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Research Inventy: International Journal Of Engineering And Science

Vol.5, Issue 2 (February 2015), PP 16-24


Issn (e): 2278-4721, Issn (p):2319-6483, www.researchinventy.com

Contribution La Caractrisation Microbiologique Et


Enzymatique D'un Site Extrme : Les Tanneries Traditionnelles
De Fs
EL HARCHLI E.H*1, IRAQUI HOUSSAINI M.1, IBNSOUDA KORAICHI S.1.
1

Laboratoire de Biotechnologie Microbienne. Facult des Sciences et Techniques, Fs BP : 2202Universit Sidi Mohamed Ben Abdallah route dImouzzer Fs

ABSTRACT: Microorganisms in general are of abounding sources of unique enzymes that can be particularly
used in biotechnology. To face up the growing request of the industrialists notably in the field of biocatalysises,
numerous efforts are provided for the research of enzymes of interest. This concerns principally enzymes
coming from extremophiles microorganisms. These enzymes will be undoubtedly of a big interest to intervene in
close future in industrial techniques. It is as part of a possible promotion of microbic means by use of their
enzymes that we accomplished a first job which is interested in an extreme middle ' the traditional tanneries of
Fez. In a first shutter, we performed a physicochemical characterization of different stages of tanning; then we
undertook the isolation of microorganisms by a bet in culture on appropriate medium and at the end, we could
revealed certain of enzymatic potentialities (cellulase, pectinase, amylase, tannase and lipase) that the cleaned
microbic isolats culminates.
Key words : mediums extremes, tanneries, microorganisms, enzymatiques activities

RESUM: Les micro-organismes en gnral sont dabondantes sources denzymes uniques pouvant tre
utilises particulirement en biotechnologie. Pour faire face la demande croissante des industriels notamment
dans le domaine des biocatalyses, de nombreux efforts sont fournis pour la recherche denzymes dintrt. Ceci
concerne essentiellement les enzymes provenant de microorganismes extrmophiles. Ces enzymes seront sans
nul doute dun grand intrt pour intervenir dans un futur proche dans les procds industriels. Cest dans le
cadre dune ventuelle valorisation des ressources microbiennes par utilisation de leurs enzymes que nous
avons ralis un premier travail qui s'intresse un milieu extrme "les tanneries traditionnelles de Fs".
Dans un premier volet, nous avons effectu une caractrisation physico-chimique des diffrentes tapes de
tannage ; ensuite on a procd lisolement de micro-organismes par une mise en culture sur des milieux
adquats et en fin, nous avons pu dvoiler certaines potentialits enzymatiques (cellulase, pectinase, amylase,
tannase et lipase) que culminent les isolats microbiens purifis.
Mots cls: milieux extrmes, tanneries, micro-organismes, activits enzymatiques.

I. INTRODUCTION
La tannerie constitue la premire opration dans le traitement du cuir avant de le faonner pour produire les
diffrents articles. C'est une activit connue au Maroc depuis des sicles et elle s'est dveloppe au temps des
Almohades notamment Marrakech et Fs. Bien que des techniques plus rcentes aient fait leur apparition, la
tannerie traditionnelle existe encore dans la majorit des anciennes villes marocaines. C'est l'une des activits les
plus importantes dans l'artisanat traditionnel marocain. Fs est Parmi les principaux centres artisanaux. Une
tannerie englobe essentiellement une aire dcouverte creuse de bassins servant pour le brossage et le rinage
des peaux et aussi des fosses destines aux bains o ces peaux sjournent. La prparation des peaux comporte
une srie d'oprations compliques.
Le procd le plus ancien est le tannage vgtal des peaux qui est effectu principalement l'aide des extraits
de produits vgtaux naturels [1] comme lcorce de mimosa, lcorce de chne lige, lcorce de grenadine, le
takaout, le son, la farine, les fientes de pigeon et lhuile vierge. Ces produits ayant des proprits particulires
pour transformer une peau brute en cuir fini. Les peaux fraiches trs putrescibles sont sches ou conserves au
sel. Le reverdissage de ces peaux permet de dbarrasser les souillures superficielles et les sels. Les tapes
dpilage et de chaulage qui font suite prparent les peaux la phase importante de confitage.
Il sagit alors de faire macrer les peaux en vue de favoriser laction enzymatique ce qui leurs donne une
grande souplesse et un grain particulirement fin. Pour ce faire, les peaux sont trempes dans des bassins de
mlange deau de puits et de fiente de pigeons sauvages pendant quatre jours en hiver et un jour en t. Ensuite,

