Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
Os genes e o comportamento
ODOS OS COMPORTAMENTOS SO DELINEADOS PELA inter-relao entre os genes e o ambiente. Os comportamentos mais estereotipados dos animais simples
so influenciados pelo ambiente, e os comportamentos
T
Kandel_03.indd 35
06/06/14 09:53
36
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
A natureza do gene
As reas cientficas bastante relacionadas da biologia molecular e da transmisso gentica so centrais para a compreenso atual dos genes. O texto a seguir introduz essas
ideias; um glossrio no final do captulo define os termos
comumente utilizados.
Os genes so constitudos por DNA, e esse DNA
que transmitido de uma gerao a outra. Por meio da
replicao do DNA, cpias exatas de cada gene so fornecidas a todas as clulas de um organismo, assim como s
geraes seguintes. O DNA constitudo por duas fitas,
cada uma delas com um esqueleto de desoxirribose-fosfato ligado a uma srie de quatro subunidades: as bases nitrogenadas adenina (A), guanina (G), timina (T) e citosina
(C). As duas fitas so pareadas, de modo que uma A em
Kandel_03.indd 36
uma fita est sempre pareada com uma T na fita complementar, e uma G com uma C (Figura 3-2). Essa complementaridade assegura a cpia acurada do DNA durante
sua replicao e a base da transcrio do DNA em RNA.
O RNA difere do DNA pelo fato de ser uma nica fita,
ter ribose no lugar da desoxirribose na cadeia de nucleotdeos e utilizar a base uracila (U) em seus nucleotdeos, no
lugar da timina.
A maior parte dos genes codifica produtos proteicos,
que so gerados pela traduo da mensagem linear da sequncia de RNA mensageiro (mRNA) em uma sequncia
polipeptdica linear (protena), composta por 20 aminocidos diferentes. Um gene tpico consiste em uma regio
codificante, que traduzida em uma protena, e em regies
no codificantes (Figura 3-3). A regio codificante geralmente dividida em pequenos segmentos denominados
xons, separados por sequncias no codificantes denominadas ntrons. Os ntrons so removidos do mRNA antes de
sua traduo em uma protena.
Alguns RNAs funcionais no codificam protenas. Eles
incluem RNAs ribossmicos (rRNAs) e transportadores
(tRNAs), componentes essenciais para a maquinaria de traduo do mRNA; pequenos RNAs nucleares (snRNAs, de
small nuclear RNAs), que guiam o processo de corte-juno*
do mRNA, e micro-RNAs (mRNAs), pequenos RNAs que
pareiam com sequncias complementares em mRNAs especficos, inibindo sua traduo.
Cada clula do organismo contm DNA para todos
os genes, mas expressa apenas um subconjunto especfico
de seus genes como RNAs. A parte dos genes transcrita na
forma de RNA flanqueada por regies de DNA no codificante denominadas promotores e estimuladores, que permitem a acurcia na expresso do RNA, nas clulas certas,
no momento adequado. Promotores e estimuladores geralmente so encontrados prximos ao incio da regio a
ser transcrita, mas os estimuladores tambm podem atuar
a uma certa distncia. Um complemento nico de protenas de ligao de DNA dentro de cada clula interage com
promotores e estimuladores de modo a regular a expresso
gnica e as propriedades celulares resultantes.
O encfalo expressa um nmero maior de genes que
qualquer outro rgo no corpo, e dentro do encfalo diversas populaes de neurnios expressam diferentes grupos
de genes. A expresso seletiva de genes, controlada por
promotores e estimuladores, e pelas protenas de ligao
de DNA, que interagem com eles, permite que um nmero
fixo de genes gere um nmero bem mais amplo de tipos
celulares neuronais e de conexes no encfalo.
Embora os genes especifiquem o desenvolvimento e as
propriedades iniciais do sistema nervoso, a experincia de
um indivduo e a atividade resultante em circuitos neurais
especficos podem, por si s, alterar a expresso de genes.
Desse modo, influncias ambientais so incorporadas na
estrutura e na funo dos circuitos neurais. O objetivo da
gentica descobrir o modo como genes individuais afetam um processo biolgico, as formas como redes de genes
* N. de T. O processo de corte-juno do mRNA (splicing em ingls) corresponde ao processo de remoo dos ntrons, citado anteriormente.
06/06/14 09:53
Princpios de Neurocincias
A
37
1,0
Gmeos monozigticos
Gmeos dizigticos
Concordncia na doena
0,8
0,6
0,4
0,2
at ficit
en d
e
o
do Es
au pec
tis tr
m o
o
m
o
tis
Au
Tr
a
do ns
p torn
ni o
co
an
s
af torn
et o
iv
o
Tr
Es
qu
izo
fre
ni
0,0
B
Genes
compartilhados
12,5%
(familiares em
terceiro grau)
Nenhuma
(populao em geral)
Primos em
primeiro grau
1%
2%
Tio/tia
25%
(familiares em
segundo grau)
50%
(familiares em
primeiro grau)
2%
Sobrinho/
sobrinha
4%
Neto/neta
5%
Meio-irmo/
meia-irm
6%
Pais
6%
Irmo/irm
9%
Filho/filha
13%
Gmeo
dizigtico
100%
17%
Gmeo monozigtico
48%
0
10
20
30
40
50
Kandel_03.indd 37
06/06/14 09:53
38
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Blocos constitutivos do DNA
Acarfosfato
Base
Fita de DNA
Nucleotdeo
59
39
+ G
Fosfato
DNA de dupla-hlice
59
Acar
59
39
Ligao de
hidrognio
39
Citosina
A
H
T
H
C
G
Esqueleto de
acar-fosfato
G
C
N
C
O
H
59
Guanina
N
C
H
C
N
N
H
Timina
Adenina
H
CH3
C
T
C
A
59
A
39
Esqueleto
de acar-fosfato
O
N
C
N
59
39
N
C
C
O
H
C
N
59
39
Figura 3-2 Estrutura do DNA. Quatro bases nucleotdicas diferentes, adenina (A), timina (T), citosina (C) e guanina (G), so
Os seres humanos tm cerca de 25 mil genes, mas apenas 46 cromossomos: 22 pares de autossomos (cromossomos presentes em indivduos de ambos os sexos) e 2 cromossomos sexuais (2 cromossomos X nos indivduos do
sexo feminino e 1 cromossomo X e 1 Y nos indivduos do
sexo masculino) (Figura 3-4). Cada genitor fornece uma cpia de cada autossomo para a prole diploide. Cada genitor
tambm fornece um cromossomo X para a prole feminina
(XX), mas os machos XY herdam seu nico cromossomo X
das mes e seu nico cromossomo Y dos pais. A herana
ligada ao sexo foi descoberta em moscas-da-fruta por Thomas Hunt Morgan em 1910. Esse padro de herana ligada
ao sexo, associado ao cromossomo X nico, tem sido altamente significativo em estudos genticos humanos, em que
certas doenas genticas ligadas ao X costumam ser observadas apenas em machos, mas so transmitidas geneticamente das mes para seus filhos.
