M UTAES G N ICAS E

M UTAES C ROMOSSMICAS
Dcima terceira
aula (T13)

Objetivos
1. Distinguir mutao espontnea de mutao
induzida.
2. Conceituar gene letal.
3. Explicar como Morgan identificou mutaes
letais ligadas ao sexo em Drosophila.
4. Conceituar sistema balanceado de genes letais.
5. Definir inverso cromossmica.
6. Explicar como inverses em estado heterozigtico
suprimem recombinao gnica.
7. Descrever as caractersticas do sistema ClB de
Drosophila melanogaster.
8. Explicar a deteco de mutaes letais ligadas ao
sexo em Drosophila por meio do sistema ClB.
9. Conceituar mutao hometica.

Texto adaptado de:

MOORE, J. A. Science as a Way of Knowing Genetics. Amer. Zool. v. 26: p. 583-747, 1986.

DESCOBERTA DAS MUTAES

Os relatos de De Vries (1901-1903, 19091910) sobre o aparecimento freqente de mutantes na planta Oenothera glazioviana (Onagraceae), abundante nas dunas da Holanda, estimularam muitos geneticistas e evolucionistas a
procurar novos mutantes em outros organismos
(veremos a seguir que os mutantesde De Vries
no eram mutaes verdadeiras, definidas por ele
como uma mudana hereditria em um dos alelos
de um gene). Era isto que Morgan tinha em mente
quando iniciou suas culturas de D. melanogaster.
Em espcies de Drosophila, assim como em
qualquer outro organismo, o aparecimento de
novos mutantes um evento extremamente raro.
Drosfilas com olhos brancos ou asas vestigiais
s foram encontradas aps a anlise minuciosa
de milhares de indivduos. Em 1914, Morgan
escreveu: Na realidade, nossa experincia com
Drosophila nos d a impresso que as mutaes
so eventos raros, embora o nmero de mutaes
obtidas por ns at o momento tenha sido muito
grande.
Existem duas razes principais para a raridade
das mutaes. Uma delas a baixa freqncia

com que um determinado gene sofre mutao; a

outra a recessividade da maioria dos alelos
mutantes. Como conseqncia dessa ltima situao, a quase totalidade dos alelos mutantes encontra-se no estado heterozigtico, mascarados pelo
alelo dominante selvagem. Imagine uma populao de 1.000 moscas, em que haja apenas um
alelo recessivo presente em um indivduo heterozigtico, como seria possvel detect-lo?
Durante as primeiras dcadas do sculo XX,
os organismos foram submetidos a diversos tratamentos visando o aumento da taxa de mutao.
Na esperana de obter novos mutantes, Morgan
injetou vrias substncias qumicas em diferentes
espcies de insetos. Posteriormente, ele exps
drosfilas radiao, idia que deve ter vindo de
seu colega da Columbia University, James Howard
McGregor, que foi um dos primeiros a testar o
efeito da radiao por rdio em organismos vivos
(ele usou gametas e embries de rs).
O fato de algumas das linhagens de D. melanogaster de Morgan terem sido submetidas radiao traz a remota possibilidade de que alguns dos
primeiros mutantes descobertos possam ter sido
induzidos por ela. Contudo, Morgan (1914a) no
acreditava nesta hiptese e experimentos subse-

123

qentes usando o elemento qumico rdio e raios

X pareciam no produzir mutaes. Foram os trabalhos de Muller que, posteriormente, demonstraram a capacidade mutagnica dos raios X. Morgan (1914b) tambm levantou a possibilidade da
eterizao das moscas causar mutaes, mas no
pde demonstrar se isso realmente ocorria.
E. B. Lewis (comunicao pessoal) acredita que
seja pouco provvel que os mutantes encontrados
na Sala das Moscas tenham sido induzidos por
radiao. Uma das razes para isto que as dosagens de radiao usadas por Morgan eram muito
baixas. Lewis suspeita que a causa da taxa elevada
de mutaes tenha sido a disgenesia do hbrido1
decorrente de numerosos cruzamentos entre diferentes linhagens de D. melanogaster coletadas no
campo. Se essa hiptese for verdadeira, significa
que o advento da gentica de Drosophila foi um
evento pouco provvel. Se Morgan tivesse usado
somente uma linhagem, quer de Lutz, Castle, Payne
ou que ele prprio tivesse coletado, a disgenesia
do hbrido no teria ocorrido e o fervilhar de
mutantes no teria sido observado.
Logo aps o primeiro macho de olho branco
ter sido descoberto, outros alelos mutantes apareceram. Em poucos anos o nmero chegou a 85.
Isto se deveu, em grande parte, extraordinria
habilidade de Calvin Bridges para detectar variaes entre indivduos com anomalias e o tipo selvagem. Na verdade, todos na Sala das Moscas
tinham uma grande habilidade em descobrir novos
alelos mutantes. Mesmo Sturtevant, apesar de
daltnico, detectou muitos desses alelos. Um
nmero enorme de moscas foi analisado e foi,
muito provavelmente, a dedicao, o enfoque e
a disciplina desses pesquisadores da Sala das
Moscas, a maior razo para que tanto tenha sido
descoberto em to pouco tempo.
Convm lembrar que as mutaes somticas
no so hereditrias e apenas aquelas que ocorrem
na linhagem germinal que podem ser transmitidas
s geraes subseqentes. Portanto, as mutaes
somticas so aquelas que ocorrem em qualquer
clula que no aquelas que iro originar gametas.