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les peaux sont laves, rinces et foules avec les pieds dans les bassins pour liminer la fiente des pigeons [2].
Le picklage des peaux par des solutions acides les prparent pour subir laction du tannage aux des produits
naturels contenant des tannins (takaout, mimousa,..). Les tapes de finissage du cuir constituent des teintures par
des solutions de colorants et des recouvrements par une couche mince de matire adhrente (rsines acryliques,
nitrocellulose). Les fientes de pigeons sauvages contiennent des micro-organismes qui seraient capable de
dgraissage et dassouplissement des peaux. Il sagit en fait dun potentiel enzymatique notamment dactivit
lipase de ces micro-organismes. Ltape de confitage utilisant les fientes des pigeons constitue alors un passage
cl pour le tannage artisanal des peaux.
Les tanneries gnrent de grandes quantits deaux uses qui sont caractrises par de hautes concentrations
en matire organique, en azote, en sulfate et autres ions. Ces polluants viennent des peaux brutes ou conserves
au sel et aussi des produits auxiliaires ajoutes pendant les actions de traitements des peaux. Les tanneries ont un
impact svre sur la qualit de l'eau, si leurs rejets sont envoys l'gout sans traitements. Ce constat laisse
penser que les conditions des traitements des peaux engendrent des caractristiques drastiques et les microorganismes qui s'y dveloppent seraient extrmophiles. Ces derniers, bien adapts ces conditions
physicochimiques particulaires sont capables den retirer lnergie ncessaire pour leur mtabolisme et leur
croissance. Au regard de cette biodiversit microbienne et des conditions spcifiques de leur habitat, ne faut-il
pas considrer ces cosystmes atypiques comme une source de nouveaux microorganismes dintrt
biotechnologiques? [3]. La caractrisation des microorganismes extrmophiles et leur machinerie cellulaire a
fait lobjet de travaux intensifs [4 ; 5 ; 6 ; 7 ; 8]. Cela dit, le projet men lors de ce travail est le premier de son
genre au Maroc : c'est une tude pilote qui s'intresse la caractrisation des sites de tanneries traditionnelles de
Fs en vue du criblage des micro-organismes qui y sont infods et de mettre en vidence leurs capacits
enzymatiques ce qui permettrait d'exploiter ce nouveau gisement de ressources naturelles en biomolcules,
notamment les enzymes pour des fins biotechnologique.

II- MATRIEL ET MTHODES


2.1 Station d'tude
La tannerie traditionnelle CHOUARA de Fs de quatre hectares rpartie en quatre zones est situe dans
L'ancienne mdina, plante au centre de centaines de maisons vtustes et dote de 1200 kassrias (bassins). Elle
est classe au patrimoine de lUnesco. Le tannage dsigne l'art des oprations traditionnelles entreprises pour la
transformation des peaux brutes en cuirs finis, ce qui permet de recrer et de restituer la peau sa souplesse
perdue. Il sagit gnralement dune srie de quatre tapes principales :

tape des bains de chaux ;


tape des fosses de fiente de pigeon ;
tape des fosses de son ;
tape de tannage.

Figure 1 : Tanneries traditionnelles "CHOUARA" de Fs mdina (MAROC).