Alm dos genes encontrados nos cromossomos, um
nmero muito pequeno dos genes de um organismo
transmitido por organelas citoplasmticas chamadas de
mitocndrias, as quais desempenham processos metablicos. Em todas as crianas, as mitocndrias originam-se do
vulo e so, portanto, herana materna para a criana. Certas doenas humanas, incluindo algumas doenas neuromusculares degenerativas e algumas formas de deficincia
mental e de surdez, so causadas por mutaes no DNA
mitocondrial.
Kandel_03.indd 38
Uma vez que cada indivduo tem duas cpias de cada gene
autossmico, torna-se importante distinguir o gentipo de
um organismo (o contedo gentico) de seu fentipo (sua
aparncia). As duas cpias de determinado gene autossmico em um indivduo so chamadas de alelos. Se os dois
alelos so idnticos, diz-se que o indivduo homozigoto
naquele locus. Se os alelos variam devido a mutaes, o
indivduo heterozigoto naquele locus. Machos so hemizigotos para genes no cromossomo X. Uma populao pode
ter um grande nmero de alelos de um gene; por exemplo,
o OCA2, um gene humano que afeta a cor dos olhos, pode
ter alelos que codificam tons de azul, verde, cor de avel
ou castanho. Em um sentido amplo, um gentipo todo o
conjunto de alelos que formam o genoma de um indivduo;
em um sentido estrito, constitui os alelos especficos de um
gene. Em contrapartida, o fentipo uma descrio de um
organismo completo e o resultado da expresso do gentipo do organismo em determinado ambiente.
A diferena entre gentipo e fentipo torna-se evidente
quando se consideram as consequncias de se ter um alelo
normal (do tipo selvagem) e um alelo mutante do mesmo
gene. A maioria das protenas pode atuar mesmo se apenas metade de seus nveis estiver presente na forma do
tipo selvagem, de maneira que a inativao de uma cpia,
para a maioria dos genes, no leva a alteraes no fentipo. Desse modo, dois organismos com diferentes gentipos
06/06/14 09:53
Princpios de Neurocincias
39
A Estrutura do gene
Regio 59
no traduzida
Trmino
Incio
Regio 39
no traduzida
xon
xon
ntron
ntron
xon
Sequncia
do promotor
B Transcrio
mRNA
C Corte-juno
mRNA
maduro
Incio
Trmino
D Traduo
Protena
Kandel_03.indd 39
06/06/14 09:54
40
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
nes ortlogos especficos em outros vertebrados e invertebrados. Enumerando-se a herana gentica partilhada dos
animais, pode-se inferir que as vias moleculares bsicas
para o desenvolvimento neuronal, a neurotransmisso, a
excitabilidade eltrica e a expresso gnica estavam presentes no ancestral comum de vermes, moscas, camundongos
e seres humanos. Alm disso, o estudo dos genes animais
e humanos demonstrou que os genes mais importantes no
encfalo humano so aqueles mais conservados ao longo
da filogenia animal. Diferenas entre genes de mamferos
e suas contrapartes em invertebrados com frequncia resultam no da criao de genes inteiramente novos, mas
de duplicao gnica em mamferos ou mudanas sutis na
expresso e funo gnicas.
Kandel_03.indd 40
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
41
Em anlises genticas clssicas, os organismos so inicialmente submetidos mutagnese com uma substncia
qumica ou com irradiao, produzindo mutaes ao acaso, e ento sofrem uma varredura em busca de alteraes
herdveis que afetem o comportamento de interesse, por
exemplo, o sono. Essa abordagem no impe um vis
quanto ao tipo de gene envolvido; uma busca ao acaso
de todas as mutaes possveis capazes de causar alteraSeres humanos
apenas (< 1%)
Animais vertebrados
apenas (22%)
Eucariotos e
procariotos (21%)
Animais
vertebrados e
invertebrados
(24%)
Animais e outros
eucariotos (32%)
Outros
(1%)
Figura 3-5 A maioria dos genes humanos est relacionada aos genes de outras espcies. Menos de 1% dos genes
especfico dos seres humanos; outros genes podem ser compartilhados por todos os seres vivos, por todos os eucariotos ou
apenas pelos animais vertebrados. (Modificada, com permisso,
de Lander et al., 2001.)
Kandel_03.indd 41
Os primeiros estudos em grande escala acerca da influncia dos genes sobre o comportamento foram iniciados por
Seymour Benzer e colaboradores, por volta de 1970. Eles
usaram mutagnese ao acaso e anlise gentica clssica
para identificar mutaes que afetavam o aprendizado e
comportamentos inatos na mosca-da-fruta Drosophila melanogaster: ritmos circadianos (dirios), comportamento de
corte, movimento, percepo visual e memria (Quadros
3-2 e 3-3). Essas mutaes induzidas tm exercido uma influncia imensa sobre a compreenso do papel dos genes
no comportamento.