MUTAES INDUZIDAS

A natureza e as causas do processo de mutao

despertaram o interesse no s dos geneticistas
mas tambm dos evolucionistas. Seriam as
mudanas herdveis estudadas na Sala das
Moscas a base da variabilidade necessria evoluo darwiniana?
A princpio, ningum imaginava que as mudanas genticas pudessem ser de tamanha magnitude a ponto de serem reveladas por meio de
investigaes citolgicas dos cromossomos. Mas,
se a natureza fsica da mudana parecia no poder
ser detectada, possivelmente, o processo da mutao em si pudesse ser estudado. Isto se tornaria
plausvel se as mutaes pudessem ser produzidas
experimentalmente.
As evidncias genticas indicavam que mutao era um fenmeno raro. Muller, por exemplo,
estimou que em D. melanogaster qualquer gene
particular teria uma taxa de mutao da ordem
de 1x10-6; ou seja, em uma amostra de 1 milho
de gametas seria esperado um portador de uma
mutao nova em um gene particular. Foi verificado tambm que: a taxa de mutao variava
para diferentes genes; a mutao podia ocorrer
em qualquer etapa da vida do organismo; a maioria dos alelos mutantes era recessiva; mutaes
com efeitos letais ocorriam com muito mais
freqncia do que mutaes com efeitos visveis;
um mesmo gene podia sofrer mais de um tipo de
mutao, originando sries de alelos mltiplos que
afetavam um mesmo carter em graus variados;
podiam ocorrer mutaes reversas, ou seja, um
alelo mutante mutar novamente restabelecendo
a condio selvagem. A ocorrncia de mutao
reversa mostrou de forma clara e definitiva que a
mutao era uma alterao no gene e no uma
simples perda do gene. Com isso foi sepultada a
chamada hiptese da presena ou ausncia,
proposta no incio do sculo para explicar as
relaes entre os estados de carter mendelianos.
Segundo essa hiptese, um dos estados do carter
seria condicionado por um determinado fator e o
outro, pela ausncia do fator.
1
Inicialmente, nenhum dos experimentos para
Disgenesia do hbrido um fenmeno que ocorre quando
fmeas de Drosophila melanogaster de linhagens de labora- induzir modificaes genticas foi conclusivo,
trio so cruzadas com machos provenientes de certas popu- uma vez que no se distinguiam as mutaes indulaes naturais. A prognie apresenta uma srie de defeitos,
incluindo esterilidade, devido segregao distorcida na zidas das espontneas e o planejamento dos expemeiose (desvio meitico), mutao e quebras cromossmicas. rimentos era inadequado. As mutaes que apare124

ciam em estoques no expostos aos agentes mutagnicos, para as quais no se podia correlacionar
nenhuma causa conhecida, eram chamadas mutaes espontneas. E embora elas fossem raras,
tambm o eram as mutaes obtidas por meio de
experimentos onde indutores fsicos ou qumicos
eram utilizados. Sendo assim, ao expor-se, por
exemplo, D. melanogaster ao elemento rdio, e
se observar o aparecimento de um mutante em
F1, F2 ou em geraes posteriores, no se podia
estar seguro quanto a origem espontnea ou induzida da mutao.
Uma vez que o aparecimento de novos alelos
mutantes era pouco freqente e praticamente
todos eram recessivos, havia um problema em
detect-los. Assuma, por exemplo, que um gene
autossmico no ncleo de um espermatozide
sofra uma mutao. Se este espermatozide
fecundar um vulo um evento muito pouco
provvel por si s o novo indivduo ter um
alelo mutado proveniente do pai e um normal,
dominante, proveniente da me. Ao observar-se
a prole, no ser possvel detectar o indivduo
que carrega o novo alelo mutante, pois este estar
em heterozigose.
Por meio de cruzamentos apropriados pode-se
produzir homozigotos para o alelo mutante, mas
para isto necessrio que se seja capaz de identificar
o heterozigoto original. Como isso no possvel
saber, a alternativa seria realizar inmeros cruzamentos na esperana de que um deles inclusse o
indivduo heterozigtico. Este procedimento
impraticvel para aqueles interessados em obter
dados quantitativos na produo de mutantes.
H. J. Muller foi a primeira pessoa a dar uma
soluo prtica a esse problema. Ele props, em
1927, um experimento engenhoso que permitiu
comparar, de maneira simples e acurada, a taxa
de mutao espontnea com a taxa de mutao
induzida por exposio aos raios X.
Muller s pde elaborar seu famoso experimento de quantificao de mutao induzida, que
lhe rendeu o prmio Nobel para Medicina e Fisiologia em 1946, a partir do conhecimento que se
tinha na poca sobre genes letais e sobre o efeito
inibidor de recombinao gnica exercido pelas
inverses cromossmicas.