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2.2. Caractrisation physico-chimique des tanneries traditionnelles de Fs
La caractrisation physico-chimique des eaux de tannage est primordiale et s'avre d'une grande importance
pour l'tude de la composition microbienne de ces milieux. En effet, ces paramtres jouent un rle fondamental
dans la croissance et la multiplication des diffrents micro-organismes qui y vivent.
2.2.1. Temprature et pH
La temprature et le pH jouent un rle important dans lenvironnement aquatique du fait quils rgissent
presque la totalit des ractions physiques, chimiques et biologiques. Pour notre tude, ces deux paramtres sont
mesurs sur place par un pH-mtre type "ORION" indiquant la fois le pH et la temprature de leau dans
chaque tape de tannerie.
2.2.2. Oxygne dissous
tant lun des plus importants indicateurs du degr de pollution des eaux qui mesure la concentration du
dioxygne dissous dans leau (en mg/l ou en pourcentage de saturation). Ce paramtre participe la majorit des
processus chimiques et biologiques en milieu aquatique. La teneur moyenne en oxygne dans les eaux de
surface non pollues est de 8 mg/l et ne dpasse gure 10 mg/l. Les concentrations d'oxygne dissous dans les
diffrents chantillons d'eau provenant des quatre tapes de tanneries sont dtermines in situ par oxymtrie.
Au laboratoire, le dosage de loxygne dissous a t refait par la mthode de Winckler [9].
2.2.3. Conductivit lectrique
Ce paramtre renseigne sur le degr de minralisation dune eau, il dsigne la capacit de leau conduire un
courant lectrique. Elle est lie la teneur en substances dissoutes, la charge ionique, la capacit dionisation, et
la temprature de leau. Les conductivits lectriques des chantillons deaux des tanneries sont mesures par
un conductimtre Type "WTW model LF318/set" (unit : le milli-Siemens par centimtre: mS/cm).
2.2.4. Demande biologique en oxygne (DBO5)
Cette demande Biologique en Oxygne sur 5 jours, reprsente la quantit d'oxygne ncessaire aux microorganismes pour dgrader l'ensemble de la matire organique d'un chantillon d'eau maintenu une temprature
de 20C, l'obscurit, pendant 5 jours. Dans notre tude, nous avons mesur la DBO5 des chantillons d'eau
pour une priode tale sur cinq jours. Le dispositif exprimental est de type: "Oxi-(IS6)". La DBO5 est alors
exprime en milligrammes doxygne par litre deau.
2.2.4. Demande chimique en oxygne (DCO)
Cette grandeur mesure toute la matire organique contenue dans un chantillon d'eau naturelle ou use, quelle
soit biodgradable ou non. Afin de dterminer la DCO, une oxydation plus pousse par voie chimique est
ncessaire. Cest le dichromate de potassium (K2Cr2O7), oxydant puissant qui est utilis en prsence dacide
sulfurique lors dun chauffage reflux pendant deux heures. Lintrt de ce test consiste surtout la dtection de
la prsence de rejets toxiques qui ne sont pas souvent aperus par les tests de DBO5. La DCO est en gnral plus
leve que celle de la DBO5 et lexamen du rapport DBO sur DBO5 est aussi importante. La dtermination de la
DCO permet en plus de prdire de faon raisonnable la DBO5. Le dispositif utilis pour nos mesures de la DCO
est ralis laide dun dispositif de type :"Hot Record Fusibles T5A".
2.3. tude de la biodiversit microbienne des tanneries
2. 3.1. chantillonnage
Les chantillons deaux des tanneries destins ltude de la biodiversit microbienne sont prlevs deux
priodes diffrentes. Le premier prlvement est ralis pendant le mois de mai, le second est accompli au mois
de dcembre. De chaque fosse de tannerie, nous avons prlevs des chantillons d'eaux en duplicata. La mise en
culture des micro-organismes de ces chantillons est effectue au laboratoire dans deux milieux de culture
diffrents.
2.3.2. Mise en culture
Pour la croissance et lisolement des microorganismes nous avons utilis deux milieux de cultures :

Le milieu de culture Luria-Bertani (LB) pour la culture des bactries.


