Centro de Cincias Exatas

Departamento de Qumica

PRTICA 1 COLORIMETRIA E
ESPECTROFOTOMETRIA

Londrina, Abril de 2015

1 INTRODUO
A espectroscopia se baseia na absoro da radiao nos comprimentos de onda
entre o ultravioleta e o infravermelho. O aparelho espectrofotmetro faz passar um feixe
de luz monocromtica atravs de uma soluo e mede a quantidade de luz que foi
absorvida por essa soluo. Um prisma contido no aparelho separa a luz em feixes com
diferentes comprimentos de onda. O equipamento permite saber que quantidade de luz
absorvida a cada comprimento de onda.1
medida que a luz atravessa o meio contendo um analito que absorve, um
decrscimo de intensidade ocorre na proporo que o analito excitado. Para uma
soluo do analito de determinada concentrao, quanto mais longo for o comprimento
do caminho do meio atravs do qual a luz passa, mais centros absorventes estaro no
caminho, e maior ser a atenuao. Quanto maior for a concentrao de absorventes,
mais forte ser a atenuao. A lei de absoro, tambm conhecida como lei de LambertBeer, nos diz quantitativamente como a grandeza da atenuao depende da concentrao
das molculas absorventes e da extenso do caminhosobre o qual ocorre a absoro.2
A espectroscopia de radiao ultravioleta-visvel (UV-VIS) uma ferramenta
muito til para a realizao de anlises quantitativas que dependem da medio de
propriedades eltricas ou na medida da intensidade de radiao emitida e absorvida,
sendo as radiaes ultravioletas utilizadas para a deteco de grupos cromforos, como
o verde de bromocresol, empregado em solues diludas.3O indicador verde de
bromocresol,

um

cido

orgnico

fraco,

com

denominao

qumica

de

tetrabromometacresolsulfonoftalena e frmula molecular C21H14Br4O5S, sua constante

de ionizao (pKa) corresponde a 4,66 (fora inica 0,1)e,

massa molecular de

698,01386 g mol-1. Constitui-se de dois tomos de hidrognio doadores e cinco tomos

de hidrognio aceptores.3,4

Figura 1.Estrutura do verde de bromocresol.

Fonte UTFPR, 2011

A mudana de colorao deste corante ocorre devido a concentrao de on

hidrognio na soluo, do amarelo para soluo predominante cida para o azul em
soluo predominante alcalina, variando entre os pH 3,8 e 5,4. Este intervalo de pH
influenciado pela temperatura, pela fora inica e pela presena de solventes orgnicos
e partculas coloidais.4
2 OBJETIVO
O objetivo deste trabalho foi a abordagem da espectrofotometria como mtodo
analtico, atravs da absoro de luz, na determinao de diferentes concentraes do
corante verde de bromocresol, quando este foi submetido a uma diluio alm de
observar atravs da colorimetria as pequenas diferenas de cor entre as amostras.
Objetivou-se tambm uma curva de calibrao para essas amostras.
3 MATERIAIS UTILIZADOS

Espectrofotmetro de absoro no UV-vis

Cubetas de acrlico
Pipeta Volumtrica de 5mL
Pipeta Volumtrica de 2mL
Pipeta Graduada de 4mL
Pipeta Graduada de 1mL
Tubos de ensaio
Estante para tubos de ensaio
Bales Volumtricos de 100mL
gua destilada
Verde de bromocresol 4,426 x 10-5 mol L-1

4 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
A soluo de corante utilizada foi o verde de bromocresol na concentrao 4,
426 x 10-5 mol.L-1, sendo etanol o solvente utilizado.
Foi observada a colorao da soluo de corante de cada equipe para a
realizao do experimento. A primeira equipe utilizou o alaranjado de metila, o qual
encontrava-se na cor laranja. A terceira equipe utilizou o azul de bromofenol, o qual
encontrava-se na cor azul, e a nossa equipe utilizou o verde de bromocresol, sendo este

de cor verde. Em seguida, discutiu-se se naquela colorao a qual se encontravam as

solues seria possvel que a luz atravessassem-nas. Porm, as solues de cada equipe
j encontravam-se diludas e no concentradas. Assim, no foi necessrio dilu-las para
a realizao da prtica, pois naquelas condies a luz atravessaria.
Foi, ento, medido o pH da soluo de verde de bromocresol, sendo este entre 6
e 7 (Figura 1). Por conseguinte foi feita a leitura de quanto cada soluo est
transmitindo (transmitncia) e absorvendo (absorvncia) de luz no espectrofotmetro.
Primeiramente desde 400 nmat 540 nm de 10 em 10 nm, e, em seguida de 540 nmat
700 nm de 20 em 20 nm, usando gua destilada como referncia.
Por fim, foi preparado 6 tubos de ensaio, sendo que o tubo de nmero 6 continha
uma soluo de corante de concentrao desconhecida, a qual ser determinada atravs
da Lei de Lambert-Beer.

