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gov/pmc/articles/PMC2790261/
Abstracto
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Introduccin
El ejercicio de resistencia puede aumentar de forma aguda concentraciones sricas de
hormonas tales como la testosterona, la hormona del crecimiento (GH), y el crecimiento
similar a la insulina factor 1 (IGF-1). La magnitud de esta elevacin depende de la
intensidad ( Kraemer et al. 1990 ), el volumen ( Gotshalk et al. 1997 ), intervalo de
descanso ( Kraemer et al. 1987 ) y la masa muscular ejercicio ( Kraemer y Ratamess,
2005 ) de la resistencia sesin de ejercicio. Simplemente, ejerciendo una gran masa
muscular con una intensidad moderada-alta y con alto volumen y los intervalos cortos de
descanso conduce a mayores alzas en GH, IGF-1 y la testosterona. Dada la conocida
influencia de las hormonas anablicas durante el desarrollo ( Mauras, 2001 ), se ha sugerido
que la respuesta aguda del sistema neuroendocrino para el ejercicio de resistencia es de
importancia primordial en la remodelacin de las protenas del msculo esqueltico y en
ltima instancia en la regulacin de la hipertrofia muscular ( Kraemer y Ratamess,
2005). Sin embargo, a pesar de que las respuestas hormonales a las variables del programa
de ejercicios de resistencia han sido bien caracterizados ( Kraemer et al., 1990 ), la
influencia de la respuesta de la hormona inducida por el ejercicio de la sntesis de protenas
musculares an no se ha cuantificado directamente.
Sntesis de protenas musculares, en particular, la sntesis de la fraccin de protena
miofibrilar ( Moore et al. 2009 b ), se eleva en respuesta a ejercicio de resistencia
( Phillipset al. 1997 ). Los ataques repetidos de ejercicio de resistencia, especialmente
Ocho hombres jvenes sanos (20,0 1,1 aos, 1,79 0,03 m, 84,1 4,1 kg; medias SEM )
se ofreci para participar en el estudio tras ser informados de los procedimientos y los
riesgos potenciales involucrados en la investigacin. Los sujetos fueron recreativa activa
sin experiencia de levantamiento de pesas formal o actividad regular de levantamiento de
pesas en el ltimo ao. El protocolo fue aprobado por el Consejo de tica de Investigacin
de Ciencias de la Salud y la Universidad McMaster de Hamilton y fue escrito conforme a
las normas establecidas por la Declaracin de Helsinki .
Diseo experimental
Los participantes completaron dos ensayos de infusin en das separados. En un ensayo, los
participantes realizaron un solo brazo ejercicios enrollamiento (unilateral) de cable
"predicador" destinadas exclusivamente a la activacin del msculo bceps. En el otro
ensayo, los participantes realizaron el mismo ejercicio de un solo brazo con el brazo
contralateral, seguido inmediatamente por un ataque de un intenso ejercicio de la pierna
pesada de alto volumen con intervalos de descanso cortos diseados para provocar un gran
aumento en las hormonas sistmicas. La orden de ensayo y la dominacin brazo se tuvieron
en cuenta y los ensayos se llevaron a cabo de una manera contraproducente equilibrado
aleatorio. Los participantes se sometieron a la prueba de fuerza al menos 1 semana antes de
la primera prueba de infusin para determinar una carga apropiada para cada ejercicio (por
ejemplo, 10 repeticin mxima (10RM)). El ejercicio con el brazo solo constaba de cuatro
series de 10 repeticiones con una carga que era ~ 95% de su 10RM tal que la falta
voluntaria se produjo durante el ltimo set. Para obtener una respuesta hormonal grande, el
mismo ejercicio brazo se realiz en el brazo contralateral seguido de cinco series de 10
repeticiones de press de piernas en ~ 90% de 10RM y tres series de 12 repeticiones de la
pierna extensin / Leg Curl 'superconjuntos' (1 conjunto de cada uno vuelve back-to-sin
descanso entre series). Entre-establecidos intervalos de descanso de los ejercicios de brazos
y el ejercicio de la pierna eran 120 s y 60 s, respectivamente. En el trabajo de piloto de
nuestro laboratorio se determin que el volumen y la intensidad del entrenamiento de la
pierna provocaron un gran aumento de GH, IGF-1 y testosterona que era comparable a
otros estudios
Protocolo de infusin
los participantes tuvieron un segundo catter insertado en una vena antecubital del brazo
ejercido que se utiliz para muestra de sangre para el resto del ensayo. Los participantes
fueron pesados en la maana de cada ensayo experimento y las tasas de infusin se
ajustaron en consecuencia para mantener una velocidad de infusin en 0,05 mol L - [ de
anillo 13 C 6 ] fenilalanina kg -1 min -1 . Tras el ejercicio, los participantes descansaban
cmodamente en una cama para el resto de la infusin.
Todos los participantes ingirieron una dosis en bolo de 25 g de protena de suero despus
del ejercicio de brazo en los dos ensayos que se enriquecieron al 6% con trazador para
minimizar las perturbaciones en el equilibrio de istopos. La bebida de protena de suero de
leche sirve como suplemento tpica protena post-entrenamiento y proporciona los
aminocidos esenciales como sustrato para la respuesta sinttica de la protena muscular al
ejercicio. Se procesaron muestras de sangre como se ha descrito previamente ( Moore et
al. 2009 a ). Una biopsia muscular (~ 80 mg) fue tomado del bceps braquial de cada brazo
240 min despus del ejercicio. Las biopsias musculares se realizaron con una aguja
Bergstrm que fue modificado a medida para aspiracin manual bajo anestesia local (2%
xilocana). Las muestras de biopsia fueron borrados y liberaron de cualquier grasa visible y
tejido conectivo, se congelaron en nitrgeno lquido (a menos de ~ 20 s de ser llevado
desde el msculo) y almacenados a -80 C hasta su posterior anlisis.
