CARACTERSTICAS GENERALES

Los vibrios son unas de las bacterias ms frecuentes en las aguas de superficie
de todo el mundo. Son bacilos gramnegativos curvados, son extremadamente
mviles y poseen un flagelo polar, no forman esporas, son oxidasa-positivas y
pueden desarrollarse bajo condiciones aerobias, pero pueden ser anaerobios
facultativos. Las clulas pueden conectarse extremo a extremo, generando
formas en S y espirales. La estructura de la envoltura celular es similar a la de
otras bacterias gramnegativas.

Vibrio cholerae (micrografa electrnica de barrido). Observe los bacilos

curvados y los flagelos polares.

Vibrios de importancia mdica

Microorganismo
Vibrio cholerae serogrupos O1 y O139
Vibrio cholerae serogrupos no O1/ no O139

Vibrio parahaemolyticus

Enfermedad en seres humanos

Clera epidmico y pandmico
Diarrea coleriforme; diarrea leve; raras veces
infecciones extraintestinales

Gastroenteritis, tal vez infecciones extraintestinales

Otros
Vibrio mimicus, Vibrio vulnificus, Vibrio hollisae,

Infecciones de odo, heridas, tejidos blandos y otros

Vibrio fluvialis, Vibrio damsela, Vibrio anginolyticus, lugares extraintestinales, todas infrecuentes
Vibrio metschnikovii

Caractersticas de las especies menos comunes de Vibrio

ORGANISMO

CARACTERSTICAS

EPIDEMIOLOGA

ENFERMEDAD

V. mimicus

Cercanamente relacionado con V. cholerae, Ingestin de pescados y mariscos

Diarrea acuosa
enterotoxina similar al clera
crudos

V. parahaemolyticus

Agua de mar costera; ingestin de

Produce inflamacin intestinal, enterotoxina
Diarrea
acuosa,
pescados y mariscos crudos; brotes en
no clara
ocasional
cruceros; comn en Japn

V. vulnificus

Agua de mar costera, en especial

Produce
siderforos poderosos
que cuando aumenta la temperatura del
secuestran el hierro de la transferrina y la agua; ingesta de pescados o mariscos
lactoferrina del hospedador
crudos o por contaminacin de heridas
con agua de mar

V. alginolyticus

disentera

Bacteriemia fulminante posterior a

la
ingestin,
celulitis
por
contaminacin de heridas, altas
tasas de mortandad en aquellos
con
enfermedades
de
+
almacenamiento de Fe

Heridas contaminadas con agua de

Celulitis
mar

RESERVORIOS
El principal reservorio es el ser humano; observaciones en Australia,
Bangladesh y Estados Unidos han demostrado la existencia de reservorios en el
ambiente, al parecer con la participacin de coppodos u otras clases de
zooplancton de aguas salobres o estuarios.
Hay microorganismos que pueden persistir en el agua por mucho tiempo y en la
literatura se menciona que el alza de la temperatura del mar, producto de la
corriente del nio, favoreca la sobrevida y su replicacin.
Las personas son infeccin asintomtica juegan un importante rol en acarrear el
vibrio de un lugar a otro, produciendo la diseminacin de las epidemias.

VIBRIO CHOLERAE
En el aislamiento inicial, V. cholerae es un bacilo curvo de forma de coma de 2 a
4 m de longitud (figura 2). Se mueve por medio de un flagelo polar. En el
cultivo prolongado, los vibrios pueden convertirse en bacilos rectos que se
parecen a las bacterias entricas gramnegativas.

Tincin de Gram de Vibrio cholerae. A menudo tienen forma de

coma o levemente curveados (flechas) y miden 1 2 a 4 m.
Aumento original 1 000.