Figura 2. Colorao da soluo do corante verde de bromocresol e seu respectivo pH.

5 RESULTADOS E DISCUSSO
Usando gua destilada como referncia, foram efetuadas leituras de absorvncia
e transmitncia da soluo de corante verde de bromocresol em uma faixa de
comprimento de onda de 400 a 700 nm. Os resultados obtidos podem ser encontrados na
Tabela 1.
Tabela 1. Leitura de absorvncia e transmitncia da soluo de verde bromocresol em
comprimento de onda de 400 nm at 700 nm.
Comprimento de onda (nm)

Transmitncia (%)

Absorvncia

400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
560
580
600
620
640
660
680
700

38,9
36,0
33,6
32,2
32,9
34,5
36,2
41,6
46,7
52,1
56,8
61,7
63,6
64,1
61,2
51,1
41,1
33,2
43,5
69,7
91,9
97,9
100,6

0,410
0,445
0,474
0,493
0,483
0,463
0,441
0,381
0,331
0,283
0,246
0,210
0,197
0,193
0,213
0,292
0,386
0,479
0,362
0,157
0,041
0,009
-0,003

A partir dos resultados obtidos na tabela 1, construiu-se um espectro de absoro

do corante utilizado, como observado na Figura 3. Os dados coletados ainda
possibilitaram a determinao da absoro mxima do composto utilizado, sendo este
obtido em 430 nm.

0,6

A b sorvn cia

0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0,0

400

450

500

550

(nm)

600

650

700

Figura 3.Grfico da absorvncia em funo do comprimento de onda.

Na demonstrao da lei de Lambert-Beer preparou-se 6 tubos de ensaio

enumerados de 0 a 5 conforme a tabela 2. O tubo nmero 6 continha uma soluo do
corante com concentrao desconhecida.
Tabela 2. Leitura de absorvncia e transmitncia da soluo de verde bromocresol em
comprimento de onda de 430 nm.
Tubo (n)

gua
(mL)

Soluo de
Calculo de
Transmitncia Absorvnci
corante
concentra
(T%)**
a (ou
(mL)
o (g/mL)
D.O.)**
0
5
0
0
99,8
0,001
1
4
1
6,179
93,1
0,031
2
3
2
12,355
72,5
0,140
3
2
3
18,54
57,6
0,240
4
1
4
24,718
42,4
0,373
5
0
5
30,896
34,1
0,467
6
5 mL
Desconhecida
67,2
0,172
** Leituras efetuadas no comprimento de onda que corresponde ao pico mximo de
absoro do corante em soluo.
A partir da tabela 2 foi possvel construir os grficos da absorvncia em funo
da concentrao (Figura 4) e da variao da transmitncia em funo da concentrao
(Figura 5).

0,5

A b so rv n cia

0,4
0,3
0,2
0,1
0,0
0

10

15

20

25

30

Verde de Bromocresol ( g/mL)

Figura 4. Grfico da absorvncia em funo da concentrao.

35

110
100

T ra n sm it n cia (% )

90
80
70
60
50
40
30
0

10

15

20

25

30

35

Verde de Bromocresol ( g/mL)

Figura 5. Grfico da transmitncia em funo da concentrao.

Quando uma luz policromtica (luz branca), que contm todos os comprimentos
de onda do espectro na regio do visvel, passada por um objeto, este objeto ir
absorver alguns comprimentos de onda, deixando passar outros que no so absorvidos
e sero transmitidos.
Estes comprimentos de onda transmitidos sero observados na forma de cor.
Esta cor chamada de cor complementar da cor absorvida. 5Na Figura 6, pode-se
observar que as solues nos tubos, as quais foram diludas conforme a tabela
2,apresentaram a cor azul-esverdeado, sendo esta a cor complementar. Assim, o
esperado seria que obtivssemos o pico mximo de absoro entre 595 e 650 nm, de
acordo com a literatura. Porm, obtivemos o maior pico de absoro em 430 nm, sendo
que neste comprimento de onda a cor complementar esperada amarela.