06/06/14 09:54
42
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Ligao aos cidos
nucleicos (14%)
Funo
molecular
desconhecida
(42%)
Transduo
de sinal
(16%)
Enzimas
(10%)
Vrias
outras
(5%)
Estrutura
e adeso
celular (9%)
Transportadores e
canais inicos (4%)
Tem-se um quadro particularmente completo das bases genticas do controle circadiano do comportamento.
O ritmo circadiano de um animal acopla certos comportamentos a um ciclo de 24 horas, ligado ao nascer e ao por do
sol. O ncleo da regulao circadiana um relgio biolgico intrnseco que oscila em um ciclo de 24 horas. Em funo
da periodicidade intrnseca do relgio, o comportamento
circadiano persiste mesmo na ausncia de luz ou outras influncias do ambiente.
O relgio pode ser reiniciado, de modo que mudanas
no ciclo dia-noite resultam em um ajuste no oscilador intrnseco, um fenmeno que familiar a qualquer viajante
que se recupera de um voo transmeridiano. Sinais oriundos de estmulos luminosos so transmitidos do olho para
o encfalo para reajustar o relgio. Finalmente, o relgio
estimula vias eferentes para comportamentos especficos,
como sono e locomoo.
O grupo de Benzer avaliou milhares de moscas mutantes, buscando as raras moscas que no seguiam um ritmo
circadiano em funo de mutaes nos genes que dirigem a
oscilao circadiana. Desse trabalho emergiram as primeiras ideias acerca do mecanismo para a maquinaria molecular do relgio circadiano. Mutaes no gene perodo, ou per,
afetavam todos os comportamentos circadianos gerados
pelo relgio interno da mosca.
Curiosamente, mutaes no gene per podiam alterar o
relgio circadiano de diversas maneiras (Figura 3-9). Moscas mutantes per arrtmicas, que no apresentavam quaisquer ritmos intrnsecos discernveis em qualquer comportamento, no apresentavam qualquer funo do gene per;
portanto o gene per essencial para o comportamento rtmico. Mutaes per que retinham parte da funo do gene
resultavam em ritmos anormais. Alelos dias-longos produziam ciclos comportamentais de 28 horas, enquanto alelos
dias-curtos produziam um ciclo de 19 horas. Desse modo,
o gene per no apenas uma pea essencial do relgio, mas
sim um marca-passo cuja atividade pode mudar a taxa de
funcionamento do relgio.
O mutante per no apresenta efeitos adversos importantes, alm da mudana no comportamento circadiano.
Essa observao de grande importncia porque, antes da
Kandel_03.indd 42
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
43
o embrio consiste em cerca de 100 clulas. Esses embries so ento reintroduzidos em uma fmea hormonalmente preparada para a implantao, esperando-se
o parto acontecer. Os embries resultantes so misturas
quimricas entre a linhagem de clulas-tronco e o embrio hospedeiro.
Clulas-tronco embrionrias no camundongo tm a
capacidade de participar de todos os aspectos do desenvolvimento, incluindo linhagens germinativas. Assim, as
clulas injetadas podem tornar-se clulas germinativas e
passar o gene alterado para futuras geraes de camundongos. Essa tcnica tem sido utilizada para gerar mutaes em vrios genes cruciais para o desenvolvimento ou
para a funo do sistema nervoso.
Alterao da funo gnica pela utilizao de
RNA de interferncia
A tcnica que utiliza RNA de interferncia aproveita o fato
de que em geral o RNA de fita dupla em clulas eucariotas destrudo; o RNA inteiro destrudo mesmo quando
apenas parte dele apresentar-se na forma de fita dupla.
Pesquisadores podem ativar esse processo ao, artificialmente, selecionar um mRNA para que se torne fita dupla,
reduzindo, assim, os nveis de mRNA para determinados
genes.
Para reduzir a funo de um gene utilizando RNA de
interferncia, introduzida uma pequena sequncia de
RNA capaz de parear com o mRNA endgeno, em funo
da complementaridade entre a pequena sequncia de RNA
e o mRNA-alvo. Pequenos RNAs em geral tm 21 ou 22
bases de comprimento, sendo conhecidos como pequenos
RNAs de interferncia (RNAsis, de small interfering RNAs)
ou pequenos grampos de RNA (RNAsh, de small hairpin
RNA).
O pareamento de RNAsi ou RNAsh com mRNA leva
destruio do mRNA endgeno por ribonucleases celulares. O RNAsi pode ser introduzido por transfeco direta
do RNA nas clulas ou por transgenes, que podem ser introduzidos nas clulas e que levam expresso de RNAsi
ou RNAsh.
Se a complementaridade entre o RNAsi e o mRNA for
perfeita, ento geralmente o mRNA destrudo. Se a complementaridade for prxima, mas no perfeita, a traduo
do mRNA abortada. Embora o RNAsi e o RNAsh sejam
ferramentas experimentais, pequenos RNAmis endgenos
com pareamentos imperfeitos a mRNAs esto sendo descobertos como importantes reguladores da traduo em
muitos contextos.
O RNA de interferncia apresenta grande potencial
de aumentar o poder da anlise gentica, pois pode ser
utilizado em qualquer espcie em que transgenes ou RNA
de fita dupla possam ser introduzidos nas clulas. Essas
ferramentas devem permitir que pesquisadores mudem a
atividade de genes em animais que atualmente no so
utilizados na anlise gentica clssica, como pssaros e
peixes de vida longa, e mesmo primatas.