CULTIVO
V. cholerae produce colonias convexas, lisas y redondas que son opacas y
granulosas en la luz transmitida. V. cholerae y la mayor parte de los dems
vibrios se multiplican bien a una temperatura de 37 C en muchas clases de
medios, incluidos los medios definidos que contienen sales minerales y
asparagina como fuentes de carbono y nitrgeno. V. cholerae se multiplica bien
en agar de tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa (TCBS, thiosulfate-citratebilesucrose), en el cual produce colonias amarillas que son fcilmente visibles
sobre un fondo de color verde oscuro de agar (figura. 3). Los vibrios son
oxidasa positivos, lo que los distingue de las bacterias gramnegativas entricas.
Es caracterstico que los vibrios se multipliquen a un pH muy alto (8.5 a 9.5) y
que rpidamente sean destruidos por cido. Por tanto, los cultivos que
contienen hidratos de carbono fermentables se vuelven estriles con rapidez.

CARACTERSTICAS DE CRECIMIENTO
Por lo regular V. cholerae fermenta sacarosa y manosa pero no arabinosa. Una
prueba de oxidasa positiva es un paso clave en la identificacin preliminar de V.
cholerae y otros vibrios. Las especies del gnero Vibrio son susceptibles al
compuesto O/129 (fosfato de 2,4diamino-6,7-diisopropilpteridina), que los
diferencia de las especies del gnero Aeromonas, que son resistentes al
compuesto O/129. La mayor parte de las especies del gnero Vibrio son
halotolerantes y el NaCl a menudo estimula su multiplicacin. Algunos vibrios
son halfilos y necesitan la presencia de NaCl para multiplicarse. Otra diferencia
entre los vibrios y las aeromonas es que los primeros crecen en medios que
contienen NaCl al 6%, y las aeromonas no.

DESARROLLO Y ESTRUCTURA
V. cholerae tiene una baja tolerancia al cido, pero crece bajo condiciones
alcalinas (pH 8.0 a 9.5) que inhiben a muchas otras bacterias gramnegativas.
Se distingue de los dems Vibrio por sus reacciones bioqumicas, estructura
antignica lipopolisacrida (LPS) O y por su produccin de la toxina del clera
(TC). Existen ms de 150 serotipos antignicos O, slo dos de los cuales (O1 y
O139) causan el clera. El biogrupo El Tor de V. cholerae, una variante de O1,
es un biotipo de la cepa clsica. Las cepas O139 se asemejan fenotpicamente
a las cepas El Tor O1. V. cholerae posee largos pelos fi lamentosos que forman
haces sobre la superficie bacteriana y que pertenecen a una familia de pelos
cuya estructura qumica es similar a las de los gonococos y de numerosos otros
patgenos bacterianos. Todas las cepas capaces de causar el clera producen
un factor de colonizacin denominado pelo corregulado por toxina (PCT) a
causa de que su expresin se regula junto con la de la TC.

ESTRUCTURA ANTIGNICA Y CLASIFICACIN BIOLGICA

Muchos vibrios comparten un solo antgeno H flagelar termolbil. Los
anticuerpos contra el antgeno H probablemente no intervienen en la proteccin
de los hospedadores susceptibles. V. cholerae tiene lipopolisacridos O que le
confieren una especificidad serolgica. Existen por lo menos 139 grupos de
antgeno O. Las cepas de V. cholerae del grupo O1 y del grupo O139 producen
el clera caracterstico; en ocasiones, los cleras V. cholerae no O1/no O139
producen una enfermedad parecida al clera. Los anticuerpos contra los
antgenos O tienden a proteger a los animales de laboratorio contra las
infecciones por V. cholerae.

El antgeno del serogrupo O1 de V. cholerae tiene determinantes que permiten

una tipificacin adicional: los serotipos son Ogawa, Inaba e Hikojima. Se han
definido dos biotipos de V. cholerae epidmico, el clsico y El Tor. El biotipo El
Tor produce una hemolisina, da resultados positivos en la prueba de
VogesProskauer y es resistente a la polimixina B. Tambin se pueden utilizar
tcnicas moleculares para tipificar V. cholerae. Se utiliza la tipificacin para los
estudios epidemiolgicos y por lo general slo se llevan a cabo las pruebas en
laboratorios de referencia. V. cholerae O139 es muy similar a V. cholerae O1
biotipo El Tor. V. cholerae O139 no produce el lipopolisacrido O1 ni tiene todos
los genes necesarios para elaborar este antgeno. V. cholerae O139 elabora
una cpsula de polisacrido, al igual que otras cepas de V. cholerae no O1, en
tanto que V. cholerae O1 no sintetiza una cpsula.

