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Universidad de Chile

Facultad de Ciencias
Licenciatura en Ciencias c/m en Qumica

Informe de Laboratorio de Biologa:


Extraccin de ADN con Tecnologa de Trinchera
Fecha: jueves 13 de mayo
Integrantes: Marcela Camps
Katherine Morales

Objetivos
El objetivo especfico de este laboratorio es obtener ADN a partir de tejido vegetal, especficamente
de una frutilla, con un simple mtodo de extraccin de ADN.
As mismo, el objetivo general de este prctico es lograr conocer los pasos para conseguir ADN con
implementos comunes de todas las casas, tales como sal de cocina, quix, alcohol.

Introduccin
El cido Desoxirribonucleico, ms conocido como ADN, es la base gentica de todas las clulas y
se encuentra presente en todas ellas. Su rol fundamental es tener y traspasar tal informacin
gentica de generacin en generacin de clulas mediante sus cualidades qumicas.
El ADN, como aprendimos en unidades anteriores, est formado por sub unidades, llamadas
nucletidos, los cuales estn compuestos por una Base Nitrogenada, que pueden ser Purinas
(Adenina y Guanina) o Pirimidinas (Citocina y Timina), una Desoxirribosa (azcar) y un Grupo
Fosfato. Esta molcula tiene una estructura muy caracterstica, la cual consta de dos cadenas de
ADN, las que debido a los enlace por puente de Hidrgeno, produce un leve enrollamiento de sta
sobre s misma. La estructura fue descubierta por Watson y Crick en 1953, los que la denominaron:
Doble Hlice.
Este poli nucletido, que podemos llamarlo as por ser muchas sub unidades de nucletidos juntas,
se encuentra dentro del ncleo de cada clula, por lo que para este trabajo prctico, necesitamos
extraerlo desde ah. Cmo y con qu materiales se realiz esta extraccin se explica en este informe.

Procedimiento Experimental
A continuacin se describe cmo se realiz la Extraccin de ADN de una frutilla y los materiales
utilizados para ello.
a) Materiales:
- 1 Frutilla (de ah obtenemos el ADN)
- Mortero
- 20 cc de Agua Destilada (3/4 de un tubo)

Media cucharada de t de Sal de Mesa


Media cucharada de detergente (Quix)
2 Tubos de Ensayo
1 Tubo Falcn
2 Palitos de Madera, esptula
Alcohol Fro

b) Mtodo:
Lo primero que realizamos fue la trituracin de la frutilla en el mortero, lo que se realiza para
separar las clulas, quedando ahora ms expuestas al detergente que se utilizar ms adelante. Para
la maceracin se utilizaron 20 cc de agua destilada con una pizca de sal. En esta mezcla de sal y
agua se producen iones salinos, los que son atrados por las cargas negativas del ADN,
disolvindolo en el agua para que la extraccin resulte ms fcil.
Cuando la maceracin est bien hecha, se agrega la media cucharada de detergente Quix. Esto se
incorpora a la maceracin para romper la membrana celular y nuclear, lo que gatilla la liberacin de
ADN del interior de la clula hacia el medio. Una clara explicacin de por qu sucede esto, es el
mismo acto de lavarse las manos, o lavar los platos: El jabn se une con la grasa reaccionando. En
la clula pasa algo similar. Como sabemos, la membrana est formada por una bicapa lipdica y son
estos mismos lpidos los que reaccionan con el Quix, permitiendo la liberacin de todo lo contenido
en la clula. Luego sucede lo mismo con la membrana del ncleo, liberndose ADN el cual queda
disuelto en el agua.
Trasvasijamos aproximadamente 10 ml de la muestra (roja turbia hasta ese momento) a un tubo
falcn, para despus llevarla a la centrifuga y luego de 5 minutos a mediana-baja lograr obtener dos
fases: Sobre nadante (lquido) y Pellet (slido).
A continuacin, con mucha precaucin vertimos el sobre nadante (roja, pero ya sin material en
suspensin) a un tubo de ensayo limpio.
Luego, agregamos al tubo alcohol fro de tal manera que escurra por las paredes de ste lentamente
y sin producir turbulencias. Debe quedar en la misma cantidad que el agua. El alcohol queda encima
del agua, debido a que su densidad es menor, y ah es cuando justo en el lmite entre estos dos
lquidos aparece el ADN en forma de precipitado y desenrollado (mota blanca).
Finalmente el ADN se divide en tres espacios del tubo, lo que se debe a los distintos pesos de ste:
Algunos pedazos suben a la superficie del alcohol, otros se quedan al medio y otros quedan justo en
la interfase de alcohol y agua.

Resultados
La mota blanca obtenida no debera ser ADN puro, ya que ste est acompaado de ARN en el
ncleo, por lo que se observa son estos dos componentes vitales de las clulas. Para eliminar este
ARN unido al ADN se requiere la utilizacin de alguna enzima que fragmente ste ARN.
Para verificar que la mota blanca obtenida es ADN se requiere de un procedimiento medianamente
peligroso. Se realiza agregando un compuesto qumico llamado Bromuro de Etidio, el cual es un
marcador de cidos nucleicos. Cuando esto se pone ante luz ultra-violeta, emite una luz
fluorescente, que al estar unido a cadenas de ADN se intensifica unas 20 veces.

Conclusiones y Discusiones
Luego de haber extrado ADN de una frutilla logramos darnos cuenta de distintas cosas, tales como
que muchas de las cosas que nos rodean contienen ADN y quiz no lo sabamos. Con simples
tcnicas y materiales caseros logramos extraer algo tan complejo como lo es el ADN, el cual es la
base de la vida de todas las clulas de todos los tipos.

Referencias y Bibliografa
-

http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/index.html

http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/detergent.ht
ml

http://www.correodelmaestro.com/anteriores/2005/noviembre/2nosotros114.htm

http://www.tipete.com/userpost/videos-online-gratis/extraccion-casera-de-adn-experimento

http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_t
u_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm

http://es.wikipedia.org/wiki/Bromuro_de_etidio