Los anlisis
Las transferencias Western de las protenas JAK2 y STAT3 se llevaron a cabo como
sigue. Muscle se homogeneiz con una mano de mortero de vidrio en hielo en tampn (20
min. Despus de bloquear con 5% de leche baja en grasa en TBS-T durante 1 h, las
membranas se rotaron durante la noche con anticuerpo primario en contra de los objetivos
antes mencionados (solucin salina y 0,1% de Tween-20, tanto Sigma-Aldrich tamponada
con Tris) a una concentracin de 1 : 2000 a 4 C. Las membranas se lavaron (3 x 5 min)
con TBS-T y se incubaron durante 60 min a temperatura ambiente con peroxidasa de
rbano (HRP) conjugado con anti-anticuerpo secundario de conejo (New England Biolabs,
Ipswich, MA, EE.UU.) antes de lavado adicional (3 5 min) con TBS-T y la incubacin
durante 5 minutos con un aumento de quimioluminiscencia (ECL) los reactivos (kit
Immunstar; Bio-Rad). Las transferencias fueron imgenes y se cuantificaron mediante la
evaluacin de la densidad de pico despus de bandas asegurando estaban dentro del rango
lineal de deteccin utilizando el sistema ChemiDoc XRS (Bio-Rad). La fosforilacin de
protenas de sealizacin se corrigi para la carga de -actina.
Clculos
contra de tomar una biopsia posterior en el segundo juicio por enriquecimiento inicio del
estudio ( Tang et al. 2007 ).
Estadstica
Este estudio fue un diseo de medidas repetidas en un mismo sujeto. Analitos de sangre
fueron analizados utilizando dos factores (tiempo condicin) Medidas repetidas anlisis
de la varianza (ANOVA) estadsticas. MPS y de sealizacin de datos de protenas se
analizaron utilizando un factor (condicin) de medidas repetidas ANOVA
estadsticas.Diferente honestamente significativa de Tukey post hoc se utiliz la prueba
para determinar las diferencias entre los valores individuales si se detect un importante
efecto principal o interaccin en el ANOVA ( P <0,05). Los valores se expresan como
media SE . M .
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Resultados
Las concentraciones de aminocidos en la sangre
Hubo un efecto principal de tiempo para los cidos de cadena ramificada aminocidos
(BCAA) y aminocidos esenciales (EAA) ( P <0,001). La ingesta de protenas de 60
minutos despus del ejercicio estimul un aumento de las concentraciones de EAA y
BCAA que fueron elevados a los 90 minutos, alcanz un mximo de 120 minutos y se
volvi a los niveles basales de 240 minutos despus del ejercicio. No hubo diferencias entre
las condiciones. La Tabla 1 muestra la BCAA media y concentraciones de EAA de los dos
ensayos.
Tabla 1
Las concentraciones de aminocidos, glucosa y de insulina en plasma
La glucosa en sangre y la insulina en plasma
Glucosa en sangre en ayunas fue de 4,5 0,1 m M en reposo y no fue diferente entre las
condiciones ( Tabla 1 ). La concentracin de insulina en plasma en ayunas fue de 6,1 0,4
uUI ml -1 y aument en ~230% 90 min despus del ejercicio y regres a los valores de
reposo de 180 min. Hubo efectos principales significativos para la condicin (HH>
LH, P<0,05) y el tiempo ( P <0,001), pero la interaccin no alcanz significacin ( P >
0,05).
La testosterona srica, cortisol, hormona del crecimiento, factor-1 de crecimiento
similar a la insulina y de lactato en sangre
Figura 1
Lactato en sangre entera ( A ) y GH en suero ( B ), IGF-1 ( C ) de testosterona ( D ) y el
cortisol ( E ) concentraciones en reposo y despus de los protocolos de ejercicio de LH
y HH
Plasma y muscular intracelular enriquecimiento libre de fenilalanina
Ejercicio flexor del codo MPS elevados en un 78% (LH) y 61% (HH) ( P <0,05), sin
diferencias entre las condiciones ( P = 0,72) ( Fig. 2 ). Se obtuvieron resultados similares
para la sntesis de protena muscular mixta (ver lnea material complementario ). No hubo
efecto de la orden de ensayo en MPS ( P > 0,05). Tampoco hubo diferencia en reposo MPS
entre las condiciones ( P > 0,05).
Figura 2
Tasa de sntesis proteica miofibrilar en el estado alimentado en reposo y tras la LH y
protocolos de ejercicio HH
Sealizacin protenas
Figura 3
Fosforilada a proporcin de protena total de JAK2 ( A ), STAT3 ( B ), p70S6K ( C ) y
eEF2 ( D ) en reposo y despus de los protocolos de ejercicio de LH y HH
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Discusin
Presentamos aqu que, a pesar de estar expuestos a diferencias sustanciales en las hormonas
supuestamente anablicos tales como testosterona, GH, y el IGF-1, la tasa de MPS en los
msculos de forma idntica ejercidas no fue diferente. Estos datos demuestran que los
factores locales son de suma importancia en la determinacin no slo la activacin de la va
de sealizacin sino tambin la respuesta de MPS. Por otra parte, nuestros resultados
indican que los aumentos de MPS pueden ocurrir sin aumentos en las concentraciones de
hormonas anablicas sistmicos y no se ven reforzadas por la elevacin aguda que puede
seguir los ejercicios de resistencia; esta conclusin est de acuerdo con el trabajo previo de
nuestro laboratorio muestra que el aumento de las hormonas circulantes no son necesarios
10RM
Mximo 10 repeticin
GH
hormona de crecimiento
IGF-1
MPS