Continua
Kandel_03.indd 43
06/06/14 09:54
44
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Quadro 3-2
Continuao
A
CTEs crescendo em
cultura de tecidos
Verso alterada do
gene-alvo,
construda por meio
de engenharia
gentica
Um embrio em estado
inicial removido de
uma fmea de
camundongo prenhe
Um fragmento de
DNA contendo o gene
alterado introduzido
em muitas clulas
As clulas crescem
at formar uma
colnia
CTEs so
injetadas
no embrio
em estado
inicial
O embrio formado
parcialmente com
CTEs implantado
em uma me adotiva
Nascimento
Camundongo transgnico
com uma cpia do gene-alvo
substituda pelo gene alterado
na linhagem germinativa
A caracterizao desses genes levou a uma compreenso dos mecanismos moleculares do ritmo circadiano e a
uma demonstrao da similaridade desses mecanismos
em moscas e camundongos. Tanto em moscas quanto em
camundongos, a protena CLOCK um ativador transcricional. Junto com uma protena que com ela colabora, ela
controla a expresso de genes que determinam sinais efetores para comportamentos, como nveis de atividade locomotora. A CLOCK e sua protena colaboradora tambm
estimulam a transcrio do gene per. A protena PER, no
entanto, reprime a capacidade da CLOCK de estimular a
expresso de per, de modo que, medida que a protena
PER se acumula, a transcrio de per diminui (Figura 3-11).
Kandel_03.indd 44
O ciclo de 24 horas ocorre porque o acmulo e a inativao da protena PER so retardados em muitas horas aps
a transcrio de per, como resultado da fosforilao da PER,
de sua instabilidade e de interaes com outras protenas
capazes de ciclar.
As propriedades moleculares de per, clock e outros genes relacionados geram todas as propriedades essenciais
para o ritmo circadiano. Os elementos-chave do processo
regulatrio so:
1. A transcrio dos genes do ritmo circadiano varia com
o ciclo de 24 horas: a atividade de PER alta noite e a
atividade de CLOCK alta durante o dia.
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
45
Camundongo
Ovo fertilizado
50 mm
Gene de interesse
microinjetado na
forma de DNA
linear no pr-ncleo
Embrio
Diversos desses
embries so
introduzidos em
uma fmea de
camundongo
pseudoprenhe
Drosophila
500 mm
Embrio
Clulas germinativas primordiais
Algumas das moscas que se
desenvolvem a partir desses
embries so portadoras do
gene de interesse em suas
clulas germinativas
Nascimento
Camundongos
expressando o gene
so criados para testar
a presena do gene em
suas clulas germinativas
Camundongo transgnico
Cpias do gene arranjadas em tandem
so inseridas ao acaso em um
cromossomo em cada clula
gene gene gene gene
Arranjo em tandem dos genes
Figura 3-8 Produo de camundongos e moscas transgnicos. Aqui, o gene injetado no camundongo determinou
uma mudana na cor da pelagem, enquanto o gene injetado
na mosca causou uma mudana na cor dos olhos. Em alguns
Kandel_03.indd 45
Drosophila transgnica
Uma nica cpia do gene inserida ao
acaso em um cromossomo em cada clula
gene
Elemento mvel Extremidade do DNA
animais transgnicos de ambas as espcies, o DNA inserido em diferentes regies cromossmicas em diferentes clulas (ver ilustrao na parte inferior da figura). (Reproduzida,
com permisso, de Alberts et al., 2002.)
06/06/14 09:54
46
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
A
Normal
24 horas
19 horas
28 horas
Mutante arrtmico
30
30
20
20
10
10
Dia curto
Arrtmico
60
30
40
20
20
10
Kandel_03.indd 46
Dia longo
Normal
2
Dias
2
Dias
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
Tipo selvagem
0
L/E
Dia
E
PL
40
Clock/+
0
L/E
Dia
PL
40
E
Clock/clock
0
Dia
L/E
E
PL
40
E
0
12
18
24
30
Tempo (horas)
36
42
48
Kandel_03.indd 47
47
06/06/14 09:54
48
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Gene e
promotor
mRNA
Protena Complexo
PER/TIM
PER
TIM
CYC/CLOCK
As protenas PER e TIM so
sintetizadas no citoplasma
Ribossomo
Criptocromo
(inativo, ativo)
PER
A transcrio dos
genes per e tim
reinicia
TIM
As protenas PER
so instveis, mas os
complexos PER/TIM
so estveis
Crepsculo
Luz
12
6
18
Escuro
A represso pelo
complexo
PER/TIM deixa
de ocorrer
0
Amanhecer
Os dmeros
PER/TIM entram no
ncleo e reprimem
a transcrio dos
genes per e tim
Sem a estabilizao
fornecida pela protena
TIM, PER degradada
Kandel_03.indd 48
tintas. Quando PER liga-se a TIM, PER protegida da degradao. Como CLOCK estimula mais e mais a expresso de per
e tim, quantidades suficientes de PER e TIM por fim acumularo, para possibilitar a ligao de uma com a outra e a sua
estabilizao; nesse ponto, essas protenas entram no ncleo
e reprimem sua prpria transcrio. Como resultado, os nveis
de mRNA de per e tim diminuem, seguindo-se a reduo nos
nveis das protenas PER e TIM, e CLOCK pode (novamente)
estimular a expresso do mRNA de per e tim. Durante a fase
clara do ciclo, a protena TIM degradada por vias de sinalizao reguladas pela luz (incluindo criptocromos), de modo que
os complexos PER/TIM formam-se apenas durante a noite. A
protena CLOCK induz a expresso de PER e TIM, mas inibida
pelas protenas PER e TIM.
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
A
49
70
Fungos
Sedentrias
Com maior
mobilidade
gar
Nmero de indivduos
60
50
40
30
20
10
gar
0
8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34
Figura 3-12 Comportamento forrageiro em larvas de Drosophila melanogaster. As larvas alimentam-se em regies contendo fungos. Larvas do tipo de maior mobilidade movem-se de uma
regio outra, enquanto larvas do tipo sedentrio permanecem
na mesma regio por um longo tempo. Quando se alimentando
em uma regio, as larvas do primeiro tipo movem-se mais inten-
Kandel_03.indd 49
06/06/14 09:54
50
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
de um circuito neural, de modo que a funo do prosencfalo ventral est ligada funo dos neurnios que secretam vasopressina e que so ativados pelo acasalamento.
Como resultado, os comportamentos sociais so alterados.
A importncia da ocitocina e da vasopressina no comportamento social humano no conhecida, mas seu papel
central na formao de pares e na criao de filhotes em
espcies de mamferos sugere que essas molculas possam
desempenhar um papel tambm na espcie humana.
