UNIVERSIDADE FEDERAL DO VALE DO SO FRANCISCO

GRADUAO EM CINCIAS FARMACUTICAS

Doseamento de Triglicerdeos e Colesterol

Disciplina de Bioqumica Clnica

Docente Responsvel: Ana Ccia
Discentes: Carlos Leite, Denise Amorim, Mara Ribeiro, Phelipe Rodrigues e
Rosa Maria

Petrolina-PE
09/06/2014

1. INTRODUO
Os lipdios so substncias orgnicas que tem a caractersticas de
serem insolveis em gua mas, solveis em solventes apolares. So
encontrados em todos os tecidos do corpo e possuem importncia em nos mais
diversos sistemas: atuam como hormnios (ou precursores hormonais), agem
como combustvel metablico, componentes estruturais e funcionais das
membranas biolgicas, isolante trmico. Os lipdios principais no plasma
humano so o colesterol, steres de colesterol, triglicerdeos, fosfolipdios e os
cidos graxos no esterificados (MOTTA, 2013).
A lipoprotena uma juno de protenas e lipdios. Os lipdios ou seus
derivados podem ser covalentemente ou no covalentemente ligado s
protenas. Muitas enzimas, transportadores, protenas estruturais, antgenos,
adesinas e toxinas so lipoprotena. Duas lipoprotenas so muito faladas hoje
em dia, so elas: a lipoprotena alta densidade (HDL) e a lipoprotena baixa
densidade (LDL) que permitem que as gorduras possam ser carregadas pela
corrente sangunea (NEWS MEDICAL, 2013).
Os triglicerdeos so a gordura fundamental obtida atravs da
alimentao, entretanto tambm podem ser sintetizados pelo organismo. Os
Altos nveis de triglicerdeos (acima de 200) associam-se a um maior risco de
doena coronariana. A ingesto de gordura, doces e lcool pode elevar os
triglicerdeos, razo pela qual deve-se medir sua concentrao no sangue aps
12 horas de jejum. Triglicerdeos muito altos, acima de 400-500, podem causar
inflamao do pncreas (pancreatite) e devem, pois, ser tratados o quanto
antes, principalmente atravs de uma dieta pobre em gorduras (HOSPITAL
DAS CLNICAS, 2013).
A avaliao do glicerol liberado a partir dos triglicerdeos tem sido a base
da maioria das determinaes deste composto. O colesterol sintetizado a
partir de Acetil-CoA e o precursor das hormnios esteroides e dos sais
biliares. Em excesso, pode formar placas aterosclerticas que podem provocar

doenas cardiovasculares isqumicas como acidentes vasculares cerebrais e

enfartes de miocrdio, entre outros. (MOTTA, 2013).
O colesterol plasmtico afetado tanto por fatores interindividuais como
intraindividuais. As medidas da colesterolemia so influenciadas por dieta,
idade, sexo, raa e pratica de exerccios fsicos. No estudo das desordens
lipoproticas so empregados os seguintes testes bioqumicos de rotina como
de Colesterol total, Triglicerdeos, Colesterol-HDL, Colesterol-LDL (por clculo),
relao

colesterol

total/colesterol-HDL

colesterol-LDL/colesterol

HDL,

aparncia do soro aps refrigerao de 18 H a 4 C, Lipoprotena (a) [Lp(a)] e

Apoprotena B (Apo B) (MOTTA, 2013).

intraindividuais (sexo, idade e raa) como interindividuais

2. OBJETIVOS
OBJETIVO GERAL

Entender a tcnica de determinao quantitativa de colesterol total e

triglicrides.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Utilizar o teste IN VITRO para a execuo das anlises;

Realizar preparao das amostras;
Utilizar o espectrofotmetro para determinar as quantidades de

colesterol total e triglicrides nas amostras;

Calcular o valor da quantidade de colesterol total e triglicrides
usando os valores obtidos pela absorbncia das amostras.