GENES LETAIS
Em 1912, Morgan descobriu que um de seus
estoques de moscas selvagens estava apresen-

tando um comportamento peculiar ... algumas

fmeas estavam produzindo duas fmeas para
um macho, enquanto que outras fmeas produziam nmeros iguais dos dois sexos.
Morgan imediatamente suspeitou que o distrbio na proporo sexual tinha algo a ver com o
cromossomo X. Diz ele: Se o sexo determinado por um fator nos cromossomos sexuais
parece provvel que alguma alterao tenha
ocorrido nesse cromossomo.
Com o objetivo de testar essa hiptese, Morgan cruzou fmeas daquele estoque com machos
white. O resultado obtido foi apresentado nos
seguintes termos: Algumas das fmeas F1 deram
uma proporo 2:1. Quando estas fmeas foram
cruzadas com machos white, novamente obtevese os seguintes resultados:
448 fmeas selvagens
2 machos selvagens
445 fmeas white
374 machos white.
A anlise de Morgan foi brilhante. Ele assumiu,
a partir de seu modelo sobre herana ligada ao
sexo em D. melanogaster, que uma classe de
machos selvagens era esperada e sua ausncia,
portanto, s poderia ser explicada pela existncia
de um fator no cromossomo X que impedisse a
sobrevivncia das moscas que portassem este
fator. Mas se tal fator existisse, como explicar o
aparecimento dos dois machos selvagens na
prognie? (Fig. 41)
Morgan explicou estes resultados sugerindo a
existncia de algum tipo de fator letal recessivo
em um dos cromossomos sexuais das fmeas
produtoras de 2 fmeas para 1 macho. Se na
meiose da fmea heterozigtica para white e para
o letal, ocasionalmente, o fator letal se separasse
do alelo selvagem do gene white, por meio de
uma permutao, o cromossomo X recombinante
selvagem originaria um macho normal. E mais,
de acordo com sua hiptese da ordenao linear
dos fatores nos cromossomos, o suposto fator
letal deveria estar prximo do loco white, j que
ele se separava do alelo selvagem do white uma
vez em cada 200 vezes.
Morgan fez uma deduo a partir dessa sua
hiptese: se o gene letal estivesse realmente to
prximo do gene white, a freqncia de permutao entre ele e o gene miniature deveria ser
semelhante freqncia de permutao entre minia-

125

X+

X+

Xl
+

X+ Y

gametas

F1

X+ X l

X + X+

X l X+

X+ Y

X lY

Fmea
selvagem

Fmea
selvagem

Macho
selvagem

Morre

Cruzamento-teste
+ w
X l X+

F1

Xl

X+

X+
w

X+ Y

gametas

X l X+

X+ X+

Xl Y

X+Y

Fmea
selvagem

Fmea
white

Morre

Macho
white

Figura 41. Representao esquemtica do experimento

de Morgan (1912) sobre o alelo letal ligado ao cromossomo X em Drosophila melanogaster.

ture e white. Diz ele: Em resumo, ns previmos a

proporo de machos com asas longas e asas
miniaturas esperados nos retrocruzamentos, i.e.,
quantos machos de asas longas iriam escapar da
dose fatal. A previso foi confirmada.
E. A. Carlson, em seu livro THE GENE: A Critical History, considera que a capacidade de localizar um mutante apenas pela ausncia da prognie
que deveria cont-lo e de restringir a localizao
desse gene a uma regio conhecida de um dado
cromossomo foi um feito mais extraordinrio do
que a prpria hiptese da permutao. A proporo entre as classes de F2 nestes cruzamentos era
inexplicvel com base em qualquer das hipteses
de Bateson. Na verdade, dez anos antes, o prprio
Bateson havia previsto a existncia de genes letais
com base nas anlises da alcaptonria e do albinismo realizadas por Garrod, mas sua concepo
da teoria gentica impediu que ele prprio fizesse
a descoberta desses fatores.

