1

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA BIOLOGIA MOLECULAR y FARMACOLOGA
PRACTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
2006

Conceptos bsicos, trminos, agua y pH

La mayora de las reacciones estudiadas en el laboratorio de bioqumica se realizan en soluciones.
Por ello, es importante conocer las diferentes formas de expresar la concentracin de dichas
soluciones.
A. Concentraciones basadas en el volumen
Molaridad (M) = nmero de moles de soluto por litro de solucin
M=

Peso en gramos

Peso molecular

Actividad (a) = molaridad aparente o efectiva del soluto

a = [M]
( = coeficiente de actividad -fraccin de la concentracin real que es activa*)
Normalidad (N) = nmero de equivalentes de soluto por litro de solucin
Peso en gramos
Equivalentes =
Peso equivalente
Peso molecular
Peso equivalente =
n
(n = nmero de H+ o OH- reemplazables por molcula, o nmero de electrones perdidos o ganados
por molcula)
N=nM
Relacin peso/volumen (%) = peso en gramos de un soluto por 100 ml de solucin
Miligramo % = peso en mg de un soluto por 100 ml de una solucin
Osmolaridad = molaridad de las partculas presentes en una solucin
*)Para la mayora de clculos en la prctica bioqumica se asume que = 1, es decir que la actividad es
igual a la concentracin molar. Asumir esto es razonablemente vlido para soluciones acuosas diluidas.
*(

Fuerza Inica = medida de la concentracin de cargas en una solucin

------ = 1/2 MiZi2

2
Mi = molaridad del in
Zi = carga neta del in
B. Concentraciones basadas en el peso.
Relacin peso/peso (%) = peso en gramos de un soluto por 100 gr de solucin
peso de una solucin =

volml

Densidad

Fraccin de la sustancia pura en el peso total

peso
densidad =
volumen

Gravedad especfica = densidad relativa a la del agua (gr/ml)

Molalidad (m) = nmero de moles de soluto por 1000 gr de solvente

Fraccin Molar = fraccin del nmero total de moles en la solucin que corresponde a un
compuesto determinado
C. Concentraciones basadas en el grado de saturacin.
Porcentaje de saturacin =

Concentracin de una sal en solucin como porcentaje de la

mxima concentracin posible a una determinada temperatura

Para hacer este clculo se debe tener en cuenta el volumen especfico (v):
v = volumen ocupado por 1 gr de sal (ml/gr)
= 1/densidad

PROBLEMAS
1)
a) Cuntos gramos de NaOH slido se necesitan para preparar 500 ml de una solucin 0.04
M?
b) Expresar la concentracin de esta solucin en trminos de N, gr/lt, % peso/volumen y
osmolaridad.
2) Cuntos ml de H2SO4 5 M se requieren para preparar 1.5 lt de una solucin 0.002 M?
3) Una solucin contiene 15 gr de CaCl2 en un volumen total de 190ml.
a) Expresar la concentracin de esta solucin en trminos de gr/lt, % peso/volumen, mg %,
molaridad y osmolaridad.
b) Cul es la fuerza inica de esta solucin?
4) Calcular la fuerza inica de una solucin de Fe2(SO4)3 0.02 M.
5) Describir la preparacin de 2 litros de HCl 0.4 M a partir de una solucin stock de HCl (28%
HCl peso/peso, gravedad especfica = 1.15).
a) Calcular la molalidad del de la solucin stock de HCl.
b) Calcular la fraccin molar de HCl en la solucin stock.
6) Cul es la molaridad del etanol puro? (cuantas moles estn presentes en un litro de etanol
puro?). La densidad del etanol es 0.789 gr/ml.
7) El volumen especfico del sulfato de amonio slido es 0.565 ml/gr. La solubilidad el sulfato de
amonio a 0C es 706 gr/1000 gr de agua. Calcular:
a) la concentracin de sulfato de amonio en una solucin saturada a 0C.
b) la cantidad de sulfato de amonio slido que debe aadirse a 0C a 500 ml de una solucin
al 40% de saturacin para llevarla a 60% de saturacin.
8) Cuntos ml de una solucin saturada de sulfato de amonio deben aadirse a 40 ml de una
solucin al 20% de saturacin para preparar una solucin al 70% de saturacin?. Asumir que
los volmenes son aditivos.