ENTEROTOXINAS DE VIBRIO CHOLERAE

El V. cholerae invade la mucosa intestinal y se adhiere a las microvellosidades
del borde en cepillo de las clulas epiteliales intestinales. V. cholerae, casi
siempre el serotipo O1 (y O139), produce una enterotoxina termolbil con un
peso molecular de 84 000. La toxina del clera, TC (Figura 4 y 5), es una toxina
ADP-ribosilante tipo A-B que consta de dos subunidades: las subunidades
txicas A, que se degrada hasta formar dos pptidos, A1 y A2, unidos por un
puente disulfuro; y cinco unidades de fijacin B (cinco pptidos idnticos). Las
unidades B se fijan al receptor GM1-ganglisido que se encuentra sobre la
superficie de muchos tipos de clulas. Una vez fijada, la subunidad A1 se libera
de la molcula de toxina mediante la reduccin del enlace disulfrico que la une
a la subunidad A2 e ingresa en la clula por translocacin. Dentro de la clula
ejerce su efecto sobre el sistema adenilciclasa asociado con la membrana sobre
la superficie de la membrana basolateral.

El blanco de la subunidad txica A1 es una protena nucletida de guanina (G),

Gsa, que regula la activacin del sistema adenilciclasa. La TC cataliza la ADP
ribosilacin de la protena G, hacindola incapaz de disociarse del complejo
activo de la adenilciclasa. Esto ocasiona la activacin persistente de la
adenilciclasa intracelular que, a su vez, estimula la conversin del trifosfato de
adenosina en 3, 5-monofosfato cclico de adenosina (cAMP). El efecto neto es
una acumulacin excesiva de cAMP en la membrana celular, lo que ocasiona
una hipersecrecin de cloro, potasio, bicarbonato y molculas de agua
asociadas hacia el exterior de la clula. La diarrea producida algunas veces es
masiva (p. ej., 20 a 30 L/da), lo cual da por resultado deshidratacin, choque,
acidosis y hasta la muerte. Los efectos nocivos del clera son secundarios a la
prdida del lquido y al desequilibrio acidobsico; por lo tanto, el tratamiento es
la restitucin de lquidos y electrlitos.

PATOGNESIS
El clera, V. cholerae debe llegar al intestino delgado, nadar al interior de las
criptas intestinales, multiplicarse y producir factores de virulencia (Cuadro 4). En
las personas sanas, se requiere de la ingesta de grandes cantidades de
bacterias, cuando el vehculo es agua se requiere 1010 o ms microorganismo
para infectarse y cuando el vehculo es alimento, se necesita un mnimo de 102a
104 microorganismos por la capacidad amortiguadora del alimento. El clera no
es una infeccin invasiva, los microorganismos no llegan al torrente sanguneo
sino que permanecen en el tubo digestivo. La colonizacin del tracto intestinal
completo desde el yeyuno al colon por V. cholerae requiere de la adherencia a
la superficie epitelial por medio de la protena antes mencionada y los pelos de
su superficie. La caracterstica sobresaliente de la patogenicidad de V. cholerae
es la capacidad que las cepas virulentas tienen para producir la TC, que es la
responsable de la enfermedad del clera. El cambio de agua y electrlitos de la
clula a la luz intestinal es la causa fundamental de la diarrea acuosa del clera.