Le milieu de culture Yeast Pepton Glucose (YPG) pour la culture des levures.

Le milieu glos LB se compose de Peptone (10g), extrait de levures (5g), NaCl (10g), agar (20g) et eau
distille (1litre). Tandis que, Le milieu glos YPG est constitu de Peptone (20g), extrait de levures (10g),
NaCl (10g), glucose (20g), agar (20g) et Eau distille (1litre). La kanamycine (antibiotiques) est additionne au
milieu YPG pour viter les dveloppements bactriens [10, 11].

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2.3.3. Prparation des dilutions
partir des chantillons des trois dernires tapes de tanneries : fiente de pigeon, son et tannage, nous avons
prlev un volume de 1000l. Ensuite, nous avons prpar des dilutions allant de 10 -1 10-4. Un volume de
100l des diffrentes dilutions est tal sur chaque milieu de culture en triplicata. Les boites de Ptri milieux
YPG sont alors incubs 30C, alors que ceux des milieux LB sont dposs 37C pendant 24 heures.
2.3.4. Purification par puisement
Les colonies des bactries et des levures qui ont pouss sur les diffrents milieux ont subis des purifications
par puisements en vue dobtention d'isolats microbiens purs. Ces isolats ont constitu une banque de microorganismes issue des tanneries traditionnelles de Fs. Deux copies de cette rcolte sont conserves au glycrol
dans des tubes eppendorf -20C.
2.4. Caractrisations enzymatiques des micro-organismes purifis
Pour senqurir des potentialits biotechnologiques des souches testes nous avons cibl les activits
enzymatiques trs sollicites en bio-industrie. Nous nous sommes intresss aux activits cellulases, pectinases,
amylases, lipases et tannases.
2.4.1. Activit cellulase
Cette activit est visualise par lutilisation d'un milieu glos base du carboxy-mthyl-cellulose (CMC)
comme seule source de carbone. Le milieu cellulase est un mlange d'un milieu minimum M9 et d'un milieu
CMC. Le milieu M9 se compose de Na2HPO4 (6g), KH2PO4 (3g), NH4Cl (1g), NaCl (0,5g) et eau distille
(1litre). Le milieu est autoclav pendant 15min 120C. Ensuite, sont ajouts 1ml dune solution de CaCl 2
0,1molaire et 1ml dune solution de MgSO4 1molaire. Le milieu CMC se compose de carboxy-mthylcellulose (10g), extrait de levure (5g), glycrol (50%) (2ml), agar (20g) et le tampon M9 (quantit pour 1litre).
Ce milieu final est autoclav pendant 15min 120C puis coul dans des boites de Ptri. L'incubation des
microorganismes sur ce milieu CMC est effectue pendant 24 heures 48 heures et des tempratures de 37C
et 30C respectivement pour les bactries et les levures. Lactivit cellulase est ensuite rvle par lajout dune
solution de rouge Congo une concentration de 1mg/ml pendant 15 minutes suivie de trois rinages avec une
solution molaire de NaCl. Les micro-organismes cellulase positifs manifestent alors des auroles jauntres
autour de leurs colonies.
2.4.2. Activit pectinase
Afin de cribler les isolats producteurs de pectinase, nous avons ralis des cultures des micro-organismes
purifis sur un milieu base dacide polygalacturonique (PGA). Le milieu PGA est obtenu par l'extrait de levure
(5g), PGA (2,5g), (NH4)2S04 10% (5ml), MgSO4 molaire (0,5ml), glycerol 50%(5ml), agar (20g) et l'eau
distille (1litre). Le pH du milieu PGA est ajust entre 5 6 afin dviter une acidit qui empche la
solidification du milieu. Le milieu PGA est mlang un tampon (pH=8) avec des proportions respectives de
80% et 20%. Ce milieu final est autoclav pendant 15min 120C puis coul dans des boites de Ptri. La
visualisation d'activit pectinase extracellulaire a t dtermine par l'ajout sur chaque boite de Ptri de 3ml
dune solution dactate de cuivre 7,5% pendant 15min suivi de trois rinages leau distille. Les colonies
pectinase positives sont alors caractrises par la prsence dauroles blanchtres. (Tampon: pH = 8): Na2HPO4
(15g) et NaH2PO4 (0,7g) / litre d'eau distille).
2. 4.3. Activit amylase
Les isolats microbiens activit amylase sont dtects par culture sur milieu glos base damidon. Ce
milieu de culture est form de Peptone (6g), MgSO4 (0,5g), KCl (0,5g), amidon de pomme de terre (1g) et eau
distille (1litre). La visualisation des halos clairs dactivit amylase autour des colonies est dtermine par ajout
de 3ml dune solution iode pendant 15min suivie de deux rinages leau distille.
2.4.4. Activit lipase
La mise en vidence de lactivit lipase est effectue sur milieu de culture base de rhodamine B. Cette
mthode implique la mesure de la fluorescence provoque par les acides gras librs grce l'action de la lipase
sur l'huile d'olive. Une fluorescence quantitative due la lipase est base sur l'interaction de la rhodamine B
avec les acides gras librs pendant l'hydrolyse enzymatique d'huile d'olive [10]. Le milieu de rhodamine B est
form d'Huile dolive (30 ml), Tween 80(250l), rhodamine B (0.02% p/v) et eau distille (50 ml). 50 ml de ce
milieu est mlang avec 450 ml dun milieu de base (YPG ou LB). Le milieu final est ajust pH= 7. Les
colonies activit lipase dveloppent une fluorescence orange lors de lexposition des boites de Ptri aux
radiations UV (350 nm).