SISTEMAS

DE LETAIS BALANCEADOS

Em 1917, Muller apresentou uma sensacional

anlise da mutao Beaded que serviu para quatro
126

propsitos principais: a) revelou o mistrio de

um fator inconstante, as asas beaded; b) provou
a existncia da hereditariedade residual que
causa variao de carter; c) explicou as mutaes obtidas por De Vries em O. glazioviana;
d) introduziu um novo conceito para hbridos
permanentes.
Beaded uma mutao dominante que causa
cortes curvos nas bordas das asas. Seus efeitos eram
variveis e podiam ser modificados por seleo.
Quando uma mosca Beaded era cruzada com uma
mosca normal no mais do que metade da prognie
apresentava fentipo Beaded. Aps anos de seleo,
foi isolada uma linhagem cuja prognie era quase
100% Beaded. Umas poucas moscas no-Beaded
apareciam irregularmente entre a descendncia
Beaded. Muller props que Beaded era uma
mutao visvel dominante, mas letal em homozigose. Ele sugeriu tambm que a variabilidade da
expresso dessa mutao era devida a outros genes
que ele realmente mapeou nos diversos cromossomos de D. melanogaster.
Finalmente, ele lanou a hiptese de que a
linhagem Beaded estvel era resultante da
presena de outro gene com um alelo letal no
cromossomo homlogo ao portador do alelo
Beaded, o qual seria da mesma natureza do letal
descrito por Morgan em 1912, um recessivo
simples. A conseqncia desse estado era uma
letalidade balanceada que matava qualquer uma
das prognies homozigticas mas permitia a
sobrevivncia dos heterozigticos. (Fig. 42)
Os sobreviventes com asas normais seriam
resultado de permutaes entre os dois genes
letais (nesse sentido, eles seriam como os machos selvagens que escapavam da morte no experimento de Morgan, por serem produtos da
permutao entre o gene letal e o white). Muller
diz o seguinte a esse respeito: Esta extraordinria condio gentica, em que ambos os homozigticos no aparecem devido a ao de fatores
letais em cromossomos opostos [homlogos]
pode ser chamada condio de fatores letais
balanceados.
Se as plantas de De Vries (Oenothera glazioviana) fossem igualmente letais balanceados, elas
produziriam recombinantes com caractersticas
recessivas mantidas em heterozigose por inmeras
geraes. Essas novas caractersticas apareceriam
na populao em freqncias muito mais altas do
que as mutaes simples encontradas na mosca

INVERSES CROMOSSMICAS E A
SUPRESSO DA RECOMBINAO GNICA

D. melanogaster. Portanto, os mutantes descritos

por De Vries no seriam resultado de novas mutaes, mas sim de permutaes raras entre grupos
de alelos normalmente mantidos em heterozigose.

Por volta de 1915, observou-se que alguns

estoques de Drosophila melanogaster apresentavam uma taxa muito pequena de recombinao
Herana do alelo Beaded em condio entre determinados locos. Este fato chamou a
no-balanceada
ateno dos pesquisadores da poca, uma vez que
a porcentagem de ocorrrncia de recombinantes
P
*
*
*
*
se constituia em um dado fundamental para a locaX
lizao de locos gnicos. A causa para a reduo
Bd
Bd
+
+
da recombinao, embora no fosse conhecida,
gametas
era herdada e sendo assim poderia ser estudada.
Imaginou-se a existncia de um fator redutor
*
*
*
*
de recombinao que seria herdado como um
Bd
Bd
+
+
gene mendeliano simples. Este suposto fator
estava localizado na regio do mapa cuja recombinao ele afetava. Alm disso, o suposto fator se
F1
expressava apenas na condio heterozigtica.
*
*
*
* *
*
*
*
Em 1926, Sturtevant publicou os resultados
Bd
Bd
Bd Bd
+
+ +
+ obtidos com moscas portadoras de um destes
MORRE
Beaded
Beaded
Selvagem fatores que suprimia a recombinao entre genes
localizados no brao direito do cromossomo III
(fator CIII). Por meio de cruzamentos bem planeHerana do alelo Beaded em condio jados, ele conseguiu determinar que a ordem de
balanceada
quatro dos genes presentes na regio cromossmica onde a recombinao era suprimida no
era a mesma que a do mapa gnico daquele
l
P
l
*
*
cromossomo. Enquanto nas linhagens normais a
X
Bd
Bd
+
+
ordem dos genes era ABCD, na linhagem portadora do fator CIII a ordem desses mesmos
gametas
genes era ACBD.
l
l
*
*
Sturtevant concluiu que este e, possivelmente,
os demais fatores inibidores de recombinao eram
Bd
Bd
+
+
inverses de regies especficas dos cromossomos.
Suponha um conjunto de locos hipotticos que
normalmente ocorrem ao longo do cromossomo
F1
na ordem abcdefg; um cromossomo que apresente
l
l
l
l
*
*
*
*
estes locos na ordem abedcfg contm uma inverso.
Bd
Bd
Bd Bd
+
+ +
+
As inverses so formadas quando um cromossomo
MORRE
Beaded
Beaded
MORRE
sofre quebras em duas partes, neste caso entre b e c
Figura 42. Herana do estado de carter asas Beaded e entre e e f, seguidas de uma rotao de 180o do
na condio letal no-balanceada e na condio letal segmento central e posterior fuso com as pontas
balanceada. Homozigotos para o alelo Beaded no terminais, b e f, do cromossomo original.
podem ser obtidos pois esse alelo letal em homozigose.
Foi sugerido, ento, que a recombinao era
Uma homozigosidade aparente ocorre quando um alelo
suprimida,
porque durante a meiose os cromosletal de um outro gene, sem efeitos visveis, est presente
no cromossomo homlogo ao que contm o alelo Beaded. somos no podiam se emparelhar na regio onde
Isso ocorre porque ambas as prognies homozigticas um dos homlogos contivesse a seqncia de locos
morrem; uma por ter o alelo Beaded em homozigose e a normal e, o outro, a seqncia invertida. As observaoutra por ter o outro letal em homozigose. (* = alelo es de cromossomos invertidos na meiose de milho
selvagem; l = alelo mutante letal recessivo).
e, mais tarde, em clulas de drosfilas com cromos127