Factores de virulencia en las especies Vibrio

Especies

Factor de virulencia

Efecto biolgico

Toxina colrica

Hipersecrecin de electrlitos y agua

Pilus corregulado por la toxina

Lugar de unin para CTX; media la adherencia a las

clulas de la mucosa intestinal

V. cholerae

Protena quimiotctica

Factor adhesina

Enterotoxina colrica accesoria

Aumenta la secrecin de lquido intestinal

Toxina de la znula oclusiva

Aumenta la permeabilidad intestinal

Neuraminidasa

Modific la supercie celular para aumentar el nmero

de sitios de unin de GM1 para la toxina colrica

V. parahaemolyticus
V. vulnicus

Hemolisina Kanagawa

Enterotoxina que induce la secrecin del cloruro

(diarrea acuosa)

Cpsula de polisacridos

Antifagoctica

Citolisinas, proteasas, colagenasa

Media la destruccin tisular

PRUEBAS DIAGNSTICAS DE LABORATORIO

Los cultivos con sospecha de ser V. cholerae deben subcultivarse en un medio
no selectivo (por ejemplo, agar infusin de corazn [AIC] o agar triptona soya
[ATS]) como preparacin para la identificacin por serologa en lmina y
pruebas bioqumicas. Las cepas de V. cholerae requieren de 0,5% de ClNa (sal)
para un crecimiento ptimo en medio de agar; algunas formulaciones
comerciales de agar nutriente no contienen sal y no deben usarse para el cultivo
de V. cholerae . En general, el anlisis con pruebas bioqumicas previo a la
prueba con los antisueros O1 y O139 no es necesario cuando se sospecha
presencia de V. cholera e en muestras de fecales. No obstante, si el suministro
de antisueros somticos es limitado, las pruebas bioqumicas pueden servir
para la deteccin adicional de aislamientos, antes de ir a las pruebas con
antisueros. Las pruebas de deteccin y la serologa en lmina tienen que
hacerse con el crecimiento de un medio no selectivo.

IDENTIFICACIN DEL V. CHOLERAE

Prueba de oxidasa

Mtodo del papel de filtro humedecido

Mtodo del hisopo

Anlisis bioqumicos adicionales

La prueba de la cuerda
Agar hierro de Kligler y agar hierro triple azcar
Agar hierro lisina
Coloracin de Gram

Cuadro 4. Reacciones de Vibrio cholerae en pruebas de pesquisaje

Prueba de pesquisaje

Reacciones de Vibrio cholerae

Prueba de oxidasa

Positivo

Prueba de la cuerda

Positivo

Agar hierro de kligler (AHK)

Agar hierro triple azcar (AHTA)

Agar hierro lisina (AHL)

Coloracin de Gram Montaje hmedo

K/A (cua roja/fondo amarillo), no produce gas, no

H2Sa [1824 horas]

A/A (cua amarilla/fondo amarillo, no produce gas,

no H2Sa [1824 horas]
K/K (cua prpura/fondo prpura), no produce gas,
no H2Sa, b [1824 horas]
Pequeos bacilos curvos gramnegativos Pequeos bacilos curvos con motilidad
rpida

a K=

alkaline; A= acid

b An

alkaline reaction (purple) in the butt of the medium indicates that lysine was decarboxylated.

An acid reaction (yellow) in the butt indicates that lysine was not decarboxylated.

Produccin de la toxina del clera

1) Los cultivos que se van a someter a prueba se siembran mediante estriacin
en un medio de plano inclinado no selectivo (como agar de infusin de corazn)
y se incuban de 18 a 24 horas a una temperatura de 35 C a 37 C. Se incluyen
cuatro cepas testigo (dos positivas y dos negativas).
2) Se inoculan las cepas en 5 ml de medio de Craig en tubos de tapa de rosca
de 16 X 125 mm. Se mantienen los tapones poco apretados y se incuban los
tubos a 30 C durante 48 horas sin agitar.
3) Se centrifugan los tubos para sedimentar las clulas bacterianas, y se retira
el sobrenadante con una pipeta Pasteur. EI sobrenadante se almacena a 4 C
hasta utilizarse. Si el sobrenadante ha de almacenarse por ms de 7 das, se
congela a -70 C.

Deteccin de la toxina del clera

1. Biovaloraciones
Mtodos que utilizan animales
Mtodos de cultivo de tejidos

2. Inmunovaloracin
ELISA

Coaglutinacin
Aglutinacin de ltex
3. Anlisis basados en el DNA
Sondas de DNA
Reaccin en cadena de la polimerasa

La fotografa de la izquierda muestra el redondeo tpico de las clulas Y-I suprarrenales de ratn causado
por la presencia de la toxina del clera. Se muestran clulas Y-I normales en las fotografa de la derecha.