3. MATERIAS E MTODOS

3.1 MATERIAIS UTILIZADOS:

Amostras de sangue coletadas;

Tubo de ensaio de vidro;
Espectrofotmetro UV-VIS;
Cubetas de Plsticos;
Pipetas micromtricas;
Kit para teste de Colesterol Liquicolor
Kit para teste de triglicerdeos Liquicolor

3.2 MTODO
Para a dosagem de colesterol, o mtodo utilizado foi o CHOLESTEROL
LIQUICOLOR que consiste de um teste Enzimtico-Colorimtrico com Fator
Clareante de Lpides(LCF). Esse teste tem como finalidades os reagentes para
a determinao quantitativa do colesterol presente no soro e plasma humano.
Seu fundamento a determinao do colesterol aps a hidrlise enzimtica e
oxidao. H a formao de um indicador quinoneimina formado a partir do
perxido de hidrognio e 4-aminofenazona na presena de fenol e peroxidase.
Para

dosagem

de

triglicerdeos

foi

utilizado

mtodo

TRIGLYCERIDES LIQUICOLOR que tambm um mtodo enzimtico

colorimtrico com Fator Clareante de Lpides (LCF). Possui como finalidade a
determinao dos triglicerdeos no soro e plasma e seu princpio consiste da
determinao dos triglicerdeos aps hidrlise enzimtica com lpases. O
indicador a quinoneimina formada a partir do perxido de hidrognio, 4aminoantipirina e 4-clorofenol sob a influncia cataltica da peroxidase.

3.3 DESCRIES DO PROCEDIMENTO

Para realizao da dosagem macro da colesterol foram separados
tubos identificados como padro, branco e amostras 1 a 3. No interior de cada
um, adicionou-se 1,0 mL do reagente enzimtico, exceto no padro que a
quantidade adicionada foi de 2,0 mL. No tubo escolhido para o padro,
adicionou-se tambm 20 mL da soluo de colesterol 200 mg/dL. Nos tubos
enumerados de 1 a 3, alm do reagente havia 10 L da amostra biolgica
(sangue) onde o colesterol seria doseado. Posteriormente os tubos foram

homogeneizados e incubados por um perodo de 10 minutos a uma

temperatura em torno dos 25 C. Passado esse tempo, os mesmos submetidos
anlise por meio da leitura em espectrofotmetro com comprimento de onda
de 500 nm obtendo os resultados que foram posteriormente interpretados.
O mesmo ocorreu para o doseamento de triglicerdeos, alterando
somente os reagentes e padro que tambm possua concentrao de 200
mg/dL.

4. RESULTADOS E DISCUSSO

COLESTEROL

TRIGLICERDEOS

Branco

Padro

234 mg/dl

200 mg/dl

Amostra 1

200 mg/dl

299 mg/dl

Amostra 2

179 mg/dl

213 mg/dl

Amostra 3

171 mg/dl

304 mg/dl

Segundo os critrios adotados pela Associao Brasileira de Cardiologia,

os valores de referncia para classificao dos nveis de triglicerdeos em
pessoas maiores de 20 anos de idade so; (< 150 timo); (150-200 Limtrofe);
(201-499 Alto); ( 500 Muito alto). Portanto ao se proceder com uma anlise
comparativa aos resultados obtidos em aula prtica infere-se que: todas as
amostras encontravam-se com taxas de TG alteradas, inseridas no intervalo de
dosagem alta, visto que as taxas obtidas, nas 3 amostras, foram
respectivamente: 299mg/dl, 213mg/dl e 304 mg/dl. Pelos resultados individuais,
somente dos TG, os indivduos estariam apresentando Hipertrigliceridemia
isolada situao quando h elevao isolada dos triglicrides (TG), em geral
representada por aumento das VLDL, ou dos quilomcrons, ou de ambos. No
entanto, necessrio levar em considerao as condies nas quais as
dosagens foram feitas.
O horrio de coleta das amostras constitui-se como fator preponderante,
uma vez que a padronizao para a realizao do perfil lipdico recomenda
jejum de 12h a 14h prvio coleta da amostra. Fato que se ope a situao
das amostras analisadas em questo, pois o horrio da coleta foi em perodo
ps-almoo. Vrias so as fontes de variao pr-analtica do perfil lipdico,
portanto, essa anlise no se constitui como suficiente e satisfatria para
diagnstico final de perfil lipdico alterado. Sendo ento, necessria uma que
aborde as demais variveis, alm do jejum.
O colesterol desempenha funo essencial na vida humana, pois
precursor dos hormnios esteroides, dos cidos biliares e da vitamina D. Alm
disso, como constituinte das membranas celulares, o colesterol atua na fluidez
destas e na ativao de vrias enzimas. Uma parte do colesterol presente na