ACIDOS Y BASES
La comprensin de los conceptos de cido y base es esencial para el entendimiento de las
propiedades biolgicas y el comportamiento qumico de las molculas orgnicas.
Muchos metabolitos de bajo peso molecular y macromolculas biolgicas son cidos y bases, es
decir, son capaces de ionizarse. Las cargas elctricas de estas molculas son factores importantes
para la catlisis enzimtica, para la estabilidad y conformaciones de las protenas y los cidos
nucleicos, para la interaccin entre molculas y para las tcnicas analticas y de purificacin
utilizadas en el laboratorio.
En general, se define un cido como un donador de protones y una base como un aceptor de
protones. Cuando un cido pierde un protn, se produce una base. Otra base recibe el protn,
convirtindose en un cido.
par cido-base 2

HA
+
B
< A+
HB
cido 1
base2
>base 1
cido 2

par cido-base 1
IONIZACION DE ACIDOS Y BASES FUERTES
Un cido "fuerte" es una sustancia que se ioniza prcticamente en un 100% cuando est en
solucin acuosa.
Por ejemplo, el HCl en solucin es ionizado casi en su totalidad a H3O+ y Cl-:
HCl + H2O

>

H3O+ +

Cl-

El H3O+ (in hidronio, o cido conjugado del agua) es la forma real del in hidrgeno (protn) en
solucin.
Sin embargo, la ionizacin del HCl puede representarse como una simple disociacin:
HCl

>

H+ +

Cl-

As, en trminos prcticos, H3O+ y H+ significan lo mismo.

Una base "fuerte" es una sustancia que al estar en solucin se ioniza casi totalmente produciendo
iones OH-. El NaOH y el KOH son ejemplos de bases fuertes.
IONIZACION DEL AGUA
Debido a que la masa del tomo de hidrgeno es muy pequea y a que su nico electrn est
fuertemente atrado por el tomo de oxgeno, existe poca tendencia a que el in hidrgeno de una
molcula de agua se disocie del tomo de oxgeno y salte al oxgeno de otra molcula de agua
cercana. A 25C, slo una de cada 10 millones de molculas presentes en un litro de agua pura se

encuentra en forma ionizada. Sin embargo, aunque la concentracin de estos iones es muy baja, los
efectos biolgicos que produce dicha ionizacin son muy importantes.
HOH + HOH > H3O+ + OH-, o
<
en forma simplificada,
> H+ + OH- (1)
<

H2O

La constante de equilibrio para la reaccin (1) ser:

[H+] [OH-]
Keq =
[H2O]

(2)

Como la concentracin de H2O es relativamente alta (55.6 M), se mantiene casi constante en
relacin a la concentracin de H+ y OH- (1 x 10-7). De esta manera, podemos sustituir [H2O] por
55.6 en la expresin de equilibrio:
55.6 Keq = [H+][OH-]

(3)

El valor de Keq se estima a partir de mediciones de conductividad elctrica del agua (slo los iones
que surgen de la ionizacin del agua pueden conducir corriente elctrica), encontrndose que a
25C es de 1,8 x 10-16. Sustituyendo este valor en la ecuacin (3) tenemos:
(55.5)(1.8 x 10-16) = [H+][OH-]
1 x 10-14 = [H+][OH-]
Kw = 55.5 Keq = 1 x 10-14 = [H+][OH-]
Kw es la constante de ionizacin del agua (tambin conocida como producto inico del agua).
pH Y pOH
pH es la manera abreviada de designar la actividad de iones hidrgeno (protones) en una solucin.
Por definicin, pH es el logaritmo negativo de la actividad de iones hidrgeno. De igual modo,
pOH es el logaritmo negativo de la concentracin de iones hidroxilo.
pH = -log [H+]

pOH = -log [OH-]

En todas las soluciones acuosas debe satisfacerse el equilibrio para la ionizacin del agua, esto es
que: [H+][OH-]= 10-14. As, conociendo la [H+] nosotros podemos calcular fcilmente la [OH-].
[H+][OH-] = Kw,
sacando logaritmos,

pH + pOH = 14
A mayor valor de pH, menor ser la concentracin de iones H + y viceversa. Como la escala es
logartmica, si dos soluciones que difieren en pH por 1 unidad, significar que una de ellas tiene
una concentracin 10 veces mayor de iones H+ que la otra.
PROBLEMAS

1) Calcular la concentracin en moles de H+, OH- y el nmero de iones H+ y OH- por litro en
soluciones con los siguientes valores de pH:
a) 2.73
b) 5.29
c) 6.78
d) 8.65
e) 9.52
f) 11.41
g) 0
2) El H2SO4 concentrado es 96% peso/peso y tiene una densidad de 1.84 g/ml. Calcular el
volumen de cido concentrado que se requiere para preparar:
a) 750 ml de H2SO4 1 N
b) 600 ml de H2SO4 1 M
c) 1000 gr de una solucin diluda de H2SO4 que contenga 12% de H2SO4 peso/peso.
d) una solucin diluda de H2SO4 de pH 3.8
3) Cul es el pH de una solucin de HCl 10-8 M?