segunda fica unida aos dois plos celulares,

somos politnicos mostraram, no entanto, que o
formando na anfase I da meiose uma ponte
emparelhamento cromossmico, em geral, ocorre
cromatdica que termina por se romper. Isso
e forma uma espcie de ala no bivalente.
faz com que os nicos produtos viveis dessa
Nos segmentos invertidos emparelhados pode
meiose sejam as cromtides que no sofreram
ocorrer permutao com formao de quiasmas
permutao dentro do segmento invertido.
e de cromtides recombinantes que tero constituies distintas se o centrmero estiver situado b. Se a inverso inclui o centrmero (inverso
pericentromrica), a permutao originar
dentro ou fora do segmento invertido. (Fig.43)
cromtides recombinantes com deficincia de
alguns genes e com duplicao de outros. Os
a. Se a inverso no inclui o centrmero (inverso
gametas que recebem estes cromossomos, em
paracentromrica), a permutao originar
geral, no formam zigotos viveis. Assim, no
uma cromtide sem centrmero e outra com
se formam recombinantes entre os genes contidois centrmeros. A primeira no puxada para
dos no segmento invertido.
os plos onde se formam os ncleos-filhos; a

Inverso paracentromrica em heterozigose

Inverso pericentromrica em heterozigose

Emparelhamento

Emparelhamento

Permutao na
ala

Permutao na
ala

Meiose

Meiose
Final da
meiose I

Final da
meiose II

Fragmento sem
centrmero
( perdido)

Ponte cromossmica
(quebra em qualquer ponto)

Com inverso
Produtos

Duplicao de D
Deficincia de A
Duplicao de A
Deficincia de D

Produto normal
Produto com deficincia

Normal

Produto com deficincia

Produto com inverso

Figura 43. Permutaes mpares dentro da ala que se forma pelo emparelhamento entre cromossomos homlogos
de indivduos heterozigticos para inverso paracentromrica ( direita) e para inverso pericentromrica ( esquerda).
Como resultado da meiose formam-se dois cromossomos parentais e dois recombinantes cujos gametas resultantes
so, em geral, inviveis por possurem deficincia ou duplicao de genes (extrado de Griffiths et al., 2.000).