corrente sangunea humana sintetizada pelo fgado, a outra poro atravs

da dieta do indivduo. O colesterol total a soma do colesterol HLD, LDL, VLDL
e Triglicerdeos, os valores de referncia utilizados pela Sociedade Brasileira
de Cardiologista para a medio desse parmetro so: desejvel (<200 mg\dl);
limtrofe (200-239 mg\dl) e alto (240 mg\dl).
Antigamente os valores do colesterol total eram utilizados como o
principal critrio para definir se um paciente possui considervel chance de
apresentar doenas como aterosclerose, acidente vascular cerebral e infarto
agudo do miocrdio. Mas, atualmente os valores utilizados so as fraes do
colesterol total que so os HDL e LDL. Essas fraes so lipoprotenas que
tem como funo conduzir o colesterol na corrente sangunea, pois o mesmo
insolvel no sangue. O LDL definido como lipoprotena de baixa densidade,
tem a funo de conduzir o colesterol do fgado para as clulas, durante o
transporte poder ocorrer o depsito de gorduras nas artrias, formando as
placas de gorduras, que poder originar doenas cardiovasculares, os nveis
de LDL elevados devem ser evitados. J o HDL, definido como lipoprotena de
alta densidade, considerado o colesterol bom, tem a funo de conduzir o
colesterol das clulas para o fgado, alm disso, elimina o depsito de gordura
nas artrias, seus nveis elevados so desejveis.
Dessa forma, avaliando os valores do colesterol total apresentados pelas
as amostras em estudos, todas deram a baixo do definido como desejvel (200
mg/dl), mas como j foi citado, as amostram foram coletadas em um perodo
ps-prandial, o que inadequado para essa anlise, logo essa anlise no
pode ser usada para o diagnstico final.

5. CONCLUSO
Atravs da atividade prtica proposta, foi possvel verificar a importncia
do conhecimento dos procedimentos padres laboratoriais na determinao

quantitativa de colesterol e triglicrides, para que se possam desenvolver

trabalhos com alto grau de confiabilidade, j que, existem procedimentos e
fatores que podem interferir de forma positiva ou no na qualidade dos
resultados.

REFERNCIAS

SANTOS, R.D et al.,2001. III Diretrizes Brasileiras Sobre Dislipidemias e

Diretriz de Preveno da Aterosclerose do Departamento de Aterosclerose da
Sociedade Brasileira de Cardiologia. Arq Bras Cardiol volume 77, (suplemento
III), 2001.

HOSPITAL DA CLNICAS, Faculdade de Medicina de Botucatu. Nutrio e

Patologia: Triglicerdeos. Governo do Estado de So Paulo. Disponvel em
<<http://www.hc.fmb.unesp.br/assistencia/servico-tecnico-de-nutricao-edietetica/nutricao-e-patologia/triglicerideos/>>. Acesso em 07 de Junho de
2014.

MOTTA ,VALTER T. Bioqumica Clnica: Princpios e Interpretaes.

Disponvel

em

<<http://www.labclinisul.com.br/artigos/Bioq.Clinica%20-

%20Lipidios,%20Lipoproteinas.pdf>>. Acesso em 08 de Junho de 2014.

NEWS MEDICAL.

Quais

so as

Lipoprotenas.

Disponvel em <<

http://www.news-medical.net/health/What-are-Lipoproteins-(Portuguese).aspx
>>. Acesso em 08 de junho de 2014.