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2.4. 5. Activit tannase
La dtermination de l'activit tannase est tablie sur milieux YPG (levures) et milieux LB (bactries). Ces
milieux sont additionns 10ml d'une solution d'acide tannique (20 %). Les micro-organismes prsentant une
activit tannase montrent des auroles claires qui tmoignent de la dcomposition d'acide tannique en acide
gallique et en glucose.

III. RESULTATS ET DISCUSSION


3.1. Caractrisation physico-chimique des tanneries traditionnelles
A l'exception de l'tape de chaux qui montre un pH nettement alcalin, les trois autres phases de tannage
prsentent des pH trs acides. Ceux-ci permettraient alors le dveloppement des micro-organismes acidophiles
s'adaptant ces conditions. La temprature au sein de tous les bassins est comprise entre 20 et 24C. Les
rsultats de la teneur en oxygne dissous sont trs faibles ceci laisse penser que l'anarobiose prdispose dans
ces milieux. tant li la charge ionique (calcium, magnsium, nitrate, nitrite...) d'eau, La conductivit
lectrique de ces biotopes est lordre des milli-siemens par centimtres. Cette forte conductivit est
essentiellement due la charge en sels naturels des peaux et aussi en sels de conservation utiliss par les
tanneurs avant de procder au tannage (tableau 1).
Tableau .1 : Valeurs de pH, temprature, oxygne dissous et conductivit lectrique des quatre tapes
de tannage
Traitement

Chaux

Fiente pigeon

Son

Tannage

pH

10,49

5,40

2,74

3,16

Temprature C

24,2

22,6

23

20,6

O2 dissous (mg/l)

0,11

0,13

0,53

0,49

Conductivit lectrique (ms/cm)

28,8

19,23

24,4

12,53

La mesure des demandes biologiques et chimiques en oxygne (DBO5 et DCO) des quatre tapes de
tannage reprsentent la part de matire organique dcompose respectivement par voix biologique et chimique.
La DBO5 importante de la phase "fiente de pigeon" par rapport aux autres phases s'explique par la prsence de
matire fcale de pigeon riche en matire organique biodgradable. Les valeurs des DCO sont plus importantes
que celles des DBO5 en raison de la prsence dans ces fosses de composs chimiques non biodgradables
(tableau 2).
Tableau. 2 : Valeur de DBO5 et DCO des chantillons prlevs exprims en mg doxygne par litre
deffluent
Fiente pigeon