128
A

mo X de uma fmea qualquer de D. melanogaster

poderia portar um alelo letal. A inteno de
A descoberta do sistema balanceado de genes Muller era determinar a taxa espontnea deste
letais e do efeito supressor de recombinao das tipo de mutao e, com esta informao, testar o
inverses permitiu que Muller planejasse e cons- efeito dos possveis agentes mutagnicos (por
trusse uma linhagem especial de drosfilas exemplo, do raio X).
O mtodo desenvolvido por Muller, esquemachamada ClB. Com essa linhagem ele podia medir
a taxa de mutao para o estado letal de genes tizado na figura 44, permite que seja estimada a
freqncia com que ocorre uma mudana para o
localizados no cromossomo X.
Uma fmea ClB tem um dos seus cromossomos estado letal, de qualquer um dos alelos do cromosX portando uma grande inverso (C), um alelo somo X dos machos da gerao parental; o l inrecessivo letal (l) e o alelo dominante bar (B). Os dica presena desta mutao.
Note que o X do macho ser transmitido para
loci l e B esto includos na regio invertida C.
Muller estrategicamente escolheu os genes l e suas filhas. Se uma das filhas receber um cromosB includos na regio invertida C, pois assim eles somo X do pai com uma nova mutao letal, ela
permaneceriam ligados (a inverso impediria ficar com esse cromossomo e com o ClB recebido da me. Por que esta fmea no morre, uma vez
que eles fossem separados por permutao).
O alelo dominante B serviria como um meio que ela possui um alelo letal em cada um dos seus
imediato de reconhecer as fmeas heterozigticas cromossomos X? Neste caso, o gene letal recmpara o cromossomo ClB, pois uma mutao mutado no est no mesmo loco gnico, ou seja,
dominante facilmente visvel. As fmeas portadoras no alelo do gene letal presente no cromossomo
de dois cromossomos ClB no seriam viveis pois ClB homlogo. Sendo assim, cada um dos alelos
o alelo letal l entraria em homozigose levando-as letais ser inibido por um alelo normal presente no
morte. Da mesma forma, os machos portadores cromossomo homlogo. A confuso vem do fato
do cromossomo ClB em hemizigose morreriam. de os dois alelos mutantes, embora em locos
Quando uma fmea heterozigtica para o diferentes, receberem o mesmo nome letal.
cromossomo ClB cruzada com um macho selvaComo mutao um fenmeno raro, a maioria
gem. A metade de suas filhas selvagem e a outra das fmeas F1 receber cromossomos X normais
metade tem os olhos bar, sendo, portanto, porta- de seus pais e, portanto, elas s possuiro o alelo
doras do cromossomo ClB. Os filhos que recebe- letal do cromossomo ClB.
ram o cromossomo ClB morrem por no possuAs fmeas ClB da gerao F1 sero cruzadas
rem o alelo dominante capaz de inativar o efeito com seus irmos machos normais. Cada fmea
do alelo letal l. A proporo sexual , ento, de 2 ser, ento, separada em um vidro de cultura infmeas para 1 macho.
dividual para que sua descendncia seja analisada.
Como mencionado anteriormente, na poca
Uma fmea no portadora de mutao letal
em que Muller estava fazendo estes experimen- no cromossomo recebido do pai produzir uma
tos, era sabido que genes em locos diferentes prognie constituda por 2 fmeas para 1 macho.
podiam mutar e causar a morte e que estes genes Metade das fmeas ser Bar (possuidoras do
letais eram quase sempre recessivos. J que cromossomo ClB) e metade ser selvagem; os
diferentes locos podem mutar para um estado machos sero todos selvagens, pois os que
letal, a chance de se obter uma mutao letal receberam o cromossomo ClB morreram.
qualquer bem maior do que a de se obter uma
Como mostrado na parte inferior da figura
mutao em um loco especfico. Assim, se estu- 44, uma fmea F1 que tenha recebido um cromosdarmos a taxa de mutao para uma condio somo X do pai com uma nova mutao letal
letal do cromossomo X, estaremos estimando a produzir apenas fmeas na descendncia: metade
soma das taxas para todos os locos que podem com fentipo Bar (portadoras do cromosssomo
mutar de maneira a levar a prole de machos ClB) e a metade com fentipo normal, embora
morte. O nmero destes locos pode ser grande, sejam portadoras do novo letal. No haver mamas no ser conhecido.
chos. Metade deles morrer por receber o cromosO estoque ClB permitiu a Muller medir a somo ClB e a outra metade por receber o cromosfreqncia com que locos gnicos num cromosso- somo X portador da nova mutao letal.

O MTODO ClB

DE

M ULLER

129

uma fmea F1 em mil (0.1 por cento) apresentava

apenas fmeas na prognie. Esta era, portanto, a
C
P
l
X
taxa espontnea de mutao letal. Vale lembrar,
B
+
+
mais uma vez, que esta no a taxa para apenas

