UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

CARRERA DE INGENIERIA BIOQUIMICA
MODULO OPTATIVO II
ELUCIDACIN DE MOLCULAS ORGNICAS
ESTUDIANTE: Jonathan Gavilanes Lpez.
Cinthia Romero Flores.
DOCENTE: Dr. Nahir Dugarte.

SEMESTRE: 6 Bioqumica.
PRACTICA: N 7
FECHA: 5 de febrero del 2015.

TEMA: CROMATOGRAFA EN COLUMNA: MEZCLA DE

-CAROTENO Y

LICOPENO
I.

INTRODUCCIN

La cromatografa en columna es una tcnica de purificacin, puesto que permite aislar los
compuestos deseados de una mezcla. Inicialmente, la fase estacionaria se deposita en el
interior de una columna de vidrio que termina con una placa porosa que impide su paso
asegurndose con el estrechamiento de una llave. La mezcla se deposita sobre la parte
superior de la fase estacionaria mientras que la fase mvil atraviesa el sistema.
sta se desplaza por capilaridad, gravedad o presin. Los compuestos son separados y
van saliendo uno por uno de la columna, as estos se recogen en fracciones, los ms
polares quedan ms retenidos y para que estos salgan es necesario aumentar la
polaridad del disolvente.
(Angurell, 2011)
La polaridad del eluyente afecta las velocidades relativas con las que los diferentes
componentes de la mezcla se mueven en la columna. Los disolventes polares compiten
eficientemente con las molculas polares de una mezcla por los lugares polares del
adsorbente. Por lo tanto, un disolvente polar desplazar las molculas, incluyendo las
ms polares, rpidamente a travs de la columna. Si el disolvente es muy polar la elucin
ser muy rpida y generalmente habr poca separacin de los componentes de la
mezcla.
Si por el contrario el disolvente es muy apolar, no eluirn los
compuestos de la columna.
Entonces, la eleccin del eluyente es crucial para el
xito de la cromatografa en columna.
A menudo se utiliza un gradiente creciente
de polaridad para la elucin.
(Velasco, 2011)
II.

OBJETIVOS

GENERAL
Separar una mezcla de

-caroteno y licopeno mediante la tcnica de

cromatografa de columna.
ESPECIFICOS

Analizar la influencia de los eluyentes respecto a la tcnica cromatogrfica de

columna.

Establecer la relacin existente entre cromatografa de columna y cromatografa

de capa fina.

III.

PROCEDIMIENTO
Diagrama 1.
Elaborado por: Gavilanes, J.; Romero C. (2015)

IV.

CUADRO DE SEGURIDAD DE REACTIVOS

Tabla 1. Propiedades Fsicas de los Reactivos Intervinientes en la Prctica

REACTIVOS

PROPIEDADES FSICAS-QUMICAS

INCLUYEN FRMULA Y
ESTRUCTURA QUMICA

Elaborado por: Gavilanes, J.; Romero C. (2015)

Fuente: Martnez, A. (2006)

Cuadro 1. Medidas de seguridad de los Reactivos Intervinientes en la Prctica

REACTIVOS

TER DE
PETRLEO

TOXICIDAD

MEDIDAS DE
SEGURIDAD
Este reactivo se debe
almacenar en recipientes
bien
cerrados
(No
almacenar
en
recipientes de plstico),
adems en un lugar con
suficiente aireacin y
alejado de fuentes de
ignicin y calor.
El reactivo requiere de
temperatura ambiente.