Kandel_03.indd 50
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
A Microtus montanus, no monogmico
SL
Plido ventral
levam s doenas de Parkinson ou de Alzheimer de instalao precoce. Indivduos com essas variantes raras e graves
representam um minsculo subconjunto de todos os indivduos com doena de Alzheimer ou de Parkinson, mas o
estudo dessas raras variantes desvendou processos celulares que tambm apresentam distrbios no grande conjunto de pacientes, sugerindo possibilidades para estratgias
teraputicas gerais.
No restante deste captulo, discute-se a gentica do autismo e da esquizofrenia, dois transtornos psiquitricos que
se manifestam na infncia e na adolescncia respectivamente. Em comparao com as doenas de expanses de
repeties de poliglutamina ou os distrbios convulsivos
relacionados a canais inicos, as causas biolgicas do autismo e da esquizofrenia ainda so desconhecidas. Ainda assim, em alguns casos, pode-se comear a identificar como
certos genes, e os processos biolgicos associados, afetam
funes enceflicas complexas, como a linguagem, o aprendizado e a emoo.
As doenas neurolgicas em seres humanos
sugerem que genes distintos afetem funes
enceflicas diferentes
O autismo um transtorno do desenvolvimento comum e
devastador, caracterizado por deficincias na aquisio da
linguagem, dificuldades para a interao social e interesses
estereotipados. Cerca de 1 em 200 crianas diagnosticada com autismo (a frequncia exata varia com os critrios
diagnsticos), sendo que os meninos so cerca de trs vezes mais afetados que as meninas. Os sintomas clnicos do
autismo em geral emergem nos primeiros trs anos de vida
e frequentemente incluem uma fase de regresso, na qual
as crianas perdem as habilidades lingusticas que haviam
adquirido quando mais jovens.
H considervel variabilidade entre indivduos autistas. Crianas autistas tm mais alta frequncia de convulses e problemas cognitivos do que a populao em geral, e
algumas se apresentam gravemente incapacitadas. Muitos
indivduos autistas, no entanto, tm inteligncia normal ou
acima do normal e podem, com o cuidado apropriado, levar vidas altamente bem-sucedidas.
O autismo tem um componente herdado muito forte
(ver Figura 3-1A), o que deveria aumentar a probabilidade
Kandel_03.indd 51
SL
PV
Vasopressina
51
Via de
reconhecimento
social
Via de
recompensa
PV
Vasopressina
Plido ventral
Via de
reconhecimento
social
Via de
recompensa
da identificao dos genes responsveis. O autismo tambm uma doena amplamente significativa, pois fornece
vislumbres sobre as bases de comportamentos que so unicamente humanos: linguagem, inteligncia complexa e interaes interpessoais. O fato de que autistas podem apresentar problemas na comunicao social que coexistem
com inteligncia normal em outros domnios sugere que o
encfalo apresenta-se em mdulos, com funes cognitivas
distintas que podem variar independentemente.
A ideia de que genes distintos afetem domnios cognitivos diferentes apoiada pelos efeitos contrastantes de
uma sndrome gentica rara, denominada sndrome de
Williams. Crianas com essa sndrome adquirem a linguagem tardiamente, mas, por fim, superam suas deficincias
iniciais e desenvolvem fortes habilidades lingusticas e
comportamento social normal. De fato, essas crianas exibem enorme sociabilidade; por exemplo, no apresentam a
timidez que as crianas normalmente demonstram na presena de estranhos. Crianas com a sndrome de Williams,
no entanto, so profundamente deficientes no processamento espacial e apresentam desempenho to fraco quanto ou ainda pior que crianas autistas em testes de QI. Os
diferentes padres de prejuzos no autismo e na sndrome
de Williams sugerem que a linguagem e as capacidades
sociais podem ser separadas de outras funes enceflicas.
reas enceflicas relacionadas com a linguagem mostram
prejuzos funcionais em crianas autistas, mas apresentam
funo normal ou mesmo destacada em crianas com sndrome de Williams. Em contrapartida, a inteligncia geral
e espacial encontra-se mais prejudicada em crianas com
sndrome de Williams do que em muitas crianas autistas.
A sndrome de Williams geneticamente simples;
causada por uma deleo heterozigota da regio cromossmica 7q11.23. A interpretao mais simples desse defeito
que o nvel de expresso de um ou mais genes dentro desse
intervalo encontra-se reduzido, pois h apenas uma cpia,
em vez de duas de cada gene na regio. Ainda no se conhece precisamente quais os genes nessa regio que afetam
a sociabilidade e o processamento espacial, mas eles so de
grande interesse, devido a seu potencial para ajudar a entender a regulao gentica dos comportamentos humanos.
Outra sndrome rara tem ajudado a esclarecer os requerimentos genticos para a linguagem humana. Um es-
06/06/14 09:54
52
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Kandel_03.indd 52
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
53
Avs
(no afetados)
Gene de
interesse
Pais
(no afetados)
Filhos
Sndrome de
Angelman
anormal, com uma deleo, de seu pai, ela no ter a sndrome de Angelman. No entanto, se a criana receber um
cromossomo normal do pai e um cromossomo anormal da
me, ela apresentar a sndrome de Angelman.
Para a sndrome de Angelman, o gene mais importante
nessa regio parece ser o gene que codifica a UBE3A, uma
ubiquitina-protena ligase que expressa apenas a partir
do cromossomo obtido da me. Ubiquitinas-ligase estimulam a degradao e a renovao de outras protenas.
Acredita-se que funes importantes da UBE3A regulem
a plasticidade geral no encfalo, talvez pela regulao da
atividade de receptores de neurotransmissores.