Son

Tannage

DBO5 (mg/L)

50

31

33

DCO (mg/L)

557,6

592,4

617,5

DBO5/DCO

0,1

0,06

0,05

Traitement

Le rapport DBO5/DCO qui dtermine la fraction biodgradable est. Ce rapport est de 0,1 ; 0,06 et 0,05
respectivement pour l'tape "fiente de pigeon", ltape "son" et ltape de tannage. Ces rapports sont
infrieurs la valeur norme qui est de 0,5 ce qui indique que ce site de tanneries traditionnelles se caractrise
par un faible pouvoir de biodgradabilit. De l'ensemble de ces caractristiques dcoule alors l'aspect extrme
des eaux de tanneries et marquent l'intrt du criblage de leur diversit microbienne.

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3.2. Diversit microbienne des eaux de tanneries
La premire tape de chaux n'a pas montr de croissance microbienne. Les dnombrements des colonies
dveloppes sur les milieux de culture LB et YPG des trois autres tapes de tanneries sont prsents sur la
figure2.

Figure 2 : Variation de la charge microbienne par milieu de culture et par phase des tanneries
(A: prlvements de mai, B: prlvements de dcembre)
La comparaison des graphes A et B montrent quune charge microbienne importante est prsente dans ces
milieux pendant le mois de Mai par rapport au mois de Dcembre. Cette richesse microbienne est
particulirement marque pendant la phase des fientes de pigeon.
Les diffrentes colonies microbiennes isoles et purifies par puisements ont constitu une banque forme de
65 bactries et 29 levures. Le tableau 4 montre l'inventaire des bactries et levures isoles partir des tapes de
tanneries (tableau3).
Tableau 3: inventaire des bactries et levures purifies partir des phases de tanneries

Prlvement
Mai
Prlvement
Dcembre

Bactries
Levures

Fiente de pigeon
20
6

Son
17
8

Tannage
10
1

Bactries
Levures

9
6

5
4

4
4

Figure 3 : Isolats microbiens purifis par milieu de culture et par phase de tanneries
(Prlvements mai et dcembre)

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3.3. Caractrisation enzymatiques des isolats microbiens
Les isolats microbiens (bactries et levures) sont tests pour mettre en vidence leur potentiels enzymatiques,
l'ensemble des cinq activits enzymatiques tudis sont portes sur la figure 4.

Figure 4 : Activits enzymatiques des isolats purifis de tanneries


Ces rsultats montrent que les expressions des cinq enzymes testes sont manifestes surtout en phase "fiente
de pigeon" et en phase "son". Les activits cellulase, pectinase et lipase sont prsentes en phase "fiente de
pigeon" par rapport l'activit amylase Cette figure indique aussi que ltape de fiente de pigeon est riche en
micro-organismes producteurs de lipase. D'autre part, toutes les activits enzymatiques sont faiblement rvles
en phase tannage. Ceci serait du la charge de produits tannant utiliss par les tanneurs et la teneur faible en
matire organique. Pour les activits enzymatiques des bactries, la phase de "fiente de pigeon" se caractrise
surtout par des activits pectinase et cellulase. Alors que pour les expressions enzymatiques des levures se
distinguent surtout par l'activit lipase en phase" son".
Lanalyse physico-chimique des phases de tannage indique le caractre alcalin de la phase de "chaux" et des
pH trs acides pour les trois autres phases de tannage (fiente de pigeon, son, tannage) avec des concentrations
faible en oxygne dissous. La figure 5 montre l'effet du pH sur la rpartition des bactries et levures dans les
fosses de tanneries.

Figure 5 : Effet du pH sur la rpartition des biomasses de bactries et de levures dans les trois phases de
tannage.