Figura 6.Coloraes das solues diludas.

O erro decorrente de impreciso do comprimento de onda pode ter ocorrido

devido a falhas instrumentais, uma vez que o pH medido foi entre 6 e 7 para todas as
diluies (Figura 7), e, para a soluo ser amarela ( = 430 nm), de acordo com a
literatura, o pH deve ser abaixo de 3,8. Sendo que, para o pH acima 5,4 a cor observada
azul. Conforme a Figura 3 pode-se observar a presena de um segundo pico, em 600
nm, que de acordo com a literatura seria o correto, j que a cor observada no intervalo
de 595 a 650 nm corresponde ao azul esverdeado.5

Figura 7.pH correspondente das diluies do corante verde de bromocresol.

De acordo com a Lei de Lambert-Beer para encontrar a concentrao de uma

determinada soluo deve-se ter um conjunto de soluo j conhecida. Sendo assim, de
acordo com as diluies realizadas,as concentraes das solues dos tubos de 1 a 5 da
Tabela 2 foram obtidas da seguinte forma:
C1.V1 = C2.V2
Sendo que, C1 a concentrao a ser encontrada, V1 o volume total, C2 a
concentrao do corante (4,426 x 10-5 mol L-1) e V2 o volume pipetado da soluo de
corante. No caso do tubo1 a concentrao obtida foi de 6,179 g/mL e a concentrao
nos demais tubos foram obtidos da mesma forma.
Para determinar a concentrao da amostra desconhecida (tubo 6) foi utilizada a
Lei de Lambert-Beer. Assim, a partir do grfico de absorvncia em funo da
concentrao (Figura 4) foram obtidos os parmetros de regresso linear, sendo estes: a
= 0,01598, b = -0,0381 e r = 0,97487. Ento, com a equao da reta:
y = ax + b

Onde, y a absorvncia e x a concentrao. Assim:

y = ax + b
x=

y b
a

x = 13,15 g/mL
A demonstrao do equilbrio cido-base do corante verde de bromocresol
(VB),utilizado na aula prtica, apresenta duas formas estruturais predominantes, sendo a
de cor amarela no pH abaixo de 3,8 e a azul em pH acima de 5,4 cuja distribuio
relativa obedece ao equilbrio cido-base mostrado na Figura 8.6

Figura 8. Equilbrio cido-base do corante verde de bromocresol.

6 CONCLUSO
Concluiu-se que a capacidade de absoro de luz do cromforo dependedas
condies de favorecimento do meio. Nesta prtica pode-se observar a influncia do pH
no ndice de absorvncia, pois com a variao do pH o corante absorve luz visvel em
um comprimento de onda diferente, mudando assim a cor absorvida e a cor transmitida.
A curva de calibrao obteve resultados satisfatrios, visto que, o coeficiente de
correlao ficou prximo de 1. E atravs da Lei de Lambert-Beer, pode-se determinar a
concentrao da amostra desconhecida. No entanto, de acordo com os resultados
obtidos, observou-se a falha no experimento, j que a maior absorvncia encontrada
refere-se a um comprimento de onda diferente ao evidenciado pela literatura.
7 BIBLIOGRAFIA

1. Disponvel em: <http://pt.slideshare.net/Danielly27/relatorio-5>. Acesso em 06 de

abril de 2015.
2. SKOOG, A. D. Qumica Analtica, 8a edio. So Paulo: Cengage Learning, 2012.
Pagina 678 e 746.
3. VOGEL, A. I. Anlise Qumica Quantitativa, 5 a edio. Rio de Janeiro: LTC, 1992.
Pagina 7 e 219.
4. Anais do III ENDICT Encontro de Divulgao Cientfica e Tecnolgica.
Universidade

Tecnolgica

Federal

do

Paran,

UTFPR.

Disponvel

em:

<http://www.utfpr.edu.br/toledo>. Acesso em 06 de abril de 2015.

5. Apostila absoro molecular UV-visvel. Pgina 8.
6. PREVIDELLO, B. A. F. et al. O pKa de indicadores cido-base e os efeitos
coloidais. Qum. Nova v. 29, 600-606, 2006.