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Facultad De Qumica
Qumica Legal
QFB
Procedimiento
Teichmann y Takayama
Macerar en solucin
salina hasta conseguir
una solucin coloreada
al mximo.
Cubrir el extendido
con un cubreobjetos y
adicionar por
capilaridad gotas del
reactivo segn la
prueba a realizar.
La preparacin se
calienta a la llama
hasta que se inicie la
ebullicin, teniendo
cuidado de no
sobrecalentar para
evitar quemar la
muestra.
Si la muestra no
procede de la elucion
de una muestra, si no
que esde una muestra
directa, basta realizar
una sola vez la adicion
del reactivo.
En caso de que no
aparezcan los cristales
se aade otra gota de
reactivo, repitiendo el
procedimiento. si
despues de 4 o 5
ebulliciones no
aparecen los cristales,
se puede dar la prueba
como negativa.
La preparacin se deja
enfrar y se observa al
microscpio buscando
los cristales.
Disposicin de Residuos
Colocar las laminillas, cubreobjetos y el residuo de muestra en solucin de hipoclorito de sodio
por 15 minutos.
Observaciones
Resultados
En las muestras para Teichmann y Takayama en muestra fresca resultan positivas a cada prueba
identificando de forma inmediata los cristales en Takayama, y con un poco de dificultad se
encontraron los de Teichmann.
En las muestras diluidas fue difcil encontrarlos slo en el de Takayama fueron ms perceptibles,
pero estaba muy concentrada la dilucin, por lo que al diluirlo ms, ya no pudieron encontrarse.
La apariencia de los cristales en las reacciones de Takayama eran de color rosado transparente,
algunos en forma de aguja o formas semiromboidales, uno encima de otro.
En el caso de los cristales de Teichmann tenan definidamente una forma romboidal y era de un
color caf.
Conclusiones
Las pruebas que se realizan con las tcnicas de Takayama y Teichmann son relativamente
sencillas y rpidas para la determinacin de muestras de sangre, con pequeos inconvenientes
en las preparaciones de estos, ya que en el caso de la de Teichmann si el c. Actico no ebulle
en su totalidad queda lquido que impide su visualizacin y la totalidad de la reaccin. Pero en la
reaccin de Takayama si se expone demasiado tiempo a la llama el portaobjetos, se puede
caramelizar el reactivo lo que provocara que no se lograra ver nada en el microscopio y de igual
forma la reaccin con la sangre no se llevara a cabo.
Es posible que en la muestra diluida no se lograra encontrar los cristales, porque, en todas las
pruebas que se realizaron no se realizaron en su totalidad las reacciones correspondientes o de
igual forma con el reactivo de Takayama hubo muchas partes caramelizadas. No se puede decir
que haba poca cantidad de sangre y que por esto no se vio nada, ya que este tipo de pruebas
pueden realizarse con una concentracin baja de sangre, por lo que no es un factor que pueda
impedir su visualizacin.
Cuestionario
1. Explique el fundamento de la reaccin del cido actico con la sangre.
La hemoglobina, cuando es tratada con cido actico, se separa inmediatamente de las
protenas y del grupo prosttico. Durante la hidrlisis la globulina se desnaturaliza.
2. Explique el fundamento de la reaccin de la sangre con el reactivo de Takayama.
El hidrxido de sodio efecta una hidrlisis alcalina, liberando el grupo prosttico de la globina; el
fierro del Hem en este momento se encuentra como in frrico (+3) debido a la formacin de la
metahemoglobina en el proceso de desecacin de la mancha de sangre. La carga (+3) del fierro
se neutraliza por el in OH. Calentando la glucosa (a azcar reducida), se reduce el in frrico a
ferroso (+2) y la piridina se combina con ste para formar un producto cristalino insoluble: el
hemocromgeno o piridinferroprotoporfirina.
3. Cules son las caractersticas cristalogrficas de los cristales de
hemocromgeno?
Cristales romboidales de color rosa alrededor de la muestra.