Um transtorno comportamental do desenvolvimento
do sistema nervoso diferente, a sndrome de Prader-Willi,
tambm causado por uma deleo de mltiplos genes
no cromossomo 15q11-q13, mas os genes implicados nessa sndrome so expressos apenas a partir do cromossomo
obtido do pai. Assim, a sndrome de Prader-Willi resulta
do recproco do padro de hereditariedade para a sndrome de Angelman: uma criana deve receber o cromossomo anormal de seu pai para desenvolver a sndrome de
Prader-Willi. Essa sndrome est associada obesidade, e
os sintomas psiquitricos incluem comportamento obsessivo-compulsivo, transtorno bipolar e transtornos difusos
do desenvolvimento.
A impresso parental um exemplo da complexidade
que pode confundir as expectativas no mapeamento gentico humano. Estudos recentes em camundongos, realizados pelo grupo de Catherine Dulac, sugerem que a impresso parental seja mais comum no encfalo que em outros
tecidos do organismo. Se essa observao for confirmada
em seres humanos, ela pode ajudar a explicar a dificuldade do mapeamento de caractersticas comportamentais em
seres humanos.
Caractersticas multignicas: muitas doenas raras
ou umas poucas variantes comuns?
Mtodos de mapeamento gentico que seguem associaes
ao longo de geraes so altamente eficientes na identificao de traos quando estes so explicados por um nico
gene (Quadro 3-4). No entanto, as doenas genticas mais
comuns em seres humanos no podem ser seguidas em
uma rvore genealgica como as caractersticas devidas a
um nico gene, e suspeita-se, ou sabe-se, que elas envol-
Kandel_03.indd 53
Afetado
No afetado
Afetado
No afetado
06/06/14 09:54
54
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Kandel_03.indd 54
Par de cromossomos
na me com a doena
Gene defeituoso,
que causa a doena
Marcador de DNA
polimrfico, apenas
nessa cpia do
cromossomo
vulo
Espermatozoide
+
+
Prole
Doena
Marcador
+
+
Pai
Marcador de
DNA polimrfico
+
+
Me
Gene de
Huntington
Prole normal
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
Esses estudos podem ser analisados utilizando-se tanto modelos monognicos quanto polignicos de herana, alm de
um arsenal de mtodos cada vez mais sofisticados de genotipagem para verificar correlaes entre regies do genoma e caractersticas de interesse (Quadro 3-4). Resultados
promissores tm emergido de uma variedade de estudos.
A verificao desses resultados necessitar de replicao
independente de resultados e nmeros muito grandes de
pacientes. Com essa advertncia, alguns dos primeiros resultados desses estudos so descritos a seguir.
Um estudo bem-sucedido de mapeamento de gene nico de uma famlia escocesa com alta incidncia de esquizofrenia levou identificao do gene de risco Disc1 (de Disrupted
in Schizophrenia). Em camundongos, o gene Disc1 tem efeitos
no desenvolvimento neuronal, na sinalizao neuronal e na
incorporao de novos neurnios a circuitos neurais. Em seres humanos, uma mutao no Disc1 aumenta muito o risco
para a esquizofrenia, mas esse gene est mutado apenas em
uma pequena frao dos pacientes esquizofrnicos. Outros
genes candidatos para a esquizofrenia tm sido identificados
a partir da abordagem alternativa de buscar associaes estatsticas entre o transtorno e loci especficos no genoma em
uma amostra de milhares de pacientes esquizofrnicos de diferentes famlias. Um gene de risco identificado desse modo
a neurregulina, um gene de sinalizao no desenvolvimento
que afeta a migrao celular e a formao de sinapses. Em
conjunto, os estudos acerca de Disc1 e neurregulina comeam
a sugerir que um defeito do desenvolvimento no encfalo
possa ser a base da esquizofrenia.
Estudos similares em larga escala de milhares de crianas autistas e suas famlias levaram identificao repetida de mutaes em certos genes de risco para o autismo.
Diversas mutaes em pacientes autistas afetam protenas
de sinalizao transmembrana denominadas neurexinas
e neuroliginas, que afetam a eficcia das sinapses. Esses e
outros resultados de estudos genticos sugerem que alteraes sutis na transmisso sinptica tenham um papel no
autismo. Uma anlise gentica sofisticada sugere que exista um risco aumentado para o autismo em muitos locais
no genoma (Figura 3-17). Alguns desses loci podem ser variantes monognicas raras de alto risco e outros podem ser
variantes mais comuns de baixo risco.
Uma descoberta notvel feita pelo grupo de Michael
Wigler enquanto tentava entender a base gentica do autismo foi a de que uma frao das mutaes associadas ao
autismo na verdade no herdada de nenhum dos pais.
Essas mutaes so novas na criana autista, surgindo no
espermatozoide ou no ocito antes da fertilizao. Gmeos
monozigticos idnticos, que se separam aps a fertilizao, tero ambos a caracterstica, a definio clssica de hereditariedade. Alm disso, uma vez que a mutao surge,
a criana afetada tem um trao que pode passar para seus
filhos, de modo que de fato um trao herdvel. Estudos
genticos clssicos de associaes, no entanto, baseiam-se
na premissa de que praticamente todas as mutaes causadoras de doenas so mutaes preexistentes, herdadas ao
longo de muitas geraes, e os achados de novas mutaes
no autismo violam essa expectativa. A biologia humana
uma constante fonte de surpresas.
Novas ferramentas esto sendo desenvolvidas para
ajudar a investigar as complexidades das caractersticas
Kandel_03.indd 55
55
Viso geral
Os genes afetam muitos aspectos do comportamento. H
notvel similaridade em traos de personalidade e doenas
psiquitricas em gmeos humanos, mesmo quando criados separadamente; animais domsticos e de laboratrio
podem ser criados para terem determinadas caractersticas
comportamentais estveis. Uns poucos genes especficos
esto associados a comportamentos humanos.
Nos ltimos anos, observa-se grande sucesso na identificao de genes associados a doenas neurolgicas, como
o caso das doenas de Alzheimer, de Parkinson, de Huntington e ataxias espinocerebelares, assim como aqueles
associados a transtornos do desenvolvimento, como as
sndromes de Rett e de Angelman. O aprendizado acerca
das bases genticas dessas doenas pode ajudar a estabelecer abordagens para a pesquisa de doenas psiquitricas
mais difceis de serem estudadas, como a esquizofrenia, a
depresso e o autismo.