Diagrama del ensayo GM1-ELISA para la deteccin de la toxina del clera (TC).

En el ensayo GM,-ELISA para la toxina del clera, la aparicin de un color amarillo distintivo en
los pozos de la microplaca indica una reaccin positiva.

Microplaca con resultados de la prueba VETRPLA (Oxoid Limted). La muestra 1 es

negativa; las muestras 2, 3, 4, 5 Y 6 son positivas.

A B CDEFGH I JK L

564-bp

Figura VII-5. Gel de agarosa con resultados de una prueba PCR tpica de la toxina
del clera. Las bandas A, C, D, E, F, cepas de prueba positivas; las bandas B, J,
cepas de prueba negativas; bandas G, K, testigos positivos; bandas H, I, testigos
negativas; banda L. escalera de ADN de 1 kb.

Producto de PCR - 564 pb

Localizacin de los iniciadores y tamao del fragmenta de DNA

amplificada en la prueba de la PCR para la deteccin de ctxA

Resultados de la hibridacin con una sonda marcada con digoxigenina para ctxA; el color
morado oscuro indica una reaccin positiva.

Mtodos comunes para la deteccin de la toxina del clera

Prueba
Asa ileal de conejo
Valoracin en conejo lactante

Sensibilidad por ml

Tipo de prueba

Objetivo especfico de la
prueba

30 ng

Biovaloracin

Estimular la acumulacin de
lquido

Sobrenadante del cultivo

Biovaloracin

Estimular la acumulacin de
lquido

Cultivo en caldo o sobrenadante del

cultivo

250 a 500 ng

Muestra estudiada

Prueba en la piel del conejo

0,1 a 3,5 ng

Biovaloracin

Factor de permeabilidad

Sobrenadante del cultivo

Clulas suprarrenales Y1 de
ratn

10 pg

Biovaloracin

Acumulacin de AMPc

Sobrenadante del cultivo

Clulas de ovario de hmster

chino

10 pg

Biovaloracin

Acumulacin de AMPc

Sobrenadante del cultivo

ELISA GM 1

10 pg

Inmunitaria

Subunidad Bb

Sobrenadante del cultivo

Coaglutinacin
Aglutinacin inversa pasiva en
ltex

50 ng

Inmunitaria

Subunidad Bb

Lisados del cultivo

1 a 2 ng

Inmunitaria

Subunidad Bb

Sobrenadante del cultivo

Sondas de DNA

Detecta el gen ctx

Gentica

Gen ctx

DNA (improntas de colonias)

PCR

Detecta el gen ctx

Gentica

Gen ctx

DNA (lisado de la clula en bruto)

a Sensibilidad para
b Subunidad 8

la deteccin de la toxina del clera utilizando antisuero contra la enterotoxina termolbil de E. coli

de la molcula de la toxina del clera.

Tratamiento

El desenlace del clera depende de equilibrar el lquido diarreico y las prdidas inicas con
un adecuado reemplazo de lquidos y electrlitos. Esto se logra mediante la administracin
oral, intravenosa, o ambas, de soluciones con glucosa con concentraciones casi fisiolgicas
de sodio y cloro y concentraciones mayores a las fisiolgicas de potasio y bicarbonato. Hay
disponibilidad de las formulaciones exactas en forma de paquetes secos a los que se aade
un volumen especificad de agua. El reemplazo oral, en especial si se inicia de manera
puntual, es suficiente para todos los casos, a excepcin de los ms graves, y ha reducido la
mortalidad del clera en forma sustancial. La terapia antimicrobiana representa un papel
secundario al del reemplazo de lquidos. La doxiciclina reduce la duracin de la diarrea y la
magnitud de la prdida de lquidos. El trimetoprim-sulfametoxazol, eritromicina y
ciprofloxacino son alternativas para uso en nios y mujeres embarazadas. Los
antimicrobianos tienen un rol secundario en el tratamiento del clera, ayudan a reducir el
volumen de las deposiciones, acortan el perodo de sntomas y excrecin bacteriana. La cepa
causante del actual brote en Hait ha demostrado ser susceptible a doxiciclina y tambin a
ciprofloxacino y macrlidos.

