito perezoso

Los leucocitos no responden a los estimulos quimiotcticos
llegando al foco demasiado despacio. Neutropenia periferica

severa pero en mdula sea el nmero es igual que en los

test cutneos. Por tanto el defecto reside en el paso desde
mdula osea a sangre.

Sindrome de JOB: Hiperinmunoglobulinemia E

(AD-HIES)
Causa desconocida. Afecta a nias pelirrojas. Aumento
de IgE circulante en sangre > 2000ui/mL. Infecciones
bacterianas recurrentes ( piel y pulmon) a Stafiloccocus
Aereus. Rash cutaneo eczematoso, eosinofilia, abscesos
frios cutaneos con poca respuesta inflamatoria.

3.-Defectos de la MIGRACION Y QUIMIOTAXIS (2)

c) Inhibidores sericos del quimiotaxtismo (inactivadores del c5)
d) Inhibidores de la motilidad de los leucocitos:

- Fcos: cloroquina ; Factores sricos en enfermedades: cancer, AR..

4.- Defectos de la FAGOCITOSIS

Hay ingestin del agente patgeno pero su digestion es defectuosa
o no se produce.
- Por defecto celular intrinseco (diabetes)
- Por deficit de Ig o Co (opsonizacin defectuosa)

5.- Defectos en la ACTIVIDAD MICROBICIDA

Enfermedad granulomatosa crnica
(defectos geneticos hereditarios que codifican componentes
de la NAPDH oxidasa de los mecanismos oxigeno- dependientes)
-- Ligado al cromosoma X (gp91phox)

-- autosmica recesiva (p47phox yp67phox)

Dficit de mieloperoxidasas
Dficit de glucosa 6 fosfato-deshidrogenasa

Enfermedad granulomatosa crnica

Es hereditaria ligada al cromosoma X y con mas

frecuencia la padecen nios. Defecto de la funcin

oxidante de los granulos leucocitarios .

Test de laboratorio: leucocitos en cultivo + granulos de

nitrato B tetrazolio, si es normal se oxida el colorante
fagocitado y cambia de color de amarillo a azul
negruzco (granulos de farmazac)
si no hay granulos : patolgico.
NBT test normal (granulos de farmazac)

Take Home Messages

Las fases moleculares de la inflamacin aguda son:
la activacin endotelial , la marginacin y rodamiento
de los leucocitos , la adherencia leucocito-endotelio,
la transmigracin por diapdesis , la quimotaxis y la
fagocitosis.
En todos estos procesos intervienen mediadores
qumicos que activan receptores y ligandos
especficos.
Si bien en la mayora de las formas de inflamacin
aguda el reclutamiento es a expensas de
neutrfilos (en las primeras 6-24 h) , hay algunas
excepciones a recordar.

 En la degradacin y destruccin de la partcula en el

proceso de fagocitosis, existen los mecanismos
dependientes e independientes de oxigeno.
Existen muchas enfermedades causadas por la
disfuncin leucocitaria en la respuesta inflamatoria.

http://library.med.utah.edu/WebPath/INFLHTML/INFLIDX.html