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Lacidit (paramtre abiotique) a influenc les rpartitions spatiales de la microflore totale au niveau de trois
tapes de tannage. La phase "fiente de pigeon" montre la plus importante biomasse en bactries et levures. Ceci
peut tre li la charge en matire grasse des peaux qui sert de source de carbone utilise pour le mtabolisme
des micro-organismes. [12] ont mis en vidence leffet du pH faible sur lexploitation microbienne des graisses
en mtabolisme. Il ya alors rtention des acides gras et des Ions H+dans le milieu travers le cycle de Krebs.
Les cellules synthtisent des enzymes spcifiques et non spcifiques pour lhydrolyse des graisses et
laugmentation de biomasse est en relation avec le catabolisme des graisses (fractions organiques) [13]. Les taux
dabattements des demandes chimiques en oxygne augmentent en allant de la phase "fiente de pigeon" jusqu
ltape de tannage (figure 6) , ce qui nest pas accord avec la baisse nette des biomasses. Ceci serait du en fait
lacidit faible des fosses des traitements par le son et les tanins (pH respectivement de 2,74 et 3,16). Il est
aussi important d'indiquer que la concentration des produits (non biodgradables) utiliss en phase finale de
tannage est en dfaveur avec le dveloppement microbien.

Figure 6 : Variations des biomasses (bactries et levures) et de la DCO dans les trois phases de tannage.
Les rsultats obtenus par l'approche physico-chimique expliquent alors en partie l'approche microbiologique
dtermine. Par ailleurs les travaux de [13] ont montr que par traitement biologique deffluent synthtique
biomasse non adapt, la faible rduction de la DCO ne dpassant pas 51,88%. Il sagit dune adaptation des
cellules bactriennes et dune stimulation de leurs quipements enzymatiques pour rduire la matire grasse et
produire une nouvelle biomasse.
Ces fluctuations de biomasse microbienne dans les diffrentes tapes de tanneries concordent avec les
travaux [14] sur la diversit bactrienne des tanneries de Fs. Il a t conclu que la diversit bactrienne change
durant les processus de tannage et que les chantillons de la phase des fientes de pigeon manifestent un plus haut
niveau de diversit bactrienne.
La caractrisation enzymatique des isolats des trois phases de tannage a rvl la prsence d'important
potentiel denzymes produites. Nous avons mis en vidence 61 activits enzymatiques pour l'ensemble de 94
isolats purifis. La figure 6 prsente les rpartitions des activits tudies.

Figure 7: rpartition des activits enzymatiques sur les isolats microbiens purifis

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Contribution La Caractrisation Microbiologique


L'activit lipase des isolats microbiens se montre alors prdominante. Ceci est en relation avec les
caractristiques des milieux de tanneries trs riche en matires grasses provenant des peaux en traitements. Ce
potentiel lipolytique a t bien manifest chez trois levures isoles.
Le rle des levures est reconnu en application biotechnologique comme la fermentation, agro-alimentaire,
pharmacie et chimie fine [15]. Peu dtudes ont cible les distributions des levures dans diffrents sites de
traitements deaux uses, cependant plusieurs espces de levures sont spcifiques et accordent ces traitements
la plateforme pour induire le processus unique adquat [16]. Des lipases de certaines levures ont t purifies,
caractrises les gnes codant lipases sont clons (Candida, Geotrichum, Trichsporon et Yarrowia lipolytica)
[17].

IV. CONCLUSION
Les ressources microbiennes reprsentent des atouts naturels et rels si leur exploitation est conduite dans des
conditions environnementales rigoureuses et que la valorisation de leurs potentialits soriente vers des
applications biotechnologiques cibles. Les tanneries traditionnelles CHOUARA de Fs-mdina sont
caractre extrme et culminent une richesse microbiennes importantes. Les isolats microbiens purifis
manifestent des activits enzymatiques intressantes. L'activit lipase suscite l'attention particulire tant donn
sa performance dans la catalyse de lhydrolyse d'esters glycridiques en milieu aqueux et la synthse d'esters en
milieu non-aqueux [18,19]. Elles sont de ce fait des biomolcules trs convoites sur le march des enzymes et
leurs diverses applications biotechnologiques sont de loin les plus prometteuses.

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