Caractersticas do comportamento humano so multignicas em sua origem. Embora alteraes em um nico
gene sejam responsveis por diferenas individuais no comportamento social em nematoides e nos nveis de atividade
na Drosophila, apenas raramente alteraes genticas em um
nico gene explicaro completamente uma doena psiquitrica ou um comportamento em seres humanos. Com mais
frequncia, diversos genes diferentes atuaro de modo independente afetando uma caracterstica ou tero efeitos apenas quando em combinao um com o outro. Organismos
usados como modelos, como moscas, vermes e camundongos, so importantes para a gentica, pois podem ser tratados experimentalmente. O estudo dos genes nesses animais
simples, em que o genoma e o ambiente podem ser rigorosamente controlados, pode identificar vias biolgicas conservadas que medeiam o comportamento em seres humanos.
Diversos sucessos emergiram dessa abordagem. O gene per,
na mosca-da-fruta, levou compreenso da sndrome do
sono avanado em seres humanos, e o gene para a narcolepsia em ces levou ao entendimento de mecanismos importantes para o sono em seres humanos (ver Captulo 51).
Ainda h muito a aprender acerca dos modos como
os genes afetam o encfalo. Os bilogos esto se tornando
mais hbeis em delinear o papel de genes individuais em
neurnios e circuitos. Com esse estudo, ser possvel ter
ideias importantes acerca dos mecanismos para as doenas psiquitricas e das influncias genticas nas caractersticas psicolgicas, fisiolgicas e cognitivas normais. Ainda
assim, no entanto, a combinao de gentica, ambiente,
acaso e escolhas individuais que, no final, determina as di-
06/06/14 09:54
56
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
Figura 3-17 Loci candidatos que contribuem para transtornos do espectro autista. Os loci foram identificados em
diversos estudos de varredura do genoma publicados. Muitos
loci diferentes podem aumentar o risco de autismo. O sinal mais
consistente, relatado em mltiplos estudos, est no brao lon-
Glossrio1
Alelo. Os seres humanos tm dois conjuntos de cromossomos, um de cada genitor. Os genes equivalentes, nos dois
conjuntos, podem ser diferentes, por exemplo, em funo
de polimorfismos de nucleotdeo nico. Um alelo uma
das duas (ou mais) formas de determinado gene.
Centrmero. Os cromossomos contm uma regio compacta
conhecida como centrmero, onde esto unidas as cromtides irms (as duas cpias exatas de cada cromossomo formadas aps a replicao).
Clonagem. Processo de produo de cpias de determinado
fragmento de DNA em nmero suficiente para que possa
ser sequenciado ou estudado de alguma forma.
DNA complementar (cDNA). Sequncia de DNA produzida
a partir de uma molcula de mRNA, utilizando uma enzima denominada transcriptase reversa. cDNA pode ser utilizado experimentalmente para determinar sequncias de
mRNA aps seus ntrons (sees no codificantes) serem
removidos.
Genes conservados. Os genes presentes em duas espcies distintas so ditos conservados, e os dois genes das espcies
diferentes so denominados genes ortlogos. A conservao
pode ser detectada medindo-se a semelhana das sequncias de bases (DNA ou RNA) ou de aminocidos (prote1
Kandel_03.indd 56
06/06/14 09:54
Princpios de Neurocincias
Braos longos e curtos. As regies de cada lado do centrmero so conhecidas como braos. Como o centrmero no
est localizado no centro do cromossomo, um brao mais
longo que o outro.
RNA mensageiro (mRNA). As protenas no so sintetizadas diretamente a partir do DNA genmico. Uma matriz
de RNA (um mRNA precursor) construda a partir da sequncia genmica. Esse RNA ento processado de vrias
formas, incluindo corte-juno. O RNA que sofreu tal processamento e que se destina a ser usado como matriz para a
sntese de protenas conhecido como mRNA.
Mutao. Uma alterao no genoma em relao a um estado
de referncia. Mutaes nem sempre tm efeitos deletrios.
Fentipo. Propriedades e caractersticas fsicas observadas
de um organismo.
Polimorfismo. Uma regio do genoma que varia entre os
membros de uma populao. Uma variante, para ser denominada polimorfismo, deve estar presente em um nmero
significativo de pessoas na populao.
Procarioto. Organismo unicelular com uma estrutura interna simples e sem membrana nuclear. Bactrias e arqueobactrias so procariotos.
Proteoma. Conjunto completo das protenas codificadas por
um genoma.
Recombinao. Processo pelo qual DNA trocado entre pares de cromossomos equivalentes durante a formao do
espermatozoide e do vulo. A recombinao tem o efeito
de tornar os cromossomos da prole distintos daqueles de
seus pais.
Endonuclease de restrio. Enzima que cliva o DNA em posies onde ocorre determinada sequncia. Diferentes tipos
de endonucleases de restrio clivam o DNA em diferentes
sequncias.
RNA de interferncia (RNAi). Mtodo para reduzir a funo
de um gene especfico introduzindo na clula um pequeno RNA complementar ao mRNA-alvo. O pareamento do
mRNA com o pequeno RNA leva destruio do mRNA
endgeno.
Polimorfismo de nucleotdeo nico (SNP, de single nucleotide
polymorphism). Polimorfismo causado por mudana de um
nico nucleotdeo. SNPs frequentemente so utilizados em
estudos de mapeamento gentico.
Corte-juno (splicing). Processo que remove ntrons (pores
no codificantes) do RNA transcrito. xons (pores codificantes para protenas) tambm podem ser removidos. Dependendo de quais xons so removidos, diferentes protenas podem ser produzidas a partir do mesmo RNA inicial ou
do mesmo gene. As diferentes protenas criadas dessa forma
so variantes de corte-juno ou de corte-juno alternativo.
Transcrio. Processo de copiar um gene produzindo RNA.
Esse o primeiro passo na produo de uma protena a
partir de um gene, embora nem todos os transcritos levem
a protenas.