gametas
um gene, mas para todos os genes do cromos12
12
somo X que podem mutar para um estado letal.
12
12
12
C
12
Embora Morgan e outros pesquisadores tives12
l
12
12
12
B
sem concludo uma dcada antes que os raios X
l 12
+
no induziam mutaes, Muller observou que,
na verdade, isto ocorria. Quando os machos eram
expostos a, aproximadamente, 4000r de raios X,
F1 12
12
12
12
12
12
12
uma fmea F1 em 10 apresentava apenas fmeas
C 12
C
12
12
12
12
12
l
l
12
12
na prognie portanto, uma taxa de mutao 100
12
12
B
B 12
12 l
12 l
+
+ 12
vezes maior do que a taxa de mutao espontnea.
Fmea
MORRE
Fmea
Macho
Muller demonstrou que os raios X podiam ser
Bar
selvagem
selvagem
utilizados para induzir mutaes nem todas letais,
claro. De fato, foi observado que os raios X
podiam induzir no apenas mutaes gnicas mas
tambm inverses, translocaes ou deficincias
(perda de um segmento do cromossomo).
12
Os cromossomos e genes de D. melanogaster
12
12
C 12
12
12
poderiam
a partir da ser modificados de maneira a
12
l
X
12
12
B
12 l
permitir que os geneticistas respondessem a vrias
+
questes antes impossveis de serem respondidas.
gametas
Alm da importncia do dado e das concluses
12
12
12
12
obtidas, no se pode esquecer o fato de que o
C
12
12
12
l
12
mtodo ClB desenvolvido por Muller foi bastante
12
12
B
12 l
+
engenhoso. Em muitos momentos, principalmente
quando nas mos de um pesquisador criativo, D.
melanogaster pde ser moldada segundo as
F2
12
12
necessidades dos experimentos. Ao construir o
12
12
12
12
12
12
C
C
12
12
12
12
genoma das moscas ClB, Muller foi capaz de
12
12
l
l
12
12
12
12
detectar a ocorrncia de um fenmeno muito raro.
B
B
+ 12
l 12
12 l
12
+
MORRE Uma vez que ele j podia medir, com preciso, a
Fmea
MORRE
Fmea
taxa de mutao espontnea, ele pode determinar
Bar
selvagem
o efeito mutagnico de vrias condies externas.
Figura 44. Representao esquemtica do mtodo ClB
Este foi o incio de uma linha de pesquisa que
de Muller para deteco de mutaes letais no cromosto importante para ns hoje em dia - a deteco
somo X de Drosophila melanogaster.
de radiaes e substncias qumicas txicas capazes de induzir mutaes.
Embora D. melanogaster seja uma mosca
pequena, possvel distinguir os machos das
MUTAES HOMETICAS
fmeas a olho nu. Assim, Muller podia, com
rapidez, verificar se seus tubos de cultura contiDiscos imaginais so aglomerados celulares
nham ou no machos. Foi, ento, possvel formu- presentes no corpo das larvas de insetos holomelar a questo: Qual a freqncia com que tablicos a partir das quais se desenvolvem (difequalquer loco no cromossomo X muta para um renciam-se) as estruturas do corpo do adulto,
alelo letal?
durante o estgio de pupa.
Como suspeitava-se que esta porcentagem era
Uma mutao que faz com que, durante o
muito pequena, milhares de cruzamentos foram desenvolvimento (metamorfose), uma determinada
feitos. Muller observou que, aproximadamente, estrutura do corpo seja substituda por outra

Raios X

130

Apndice em
denominada mutao hometica. Em outras
forma de perna
Olho
palavras, mutaes hometicas so mutaes que
mudam o destino de um disco imaginal. A mutao
Antennapedia em Drosophila melanogaster, por
exemplo, transforma a determinao do disco imaAntena
ginal de antena em disco imaginal de perna, o que
resulta em uma imago (inseto adulto) que apresenta
A
B
apndices em forma de perna na regio da cabea
onde, na ausncia dessa mutao, normalmente se Figura 45. Esquemas da cabea de adultos de
Drosophila melanogaster, em vista anterior,
formaria uma antena. (Fig. 45)
mostrando o efeito da mutao hometica
Antennapedia no fentipo. A. Imago com
fentipo selvagem: antenas normais. B. Imago
portadora da mutao: a parte distal das
antenas foi substituda por apndices em forma
de pernas (extrado de Gardner et al., 1991).

EXERCCIOS
PARTE A: REVENDO CONCEITOS BSICOS
Complete as frases de 1 a 8 com as alternativas
abaixo:
(a) inverso cromossmica
(b) inverso pericntrica
(c) inverso paracntrica
(d) fenocpia
(e) mutao cromossmica
(f) letalidade balanceada
(g) agente mutagnico
(h) gene letal
(i) mutao reversa
(j) mutao somtica
(k) mutao germinal
(l) mutao hometica
1. D-se o nome de ( ) a qualquer alterao
permanente na constituio cromossmica de um
organismo.

5. ( ) aquele cujo efeito fenotpico suficientemente drstico para matar seu portador.
6. Quando o centrmero est incluido em um
segmento cromossmico invertido, fala-se em ( ).
7. Quando o centrmero est fora da regio
invertida, fala-se em ( ).
8. Uma alterao hereditria em um alelo
mutante que restabelece a condio selvagem
denominada ( ).
9. Um fentipo (no-hereditrio) induzido pelo
ambiente, que simula um fentipo sabidamente
produzido por uma mutao herdvel denominado ( ).
10. ( ) uma mutao que ocorre em clulas
que no iro originar gametas, ou esporos.
11. ( ) uma mutao que ocorre em clulas
que iro originar gametas, ou esporos.