Aguda
Evitar la formacin de
cargas electrostticas.
Para el uso de este
producto
qumico
es
necesario emplearlo en
un lugar bien ventilado,
utilizando bata, lentes de
seguridad
y,
si
es
necesario, guantes de
hule natural para evitar
un contacto prolongado
de este producto con la
piel.
Utilice el equipo de
seguridad mnimo como
bata
y
lentes
de

PRIMEROS AUXILIOS

Indicaciones generales: En caso de

prdida del conocimiento nunca dar a
beber ni provocar el vmito.
Inhalacin: Trasladar a la persona al
aire libre. En caso de asfixia proceder
a la respiracin artificial.
Contacto
con
la
piel:
Lavar
abundantemente con agua. Quitarse
las ropas contaminadas.
Ojos: Lavar con agua abundante
manteniendo los prpados abiertos.
Pedir atencin mdica.
Ingestin: Riesgo de aspiracin. Pedir
atencin mdica. Administrar aceite de
vaselina como laxante (3 ml/kg).
Administrar solucin de carbn activo
de uso mdico. No beber leche. Evitar
el lavado de estmago. No administrar
aceites digestivos.

Inhalacin: Si la inhalacin ha sido

ACETONA

Aguda/
Moderada

seguridad. Dependiendo
de la magnitud del
derrame,
se
utilizar
equipo de respiracin
autnoma,
botas
y
guantes de hule natural o
neopreno,
no
utilizar
PVC.
Evite la presencia de
chispas,
fuegos
y
cualquier
fuente
de
ignicin
cerca
del
derrame y evacuar el
rea, si es necesario.
Evite que el lquido
derramado
entre
en
contacto con suministros
de agua y drenajes.
Use agua en forma de
roco para dispersar y
diluir los vapores.
Este
lquido
debe
almacenarse para tratarlo
de manera adecuada
posteriormente.
En pequeas cantidades
pueden ser almacenados
en recipientes de vidrio.

ETANOL

Aguda/
Moderada

En
el
lugar
de
almacenamiento
debe
existir buena ventilacin
para
evitar
la
acumulacin
de
concentraciones txicas
de vapores de este
producto y los recipientes
deben estar protegidos
de la luz directa del sol y
alejados de fuentes de
ignicin.
Usar
guantes,
bata,
lentes
de
seguridad,
botas y cualquier otro
equipo
de
seguridad

prolongada, transportar al intoxicado a

una zona bien ventilada. Si no respira,
dar respiracin artificial. Mantenerlo
caliente y en reposo. Si es necesario,
administrar oxgeno.
Ojos: Lvelos con agua o disolucin
salina, asegurndose de que los ojos
se encuentren abiertos durante el
lavado.
Piel: Lavar el rea contaminada con
agua y jabn. En caso necesario,
elimine la ropa contaminada. Ingestin:
Lavar la boca con agua. Si se ingiri,
diluir tomando agua. No inducir el
vmito.

Inhalacin: Traslade a la vctima a un

lugar ventilado. Aplicar respiracin
artificial si sta es dificultosa, irregular
o no hay. Proporcionar oxgeno.
Ojos: Lavar inmediatamente con agua
o disolucin salina de manera
abundante.
Piel: Eliminar la ropa contaminada y
lavar la piel con agua y jabn.
Ingestin: No inducir el vmito.
EN TODOS LOS CASOS DE
EXPOSICION, EL PACIENTE DEBE
RECIBIR AYUDA MDICA TAN
PRONTO COMO SEA POSIBLE.

necesario.
Use
equipo
de
respiracin autnoma y
ropa
de
proteccin
adecuada,
para
la
manipulacin del reactivo.

CLOROFORM
O

Carcingeno

Recordar, que a pesar de

que el compuesto es no
inflamable, los productos
de descomposicin por
calentamiento (entre ellos
fosgeno)
son
muy
peligrosos.
Los
recipientes
que
contienen este producto
deben ser almacenados
en lugares alejados de la
luz directa del sol, ya que
se
descompone
lentamente a productos
como el fosgeno.