Transcriptoma. O conjunto completo de RNA transcrito a
partir de um genoma.
Traduo. Processo que utiliza uma sequncia de mRNA
para construir uma protena. O mRNA serve como uma
Kandel_03.indd 57
57
matriz sobre a qual molculas de RNA transportador, carregando aminocidos, so alinhadas. Os aminocidos so
ento unidos para formar uma cadeia proteica.
Cornelia I. Bargmann
T. Conrad Gilliam
Leituras selecionadas
Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P. 2002.
Molecular Biology of the Cell, 4th ed. New York: Garland Publishing. Also searchable at http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=Books.
Allada R, Emery P, Takahashi JS, Rosbash M. 2001. Stopping time:
the genetics of fly and mouse circadian clocks. Annu Rev Neurosci 24:1091119.
Botstein D, Risch N. 2003. Discovering genotypes underlying human phenotypes: past successes for mendelian disease, future
approaches for complex disease. Nat Genet 33:228337. Suppl.
Bouchard TJ Jr, Lykken DT, McGue M, Segal NL, Tellegen A. 1990.
Sources of human psychological differences: the Minnesota Study of Twins Reared Apart. Science 250: 223228.
Griffiths AJF, Gelbart WM, Miller JH, Lewontin RC. 1999. Modern
Genetic Analysis. New York: Freeman. Also searchable at http://
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi? db=Books.
Insel TR, Young LJ. 2001. The neurobiology of attachment. Nat Rev
Neurosci 2:129136.
International Human Genome Sequencing Consortium. 2001.
Initial sequencing and analysis of the human genome. Nature
409:860921.
Online Mendelian Inheritance in Man, OMIM . McKusick-Nathans Institute of Genetic Medicine, Johns Hopkins University
(Baltimore, MD) and National Center for Biotechnology Information, National Library of Medicine (Bethesda, MD), World
Wide Web URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim/
Novina CD, Sharp PA. 2004. The RNAi revolution. Nature
430:161164.
Shahbazian MD, Zoghbi HY. 2002. Rett syndrome and MeCP2:
linking epigenetics and neuronal function. Am J Hum Genet
71:12591272.
Venter JG, Adams MD, Myers EW, Li PW, Mural RJ, Sutton GG,
Smith HO, et al. 2001. The sequence of the human genome.
Science 291:13041351.
Referncias
Amir RE, Van den Veyver IB, Wan M, Tran CQ, Francke U, Zoghbi HY. 1999. Rett syndrome is caused by mutations in X-linked
MECP2, encoding methyl-CpG-binding protein 2. Nat Genet
23:185188.
Antoch MP, Song EJ, Chang AM, Vitaterna MH, Zhao Y, Wilsbacher LD, Sangoram AM, King DP, Pinto LH, Takahashi JS. 1997.
Functional identification of the mouse circadian Clock gene by
transgenic BAC rescue. Cell 89:655667.
Arnold SE, Talbot K, Hahn CG. 2004. Neurodevelopment, neuroplasticity, and new genes for schizophrenia. Prog Brain Res
147:319345.
Bellugi U, Lichtenberger L, Jones W, Lai Z, St George M. 2000. I. The
neurocognitive profile of Williams Syndrome: a complex pattern
of strengths and weaknesses. J Cogn Neurosci 12:729. Suppl.
Ben-Shahar Y, Robichon A, Sokolowski MB, Robinson GE. 2002.
Influence of gene action across different time scales on behavior.
Science 296:741744.
Brunner HG, Nelen M, Breakefield XO, Ropers HH, van Oost BA.
1993. Abnormal behavior associated with a point mutation in
the structural gene for monoamine oxidase A. Science 262:578
580.
Caron H, van Schaik B, van der Mee M, Baas F, Riggins G, van
Sluis P, Hermus MC, et al. 2001. The human transcriptome map:
06/06/14 09:54
58
Eric R. Kandel, James H. Schwartz, Thomas M. Jessell, Steven A. Siegelbaum & A. J. Hudspeth
Kandel_03.indd 58
McGue, M, Bouchard, TH Jr. 1998. Genetic and environmental influences on human behavioral differences. Ann Rev Neurosci
21:124.
Mendel G. 1866. Versuche ber Pflanzen-hybriden. Verh Naturforsch 4:347;1966. Translated in: C Stern, ER Sherwood (eds). The
Origin of Genetics: A Mendel Source Book. San Francisco: Freeman.
Sokolowski MB. 1980. Foraging strategies of Drosophila melanogaster: a chromosomal analysis. Behav Genet 10: 291302.
Sokolowski MB. 2001. Drosophila: genetics meets behavior. Nat
Rev Genet 2:879890.
Stefansson H, Sigurdsson E, Steinthorsdottir V, Bjornsbottir S, Sigmundsson T, Ghosh S, Brynjolfsson J, et al. 2002. Neuregulin 1
and susceptibility to schizophrenia. Am J Hum Genet 71:877892.
Takahashi JS, Pinto LH, Vitaterna MH. 1994. Forward and reverse
genetic approaches to behavior in the mouse. Science 264:1724
1733.
Toh KL, Jones CR, He Y, Eide EJ, Hinz WA, Virshup DM, Ptacek LJ,
Fu YH. 2001. An hPer2 phosphorylation site mutation in familial
advanced sleep phase syndrome. Science 291:10401043.
Walter J, Paulsen M. 2003. Imprinting and disease. Semin Cell Dev
Biol 14:101110.
Watson JD, Tooze J, Kurtz DT (eds). 1983. Recombinant DNA: A
Short Course. New York: Scientific American; distr. by W.H.
Freeman.
Whitfield CW, Cziko AM, Robinson GE. 2003. Gene expression
profiles in the brain predict behavior in individual honey bees.
Science 302:296299.
Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. 2001. Cellular mechanisms of social attachment. Horm Behav 40: 133138.
Zondervan KT, Cardon LR. 2004. The complex interplay among
factors that influence allelic association. Nat Rev Genet 5:89100.
06/06/14 09:54