2. Uma substncia qumica ou um fator fsico

(por exemplo: raios X, luz ultra violeta etc.) capaz
de alterar o material hereditrio chamado ( ).

12. Uma ( ) aquela que modifica o destino

de um disco imaginal.

3. Muller, em 1917, props a hiptese de ( )

para explicar o fato de a linhagem Beaded ser
estvel apesar de ser portadora de uma mutao
letal; segundo essa hiptese, as prognies
homozigticas morriam restando apenas os indivduos heterozigticos.

PARTE B: L IGANDO CONCEITOS E FATOS

4. Um rearranjo intracromossmico que resulta

na rotao de 180o de um segmento cromossmico chamado ( ).

Utilize as alternativas abaixo para responder as

questes 13 e 14.
(a). Bateson
(c). Muller
(b). Morgan
(d). Sturtevant
13. A demonstrao de que raios X causam
mutao foi feita por ( ).

131

14. A hiptese de que os fatores redutores de

permutao eram inverses cromossmicas foi
feita por ( ).
15. Inverses cromossmicas impedem recombinao porque
a. um cromossomo portador de inverso no
consegue se emparelhar com seu homlogo
normal.
b. indivduos homozigticos para cromossomos
portadores de inverso so inviveis.
c. permutao entre cromossomos portadores
de inverso geram genes letais.
d. uma permutao, dentro da regio invertida,
entre um cromossomo portador de inverso e
seu homlogo normal origina cromossomos
recombinantes inviveis.
16. Com relao ao cromossomo ClB, construdo por Muller, pode-se dizer que
a. machos portadores desse cromossomo so
viveis.
b. fmeas diplides portadoras de um par
desses cromossomos so inviveis.
c. trata-se de um tipo especial de autossomo.
d. trata-se de um cromossomo Y especial.
17. O mtodo ClB de Muller permite estimar
a freqncia com que ocorre (m)
a. uma mutao recessiva no cromossomo X.
b. mutaes recessivas no cromossomo X .
c. uma mutao letal recessiva no cromossomo X.
d. mutaes letais recessivas no cromossomo X.
Utilize as alternativas abaixo para responder as
questes 18 e 19.
a. cada um dos cromossomos recombinantes
apresenta dois centrmeros.
b. nenhum dos cromossomos recombinantes
apresenta centrmero.
c. um dos cromossomos recombinantes apresenta dois centrmeros e o outro, nenhum.
d. os cromossomos recombinantes, apesar de
apresentarem centrmeros normais, tm
deficincia ou duplicao de genes.
18. A ocorrncia de uma permuta na regio
invertida em indivduos heterozigticos para
uma inverso cromossmica paracentromrica
no produz recombinantes porque ( ).

PARTE C: QUESTES PARA PENSAR E DISCUTIR

20. Por que a descoberta de mutaes reversas
derrubou a hiptese da presena ou ausncia?
21. Por que Morgan concluiu que o suposto fator
letal, descrito em seu trabalho de 1912, estaria
prximo ao loco gnico white?
22. Por que era impossvel obter uma linhagem
Beaded pura?
23. Como Muller explicou o aparecimento de uma
linhagem Beaded que apenas esporadicamente
produzia descendentes selvagens?
24. Que tipo de estratgia usada para se
manter uma linhagem ClB em laboratrio?
25. Qual o procedimento usado para se medir a
taxa de mutao letal por meio do sistema ClB?
26. Drosfilas aparentemente normais foram
cruzadas entre si, na descendncia de um dos
casais obteve-se: 202 fmeas e 98 machos.
Proponha uma explicao gentica para este
resultado. Proponha um teste para a sua hiptese.
27. Em uma grande maternidade, de 100 mil
crianas nascidas, 10 eram portadoras de
acondroplasia; uma anomalia autossmica
dominante, com penetrncia completa. Destas 10
crianas somente 2 tinham um dos pais afetados.
Com base nessas informaes estime a freqncia
de mutao para acondroplasia nos gametas.
28. Suponha uma petnia heterozigtica, com
a seguinte distribuio de genes em um par de
cromossomos homlogos ABCDEFGHI /
abcdhgfei ( representa o centrmero).
a) Esquematize o emparelhamento desse par
de cromossomos na prfase I da meiose. Identifique as partes do seu diagrama.
b) Identifique as cromtides de um cromossomo
como 1 e 2 e as cromtides de seu homlogo
como 3 e 4. Considere a ocorrncia de uma
permutao entre os locos G e H das cromtides 2 e 3 e faa o esquema dos resultados
destas permutaes na anfase I. Quais os
gentipos dos gametas, resultantes desta
meiose, que dariam origem a descendentes
viveis?

19. A ocorrncia de uma permuta na regio

invertida em indivduos heterozigticos para
uma inverso cromossmica pericentromrica
no produz recombinantes porque ( )

132