SILICA

MODERADA

Guardar los contenedores

en lugares secos.
Guardar
lejos
de
materiales incompatibles.
Mantener contenedores
bien cerrados, mientras
no
estn
en
uso.
Inspeccionar
todo
contenedor
entrante
antes de almacenar y
etiquetar
y
asegurar
apropiadamente
para
evitar daos.
Evitar respirar polvo o
partculas generadas por
este producto.
Usar en lugares bien
ventilados.
Remover o cambiar de
ropa despus de haber
tenido contacto con el
producto.
El personal que manipule

Inhalacin: Los signos de intoxicacin

aguda con vapores de cloroformo, en
general, son: depresin respiratoria,
neumonitis qumica, edema pulmonar,
acidosis metablica, depresin del
sistema nervioso central, dolor de
cabeza, fatiga, adormecimiento y
prdida del equilibrio.
Piel: Quitar la ropa contaminada, y
lavar segn sea el caso, ojos y/o piel
con agua corriente en gran cantidad.
Ojos: Los ojos pueden lavarse tambin
con
disolucin
salina
neutra
asegurndose de abrir bien los
prpados.

Inhalacin: Mover al paciente a zona

con aire fresco. Si los sntomas
persisten, consultar al mdico.
Contacto con la piel: En caso de
contacto lavar con abundante agua y
jabn.
Contacto con los ojos: Enjuagar con
abundante
agua.
Mantener
los
prpados separados del globo ocular
para asegurar el lavado minucioso,
consultar al mdico si la irritacin
persiste.
Ingestin: No causa efectos adversos
a la salud sin embargo debe
manipularse de manera apropiada
usando los implementos necesarios,
en caso de ingestin enjuagar la boca.
No inducir el vmito.

este producto debe tener

un entrenamiento sobre
seguridades del manejo.

ACETATO DE
ETILO

Aguda/Moderad
a

Para el uso de este

producto
qumico
es
necesario emplearlo en
un lugar bien ventilado,
utilizando bata, lentes de
seguridad
y,
si
es
necesario, guantes de
hule natural para evitar
un contacto prolongado
de este producto con la
piel.
Al trasvasar pequeas
cantidades con pipeta,
utilizar
propipetas,
NUNCA ASPIRAR CON
LA BOCA.

Inhalacin: Transportar a la vctima a

un lugar bien ventilado, proporcionar
respiracin artificial y oxgeno si no
respira, mantenindola en reposo y
abrigada.

Mantener
estrictas
normas de higiene, no
fumar, ni comer en el sitio
de trabajo.

Ojos: Lavarlos con grandes cantidades

de
agua
o
disolucin
salina,
asegurndose de abrir los prpados.
Levantar y separar los prpados para
asegurar la remocin del qumico.
Si la irritacin persiste repetir el
lavado.

Manipular
lejos
fuentes de calor.

de

Ingestin: Lavar la boca con agua y

dar a beber agua para diluir, no inducir
el vmito. Nunca suministre nada a
personas inconscientes.
Piel: Eliminar la ropa contaminada
inmediatamente, si es necesario, y
lavar la piel con agua y jabn. Si la
irritacin persiste repetir el lavado y
buscar atencin mdica.

Elaborado por: Gavilanes, J.; Romero C. (2015)

Fuente: IPCS- INSHT. (2010)

V.

BIBLIOGRAFIA

Angurell, A. 2011. Cromatografa de Columna. Segunda Edicin. Editorial

Revert. Espaa. Pp: 104.

Velasco, A. 2011. Tcnicas Cromatogrficas. Cuarta Edicin. Editorial

Mc- Grill. Espaa. Pp: 67-71.

Caubet, A. 2011. Operaciones Bsicas en el Laboratorio: Cromatografa de

columna y capa fina. Disponible en: http://www.ub.edu/oblq/oblq
%20castellano/cromatografia_tipus.html

INSHT. 2010. Fichas Internacionales de Seguridad Qumica. Disponible

en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/F
ISQ/Ficheros/0a100/nspn0078.pdf

IPCS. 2010. Programa Internacional de Seguridad de Sustancias

Qumicas.
Disponible
en:
http://training.itcilo.it/actrav_cdrom2/es/osh/ic/110543.htm