Tratamientos Farmacolgicos para el clera

Tratamiento de eleccin:
Adultos:
Nios menores de 8 aos:
Nios mayores de 8 aos:
Embarazadas:

Doxiciclina 300 mg. oral por una vez.

Azitromicina 10 mg/Kg. por va oral por 3 das
Doxiciclina 4 mg/ kg (mx 300 mg) por va oral por 1 vez
Azitromicina 500 mg. por va oral por 3 das
Tratamiento alternativo:

Adultos:

Nios:

Ciprofloxacino 1 gr. por va oral por una vez

Azitromicina 500 mg. por va oral por 3 das

Ciprofloxacino en dosis nica de 20mg/Kg de peso

VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS

Vibrio parahaemolyticus es una bacteria halfila produce gastroenteritis aguda tras la

ingestin de mariscos contaminados como pescado crudo o crustceos como las ostras. Es la
causa principal de diarrea en Japn, donde el pescado crudo se come en grandes
cantidades, pero es un patgeno poco frecuente en Estados Unidos, aunque ha habido varios
brotes en cruceros por el Caribe. No se conoce demasiado su patogenia, excepto que secreta
una enterotoxina similar al colergeno y, a veces, se da una invasin limitada. Tras un
periodo de incubacin de 12 a 24 horas, se presentan nusea y vmito, clicos abdominales,
fiebre y diarrea lquida a sanguinolenta. A menudo se detectan leucocitos fecales. La enteritis
tiende a desaparecer en forma espontnea en un lapso de uno a cuatro das sin otro
tratamiento que no sea el restablecimiento del equilibrio hidroelectroltico. La enfermedad es
autolimitada y dura unos 3 das. Vibrio parahaemolyticus se distingue del V. cholerae
principalmente por el crecimiento en NaCl: Vibrio parahaemolyticus crece en una solucin de
NaCl al 8 % (la que corresponde a un microorganismo marino), mientras que el V. cholerae
no puede crecer. No existe un tratamiento especfico indicado, porque la enfermedad es
relativamente leve y autolimitada. La enfermedad puede evitarse con una buena refrigeracin
y con la coccin de los mariscos.

VIBRIO VULNIFICUS

Vibrio vulnificus puede causar infecciones graves de heridas, bacteriemia y probablemente

gastroenteritis. Es una bacteria de estuarios, de vida libre que existe en Estados Unidos en el
Atlntico y las costas del Pacfico y sobre todo en la costa del Golfo. Se han comunicado
infecciones en Corea y el microorganismo puede tener una distribucin mundial. Es muy
posible que V. vulnificus se encuentre en ostiones, sobre todo en los meses clidos. La
bacteriemia sin un foco infeccioso ocurre en personas que han consumido ostiones
infectados o en alcohlicos o hepatpatas. Las heridas pueden infectarse en personas
normales o en inmunodeprimido s que entran en contacto con agua donde est presente la
bacteria. La infeccin suele evolucionar con rapidez, con la aparicin de una enfermedad
grave. Casi 50% de los pacientes con bacteriemia fallece. Las infecciones de las heridas
pueden ser leves pero a menudo evolucionan con rapidez (en el curso de algunas horas)
presentndose lesiones cutneas ampollosas, celulitis y miositis con necrosis. Varios de los
primeros decesos en Louisiana y Texas despus del huracn Catrina fueron ocasionados por
Vibrio vulnificus. Dado el avance rpido de la infeccin, a menudo es necesario tratarla con
antibiticos apropiados antes que se confirme la causa mediante cultivo. El diagnstico se
establece con el cultivo del microorganismo en medios estndares de laboratorio; TCBS es el
medio preferido para los coprocultivos, donde la mayor parte de las cepas produce colonias
color verde-azuloso (sacarosas negativas). La tetraciclina al parecer es el antimicrobiano de
eleccin para la infeccin por V. vulnificus. Ciprofloxacina tambin puede ser eficaz
basndose en la actividad in vitro.